CN103127115A

CN103127115A - 一种治疗血脂异常的组合物

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Publication number: CN103127115A
Application number: CN2011103887437A
Authority: CN
Inventors: 狄媛; 吕玉珠; 杨敏; 张铁军; 唐亚坤; 刘俊轶
Original assignee: BEIJING TIANHENG MEDICINE INST
Current assignee: Beijing Tianheng Hospital Management Co. Ltd.
Priority date: 2011-11-30
Filing date: 2011-11-30
Publication date: 2013-06-05

Abstract

本发明涉及一种含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的治疗血脂异常的组合物，所述组合物中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者的重量比的比例范围是5～10∶5～80∶250～1000，优选10∶10～40∶250～750，最优选10∶10～20∶500～750。本发明的组合物，调节血脂效果强，作用全面，并且副作用小。

Description

一种治疗血脂异常的组合物

技术领域

本发明涉及一种治疗血脂异常的医药组合物，尤其是一种含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的医药组合物。

背景技术

一、高脂血症的介绍

血脂异常又称为高脂血症，是指循环中的脂质或脂蛋白的组成成分浓度异常，血脂水平偏高，尤其是低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高，是斑块形成导致动脉粥样硬化的主要原因。斑块中的脂质含量决定斑块稳定性以及是否易导致急性缺血事件。近20年来冠心病等心血管病的发病率和死亡率逐步上升，成为我国居民的首要死亡原因，与LDL-C等血脂异常指标密切相关，血清胆固醇(主要指LDL-C)每降低1％，发生冠心病的危险性可降低2％^[1，2]。高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则有心脏保护作用，是心血管的清道夫，它可通过抗炎、抗氧化和保护血管内皮功能而发挥抗动脉粥样硬化作用，研究表明，HDL-C水平与冠心病发病呈负相关，每增加0.39mmol/L，发生冠心病危险性降低2～3％^[3]。研究表明，甘油三酯(TG)可能通过影响低密度脂蛋白或高密度脂蛋白的结构，而具有致动脉粥样硬化作用，血清TG水平轻至中度升高者患冠心病的危险性增加。综上，调脂的主要目标是降低LDL-C、TG，升高HDL-C，其意义主要在于降低心血管事件的发生，因此实现全面调脂，意义重大。

二、高脂血症治疗药物的分类及特点

目前治疗高脂血症的药物主要有以下五类：

1、他汀类：羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶是胆固醇合成限速酶，他汀在胆固醇合成早期竞争性抑制HMG-CoA还原酶活性，抑制肝脏内源性合成胆固醇，是目前临床上应用的主要降脂药。对他汀的大规模循证医学试验证实，降低血脂使发生各种心血管事件的危险性降低30％，其中发生心梗的危险性下降62％，还能使动脉粥样硬化病灶减轻或消退。

他汀类的缺点：(1)调脂谱较为单一，主要降LDL-C，对TG、HDL-C作用较弱。(2)降低肝脏内源性合成胆固醇的同时，肠道外源性胆固醇的吸收代偿性增加^[1]。(3)少数患者长期用药后胆固醇不降低，反而升高。(4)毒性较大：主要是肌毒性和肝毒性^[4]，发生率呈剂量依赖性增加。(5)6％现象：即剂量增加1倍时，降低LDL-C作用只增加6％。虽然降脂作用增加有限，但毒性却大大增加，使其临床使用受限^[5]。

他汀类的代表药是阿托伐他汀钙，与已上市的他汀相比，其优点为：(1)降脂作用最强^[6]。(2)循证医学证据最多。其缺点为：与其他他汀相同，阿托伐他汀钙主要侧重于降低LDL-C，对其它血脂指标的作用相对较弱，单用时调脂作用有限，常与其他类别降脂药合用以强化降脂作用^[7]。

2、贝特类：通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)降脂，主要降低TG，轻至中度降低TC、LDL-C、升高HDL-C^[6]。代表药是非诺贝特，有明显降TG作用。因溶解性差，生物利用度受进食影响大，近年来开发了微粉化制剂或直接上市活性代谢物非诺贝特酸，以避免上述影响。主要不良反应是胃肠道反应、肌毒性和肝毒性。

3、烟酸类：烟酸属B族维生素，在体内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)辅酶系统中转变为NAD后发挥降脂效应。烟酸对所有脂质谱都能产生有益作用，主要升高HDL-C，降LDL-C和TG作用较弱。主要不良反应是潮红，是患者停药的主要原因。

阿昔莫司是烟酸的衍生物。与烟酸相比，具有降低游离脂肪酸持续时间长，停药后无反弹，给药剂量小(烟酸的日用量相当于阿昔莫司的4-6倍)，潮红等不良反应低的特点，最突出的作用是显著升高HDL-C，是目前升高HDL-C最强的药物，但单药对LDL-C的作用较弱，常与他汀合用，以提高降脂疗效^[8]。

4、胆酸螯合树脂：进入肠道后不吸收，与胆汁酸牢固结合，阻滞胆汁酸的肝肠循环和反复利用，从而大量消耗胆固醇，使血浆TC和LDL-C降低。主要治疗以TC和LDL-C升高为主，TG水平正常而不能使用他汀的高胆固醇血症患者，对降低TG基本无效，对纯合子家族性高脂血症无效。

5、肠道胆固醇吸收抑制剂：人体每天更新的胆固醇2/5来自小肠吸收的胆固醇，在此理论基础上开发了肠道胆固醇吸收抑制剂。依折麦布是该类中第一个上市的药物，主要降低LDL-C，对其他指标作用不明显^[5，9，10]。该药虽能阻断肠道吸收胆固醇，减少饮食引起的高脂血症，但对肝脏合成的胆固醇无作用。因此，主要与他汀合用，用来强化后者的降脂作用。

三、不同类别的调脂药合用的必要性

(1)目前没有一种药物能全面调脂，单用一种调脂药的达标率低。只有将不同类别、不同作用机制的调脂药合用，才能获得全面调脂作用，进一步提高达标率。

(2)目前的主流调脂药是他汀。临床观点是降脂幅度越大越好，但单用他汀达不到这个目标，原因：他汀6％现象使其在增加剂量时增加的降脂作用有限，但毒性大大增加。与其他类别调脂药合用，即可降低他汀的剂量，在提高疗效的同时降低毒性。

(3)临床常见的混合型高血脂异常以及严重的血脂异常，治疗上使用一种调脂药难以使血脂水平满意达标，必须联用不同作用机制的调脂药才能全面改善血脂异常，降低心血管事件发生的风险^[11]。

目前国内外陆续上市了一些复方调脂药，在欧美的治疗指南及专家共识也强调了复方调脂药的重要性，但这些已上市复方调脂药的调脂作用仍嫌单一，血脂达标率还不能令人满意，临床上迫切需要能全面调脂的复方药物。

四、目前国内外已上市或有文献报道的复方调脂药

(1)辛伐他汀+依折麦布复方(国外商品名：Vytorin)^[12]

该复方的原研厂家为默沙东，2004年7月在美国上市。该复方是从肝脏合成及肠道吸收两条途径减少胆固醇合成，作用机制互补。优点是强化了辛伐他汀降低LDL-C的作用，缺点是升高HDL-C、降低TG的作用与单用辛伐他汀相比并无显著差异，总体来讲并无全面调脂作用。

(2)阿托伐他汀钙+依折麦布复方^[13]

两药合用的机制互补途径与Vytorin相同。与Vytorin相比，由于阿托伐他汀钙的降脂作用强于辛伐他汀，故总体降脂作用强于Vytorin。与单用阿托伐他汀钙相比，合用依折麦布后降低LDL-C的作用显著增强，但对升高HDL-C、降低TG的作用与单用阿托伐他汀钙相比并无显著差异。

(3)阿托伐他汀钙+阿昔莫司复方^[14]

两药合用后LDL-C、TG进一步降低的幅度不大，但能显著升高HDL-C。该复方的不良反应属轻至中度，出现的潮红与阿昔莫司有关。

(4)辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释片^[15]

三种药物的作用机制互补，LDL-C、TG显著降低，HDL-C显著增加，调脂作用相对全面。但是，由于辛伐他汀和烟酸并非同类别药物中降脂作用最好的药物，降脂作用并未达到最大化，该三联复方仍有不如人意之处。此外，主要是烟酸引起的不良反应(如：潮红)较多，患者耐受性差，停药率高。

综上，目前已上市或有临床报道的复方调脂药尽管各有所长，但调脂作用仍有不足之处，安全性有待提高。临床上仍迫切需要降脂作用更强、调脂作用更全面、安全性更好的复方调脂药。

参考文献

1.高危极高危患者强化降脂多种途径可选-现有他汀类药物联用依折麦布将迎来阳光新局面会改变吗？临床药物治疗杂志，2008，6：1-5

2.高甘油三酯血症与动脉粥样硬化疾病关系的研究进展，宁夏医学杂志，2002，24(5)：318-319

3.高密度脂蛋白与动脉粥样硬化和冠心病，中国动脉硬化杂志，2004，12(6)：733-736

4.他汀类药物的安全性，中华高血压杂志，2007，15(10)：848

5.新型降脂药-依折麦布的研究进展，药学服务与研究，2007，7(3)：187-190

6.积极降脂，有效防治冠心病-从治疗指南到临床实践，老年医学与保健，2005，11(1)：11-13

7.ATORVASTATIN-降脂药，国外新药介绍，2002，2：7-10

8.阿昔莫司和阿托伐他汀钙单独或合并应用治疗高脂血症的临床疗效和安全性比较，临床荟萃，2005，20(13)：754-756

9.饮食胆固醇吸收的分子途径与依折麦布(Ezetimibe)作用原理，第四届全国血脂分析与临床学术研讨会，35

10.新型降脂药依折麦布评价，心血管病学进展，2009，30(4)：543-545

11.中国成人血脂异常防治指南，人民卫生出版社

12.Efficacy and safety of ezetmibe coadministered with simvastatin in patients with primaryhypercholesterolemia：a randomized，double-blind，placebo-controlled trial.Mayo clin proc.2004，79：620-629

13.Effect of ezetimibe coadministered with atorvastatin in 628 patients with primaryhypercholesterolemia.Circulation，2003，107：2409-2415

14.联合应用阿昔莫司和阿托伐他汀钙治疗低高密度脂蛋白胆固醇血症的疗效及安全性，心脏杂志，2008，20(2)：190-192

15.Lipid-altering efficacy and safety of ezetimibe/simvastatin coadminstrated withextended-release niacin in patients with type IIa or type IIb hyperlipidemia.J.Am.Coll.Cardiol.2008，51：1564-1572

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种降脂作用更强、调脂作用更全面、安全性更好的复方调脂药。

为解决上述技术问题，我们通过大量的研究惊喜地发现，采用依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者复方，可以达到降脂作用更强、调脂作用更全面、安全性更好的目的。

本发明提供了一种由含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的组合物，用于预防和治疗血脂异常，所述组合物中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者的比例范围(重量比)是5～10∶5～80∶250～1000，优选10∶10～40∶250～750，最优选10∶10～20∶500～750，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。其中，优选的具体比例为：依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者重量比为10∶10∶500、10∶10∶750、10∶20∶500或10∶20∶750，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。

依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者复方，其中依折麦布是第一个上市的肠道胆固醇吸收抑制剂，阿托伐他汀钙和阿昔莫司均为同类降脂药中的佼佼者。通过研究，三药合用或复方具有如下特点和优势：

1、本发明的复方作用机制互补：人体内胆固醇有两个来源：合成和吸收。他汀只能抑制合成，合成被抑制后吸收就会代偿性增加，所以单用他汀常常效果不好，如果同时服用阻止胆固醇吸收的药物，就可把胆固醇的两个来源都阻断。依折麦布作用于小肠细胞的刷状缘，有效抑制胆固醇的吸收，因此两药合用降低LDL-C的作用增强。但由于依折麦布和阿托伐他汀钙对HDL-C和TG的作用较弱，而阿昔莫司是目前已知升高HDL-C作用最强的药物，对TG有中度降低作用。三药合用后，优势互补，全面调脂，既能降低LDL-C和TG，又能升高HDL-C，进一步提高血脂达标率。

2、依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司都是同类药物中最优的产品：依折麦布是目前唯一上市的通过抑制胆固醇吸收这一全新作用机制发挥降脂作用的药物；阿托伐他汀钙是目前循证医学证据最充分，降脂作用最强，安全性最好，临床应用最广泛的他汀类药物；阿昔莫司是烟酸的换代产品，降脂作用约是烟酸的20倍，安全性明显改善，同时还能改善糖耐量，对血尿酸无影响，尤其适用于糖尿病和痛风患者。三药合用后，将实现全面调脂，使更多的患者受益。

3、依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司都是安全性好的药物：依折麦布只有轻度肌、肝毒性；阿托伐他汀钙的肌、肝毒性发生率与安慰剂相似；阿昔莫司相对于烟酸最大的优势是外周扩张血管作用小，潮红发生率低，肝毒性小，胃肠道副作用小，在所用剂量范围内，三方合用未对患者产生不能耐受的不良反应，毒性未叠加。

与目前已上市的辛伐他汀+依折麦布相比，本发明的调脂组合物有如下优势：

辛伐他汀和依折麦布复方的主要缺点是升高HDL-C的作用较弱，而且辛伐他汀不是最好的他汀，对LDL-C的降低作用有限，肝毒性和肌毒性发生率较高。本发明的调脂组合物中，由于加入了阿昔莫司，它升高HDL-C的作用最强，弥补了辛伐他汀+依折麦布在升高HDL-C方面的不足，而阿托伐他汀钙的疗效和安全性远优于辛伐他汀，阿昔莫司还能有效降低TG，三方合用具有最全面的调脂作用。

与现有技术的依折麦布+阿托伐他汀钙相比，本发明的调脂组合物有如下优势：

依折麦布+阿托伐他汀钙合用的主要缺点是降脂谱相对单一，侧重于降低LDL-C，对其他指标的作用较弱。本发明的三方组合物除降低TG和LDL-C的作用极佳外，在升高HDL-C方面的作用也是最强的。

与现有技术的阿托伐他汀钙+阿昔莫司相比，本发明的调脂组合物有如下优势：

阿托伐他汀钙+阿昔莫司合用虽然既能降低LDL-C、TG、升高HDL-C，调脂作用相对全面，但是降低LDL-C的作用与单用阿托伐他汀钙并无显著差异。本发明则通过增加依折麦布抑制胆固醇吸收，降低LDL-C的作用是阿托伐他汀钙+阿昔莫司二联复方所不能及的。

与现有技术的辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释制剂相比，本发明的调血脂组合物有如下优势：

阿托伐他汀钙的疗效和安全性均优于辛伐他汀，大量循证医学试验已充分证明了阿托伐他汀钙在降脂、减少心血管事件方面的强大作用。烟酸虽然可显著升高HDL-C，但烟酸的最大问题是安全性不好，患者耐受性差，还降低糖耐量，升高血尿酸，故糖尿病和痛风患者禁用。阿昔莫司的调脂作用优于烟酸，潮红的发生率及停药率、肝毒性及胃肠道不适等不良反应均显著低于烟酸，同时还能改善糖耐量，对血尿酸无影响，尤其适用于糖尿病和痛风患者，临床适用范围广，是烟酸的最佳换代产品。与辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释制剂相比，本发明的三方组合物的优势明显，能达到最大化、最全面的调脂作用，临床适用范围更广。

此外，目前已上市的复方调脂药的毒性多为叠加，尤其是肌、肝毒性，患者因不良反应的停药率高，使其临床受限。本发明的三方组合物给药后肌、肝毒性未增加，患者耐受性好，临床使用更安全。在以后的临床应用中，必将取代目前常用的单方或复方调脂药，对高血脂症及冠心病患者发挥安全有效的治疗作用，取得广泛的社会效益和经济效益，市场前景广阔。

本发明所述含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的治疗血脂异常的组合物，可以制成各种制剂形式，优选口服固体制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、干混悬剂等，可以按照本领域公知的一般制剂方法制备。

本发明所述含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的治疗血脂异常的组合物，患者每日服用的剂量，可以按照依折麦布∶阿托伐他汀钙∶阿昔莫司＝5～10mg∶5～80mg∶250～1000mg服用，优选10mg∶10～40mg∶250～750mg，最优选10mg∶10～20mg∶500～750mg，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。其中，优选的具体剂量为：依折麦布∶阿托伐他汀钙∶阿昔莫司＝10mg∶10mg∶500mg、10mg∶10mg∶750mg、10mg∶20mg∶500mg或10mg∶20mg∶750mg，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。

在将本发明所述含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的组合物制备成可以工业化生产的制剂时，我们意外地发现，制剂的结构形式以及制备工艺对活性成分的稳定性有较大影响，原因是组合物中的阿昔莫司和阿托伐他汀钙二者之间会发生明显的有害相互作用。首先，我们发现，在制剂的加工过程中阿昔莫司和阿托伐他汀钙不能简单混合在一起，尤其是不能在含水的情况下混合，例如采用含水的润湿剂/粘合剂湿法制粒，否则会引起阿托伐他汀钙在加工过程中即明显降解，导致制剂中阿托伐他汀钙含量明显下降，杂质不断增加；试验结果表明：将三种活性成分和辅料直接混合，采用含水的润湿剂/粘合剂湿法制粒，产品中阿托伐他汀钙的含量只剩下不到投料量的50％，主要杂质(侧链关环产物)高达25％；其次，我们还发现，采用均匀混合法制备的制剂，即使采用非水条件来制粒，例如干法制粒，在加工好之后的储存过程中，阿昔莫司和阿托伐他汀钙两种活性成分由于均匀混合、紧密接触，即使封装在密封的铝箔袋里，在正常储存的条件下，依旧会相互作用，导致阿托伐他汀钙降解，实验结果表明，在影响因素试验中，60℃10天后，阿托伐他汀钙含量只有54％，主要杂质(侧链关环产物)高达23.5％；即使室温放置，12个月后阿托伐他汀钙的含量依旧会下降10～15％，主要杂质为侧链关环产物，因此不能长期储存。甚至采用阿昔莫司单独制粒，干燥后再与依折麦布+阿托伐他汀钙部分干燥好的颗粒混匀后压成单层片，依然不能达到满意的效果。

此外，我们经过试验还发现，阿昔莫司和依折麦布二者之间也会发生明显的有害相互作用，如果简单混合在一起，尤其是在含水的情况下混合，依折麦布的含量也会明显下降，杂质增加，主要杂质为氧化产物，可达10～15％，推测是由于依折麦布分子结构中含有酚羟基，具有较强还原性，而阿昔莫司分子中具有吡啶N-氧化物的结构，具有氧化性，二者发生氧化还原反应，导致依折麦布降解。

我们的实验表明，即使采用阿昔莫司单独制粒，干燥后再与依折麦布+阿托伐他汀钙部分干燥好的颗粒混匀后压成单层片，依然不能消除阿昔莫司对依折麦布和阿托伐他汀钙的不良影响，室温放置12个月后，阿托伐他汀钙含量下降9～11％，依折麦布含量下降6～8％。

因此，本发明要解决的另一个技术问题就是如何制备稳定的含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司的制剂，该制剂能够在工业化规模生产，并且在储存期内保持稳定，避免主要活性成分的降解，抑制杂质的产生，保证药品质量和疗效。

为解决上述技术问题，本发明人经过研究惊喜地发现，采用充分隔离的措施，可以保证制剂在制备和储存过程中的稳定性，具体来说，首先在制剂的制备过程中将阿昔莫司部分和依折麦布和/或阿托伐他汀钙部分分别制备，使得阿昔莫司不与其他两种活性成分接触；然后，在制剂的结构上把阿昔莫司部分和依折麦布或阿托伐他汀钙部分充分隔离，例如，片剂制备成双层片，一层为阿昔莫司部分，另一层为依折麦布、阿托伐他汀钙部分；胶囊剂中含两种微丸，一种微丸含有阿昔莫司，另一种微丸含有依折麦布、阿托伐他汀钙；颗粒剂中含两种颗粒，一种颗粒含有阿昔莫司，另一种颗粒含有依折麦布、阿托伐他汀钙；或者颗粒剂由含有阿昔莫司的微丸与含有依折麦布、阿托伐他汀钙的颗粒组成。干混悬剂中，阿昔莫司部分为颗粒，依折麦布、阿托伐他汀钙为粉末。实验表明，采用上述几种形式后，稳定性得到很大的改善。其中，双层片由于阿昔莫司和其他两种活性成分的接触面积和接触紧密程度稍大，室温放置12个月后阿托伐他汀钙含量下降3～4％，依折麦布含量下降2～3％，其他几种剂型阿昔莫司和其他两种活性成分的接触面积很小，效果更好一些，室温放置12个月后阿托伐他汀钙含量仅下降2～3％，依折麦布含量仅下降1～2％。

为达到各部分之间进一步充分的隔离，从而保证相互之间的影响最小，优选采用将阿昔莫司部分制成微丸或微片，阿托伐他汀钙和依折麦布二者分别压成两个微片，然后按照各活性成分的规格，将适当数目的上述微丸或微片装填入胶囊中；进一步优选上述微丸或微片含有包衣层，例如缓释衣层或者薄膜衣层，从而完全隔绝各部分的接触。所述薄膜衣层起隔离作用，可采用本领域常用于防潮和隔离的薄膜包衣材料制备，例如可用常见的市售的胃溶型包衣粉来制备。试验结果表明三部分之间互不影响，稳定性极佳，室温放置12个月后阿托伐他汀钙含量仅下降1％左右，依折麦布含量几乎不下降。

本发明的组合物在制成口服固体制剂时，为达到持久的治疗效果，优选将有效量的阿昔莫司制成缓释部分(微丸、颗粒或微片)，再与含有有效量的阿托伐他汀钙、依折麦布的速释部分共同制成制剂，如片剂、颗粒剂、胶囊剂、干混悬剂。相应地，可药用的辅料包括稀释剂(如淀粉、乳糖、甘露醇、预胶化淀粉、糊精、微晶纤维素)、崩解剂(如羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠)、缓释剂(如乙基纤维素、羟丙甲纤维素K4M、羟丙甲纤维素K15M；优特奇RS-100、RL100、RS30D、RL30D、NE30D，以及苏丽丝(Surelease))、粘合剂(如聚乙烯吡咯烷酮，羧甲基纤维素钠)、润滑剂(如硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶)等。所述口服固体制剂中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者的比例范围(重量比)是5～10∶5～80∶250～1000，优选10∶10～40∶250～750，最优选10∶10～20∶500～750，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。患者每日服用的剂量，可以按照依折麦布∶阿托伐他汀钙∶阿昔莫司＝5～10mg∶5～80mg∶250～1000mg服用，优选10mg∶10～40mg∶250～750mg，最优选10mg∶10～20mg∶500～750mg，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计，每日服用一次。

本发明的组合物在制成阿昔莫司部分为缓释形式的制剂时，优选采用将阿昔莫司部分制成缓释微丸或缓释微片，阿托伐他汀钙和依折麦布二者分别压成两个微片，然后按照各活性成分的规格，将适当数目的上述微丸或微片装填入胶囊中；进一步优选，将阿昔莫司部分制成含缓释包衣层的膜控缓释微丸或膜控缓释微片，或者制成骨架缓释片后外包薄膜衣层，同时，阿托伐他汀钙部分和依折麦布部分制成微片外后包薄膜衣层，再将上述微丸或微片装填入胶囊中制得胶囊剂，从而完全隔绝各部分的接触。所述薄膜衣层起隔离作用，可采用本领域常用于防潮和隔离的薄膜包衣材料制备，例如可用常见的市售的胃溶型包衣粉来制备。

此外，我们还发现，由于上述最优选的组合物中阿昔莫司的日剂量为500～750mg，本身剂量较大，制成缓释制剂时再加上缓释辅料之后总量较大，为了控制制剂的总体积，方便患者服药，优选在保证上述活性成分的重量比例范围的前提下，减少单个单元制剂中活性成分和辅料的量，从而获得体积上适于患者尤其是老年患者服药的制剂。例如作为本发明的一个优选实施方式，制成含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司分别为5mg、5mg和250mg以及含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司分别为5mg、5mg和375mg的缓释制剂，例如阿昔莫司部分制成缓释微丸或缓释微片，阿托伐他汀钙和依折麦布二者分别压成两个微片，然后按照各活性成分的规格，将适当数目的上述微丸或微片装填入胶囊中；进一步优选，将阿昔莫司部分制成含缓释包衣层的膜控缓释微丸或缓释微片，或者制成骨架缓释片后外包薄膜衣层，含阿托伐他汀钙和依折麦布的微片外包薄膜衣层。患者每次服用两个单元制剂，例如两个胶囊，每日一次，患者每日服用的剂量依然是10mg∶10mg∶500mg或10mg∶10mg∶750mg，然而患者服药的方便性大为增加。同时，由于制剂的体积适中，与常规制剂一样，在制剂的加工和包装过程中无需采用特殊的设备和材料，从而简化工艺、降低成本。

上述制剂中含有阿托伐他汀钙的部分，制备工艺优选采用非水工艺，可以进一步减少阿托伐他汀钙的降解，例如采用粘合剂的醇溶液来湿法制粒或干法制粒，进一步优选干法制粒。

具体实施方式

以下为本发明的具体实施方式，用实例来具体说明本发明的技术方案的实现方法以及产生的优异效果，其中阿托伐他汀钙的量均以阿托伐他汀计。

实施例1片剂

一、处方(以1000片计)

二、制备工艺

(1)将阿昔莫司、依折麦布、阿托伐他汀钙粉碎过100目筛，备用。

(2)按处方量将阿昔莫司、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)加入适量的5％羟丙纤维素-SL的80％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟。

(4)用24目筛制粒，在40℃下烘干，然后用24目筛整粒，得阿昔莫司部分颗粒。

(5)依折麦布、微晶纤维素、重质碳酸钙、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(6)加入适量的5％羟丙纤维素-SL的80％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟。

(7)用24目筛制粒，在40℃下烘干，然后用40目筛整粒，加入阿托伐他汀钙混合均匀，得依折麦布、阿托伐他汀钙部分颗粒。

(8)在上述两部分颗粒中分别加入处方量的硬脂酸镁，摇匀。

(9)压制双层片：将两部分颗粒用11mm的旋转压片机压制成双层片，下层为阿昔莫司部分，上层为依折麦布、阿托伐他汀钙部分，硬度为60～100N。

(10)压制单层片：作为对照，将上述两部分颗粒混合均匀，用10mm的旋转压片机压制单层片，硬度为60～100N。

三、溶出度及含量检测方法及结果

含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。

色谱条件与系统适用性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L柠檬酸溶液(用氨水调节pH值至4.0)-乙腈-四氢呋喃(60∶20∶20)为流动相；检测波长为244nm；阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司各峰之间的分离度应大于1.5，三个主峰的理论板数应均不低于2000。

测定法取本品20片，精密称定，研细。精密称取适量细粉(约相当于阿托伐他汀10mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，为供试品溶液1；精密称取适量细粉(约相当于阿昔莫司50mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1ml置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，为供试品溶液2；精密称取适量细粉(约相当于依折麦布10mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，为供试品溶液3；另取阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含100μg阿托伐他汀、100μg依折麦布和50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。

分别取20μl供试品溶液1、2、3和对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，即得。

溶出度测定：

1、阿托伐他汀钙和依折麦布部分

取本品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XC第二法)，以十二烷基硫酸钠-醋酸钠缓冲液(pH4.5)900ml为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作。经30分钟时，取溶液10ml滤过。

直接取续滤液(阿托伐他汀钙5mg规格)；或取续滤液5ml置10ml量瓶中(阿托伐他汀钙10mg规格)，或取续滤液2.5ml置10ml量瓶中(阿托伐他汀钙20mg规格)，或取续滤液3ml置25ml量瓶中(阿托伐他汀钙40mg规格)，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液1。

直接取续滤液(依折麦布5mg规格)；或取续滤液5ml置10ml量瓶中，加溶出介质稀释至刻度(依折麦布10mg规格)，作为供试品溶液2；

另取阿托伐他汀钙、依折麦布对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并分别制成每1ml中约含5μg阿托伐他汀、5μg依折麦布的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液1(用于测定阿托伐他汀钙)、供试品溶液2(用于测定依折麦布)、以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每片中阿托伐他汀钙、依折麦布的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

2、阿昔莫司部分

取本品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XC第二法)，以盐酸溶液(9→1000)1000ml为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作。经30分钟时，取溶液10ml滤过。

取续滤液5ml置25ml量瓶中，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；另取阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液以及对照品溶液各50μ1注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每片中阿昔莫司的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表1：

表1实施例1溶出度及含量测定结果

实验结果表明，采用阿昔莫司单独制粒，干燥后再与依折麦布+阿托伐他汀钙部分干燥好的颗粒混匀后压成单层片，依然不能消除阿昔莫司对依折麦布和阿托伐他汀钙的不良影响，室温放置12个月后，阿托伐他汀钙含量下降9～11％，依折麦布含量下降6～8％，而采用双层片工艺后稳定性明显改善，室温放置12个月后，阿托伐他汀钙含量仅下降3～4％，依折麦布含量仅下降2～3％。

实施例2片剂

一、处方(以1000片计)

二、制备工艺

(4)用24目筛制粒，在40℃下烘干，然后用24目筛整粒，加入硬脂酸镁，得阿昔莫司部分的颗粒。

(5)将依折麦布、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(7)用24目筛制粒，在40℃下烘干，然后用24目筛整粒，加入处方量的硬脂酸镁混合均匀、得依折麦布颗粒。

(8)将阿托伐他汀钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(9)干法制粒，粒度控制在20-40目之间，得到阿托伐他汀钙颗粒。

(10)按处方比例，将依折麦布颗粒与阿托伐他汀钙颗粒混合，得含依折麦布、阿托伐他汀钙的颗粒。

(11)将阿昔莫司部分的颗粒与含依折麦布、阿托伐他汀钙部分的颗粒用Φ17mm×7mm的旋转压片机压制成双层片，下层为阿昔莫司部分，上层为依折麦布、阿托伐他汀钙部分，硬度为60～100N。

三、溶出度及含量检测方法及结果

含量测定：同实施例1

溶出度测定：

1、阿托伐他汀钙和依折麦布部分

取续滤液3ml置50ml量瓶中(阿托伐他汀钙80mg规格)，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液1。

2、阿昔莫司部分

取续滤液5ml置25ml量瓶中，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；另取阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每片中阿昔莫司的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表2

表2实施例2溶出度及含量测定结果

实施例3片剂

一、处方(以1000片计)

二、制备工艺

(4)用24目筛制粒，在40℃下烘干，然后用24目筛整粒，加入处方量的硬脂酸镁，得到阿昔莫司部分的颗粒。

(5)依折麦布、微晶纤维素、预胶化淀粉、交联羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(7)用24目筛制粒，在40℃下烘干，然后用24目筛整粒，加入硬脂酸镁混合均匀，得依折麦布颗粒。

(8)将阿托伐他汀钙、重质碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(11)将阿昔莫司部分的颗粒与含依折麦布、阿托伐他汀钙部分的颗粒用Φ17mm×7mm的旋转压片机压制成双层片，下层为阿昔莫司部分，上层为依折麦布、阿托伐他汀钙部分，硬度为90～100N。

三、溶出度及含量检测方法及结果

含量测定：方法同实施例1

溶出度测定：

1、阿托伐他汀钙和依折麦布部分

直接取续滤液(阿托伐他汀钙5mg规格)；或取续滤液5ml置10ml量瓶中(阿托伐他汀钙10mg规格)，或取续滤液2.5ml置10ml量瓶中(阿托伐他汀钙20mg规格)，或取续滤液3ml置25ml量瓶中(阿托伐他汀钙40mg规格)，或取续滤液3ml置50ml量瓶中(阿托伐他汀钙80mg规格)，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液1。

2、阿昔莫司部分

取续滤液5ml置50ml量瓶中，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；另取阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每片中阿昔莫司的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表3

表3实施例3溶出度及含量测定结果

实施例4胶囊剂

一、处方(以1000粒)

二、制备工艺

(3)加入适量的5％乙基纤维素乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟。

(4)自挤出机上用30转/分，1mm的孔径挤出，并在滚圆机上先用1000转/分剪切1分钟，然后用800转/分滚圆2分钟，取出后用淀粉撒在微丸上，使其均匀涂在微丸表面上，再次在滚圆机上滚圆1分钟。

(5)在40℃下用流化床烘干，约两小时，得阿昔莫司部分的微丸。

(6)依折麦布、阿托伐他汀钙、微晶纤维素、重质碳酸钙、交联羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(7)加入适量的5％乙基纤维素乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3

分钟。

(8)自挤出机上用30转/分，1mm的孔径挤出，并在滚圆机上先用1000转/分剪切1分钟，然后用800转/分滚圆2分钟，取出后用淀粉撒在微丸上，使其均匀涂在微丸表面上，

再次在滚圆机上滚圆1分钟。

(9)流化床40℃下烘干约两小时，得依折麦布、阿托伐他汀钙部分的微丸。

(10)计算两种微丸的装量，按比例装入合适的胶囊中。

三、溶出度及含量检测方法及结果

测定法取本品20粒，除去胶囊壳，内容物精密称定，研细。精密称取适量细粉(约相当于阿托伐他汀10mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，为供试品溶液1；精密称取适量细粉(约相当于阿昔莫司50mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1ml置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，为供试品溶液2；精密称取适量细粉(约相当于依折麦布10mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，为供试品溶液3；另取阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含100μg阿托伐他汀、100μg依折麦布和50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。

分别取20μl供试品溶液1、2、3和对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算。即得。

溶出度测定：

1、阿托伐他汀钙和依折麦布部分

另取阿托伐他汀钙、依折麦布对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并分别制成每1ml中约含5μg阿托伐他汀、5μg依折麦布的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液1(用于测定阿托伐他汀钙)、供试品溶液2(用于测定依折麦布)、以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每粒中阿托伐他汀钙、依折麦布的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

2、阿昔莫司部分

取续滤液5ml置25ml量瓶中，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；

另取阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每粒中阿昔莫司的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见下表4

表4实施例4溶出度及含量测定结果

实验结果表明，制成颗粒填充胶囊后，阿昔莫司颗粒和其他两种活性成分颗粒的接触面

积很小，室温放置12个月后阿托伐他汀钙含量仅下降2～3％，依折麦布含量仅下降1～2％。

实施例5颗粒剂

处方(以1000袋计)

二、制备工艺：

(2)将阿昔莫司、微晶纤维素、羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)干法制粒，颗粒粒度控制在20-40目之间，得阿昔莫司部分颗粒。

(4)将依折麦布、阿托伐他汀钙、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠、十二烷基硫酸钠于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(5)干法制粒，颗粒粒度控制在20-40目之间，得依折麦布、阿托伐他汀钙部分颗粒。

(6)将阿昔莫司部分颗粒与依折麦布、阿托伐他汀钙部分颗粒混合均匀，即得。

(7)计算每袋装量，封装于铝箔袋中。

三、溶出度及含量检测方法及结果

测定法取本品20袋，内容物精密称定，研细。精密称取适量细粉(约相当于阿托伐他汀10mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，为供试品溶液1；精密称取适量细粉(约相当于阿昔莫司50mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液1ml置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，为供试品溶液2；精密称取适量细粉(约相当于依折麦布10mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，为供试品溶液3；另取阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含100μg阿托伐他汀、100μg依折麦布和50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。

溶出度测定：

1、阿托伐他汀钙和依折麦布部分

另取阿托伐他汀钙、依折麦布对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并分别制成每1ml中约含5μg阿托伐他汀、5μg依折麦布的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液1(用于测定阿托伐他汀钙)、供试品溶液2(用于测定依折麦布)、以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每袋中阿托伐他汀钙、依折麦布的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

2、阿昔莫司部分

取续滤液5ml置100ml量瓶中，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；

另取阿昔莫司对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含50μg阿昔莫司的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每袋中阿昔莫司的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表5。

表5实施例5溶出度和含量测定结果

实验结果表明，制成颗粒剂后，阿昔莫司颗粒和其他两种活性成分颗粒的接触面积很小，

稳定性很好。

实施例6干混悬剂

一、处方(以1000袋计)

二、制备工艺：

(1)将阿昔莫司、依折麦布、阿托伐他汀钙粉碎过100目筛，蔗糖粉碎过60目筛，桔子香粉过60目筛，备用。

(2)将阿昔莫司、蔗糖200g、羧甲基淀粉钠于湿法制粒机中，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)干法制粒，颗粒粒度控制在40-60目之间，得阿昔莫司颗粒。

(4)上述阿昔莫司颗粒中按处方量加入依折麦布、阿托伐他汀钙、蔗糖300g、黄原胶、三氯蔗糖、桔子香粉，十二烷基硫酸钠混匀。

(5)计算每袋装量，封装于铝箔袋中。

三、溶出度及含量检测方法及结果

溶出度测定：

1、阿托伐他汀钙和依折麦布部分

2、阿昔莫司部分

取本品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XC第二法)，以盐酸溶液(9→1000)1000ml为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作。经30分钟时，取溶液10ml滤过。取续滤液3ml置50ml量瓶中，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液；

溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表6

表6实施例6溶出度和含量测定结果

实验结果表明，本实施例各处方中阿昔莫司颗粒和其他两种活性成分的接触面积较小，稳定性很好。

实施例7缓释片剂

一、处方

二、制备工艺：

(1)首先将阿昔莫司、依折麦布、阿托伐他汀钙粉碎过100目筛，硬脂酸，甘露醇过80目筛，备用。

(2)将阿昔莫司、羟丙甲纤维素K4M、硬脂酸、甘露醇按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)用8％PVPK3070％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟。

(4)过24目筛制粒，在40℃下烘干，过24目筛整粒，得阿昔莫司部分的缓释颗粒。

(5)将依折麦布、阿托伐他汀钙、重质碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(6)用8％PVPK3070％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟。

(7)过24目筛制粒，在40℃下烘干，过24目筛整粒，得依折麦布、阿托伐他汀钙部分的颗粒。

(8)在上述两部分颗粒中分别加入处方量的硬脂酸镁，摇匀。

(9)将两部分颗粒用17mm*7mm的冲头在旋转压片机中压制成双层片，下层为阿昔莫司部分，上层为依折麦布、阿托伐他汀钙部分，硬度为110～120N。

三、含量、溶出度及释放度检测方法及结果

含量测定：同实施例1

溶出度测定(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)取本品，照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XC第二法)，以十二烷基硫酸钠-醋酸钠缓冲液(pH4.5)900ml为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作。经30分钟时，取溶液10ml滤过。

直接取续滤液(阿托伐他汀钙5mg规格)；或取续滤液5ml置10ml量瓶中(阿托伐他汀钙10mg规格)，或取续滤液2.5ml置10ml量瓶中(阿托伐他汀钙20mg规格)，加适量溶出介质稀释至刻度，作为供试品溶液1。

另取阿托伐他汀钙、依折麦布对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含5μg阿托伐他汀和5μg依折麦布的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液1(用于测定阿托伐他汀钙)、供试品溶液2(用于测定依折麦布)以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每片中阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

释放度测定(阿昔莫司部分)：取本品，照释放度测定法(中国药典2005年版二部附录XD第一法)，采用溶出度测定法第二法装置(中国药典2005年版二部附录XC第二法)，以盐酸溶液(9→1000)1000ml为溶剂，转速每分钟50转，依法操作，经1小时、4小时、8小时时分别取样10ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，并即时在操作容器中补充相同温度的释放介质10ml。

取续滤液5ml置50ml量瓶中，加适量释放介质稀释至刻度，作为供试品溶液；另精密称阿昔莫司对照品适量，加盐酸溶液(9→1000)制成每1ml中约含50μg的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液，照含量测定项下的色谱条件试验，计算释放量。本品每片在第1小时、4小时和8小时时的释放量应分别为标示量的10％～30％、35％～75％和80％以上，均应符合规定。

阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表7：

表7实施例7阿托伐他汀钙和依折麦布溶出度和含量测定结果

阿昔莫司的释放度及0天和室温放置12个月含量测定结果见表8：

表8实施例7阿昔莫司释放度和含量测定结果

结果表明：本实施例稳定性较好，各处方的阿昔莫司缓释部分的释放性能良好，均符合规定。

实施例8缓释颗粒剂(由阿昔莫司缓释微丸与阿托伐他汀钙、依折麦布颗粒组成)

一、处方(以1000粒计)

二、制备工艺：

(1)将阿昔莫司、依折麦布、阿托伐他汀钙分别粉碎过100目筛，备用。

(2)将阿昔莫司、羟丙纤维素按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)加入适量的1％CMC-Na10％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟。

(4)自挤出机上用30转/分，1mm的孔径挤出，并在滚圆机上先用1000转/分剪切1分钟，然后用800转/分滚圆2分钟。

(5)在40℃下用流化床烘干，约两小时，用16目～40目筛子进行筛分。

(6)缓释衣制备工艺：

称取处方量的乙基纤维素溶于乙醇中，加入处方量的聚维酮搅拌至完全溶解，即得。

(7)将阿昔莫司丸芯置流化床中包衣，增重在15.0％-16.0％。

(8)将阿托伐他汀钙、依折麦布、微晶纤维素、重质碳酸钙、十二烷基硫酸钠、硬脂酸镁按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟；

(9)干法制粒，粒度控制在20-40目之间，得到含阿托伐他汀钙、依折麦布的颗粒。

(10)将阿昔莫司缓释微丸与阿托伐他汀钙依折麦布颗粒按比例封装入铝箔袋中，即得。

三、含量、溶出度及释放度检测方法及结果

1、含量测定：同实施例5

2、溶出度测定(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)同实施例5

3、释放度测定(阿昔莫司部分)：

取本品，照释放度测定法(中国药典2005年版二部附录XD第一法)，采用溶出度测定法第二法装置(中国药典2005年版二部附录XC第二法)，以盐酸溶液(9→1000)1000ml为溶剂，转速每分钟50转，依法操作，经1小时、4小时、8小时时分别取样10ml，用0.45μm微孔滤膜滤过，并即时在操作容器中补充相同温度的释放介质10ml。

取续滤液3ml置50ml量瓶中(阿昔莫司750mg规格)，或取续滤液5ml置100ml量瓶中(阿昔莫司1000mg规格)，加适量释放介质稀释至刻度，作为供试品溶液；另精密称阿昔莫司对照品适量，加盐酸溶液(9→1000)制成每1ml中约含50μg的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液，照含量测定项下的色谱条件试验，计算释放量。本品每粒在第1小时、4小时和8小时时的释放量应分别为标示量的10％～30％、35％～75％和80％以上，均应符合规定。

阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表9：

表9实施例8阿托伐他汀钙和依折麦布溶出度和含量测定

阿昔莫司释放度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表10：

表10实施例8阿昔莫司释放度和含量测定结果

结果表明：制成颗粒剂后，本实施例各处方的阿昔莫司颗粒和其他两种活性成分颗粒的接触面积很小，稳定性很好；阿昔莫司缓释部分的释放性能良好，均符合规定。实施例9缓释胶囊(由阿昔莫司缓释微丸与阿托伐他汀钙微片和依折麦布微片组成)

一、处方(以1000粒计)

二、制备工艺：

1、阿昔莫司缓释微丸制备：

(1)将阿昔莫司粉碎过100目筛，备用。

(6)缓释衣制备工艺：

(7)将阿昔莫司丸芯置流化床中包衣，增重在13.0％-14.0％，得到阿昔莫司缓释微丸。

2、阿托伐他汀钙微片的制备：

(1)将阿托伐他汀钙微粉化，备用。

(2)将微晶纤维素、碳酸钙、乳糖、交联羧甲基纤维素钠(内加)按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)用适量5％羟丙纤维素-sl水溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分。

(4)24目筛制粒，40℃烘干，40目筛整粒，按比例加入处方量的交联羧甲基纤维素钠(外加)、阿托伐他汀钙、硬脂酸镁混合均匀，备用。

(5)将阿托伐他汀钙颗粒用7.5mm的旋转压片机压制成片，硬度为35～50N。

(6)薄膜衣的制备：将胃溶型包衣粉溶于水中，即得。

(7)将阿托伐他汀钙片置包衣锅中包衣增重至2.0％～4.0％，即得。

3、依折麦布微片的制备：

(1)将依折麦布粉碎过100目筛，备用。

(2)将乳糖、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠(内加)按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)用适量5％羟丙甲纤维素-E5水溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分。

(4)24目筛制粒，40℃烘干，24目筛整粒，按比例加入处方量的依折麦布、交联羧甲基纤维素钠(外加)、十二烷基硫酸钠、硬脂酸镁混合均匀，备用。

(5)将依折麦布颗粒用7.5mm的旋转压片机压制成片，硬度为35～50N。

(6)薄膜衣的制备：将胃溶型包衣粉溶于水中，即得。

(7)将依折麦布片置包衣锅中包衣增重至2.0％～4.0％，即得。

4、缓释胶囊的制备：

将处方量的阿昔莫司缓释微丸及阿托伐他汀钙微片、依折麦布微片各一片装入胶囊中，即得。

三、含量、溶出度及释放度检测方法及结果

1、含量测定：照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录VD)测定。

测定法1(阿昔莫司部分)取本品20粒，将内容物分离，收集微丸部分，混匀，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约含阿昔莫司50mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声使主药溶解，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液1，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿昔莫司对照品适量，加流动相配成每1ml约含0.5mg阿昔莫司的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

测定法2(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)取上述测定法1项下所有微片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约含阿托伐他汀、依折麦布均各100mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声使主药溶解，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液2，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另分别取阿托伐他汀钙和依折麦布对照品适量，分别加流动相配成每1ml约含阿托伐他汀钙或依折麦布0.1mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

2、溶出度测定(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)：

直接取续滤液作为供试品溶液；另取阿托伐他汀钙、依折麦布对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制成每1ml中约含5μg阿托伐他汀和5μg依折麦布的溶液作为对照品溶液。分别量取供试品溶液以及对照品溶液各50μl注入液相色谱仪，照含量测定项下的色谱条件试验，计算每粒中阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。

3、释放度测定(阿昔莫司部分)：

取续滤液3ml置25ml量瓶中(阿昔莫司375mg规格)，或取续滤液2ml置10ml量瓶中(阿昔莫司250mg规格)，加适量释放介质稀释至刻度，作为供试品溶液；另精密称阿昔莫司对照品适量，加盐酸溶液(9→1000)制成每1ml中约含50μg的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液和对照品溶液，照含量测定项下的色谱条件试验，计算释放量。本品每粒在第1小时、4小时和8小时时的释放量应分别为标示量的10％～30％、35％～75％和80％以上，均应符合规定。

阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出度及0天和室温放置12个月含量的测定结果见表11：

表11实施例9阿托伐他汀钙和依折麦布溶出度和含量测定

阿昔莫司释放度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表12：

表12实施例9阿昔莫司释放度和含量测定结果

结果表明：阿昔莫司制成含有缓释包衣的膜控缓释微丸，阿托伐他汀钙微片和依折麦布微片外包薄膜衣层后，三部分之间互不影响，稳定性极佳，室温放置12个月后阿托伐他汀钙含量仅下降1％左右，依折麦布含量几乎不下降；各处方的阿昔莫司缓释部分的释放性能良好，均符合规定。

实施例10缓释胶囊(由阿昔莫司渗透泵微片与阿托伐他汀钙、依折麦布微片组成)

一、处方(以1000粒计)

二、制备工艺：

1、阿昔莫司缓释微片的制备：

(1)将阿昔莫司粉碎过100目筛，备用。

(2)将阿昔莫司、乳糖、甘露醇按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)用适量的含8％PVPK30、3％吐温的70％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟，24目筛制粒，40℃烘干，24目筛整粒，按比例加入处方量的硬脂酸镁混合均匀，备用。

(4)压片：处方1，将阿昔莫司颗粒于7.5mm的旋转压片机压制成每片含阿昔莫司62.5mg的微片；处方2，将阿昔莫司颗粒于7.5mm的旋转压片机压制成每片含阿昔莫司75mg的微片。硬度为30～45N。

(5)缓释衣制备工艺：

a.称取处方量的羟丙甲纤维素E50于乙醇中分散；

b.称取处方量的聚乙二醇4000于水中溶解，加入乙基纤维素分散；

c.将a加入到b中，溶解，即得。

(6)将阿昔莫司片芯于高效包衣机中包衣，增重在8.0％-9.0％。

2、阿托伐他汀钙微片的制备：同实施例9

3、依折麦布微片的制备：同实施例9

4、缓释胶囊的制备：

处方1：将4片阿昔莫司缓释微片(即阿昔莫司250mg)与阿托伐他汀钙微片、依折麦微布片各一片装入胶囊中，即得；

处方2：将5片阿昔莫司缓释微片(即阿昔莫司375mg)与阿托伐他汀钙微片、依折麦布微片各一片装入胶囊中，即得。

三、含量、溶出度及释放度检测方法及结果

测定法1(阿昔莫司部分)取本品20粒，取内容物中阿昔莫司部分微片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约含阿昔莫司50mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声使主药溶解，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液1，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿昔莫司对照品适量，加流动相配成每1ml约含0.5mg阿昔莫司的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

测定法2(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)取上述测定法1项下阿托伐他汀钙和依折麦布部分微片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约含阿托伐他汀、依折麦布均各100mg)，置100ml量瓶中，加流动相适量，超声使主药溶解，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，作为供试品溶液2，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另分别取阿托伐他汀钙和依折麦布对照品适量，分别加流动相配成每1ml约含阿托伐他汀钙或依折麦布0.1mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

2、溶出度测定(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)：

3、释放度测定(阿昔莫司部分)：

阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表13：

表13实施例10阿托伐他汀钙和依折麦布溶出度和含量测定

阿昔莫司释放度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表14

表14实施例10阿昔莫司释放度和含量测定结果

结果表明：三部分之间互不影响，稳定性极佳，室温放置12个月后阿托伐他汀钙含量仅下降1％左右，依折麦布含量几乎不下降；各处方的阿昔莫司缓释部分的释放性能良好，均符合规定。

实施例11缓释胶囊(由阿昔莫司骨架缓释微片与阿托伐他汀钙、依折麦布微片组成)

一、处方(以1000粒计)

二、制备工艺：

1、阿昔莫司缓释微片的制备：

(1)将阿昔莫司粉碎过100目筛，备用。

(2)将阿昔莫司、巴西蜡、甘露醇、硬脂酸按处方量于湿法制粒机中混合，搅拌600转/分，剪切1200转/分，约10分钟。

(3)用适量的1％CMC-Na10％乙醇溶液制备软材，搅拌500转/分，剪切1380转/分，约3分钟，24目筛制粒，40℃烘干，24目筛整粒，按比例加入处方量的硬脂酸镁混合均匀，备用。

(5)薄膜衣的制备：将胃溶型包衣粉溶于水中，即得。

(6)将阿昔莫司骨架缓释片置包衣锅中包衣增重至2.0％～4.0％，即得。

2、阿托伐他汀钙微片的制备：同实施例9

3、依折麦布微片的制备：同实施例9

4、缓释胶囊的制备：

处方1：将4片阿昔莫司缓释微片(即250mg)与阿托伐他汀钙微片、依折麦布微片各一片装入胶囊中，即得

处方2：将5片阿昔莫司缓释微片(即375mg)与阿托伐他汀钙微片、依折麦布微片各一片装入胶囊中，即得

三、含量、溶出度及释放度检测方法及结果

2、溶出度测定(阿托伐他汀钙和依折麦布部分)：

3、释放度测定(阿昔莫司部分)：

阿托伐他汀钙和依折麦布的溶出度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表15：

表15实施例11阿托伐他汀钙和依折麦布溶出度和含量测定

阿昔莫司释放度及0天和室温放置12个月的含量测定结果见表16：

表16实施例11阿昔莫司释放度和含量测定结果

实施例12本发明临床试验结果

一、试验方法

(一)试验设计

本试验分为2个阶段进行。第1阶段：筛选期(4周)，第2阶段：治疗期(12周)。分别在-4、-2、0、4、8、12周进行随访，测定血脂，观察安全性。

表17-1试验流程图

(二)试验步骤

受试者在第1次随访时(-4周)如符合筛选期入选标准则进入筛选期，停用所有调脂药物，在-2周和0周分别采血，测定血脂，将两次血脂的平均值作为基线值。如符合治疗期入选标准则进入治疗期，随机分入各给药组，进行为期12周的治疗。

(三)受试者的选择

3.1入选标准

3.1.1筛选期

受试者进入筛选期即第1次随访时，必须符合以下标准。

(1)门诊或住院的男性及女性患者；

(2)年龄18-75岁；

(3)原发性高胆固醇血症患者，入选时的血脂标准需满足：LDL-C为3.37-6.48mmol/l(130-250mg/dl)，TG为1.70-5.65mmol/L(150-500mg/dl)；

(4)停用所有调脂药物；

(5)试验期间采用国家胆固醇教育计划规定的饮食治疗方案，规律运动；

(6)育龄人群同意在试验期间严格采取有效的避孕措施(不能口服避孕药)；

(7)自愿签署书面知情同意书。

3.1.2药物治疗期

当受试者进入药物治疗期即第3次随访时，必须符合以下标准：

(1)门诊或住院的男性及女性患者；

(2)年龄18～75岁；

(3)在-2周和0周随访时，空腹血清LDL-C平均值为3.37-6.48mmol/L(130-250mg/dl)；

(4)在-2周和0周随访时，空腹血清TG平均值为1.70-5.65mmol/L(150-500mg/dl)；

(5)停用所有调脂药物；

(6)同意在试验期间坚持低脂、低胆固醇饮食；

(7)育龄人群同意在试验期间严格采取有效的避孕措施(不能口服避孕药)；

(8)自愿签署书面知情同意书。

3.2排除标准

(1)已确诊的纯合子家族性高胆固醇血症患者；

(2)对HMG-CoA还原酶抑制剂、依折麦布或烟酸类药物(如阿昔莫司、烟酸)有过敏史或有严重不良反应史的患者；

(3)正在使用肝素、甲状腺治疗药和其它影响血脂代谢药物(如各种激素制剂、口服避孕药等)的患者；

(4)半年内曾发生心脑血管事件、严重创伤或重大手术者；

(5)肾病综合症、甲状腺机能减退、急或慢性肝胆疾病、急慢性胰腺炎、活动性胃溃疡、不稳定或严重的外周动脉病、充血性心力衰竭(NYHA分级标准III或IV级)、严重高血压患者；

(6)出血体质患者；

(7)肝肾功能异常患者(AST或ALT≥正常值上限的2倍，Cr＞正常值上限)；

(8)血清CK≥正常值上限的3倍；

(9)空腹血糖＞180mg/dl(9.99mmol/l)；

(10)准备怀孕的妇女、妊娠或哺乳期妇女；

(11)患者无能力表达自己的主诉，如精神病患者；

(12)依从性差的患者。

(四)合并用药

本研究中，患者在入组前1个月内以及在试验期间所有的合并用药，均应记录。试验过程中不允许合并下列药物：

·其他任何临床研究用药；

·其他调脂药，包括具有调脂作用的食品补充剂和添加剂等保健品；

·肝素、香豆素类衍生物(如华法林)、甲状腺治疗药和其它影响血脂代谢的药物(如口服避孕药等)；

·胺碘酮、异维A酸、环孢素、达那唑、奈法唑酮、利福平、大环内酯类抗生素(如克拉霉素)、喹诺酮类抗生素(如氧氟沙星)、唑类抗真菌药(如酮康唑、氟康唑和伏立康唑)、维拉帕米、全身用雄激素/促蛋白合成类固醇、艾滋病治疗药(如齐多夫定、司他夫定、茚地那韦、沙奎那韦、利托那韦等)、贯众连翘类制剂、银杏制剂。

(五)研究用药

阿托伐他汀钙片、依折麦布片、辛伐他汀片、烟酸缓释片均为市售品，阿昔莫司缓释片(250mg)为临床研究用药。

(六)用法用量

阿托伐他汀钙片：口服，一次10、20、40mg，一天1次；依折麦布片：口服，一次10mg，一天1次；阿昔莫司缓释片：口服，一次250、500、750mg，一天1次，分别用阿昔莫司缓释片1片、2片、3片。辛伐他汀片：口服，一次10、20、40、80mg，一天1次；烟酸缓释片：口服，一次2g，一天1次。具体组合方式详见表17-3。

(七)疗效和安全性评价

7.1疗效评价

7.1.1疗效指标

7.1.1.1血脂测定指标及测定时间

血脂测定指标：LDL-C、HDL-C、TC、TG

测定时间：第1、2、3、4、5、6次随访

7.1.1.2疗效指标

治疗12周末，LDL-C、TC、TG、HDL-C相对基线的变化百分率

7.1.2疗效评价指标的计算

将随访2和随访3时血脂(HDL-C、LDL-C、TC、TG)的平均值作为基线值；治疗12周后血脂将与基线值进行比较，计算百分比率的改变。

7.2安全性评价

通过患者报告、研究者询问、实验室检查、心电图及生命体征检查结果等方面进行安全性评价。

7.2.1实验室及心电图检查指标及测定时间

表17-2实验室及心电图检查指标及测定时间

*：第4、8周随访时只测定ALT、AST、CK $：针对育龄妇女

将第0周的实验室及心电图检查结果作为基线值，与基线值相比，药物治疗期间任何有临床意义的实验室指标恶化都将认为是不良事件。

注意：若在药物治疗期间，CK＞正常值上限的5倍但没有临床症状，则需要询问患者化验前是否进行超常的剧烈运动、大量饮酒、是否有病毒感染(可考虑进行有关血清学检查)以及新近的合并用药，建议受试者4-10天后复查；若CK＞正常值上限的5倍，同时伴有肌肉疼痛、触痛或肌肉无力，则应退出临床研究，并随访至上述情况消失。ALT或AST＞正常值上限的2倍但不足3倍时，建议受试者4-10天后复查；若ALT或AST＞正常值上限的3倍时，应退出临床试验，并随访至上述情况消失。

7.2.2不良事件

不良事件是指自患者入选试验开始至最后一次随访之间，由患者主动报告；或研究医师检查发现；或通过询问“自上次检查后，您有何不同的感觉？”患者回答的任何不利的医疗事件。无论这一事件与研究药物是否有因果关系。

(八)统计分析

8.1统计分析人群

·全分析数据集(Full Analysis Set，FAS)：根据ITT原则，所有经随机化分组，并至少服用一次药品的全部病例，构成本研究的FAS人群。FAS集用于疗效分析，其中缺失数据用最后一次观察的数据填补(LOCF准则)。

·符合方案数据集(Per-Protocol Set，PPS)：所有符合试验方案、依从性好、试验期间未服禁止用药、完成CRF规定填写内容的病例，PPS集用于疗效分析。

·安全性数据集(Safety Analysis Set，SS)：由所有经随机化分组，至少服用一次药品且有安全性评价的病例构成。SS集用于安全性分析。

8.2统计分析方法

8.2.1统计描述

(1)未完成试验的病例分析：脱落病例应一一分析原因。

(2)描述性统计：包括均数，标准差，最大值，最小值，中位数，可信区间，频率(构成比)等。

8.2.2统计推断方法

(1)计量资料：采用t检验、配对t检验、秩和检验、配对秩和检验、中位数检验等方法。

(2)计数资料：采用卡方检验、Fisher精确检验等；等级资料采用Ridit分析，CMH法。

主要疗效指标：采用非线性多元回归模型进行相互作用分析，确定最佳组方。

8.2.3统计表达

(1)报告主要采用表格形式，表格具有自明性，即具有标题，表注，例数。

(2)重复测量数据的结果既用表格形式，同时附统计图，以增加可读性。

8.2.4统计软件：采用SAS 9.1.3软件分析。

(九)试验结果

9.1基线值测定结果

对1908例符合入选标准的患者随机分组。共分32组，分别为依折麦布(1组)、阿托伐他汀钙(3组)、阿昔莫司(3组)、阿托伐他汀钙+依折麦布(3组)、阿昔莫司+阿托伐他汀钙(9组)、阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司(9组)、辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释片(4组)，测定各组患者的LDL-C、TC、TG、HDL-C的基线值。结果表明，各组血脂指标的基线值具有可比性(p＞0.05)，见表17-3。

表17-3各组血脂基线值

*：LDL-C、TC、HDL-C为平均值±标准差，TG为中位值。

9.2疗效评价

给药12周后，阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司10+10+250mg、20+10+250mg、40+10+250mg组对LDL-C、TC及TG的调节作用与阿托伐他汀钙+依折麦布各组相比均无显著差异(p＞0.05)，且降低TG、升高HDL-C的作用明显弱于辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释片各组(p＜0.05)。

阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg、40+10+500mg、40+10+750mg组治疗12周后各项血脂指标均得到全面而显著地改善，与其他各组具体对比如下：

与依折麦布、阿托伐他汀钙、阿昔莫司组相同剂量的单方相比：LDL-C、TC、TG均进一步显著下降(p＜0.01或＜0.001)，HDL-C显著升高(p＜0.05或＜0.001)。

与相应剂量的阿托伐他汀钙+依折麦布组相比：由于阿昔莫司的加入，使TG进一步显著下降(p＜0.01或＜0.001)，HDL-C显著升高(p＜0.01或＜0.001)。

与相应剂量的阿托伐他汀钙+阿昔莫司组相比：由于依折麦布的加入，使LDL-C和TC进一步显著下降(p＜0.01或0.001)。

与辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释片组相比：LDL-C、TC、TG显著降低(p＜0.05)，HDL-C无显著差异(p＞0.05)。

其中，阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司40+10+500mg、40+10+750mg组与10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg相比，对LDL-C、TC、TG及HDL-C的调脂作用无显著差异(p＞0.05)，调脂作用并没有随着剂量的增加而显著增加，结果见表17-4。

9.3安全性评价

给药12周后，阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司组中除40+10+250mg、40+10+500mg、40+10+750mg组外，其他各剂量组肝酶异常发生率(ALT≥3×ULT、AST≥3×ULT)、肌酸激酶异常发生率(CK≥5×ULT)以及潮红发生率与依折麦布、阿托伐他汀钙、阿昔莫司、阿托伐他汀钙+依折麦布、阿昔莫司+阿托伐他汀钙组相比，均无显著增加(p＞0.05)；与辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释片组相比，肝酶、肌酶异常及潮红发生率均显著降低(p＜0.05或0.001)。阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司组40+10+250mg、40+10+500mg、40+10+750mg组与依折麦布、阿托伐他汀钙、阿昔莫司、阿托伐他汀钙+依折麦布、阿昔莫司+阿托伐他汀钙组相比，肝酶、肌酶异常及潮红发生率显著增加(p＜0.05)，与辛伐他汀+依折麦布+烟酸缓释片组相比，肝酶、肌酶异常发生率无显著差异(p＞0.05)，但潮红发生率显著降低(p＜0.05)。

其中，阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司各剂量组内，10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg四组上述不良反应的发生率与10+10+250mg、20+10+250mg组相比无显著差异(p＞0.05)，但显著低于40+10+250mg、40+10+500mg、40+10+750mg组(p＜0.05)。同时与相同剂量的单方相比，不良反应没有叠加，结果见表17-4。

(十)总结

上述临床试验的结果表明，他汀类、烟酸类以及依折麦布的单药或两药联合用药的调脂谱较为单一，而辛伐他汀+依折麦布+烟酸三方合用的缺点主要是烟酸引起的潮红不良反应严重。而本发明的阿托伐他汀+依折麦布+阿昔莫司三方联合用药，对各项血脂指标，如：LDL-C、TG、HDL-C均有明显改善作用，调脂作用更加全面，调脂效果更加显著，同时不良反应无显著差异甚至更小。

尤其是在所有剂量组中，阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司剂量组合为10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg组与其他剂量组相比，对血脂的改善作用更明显，同时不良反应未增加，疗效与安全性俱佳，因此为优选剂量组合。

其中，上述优选剂量组合与阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司剂量组合为10+10+250mg、20+10+250mg组相比，调脂作用显著改善，而不良反应无显著差异。而阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司剂量组合为40+10+250mg、40+10+500mg、40+10+750mg的各组与优选剂量组相比，随着剂量增加，调脂作用并未进一步增加，但不良反应显著增加。

因此，通过对疗效及安全性的综合评价，我们惊喜地发现，阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司每日10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg的剂量组合有显著调脂作用，同时安全性好，充分体现了三方用药的优势，实现了全面调脂，患者耐受性更好，是优选的三方组合，符合目前对调脂药临床用药高效低毒的要求。

上述临床试验的结论是基于阿托伐他汀+依折麦布+阿昔莫司联合用药，显然，将这三种活性成分按照上述剂量和比例与适宜的药用辅料混合制得组合物，制成单一形式的药物制剂，优选固体口服制剂，包括片剂、胶囊、颗粒剂、干混悬剂等，例如本发明的实施例1-11所述的制剂组合物，以复方制剂的形式提供给患者，不仅可以保持上述优点，同时可以进一步方便患者服药，提高患者顺应性。复方制剂中优选将阿昔莫司部分制成缓释形式，可以进一步降低潮红等不良反应的程度，使得本发明的效果更佳。

实施例13大鼠长期毒性试验结果

1、动物

Wistar大鼠，雌雄各半，周龄为6-7周。雌性大鼠体重160±8g，雄性大鼠体重170±10g。试验开始前观察动物进食、活动及粪便等1周，选择状态正常的动物进入试验。

2、实验仪器

SABA/18全自动生化分析仪、SYSMEXF-820半自动血液学分析仪、PABER-1型血小板聚集凝血因子分析仪、BX40-32H02型生物显微镜和PM10-SP35显微照相系统等。

3、分组与给药

3.1分组

依照《化学药物长期毒性试验技术指导原则》，本试验设溶媒对照组、阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司单药组及和三个药组成的复方组。分组前称动物体重，按动物体重和性别分层并随机原则分组，每组30只，雌雄各半。

3.2剂量设置依据

实施例12中优选的阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司三方组合物中，阿昔莫司日剂量为500～750mg，阿托伐他汀钙的日剂量为10～20mg，依折麦布的日剂量为10mg，按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述人常用剂量换算成大鼠的剂量分别为阿昔莫司45～67.5mg/kg、阿托伐他汀钙0.9～1.8mg/kg、依折麦布0.9mg/kg。将上述动物剂量分别扩大10倍进行大鼠长期毒性研究，组别见表18-1。

表18-1各组动物剂量

*：以阿托伐他汀计

**：分别对应于实施例12中优选的阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司剂量组合10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg。

3.3给药期：本制剂临床的给药方案为长期用药，故本试验的给药期定为26周。

4、观测指标、方法和时间

4.1观测指标项目

一般药物反应、血液学指标、血清生化指标、大体解剖、脏器称重，并计算脏器系数。其中：

一般药物反应包括观察腔道有无异常分泌物，记录皮毛、活动、尿液、粪便的变化，称进食量和体重等。体重以每笼为单位计算平均数。

血液学指标，项目包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、血细胞比积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白含量、红细胞平均血红蛋白浓度、网织红细胞计数、血小板计数、凝血酶原时间。

血清生化指标包括天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、肌酸磷酸激酶、尿素氮、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆红素、肌酐、总胆固醇、甘油三酯、钠离子、钾离子和氯离子。

4.2指标观测时间

各类指标观测时间见表18-2。

表18-2长期毒性试验指标观测时间

注：如动物出现药物异常毒性反应，可增加新的检查指标或检查次数。

5、数据处理和统计分析

对计数资料，一般用发生率表示，采用Fisher精确检验(双侧)进行统计分析。对计量资料，各组结果以算术平均数±标准差表示，采用Student t检验进行各组间差异的显著性检验。

6、试验结果

6.1一般症状

试验期内，各组动物均存活到预定活杀期内。溶媒对照组、三药单独给药组及复方低剂量组和中剂量组动物活泼好动，毛顺而亮，大便成粒，小便白色或微黄，复方高剂量组动物，于给药26周后，形体略有消瘦，毛色黄而乱，精神不佳，但二便未见异常变化。

6.2进食量

给药期及恢复期间，各给药组动物的进食量与溶媒对照组比较无显著差异(P＞0.05)。恢复期结束，上述各组进食量与溶媒对照组相比无显著差异。

6.3体重

各给药组动物的体重与溶媒对照组比较未见明显差别，个别时间体重略有降低。停药4周，各给药组体重均升高，但与溶媒对照组相比无显著差异。

6.4外周血有形成分指标

6.4.1白细胞总数及分类

大鼠给药13、26周及停药4周，三次检测外周血白细胞数，各给药组与溶媒对照组比较没有明显升高或下降。各组动物白细胞分类计数中，中性粒细胞、嗜酸粒细胞、淋巴细胞及单核细胞与溶媒对照组相比均无显著差异。

6.4.2红细胞数、血红蛋白含量及血细胞比积

各给药组动物的红细胞数、血红蛋白含量及血细胞比积与溶媒对照组相比均无明显差异。

6.4.3红细胞计算指标

外周血红细胞计算指标包括平均红细胞容积、平均红细胞血红蛋白浓度和平均红细胞血红蛋白量三项指标。在给药期及停药期各给药组与溶媒对照组相比，各项指标均无显著差异。

6.4.4外周血网织红细胞

试验组动物的外周血网织红细胞有一定的个体差异，但组间比较均无显著差异。

6.4.5外周血小板数

各给药组在试验期内血小板数波动均在Wistar大鼠正常值范围之内，组间比较无显著差异。

6.4.6凝血酶原时间

各给药组的凝血酶原时间与溶媒对照组相比均无显著差异。

6.5血清生化指标

给药13周、26周时，各给药组的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、血糖(GLU)、总胆红素(TBil)、尿素氮(URE)、肌酐(Cr)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)等指标与溶媒对照组相比均无显著差异(见表18-3～表18-12)。

给药13周，9+9+675mg/kg组、18+9+450mg/kg组、18+9+675mg/kg组(雌、雄)总胆固醇显著低于溶媒对照组(p＜0.05)；给药26周，各给药组动物(雌、雄)总胆固醇均显著低于溶媒对照组(p＜0.05或p＜0.01)。给药26周，雌、雄大鼠阿昔莫司450、675mg/kg组、复方9+9+675、18+9+450、18+9+675mg/kg组甘油三酯显著低于溶媒对照组(p＜0.05或p＜0.01)，结果见表18-13～表18-14。上述给药期中，给药组总胆固醇和甘油三酯的变化是由于试验药的药理作用所致。

停药4周时，给药组各项指标与溶媒对照组相比均无显著差异。

表18-3大鼠灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清丙氨酸氨基转移酶的变化(n＝5)

表18-4大鼠灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清天门冬氨酸氨基转移酶的变化(n＝5)

表18-5灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清肌酸激酶的变化(n＝5)

表18-6大鼠灌胃灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清碱性磷酸酶的变化(n＝5)

表18-7灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清血糖的变化(n＝5)

表18-8灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清总胆红素的变化(n＝5)

表18-9灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清尿素氮的变化(n＝5)

表18-10灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清肌酐的变化(n＝5)

表18-11灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清总蛋白的变化(n＝5)

表18-12灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清白蛋白的变化(n＝5)

表18-13灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清总胆固醇的变化(n＝5)

注：与溶媒对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01

表18-14灌胃口服阿昔莫司、阿托伐他汀钙、依折麦布或阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司后血清甘油三酯的变化(n＝5)

注：与溶媒对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01。

6.6大体解剖

试验分组、动物处理时间及处理动物数见表18-15。结果发现，给药13、26周及停药4周处理的大鼠，组织脏器色质正常，未见包块、疤痕、淤血、出血及感染灶等病变。

表18-15实验动物处理时间及处理动物数

6.7脏器重量及脏器系数

分别对脑、甲状腺、心、肝、脾、肺、肾(双侧)、肾上腺(双侧)、胸腺、子宫、卵巢(双侧)、睾丸(带附睾、双侧)、前列腺称重，计算脏器系数。

脏器系数＝脏器重量/体重×100。

结果：给药13、26周、停药4周后，各给药组动物的脏器重量及脏器系数与溶媒对照组相比均无显著差异(见表18-16～表18-21)。

7、结论

结果表明，对于优选的阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司剂量组合10+10+500mg、10+10+750mg、20+10+500mg、20+10+750mg，按体表面积为单位的剂量等效原则推算，上述阿托伐他汀钙、依折麦布、阿昔莫司的人用剂量换算成大鼠剂量分别为0.9～1.8mg/kg、0.9mg/kg、45～67.5mg/kg，将上述大鼠剂量分别扩大10倍后，按上述优选的剂量组合的比例，给予大鼠连续口服用药26周，我们惊喜地发现，与阿托伐他汀钙、依折麦布或阿昔莫司单方用药组相比，上述优选剂量组合对应的动物实验组的各项安全性指标均无显著变化，毒性未增加，这充分体现了本发明的优势。上述动物长期毒性试验结果提示，在临床应用中，本发明的阿托伐他汀钙+依折麦布+阿昔莫司组合物可安全有效地用于治疗高脂血症患者。

Claims

1.一种治疗血脂异常的组合物，其特征在于含有依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司。

2.如权利要求1所述组合物，其特征是组合物中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者重量比的比例范围是5～10∶5～80∶250～1000，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。

3.如权利要求1所述组合物，其特征是组合物中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者重量比的比例范围是10∶10～40∶250～750，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。

4.如权利要求1所述组合物，其特征是组合物中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者重量比的比例范围是10∶10～20∶500～750，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。

5.如权利要求1所述组合物，其特征是组合物中依折麦布、阿托伐他汀钙和阿昔莫司三者重量比为10∶10∶500、10∶10∶750、10∶20∶500或10∶20∶750，其中阿托伐他汀钙的量以阿托伐他汀计。

6.如权利要求1-5任一项所述组合物，其特征是剂型为固体口服制剂。

7.如权利要求6所述组合物，其特征是剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、干混悬剂。

8.如权利要求7所述组合物，其特征是所述片剂为双层片，一层为阿昔莫司部分，另一层为依折麦布、阿托伐他汀钙部分。

9.如权利要求7所述组合物，其特征是所述胶囊剂中含两种微丸，一种微丸含有阿昔莫司，另一种微丸含有依折麦布、阿托伐他汀钙。

10.如权利要求7所述组合物，其特征是所述颗粒剂中含两种颗粒，一种颗粒含有阿昔莫司，另一种颗粒含有依折麦布、阿托伐他汀钙；或所述颗粒剂由含有阿昔莫司的微丸与含有依折麦布、阿托伐他汀钙的颗粒组成。

11.如权利要求7所述组合物，其特征是所述干混悬剂中，阿昔莫司部分为微丸，依折麦布、阿托伐他汀钙为粉末。

12.如权利要求6所述组合物，其特征是所述固体口服制剂中阿昔莫司为缓释形式。

13.如权利要求7-11任一项所述组合物，其特征是所述剂型中阿昔莫司为缓释形式。

14.如权利要求12所述组合物，所述组合物为胶囊剂，其特征是所述胶囊剂中阿昔莫司部分为缓释微丸或缓释微片，依折麦布部分、阿托伐他汀钙部分均为微片。

15.如权利要求14所述胶囊剂，其特征是所述阿昔莫司部分为含缓释包衣层的膜控缓释微丸、膜控缓释微片或外包薄膜衣层的骨架缓释片，阿托伐他汀钙部分和依折麦布部分的微片外包薄膜衣层。

16.如权利要求15所述胶囊剂的制备方法，其特征是将阿昔莫司部分制成含缓释包衣层的膜控缓释微丸、膜控缓释微片或制成骨架缓释片后外包薄膜衣层，阿托伐他汀钙和依折麦布制成微片后外包薄膜衣层，然后将上述微丸或微片装填入胶囊中。