CN103125517A - 一种具有增效作用的杀菌组合物及其制剂 - Google Patents
一种具有增效作用的杀菌组合物及其制剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有增效作用的杀菌剂组合物及其制剂。所述杀菌组合物由活性物质A和B组成,活性物质A是指:1,1′-亚氨基双(1,8-亚辛基)二胍三辛烷基苯磺酸盐,活性物质B是指:(±)烯丙基1-(2,4-二氯苯基)-2-咪唑-1-基乙基醚(抑霉唑,Imazalil),其中活性物质A与B的质量比为1∶9-9∶1。杀菌剂制剂中该组合物的质量百分含量为10%~80%,其剂型优选为乳油、可湿性粉剂、悬浮剂、水乳剂、微乳剂、水分散粒剂中的一种或几种。本发明的杀菌组合物应用于柑橘贮藏期病害的防治,尤其是青霉病、绿霉病、炭疽病、酸腐病、蒂腐病、黑腐病等病害的防治。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有增效作用的杀菌组合物及其制剂。
背景技术
柑橘果实贮藏期间常发生侵染性病害,通常由真菌引起,常见的有青霉病、绿霉病、蒂腐病、黑腐病、炭疽病等。若不进行防治,常规年份可引起20%~30%以上采收柑橘腐烂。一般用咪唑类杀菌剂抑霉唑或咪鲜胺处理果实,以预防在贮藏、运输和销售过程中由绿霉病引起的烂果问题。但是,自2000年以来,抑霉唑和咪鲜胺防治效果下降甚至失效的事件时有发生。美国和以色列早已报道了抗抑霉唑的柑橘绿霉病菌菌系形成和种群增长情况,以及由此带来的抑霉唑防治效果下降问题,中国早在2000年也已有发现。为应对抑霉唑的抗药性问题,美国已筛选并完成了嘧霉胺(pyrimethanil)、嘧菌酯(azoxystrobin)和氟咯菌腈(fludioxonil)等3种杀菌剂在采后柑橘上使用的登记。
杀菌剂的混配或复配可以延缓或克服抗药性,是解决上述问题的最有效的方法之一。植物病原茵对杀菌剂的抗药性,显然先在保护性杀菌剂中最早发现,但种类有限,抗性程度较低,对防治上并没有多大的影响。内吸性杀菌剂的大量应用,情况就完全不同了,尽管历史短,但抗性问题却远比应用时间长的保护性杀菌剂严重得多,解决病原茵对杀菌剂的抗性问题,最好的办法处是防止或延缓病原菌产生抗性菌株,但这方面工作难度较大,目前取得的成就并不十分满意,而从用药的选择性和采用合理的用药方法来克服抗性问题,特别是杀菌剂的复配,是行之有效的方法。从目前的研究资料来看,作用方式不同的杀菌剂混用有利于延缓或克服抗性的产生。采用作用方式不同的杀菌剂混用,实质上就是增加药剂对病原菌的作用点和抑制病原菌对药剂的代谢过程及途径。从延缓和克服抗性的角度出发,主要以不发生不良的物理或化学变化的可混性为基础,药剂的防治对象一致而作用方式不同,又无严重的拮抗作用发生,无论内吸性杀菌剂的混用,保护性杀菌剂的混用,还是内吸性和保护性杀菌剂的混用,通常均能达到延缓或克服抗性的目的。特别值得提出的是,内吸性杀菌剂和保护性杀菌剂的复配混用,已成为用于延缓和克服抗性的混剂的主要发展趋势。而作用机制相同的杀菌剂混用,则有利于抗性的产生和强化已产生的抗性。如苯菌灵和甲基托布津,它们是转化成多菌灵后,对核酸的代谢起抑制作用,混用易导致抗性的产生,所以一般作用机制相同的药剂不宜混用。
杀菌剂之间的合理复配混用,可以提高药剂对病害的防治效果,而防治效果的提高是通过增效作用来实现的。杀菌剂混配的增效机制,人们普遍接受的一种观点是一种药剂干扰了病原菌对另一种药剂的代谢或解毒作用。从归纳的具有增效作用的杀菌混剂可以看出,保护性杀菌剂之间,内吸性杀菌剂之间,以及保护性与内吸性杀菌剂之间的复配混用,均有许多具有增效作用的实例。
百可得(Belkute)主要对真菌的类酯化合物的生物合成和细胞膜机能起作用,抑制孢子萌发、芽管伸长、附着胞和菌丝的形成,百可得适用于番茄、茄子、芦笋、黄瓜、草莓、西瓜、生菜、菜豆、洋葱等蔬菜类作物以及苹果、柑橘、梨、桃、葡萄、柿子、猕猴桃等果树。可有效防治灰霉病、白粉病、菌核病、茎枯病、蔓枯病、炭疽病、轮纹病、黑星病、叶斑病、斑点落叶病、果实软腐病、青霉病、绿霉病。百可得是一种广谱性杀真菌剂,具有触杀和预防作用。对大多数由子囊菌和半知菌引起的真菌病害有很好的效果
抑霉唑(Imazalil)是一类新型的内吸性杀菌剂,主要作用是影响细胞膜的渗透性及生理机能,影响脂类合成代谢,从而使霉菌细胞被破坏,对长孺孢属、镰孢属和壳针孢属等真菌性病害有特效,可以抑制柑橘青霉、绿霉病抗性菌株及其它贮藏期病害。
目前关于抑霉唑类与双胍辛胺类的杀菌组合物尚未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种混配比例合理、增效效果好、防治成本低的杀菌组合物。
本发明所提供的杀菌组合物,由活性物质A和活性物质B组成;所述活性物质A为1,1′-亚氨基双(1,8-亚辛基)二胍三烷基苯磺酸盐(百可得,Belkute),所述活性物质B为(±)烯丙基1-(2,4-二氯苯基)-2-咪唑-1-基乙基醚(抑霉唑,Imazalil)。
其中,活性物质A和活性物质B的质量比可为1∶5-7∶1,进一步可为1∶5-5∶4,更进一步可为1∶5-4∶5,最优选配比为4∶5。
本发明的另一个目的是提供一种杀菌剂制剂。
本发明所提供的杀菌剂制剂,由上述杀菌组合物和农药制剂上可接受的助剂组成,其中,杀菌组合物的质量占所述杀菌剂制剂质量的10%~80%。
所述杀菌剂制剂可以制成任意一种剂型的农药制剂,优选下述任意一种或几种剂型:乳油、可湿性粉剂、悬浮剂、水乳剂、微乳剂和颗粒剂。
上述剂型均采用本技术领域公知的方法制备,通常是将活性物质与助剂、填料,充分混合溶解或者研磨或造粒,制成制剂使用,本发明的杀菌剂制剂中使用的助剂包括溶剂、助溶剂、分散剂、乳化剂、润湿剂、稳定剂、防冻剂、增稠剂、消泡剂、填料等及其他有益于活性物质在制剂中稳定和发挥药效的物质,并无特别限定,具体组分和用量通过试验确定。
本发明还保护上述杀菌组合物及杀菌剂制剂的应用。
本发明所述的杀菌组合物及杀菌剂制剂的应用是其在柑橘贮藏期病害防治中的应用。
所述病害尤其是指青霉病、绿霉病、炭疽病、酸腐病、蒂腐病、黑腐病等病害。
本发明组分合理,杀虫效果好,用药成本低,活性物质A和B具有显著的增效作用,与现有技术相比,本发明的有益效果在于:与单剂相比,该组合物,对抗性病害,如绿霉病等具有明显的增效作用,提高了防治效果;两种成分复配,减少了用药量,从而降低了成本,减轻了对环境的污染;组合物由两种作用机制不同的活性物质组成,有利于克服和延缓害虫的抗药性。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,但它们对本发明的范围不构成任何形式的限制。所有配方中百分比或配比均为质量百分比或质量比。
下述实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
一、杀菌剂制剂的配制
1、乳油的配制:
将活性物质用溶剂溶解,待完全溶解后,加入乳化剂,搅拌成均一液体,即得。
实施例1、10%乳油
实施例2、40%乳油
实施例3、40%乳油
2、可湿性粉剂的配制:
将活性物质、分散剂、润湿剂、填料等按配方的比例混合均匀,再经粗粉碎、气流粉碎达到目标细度,再经后混合,得到可湿性粉剂。
实施例4、30%可湿性粉剂
实施例5、60%可湿性粉剂
3、悬浮剂的配制
将活性物质、分散剂、润湿剂和水按配方比例混合均匀,经砂磨机研磨后,加入增稠剂得到悬浮剂。
实施例6、35%悬浮剂
实施例7、40%悬浮剂
实施例8、45%悬浮剂
4、水乳剂的配制
将活性物质完全溶解于溶剂中,加入乳化剂搅拌至透明,作为油相,将防冻剂与水混合均一作为水相。在6000rpm的转速下,剪切水相,再将油相缓慢加入到水相中,剪切30min,形成分散性良好的水乳剂。
实施例9、15%水乳剂
实施例10、20%水乳剂
实施例11、27%水乳剂
5、微乳剂的配制
将活性物质用溶剂、助溶剂溶解,加入乳化剂搅拌至透明,作为油相,将其余物料与水混合均一作为水相,将油相缓慢滴加到水相中,搅拌30~60min,形成外观透明、均一的微乳剂。
实施例12、9%微乳剂
实施例13、15%微乳剂
实施例1418%微乳剂
6、水分散粒剂的配制
将活性物质、分散剂、润湿剂、粘结剂、崩解剂和填料按配方的比例依次加入混合器中,混合均匀,经气流粉碎成10μm以下的粉剂,再加入5%~15%的水,混合均匀后挤压造粒,经干燥筛分得到水分散粒剂。
实施例15、50%颗粒剂
实施例16、80%颗粒剂
二、室内生物测定及药效实验
下述实施例中所用的病原菌
1.柑橘蒂腐病菌,Diaporthe medusaea(Nitsehke),参考文献:陈丽锋等.柑橘蒂腐病菌的分离鉴定及生物学特性.植物保护,2007,(33)6.
2、柑橘青霉病菌,Penicillium italicum,参考文献:闵晓芳等.柑橘采后致病青霉的鉴定.果树学报,2007(24)5.
3、柑橘酸腐病菌,Geotrichum citri-aurantii,参考文献:王哲.柑橘酸腐病菌致病机理及其拮抗酵母的研究.华中农业大学硕士学位论文.2012.
上述3种病菌公众可从发病的柑橘果实表面分离获得。
实施例17、百可得与抑霉唑对柑橘蒂腐病的室内生物测定
本试验按照中华人民共和国农业行业标准(NY/T 1156.2-2006),采用菌丝生长速率法进行测定。母液的配制:用万分之一电子天平分别称取0.0842g百可得原药(含量95%)和0.0825g抑霉唑原药(含量97%)用5mL甲醇溶解配制成16000μg/mL的母液,以相同的方法依次配制百可得、抑霉唑质量比为1∶5、2∶5、4∶5、5∶1的16000μg/mL的母液。
浓度的设定:经过预实验,在无菌操作条件下,分别把配制好的16000μg/mL百可得和抑霉唑两种药剂不同配比(1∶5、2∶5、4∶5、5∶1)的母液用培养基稀释成为4μg/mL、2μg/mL、1μg/mL、0.5μg/mL、0.25μg/mL和0.125μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板,把配好的16000μg/mL的抑霉唑母液稀释为16μg/mL、8μg/mL、4μg/mL、2μg/mL、1μg/mL和0.5μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板。试验设不含药剂处理的空白对照,各处理重复4次。将培养好的柑橘腐病菌,在无菌操作条件下用直径5mm的灭菌打孔器,自菌落边缘切取菌饼,用接种器将菌饼接种于含药平板中央,菌丝面向下,盖上皿盖,置于25℃培养箱中黑暗培养。
调查和计算
根据空白对照培养皿中菌落的生长情况调查病原菌菌丝生长情况,待空白对照中的菌落充分生长后,以十字交叉法测量各处理的菌落直径,采用下面公式计算菌落增长直径,取其平均值。
菌落增长直径=菌落直径-菌饼直径 (1)
测定结果用下列方法计算,以空白对照菌落增长直径和药剂处理的菌落增长直径计算各药剂处理对柑橘蒂腐病菌菌丝生长抑制率(参见下面公式)。
采用回归分析法对试验数据进行分析,将菌丝生长抑制率换算成几率值,以各药剂浓度对数值为横坐标,用直线回归分析法计算出EC50和EC90值,比较各处理药剂的毒力大小。
根据Wadley法来评价百可得与抑霉唑混用对柑橘蒂腐病菌的联合作用类型,增效系数(SR)<0.5为拮抗作用,0.5≤SR≤1.5为相加作用,SR>1.5为增效作用。增效系数(SR)按式(3)、式(4)计算:
对柑橘蒂腐病的毒力测定结果见表1。
表1百可得、抑霉唑不同配比对柑橘蒂腐病的毒力
室内活性测定结果显示,百可得对柑橘蒂腐病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为0.39μg/mL,抑霉唑对柑橘蒂腐病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为5.07μg/mL;百可得与抑霉唑在5∶1混用时对柑橘蒂腐病菌菌丝生长速率的抑制的增效系数(SR)为0.97表现为相加作用。百可得与抑霉唑在1∶5、2∶5和4∶5混用时对柑橘蒂腐病菌菌丝生长速率的抑制增效系数(SR)分别为2.34、2.35、2.37表现为增效作用,且百可得与抑霉唑在4∶5混用对柑橘蒂腐病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为0.34μg/mL,EC90为2.34μg/mL,其EC50和EC90值略小于百可得,而远远小于抑霉唑的EC50和EC90值。说明百可得与抑霉唑在4∶5混用对柑橘蒂腐病菌菌丝生长速率具有很好的抑制效果。
实施例18百可得与抑霉唑对柑橘青霉病的室内生物测定
测试方法同实施例17。
母液的配制:用万分之一电子天平分别称取0.0263g百可得原药(含量95%)用5mL甲醇配成5000μg/mL的母液,另外称取0.0515g抑霉唑原药(含量97%)用5mL甲醇溶解配制成10000μg/mL的母液,以相同的方法依次配制百可得、抑霉唑质量比为1∶5、2∶5、4∶5、5∶4、5∶1的5000μg/mL的母液。
浓度的设定:经预试验,在无菌操作条件下,分别把两种药剂不同配比(1∶5、2∶5、4∶5、5∶4、5∶1)的母液用培养基稀释成为5μg/mL,2.5μg/mL、1.25μg/mL、0.625μg/mL、0.3125μg/mL、0.15625μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板,单独把配好的10000μg/mL的抑霉唑母液稀释为10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL、0.625μg/mL,0.3125μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板。试验设不含药剂处理的空白对照,各处理重复3次。
对柑橘青霉病病菌的抑制结果见表2。
表2百可得、抑霉唑不同配比处理对柑橘青霉病菌菌丝生长的抑制效果
表3百可得和抑霉唑混用对柑橘青霉病菌菌丝生长速率抑制效果
室内活性测定结果显示,百可得和抑霉唑对柑橘青霉病都具有很好的防治效果,其中,百可得对柑橘青霉病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为0.35μg/mL,抑霉唑对柑橘青霉病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为30.36μg/mL;百可得与抑霉唑在1∶5、2∶5、4∶5、5∶4和5∶1混用时对柑橘青霉病菌菌丝生长速率的抑制的增效系数(SR)分别为1.04、1.01、1.12、0.55和0.59均表现为相加作用。
实施例19百可得与抑霉唑对柑橘酸腐病的室内生物测定
测试方法同实施例17。
母液的配制:用万分之一电子天平分别称取0.0053g百可得原药(含量95%)和0.0825g抑霉唑原药(含量97%)用5mL甲醇溶解配制成1000μg/mL和16000μg/mL的母液,以相同的方法依次配制百可得抑霉唑比例为1∶5、4∶5、5∶4、5∶1的1000μg/mL的母液。
浓度的设定:经过预实验,在无菌操作条件下,分别把配制好的1000μg/mL百可得和抑霉唑两种药剂不同配比(1∶5、4∶5、5∶4、5∶1)的母液用培养基稀释成为1μg/mL、0.25μg/mL、0.0625μg/mL、0.0313μg/mL、0.0156μg/mL、0.0078μg/mL和0.0039μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板,把配好的16000μg/mL的抑霉唑母液稀释为16μg/mL、8μg/mL、4μg/mL、2μg/mL、1μg/mL、0.5μg/mL和0.25μg/mL的系列浓度的含毒培养基平板。试验设不含药剂处理的空白对照,各处理重复4次。对柑橘酸腐病病菌的结果见表4。
表4百可得与抑霉唑不同配比对柑橘酸腐病的毒力
室内活性测定结果显示,百可得对柑橘酸腐病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为0.051g/mL,抑霉唑对柑橘酸腐病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为11.437μg/mL;百可得与抑霉唑在1∶5和5∶1混用时对柑橘酸腐病菌菌丝生长速率的抑制的增效系数(SR)分别为1.38和0.81表现为相加作用。百可得与抑霉唑在4∶5和5∶4混用时对柑橘酸腐病菌菌丝生长速率的抑制的增效系数(SR)分别为2.20和1.65表现为增效作用,且百可得与抑霉唑在4∶5混用对柑橘酸腐病菌菌丝生长速率的抑制中浓度EC50为0.052μg/mL,EC90为0.29μg/mL,其EC50和EC90值与百可得的EC50和EC90值相当,而远远小于抑霉唑的EC50和EC90值。说明百可得与抑霉唑在4∶5混用对柑橘酸腐病菌菌丝生长速率具有很好的抑制效果。
实施例20贮藏期柑橘果实病害实施例
供试柑橘品种为槛柑,防治对象为贮藏期柑橘病害。
供试药剂:40%百可得可湿性粉剂1000倍液(A)(加2,4-D200mg/L,下同)
500g/L抑霉唑乳油1000倍液(B)
实施例31000倍液(C)
实施例51000倍液(D)
实施例71000倍液(E)
实施例11500倍液(F)
实施例151000倍液(G)
另设不浸药空白对照(CK)
每处理橘果1箱,净重15kg,重复4次。用药方式为浸果法,以浸湿为度,捞出晾干。3日后剔去伤、病果后,清点橘果个数,置于常温库房内,贮库以窗门开关调节温度。贮藏期为4个月。效果考查方法:每间隔1个月检查1次,记录各种病害数量,并剔除病果。计算发病率和防治效果。
实验结果表明,柑橘果实短期贮存(90天、120天),根据本发明制备的制剂实施例E、G1000倍液处理、实施例F500倍液处理,烂果少,防效高,保持在93%以上,高于市售对照药剂,可确保柑橘防腐保鲜效果。
表5百可得与抑霉唑对柑橘贮存期病害的防治效果
Claims (9)
1.一种杀菌组合物,由活性物质A和活性物质B组成;所述活性物质A为1,1′-亚氨基双(1,8-亚辛基)二胍三烷基苯磺酸盐,所述活性物质B为(±)烯丙基1-(2,4-二氯苯基)-2-咪唑-1-基乙基醚;所述活性物质A和活性物质B的质量比为1∶5-7∶1。
2.根据权利要求1所述的杀菌组合物,其特征在于:所述活性物质A和活性物质B的质量比为1∶5-5∶4。
3.根据权利要求2所述的杀菌组合物,其特征在于:所述活性物质A和活性物质B的质量比为1∶5-4∶5。
4.一种杀菌剂制剂,由权利要求1-3中任一项所述的杀菌组合物和农药制剂上可接受的助剂组成;其中,所述杀菌组合物占所述杀菌剂制剂质量的10%~80%。
5.根据权利要求4所述的杀菌剂制剂,其特征在于:所述杀菌剂制剂的剂型选自下述任意一种:乳油、可湿性粉剂、悬浮剂、水乳剂、微乳剂和颗粒剂。
6.权利要求1-3中任一项所述的杀菌组合物在柑橘贮藏期病害防治中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于:所述病害选自下述至少一种:青霉病、绿霉病、炭疽病、酸腐病、蒂腐病和黑腐病。
8.权利要求4或5所述的杀菌剂制剂在柑橘贮藏期病害防治中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述病害选自下述至少一种:青霉病、绿霉病、炭疽病、酸腐病、蒂腐病和黑腐病。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130605 |