CN103124731B - 稠合的杂芳基化合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了稠合的杂芳基化合物、其组合物及其用途。
Description
磷脂酰肌醇3-激酶(也称为PI3-激酶或PI3K)家族在细胞生长、增殖、分化、迁移、存活和胞内转运等多种细胞功能中至关重要，因而与癌症密切相关。
根据结构和功能特点，PI3K家族成员可归为四类，即I～IV类。目前了解最为全面的应属I类PI3K激酶。I类含有三类Iα亚型，即PI3Kα、PI3Kβ和PI3Kδ。研究发现，PI3Kα与人类癌症和恶性疾病密切相关。PI3Kα可在人类癌症中过度表达。
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)为PI3K家族的下游激酶。抑制mTOR可以抑制PI3K的活性。因此，PI3K/mTOR信号通路有望成为新型抗癌药物研发的靶点。
本发明提供了结构式(1)的至少一种化合物:
和/或其至少一种药学上可接受的盐，其中
A1是N或CH;
A4和A5独立地为N或CR2;
A2、A3和B环一起形成含有1-4个选自N、O和S的杂原子的五元杂芳基或五元杂环基，且所述五元杂芳基或五元杂环基任选地被一个或多个基团所取代，这些基团独立地选自：烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
条件是A2、A3和B环一起形成的五元环不是
表示单键或双键;
R1是杂芳基，其任选地被一个或多个基团所取代，这些基团独立地选自：烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
R和R2独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
且以上所述的烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、卤代烷基、杂芳基和杂环基各自可以任选地被一个或多个基团取代，这些基团独立地选自任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、-OH、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；
Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg各自独立地选自氢、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；
或Ra和Rc、和/或Rc和Rd、和/或Rc和Re、和/或Rc和Rf、和/或Rd和Re、和/或Rg和Rf与它们所连接的原子一起形成3-10元的任选取代的杂环，并且
n在每次出现时独立地为0、1或2;
其中上述各任选取代的基团可以是未取代的，或者被一个或多个，例如，一个、两个或三个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C4烷基、环烷基、氧代、芳基、杂环基、杂芳基、芳基-C1-C4烷基-、杂芳基-C1-C4烷基-、C1-C4卤代烷基-、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-C1-C4烷基-O-C1-C4烷基、-OC1-C4卤代烷基、卤素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-C(O)O环烷基、-C(O)O芳基、-C(O)O杂芳基、-C(O)O杂环基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONR’R”，其中R’和R”与它们所连接的N原子可形成杂环、-CON(环烷基)(环烷基)、-CON(杂环基)(杂环基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH(环烷基)、-CONH(杂环基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(环烷基)、-NHC(O)(杂环基)、-NHC(O)(芳基)例如-NHC(O)(苯基)、-NHC(O)(杂芳基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(环烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(杂环基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(芳基)例如-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(杂芳基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)(环烷基)、-C(O)(杂环基)、-C(O)(芳基)例如-C(O)苯基、-C(O)(杂芳基)、-C(O)C1-C4卤代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-OC(O)(环烷基)、-OC(O)(杂环基)、-OC(O)(杂芳基)、-OC(O)(芳基)例如-OC(O)苯基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(环烷基)、-SO2(杂环基)、-SO2(芳基)例如-SO2(苯基)、-SO2(杂芳基)、-SO2(C1-C4卤代烷基)、-SO2NH2、-SO2NR’R”，其中R’和R”与它们所连接的N原子可形成杂环基、-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(环烷基)、-SO2NH(杂环基)、-SO2NH(芳基)如-SO2NH(苯基)、-SO2NH(杂芳基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(环烷基)、-NHSO2(杂环基)、-NHSO2(芳基)如-NHSO2(苯基)、-NHSO2(杂芳基)和-NHSO2(C1-C4卤代烷基)，其中各烷基、苯基、芳基、环烷基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个独立选自下述的基团所取代：-OH、卤素、环烷基、杂环基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、-OC1-C4烷基、C1-C4烷基-OH、-C1-C4烷基-O-C1-C4烷基、-OC1-C4卤代烷基、氰基、硝基、-NH2、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)和-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)。
本发明还提供一种包含本文所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明还提供一种抑制PI3K和/或mTOR活性的方法，包括将有效量本文所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与所述的酶接触。
本发明还提供一种对抑制PI3K和/或mTOR有响应的癌症进行治疗的方法，包括给需要治疗所述癌症的个体施用有效量的本文所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐。
本发明还提供本文所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐在生产用于抑制PI3K和/或mTOR活性的药物中的用途。
本发明还提供本文所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
本说明书中所用的下列单词、短语和符号一般具有如下给出的含义，除非另有说明。下列缩写和术语在整文中具有如下给出的含义：
不在两个字母或符号之间的短线“-”表示取代基连接的位点。例如，-CONH2通过碳原子连接。
术语“烷基”指的是含有1-18个碳原子(如1-12个碳原子，再例如1-6个碳原子)的直链或支链烷烃。例如，烷基包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。“低级烷基”是指含有1-6个碳原子(例如1-4个碳原子)的直链或支链烷烃。
术语“烷氧基”指的是通过一个氧桥连接的直链或支链烷基基团，例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、2-戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、3-甲基戊氧基等。烷氧基通常有通过氧桥连接的1-6个碳原子。“低级烷氧基”指的是直链或支链烷氧基，其中烷基部分包含1-4个碳原子。
术语“烯基”指的是含有一个或多个C=C双键和2-10个碳原子、例如2-6个碳原子的直链或支链烃基。例如，烯基包括但不限于乙烯基、2-丙烯基和2-丁烯基。
术语“炔基”指的是含有一个或多个C≡C叁键和2-10个碳原子、例如2-6个碳原子的直链或支链烃基。例如，炔基包括但不限于乙炔基、2-丙炔基和2-丁炔基。
术语“环烷基”指的是含有3-12个碳原子、例如3-8个碳原子的饱和或部分不饱和的环状烃基。环烷基的例子包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。环可以是饱和的，也可以含有一个或多个双键(即部分不饱和的)，但不是完全共轭的并且不是芳香性的。
“芳基”包括：
5-和6-元碳环芳香环，例如，苯基；
其中至少一个环是碳环并且是芳香环的双环体系，例如，萘、二氢化茚和1,2,3,4-四氢喹啉；和
其中至少一个环是碳环并且是芳香环的三环体系，例如，芴。
例如，芳基包括与一个含有零个或多个选自N、O和S的杂原子的5-7元环烷基或杂环稠合的5和6元碳环芳香环，条件是当碳环芳香环与杂环稠合时，连接点在碳环芳香环上，当碳环芳香环与环烷基稠合时，连接点在碳环芳香环或环烷基上。由取代的苯衍生物形成的并且在环原子上有自由价键的二价基团被称为取代的亚苯基。由命名以“基”结尾的单价多环烃基通过从具有自由价键的碳原子上除去一个氢原子衍生而来的二价基团，其命名就是将相应的单价基团称为“亚基”，例如，有两个连接点的萘基被称为亚萘基。但是，芳基不包含、也不通过任何方式与下面分别定义的杂环芳基重叠。因此，在此定义，如果一个或多个碳环芳香环与一个杂环芳香环稠合时，由此产生的环系统是杂芳基，而不是芳基。
术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘，所述的“卤代”包括氟代、氯代、溴代和碘代。
术语“杂芳基”是指：
5-7元芳香单环，其包含一个或多个，例如，1-4个，或在某些实施方案中，1-3个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子是碳原子；
8-12元的二环，其包含一个或多个，例如，1-4个，或在某些实施方案中，1-3个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子是碳原子，并且其中至少一个环是芳香环且至少一个杂原子存在于芳香环中；和
11-14元的三环，其包含一个或多个，例如，1-4个，或在某些实施方案中，1-3个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子是碳原子，并且其中至少一个环是芳香环且至少一个杂原子存在于芳香环中。
例如，杂芳基包括与一个5-7元环烷基环稠合的5-7元杂环芳香环。对于其中只有一个环含有一个或多个杂原子的稠合的二环杂芳基系统而言，连接点可以在杂芳环或在环烷基环上。
当杂芳基中的硫原子和氧原子总数超过1时，这些杂原子不能彼此相邻。在一些实施方案中，硫原子和氧原子在杂芳基中的总数不超过2。在一些实施方案中，硫原子和氧原子在杂芳基中的总数不超过1。
杂芳基的例子包括但不限于(连接点优先标记为1)：吡啶基(如2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、吡嗪基、2,4-嘧啶基、3,5-嘧啶基、2,4-咪唑基、异唑基、唑基、噻唑基、噻二唑基、四唑基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、吲哚基、二氢吲哚基、达嗪基、三唑基、喹啉基、吡唑基、吡咯并吡啶基(如1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)、吡唑并吡啶基(如1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)、苯并唑基(如苯并[d]唑-6-基)、苯并噻唑基(如苯并[d]噻唑-6-基)、吲唑基(如1H-吲唑-5-基)和5,6,7,8-四氢异喹啉。
由命名以“基”结尾的单价杂芳基通过从具有自由价键的原子上除去一个氢原子衍生而来的二价基团，其命名就是在相应的单价基团称为“亚基”，例如，有两个连接点的吡啶基被称为亚吡啶基。杂芳基不包括、也不与前面所定义的芳基重叠。
取代的杂芳基也包括被一个或多个氧(-O-)取代的环系，如N-氧化吡啶基。
“杂环”是指4-12元的饱和或部分不饱和的单环、二环或三环，所述环除含有1-3个独立地选自氧、硫和氮的杂原子外还包含至少2个碳原子。“杂环”也指与5、6和/或7元环烷基、碳芳环或杂芳环稠合的包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5-7元杂环，条件是当杂环与碳芳环或杂芳环稠合时连接点位于杂环，当杂环与环烷基稠合时连接点位于环烷基或杂环。“杂环”也指含一个或多个选自N、O和S的杂原子的脂肪族螺环，条件是连接点位于杂环上。这些环可以是饱和的或含有一个或多个双键(即部分不饱和的)。杂环可以被氧代基团取代。连接点可以是杂环中的碳原子或杂原子。杂环不是本文所定义的杂芳基。
适宜的杂环包括，例如(连接点优先标记为1)，1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、2,4-咪唑烷基、2,3-吡唑烷基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2,5-哌嗪基、吡喃基、2-吗啉基和3-吗啉基。取代的杂环基也包括被一个或多个氧代基团取代的环系，例如，N-氧哌啶基、N-氧吗啉基、1-氧代-1-硫代吗啉基和1,1-二氧代-1-硫代吗啉基。
“任选的”或“任选地”的意思是指后续描述的事件或情形可能会也可能不会发生，并且该描述包括事件或情形发生和不发生两种情况。例如，“任选取代的烷基”包括“烷基”和下文定义的“取代的烷基”。对于包含一个或多个取代基的任何基团，本领域技术人员均可理解，这些基团不包括不切实际的高位阻、合成上不可行的和/或内在不稳定的取代基。
本文所用的术语“取代的”是指在指定的原子或基团上的一个或多个氢原子被从指定范围选出的基团替换，前提是不会超出指定原子的正常价态。当取代基是氧代(即=O)时，原子上的两个氢被取代。只有当组合能得到稳定的化合物或有用的合成中间体时，取代基和/或变量的组合才是允许的。稳定的化合物或稳定的结构意味着化合物足够稳定，从而能够从反应混合物中分离出来，并在随后能够配制成具有实用价值的药剂。除非特别说明，取代基被命名进母核结构。例如，应当理解，当(环烷基)烷基被列为一个可能的取代基时，该取代基与母核结构的连接点在烷基上。
在一些实施方案中，“被一个或多个基团取代”是指在指定的原子或基团上的两个氢原子独立地被从指定范围的取代基中选出的两个基团替换。在一些实施方案中，“被一个或多个基团取代”是指在指定的原子或基团上的三个氢原子独立地被从指定范围的取代基中选出的三个基团替换。在一些实施方案中，“被一个或多个基团取代”是指在指定的原子或基团上的四个氢原子独立地被从指定范围的取代基中选出的四个基团替换。
本文所述的化合物包括但不限于：它们的光学异构体，如对映异构体和非对映异构体，对映异构体的混合物，包括外消旋体，非对映异构体的混合物以及其它混合物，只要本领域技术人员通过常规实验能够得到即可。在这些情况下，单一对映异构体或非对映异构体，例如具有光学活性的形式，可以通过不对称合成或由外消旋体或非对映异构体混合物拆分得到。对于外消旋体或非对映体混合物的拆分，可以用传统的方法分离，例如在拆分试剂的存在下结晶；也可以用色谱法分离，例如手性高压液相色谱(HPLC)柱。此外，这些化合物也包括含碳碳双键化合物的Z-和E-构型(或顺-和反-式)。当本文所述的化合物存在各种互变异构体时，术语“化合物”包括该化合物的所有互变异构形式，只要无需过多实验就能制得它们即可。这些化合物也包括其不同的晶体形式，包括多晶型和包合物，只要本领域技术人员通过常规实验就能制得它们即可。同样，术语“盐”也包括本领域技术人员通过常规实验能够合成的该化合物的盐的所有异构体、消旋体、其它混合物、Z-和E-型、互变异构体和晶体形式。
术语“药学上可接受的盐”包括但不限于与无机酸形成的盐，如盐酸盐、磷酸盐、二磷酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐、硝酸盐等；也包括与有机酸形成的盐，如苹果酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、2-羟乙磺酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐和链烷酸盐如醋酸盐、与HOOC-(CH2)n-COOH所成的盐(其中n=0-4)，等等。同样地，药学可接受的阳离子包括但不限于钠、钾、钙、铝、锂和铵。
此外，如果本文所述的化合物是以酸加成盐的形式得到的，其游离碱可以通过碱化该酸盐的溶液获得。相反地，如果产物是游离碱，则其加成盐、特别是药学上可接受的加成盐可以按照由碱性化合物制备酸加成盐的常规程序，通过将游离碱溶于合适的有机溶剂然后用酸处理溶液来得到。本领域技术人员无需过多实验即可识别各种可能用来制备无毒的药学上可接受的盐的合成方法。
“溶剂化物”如“水合物”，是化合物与溶剂相互作用形成的。术语“化合物”包括本领域技术人员能通过常规实验制得的化合物的溶剂化物(包括化合物的水合物)。同样，“盐”也包括本领域技术人员能通过常规实验制得的盐的溶剂化物(如盐的水合物)。合适的溶剂化物是药学上可接受的，例如水合物，包括本领域技术人员能通过常规实验制得的一水合物和半水合物。
“螯合物”是由化合物与金属离子在两个(或更多的)点配位形成的。术语“化合物”包括化合物的螯合物。同样，“盐”也包括盐的螯合物。
“非共价复合物”是由一种化合物与另外一种分子通过相互作用形成的，其中在化合物和分子之间不形成共价键。例如，复合物可以通过范德华力、氢键和静电相互作用(也称为离子键)形成。这些非共价复合物也包含在术语“化合物”中。
术语“氢键”是指电负性原子(也称为氢键受体)与一个连接在另一相对电负性原子上的氢原子(也称为氢键给体)作用的形式。合适的氢键给体和受体是药物化学中公知的(G.C.Pimentel和A.L.McClellan,TheHydrogenBond,Freeman,SanFrancisco,1960;R.Taylor和O.Kennard,"HydrogenBondGeometryinOrganicCrystals",AccountsofChemicalResearch,17,pp.320-326(1984))。
本文所使用的术语“基团”、“基”或“片段”为同义词，用于表示可连接于键或其它分子片段的功能基团或分子片段。
术语“活性成分”是指具有生物活性的化学物质。在一些方案中，“活性成分”是具有医药效用的化学物质。
“治疗”或“减轻”是指向患有癌症、具有癌症的症状、或有易患癌症体质的个体施用所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可以接受的盐，以治愈、治疗、缓和、抒解、改变、医治、改善、改良或影响癌症、癌症的症状或易患肿瘤的体质。
术语“有效量”指的是能有效“治疗”个体的疾病或不适的所述至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐的用量。如果是癌症时，有效量可在个体中引起前面定义“治疗”和“减轻”中所述的任何一种可见的或可检测的变化。例如，有效量能减少癌症或肿瘤细胞的数目；缩小肿瘤的大小；抑制或阻止肿瘤细胞向周边器官的侵入，例如，肿瘤蔓延入软组织或骨骼中；抑制或阻止肿瘤的转移；抑制或阻止肿瘤的生长；一定程度上减轻一种或多种与癌症相关的症状；减少发病率和死亡率；提高生活质量；或者是上述效果的结合。有效量可以是足以减轻对抑制PI3K/mTOR活性有响应的疾病的症状的用量。对于癌症治疗，体内效果可以通过例如评估存活期、疾病进展时间(TTP)、反应率(RR)、持续反应期和/或生活质量来测量。本领域技术人员可以理解，有效量可以随着给药的途径、赋形剂的用量以及与其它药物的合用而变化。
术语“抑制”是指降低一种生物活动或生物过程的基础活性。“抑制PI3K和/或mTOR活性”是指相对于在没有所述至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐时PI3K和/或mTOR的活性，由所述至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐直接或间接的作用导致的PI3K和/或mTOR活性降低。不受任何理论的束缚，活性的降低可以是所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与PI3K和/或mTOR直接的相互作用引起的，或者是由于所述至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐与其它一种或多种因子相互作用、该相互作用进而影响了PI3K和/或mTOR的活性引起的。例如，所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐可通过直接与PI3K和/或mTOR结合而降低其活性，也可通过直接或间接地影响其它因素来降低PI3K和/或mTOR活性，或通过直接或间接降低细胞或生物体中PI3K和/或mTOR的数量来降低PI3K和/或mTOR的活性。
本发明的一个或多个实施方案的细节在下文阐明。
本发明提供了结构式(1)的至少一种化合物:
和/或至少一种其药学上可接受的盐，其中
A1选自N或CH;
A4和A5独立地为N或CR2;
A2、A3和B环一起形成含有1-4个选自N、O和S的杂原子的五元杂芳基或五元杂环基，且所述五元杂芳基或五元杂环基任选地被一个或多个独立地选自下述的基团所取代：烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
条件是A2、A3和B环一起形成的五元环不是
表示单键或双键;
R1是杂芳基，其任选地被一个或多个独立地选自下述的基团所取代：烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
R和R2独立地选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
且以上所述的烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、卤代烷基、杂芳基和杂环基各自可以任选地被一个或多个基团取代，这些基团独立地选自任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、-OH、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；
Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg各自独立地选自氢、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基；
或Ra和Rc、和/或Rc和Rd、和/或Rc和Re、和/或Rc和Rf、和/或Rd和Re、和/或Rg和Rf与它们所连接的原子一起形成3-10元的任选取代的杂环；并且
n在每次出现时独立地为0、1或2;
其中上述各任选取代的基团可以是未取代的，或者被一个或多个，例如，一个、两个或三个独立选自下述的基团所取代：C1-C4烷基、环烷基、氧代、芳基、杂环、杂芳基、芳基-C1-C4烷基、杂芳基-C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、-OC1-C4烷基、-OC1-C4烷基苯基、-C1-C4烷基-OH、-C1-C4烷基-O-C1-C4烷基、-OC1-C4卤代烷基、卤素、-OH、-NH2、-C1-C4烷基-NH2、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-NH(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)(C1-C4烷基苯基)、-NH(C1-C4烷基苯基)、氰基、硝基、氧代、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-C(O)O环烷基、-C(O)O芳基、-C(O)O杂芳基、-C(O)O杂环基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONR’R”，其中R’和R”与它们所连接的N原子可形成杂环、-CON(环烷基)(环烷基)、-CON(杂环基)(杂环基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH(环烷基)、-CONH(杂环基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)、-NHC(O)(环烷基)、-NHC(O)(杂环基)、-NHC(O)(芳基)例如-NHC(O)(苯基)、-NHC(O)(杂芳基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(环烷基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(杂环基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(芳基)例如-N(C1-C4烷基)C(O)(苯基)、-N(C1-C4烷基)C(O)(杂芳基)、-C(O)C1-C4烷基、-C(O)(环烷基)、-C(O)(杂环基)、-C(O)(芳基)例如-C(O)苯基、-C(O)(杂芳基)、-C(O)C1-C4卤代烷基、-OC(O)C1-C4烷基、-OC(O)(环烷基)、-OC(O)(杂环基)、-OC(O)(杂芳基)、-OC(O)(芳基)例如-OC(O)苯基、-SO2(C1-C4烷基)、-SO2(环烷基)、-SO2(杂环基)、-SO2(芳基)例如-SO2(苯基)、-SO2(杂芳基)、-SO2(C1-C4卤代烷基)、-SO2NH2、-SO2NR’R”，其中R’和R”与它们所连接的N原子可形成杂环基，-SO2NH(C1-C4烷基)、-SO2NH(环烷基)、-SO2NH(杂环基)、-SO2NH(芳基)如-SO2NH(苯基)、-SO2NH(杂芳基)、-NHSO2(C1-C4烷基)、-NHSO2(环烷基)、-NHSO2(杂环基)、-NHSO2(芳基)如-NHSO2(苯基)、-NHSO2(杂芳基)和-NHSO2(C1-C4卤代烷基)，其中各烷基、苯基、芳基、环烷基、杂环基和杂芳基任选地被一个或多个独立选自下述的基团所取代：-OH、卤素、环烷基、杂环基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基-、-OC1-C4烷基、C1-C4烷基-OH、-C1-C4烷基-O-C1-C4烷基、-OC1-C4卤代烷基、氰基、硝基、-NH2、-CO2H、-C(O)OC1-C4烷基、-CON(C1-C4烷基)(C1-C4烷基)、-CONH(C1-C4烷基)、-CONH2、-NHC(O)(C1-C4烷基)和-N(C1-C4烷基)C(O)(C1-C4烷基)。
在一些实施方案中,A2和A3以及B环一起形成含有1-3个选自N、O和/或S的杂原子的五元杂芳基或杂环基。在一些实施方案中，A2和A3以及B环一起形成含有1-3个氮原子的五元杂芳基或杂环基。
在一些实施方案中，A2和A3以及B环一起形成选自下列所示的结构(2)-(6)
其中,
t为1、2或3;且
R3可独立地选自H、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C6-C14芳基、C3-C9环烷基、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、卤代烷基、杂芳基和杂环基;
并且所述的烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环基各自可以任选地被一个或多个基团取代，这些基团独立地选自任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、-OH、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂环基，并且Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg如上所定义。
条件是当A2和A3与B环一起形成结构式(4)的结构时，A4不是CR2，其中R2如上所定义。
例如，R3独立地选自H、-OH、-CN、-NO2、卤素、C1-C6烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C6-C14芳基、C3-C9环烷基、杂芳基和杂环，其中所述的烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环各自可以任选地被一个或多个独立地选自下述的基团取代：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、-OH、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基;
在一些实施方案中，A2和A3与B环一起形成选自下列结构式(2)-(5)所示的结构，其中R3和t如上所定义：
在一些实施方案中，A2和A3与B环一起形成选自下列结构式(3)-(4)所示的结构，其中R3和t如上所定义：
在一些实施方案中，A4为N或CH。
在一些实施方案中，A5为N或CH。
在一些实施方案中，A1、A4和A5为CH。
在一些实施方案中，A1和A5为CH，A4为N。
在一些实施方案中，R1为选自下述结构的杂芳基：
例如，R1为选自下列的杂芳基：
它们均可任选地被一个或多个独立地选自下列的基团所取代：烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、卤代烷基、杂芳基、杂环基、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-OC(O)Ra、-OC(O)NRcRd、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd和卤素，且所述的烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、卤代烷基、杂芳基和杂环基各自任选地被一个或多个独立地选自下述的基团取代：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、-OH、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、-ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基;
其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg各自独立地选自氢、烷基、芳基、环烷基、卤代烷基、杂芳基和杂环基，并且Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg中的各个烷基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环基可任选地被一个或多个、例如一个、两个或三个独立地选自卤素和烷基的取代基所取代。
在一些实施方案中，R1为
其任选地被一个或多个独立地选自下述的基团取代：
-烷基、烯基和炔基，它们均可任选地被独立地选自下述的基团所取代：任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的芳基、任选取代的环烷基、-OH、氧代、-C(O)Ra、-C(O)ORb、-CN、-C(O)NRcRd、-NRcRd、-NRcC(O)Ra、-NRcS(O)nRe、-NRcS(O)nNRfRg、-NRcC(O)ORb、-NRcC(O)NRdRe、-NO2、ORb、-S(O)nRe、-S(O)nNRcRd、卤素、任选取代的卤代烷基、任选取代的杂芳基和任选取代的杂环基;
-C(O)NRcRd;
-NRcRd;
-ORb;
-卤素;
-氰基;
-NRcS(O)nRe,
其中Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg各自独立地选自氢、烷基、芳基、环烷基、卤代烷基、杂芳基和杂环；例如，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf和Rg各自独立地选自H、C1-C6烷基、苯基、C3-C6环烷基、C1-C3卤代烷基、杂芳基和杂环基，其中的烷基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环基均可任选地被一个或多个、例如一个、两个或三个独立地选自卤素和烷基的基团所取代。
本发明还提供了选自化合物1-184的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐。
本发明所述的化合物和/或其药学上可接受的盐均可以从商业上可获得的原料出发，通过本领域已知的方法，结合本发明所公开的内容合成得到。下述的反应路线显示了本文所公开的化合物的一些制备方法。
反应路线I
反应路线II
所得的化合物可以进一步通过对外周位置进行修饰而获得本发明的其它目标化合物。所述的合成化学转化记载于例如R.Larock,ComprehensiveOrganicTransformations,VCHPublishers(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,第3版,JohnWileyandSons(1999)；L.Fieser和M.Fieser,FieserandFieser'sReagentsforOrganicSynthesis,JohnWileyandSons(1994)；以及L.Paquette(编),EncyclopediaofReagentsforOrganicSynthesis,JohnWileyandSons(1995)及其后续的版本中。
在使用前，本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐可以通过柱色谱、高效液相色谱、结晶或其它适当的方法进行纯化。
本发明还提供一种组合物，其包含本发明所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体。
包含本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐的组合物可以以各种已知的方式，例如口服、胃肠外、吸入喷雾或是植入式贮器等方式给药。这里用到的术语“胃肠外”包括皮下、皮内、静脉内、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、脊椎内、患处内以及颅内注射或输注技术。
口服用的组合物可以是任何一种可接受的口服剂型，包括但不限于片剂、胶囊、乳剂、以及水性混悬液、分散液和溶液。常用的片剂载体包括乳糖和玉米淀粉。片剂中也常加入如硬脂酸镁之类的润滑剂。以胶囊形式口服时，有用的稀释剂包括乳糖以及干燥的玉米淀粉。当水性混悬液或乳液通过口服给药时，可用乳化剂或助悬剂使活性成分悬浮或溶解于油相中。若有需要，还可添加某些甜味剂、矫味剂或色素。
无菌可注射组合物(如水性或油性混悬液)可按照本领域已知的技术，使用适合的分散剂或润湿剂(如：Tween80)以及助悬剂来完成制备。无菌可注射组合物也可制备成在无毒的可用于胃肠外应用的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如1,3-丁二醇溶液。在可药用的载体和溶剂中，可使用的是甘露糖醇、水、林格氏液以及生理盐水。此外，无菌的固定油，如合成的单或二甘油酯，通常用作溶剂或悬浮介质。脂肪酸，例如油酸以及其甘油酯衍生物，以及天然的药学可接受的油脂，例如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚乙氧基化的形态，常用于制备可注射溶液。这些油溶液或悬浮液亦可含有长链的醇类稀释剂或分散剂、或羧甲基纤维素或类似的分散剂。
吸入组合物可以使用药物制剂领域众所周知的技术制备，也可制成盐水溶液，采用苯甲醇或其它适宜的防腐剂，采用吸收促进剂提高生物利用度，采用碳氟化合物和/或其它本领域已知的增溶剂或分散剂。
局部组合物可配制为油脂、霜剂、乳液、软膏等形式。适于该组合物的载体包括植物或矿物油、白凡士林(白软石蜡)、支链脂肪或油、动物脂肪和高分子量的醇类(碳数大于12)。在一些实施方案中，药学上可接受的载体可以为活性成分能溶解于其中者。此外，除添加增加颜色或香味的成分外，亦可依需要加入乳化剂、稳定剂、湿润剂以及抗氧化剂。此外，经皮渗透促进剂也可添加于这些局部制剂中。这类促进剂的例子可见于美国专利3,989,816和4,444,762。
霜剂可由矿物油、自乳化蜂蜡和水的混合物配置，其中，将溶解于少量油脂例如杏仁油的活性成分掺杂于该混合物中。此类乳液的一个例子包括约40份的水、约20份的蜂蜡、约40份的矿物油以及约1份的杏仁油。软膏可通过将活性成分在植物油例如杏仁油中的溶液与温热的软石蜡混合并将混合物冷却而制备。这类软膏的一个例子包括约30%重量百分比的杏仁油和约70%重量百分比的白软石蜡。
“药学上可接受的载体”指的是能与组合物中的活性成分相容(在一些实施方案中，能够稳定活性成分)并且不会对欲治疗的个体有危害的载体。例如，环糊精(能与本文所述的至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐形成特定的、溶解性更强的复合物)之类的增溶剂，可用作药物赋形剂来传送活性成分。其它载体的例子包括胶态二氧化硅、硬脂酸镁、纤维素、十二烷基硫酸钠、以及色素如D&C黄色10号(D&CYellow#10)。
合适的体外试验可用于早期评价本文所述至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐抑制PI3K和/或mTOR效力。可进一步通过体内试验检测本文所述至少一种化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐用于治疗癌症的效果。例如，可将所述化合物和/或其药学上可接受的盐施用给患有癌症的动物(如小鼠模型)，然后检测其治疗效果。一个或多个此类测试所获得的阳性结果足以扩充科学知识的宝库，且因此也足以说明被测试的化合物和/或盐的实用性。根据上述结果，还可以确定其对动物(例如人)的适合的剂量范围和给药途径。
本发明也提供一种抑制PI3K和/或mTOR活性的方法。该方法包括将抑制PI3K和/或mTOR活性有效量的至少一种所述的化合物和/或至少一种药学上可接受的盐与酶接触。
本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐可用于在例如患有癌症的个体中获得一种有益的治疗或预防效果。这里所用的术语“癌症”指的是细胞紊乱，其特征为不可控或不可调的细胞增殖、细胞分化的减少、不恰当的侵入周围组织的能力、和/或在异常部位建立新的生长的能力。术语“癌症”包括但不限于实体肿瘤和血液肿瘤。术语“癌症”包括皮肤癌、组织癌、器官癌、骨癌、软骨癌、血液癌和血管癌。术语“癌症”也包括原发性和转移性的癌症。
实体肿瘤的非限定性例子包括胰腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、乳腺癌(包括转移性乳腺癌)、前列腺癌(包括雄激素依赖和非雄激素依赖的前列腺癌)、肾癌(包括如转移性肾细胞癌)、肝细胞癌、肺癌(包括如非小细胞肺癌(NSCLC)、细支气管肺泡癌(BAC)和肺腺癌)、卵巢癌(包括如渐进上皮癌或原发性腹膜癌)、宫颈癌、胃癌、食道癌、头颈部癌(包括如头部和颈部的鳞状细胞癌)、皮肤癌(包括如恶性黑色素瘤)、神经内分泌癌(包括转移性神经内分泌肿瘤)、脑瘤(包括如神经胶质瘤、间变性少突神经胶质瘤、成人多形性胶质母细胞癌和成人间变性星型细胞瘤)、骨癌、软组织肉瘤和甲状腺癌。例如，这些实体瘤包括胰腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、乳腺癌和卵巢癌。
血液恶性肿瘤的非限定性例子包括急性骨髓性白血病(AML)；慢性骨髓性白血病(CML)，包括不断发展的CML和急变的CML(CML-BP)；急性淋巴细胞白血病(ALL)；慢性淋巴细胞白血病(CLL)；霍奇金氏病(HD)；非霍奇金淋巴瘤(NHL)，包括滤泡型淋巴瘤和套细胞淋巴瘤；B-细胞淋巴瘤；T-细胞淋巴瘤；多发性骨髓瘤(MM)；瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症；骨髓增生异常综合症(MDS)，包括难治性贫血(RA)、伴有环状铁幼粒细胞增多的难治性贫血(RARS)、伴有原始细胞增多的难治性贫血(RAEB)和转变中的伴有原始细胞增多的难治性贫血(RAEB-T)；以及骨髓增生综合症。
在一些实施方案中，能够治疗的癌症的例子包括但不限于肺癌、头颈部癌、结肠直肠癌、胰腺癌、结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、胃癌、肾癌、肝癌、脑癌、骨癌和白血病。
在一些实施方案中，将本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐与其它治疗剂联合给药。在一些实施方案中，其它治疗剂是患有待治疗的疾病或症状的患者通常施用的治疗剂。本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐可与其它的治疗剂以单一剂量形式给药，或以分开的剂量形式给药。当以分开的剂量形式给药时，其它的治疗剂可以在本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐给药之前、同时或之后给药。
在一些实施方案中，本文所述的至少一种化合物和/或至少一种药学上可接受的盐与其它抗肿瘤剂联合用药。这里所用的术语“抗肿瘤剂”指得是任何一种施用于癌症患者以治疗癌症的治疗剂。抗肿瘤剂的非限定性例子包括：放疗、免疫疗法、DNA损伤的化疗剂和干扰细胞复制的化疗剂。
DNA损伤的化疗剂的非限定性例子包括，拓扑异构酶I抑制剂(例如，伊立替康、拓扑替康和喜树碱及其类似物或代谢物，以及阿霉素)；拓扑异构酶II抑制剂(例如，依托泊苷、替尼泊苷和道诺霉素)；烷化剂(例如，美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、塞替哌、异环磷酰胺、亚硝基脲氮芥、洛莫司汀、司莫司汀、链脲菌素、氨烯咪胺、甲氨蝶呤、丝裂霉素C和环磷酰胺)；DNA嵌合剂(例如，顺铂、奥沙利铂和卡铂)；DNA嵌入剂和自由基生成剂如博来霉素；以及核苷模拟剂(例如5-氟尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨、氟达拉滨、阿糖胞苷、巯嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁和羟基脲。
干扰细胞复制的化疗剂包括：紫杉醇、紫杉萜及其相关类似物；长春新碱、长春碱及有关类似物；沙立度胺及有关类似物(例如CC-5013和CC-4047)；蛋白酪氨酸激酶抑制剂(例如，甲磺酸伊马替尼和吉非替尼)；蛋白酶抑制剂(例如，硼替佐米)；NF-κB抑制剂，包括IκB激酶抑制剂；与癌症中过表达的蛋白结合从而下调细胞复制的抗体(如曲妥单抗、利妥昔单抗、西妥昔单抗和贝伐单抗)；蛋白或酶抑制剂，已知这些蛋白或酶在癌症中会被调高、过度表达或激活，蛋白或酶的抑制能够抑制细胞复制。
下述实施例应确定为纯粹地作为示例，而不应当是以任何方式对本发明的限制。用到的数据(例如，量、温度等)会力争保证其准确性，但是仍会有一些实验误差和偏移。除非另有说明，份数是重量份数，温度为摄氏温度，压力为或接近大气压。所有的质谱(MS)数据运用安捷伦(Agilent)6120和/或1100测定。氢谱(1HNMR)运用瓦里安(Varian)400MHz核磁共振仪测定，使用氘代氯仿(CDCl3)或氘代DMSO(DMSO-d6)作为溶剂，TMS为内标。化学位移(δ)以向内标TMS低场位移的ppm表示，偶合常数J值以Hz单位。本发明所用的所有试剂(除了中间体)均为商业渠道获得。所有化合物名称(除了试剂)均由软件Chemdraw10产生。
以下实施例中，使用如下缩写:
AcOH乙酸
DCM二氯甲烷
DMFN,N-二甲基甲酰胺
DMF-DMAN,N-二甲基甲酰胺二甲缩醛
DMSO二甲亚砜
DTT二硫苏糖醇
EtOAc乙酸乙酯
h小时
ISCO快速柱色谱
mL毫升
min分钟
Py吡啶
THF四氢呋喃
HATU2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟
磷酸盐
DIPEAN,N-二异丙基乙基胺
EA乙酸乙酯
PE石油醚
Pd(dppf)Cl2[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(II)
PTLC制备型薄层色谱
HEPES2-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸
EGTA乙二醇二乙醚二胺四乙酸
CHAPS3-[(3-胆胺丙基)-二甲胺基]-1-丙磺酸
TEA三乙胺
TLC薄层色谱
中间体1
2-(5-氨基吡啶-2-基)-2-甲基丙腈
室温下，将K2CO3(17.4g,126mmol)和2-氰基乙酸叔丁基酯(10.7g,76mmol)加入2-氯-5-硝基吡啶(10g,63mmol)的THF(150mL)溶液中，反应混合液加热回流并搅拌过夜。滤去固体，所得滤液浓缩得到中间体I-1b(16.6g)。m/z208(M+H)+。
将粗产物2-氰基-2-(5-硝基吡啶-2-基)乙酸叔丁基酯I-1b(12g,47mmol)溶于100毫升HCl/EtOH(v/v1:5)中，于80°C搅拌4小时，然后浓缩，加水稀释。混合液用EtOAc(4x40mL)萃取。萃取液合并，浓缩，将残余物经硅胶柱色谱(洗脱剂：PE:EtOAc=3:1)纯化得7.7克固体状2-(5-硝基吡啶-2-基)乙腈(I-1c)(收率：42.0%)。
室温下将碘甲烷(7.5mL,120mmol)滴入2-(5-硝基吡啶-2-基)乙腈I-1c(8g,46mmol)和K2CO3(18g,110mmol)的CH3CN(200mL)混合液中，升温至40°C，搅拌反应过夜。然后过滤，滤液浓缩，残余物经硅胶柱色谱(PE:EtOAc=5:1)纯化，得到2-甲基-2-(5-硝基吡啶-2-基)丙腈(I-1d)(4.2g,收率48%)。m/z192(M+H)+。
将2-甲基-2-(5-硝基吡啶-2-基)丙腈I-1d(2g,10.4mmol)和SnCl2·2H2O(9.3g,41.6mmol)的EtOAc(10mL)溶液回流搅拌反应4小时。冷却至室温后，加入2MNaOH(80mL)调节pH=8～9，滤去固体，所得滤液用乙酸乙酯萃取(3x40mL)，合并后的有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩得2-(5-氨基吡啶-2-基)-2-甲基丙腈(I-1)(1.7g,收率65.3%)。
中间体2
1,1,1-三氟-N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-基)甲磺酰胺
将2-甲氧基-3-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶(300mg,1.1mmol)和阮内镍(10mg)的甲醇(10mL)混合液在氢气下搅拌2小时。过滤，将滤液浓缩得到白色固体状标题化合物(261mg，收率95%)。
在-20°C下，将三氟甲磺酸酐(147mg,0.52mmol)慢慢滴加至2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-胺(100mg,0.4mmol)和2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶(115mg,0.56mmol)的DCM(5mL)溶液中，并在此温度下继续搅拌2小时。真空除去溶剂，得到的残余物(141mg，收率92.0%)不经进一步纯化直接用于下一步骤。
中间体3
6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-醇
将6-氯-3-氨基吡啶(5.0g,38.8mmol)和5-(甲氧基亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环己烷-4,6-二酮(7.2g,38.8mmol)的异丙醇(60mL)混合液回流搅拌反应2小时。蒸干溶剂得到10.0g固体状5-((6-氯吡啶-3-基氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环己烷-4,6-二酮(收率91%)，m/z283(M+H)+。
向加热至200°C的DowthermA(200mL)中加入5-((6-氯吡啶-3-基氨基)亚甲基)-2,2-二甲基-1,3-二氧杂环己烷-4,6-二酮(3.5g,12.4mmol)然后继续搅拌5分钟。冷却至室温后，向反应液中加石油醚，过滤收集沉淀，真空干燥后得到灰白色固体状产物6-氯-1,5-二氮杂萘-4-醇，收率42%(0.94g)。m/z183(M+H)+。
将6-氯-1,5-二氮杂萘-4-醇(1.45g,8mmol)加入到冰冷却的浓硫酸(15mL)中，接着慢慢于0°C下加入KNO3(1.62g,16mmol)。混合液加热至100°C搅拌反应一小时后，倒入冰水中，收集沉淀，真空干燥得到固体状6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-醇，收率90%(1.97g)。
中间体4
2,4-二氟-N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-基)苯磺酰胺
将5-溴-2甲氧基-3-硝基吡啶(5g,21.5mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼戊环)(6.6g,25.8mmol)、PdCl2(dppf)-CH2Cl2(500mg)和乙酸钾(6.3g,64.5mmol)的无水1,4-二氧六环(200mL)混合液回流搅拌反应2小时。浓缩，粗产物经硅胶柱色谱纯化(PE:EtOAc=10:1)得到5克2-甲氧基-3-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶(收率81%)。m/z281(M+H)+。
将阮内镍(50mg)加入2-甲氧基-3-硝基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶(500mg,1.79mmol)的甲醇(50mL)溶液中。将反应混合物在氢气下室温搅拌反应两小时。滤去固体，蒸除溶剂得到2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-胺(400mg，收率89%)。m/z251(M+H)+。
将2,4-二氟苯磺酰氯(407mg,1.9mmol)慢慢加入2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-胺(400mg,1.6mmol)的吡啶(5mL)溶液中，将反应混合物在室温下搅拌反应过夜，真空蒸除溶剂，残余物用盐水(5mL)处理并用EtOAc(3×10mL)萃取。合并有机相，真空蒸发，残余物经柱色谱(PE:EtOAc=5:1)纯化得到400毫克白色固体状产物2,4-二氟-N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-基)苯磺酰胺(收率59%)。m/z427(M+H)+。
中间体5
8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉
将溴(0.895mL,15.5mmol)加入喹喔啉-2-醇(1.5g,10.3mmol)的乙酸(15mL)溶液中，混合物室温搅拌反应6小时，收集沉淀。沉淀用乙醚洗涤得到固体状7-溴-喹喔啉-2-醇(2g,收率90%)。
向7-溴-喹喔啉-2-醇(2g,8.88mmol)的三氯氧磷(7mL)混悬液中滴加2滴DMF。混合物升温至100°C，反应3小时。冷却至室温，真空除去三氯氧磷，残余物溶解于EtOAc中并在搅拌下滴加至冰水中。将混合物用乙酸乙酯萃取三次，将合并的有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤。将有机相浓缩得到固体状的7-溴-2-氯-喹喔啉(2g,收率93%)。
将水合肼(85%,4.5mL,32.8mmol)加入7-溴-2-氯-喹喔啉(2g,8.2mmol)的乙醇(20mL)溶液中，混合液在78°C下反应2小时。冷却至室温，过滤收集沉淀，得到白色固体状7-溴-2-肼基-喹喔啉(1.7g,收率87%)。
将7-溴-2-肼基-喹喔啉(200mg,0.83mmol)的原甲酸三乙酯(3mL)溶液升温至100°C，反应4小时。冷却至室温，混合液用乙醚稀释，过滤收集沉淀，真空干燥得到黄色固体状标题产物8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(180mg,收率87%)。m/z251(M+H)+。
中间体6
8-溴-1-环丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉
向7-溴-2-肼基喹喔啉(200mg,0.83mmol)的DMF(3mL)溶液中加入HATU(380mg,1mmol)、DIPEA(0.205mL,1mmol)和环丙烷甲酸(71mg,0.83mmol)。将混合物在室温搅拌反应5小时，然后用乙酸乙酯稀释。将有机层水洗三次，然后浓缩得到黄色固体状N'-(7-溴喹喔啉-2-基)环丙基碳酰肼，该固体直接用于下步反应。m/z309(M+H)+。
将上述粗产物N'-(7-溴喹喔啉-2-基)环丙基碳酰肼溶于乙酸(5mL)中，在100°C下反应过夜。真空除去溶剂，残余物水洗，真空干燥得到黄色固体状标题产物8-溴-1-环丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(100mg,总收率42%)。m/z291(M+H)+。
中间体7
8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1(2H)-酮
将三乙胺(0.175mL,1.2mmol)加入7-溴-2-肼基喹喔啉(200mg,0.83mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，然后在氮气下，于0°C及搅拌下滴加双光气(0.055mL,0.46mmol)的二氯甲烷溶液。在室温下搅拌反应5小时后，真空除去溶剂，残余物用水洗涤，真空干燥得到黄色固体状标题产物8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1(2H)-酮(180mg,收率82%)。m/z265(M+H)+。
中间体8
5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺
将5-溴-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(4g,16.60mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼戊环)(5.90g,23.24mmol)、KOAc(4.07g,41.5mmol)和PdCl2(dppf).CH2Cl2(0.678g,0.830mmol)的二氧六环(60mL)橙色混悬液在氮气下加热至110°C反应10小时。真空浓缩除去溶剂，粗产物经硅胶柱色谱纯化(洗脱剂PE/EtOAc)得到淡黄色固体状的纯净产物(4.5g,收率94%)。MS(m/z):289(M+H)+。
实施例1:化合物1-20的合成
化合物1
(S)-1-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮
将三氯氧磷(2.7mL,28.8mmol)的无水DMF(10mL)溶液在3分钟内加至6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-醇(5g,22.1mmol)的DMF(15mL)混悬液中，混合物室温搅拌，反应过夜。把反应液倒入碎冰中，过滤收集沉淀，水洗，真空干燥，得到黄色固体状2,8-二氯-7-硝基-1,5-二氮杂萘(4g,收率74.0%)。MS(m/z):244(M+H)+。
将2,8-二氯-7-硝基-1,5-二氮杂萘(4g,16.4mmol)、4-氨基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g,19.7mmol)和三乙胺(3.5mL)的DMF(15mL)混合液在室温搅拌下反应过夜。反应液倒入250毫升水中，过滤收集沉淀，水洗，真空干燥得到黄色固体状4-(6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.54g,收率97.8%)。MS(m/z):408(M+H)+。粗产物直接用于下步反应。
将SnCl2·2H2O(18g,78.8mmol)加入4-(6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.43g,15.7mmol)的乙酸乙酯(250mL)溶液中，将混合物室温搅拌3小时，然后用饱和碳酸氢钠溶液调节pH=8。滤去固体，滤液浓缩，将粗产物经硅胶柱色谱纯化(用EtOAc:PE作为洗脱剂)得到黄色固体状4-(3-氨基-6-氯-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.1g,收率85.6%)。MS(m/z):378(M+H)+。
将NaNO2(460mg,6.6mmol)在0°C下加入4-(3-氨基-6-氯-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.5g,6.6mmol)的乙酸(8mL)溶液中。将混合物在室温下搅拌2小时后，加入饱和碳酸氢钠溶液和冰水。混合液用二氯甲烷提取。有机相经无水硫酸钠干燥，浓缩。将粗产物经硅胶柱色谱(洗脱剂：EtOAc:PE)纯化得到黄色固体状4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.9g,收率73.8%)。MS(m/z):388.8(M+H)+。
向4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(4g)的二氯甲烷-甲醇溶液中加入3mL浓盐酸。将形成的溶液浓缩得到黄色固体状8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘盐酸盐(3.81g,收率100%)。MS(m/z):289(M+H)+。
将乙酸(S)-1-氯-1-氧代丙-2-基酯(1.4g,9.23mmol)和Et3N(2.2mL)加入8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘盐酸盐(1g,3.08mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，混合液室温搅拌，反应2小时后，加水(10mL)淬灭。然后用CH2Cl2(2x20mL)萃取。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，然后真空浓缩得到乙酸(S)-1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基酯(1.2g)。MS(m/z):403(M+H)+。
将LiOH(650mg,14.9mmol)滴加至乙酸(S)-1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基酯(1.2g,2.97mmol)的THF(30mL)和MeOH(30mL)混合液中，室温搅拌，反应3小时。真空浓缩，将残余物用水稀释并用2N盐酸调节pH至7。所得混合物减压浓缩，过滤收集沉淀，水洗，真空干燥得到黄色固体状(S)-1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮(918mg,收率85.4%)。MS(m/z):361(M+H)+。该粗产物不经进一步纯化直接用于下一步反应。
将5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(120mg,0.42mmol)、Pd(dppf)Cl2(20mg,0.02mmol)和Na2CO3(100mg,0.84mmol)加入(S)-1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮(150mg,0.42mmol)的二氧六环(20mL)与水(2mL)的混合溶液中，通入氮气，在100°C下搅拌反应过夜。将得到的混合物经硅胶柱色谱纯化(用MeOH/H2O作为洗脱剂)，得到黄色固体状的化合物1(59.1mg)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),9.20(s,1H),8.67(s,1H),8.64(d,J=8.8Hz,1H),8.54(d,J=8.8Hz,1H),7.09(s,2H),6.23–6.02(m,1H),5.17–5.01(m,1H),4.75-4.50(m,2H),4.46-4.27(m,1H),3.00-2.79(m,1H),2.39-1.90(m,3H),1.36-1.16(m,6H)。MS(m/z):487(M+H)+。
以下化合物2-20按照关于化合物1所述的方法，采用相应的中间体和硼酸或其酯在本领域技术人员可以确定的适宜条件下制备。
实施例2:化合物21-29的合成
化合物21
(R)-1-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮
将(R)-2-羟基丙酸(540mg,1.85mmol)、HATU(850mg,2.21mmol)和DIEA(0.8mL,3.70mmol)加入8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘盐酸盐(600mg,1.85mmol)的DMF(15mL)溶液中。将混合物室温搅拌，反应过夜。经HPLC-MS检测，反应不完全，因此补加3当量的HATU和2当量的DIEA。将混合物继续搅拌30分钟，然后加水稀释。混合液用乙酸乙酯萃取两次，将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗产物。经硅胶柱色谱纯化(用EtOAc:PE作为洗脱剂)得到黄色固体状(R)-1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮(136mg,收率20.4%)。MS(m/z):361(M+H)+。
合成化合物21的下一步骤与合成化合物1所用的相应步骤相似。化合物21:固体，31.0mg。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.59(s,1H),9.19(s,1H),8.66(s,1H),8.63(d,J=8.9Hz,1H),8.53(d,J=8.9Hz,1H),7.07(s,2H),6.09(m,1H),5.02(m,1H),4.74-4.27(m,2H),2.87(m,1H),2.44-1.90(m,3H),1.27-1.21(m,4H)。MS(m/z):487(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯，采用与合成化合物21类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适宜条件下合成以下化合物22-29。
实施例3:化合物30-42的合成
化合物30
1-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮:
将8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(200mg,0.69mmol)、异丁酸(67mg,0.76mmol)、HATU(315mg,0.83mmol)和DIEA(133mg,1.04mmol)的DMF(5mL)混合液室温搅拌过夜。加入10毫升水，收集沉淀，真空干燥得固体状1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(200mg)。
将1-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(60mg,0.17mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(53mg,0.18mmol)、碳酸钾(70mg,0.51mmol)、Pd(dppf)Cl2(6mg)的二氧六环/H2O(3:1,4mL)混合液在160°C下于微波反应器中反应0.5小时。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO(洗脱剂：MeOH/H2O=20%-80%)纯化，得到白色固体状1-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-2-甲基丙-1-酮(46mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.61(s,1H),9.21(d,J=2.1Hz,1H),8.66(dd,J=12.5,5.5Hz,2H),8.55(d,J=8.9Hz,1H),7.10(s,2H),6.17-6.01(m,1H),4.78-4.59(m,1H),4.35-4.26(m,1H),3.40-3.37(m,2H),3.05-2.97(m,1H),2.93-2.82(m,1H),2.64-2.52(m,1H),2.39-2.21(m,1H),2.16-1.96(m,1H),1.07(s,6H)。MS(m/z):485(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯，采用与合成化合物30类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适宜条件下合成以下化合物31-42。
实施例4:化合物43-47的合成
化合物43
2-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺
将8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(100mg,0.35mmol)、2-氯-N,N-二甲基乙酰胺(46mg,0.38mmol)和碳酸钾(97mg,1.04mmol)的DMF(5mL)混合液室温搅拌，反应过夜。除去溶剂，将残余物用乙酸乙酯萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品2-(4-(8-氯-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺，该产物不经进一步纯化直接用于下一步反应。将上述产物5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(109mg,0.38mmol)、碳酸钾(145mg,1.05mmol)和Pd(dppf)Cl2(10mg)的二氧六环/H2O(3:1,4mL)混合液在微波反应器中于160°C搅拌反应0.5小时。除去溶剂，残余物经色谱纯化得灰黄色固体状化合物43(50mg)。1HNMR(400MHz,dmso-d6)δ9.60(s,1H),9.20(d,J=2.0Hz,1H),8.66(dd,J=16.5,5.4Hz,2H),8.54(d,J=8.9Hz,1H),7.12(s,2H),5.97-5.77(m,1H),3.40(s,2H),3.29-3.14(m,4H),3.10(s,3H),2.86(s,3H),2.44-2.35(m,4H)。MS(m/z):500(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯,采用与合成化合物43类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适宜条件下合成以下化合物44-47。
实施例5:化合物48的合成
化合物48
5-(1-(1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-8-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺
在氮气下，将8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(130mg,0.450mmol)、4-(溴甲基)四氢-2H-吡喃(97mg,0.540mmol)和碳酸钾(124mg,0.900mmol)在乙腈(15mL)中的白色混悬液加热回流4小时。冷却至室温，混合物加EtOAc20mL稀释。然后将混合物用布氏漏斗抽滤，收集有机相，浓缩。得到的粗产物(35mg)不经一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):387(M+H)+。
在氮气下，将8-氯-1-(1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌啶-4-基)-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(35mg,0.090mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(26.1mg,0.090mmol)、碳酸钠(19.18mg,0.181mmol)和PdCl2(dppf).CH2Cl2(3.69mg,4.52μmol)在二氧六环(20mL)和H2O(2mL)的混合液中的橙色混悬液搅拌10分钟，然后加热升温至120°C反应2小时。真空浓缩后，将残余物经快速柱色谱ISCO纯化(12g硅胶，PE/EtOAc)，得到灰黄色粉末状产物(10mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.53(s,1H),9.15(d,J=2.1,1H),8.65(s,1H),8.61(d,J=8.9,1H),8.51(d,J=8.9,1H),7.07(s,2H),5.99-5.80(m,1H),3.91-3.85(m,4H),3.22-3.08(m,4H),2.41-2.15(m,10H),1.73-1.58(m,2H)。MS(m/z):513(M+H)+。
实施例6:化合物49-78的合成
化合物49
2-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1-基)苯基)-2-甲基丙腈
将HATU(2.4g,0.063mol)和DIEA(1.2g,0.095mol)加入7-溴-2-肼基喹喔啉(1.5g,0.063mol)和4-(2-氰基丙-2-基)苯甲酸(1.1g,0.063mol)的DMF(5mL)溶液中。将反应混合物室温搅拌过夜。加5毫升水稀释，过滤收集固体，得到黄色固体状N'-(7-溴喹喔啉-2-基)-4-(2-氰基丙-2-基)苯甲酰肼(2.2g,收率85.0%)。MS(m/z):412(M+H)+。
在搅拌下，将N'-(7-溴喹喔啉-2-基)-4-(2-氰基丙-2-基)苯甲酰肼(2.2g,0.054mol)的3mLAcOH溶液于100°C反应过夜。冷却至室温后，加水(5mL)稀释。过滤收集固体，用饱和碳酸氢钠(5mL)洗涤，得到黄色固体状2-(4-(8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1-基)苯基)-2-甲基丙腈(1.8g,收率85.0%)。MS(m/z):392(M+H)+。
将2-(4-(8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1-基)苯基)-2-甲基丙腈(80mg,0.21mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(59mg,0.21mmol)和K2CO3(87mg,0.63mmol)在二氧六环(3mL)和H2O(1mL)中混合，向其中加入Pd(dppf)Cl2(3mg)。反应混合物在150°C下于微波反应器中反应30分钟。冷却至室温后，将混合物浓缩并通过色谱纯化得黄色固体状的化合物49(52mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.38(s,1H),8.26(s,1H),8.11(d,J=8.5,1H),7.99-7.95(m,1H),7.92(d,J=8.3,2H),7.83(d,J=8.4,2H),7.63(m,1H),7.52(d,J=1.5,1H),6.77(s,2H),1.77(s,6H)。MS(m/z):474(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯,采用与合成化合物49类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当条件下合成以下化合物50-78。
实施例7:化合物79-87的合成
化合物79
(S)-1-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮
将哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁基酯4-甲基酯(4.84g,20mmol)和LiOH(2.52g,60mmol)的THF(90mL)/MeOH(90mL)/H2O(30mL)混合液室温搅拌过夜。除去溶剂，将残余物用2N盐酸调节pH至2，然后用EtOAc(3x20mL)萃取。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥，浓缩得到1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-甲酸(4.6g,收率100.0%)。
将7-溴-2-肼基喹喔啉(3g,12.55mmol)、1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-甲酸(3.16g,13.81mmol)、EDCI(2.89g,15.06mmol)、HOBt(2.03g,15.06mmol)和TEA(1.9g,18.83mmol)的DMF(100mL)混合液室温搅拌过夜。加水(10mL)稀释，用EtOAc(3x100mL)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，真空浓缩得到灰黄色固体状4-(2-(7-溴喹喔啉-2-基)肼羰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(3.5g,收率62%)。
将4-(2-(7-溴喹喔啉-2-基)肼羰基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(900mg,2.0mmol)和AcOH(10mL)混合，回流反应过夜。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO纯化(MeOH/H2O=20%-90%)得灰黄色固体状8-溴-1-(哌啶-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(550mg,收率83.0%)。MS(m/z):332(M+H)+。
将8-溴-1-(哌啶-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(250mg,0.75mmol)、(S)-2-羟基丙酸(75mg,0.83mmol)、HATU(346mg,0.90mmol)、DIEA(116mg,0.90mmol)和DMF(5mL)的混合液室温搅拌6小时。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO纯化(洗脱剂MeOH/H2O=20%-90%)得到灰黄色固体状(S)-1-(4-(8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮(200mg,收率66.0%)。MS(m/z):404(M+H)+。
将(S)-1-(4-(8-溴-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-1-基)哌啶-1-基)-2-羟基丙-1-酮(65mg,0.16mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(51mg,0.18mmol)、K2CO3(67mg,0.48mmol)、Pd(dppf)Cl2(5mg)的二氧六环/H2O(3:1,4mL)混合液在微波反应器中于150°C下反应0.5小时。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO纯化(MeOH/H2O=20%-80%)得到黄色固体状化合物79(30mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.28(s,1H),8.72(d,J=2.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.16-8.12(m,2H),8.05(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),6.82(s,2H),4.91(dd,J=7.2,6.5Hz,1H),4.47(dd,J=17.8,11.8Hz,2H),4.29(t,J=10.6Hz,1H),4.15(t,J=11.2Hz,1H),3.09-2.97(m,1H),2.27(dd,J=15.6,14.5Hz,2H),1.97(dd,J=12.0,4.5Hz,1H),1.78(dd,J=7.1,5.0Hz,1H),1.25-1.15(m,3H)。MS(m/z):486(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯,采用与合成化合物79类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当条件下合成以下化合物80-87。
实施例8:化合物88-118的合成
化合物88
(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲酮
将2,8-二氯-7-硝基-1,5-二氮杂萘(3.55g,14.55mmol)、4-氨基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.55g,17.48mmol)、碳酸钾(6.02g,43.65mmol)的DMF(8mL)混合液室温搅拌过夜，倒入约20毫升的冰水混合液中。收集沉淀，水洗三次，真空干燥得到黄色固体状4-(6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(5.22g,收率88%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):409(M+H)+。
将4-(6-氯-3-硝基-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(600mg,1.47mmol)和SnCl2.H2O(996mg,4.41mmol)混合于乙酸乙酯(20mL)中，室温搅拌2小时，然后用5%NaOH碱化。混合物经硅藻土过滤，滤液用乙酸乙酯(3x15mL)萃取。将有机相合并，用盐水(10mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到黄色固体状4-(3-氨基-6-氯-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(499mg,收率90%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应，MS(m/z):378(M+H)+。
将4-(3-氨基-6-氯-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(200mg,0.53mmol)、原甲酸三乙酯(94mg,0.64mmol)、吡啶盐酸盐(6mg,0.053mmol)的甲苯(5mL)混合液回流3.5小时。真空除去溶剂，将残余物加入盐酸甲醇溶液(6N,3mL)中。将反应混合物继续在室温下搅拌3小时，真空浓缩。残余物溶于20mL二氯甲烷，然后依次用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黄色固体状8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(110mg,收率72%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。
在冰水浴冷却下，将环丙基甲酰氯(38μL,0.420mmol)加入8-氯-1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(110mg,0.382mmol)和Et3N(106μL,0.764mmol)的THF(15mL)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3小时，然后真空浓缩。将残余物用20mL乙酸乙酯溶解，依次经饱和碳酸氢钠溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到黄色固体状(4-(8-氯-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基酮(100mg,收率73%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):356(M+H)+。
将(4-(8-氯-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲基酮(100mg,0.281mmol)、PdCl2(dppf)2(12mg,0.014mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(97mg,0.337mmol)和2NK2CO3溶液(1mL)的二氧六环(4mL)混合溶液在微波反应器中于150°C反应30分钟。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO(MeOH/H2O：0%～100%)纯化得黄色固体状的化合物88(70mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.20(s,1H),9.13(d,J=1.9,1H),8.71(s,1H),8.59(d,J=2.0,1H),8.49(d,J=8.9,1H),8.32(d,J=8.9,1H),6.99(s,2H),5.98-5.92(m,1H),4.66(s,1H),4.58(s,1H),3.25(s,2H),2.35(s,2H),2.09-2.01(m,2H),2.01-1.90(m,1H),0.80-0.71(m,4H)。MS(m/z):482(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯,采用与合成化合物88类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当条件下合成以下化合物89-118。
实施例9:化合物119-146的合成
化合物119
(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲酮
将4-(3-氨基-6-氯-1,5-二氮杂萘-4-基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg,0.53mmol)与乙酸(3mL)混合，于100°C搅拌反应过夜。真空除去溶剂，将残余物加入3毫升6N的盐酸甲醇溶液中，室温继续搅拌2小时，真空浓缩。残余物溶于20mL二氯甲烷，依次经饱和碳酸氢钠溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到黄色固体状8-氯-2-甲基-1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(110mg,收率68%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。
在冰水浴冷却下，将环丙基甲酰氯(36μL,0.401mmol)加入8-氯-2-甲基-1-(哌啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘(110mg,0.364mmol)和Et3N(101μL,0.728mmol)的THF(15mL)溶液中。将反应混合液室温搅拌3小时，然后真空浓缩。将残余物溶于二氯甲烷(10mL)和水(10mL)的混合液。所得溶液用乙酸乙酯(2x10mL)萃取，合并有机相，浓缩得到黄色固体状(4-(8-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲酮(105mg,收率80%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):370(M+H)+。
将粗品(4-(8-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c][1,5]二氮杂萘-1-基)哌啶-1-基)(环丙基)甲酮(105mg,0.284mmol)、PdCl2(dppf)2(12mg,0.014mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(98mg,0.340mmol)和2NK2CO3溶液(1mL)加入二氧六环(4mL)中混合，混合液在150°C下于微波反应器中反应30分钟。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO(MeOH/H2O0%～100%)纯化，得到黄色固体状的化合物119(57mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ9.11(d,J=6.8,2H),8.58(s,1H),8.48(d,J=8.8,1H),8.29(d,J=8.3,1H),6.97(s,2H),4.67-4.58(m,2H),4.06(s,1H),2.75(m,5H),2.11-2.04(m,4H),0.81(s,1H),0.71(m,4H).MS(m/z):496(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯，采用与合成化合物119类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当的条件下合成以下化合物120-146。
实施例10:化合物147-178的合成
化合物147
2,4-二氟-N-(2-甲氧基-5-(1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-8-基)吡啶-3-基)苯磺酰胺
将7-溴-2-肼基喹喔啉(200mg,0.84mmol)和AcOH(5mL)的混合液回流过夜。冷却至室温，加入10毫升水，过滤收集所得沉淀，真空干燥得灰色固体状8-溴-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(200mg,收率91.0%)。
将8-溴-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(60mg,0.23mmol)、2,4-二氟-N-(2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-基)苯磺酰胺(107mg,0.25mmol)、K2CO3(95mg,0.69mmol)和Pd(dppf)Cl2(6mg)与二氧六环/水(3:1,4mL)混合，混合液在160°C下于微波反应器中反应0.5小时。除去溶剂，残余物经快速色谱ISCO(MeOH/H2O=20%-80%)纯化，得到白色固体状化合物147(60mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ10.44(s,1H),9.26(s,1H),8.47(d,J=1.7Hz,1H),8.34(d,J=1.5Hz,1H),8.13(t,J=10.3Hz,1H),8.02(d,J=2.1Hz,1H),7.92(dd,J=8.4,1.5Hz,1H),7.76(dd,J=14.9,8.5Hz,1H),7.51(dd,J=14.2,5.4Hz,1H),7.18(t,J=7.5Hz,1H),3.68(s,3H),3.17(s,3H)。MS(m/z):483(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯，采用与合成化合物147类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当条件下合成以下化合物148-178。
实施例11:化合物179-182的合成
化合物179
N-(2-甲氧基-5-(1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-8-基)吡啶-3-基)-4-甲基苯磺酰胺
将7-溴-2-肼基喹喔啉(1g,4.18mmol)和乙酸(10mL)混合，回流反应18小时。真空除去一半乙酸，将残余物倒入冰水中。过滤收集沉淀，水洗，真空干燥得到深红色固体，为8-溴-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉的粗品(1g,收率90%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):263(M+H)+。
将8-溴-1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉(809mg,3.07mmol)、PdCl2(dppf)2(132.6mg,0.153mmol)、2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)吡啶-3-胺(1g,4.3mmol)、碳酸钾(1.7g,12.28mmol)、DMF(40mL)和水(15mL)混合，混合液在100°C下搅拌反应过夜。除去一半溶剂，冷却至室温后，将混合液倒入冰水中，收集沉淀，水洗三次，真空干燥得到灰色固体，为2-甲氧基-5-(1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-8-基)吡啶-3-胺的粗品(730mg,收率77%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):307(M+H)+。
将4-甲基苯基-1-磺酰氯(31.3mg,0.164mmol)加入2-甲氧基-5-(1-甲基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]喹喔啉-8-基)吡啶-3-胺粗品(50mg,0.163mmol)和吡啶(2mL)的混合液中。将混合液室温搅拌过夜，然后在50°C加热5小时。除去溶剂，残余物经制备薄层色谱板纯化，得到灰色固体状化合物179(22mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ10.00(s,1H),9.27(s,1H),8.44(d,J=2.3,1H),8.32(d,J=1.8,1H),8.15(d,J=8.4,1H),7.98(d,J=2.3,1H),7.89(dd,J=8.4,1.8,1H),7.68(dd,J=8.4,1.8,2H),7.35(d,J=8.0,2H),3.71(s,3H),3.17(s,3H),2.33(s,3H)。MS(m/z):461(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯，采用与合成化合物179类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当条件下合成以下化合物180-182。
实施例12:化合物183和184的合成
化合物183
2-(4-(8-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-咪唑并[4,5-c]噌啉-1-基)苯基)-2-甲基丙腈
在0°C下，将乙酰氯(15.70mL,222mmol)的25mLDCM溶液滴加至1-(2-氨基苯基)乙酮(25g,185mmol)和Et3N(33.4mL,240mmol)的DCM白色混悬液中，室温搅拌2小时。待LC-MS监控显示反应完成，将反应液冷却至0°C，加100mL水淬灭。分出有机相，水相用二氯甲烷萃取。合并有机相，依次用水和盐水洗涤。将得到的有机相用无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩至干得到N-(2-乙酰苯基)乙酰胺(30g,收率92%)，其不经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(m/z):136(M+H)+。
在氮气下，将上述N-(2-乙酰苯基)乙酰胺粗品(28g,158mmol)在AcOH(300mL)中的淡黄色混悬液搅拌约5分钟，然后，在室温下于一小时内加入Br2(12.95mL,253mmol)。混合液在室温下继续搅拌75分钟。待LC-MS监控显示反应完成，向反应混合物中加200mL水淬灭。将混合物通过布氏漏斗过滤，收集沉淀，得到N-(2-乙酰-4-溴苯基)乙酰胺(35g,收率86%)。MS(m/z):216(M+H)+。
在氮气下，将N-(2-乙酰-4-溴苯基)乙酰胺(35g,137mmol)、HCl(100mL,600mmol)和THF(400mL)的混合液加热回流1小时。真空除去溶剂后，将混合物用EtOAc(100mL)处理。水相进一步浓缩以除去四氢呋喃，然后室温加入6NHCl(100mL,600mmol)。冷却至0°C，滴加NaNO2(9.43g,137mmol)的20mLH2O溶液。混合液继续室温搅拌15小时。然后将混合物加热回流6小时。将混合物冷却至室温，过滤收集固体，真空干燥得到白色固体状所需产物(19.5g,收率63.4%)，MS(m/z):227(M+H)+。该粗产物不经进一步纯化直接用于下一步反应。
在氮气下，将6-溴噌啉-4-醇(18.5g,82mmol)的HNO3(90mL,82mmol)溶液冷却至0°C，然后加入H2SO4(30mL)。所得混合液加热至60°C反应3小时。待LC-MS监控显示反应完成，将反应混合物冷却至0°C，加水(20mL)淬灭。将混合液用EtOAc(25mL)稀释，按常规后处理，粗产物经硅胶柱色谱(用PE/EtOAc洗脱)得到灰黄色固体状6-溴-3-硝基噌啉-4-醇(13g,收率58.6%)。
在氮气下，将棕色的6-溴-3-硝基噌啉-4-醇(2g,7.41mmol)的DMF(10mL)溶液冷却至0°C，然后滴加POCl3(0.897mL,9.63mmol)。将反应混合液室温搅拌5小时。待LC-MS监控显示反应完成，将反应液冷却至0°C，加50mL水淬灭。将混合物用布氏漏斗抽滤，收集固体。粗品6-溴-4-氯-3-硝基噌啉不经进一步纯化直接用于下一步反应(1.75g,收率82%)。MS(m/z):290(M+H)+。
将6-溴-4-氯-3-硝基噌啉(1.75g,6.07mmol)、2-(4-氨基苯基)-2-甲基丙腈(1.069g,6.67mmol)、K2CO3(1.677g,12.13mmol)和MeCN(2mL)混合，将黄色混悬液加热回流5分钟。按常规后处理，粗品经硅胶柱色谱纯化(用PE/EtOAc洗脱)得到黄色固体状2-(4-(6-溴-3-硝基噌啉-4-基氨基)苯基)-2-甲基丙腈(2.5g,收率100%)。MS(m/z):414(M+H)+。
在氮气下，将2-(4-(6-溴-3-硝基噌啉-4-基氨基)苯基)-2-甲基丙腈(2.5g,6.06mmol)、SnCl2.2H2O(5.21g,24.26mmol)和EtOAc(50mL)的橙色溶液加热至45°C反应3小时。冷却至室温，用饱和碳酸钠溶液调节pH至8。将混合物用布氏漏斗抽滤，收集滤液，浓缩得到2-(4-(3-氨基-6-溴噌啉-4-基氨基)苯基)-2-甲基丙腈(1.6g,收率69%)。MS(m/z):384(M+H)+。
在氮气下，将棕色的2-(4-(3-氨基-6-溴噌啉-4-基氨基)苯基)-2-甲基丙腈(250mg,0.654mmol)的HCO2H(3mL)溶液加热回流4小时。反应液加水淬灭，然后浓缩除去溶剂。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步反应(250mg,收率97%)。MS(m/z):394(M+H)+。
在氮气下，将2-(4-(8-溴-1H-咪唑并[4,5-c]噌啉-1-基)苯基)-2-甲基丙腈(100mg,0.255mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(95mg,0.331mmol)、Na2CO3(54.0mg,0.510mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2(10.41mg,0.013mmol)与二氧六环(20mL)和H2O(2mL)混合，将橙色混悬液室温搅拌10分钟，然后加热至120°C继续反应2小时。反应液真空浓缩，残余物经色谱纯化得到灰黄色固体状化合物183(50mg)。1HNMR(400MHz,dmso)δ8.87(s,1H),8.63(d,J=8.9,1H),8.48(d,J=2.0,1H),8.22(dd,J=9.0,1.9,1H),7.95(d,J=8.6,2H),7.88(d,J=8.6,2H),7.76(d,J=2.1,1H),7.52(d,J=1.8,1H),6.84(s,2H),1.78(s,6H)。MS(m/z):474(M+H)+。
使用相应的中间体和硼酸或其酯，采用与合成化合物183类似的方法，在本领域技术人员可以确定的适当条件下合成以下化合物184。
实施例13
PI3KaTranscreenerADP试验
本试验采用荧光偏振方法。激酶试验的最终条件是：10μM的ATP、0.2ng/μL的PI3Kα激酶、30μM的脂质底物以及含有50mMHEPES(pH7.5)、100mMNaCl、1mMEGTA、3mMMgCl2、1mMDTT和0.03%的CHAPS和2%DMSO的试验缓冲液。
将含10%DMSO的5μL测试化合物和10μL位于试验缓冲液中的0.5ng/μL的PI3K激酶(Invitrogen，PV4788)加入到96孔板(Greiner,Cat.675076)中，然后加入10μL75μMPIP2(PS脂质底物,Invitrogen，PV5100)和25μMATP的混合物启动反应。混合以后，在室温反应60分钟。然后加入25μL的ADP检测试剂(BellbrookLabs公司TranscreenerKinase试剂盒)，继续反应1.5小时。反应结束后，在TecanInfiniteF500仪器上在610nm激发，检测670nm处的发射值。
以平行的方式获得ADP标准曲线，分别用DMSO和试验缓冲液代替化合物和PI3Kα激酶。在标准曲线试验中，用0-10μM的不同浓度的ADP和10-0μM的不同浓度的ATP(ATP+ADP的总浓度是10μM)替代了反应中固定的10μMATP浓度。其它反应条件和前面描述的相同。最后标准曲线用Origin8.0软件作图。测试化合物对ADP生产的抑制率根据从标准曲线获得的ADP浓度计算得到。IC50用XLfit2.0软件计算得到。
结果
以上化合物1、2、3、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、20、21、22、23、24、25、26、28、29、30、31、33、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、79、80、81、82、83、84、85、87、88、89、90、92、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、142、143、144、145、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184抑制PI3Kα激酶受体，并且IC50<100nM。
实施例14
P-AktAcumen试验
将化合物用p-AktAcumen细胞试验进行测试。将人前列腺癌细胞系PC3(ATCC)用含10%胎牛血清(FBS)的F-12培养基培养。对于p-AktAcumen试验，将PC3细胞以5000个细胞/90μL的密度接种在多聚-D-赖氨酸96孔板(BD公司,356692)中。孵育培养24小时后，加入10μL不同浓度的测试化合物，继续孵育2小时。然后加入100μL预温热的4%低聚甲醛，室温下固定细胞45分钟。移除低聚甲醛后，再加入100μL的0.1%的TritonX-100，在室温下再孵育细胞30分钟。然后将细胞用160μL的PBS洗两次，再加入100μL阻断缓冲液(1%BSA的PBS溶液)，将细胞继续孵育2～3小时。然后再将细胞用160μL的PBS洗涤，加入30μL以1:250比例稀释在0.1%BSA中的Ser473-p-Akt(Cellsignaling,CAT:4060)，在4°C孵育过夜。然后将细胞用160μL的PBS洗涤两次。加入35μL以1:1000比例稀释在稀释缓冲液(0.1%BSA的PBS溶液)中的AlexaFluor488山羊抗兔抗体(Invitrogen,A11034)，将反应混合物避光孵育1.5小时。用160μL的PBS洗两次后，向各孔中加入35μL的1.5μM浓度的碘化丙啶(Sigma,P4170)，将反应平板在37°C,5%CO2下继续孵育30分钟。最后，将平板至于AcumeneX3(TTPLabTech)中并用适宜的仪器设置读板。
测试化合物的抑制率根据用化合物处理过的细胞和未处理过的细胞的比值计算得到。IC50用XLfit2.0软件计算得到。
每一个具体例举的本发明化合物对PI3Kα激酶受体的抑制IC50均小于1.0μM。
实施例15
mTORTR-FRET试验
化合物用LanthaScreenTR-FRET试验检测。激酶反应是在384孔黑色板(Corning，Cat.3676)上进行的。最终的激酶反应条件是：10μM的ATP，0.2ng/μL的mTOR激酶，0.4μM的GFP-4EBP1底物，并且在含有50mM的pH7.5的HEPES、0.01%的吐温20、1mM的EGTA、10mM的MnCl2、2mM的DTT和1%DMSO的试验缓冲液中进行。
将含4%DMSO的2.5μL测试化合物和稀释在试验缓冲液中的0.8ng/μL浓度的2.5μLmTOR激酶(Invitrogen,PV4753)加入到384孔板的各孔中，然后加入5μL的0.8μMGFP-4EBP1底物(Invitrogen,PV4759)和20μMATP的混合物启动反应。将混合物在室温下孵育60分钟。然后加入10μL包含有20mM的EDTA和4nM的Tb-抗-p4EBP1[pThr46]抗体(Invitrogen,PV4755)的TR-FRET稀释缓冲液，继续孵育1小时。然后在BioTekSynergy2仪器上，在340nm激发，490nm和528nm发射波长下读板。
测试化合物的抑制率根据528nm/490nm的比值计算得到。试验化合物的IC50用XLfit2.0软件计算获得。
结果：以上化合物1、6、7、9、10、12、14、16、17、21、25、26、30、33、35、42、43、44、45、46、49、50、52、53、55、56、58、63、66、72、75、88、96、98、102、103、105、106、107、119、120、121、122、123、129、131、147、148、149、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、165、166、178、180、181对mTOR的抑制IC50<100nM。
实施例16
P-S6Acumen试验
将化合物用p-S6Acumen细胞试验进行测试。将人前列腺癌细胞系PC3(ATCC)用含10%胎牛血清(FBS)的F-12培养基培养。对于p-S6Acumen试验，将PC3细胞以5000个细胞/90μL的密度接种在多聚-D-赖氨酸96孔板(BD公司,356692)中。孵育培养24小时后，加入10μL不同浓度的测试化合物，继续孵育2小时。然后加入100μL预温热的4%低聚甲醛，室温下固定细胞45分钟。移除低聚甲醛后，再加入100μL的0.1%的TritonX-100，在室温下再孵育细胞30分钟。然后将细胞用160μL的PBS洗两次，再加入100μL阻断缓冲液(1%BSA的PBS溶液)，将细胞继续孵育2～3小时。然后再将细胞用160μL的PBS洗涤，加入30μL以1:250比例稀释在0.1%BSA中的p-S6抗体(Cellsignaling,CAT:4858)，在4°C孵育过夜。然后将细胞用160μL的PBS洗涤两次。加入35μL以1:1000比例稀释在稀释缓冲液(0.1%BSA的PBS溶液)中的AlexaFluor488山羊抗兔IgG(Invitrogen,A11034)，将反应混合物避光孵育1.5小时。用160μL的PBS洗两次后，向各孔中加入35μL的1.5μM浓度的碘化丙啶(Sigma,P4170)，将反应平板在37°C,5%CO2下继续孵育30分钟。最后，将平板至于AcumeneX3(TTPLabTech)中并用适宜的仪器设置读板。
测试化合物的抑制率根据用化合物处理过的细胞和未处理过的细胞的比值计算得到。IC50用XLfit2.0软件计算得到。
每一个具体例举的本发明化合物对mTOR的抑制IC50均小于10μM。
Claims (10)
1.结构式(1)的化合物:
和/或其药学上可接受的盐，其中
A1为CH；
A4和A5独立地为CH；
A2、A3和B环一起形成5元杂芳基或杂环基，所述5元杂芳基或杂环基选自：
其中,
t为1或2；且
R3独立选自H、C1-C6烷基、C6-C14芳基、C3-C9环烷基、-C(O)NRcRd、-ORb、杂芳基和杂环基；上述的烷基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环基各自任选被一个或多个独立选自下述的基团所取代:任选被-CN取代的C1-C6烷基、-OH、-C(O)Ra、-CN、-NRcRd、-ORb、-S(O)nRe、卤素、任选被-C(O)C1-C4烷基取代的杂环基，
表示单键；
R1是杂芳基，其可任选被一个或多个独立选自下述的基团所取代：C1-C6烷基、-NRcRd、-NRcS(O)nRe、-ORb、卤素和C1-C4卤代烷基；
Ra、Rb、Rc、Rd和Re各自独立地选自氢、任选被-OH或-CN取代的C1-C6烷基、任选被卤素或C1-C6烷基取代的芳基、C3-C8环烷基和C1-C4卤代烷基；
Rc和Rd与它们所连接的原子一起形成3-10元的杂环，并且
n在每次出现时独立地为0、1或2，
其中以上所述的各芳基选自苯基、萘基和二氢化茚基；
杂环是指4-12元的饱和或部分不饱和的单环、二环或三环，所述环除含有1-3个独立地选自氧、硫和氮的杂原子外还包含至少2个碳原子；
杂芳基是指5-7元芳香单环，其包含1-4个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子是碳原子；或8-12元的二环，其包含1-4个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子是碳原子，并且其中至少一个环是芳香环且至少一个杂原子存在于芳香环中。
2.如权利要求1所述的化合物，其中所述R3选自-H、C1-C6烷基、苯基、C3-C9环烷基、杂芳基和杂环基，且以上所述的各烷基、苯基、环烷基、杂芳基和杂环基任选被一个或多个基团取代，这些基团独立地选自任选被-CN取代的C1-C6烷基、-OH、-C(O)Ra、-CN、-NRcRd、-S(O)nRe、卤素、和任选被-C(O)C1-C4烷基取代的杂环基。
3.如权利要求1所述的化合物，其中A2、A3和B环一起形成如下结构
4.如权利要求1所述的化合物，其中A2、A3和B环一起形成结构
5.如权利要求1所述的化合物，其中R1为杂芳基，并选自如下结构：
上述的基团可任选被一个或多个独立选自下列的基团所取代：C1-C6烷基、-NRcRd、-NRcS(O)nRe、-ORb和卤素；
其中，Rb、Rc、Rd和Re独立选自氢、任选被-OH或-CN取代的C1-C6烷基、任选被卤素或C1-C6烷基取代的苯基、C3-C8环烷基和C1-C4卤代烷基。
6.如权利要求5所述的化合物，其中R1为其可任选地被一个或多个独立地选自下述的基团取代：
-C1-C6烷基；
-NRcRd；
-ORb；
-卤素；
-NRcS(O)nRe,
其中Rb、Rc、Rd和Re各自独立地选自氢、任选被-OH或-CN取代的C1-C6烷基、任选被卤素或C1-C6烷基取代的苯基、C3-C8环烷基和C1-C4卤代烷基。
7.选自下列的化合物或其药学上可接受的盐：
8.一种药用组合物,包含至少一种如权利要求1-7任一项所述的化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体。
9.如权利要求1-7任一项所述的化合物和/或其药学上可接受的盐用于制备抑制PI3K和/或mTOR活性的药物的用途。
10.如权利要求1-7任一项所述的化合物和/或其药学上可接受的盐用于制备治疗癌症的药物的用途。
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| CN101330916A (zh) * | 2005-12-16 | 2008-12-24 | 科勒制药集团公司 | 经取代的咪唑并喹啉、咪唑并萘啶和咪唑并吡啶、其组合物及其方法 |
| CN101784547A (zh) * | 2007-08-14 | 2010-07-21 | 诺瓦提斯公司 | 作为GABAα配体的吡唑并喹啉和吡唑并萘啶衍生物 |
| WO2009155527A2 (en) * | 2008-06-19 | 2009-12-23 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Phosphatidylinositol 3 kinase inhibitors |
| WO2010038165A1 (en) * | 2008-09-30 | 2010-04-08 | Pfizer Inc. | Imidazo[1,5]naphthyridine compounds, their pharmaceutical use and compositions |
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