CN103118689B - 含牛蒡子苷元的牛蒡子提取物及其制造方法 - Google Patents

含牛蒡子苷元的牛蒡子提取物及其制造方法 Download PDF

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Abstract

本发明的目的在于，提供以一定比例含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物及其制造方法。更详细而言，本发明的目的在于，提供以约1∶1的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的制造方法。本发明提供以牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的制造方法，其包括以下工序：对牛蒡子进行切裁的工序；以及利用牛蒡子中固有的β-葡糖苷酶使牛蒡子中固有的牛蒡子苷酶致转变为牛蒡子苷元的工序，其中，所述酶致转变是使其在20～50℃的温度下发生反应。本发明还提供进一步包括通过加入有机溶剂进行加热回流来提取含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的提取物的工序的方法。

Description

含牛蒡子苷元的牛蒡子提取物及其制造方法
技术领域
本发明涉及含有牛蒡子苷元(arctigenin)及牛蒡子苷(arctiin)的牛蒡子提取物的制造方法。更详细而言，本发明涉及以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的制造方法。
背景技术
牛蒡子在15版日本药典中规定为牛蒡(Arctium lappa Linne菊科)的果实。此外，牛蒡子是银翘散、驱风解毒汤、消风散等处方药中的生药，其实质上被分类为专门用作医药品的成分。
牛蒡子含有约7％的属于木质素苷的牛蒡子苷以及约0.6％的作为其苷元的牛蒡子苷元。
近年来，来自PANC-1、AsPC-1、BxPC-1及KP-3等胰腺癌的细胞即使在极度营养饥饿的状态下也显示出较强的耐性，并报道了解除其耐性可能将成为癌症治疗中新生化学途径(专利文献1)。
据报道，使用胰腺癌细胞株PANC-1，进行了对能够解除低营养状态下的肿瘤细胞的生存能力的物质的筛选，结果牛蒡子苷元是有效的(非专利文献1)。根据上述见解，含有牛蒡子苷元的牛蒡子提取物可以作为用于治疗胰腺癌的抗癌剂来使用。
就目前已知的牛蒡子而言，牛蒡子中的牛蒡子苷元含量低至约0.6％。此外，难溶于水。因此，用以往所利用的热水提取法来制造以高含量含有牛蒡子苷元的牛蒡子提取物是极其困难的。
此外，在使用于胰腺癌等的治疗时，期望提供作为有效成分的牛蒡子苷元达到一定含量的牛蒡子提取物，如上所述，在以高含量含有牛蒡子苷元的牛蒡子提取物的制造中，使牛蒡子苷转变为牛蒡子苷元，难以将难溶于水的牛蒡子苷元控制在恒定含量。
进而，在使用于胰腺癌等治疗时，已知以恒定含量含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的抗癌效果特别优异。因此，在以高含量含有牛蒡子苷元的牛蒡子提取物的制造中，期望能够将牛蒡子苷元及牛蒡子苷控制在恒定含量的制造方法。尤其期望能够制造以约1∶1的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的方法。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2002-065298号公报
非专利文献
非专利文献1：S.AwaLe，J.Lu，S.K.KaLauni，Y.Kurashima，Y.Tezuka，S.Kadota，H.Esumi，Cancer Res.，2006，66(3)，1751-1757。
发明内容
发明要解决的课题
本发明的目的在于，提供以一定比例含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物及其制造方法。更详细而言，本发明的目的在于，提供以约1∶1的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的制造方法。
用于解决课题的手段
本发明人等为了解决上述课题进行了深入地研究，结果发现以下技术：通过对作为原料的牛蒡子的酶活性、切裁牛蒡子的粒径、使牛蒡子苷酶致转变为牛蒡子苷元时的温度以及从牛蒡子提取牛蒡子苷元及牛蒡子苷时的温度进行调整，从而调节牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含有比。
本发明提供一种以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比(1.0～1.9的摩尔比)含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物的制造方法，其包括以下工序：对牛蒡子进行切裁的工序；以及利用牛蒡子中固有的β-葡糖苷酶使牛蒡子中固有的牛蒡子苷酶致转变为牛蒡子苷元的工序，其中，上述酶致转变是使其在20℃～50℃的温度下发生反应。
此外，本发明提供上述的牛蒡子提取物的制造方法，其中，在进行切裁的工序中，将牛蒡子切裁成0.85mm～9.5mm的粒径。
进而，本发明提供上述的牛蒡子提取物的制造方法，其中，牛蒡子中固有的β-葡糖苷酶的酶活性在1g牛蒡子中为0.4U以上。
此外，本发明提供上述的牛蒡子提取物的制造方法，其包括以下工序：在进行酶致转变的工序之后，通过加入有机溶剂来提取含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的提取物。
此外，本发明提供上述的牛蒡子提取物的制造方法，其中，有机溶剂为乙醇。
此外，本发明提供上述的牛蒡子提取物的制造方法，其中，进行提取的工序在约80℃的温度下进行提取。
进而，本发明提供一种牛蒡子提取物，其是利用上述方法得到的、以牛蒡子苷元/牛蒡子苷为0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物。
进而，本发明提供一种抗癌剂，其含有利用上述方法得到的、以牛蒡子苷元/牛蒡子苷为0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物。
发明效果
根据本发明，能够提供牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.7～1.3且以恒定含有比含有具有抗肿瘤效果的牛蒡子苷元的牛蒡子提取物。尤其通过对胰腺癌患者进行给药，从而可以期待稳定的肿瘤增殖抑制、抗肿瘤效果。此外，还可以提高制造时的生产率。
具体实施方式
以下，对本发明进行详细地说明。公开的条件为一个例子，但并不限定于此。
本申请发明的牛蒡子提取物经过生药切裁工序、提取工序(酶致转变工序及利用有机溶剂的提取工序)、固液分离工序、浓缩工序及干燥工序来制造。
(生药切裁工序)
在本发明的牛蒡子提取物的制造方法中，将作为原料的牛蒡子切裁成适于提取的大小。作为原料生药有植物的各个部位、矿物、动物等各种大小、形状、硬度，需要根据其特质进行切裁。牛蒡子可以使用本领域技术人员公知的任意手段进行切裁。例如，可以使用市售的切裁机。
在本发明的牛蒡子提取物的制造方法中，可以预先测定牛蒡子中固有的酶β-葡糖苷酶的活性，从而选择出适于本发明的牛蒡子。
作为测定β-葡糖苷酶的活性的方法，例如，以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(C12H15NO8：分子量301.25)(SIGMA-ALDRICH公司制)为基质，使牛蒡子粉碎品与其发生作用，测定400nm的吸光度的变化来测定由此生成的对硝基苯酚，由此可以测定酶活性。作为表示酶活性的单位，可以将1分钟内生成1微摩尔对硝基苯酚的酶量表示为1单位(U)。
为了得到以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物，可以使用牛蒡子中固有的β-葡糖苷酶的活性为例如0.4U/g以上、优选1U/g以上的牛蒡子。
在低于0.4U/g的情况下，水解变得不充分，牛蒡子苷元的重量比下降，无法有效地得到所需的牛蒡子提取物。
此外，在本发明的牛蒡子提取物的制造方法中，可以使用切裁成任意粒径的牛蒡子。切裁出的牛蒡子的粒径越小，酶致转变越得以促进，提取物收率也越提高。相反，若粒径过小，则酶致转变过快，有时会使工艺管理变得困难或者在后续工序中对准确的固液分离产生障碍。
为了得到以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物，如以下实施例所示那样将牛蒡子以例如全部通过9.5mm筛的方式切裁成9.5mm以下的粒径。
此外，为了得到以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物，理想的是将牛蒡子按照以下方式进行粒径切裁：全部通过9.5mm筛，并在例如0.85mm的筛上分布60～100％、进一步优选以在0.85mm的筛上分布65～80％。
(提取工序)
在生药提取物粉末制造工序中，提取工序是品质上最重要的工序。该提取工序决定生药提取物粉末的品质。在本发明的牛蒡子提取物的制造方法中，为了提取牛蒡子提取物，而分成酶致转变工序和利用有机溶剂的提取工序的2阶段进行提取。
(酶致转变工序)
酶致转变工序是本发明的牛蒡子提取物的制造方法中的重要工序。酶致转变工序是利用牛蒡子中固有的酶即β-葡糖苷酶使牛蒡子中含有的牛蒡子苷，酶致转变为牛蒡子苷元的工序。
具体而言，通过将上述工序中准备的牛蒡子切裁物保持在适当的温度，从而使β-葡糖苷酶起作用，进行从牛蒡子苷生成牛蒡子苷元的反应。
例如，通过在切裁出的牛蒡子中添加水等的任意溶液并在30℃附近的温度下进行搅拌等方式，可以将牛蒡子保持在任意温度。
为了得到以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物，而将切裁出的牛蒡子保持在30℃附近的温度、例如20～50℃之间的温度。
在低于20℃的情况下，水解变得不充分，牛蒡子苷元的重量比下降，无法有效地得到所需的牛蒡子提取物。另一方面，在高于50℃的温度的情况下，酶失活，牛蒡子苷元的重量比下降，无法有效地得到所需的牛蒡子提取物。
此外，保持时间只要在上述温度下进行保持，则没有特别的限定，例如可以使其保持约30分钟。通过使其保持在20～50℃之间，从而无论保持时间如何，均会使适量的牛蒡子苷酶致转变为牛蒡子苷元，可以得到以牛蒡子苷元∶牛蒡子苷(重量比)为约1∶1的比例含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物。
(利用有机溶剂的提取工序)
利用有机溶剂的提取工序是使用任意的适当有机溶剂从牛蒡子中提取牛蒡子苷元及牛蒡子苷的工序。即，该工序如下：利用上述的酶致转变工序使牛蒡子苷元处于高含量的状态，并通过添加适当的溶剂来提取牛蒡子提取物。例如，在牛蒡子提取物中添加适当的溶剂，并加热搅拌适当的时间，从而提取牛蒡子提取物。此外，还可以使用除加热搅拌以外的加热回流、滴注式提取、浸渍式提取或加压式提取法等本领域技术人员公知的任意提取法来提取牛蒡子提取物。
由于牛蒡子苷元具有水难溶性，因此可以通过添加有机溶剂来提高牛蒡子苷元的收率。有机溶剂可以使用任意的有机溶剂。例如可以使用甲醇、乙醇及丙醇等醇、以及丙酮。若考虑安全性方面，则在本发明的牛蒡子提取物的制造方法中优选使用乙醇作为有机溶剂。
在利用加热搅拌来提取牛蒡子提取物的情况下，加热搅拌可以在任意温度下进行，但是，为了得到以牛蒡子苷元/牛蒡子苷为0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物，而使其保持在80℃以上的温度、例如80～90℃之间的温度。
此外，加热搅拌的时间，只要在上述温度进行加热搅拌，则没有特别的限定，通过加热搅拌约30分钟、例如30～60分钟，从而可以在溶剂中从牛蒡子提取牛蒡子苷元及牛蒡子苷。
加热搅拌的时间越长，牛蒡子苷元及牛蒡子苷的收率越高。但是，在加热搅拌的时间长时，则不需要的油脂类大量溶出，导致浓缩工序的负荷变大。因此，加热搅拌的时间只要根据情况适当决定即可。
此外，有关牛蒡子苷元及牛蒡子苷的收率，由于乙醇量越多则牛蒡子苷元及牛蒡子苷的溶解度越高，因此收率也提高。但是，在乙醇量多时，不需要的油脂类大量溶出，导致浓缩工序的负荷变大。因此，投入量只要根据情况适当决定即可。另外，通过该工序中的加热搅拌，从而可以同时对牛蒡子提取物进行灭菌及杀菌。
(固液分离工序)
固液分离工序是将提取完的牛蒡子从提取液进行分离的工序。固液分离可以使用本领域技术人员公知的任意方法来进行。固液分离法有例如过滤法、沉降法及离心分离法等。在工业上，理想的是离心分离法。
(浓缩工序)
浓缩工序是在干燥之前从牛蒡子提取液除去溶剂的工序。溶剂从牛蒡子提取液的除去可以使用本领域技术人员公知的任意方法来进行。
但是，由上述工序得到的来自牛蒡子的提取液优选以不会再长时间曝露在高温的方式进行浓缩。
例如，通过使用减压浓缩法，从而无需长时间曝露于高温即可浓缩牛蒡子提取液。
牛蒡子提取液的浓缩可以浓缩至能得到所需浓度的牛蒡子提取物的浓度。
例如，理想的是在以下的干燥工序中浓缩至能够适当进行干燥的程度。此外，理想的是在以下的工序中使牛蒡子提取物干燥制成粉末制剂的情况下，浓缩至能得到适当的制剂特性的浓度。
由于牛蒡子苷元及牛蒡子苷具有水难溶性，因此牛蒡子苷元及牛蒡子苷大量附着在以下的干燥工序的制造装置内，最终的收率大幅降低。因此，为了防止牛蒡子苷元及牛蒡子苷附着于制造装置，可以在由该浓缩工序得到的牛蒡子提取液中添加糊精。糊精的添加量理想的是例如相对于浓缩液的固体成分为15～30％左右。
(干燥工序)
干燥工序是将由上述工序得到的牛蒡子提取物加工成粉末状的工序。干燥可以使用本领域技术人员公知的任意方法来进行。例如，作为干燥法，已知冷冻干燥及喷雾干燥等，若在实验室水平上，通常使用前者，若在批量生产水平上，通常使用后者。
通过以上的制造工序，可以得到以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的牛蒡子提取物。本发明的牛蒡子提取物的制造方法必须包括在20℃～50℃的温度下进行酶致转变的工序，但是无需包括所有其他工序。
(含有牛蒡子提取物的抗癌剂)
作为牛蒡子提取物的主要成分的牛蒡子苷元已知作为用于治疗胰腺癌的抗癌剂的有效成分起作用。此外，已知在以牛蒡子提取物为有效成分的抗癌剂以约1∶1的重量比含有牛蒡子提取物中的牛蒡子苷元及牛蒡子苷的情况下，其抗癌效果最优异。
另一方面，如上所述，利用本发明的牛蒡子提取物的制造方法得到的提取物粉末以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷。因此，利用本发明的牛蒡子提取物的制造方法得到的提取物粉末比以往的牛蒡子提取物更能作为具有优异抗癌效果的抗癌剂来使用。
含有利用本发明的牛蒡子提取物的制造方法得到的提取物的抗癌剂可以还含有任意成分的组合物。例如，在含有本发明的提取物的抗癌剂作为药品使用的情况下，可以与药学上可接受的基质、载体、赋形剂、崩解剂、润滑剂及着色剂等一起制成药品组合物来提供。
作为药品组合物中使用的载体及赋形剂的例子，包括乳糖、葡萄糖、白糖、甘露醇、糊精、马铃薯淀粉、玉米淀粉、碳酸钙、磷酸钙、硫酸钙及结晶纤维素等。
此外，作为粘结剂的例子，包括淀粉、明胶、糖浆、黄芪胶(gumtragacanth)、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素及羧甲基纤维素等。
此外，作为崩解剂的例子，包括淀粉、琼脂、明胶粉、结晶纤维素、碳酸钙、碳酸氢钠、海藻酸钠、羧甲基纤维素钠及羧甲基纤维素钙等。
此外，作为润滑剂的例子，包括硬脂酸镁、氢化植物油、滑石及聚乙二醇等。此外，着色剂可以使用允许添加到医药品中的任意着色剂。
此外，药品组合物可以根据需要包覆一层以上的层的由白糖、明胶、纯化虫胶(purified shellac)、明胶、甘油、山梨糖醇、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、邻苯二甲酸纤维素醋酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸甲酯及甲基丙烯酸聚合物等制的膜。
此外，可以根据需要添加pH调节剂、缓冲剂、稳定化剂及增溶剂等。
此外，药品组合物可以以任意形态的制剂来提供。例如，作为药品组合物的口服制剂，可以是糖衣片、颊含片(buccal tablet)、包衣片及咀嚼片等片剂；糖锭剂、丸剂、散剂及包括软胶囊的胶囊剂、颗粒剂、悬浮剂、乳剂、包括干糖浆的糖浆剂、酏剂等液体制剂。
此外，作为药品组合物的非口服制剂，可以是用于静脉注射、皮下注射、腹腔内注射、肌肉内注射、经皮给药、经鼻给药、经肺给药、经肠给药、口腔内给药及经粘膜给药等给药方式的制剂。例如可以是注射剂、经皮吸收带、气溶胶剂及栓剂等。此外，由于提取物粉末具有其特有的辛辣味，因此，可以制成遮盖提取物粉末的制剂或者制成以包裹剂包裹的薄膜包衣剂。
另一方面，利用本发明的牛蒡子提取物的制造方法得到的提取物粉末也可以直接以其形态使用。此外，也可以添加到食品等中。此外，利用本发明的牛蒡子提取物的制造方法得到的提取物粉末可以通过添加、混合或涂布于其他食品而以食品原材料的形式来提供。除食品外，还可以作为化妆品及饵料等来提供。
(试验例)
对牛蒡子的酶活性及酶致转变条件(温度和时间)对于牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)带来的影响、即两者的因果关系进行了验证。
(酶活性的测定)
利用维利氏粉碎机将产地、批次不同的牛蒡子进行粉碎，将该牛蒡子粉碎品0.1g用10mL的水进行稀释，制成试样溶液。
在对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷0.15g中加入水定容至25mL，制备成20mmol/L对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷水溶液，作为基质溶液。在0.1mol/L醋酸缓冲液1mL中加入20mmol/L对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷水溶液0.5mL，制备反应混液，在37℃进行约5分钟预加热。
在反应混液中加入0.5mL试样溶液，使其在37℃反应15分钟后，加入作为反应终止液的0.2mol/L碳酸钠水溶液2mL，使反应终止。对该溶液在400nm下的吸光度进行测定，由与不进行酶反应的空白溶液相比的变化量，利用下式求出酶活性。
酶活性(U/g)＝(试样溶液的吸光度-空白溶液的吸光度)×4mL×1/18.1(对硝基苯酚在上述测定条件下的毫摩尔分子吸光系数：cm2/μmol)×1/光路长(cm)×1/反应时间(分钟)×1/0.5mL×1/试样溶液浓度(g/mL)
如表1所示，确认到各牛蒡子的酶活性为0.12～8.23U/g。
(试验例1)
在酶活性为0.12、0.27、0.40U/g(试样1～3)的、切裁出的牛蒡子1g中加入水7mL，在酶反应温度15℃、20℃的温度条件下，将各个反应温度下的反应时间设定为30分钟，反应后，加入乙醇，在80℃进行提取，对所得的提取物的牛蒡子苷元及牛蒡子苷进行定量，求出牛蒡子苷元/牛蒡子苷的重量比。
结果如表1的比较例1～2、实施例1所示。
酶活性为0.40U/g的试样3在酶反应温度20℃、反应时间30分钟的条件下得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.82的牛蒡子提取物。
另一方面，在酶反应温度15℃、反应时间30分钟的条件下，牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.69，酶反应温度优选为20℃以上。
此外，酶活性低于0.40U/g的试样1及2即使在酶反应温度20℃下也无法满足牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.70以上，因此牛蒡子的酶活性优选为0.40U/g以上。
(试验例2)
在酶活性为4.03U/g(试样5)的、切裁出的牛蒡子1g中加入水7mL，在酶反应温度30℃、40℃、50℃、60℃的温度条件下，将各个反应温度下的反应时间设定为15分钟、30分钟(仅30℃和60℃)，反应后用乙醇进行提取，对所得的提取物的牛蒡子苷元及牛蒡子苷进行定量，求出牛蒡子苷元/牛蒡子苷的重量比。
结果如表1的实施例3所示。在酶反应温度30℃、反应时间15分钟的条件下，得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.7的牛蒡子提取物；在酶反应温度30℃、反应时间30分钟的条件下，得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝1.0的牛蒡子提取物；在酶反应温度40℃、反应时间15分钟的条件下，得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝1.2的牛蒡子提取物；在酶反应温度50℃、反应时间15分钟的条件下，得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝1.2的牛蒡子提取物。
另一方面，在酶反应温度60℃、反应时间15分钟的条件下，牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.4；在酶反应温度60℃、反应时间30分钟的条件下，牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.5。
综上，酶反应温度优选低于60℃。
(试验例3)
在酶活性为1.42U/g(试样4)的、切裁出的牛蒡子1g中加入7mL水，在酶反应温度25℃的温度条件下，将反应时间设定为10分钟、30分钟，反应后用乙醇进行提取，对所得的提取物的牛蒡子苷元及牛蒡子苷进行定量，求出牛蒡子苷元/牛蒡子苷的重量比。
结果如表1的实施例2所示。在酶反应温度25℃、反应时间10分钟的条件下，得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.74的牛蒡子提取物；在酶反应温度25℃、反应时间30分钟的条件下，得到牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.85的牛蒡子提取物。
综上，即使酶活性为1.42U/g也能够得到所需的结果。
【表1】
[表1]
实施例
实施例6牛蒡子提取物的制造1
切裁牛蒡子(酶活性8.23U/g)，使其通过9.5mm的筛，并将全部过筛的物质再次通过0.85mm的筛，确认到残留75％。将该牛蒡子碎块80kg加入到保温在29～33℃的水560L中，搅拌30分钟。接着，加入乙醇265L，升温到85℃，再进行60分钟加热回流。将该溶液离心分离，得到牛蒡子提取液。将该操作重复2次，合并所得的提取液，进行减压浓缩，对提取物固体成分加入20％糊精，进行喷雾干燥。得到牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含量分别为6.2％及7.1％、牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.89的牛蒡子提取物粉末(含有20％糊精)。
实施例7牛蒡子提取物的制造2
切裁牛蒡子(酶活性8.23U/g)，使其通过9.5mm的筛，并将全部过筛的物质再次通过0.85mm的筛，确认到残留75％。将该牛蒡子碎块80kg加入到保温在30～33℃的水560L中，搅拌30分钟后，加入乙醇265L，升温到85℃，再进行30分钟加热回流。将该溶液离心分离，得到牛蒡子提取液。将该操作重复2次，合并所得的提取液，进行减压浓缩，对提取物固体成分加入20％糊精，进行喷雾干燥。得到牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含量分别为6.0％及6.8％、牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.87的牛蒡子提取物粉末(含有20％糊精)。
实施例8牛蒡子提取物的制造3
切裁牛蒡子(酶活性7.82U/g)，使其通过9.5mm的筛，并将全部过筛的物质再次通过0.85mm的筛，确认到75％。将该牛蒡子碎块80kg加入到保温在30～32℃的水560L中，搅拌40分钟后，在60分钟后加入乙醇258L，升温到85℃，再进行30分钟加热回流。将该溶液离心分离，得到牛蒡子提取液。将该操作重复2次，合并所得的提取液，进行减压浓缩，对提取物固体成分加入20％糊精，进行喷雾干燥。得到牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含量分别为6.2％及6.7％、牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.93的牛蒡子提取物粉末(含有20％糊精)。
实施例9牛蒡子提取物的制造4
切裁牛蒡子(酶活性7.82U/g)，使其通过9.5mm的筛，并将全部过筛的物质再次通过0.85mm的筛，确认到残留75％。将该牛蒡子碎块80kg加入到保温在30～32℃的水560L中，搅拌30分钟后，加入乙醇253L，升温到85℃，再进行40分钟加热回流。将该溶液进行离心分离，得到所得的提取液。将该操作重复2次，合并所得的提取液，进行减压浓缩，对提取物固体成分加入25％糊精，进行喷雾干燥。得到牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含量分别为6.4％及7.2％、牛蒡子苷元/牛蒡子苷(重量比)＝0.89的牛蒡子提取物粉末(含有25％糊精)。
【表2】
[表2]
由上述的实施例6～9的结果可知，在酶致转变工序中，通过在约30℃进行酶致转变，从而得到牛蒡子苷元∶牛蒡子苷(重量比)＝约1∶1的含量的牛蒡子提取物。通常利用酶的反应依赖于温度及时间而进行反应，但是在该温度时，可见：无论酶致转变时间如何，均得到牛蒡子苷元∶牛蒡子苷(重量比)＝约1∶1的含量的牛蒡子提取物。
此外，由上述的实施例6～9的结果可知，在加热回流工序中，升温到约85℃进行加热回流，从而得到牛蒡子苷元∶牛蒡子苷(重量比)＝约1∶1的含量的牛蒡子提取物。通常在加热回流而得到提取物的情况下，提取物中的含有物的量依赖于温度及时间而发生变化，但是在该温度时，可见：无论加热回流时间如何，均得到牛蒡子苷元∶牛蒡子苷(重量比)＝约1∶1的含量的牛蒡子提取物。
实施例10牛蒡子提取物粉末配合颗粒剂
(1)实施例7的牛蒡子提取物粉末    33.3％
(2)乳糖                         65.2％
(3)羟丙基纤维素                 1.5％
   总计                         100％
制造方法
依据《日本药典》制剂总则、颗粒剂一项制造颗粒剂。即，采用上表记载的(1)～(3)的成分，制成颗粒状。将其各1.5g填充于铝层压膜中，得到每1包含有0.5g牛蒡子提取物粉末的颗粒剂。
实施例11牛蒡子提取物粉末配合片剂
(1)实施例7的牛蒡子提取物粉末    37.0％
(2)结晶纤维素                   45.1％
(3)羧甲纤维素钙                 10.0％
(4)交聚维酮                     3.5％
(5)含水二氧化硅                 3.4％
(6)硬脂酸镁                     1.0％
   总计                         100％
(制造方法)
依据《日本药典》制剂总则、片剂一项制造片剂。即，采用上表记载的(1)～(6)成分，得到片剂。

Claims (5)

1.一种牛蒡子提取物的制造方法，所述牛蒡子提取物以牛蒡子苷元/牛蒡子苷＝0.7～1.3的重量比含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷，其包括以下工序：
切裁工序，切裁牛蒡子；
酶致转变工序，利用牛蒡子中固有的β-葡糖苷酶，使牛蒡子中固有的牛蒡子苷，酶致转变为牛蒡子苷元，且所述酶致转变是在20℃～50℃的温度下发生反应；以及
提取工序，在进行所述的酶致转变的工序之后，通过加入有机溶剂来提取含有牛蒡子苷元及牛蒡子苷的提取物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述切裁工序中，将牛蒡子切裁成0.85mm～9.5mm的粒径。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，权利要求1所述的牛蒡子中固有的β-葡糖苷酶的酶活性在1g牛蒡子中为0.4U以上。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其中，权利要求1所述的有机溶剂为乙醇。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中，权利要求1所述的提取工序在80℃以上的温度下进行提取。
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