CN103099831A

CN103099831A - 一种治疗肝病的中药及其制备工艺

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Publication number: CN103099831A
Application number: CN2011103855313A
Authority: CN
Inventors: 张彦文
Original assignee: HEILONGJIANG JIUJIU PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: HEILONGJIANG JIUJIU PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2011-11-15
Filing date: 2011-11-15
Publication date: 2013-05-15

Abstract

本发明公开了一种治疗肝病的中药，本药物制品的来源于天然植物龙牙楤木的提取物，具有降酶保肝的功效。本发明是通过对中药龙牙楤木有效成分的提取分离达到去除粗取精，获得有效成份提高药物疗效。本品口服可降低转氨酶，保护肝细胞。

Description

一种治疗肝病的中药及其制备工艺

【技术领域】

本发明涉及一种治疗肝病的中药及其制备工艺，属于中药领域。

【背景技术】

中药龙牙楤木为五加科植物，具有补气安神、强精滋肾、健胃利水、祛风除湿、活血止痛的功能，其根皮含有三种楤木皂苷(A、B、C)为齐墩果酸的三糖苷和四糖苷，齐墩果酸具有良好的抗炎、免疫作用，临床上用于传染性急性黄疸型肝炎及慢性迁延性肝炎。本技术利用现代化制药手段，对中药龙牙楤木有效成份进行提取和分离，并已被国家食品药品监督管理局批复生产。

【发明内容】

本发明目的就是提供一种更为有效的治疗肝病的一种中药提取物。

本发明药物具有保肝降酶，可用于治疗急慢性肝炎、肝硬化肝腹水。研究结果表明，其对四氯化碳所致的小鼠肝损伤，具有很好的保护作用。根据临床试验观察患者服药一个月后，急性肝炎治愈率达38.21％，基本治愈率达40.45％临床治愈率达11.24％；慢性肝炎基本治愈率达38.31％，有效率达49.21％，结果表明，本发明药物在治疗急、慢性肝炎中疗效显著，急性肝炎的治疗总有效率89.9％，慢性肝炎的治疗总有效率达87.52％，另外，本发明药物在治疗期间，未发现有任何毒副作用，心、肾功能未见异常，为高效、无毒的急、慢性肝炎的治疗药物。

本发明药物并利用现代化的中药提取取分离技术对龙牙楤木中有效成份进行提取分离后制成：

1.工艺的出发点是保证有效成分的含量。因此工艺的设计必须符合药材有效成分的性质及制剂成分的含量。

2.楤木根中主要成分为以齐墩果酸为皂甙元的皂甙类成分，同时也有游离的齐墩果酸。虽然皂甙类成分在水中有一定的溶解度，但游离的齐墩果酸在水中几乎不溶，但在乙醇中有较好的溶解度，皂甙类成分亦然，且蛋白质、淀粉、多糖类成分在乙醇中几乎不溶，使下一步工序操作简单。乙醇提取物的体积大太小于水提取物的体积，有利于减少单剂量的体积。

3.采用酸、碱调节提取液约pH值，利于使齐墩果酸及以齐墩果酸为皂甙元的皂甙类成分析出。

4.用5％硫酸∶乙醇(1∶1)回流水解，可使皂甙类成分水解而得甙元。

优选地，本发明药物活性组分的制备方法如下：

取楤木根，粉碎成粗粉，加8～12倍量30～70％乙醇回流提取3～6次，每次3～6小时，合并提取液，调醇浓度至70～90％，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩，烘干。取干膏加8～12倍量5％硫酸∶乙醇(1∶1)回流水解5～8小时，挥散乙醇，加1mol/L氢氧化钠调PH值至7，滤过，弃去滤液，沉淀物烘干，粉碎成细粉，既得本发明的活性组分。

本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型，如胶囊剂、丸剂、散剂、片剂、口服液等。

【具体实施方式】

为了对本发明进行更进一步的详细描述，给出具体实施例，但仅作为阐明本发明，而不是为了限制本发明范围。

【实施例1】本发明药物的胶囊剂制备

取楤木根，粉碎成粗粉，加10倍量50％乙醇回流提取4次，每次4小时，合并提取液，调醇浓度至85％，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩，烘干。取干膏加10倍量5％硫酸∶乙醇(1∶1)回流水解5～8小时，挥散乙醇，加1mol/L氢氧化钠调PH值至7，滤过，弃去滤液，沉淀物烘干，粉碎成细粉，加入淀粉适量，混匀，制粒，装胶囊，即得。

【实施例2】本发明药物的颗粒剂制备

按照实施例1的方法制备出本发明药物的提取物，经干燥制成本药物的干燥颗粒，采用颗粒剂常规制备工艺，制成颗粒剂。

【实施例3】本发明药物的片剂制备

按照实施例1的方法制备出本发明药物的提取物，加入片剂常用的赋形剂，采用片剂常规制备工艺，制成片剂。

【实验例1】本发明药物药效学实验考察

一.龙牙楤木提取物对四氯化碳急性肝损伤的保护作用

目的：观察龙牙肝泰胶囊(本发明药物胶囊剂)对四氯化碳急性肝损伤的保护作用。

材料：1、药物及试剂：受试品：龙牙肝泰胶囊，为处方固定，生产工艺及质量标准稳定情况下提供的受试品。由黑龙江久久药业有限责任公司生产并提供。每粒含楤木提取物以齐墩果酸计45mg。

联苯双酯片：

四氯化碳等化学试剂由黑龙江化学试剂商店提供。

GPT和GOT试剂盒由黑龙江省临床检验中心提供。

2、动物：昆明种小白鼠，体重20-22g，雌雄各半，曲黑龙江中医药大学实验动物中心提供。

方法：1、药液的配置：龙牙肝泰胶囊按有效成分45mg的剂量计算，配制成7.2mg/Kg高剂量和3.6mg/Kg低剂量，0.2ml/10g混悬液；联苯双酯按7.2mg/Kg、0.2mg/10g配制成混悬液备用。

2、将昆明种小白鼠50只正常喂养2天后，随机分为组；正常对照组、损伤对照组、联苯双酯组、龙牙肝泰胶囊高、低剂量组，24小时内灌胃给药4次，0.2ml/10g/次，间隔时间6小时，正常对照组和损伤对照组分别给予同体积的水。与末次给药后6小时腹腔注射0.1％四氯化碳(用橄榄油配置)，10ml/Kg，正常对照组注射同体积橄榄油。16小时后断头处死动物，收集血液，分离血清，测ALT，并取肝脏左叶组织固定于福尔马林中作病理组织检查。以上实验均采用实验室常规方法。

结果：

1、丙氨酸氨基转移酶活力测定结果见表1

表1ALT活力测定(X±SD)

注：*与联苯双酯组比较*P＜0.05**P＜0.01

△与正常对照组比较△P＜0.05△△P＜0.01

损伤组与正常对照组比较差异非常显著，说明造模成功，对肝损伤引起的ALT升高，龙牙肝泰胶囊与联苯双酯组均能使其降低(P＜0.05)，而剂量仅为联苯双酯的1/2，说明龙牙肝泰的药效较好。

2、龙牙肝泰胶囊对病理改变的影响见表2

表2对急性四氯化碳肝损伤病理改变的影响

注：-肝细胞排列整齐，无变性及坏死

+部分肝细胞浆疏松

++肝细胞浆疏松明显，有脂肪样变细胞，排列较混乱

+++肝细胞排列絮乱有脂肪变样，并有少量嗜酸性及坏死细胞

*与肝损伤组比较*P＜0.05**P＜0.01

△与联苯双酯组比较△P＜0.05△△P＜0.01

经统计学Digid检验，两给药组与联苯双酯组均对肝细胞损伤所至变性及坏死有保护作用，以高剂量组效果为最好。

二.龙牙楤木提取物对大鼠四氯化碳慢性肝损伤的治疗作用

材料：1、药物与试剂：(1)受试品：同前

(2)联苯双酯片：同前

(3)试剂：白蛋白、球蛋白试剂盒、ALT、AST试剂盒。

2、动物：Wister大鼠，雄性，体重130±10g。由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。方法：(1)药液的配置：将龙牙肝泰胶囊的内容物按68mg/Kg、34mg/Kg的剂量，每次3ml/次配置成混悬液备用。联苯双酯亦68mg/Kg的剂量3ml/次配置成混悬液备用。(2)将100只大鼠随机分为5组，即正常对照组、损伤对照组、联苯双酯组、龙牙肝泰胶囊高、低剂量组。正常对照组皮下注射橄榄油5ml/Kg次，其余四组皮下注视10％四氯化碳(用橄榄油配置)5ml/Kg/次，每周两次，持续3个月，与中毒第二个月开始，龙牙肝泰高、低剂量组分别口服68mg/Kg、34mg/Kg的龙牙肝泰胶囊混悬液，联苯双酯组给予68mg/Kg联苯双酯5ml/次，正常对照组和损伤对照组给予同体积水，持续2个月。与末次给药24小时后，断头处死大鼠，取血，分离血清，测定ALT、AST、总蛋白、白蛋白，肝脏取以小部分测定羟脯氨酸，并取肝脏左叶做常规病理检查。

结果：1.丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨基转移酶活力测定见表1

注：与肝损伤对照组对比*P＜0.05**P＜0.01

经统计学分析表明，龙牙肝泰两个剂量组与联苯双酯组均可降低ALT、AST活性(P均小于0.05)，其中高剂量龙牙肝泰组效果尤为显著(P＜0.01)。

2.对大鼠慢性肝损伤羟脯氨酸含量的影响(X±SD)

经统计学分析表明，联苯双酯与龙牙肝泰胶囊均降低肝脏羟脯氨酸(P＜0.05)，其中高剂量龙牙肝泰组效果尤为显著(P＜0.01)。

3.对慢性肝损伤大鼠总蛋白、白蛋白及白/球的测定见表3

表3对慢性肝损伤大鼠总蛋白、白蛋白及白/球的影响(X±SD)

注：与损伤组比较*P＜0.05**P＜0.01

经统计学分析表明，联苯双酯和龙牙肝泰胶囊高剂量组均可增加血清中总蛋白含量，以后者效果为好(P＜0.01)，龙牙肝泰胶囊还能增加白蛋白含量(P＜0.05)，二者均可改善白蛋白与球蛋白的比值。

4、病理检查

病理分析标准：

坏死——“+”肝小叶中央静脉周围有点装坏死，偶见嗜酸小体

“++”肝细胞坏死成灶状或片状，占肝小叶1/3以内

“+++”肝广泛坏死占肝小叶1/2以上

浊肿——“+”肝小叶中央肝细胞成灶性浊肿

“++”肝细胞浊肿占肝小叶的1/3

“+++”肝细胞浊肿占肝小叶的1/2以上

炎细胞浸润——“+”会管区有少量散在的炎细胞

“++”会管区有炎细胞浸润

“+++”会管区及坏死肝细胞周围均可见炎细胞浸润

结果见下表

注：m为平等继续值u0.05＝1.96 u0.01＝2.58

从上表可见，对肝损伤后肝脏的肝细胞浸润和细胞浊肿的减轻，龙牙肝泰胶囊组(平均等级值为5.8、5.2和4.7、4.0)，均优于联苯双酯组(平均等级序值为7.3、6.3)，并且联苯双酯组与损伤组比较无显著差异(P＜0.05)，而龙牙肝泰胶囊组差异显著(P＜0.05或P＜0.01)，但龙牙肝泰胶囊组的平均等级序值(m＝5.0和1.8)均优于联苯双酯组的平均等级序值(m＝5.8)。

结论：

1、对损伤的ALT、AST的升高，龙牙肝泰组明显优于联苯双酯组(P＜0.05或P＜0.01)。

2、对降低损伤后肝脏羟脯氨酸的升高，龙牙肝泰组亦能明显优于联苯双酯组(P＜0.05或P＜0.01)。

3、可增加慢性肝损伤大鼠血清总蛋白、白蛋白含量，并可改善白蛋白与球蛋白的比值。

4、对改善损伤后的肝细胞的变形及炎细胞浸润，龙牙肝泰组明显优于联苯双酯。

通过龙牙肝泰对四氯化碳急性肝损伤的保护作用，和四氯化碳慢性肝损伤的治疗作用的主要药效学研究，结果表明龙牙肝泰胶囊具有较好的保肝降酶的作用，对CCl₄慢性肝损伤所至肝细胞浆疏松、脂肪性变及坏死有明显的保护作用，并可明显改善慢性损伤后肝细胞的变形及炎性浸润，修复坏死细胞。作用明显优于相同剂量的联苯双酯。

【实验例2】本发明药物临床研究实验

一、临床资料

296例患者均符合1984年南宁第三次肝炎会议修订的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准。其中急性肝炎116例，慢性肝炎180例。龙牙肝泰胶囊高剂量治疗组223例，其中急慢性肝炎89例，男58例，女31例，年龄18-44岁，平均30岁，其中急慢黄疸型乙型病毒性肝炎31例，慢性肝炎134例，男69例，女65例，年龄27-62岁，平均45岁。龙牙肝泰胶囊低剂量组73例，急性肝炎21例，男12例，女98例，慢性肝炎52例，男30例，女22例，年龄32-58岁，平均年龄46岁。两组患者随机分组，一般情况尽量一致，使其具有可比性。

二、治疗方法

1、治疗用药物：高剂量治疗组龙牙肝泰胶囊，每粒含龙牙楤木提取物50mg，低剂量治疗组龙牙肝泰胶囊，每粒含龙牙楤木提取物30mg，均由黑龙汪中医药大学中药研究所提供。

2、治疗方法

急性肝炎每次一粒，每日2次，饭后温开水送服，疗程一个月，慢性肝炎每次一粒，每日2次，饭后温开水送服，疗程三个月。

三、疗效判定标准

急性肝炎

(1)无效：主要症状存在，肝区仍有压痛及叩痛，肝功能检查异常。

(2)临床治愈：主要症状消失，肝区无明显压痛及叩痛，肝功能检查正常。

(3)基本治愈：临床治愈各项指标随访半年无异常改变者。乙型肝炎病人的血清乙型肝炎病毒复制标记物转阴。

(4)治愈：临床治愈各项指标随访一年无异常改变者。乙型肝炎病人的血清HbsAg、HbeAg、抗HBc-IgM、HBV-DNA、DNA-P均转阴。

慢性肝炎

(1)基本治愈：自觉症状消失，肝脾肿大稳定不变或缩小，且无明显压痛及叩痛，肝功能检查正常，以上各顼指标稳定一年以上者。

(2)有效：主要症状消失或基本消失，肝脾胂大稳定不变，且无明显压痛及叩痛，肝功能检查正常或原值下降50％以上，并持续3个月者。

(3)无效：疗程结束后，SCPT不下降者。

四、治疗结果

1、急性肝炎经过一个月治疗，其结果见表1。

表1两组急性肝炎治疗后结果及疗效比较表

以上数据经统计学分析，高剂量组治愈率与低剂量组治愈率相比具有显著性差异(P＜0.05)，明显优于低剂量组，总有效率(包括临床治愈率，基本治愈率，治愈率)亦明显优于低剂量组(P＜0.05)。

表2急性黄疸型乙型病毒性肝炎治疗效果

经统计分析高剂量治疗组对急性黄疽型乙型病毒性肝炎的治疗总有效率(治愈率、基本治愈率、临床治愈率)明显高于低剂量组(P＜0.05)。

表3两组慢性肝炎治疗后结果及疗效比较

以上结果经统计学分析表明，高剂量组和低剂量组的基本治愈率有明显差异(P＜0.05)总有效率无明显差异(P＜0.05)，从数据上看高剂量组有优于低剂量组的趋势。

Claims

1.一种治疗肝病的中药，其特征在于药物活性组分可以由以下制备方法制得：取楤木根，粉碎成粗粉，加8～12倍量30～70％乙醇回流提取3～6次，每次3～6小时，合并提取液，调醇浓度至70～90％，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩，烘干。取干膏加8～12倍量5％硫酸∶乙醇(1∶1)回流水解5～8小时，挥散乙醇，加1mol/L氢氧化钠调PH值至7，滤过，弃去滤液，沉淀物烘干，粉碎成细粉，既得本发明的活性组分。

2.根据权利要求1中药物活性组分的制备方法，其特征在于加乙醇浓度范围为30～70％，加醇量为8～12倍，提取次数3～6次，每次3～6小时，合并滤液后，调整醇度范围为70～90％，加5％硫酸∶乙醇(1∶1)量为8～12倍，回流水解时间范围为5～8小时。

3.根据权利要求1中药物活性组分的制备方法，其制备方法优选为：取楤木根，粉碎成粗粉，加10倍量50％乙醇回流提取4次，每次4小时，合并提取液，调醇浓度至85％，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩，烘干。取干膏加10倍量5％硫酸∶乙醇(1∶1)回流水解5～8小时，挥散乙醇，加1mol/L氢氧化钠调PH值至7，滤过，弃去滤液，沉淀物烘干，粉碎成细粉，既得本发明的活性组分。

4.根据权利要求1～3所述的制备方法，与不同辅料混合，本发明活性药物可以制成的剂型包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、滴丸剂等内服剂型。