CN103096734B - 营养组合物 - Google Patents

Abstract

本公开内容涉及用于小儿对象的营养组合物，例如儿童营养产品和婴儿配方，其包含蛋白质源、脂肪源、碳水化合物源和β‑葡聚糖源。

Description

营养组合物

技术领域

本公开内容涉及营养组合物，例如用于小儿对象的基于乳的营养组合物，例如婴儿配方(infant formula)和儿童营养产品。此外，本公开内容进一步涉及用于增强小儿对象免疫功能的方法，包括给予小儿对象有效量的β-葡聚糖，特别是在基于乳的基质(milk-based matrix)中。

背景技术

婴儿和儿童暴露于各种各样的病原体中，因此，传染病发病率的高峰在出生后的前4年内。新生儿通常受出生前通过胎盘和随后出生后通过母乳获得的抗体保护；然而新生儿没有成熟的免疫系统且常常不能启动有效的免疫应答。实际上，在细胞水平，婴儿将白细胞集中在所需位置的能力下降 (Maternity and Gynecologic Care, Bobak, Jensen, Zalar, 第4版, 第470页)。因此，由于其炎症和免疫机制的全身性机能减退，新生儿不能限制入侵的病原体。因此，改善婴儿和/或儿童的免疫应答可提供降低感染发病率和维持或改善小儿对象整体健康的可能。

婴儿肠道微生物区系在出生后的前几周内迅速建立，其对婴儿的免疫系统具有很大影响。该肠道建群的性质最初由宿主与环境微生物源的早期接触及婴儿的健康决定。婴儿是母乳喂养还是配方喂养也对肠道细菌群有强烈影响。

人乳中包含许多可有助于婴儿肠道微生物区系的生长和数目的因子。在这些因子中有超过130种在过渡和成熟乳中高达8-12 g/L水平的不同寡糖的复杂混合物。Kunz等，oligosaccharides in Human Milk: Structure, Functional, and Metabolic Aspects, Ann. Rev. Nutr. 20: 699-722 (2000)。这些寡糖对上胃肠道中的酶消化具有抗性并完整地到达结肠，在此其然后用作结肠发酵的底物。

由于牛奶和可市售获得的基于牛奶的婴儿配方只提供痕量寡糖，可以使用益生元来补充配方喂养的婴儿的饮食。益生元已被定义为不易消化的食物成分，其可通过选择性刺激结肠中可改善宿主健康的一种或有限种细胞的生长和/或活性而对宿主产生有益影响。

由于饮食组分之间以及肠内生态系统的微生物区系之间的相互作用均十分复杂，当作为配方喂养的婴儿的饮食补充剂提供时，婴儿配方或其它小儿营养补充剂的基质可影响益生元和寡糖的功效。此外，配方基质中使用的蛋白质的类型和浓度也可调节肠内小型生物群(Boehm等, Structural and Functional Aspects of Prebiotics Used in Infant Nutrition, The Journal of Nutrition.)。由于人乳是婴儿营养的优选来源，通过允许有效补充作为功能性食物成分的益生元和寡糖提供模仿人乳品质的配方基质是合乎需要的。

因此，提供用于小儿对象的营养组合物将是有益的，所述营养组合物包含刺激免疫系统的营养补充剂，其中所述补充剂在不抑制补充剂有益效果的配方基质中提供。此外，提供通过给予小儿对象耐受良好的营养组合物来增强和改善小儿对象免疫应答的方法将是有益的。

发明的公开内容

因此，简单来说，在一个实施方案中，本公开内容涉及用于小儿对象的营养组合物，特别是基于乳的营养组合物，其包含脂质或脂肪、蛋白质源和β-葡聚糖源。在某些实施方案中，β-葡聚糖源为β-1,3-葡聚糖源。在其它实施方案中，β-葡聚糖源为β-1,3;1,6-葡聚糖源。此外在一些实施方案中，所述营养组合物进一步包含长链多不饱和脂肪酸源，所述长链多不饱和脂肪酸包括二十二碳六烯酸(DHA))和/或益生元组合物(包括多种寡糖)，使得在延长的时间内，益生元组合物的总体发酵速率概况提供增加的人肠道有益菌数目。所述益生元组合物可包含多种寡糖，使得至少一种寡糖的发酵速率相对快速且至少一种寡糖的发酵速率相对缓慢，寡糖的组合借此提供有益的总体发酵速率。在某些实施方案中，益生元包括半乳寡聚糖和聚葡萄糖的组合。

本公开内容还涉及营养组合物，在一些实施方案中，其包含：

a. 多达约7 g/100 kcal的脂肪或脂质，更优选约3至约7 g/100 kcal的脂肪或脂质；

b. 多达约5 g/100 kcal的蛋白质源，更优选约1至约5 g/100 kcal的蛋白质源；

c. 约5至约100 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸(包括DHA)源，更优选约10至约50 mg/100 kcal的长链多不饱和脂肪酸(包括DHA)源；

d. 约1.0至约10.0 g/L，更优选约2.0 g/L至约8.0 g/L的益生元组合物(其包含多种寡糖)，使得在延长的时间内，益生元组合物的总体发酵速率概况提供肠道增加的有益菌数目；和

e. β-葡聚糖源。

在某些实施方案中，所述营养组合物包含基于乳的基质。

在又一个实施方案中，本发明涉及具有改善的消化率的营养组合物，所述组合物包含基于乳的基质、脂质或脂肪、蛋白质源、长链多不饱和脂肪酸(包括二十二碳六烯酸(DHA))源、包含至少20%寡糖混合物(其包含聚葡萄糖和半乳寡聚糖)的益生元组合物和β-1,3-葡聚糖源。

在又一个实施方案中，本公开内容教导通过给予小儿对象在基于乳的基质中的β-葡聚糖来增强小儿对象免疫系统功能的方法。

应理解的是，前面的一般性描述和后文的详细描述均呈现本公开内容的实施方案，且旨在提供概述或框架，用于理解所要求保护公开内容的性质和特征。本说明书用于解释要求保护的主题的原理和操作。在阅读下面的公开内容时，本公开内容的其它和进一步的特征和优点对本领域技术人员将很快清楚明了。

附图简述

图1图示了若干样品的平均荧光强度(MFI)，显示与未处理、仅用WGP葡聚糖或仅用基质处理的小鼠相比，用基于乳的配方基质加WGP葡聚糖处理的小鼠中，粒细胞呼吸爆发增强。

图2图示了若干样品的FL1-H荧光，显示与未处理或WGP处理或基质处理的小鼠相比，用基于乳的配方基质加WGP葡聚糖处理的小鼠中，呼吸爆发增强。

图3图示了在用WGP葡聚糖加基于乳的基质处理的小鼠中，IL-6水平升高。

实施本发明的最佳模式

现在将详细提及本公开内容的实施方案，其中的一个或多个实施例在下文阐述。每个实施例均通过解释本公开内容的营养组合物的方式提供，且不作为限制。事实上，对本领域技术人员而言将清楚明了的是，可对本公开内容的教导进行多种修饰和变更而不脱离本公开内容的范围和精神。例如，作为一个实施方案的部分进行说明或描述的特征可用于另一个实施方案从而得到更进一步的实施方案。

因此，本公开内容意欲涵盖在所述权利要求书及其等价实施方案范围内的这些修饰和变更。本公开内容的其它目的、特征和方面在下文的详述中公开或从下文的详述中显而易见。本领域普通技术人员应理解，本发明论述仅为实例性实施方案的说明，并非意在限制本公开内容更广泛的方面。

“营养组合物”意指满足对象至少部分营养物需求的物质或配方。

“小儿对象”意指年龄小于13岁的人。在一些实施方案中，小儿对象指小于8岁的人对象。

“婴儿”意指年龄在出生至不超过约1岁的范围内的对象，包括矫正年龄(corrected age)在0至约12个月的婴儿。术语婴儿包括低出生体重婴儿、极低出生体重婴儿和早产儿。短语“矫正年龄”意指婴儿的实际年龄减去婴儿早产的时间数量。因此，如果是足月的，矫正年龄为婴儿的年龄。

“儿童”意指年龄在约12个月至约13岁的范围内的对象。在一些实施方案中，儿童为年龄在1至12岁之间的对象。在其它实施方案中，术语“儿童(children或child)”指2、3、4、5或6岁的对象。在其它实施方案中，术语“儿童”指约12个月至约13岁之间的任何年龄范围的对象。

“儿童营养产品”指满足儿童至少部分营养物需求的组合物。

“婴儿配方”意指满足婴儿至少部分营养物需求的组合物。在美国，婴儿配方的内容物由联邦法规规定，在21 C.F.R.第100、106、107部分阐述。这些法规规定大量营养物、维生素、矿物质和其它成分的水平，旨在刺激人类母乳的营养和其它性质。

“营养完全的”意指可用作营养的唯一来源的组合物，其可供应基本上所有日常所需量的维生素、矿物质和/或微量元素以及蛋白质、碳水化合物和脂质。

“益生菌(Probiotic)”意指具有低或无致病性并对宿主的健康产生有益效果的微生物。

“益生元”意指不易消化的食物成分，其通过选择性刺激一种或有限种消化道中可改善宿主健康的细菌的生长和/或活性而对宿主产生有益影响。

“有效量”意指在对象中提供刺激免疫效果的量。

“β-葡聚糖”意指所有的β-葡聚糖，包括β-1,3-葡聚糖和β-1,3;1,6-葡聚糖，每个为β-葡聚糖的特定类型。此外，β-1,3;1,6-葡聚糖为β-1,3-葡聚糖的一种。因此，术语“β-1,3-葡聚糖”包括β-1,3;1,6-葡聚糖。

“基于乳的基质”意指包含至少一种已从哺乳动物的乳腺中取出或提取的组分的介质。在一些实施方案中，所公开营养组合物的基于乳的基质包含衍生自家养有蹄类动物、反刍动物、人或其任意组合的乳组分。此外，在一些实施方案中，基于乳的基质包含酪蛋白、乳清蛋白、乳糖或其任意组合。本公开内容基于乳的基质可进一步包含本领域已知的任何乳衍生的或基于乳的产品。

本公开内容描述用于对象的营养组合物，在一些实施方案中，其包含基于乳的基质、碳水化合物源、脂质源、蛋白质源和β-葡聚糖特别是β-1,3;1,6-葡聚糖源，其中，β-葡聚糖和基于乳的基质提供协同效应从而刺激小儿对象的免疫系统。

本公开内容还描述增强小儿对象免疫功能的方法，其包括给予有效量的包含碳水化合物源、脂质源、蛋白质源和β-葡聚糖源的营养组合物。

用于实施本发明的合适的脂肪或脂质源可包括任何本领域已知的脂质源，包括但不限于动物来源(例如乳脂(milk fat)、黄油、乳脂(butter fat)、蛋黄脂质)、海产来源(例如鱼油、海产油、单细胞油)、蔬菜和植物油(例如玉米油、芥花子油(canola)、葵花油、豆油、棕榈油(palmolein)、椰子油、高油葵花油、月见草油、菜籽油、橄榄油、亚麻籽油、棉籽油、高油红花油、棕榈硬脂、大豆卵磷脂、棕榈仁油、麦胚油、中链甘油三酯)。

可用于实施本发明的牛乳蛋白源包括，但不限于，乳蛋白粉、乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物、脱脂乳固体、脱脂乳、脱脂奶粉、乳清蛋白、乳清蛋白分离物、乳清蛋白浓缩物、甜乳清、酸乳清、酪蛋白、酸性酪蛋白、酪蛋白酸盐(例如，酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钠钙、酪蛋白酸钙)及其任意组合。

在一个实施方案中，蛋白作为完整蛋白提供。在其它实施方案中，蛋白作为完整蛋白和部分水解蛋白两者的组合提供，其水解程度在约4%至10%之间。在某些其它实施方案中，蛋白更完全地水解。在又一个实施方案中，蛋白源可补充有包含谷氨酰胺的肽。

在本发明一个具体实施方案中，蛋白质源的乳清:酪蛋白比例与人母乳中存在的比例相似。在一个实施方案中，蛋白质源包含约40%至约80%的乳清蛋白和约20%至约60%的酪蛋白。

在本公内容的某些实施方案中，所述营养组合物可包含一种或多种益生菌。任何本领域已知的益生菌在该实施方案中均可接受，只要其取得预期结果。在一个具体实施方案中，益生菌可选自任何乳酸杆菌(Lactobacillus)种类、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus) GG、双歧杆菌(Bifidobacterium)种类、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis subsp. lactis) BB-12或其组合。

若在组合物中包含益生菌，则益生菌的量可在约10⁴至约10¹⁰个菌落形成单位(cfu)/kg体重/天之间变化。在另一个实施方案中，益生菌的量可在约10⁶至约10⁹个cfu/kg体重/天之间变化。在又另一个实施方案中，益生菌的量可至少约10⁶ cfu个/kg体重/天。

在一个实施方案中，益生菌可为有活力的或无活力的。如本文所使用的，术语“有活力的”意指有生命的微生物。术语“无活力的”或“无活力的益生菌”意指无生命的益生菌微生物、其细胞组分和/或其代谢产物。所述无活力的益生菌可为已经加热灭活或其它方式灭活，但其保留有利影响宿主健康的能力。本发明有用的益生菌可为天然存在的、合成的或通过对生物的基因操作而开发的，无论这些新的来源是目前已知还是日后开发的。

所述营养组合物包含一种或多种益生元。本文使用的术语“益生元”指对宿主产生健康益处的不易消化的食物成分。这些健康益处可包括，但不限于，对一种或有限种有益肠道细菌的生长和/或活性的选择性刺激、对摄入的益生菌微生物的生长和/或活性的刺激、肠道病原体的选择性减少和对肠道短链脂肪酸概况的有利影响。所述益生元可为天然存在的、合成的或通过对生物和/或植物的基因操作发展而来，无论这些新来源是目前已知还是日后开发的。本发明有用的益生元可包括寡糖、多糖和其它包含果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的益生元。更特别地，本发明有用的益生元可包括聚葡萄糖、聚葡萄糖粉、乳果糖、乳果寡糖(lactosucrose)、棉子糖、寡聚葡萄糖、菊粉、寡聚果糖、寡聚异麦芽糖、大豆寡糖、乳果寡糖、寡聚木糖、寡聚壳糖、寡聚甘露糖、寡聚阿拉伯糖(aribino-oligosaccharide)、唾液酸寡糖、寡聚岩藻糖(fuco-oligosaccharide)、寡聚半乳糖和龙胆寡糖(gentio-oligosaccharide)。

在一个实施方案中，营养组合物中存在的益生元的总量可为组合物的约1.0 g/L至约10.0 g/L。更优选营养组合物中存在的益生元的总量可为组合物的约2.0 g/L至约8.0g/L。至少20%的益生元可包含寡聚半乳糖和聚葡萄糖的混合物。在一个实施方案中，营养组合物中寡聚半乳糖和聚葡萄糖各自的量可在约1.0 g/L至约4.0 g/L的范围内。

在一个实施方案中，营养组合物中寡聚半乳糖的量可为约0.1 mg/100 Kcal至约1.0 mg/100 Kcal。在另一个实施方案中，营养组合物中寡聚半乳糖的量可为约0.1 mg/100Kcal至约0.5 mg/100 Kcal。在一个实施方案中，营养组合物中聚葡萄糖的量可在约0.1mg/100 Kcal至约0.5 mg/100 Kcal的范围内。在另一个实施方案中，聚葡萄糖的量可为约0.3 mg/100 Kcal。在一个具体实施方案中，寡聚半乳糖和聚葡萄糖以至少约0.2 mg/100Kcal并可为约0.2 mg/100 Kcal至约1.5 mg/100 Kcal的总量添加至营养组合物。

本发明营养组合物包含长链多不饱和脂肪酸(LCPUFA)，其包括二十二碳六烯酸(DHA)源。其它合适的LCPUFA包括，但不限于，α-亚油酸、γ-亚油酸、亚油酸、二十碳五烯酸(EPA)和花生四烯酸(ARA)。

在一个实施方案中，所述营养组合物补充有DHA和ARA二者。在该实施方案中，ARA:DHA的重量比率可为约1:3至约9:1。在本发明一个实施方案中，该比率为约1:2至约4:1。

营养组合物中长链多不饱和脂肪酸的量有利地为至少约5 mg/100 Kcal，并可在约5 mg/100 kcal至约100 mg/100 kcal，优选约10 mg/100 kcal至约50 mg/100 kcal之间变化。

可使用本领域标准技术，向营养组合物中添加包含DHA和ARA的油类。例如，可通过替代当量的组合物中通常存在的油类，例如高油葵花油将DHA和ARA添加至组合物中。如另一个实施例，可通过替代当量的无DHA和ARA组合物中通常存在其余全部脂肪混合物将包含DHA和ARA的油类添加至组合物中。

如果利用，DHA和ARA源可为本领域已知的任何来源，例如海产油、鱼油、单细胞油、蛋黄脂质和脑脂质。在一些实施方案中，DHA和ARA来源于单细胞Martek油DHASCO®，或其变体。DHA和ARA可为天然形式，只要LCPUFA源的其余部分对婴儿不造成实质性的有害作用。或者，DHA和ARA可以以精制的形式使用。

在本发明一个实施方案中，如美国专利号5,374,567、5,550,156和5,397,591所教导的，DHA和ARA源为单细胞油，这些专利的公开内容通过引用以其整体结合到本文中。然而，本发明不仅限于这些油类。

正如提到的，公开的营养组合物在其各实施方案中包含β-葡聚糖源。葡聚糖为多糖，特别地为葡萄糖的聚合物，其可为天然存在的且可存在于细菌、真菌、酵母和植物的细胞壁中。贝塔葡聚糖(β-葡聚糖)本身为葡萄糖聚合物的不同亚类，葡萄糖聚合物由葡萄糖单体链组成，其通过β型糖苷键连接在一起以形成复合碳水化合物。

β-1,3-葡聚糖为从例如酵母、蕈类、细菌、藻类或谷类中纯化得到的碳水化合物聚合物(Stone BA, Clarke AE. Chemistry and Biology of (1-3)-Beta-Glucans.London:Portland Press Ltd; 1993. )。β-1,3-葡聚糖的化学结构依赖于β-1,3-葡聚糖的来源。此外，各种生理化学参数，例如溶解度、一级结构、分子量和分支在β-1,3-葡聚糖的生物活性中发挥作用(Yadomae T., Structure and biological activities of fungalbeta-1,3-Glucans. Yakugaku Zasshi. 2000;120:413-431.)。

β-1,3-葡聚糖为天然存在的多糖，具有或不具有各种植物、酵母、真菌和细菌细胞壁中存在的β-1,6-葡萄糖侧链。β-1,3;1,6-葡聚糖为包含具有侧链连接在(1,6)位的(1,3)连接的葡萄糖单元的β-1,3;1,6-葡聚糖。β-1,3;1,6葡聚糖为共享结构共性的异质组，包括由β-1,3键连接的直链葡萄糖单元主链，且具有自该主链延伸的1,6连接的葡萄糖分支。虽然这是现在描述的β-葡聚糖类的基本结构，但可存在一些变体。例如，某些酵母β-葡聚糖具有延伸自β(1,6)分支的额外β(1,3)分支区域，其进一步增加了其各结构的复杂性。

衍生自面包酵母、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的β-葡聚糖由在1和3位连接的D-葡萄糖分子链组成，在1和6位具有葡萄糖侧链连接。酵母-衍生的β-葡聚糖为不溶的、纤维样复合糖，具有以下一般性结构：具有β-1,3主链的直链葡萄糖单元，其散布有β-1,6侧链，长度通常为6-8个葡萄糖单元。更特别地，衍生自面包酵母的β-葡聚糖为聚-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1,3)-β-D-吡喃葡萄糖。

此外，已发现β-葡聚糖具有刺激成人免疫系统的能力。事实上，这些多糖中多种已显示与单核细胞、巨噬细胞和中性粒细胞上的β-1,3-葡聚糖受体结合(Czop, J.K和Austen, K.F. (1985). β-glucans activate cellular immunity primarily throughmacrophages and neutrophils (β-葡聚糖主要通过巨噬细胞和中性粒细胞激活细胞免疫). Properties of glycans that activate the human alternate complementpathway and interact with the human monocyte beta glucan receptor (激活人补体旁路并与人单核细胞β-葡聚糖受体相互作用的葡聚糖的性质). J. Immuno. 135, 3388-3393)。然而，β-葡聚糖尚未被确定为提供本公开内容的益处并可给予小儿对象的物质。

事实上，众所周知婴儿的肠道微生物区系不如成人的发达。成年人的微生物区系由超过10¹³个微生物和将近500种组成，而婴儿的肠道微生物区系在绝对数目和物种多样性上均仅包含上述微生物的小部分。由于细菌数目和种类在婴儿或儿童肠道与成人肠道之间有很大不同，不能假定对成人具有有益作用的益生元物质也可对婴儿和/或儿童具有有益作用。

正如已提到的，葡聚糖为属于被描述为生物防御调节物的生理活性化合物组的多糖。β-1,3;1,6葡聚糖为引发免疫监视的多糖级分，当作为本公开营养组合物的部分给予时，其可通过刺激免疫功能减少儿童或婴儿的微生物相关疾病。此外，β-葡聚糖在小儿对象中耐受良好且不产生或导致过剩气体、腹胀、胃气胀或腹泻。当与基于乳的基质同时给予以提供协同、刺激免疫效果时，β-葡聚糖作为免疫系统刺激剂的功效先前尚未被证实。

在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物包含β-葡聚糖和基于乳的基质，其中当该两种成分的组合掺入到营养组合物时，其提供协同效应。所得营养组合物对对象的呼吸爆发能力具有刺激效应。更特别地，在一些实施方案中，β-1,3;1,6-葡聚糖与基于乳的基质的组合提供增加对象中性粒细胞数目的效果。

当暴露在某些刺激中时，吞噬细胞，包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核巨噬细胞对葡萄糖和氧的消耗大大增加，并开始在被称为“呼吸爆发”的一系列变化中产生大量超氧化物(O₂)和过氧化氢(H₂O₂)。呼吸爆发产生的含氧化合物在被称为氧依赖性胞内杀伤过程中杀伤入侵的细菌或病原体。因此，刺激对象的呼吸爆发增强所述对象的免疫系统。

为证明该效果，可在体内实验中评估β-葡聚糖在基于乳的配方存在或不存在时的生物活性。可用于实验的一种基于乳的配方为可市售获得配方Enfagrow® (可自MeadJohnson & Company, Evansville, IN, U.S.A.获得)。β-葡聚糖可包括Wellmune WGP®(可得自Biothera, Eagan, MN, U.S.A.)。

对于体内研究，用β-葡聚糖 (1 mg/小鼠/天)单独或与基于乳的配方混合喂养小鼠最多十天。仅用盐水或基于乳的配方类似喂养的小鼠用作对照。在鼠模型中，口服β-葡聚糖的摄取通过小肠的淋巴集结进行。由淋巴集结吸收的颗粒随后随着其通过巨噬细胞转运而进入体循环。随后，在巨噬细胞内发生降解，将β-葡聚糖断裂成小片段，这些小片段可随后活化中性粒细胞。评估总细胞数目，以及中性粒细胞呼吸爆发活性、巨噬细胞和树突细胞上的活化标志物和细胞因子的血清水平。

口服给药后，分离血细胞并计数。这些细胞显示与PBS未处理小鼠相比，用配方基质或β-葡聚糖处理的小鼠在第十天时具有明显更高的中性粒细胞计数。这是数据提示β-葡聚糖和配方基质可刺激中性粒细胞活动化并可在抗微生物的保护性应答中起重要作用。仅基于乳的配方、仅β-葡聚糖和二者的组合使中性粒细胞的数目与对照相比显著增加。

图1和2显示中性粒细胞的呼吸爆发，表明β-葡聚糖和基于乳的基质之间具有协同作用，其显著增加中性粒细胞呼吸爆发。通过对比，仅β-葡聚糖单独和仅基于乳的配方二者的呼吸爆发效应均只比对照略高。事实上，β-葡聚糖与基于乳的配方的组合对呼吸爆发具有协同效应，其呼吸爆发显著高于对照。此外，图1和2说明β-葡聚糖和基于乳的基质具有促进中性粒细胞呼吸爆发的协同效应。

如图3所示，与仅接受基于乳的配方的小鼠相比，用β-葡聚糖加配方基质处理的小鼠中IL-6水平也显著提高。图3显示，与仅接受基于乳的配方的小鼠相比，仅接受WGP® β-葡聚糖及接受β-葡聚糖和基于乳的配方的小鼠中IL-6均显著上调。

因此，体内实验证明β-葡聚糖和基于乳的配方基质一起口服给药显著增加外周血中性粒细胞计数并促进中性粒细胞呼吸爆发活性。事实上，关于免疫细胞功能方面，即中性粒细胞氧化爆发，基于乳的配方基质与β-1,3;1,6-葡聚糖之间存在协同作用。此外，基于乳的基质存在或不存在时β-葡聚糖在体内均能引起IL-6分泌增加。

因此，将β-葡聚糖添加至用于小儿对象的基于乳的营养组合物，例如婴儿配方或儿童营养产品中，可通过增强对入侵病原体的抵抗力改善对象的免疫应答从而维持或改善整体健康。β-1,3;1,6-葡聚糖能够通过先天免疫系统的细胞诱导应答。其继而可激活获得性免疫。因此，β-1,3;1,6-葡聚糖通过增加中性粒细胞计数和增强呼吸爆发能力引发宿主免疫系统的能力增强对象的免疫应答。

当口服给药时，β-1,3-葡聚糖，例如β-1,3;1,6-葡聚糖，不是通过消化系统的代谢过程直接吸收。事实上，酵母β-葡聚糖摄入后未发生明显的全身性暴露；然而，少量的不溶的β-葡聚糖颗粒通过小肠的淋巴集结摄取，这些颗粒随后随着其通过巨噬细胞转运而进入体循环。巨噬细胞吞噬β-葡聚糖后，摄入的β-葡聚糖的小片段从巨噬细胞释放。这些片段引发中性粒细胞和淋巴细胞，例如自然杀伤(NK)细胞。此外，β-葡聚糖可刺激细胞因子产生且还可刺激T淋巴细胞(T细胞)。该β-葡聚糖作用机制可将先天免疫系统的激活与获得性免疫的激活联系起来。

因此，在一些实施方案中，β-1,3-葡聚糖，或更特别地β-1,3;1,6-葡聚糖的使用增强免疫系统功能。例如，β-1,3;1,6-葡聚糖的使用可增强对感染的抵抗力和/或减少炎性反应。在至少一个实施方案中，本公开内容涉及用于增强小儿对象免疫系统功能的方法，其包括给予对象基于乳的基质中的β-1,3;1,6-葡聚糖源。在另一个实施方案中，本公开内容涉及用于增强小儿对象对感染的抵抗力的方法，其包括给予对象基于乳的基质中的β-1,3;1,6-葡聚糖。在又另一个实施方案中，本公开内容涉及用于减少小儿对象中由广谱细菌和病毒病原体引起的感染的持续时间和严重程度的方法，其包括给予小儿对象基于乳的基质中的β-葡聚糖。在又另一个实施方案中，本公开内容涉及用于减少小儿对象中伴随所述感染的炎性反应的方法，其包括给予小儿对象基于乳的基质中的β-葡聚糖。

本公开内容的营养组合物包含β-1,3-葡聚糖。在一些实施方案中，所述β-1,3-葡聚糖为β-1,3;1,6-葡聚糖。在一些实施方案中，所述β-葡聚糖为全葡聚糖颗粒β-葡聚糖、颗粒β-葡聚糖、PGG-葡聚糖(聚-1,6-β-D-吡喃葡萄糖基-1,3-β-D-吡喃葡萄糖)或其任何混合物。在其它实施方案中，所述营养组合物包含β-1,3;1,6-葡聚糖，β-1,3;1,6-葡聚糖可以以全葡聚糖颗粒β-葡聚糖、颗粒或微粒β-葡聚糖或其任何组合的形式提供。

本公开内容的β-葡聚糖为抵抗上部肠道消化的寡聚体，意指其被上部肠道的消化酶最低程度地降解。可自其提取用于实施本公开内容的合适β-1,3;1,6-葡聚糖的物种的非限制性实例包括酿酒酵母(面包酵母)、香菇(Lentinus edodes) (香菇)、灰树花(Grifola frondosa) (舞茸蘑菇)、裂褶菌(Schizophillum commune)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、真菌多糖菌(Sclerotium glucanicum)等。在一些实施方案中，本公开内容的β-1,3;1,6-葡聚糖从酵母、蕈类或其它真菌中分离。在一个实施方案中，β-葡聚糖衍生自面包酵母，更特别地，β-葡聚糖获自面包酵母的细胞壁。同样地，颗粒β-1,3;1,6葡聚糖可自酿酒酵母的细胞壁分离。具有β-1,6-葡聚糖连接的β-1,3-葡聚糖作为非特异性免疫激活剂从酵母细胞壁中提取。在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物包含由β-1,3葡萄糖的长聚合物(主链葡萄糖单元的约3-6%具有β-1,6分支)组成的β-葡聚糖。在其它实施方案中，所述β-葡聚糖可为Biothera of Eagan, Minnesota, USA提供的颗粒Wellmune WGP® β-葡聚糖。在一些实施方案中，所述营养组合物包含不溶的具有至少一个β-1,6分支的β-1,3-葡聚糖。

在一个实施方案中，本公开内容的营养组合物包含不溶的β-葡聚糖。一些天然存在的β-葡聚糖在水中是不溶的，且可为具有相对高的分子量的非常大的分子。人无法消化具有β-糖苷键的碳水化合物聚合物。由于人无法消化具有β-糖苷键的碳水化合物聚合物，所以对颗粒酵母β-葡聚糖的肠上皮吸收和显著暴露不会发生。然而，口服给药后确实发生一些全身性暴露，且调控在小肠的淋巴集结内。通过淋巴集结吸收的β-葡聚糖接着由巨噬细胞转运至网状内皮系统。在一些实施方案中，可用酶处理营养组合物的β-葡聚糖以减小其颗粒大小或控制其分子量。

在一些实施方案中，所述营养组合物的β-葡聚糖起益生元的作用，其在人胃和小肠中不被消化，保留(survive)大致完整地进入结肠，在该处可用于微生物发酵。在一些实施方案中，营养组合物中的β-葡聚糖可包括水溶性、低分子量β-葡聚糖。此外，在一些实施方案中，营养组合物可包含酶促处理的β-葡聚糖。在又其它实施方案中，营养组合物包含全酵母β-葡聚糖颗粒。

在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物可包含β-1,3;1,6-葡聚糖作为用于小儿对象的营养产品例如儿童产品或婴儿配方的一部分。在其它实施方案中，本公开内容的营养组合物可基本不含乳糖。

在一个实施方案中，组合物中存在的β-葡聚糖的量为约0.010至约0.050 g /100g组合物。在一些实施方案中，营养组合物每份包含约10 mg β-葡聚糖。在另一个实施方案中，营养组合物每份包含约5至约50 mg β-葡聚糖。在其它实施方案中，营养组合物包含足以每天提供约40 mg β-葡聚糖的β-葡聚糖量。在一些实施方案中，可以以每天递送给对象约38 mg β-葡聚糖目标的浓度将β-葡聚糖添加至营养组合物中。营养组合物可以以多次剂量递送以使全天递送至对象的β-葡聚糖达到目标量。

在一些实施方案中，本公开内容的营养组合物可以以足够递送约0.5 mg至约200mg/天范围内的β-葡聚糖的量给予小儿对象。在另一个实施方案中，通过营养组合物给予小儿对象的β-葡聚糖的量可在约1 mg至约100 mg/天的范围内。在又另一个实施方案中，可将营养组合物配制为每天递送给小儿对象约20 mg至约50 mg。在又另一个实施方案中，通过营养组合物给予小儿对象的β-葡聚糖的量可为约35 mg/天。

在另一个实施方案中，儿童产品为每天服用1-3次的呈可重新溶解粉末形式的乳替代物，且给予儿童的β-葡聚糖的量可在约25至约50 mg/天β-葡聚糖的范围内。在又一个实施方案中，对于小儿对象，推荐每天三份营养组合物，各递送总共约25至约50 mg/天的β-葡聚糖。

在一个实施方案中，包含β-1,3-葡聚糖的营养组合物作为营养全面的婴儿配方提供，其包含合适类型和量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。在该实施方案中，碳水化合物的量可在约8至约12 g/100 kcal之间变化，蛋白质约1至约5 g/100 kcal，脂质或脂肪约3至约7 g/100kcal，并可添加包含约5至约577 mg/100 kcal的量的β-1,3;1,6-葡聚糖。

本公开内容的营养组合物可为基于乳的，呈液体、蒸发、浓缩(condense)或奶粉的形式。在一些实施方案中，营养组合物还可包含非乳制品液体或固体食物产品、蛋白质、调味剂或风味掩蔽剂、增甜剂和维生素或膳食补充剂。

在一些实施方案中，营养组合物可为营养完全的，包含合适类型和量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质，以作为对象的唯一营养源。在一个实施方案中，营养组合物为儿童营养产品。在另一个实施方案中，营养组合物包括婴儿配方。在又一个实施方案中，营养组合物包括营养完全的婴儿配方。在又另一个实施方案中，营养组合物包括营养完全的儿童营养产品。

本公开营养组合物可以以任何本领域已知的形式提供，例如粉末、凝胶、混悬液、糊状物、固体、液体、液体浓缩物、重新溶解的粉末状乳替代物或随时可用的产品。在某些实施方案中，营养组合物可包括营养补充剂、儿童营养产品、婴儿配方、人乳强化剂、成长奶(growing up milk)或任何其它为小儿对象设计的营养组合物。本公开内容的营养组合物包括，例如可口服摄取的、促进健康的物质，包括例如，咀嚼食物、饮料、片剂、胶囊和粉末。本公开内容的营养组合物可对具体卡路里含量进行标准化，其可作为随时可用的产品提供，或其可以浓缩的形式提供。

在提供儿童营养产品的实施方案中，可以以足以提供1至13岁儿童的日常营养需求的量添加一种或多种维生素和/或矿物质。本领域普通技术人员应理解的是，年龄在1至13岁之间的儿童对维生素和矿物质的需求将不同。因此，这些实施方案并非意欲将营养组合物限制在特定的年龄组，而是提供适用于1至13岁儿童的范围。

在提供用于儿童的营养组合物的实施方案中，所述组合物可任选包含，但不限于，下列维生素或其衍生物中的一种或多种：维生素B₁ (硫胺素、焦磷酸硫胺素、TPP、三磷酸硫胺素、TTP、盐酸硫胺素、一硝酸硫胺素)、维生素B₂ (核黄素、黄素单核苷酸、FMN、黄素腺嘌呤二核苷酸、FAD、核黄素、卵黄素)、维生素B₃ (尼克酸、烟酸、烟酰胺、尼克酰胺、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、NAD、烟酸单核苷酸、NicMN、吡啶-3-甲酸)、维生素B₃-前体色氨酸、维生素B₆(吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、盐酸吡哆醇)、泛酸(泛酸盐、泛醇)、叶酸盐(叶酸、叶酸类似物、蝶酰谷氨酸)、维生素B₁₂ (钴胺素、甲钴胺、脱氧腺苷钴胺素、氰钴胺、羟钴胺素、腺苷钴胺素)、生物素、维生素C (抗坏血酸)、维生素A (视黄醇、视黄醇乙酸酯、视黄醇棕榈酸酯、具有其它长链脂肪酸的视黄酯、视黄醛、视黄酸、视黄醇酯)、维生素D (钙化醇、胆钙化醇、维生素D₃、1,25,-二羟维生素D)、维生素E (α-生育酚、α-生育酚乙酸酯、α-生育酚琥珀酸酯、α-生育酚烟酸酯、γ-生育酚)、维生素K (维生素K₁、叶绿醌、萘醌、维生素K₂、甲基萘醌-7、维生素K₃、甲基萘醌-4、甲萘醌、甲基萘醌-8、甲基萘醌-8H、甲基萘醌-9、甲基萘醌-9H、甲基萘醌-10、甲基萘醌-11、甲基萘醌-12、甲基萘醌-13)、胆碱、肌醇、β-胡萝卜素及其任何组合。

在提供儿童营养产品的实施方案中，所述组合物可任选包括，但不限于，下列矿物质或其衍生物的一种或几种：硼、钙、醋酸钙、葡萄糖酸钙、氯化钙、乳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、氯化物、铬、氯化铬、吡啶甲酸铬(chromium picolonate)、铜、硫酸铜、葡萄糖酸铜、硫酸铜、氟化物、铁、羰基铁、三价铁、富马酸亚铁、正磷酸铁、铁研制剂(iron trituration)、多糖铁、碘化物、碘、镁、碳酸镁、氢氧化镁、氧化镁、硬脂酸镁、硫酸镁、锰、钼、磷、钾、磷酸钾、碘化钾、氯化钾、醋酸钾、硒、硫、钠、多库酯钠、氯化钠、硒酸钠、钼酸钠、锌、氧化锌、硫酸锌及其混合物。矿物质化合物的非限制性示例性衍生物包括任何矿物质化合物的盐、碱性盐、酯和螯合物。

矿物质可以以盐例如磷酸钙、甘油磷酸钙、柠檬酸钠、氯化钾、磷酸钾、磷酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸镁和亚硒酸钠的形式添加至儿童营养组合物中。可添加本领域所公知的额外的维生素和矿物质。

在一个实施方案中，儿童营养组合物每份可包含约10至约50%最大饮食推荐的(对于任何给定的国家)或约10至50%平均饮食推荐的(对于一组国家)维生素A、C和E、锌、铁、碘、硒和胆碱。在另一个实施方案中，儿童营养组合物每份可提供约10-30%最大饮食推荐的(对于任何给定的国家)或约10-30%平均饮食推荐的(对于一组国家)的维生素B。在又另一个实施方案中，儿童营养产品中的维生素D、钙、镁、磷和钾的水平可与乳中存在的平均水平一致。在其它实施方案中，儿童营养组合物中的其它营养物可以以每份约20%最大饮食推荐(对于任何给定国家)或约20%平均饮食推荐(对于一组国家)存在。

本公开内容的儿童营养组合物可任选包含下列调味剂中的一种或多种，包括但不限于，调料提取物、挥发油、可可或巧克力调味剂、花生酱调味剂、饼干屑、香草或任何可市售获得的调味剂。有用的调味剂的实例包括，但不限于，纯茴香提取物、仿制香蕉提取物、仿制樱桃提取物、巧克力提取物、纯柠檬提取物、纯橙子提取物、纯薄荷提取物、蜂蜜、仿制菠萝提取物、仿制朗姆酒(imitation rum)提取物、仿制草莓提取物或香草提取物、或挥发油(例如香脂油、月桂油、香柠檬油、柏木油、樱桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油)、花生酱、巧克力调味剂、香草饼干屑、奶油糖果、太妃糖，及其混合物。调味剂的量可有很大变化，这取决于使用的调味剂。可依照本领域所公知的选择调味剂的类型和量。

本公开内容的营养组合物可任选包括一种或多种可添加以稳定最终产品的乳化剂。合适的乳化剂的实例包括，但不限于，卵磷脂(例如来自鸡蛋或大豆)、α乳清蛋白和/或单-和二-甘油酯，及其混合物。其它乳化剂对于技术人员是显而易见的，合适乳化剂的选择将部分取决于配方和终产品。

本公开内容的营养组合物可任选包含一种或多种还可添加以延长产品保质期的防腐剂。合适的防腐剂包括，但不限于，山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠、EDTA钙二钠，及其混合物。

本公开内容的营养组合物可任选包含一种或多种稳定剂。用于实施本公开内容的营养组合物的合适的稳定剂包括，但不限于，阿拉伯树胶、盖提胶(gum ghatti)、刺梧桐胶、西黄蓍胶、琼脂、帚叉藻聚糖、瓜尔豆胶、结冷胶(gellan gum)、刺槐豆胶、果胶、低甲氧基果胶、明胶、微晶纤维素、CMC (羧甲基纤维素钠)、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、DATEM (单-和二甘油酯的二乙酰酒石酸酯)、葡聚糖、角叉菜胶，及其混合物。

本文中使用的所有百分比、份和比率均按总配方的重量计，除非另有说明。

本公开内容的营养组合物可基本不包含任何本文描述的任选或选择成分，只要剩余的营养组合物仍包含本发明所描述的所有所需成分或特征。在本发明上下文中，除非另有说明，术语“基本不包含”意指所选组合物可包含小于功能量的任选成分，通常小于0.1%重量，也包括0%重量的该任选或选择成分。

本公开内容针对单个特性或限制的所有提及可包括相应的多个特性或限制，反之亦然，除非另有说明或在做出提及的上下文中明显暗示与此相反。

本文使用的方法或过程步骤的所有组合可按任何顺序实施，除非另有说明或在提及该组合的上下文中明显暗示与此相反。

本公开内容的方法和组合物，包括其组分，可包含以下，或由以下组成或基本上由以下组成：本文描述的实施方案的基本要素和限制、以及本文描述的或营养组合物中在其它方面有用的任何额外或任选成分、组分或限制。

如本文所使用的，术语“约”应解释为指任何范围中说明的两个数字。对一个范围的任何提及应认为提供对该范围的任何子集的支持。

提供以下实施例以说明本公开内容营养组合物的一些实施方案，但不应解释为对其的任何限制。从本文公开的营养组合物或方法的说明书或实施考虑，在本文权利要求书范围内的其它实施方案对本领域技术人员将清楚明了。本说明书，连同实施例一起，仅意在作为示例性的，且本公开内容的范围和精神由实施例后的权利要求书表明。

实施例

表1提供本公开内容粉末状营养组合物的实例实施方案。在该实施方案中，当使用寡聚果糖和/或DHA粉的备选来源时，可调整玉米糖浆的重量。此外，表1描述的粉末状营养组合物可用水重新溶解。

表1 用于小儿对象的营养组合物实例实施方案的营养概况

本说明书引用的所有参考文献，包括但不限于，所有论文、出版物、专利、专利申请、陈述、文本、报告、手稿、手册、书籍、网络发帖、期刊文章、期刊等，均在此通过引用以其整体结合到本说明书中。本文对参考文献的论述仅意在概述其作者的主张，而并未认可任何参考文献构成现有技术。申请人保留质疑所引用参考文献的准确性和相关性的权利。

尽管本公开内容的实施方案已使用特定的术语、装置和方法描述，但该描述仅用于说明目的。使用的文字仅为描述而非限制性文字。应理解的是本领域普通技术人员可进行改变和变更而不脱离本公开内容的精神或范围，其在随后的权利要求书中进行阐述。此外，应理解的是，多个实施方案的各方面可整体或部分交换。例如，当根据已举例说明的方法制备用于生产商业化无菌液体营养补充剂的方法时，也考虑其它用途。因此，所附权利要求书不应受限于其中所含形式的描述。

Claims (16)

1.用于刺激小儿对象的中性粒细胞呼吸爆发的包含基于乳的基质的营养组合物，所述营养组合物包含：

3至7g/100kcal的脂肪源；

碳水化合物源；

1至5g/100kcal的蛋白质源；

包含寡聚半乳糖和聚葡萄糖的益生元组合物，其中所述益生元组合物的总量为所述营养组合物的1.0g/L至10.0g/L；

5mg/100kcal至100mg/100kcal的长链多不饱和脂肪酸，其中所述长链多不饱和脂肪酸包含重量比率为1∶3至9∶1的二十二碳六烯酸和花生四烯酸；和

0.010g至0.050g的β-1，3；1，6-葡聚糖/100g营养组合物，其中所述β-1，3；1，6-葡聚糖衍生自面包酵母。

2.权利要求1的营养组合物，其中所述组合物为营养完全的。

3.权利要求1的营养组合物，所述营养组合物进一步包含至少一种益生菌。

4.权利要求1的营养组合物，其中所述营养组合物不包含益生菌。

5.权利要求1的营养组合物，其中所述营养组合物是婴儿配方。

6.权利要求1的营养组合物，其中所述营养组合物是儿童营养产品。

7.用于刺激小儿对象的中性粒细胞呼吸爆发的包含基于乳的基质的营养组合物，所述营养组合物包含：

脂肪源；

碳水化合物源；

蛋白质源；

包含寡聚半乳糖和聚葡萄糖的益生元组合物，其中所述益生元组合物的总量为所述营养组合物的1.0g/L至10.0g/L；和

衍生自面包酵母的β-葡聚糖，其中所述β-葡聚糖以0.010g至0.050g/100g营养组合物的量存在。

8.权利要求7的营养组合物，其中所述β-葡聚糖包括β-1，3-葡聚糖。

9.权利要求7的营养组合物，其中所述β-葡聚糖包括β-1，3；1，6-葡聚糖。

10.权利要求7的营养组合物，其中所述β-葡聚糖包括全-葡聚糖颗粒β-葡聚糖。

11.权利要求7的营养组合物，其中所述组合物为营养完全的。

12.权利要求7的营养组合物，所述营养组合物进一步包含至少一种益生菌。

13.权利要求7的营养组合物，所述营养组合物进一步包含至少一种长链多不饱和脂肪酸。

14.权利要求13的营养组合物，其中所述长链多不饱和脂肪酸选自二十二碳六烯酸、花生四烯酸或其组合。

15.含有衍生自面包酵母的β-1，3-葡聚糖的基于乳的配方在制备用于刺激小儿对象的中性粒细胞呼吸爆发的营养组合物中的用途，其中所述β-1，3-葡聚糖以0.010g至0.050g/100g营养组合物的量存在。

16.权利要求15的用途，其中所述β-1，3-葡聚糖为β-1，3；1，6-葡聚糖。