CN103083237B - 一种厚朴酚的脂肪乳剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及厚朴酚的脂肪乳剂及其制备方法，可有效解决厚朴酚水溶性差的问题，其解决的技术方案是，该厚朴酚的脂肪乳剂是由以下重量百分比计的：厚朴酚0.01%-5%，注射用油2%-30%，乳化剂0.1%-20%，等渗调节剂1%-10%，稳定剂0.001%-1%，抗氧剂0.001%-3%，pH调节剂0.00001-0.5%，余量为注射用水制成，本发明厚朴酚脂肪乳剂组方科学、制备简单、质量可靠，稳定性好，载药量高，可长期稳定储存，安全性好，是药物制剂上的一大创新。

Description

一种厚朴酚的脂肪乳剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种厚朴酚的脂肪乳剂及其制备方法。

背景技术

厚朴酚是从木兰科植物厚朴中分离出来的主要活性成分，是一种带有烯丙基的联苯二酚类化合物，现代药理学研究结果表明，厚朴酚具有抗肿瘤、心脑血管保护、肌肉松弛、抗炎、抗菌、抗氧化、抗病原微生物、抗溃疡、拮抗钙调素、营养神经、预防衰老等多种药理作用，并且毒副作用小，是一种很具开发前途的天然药物成分。

但是厚朴酚的水溶性极差，很难制成物理化学性质稳定的液体制剂，这极大地限制了其在临床上的应用，目前文献中关于厚朴酚的制剂主要有核-壳印迹聚合物（刘丽,张朝晖,聂丽华. 核-壳型厚朴酚印迹聚合物的制备及性能研究.化学通报,2009,72（10）：907-911）、核-壳印迹聚合物膜(一种厚朴酚分子印迹聚合物膜的制备方法，申请号201110236015.4)、包合物（Xiao-Ping Wang, Jing-Hao Pan, Mai-Xia Ma, et al. Study on Supramolecular Systems of Cyclodextrins and Magnolol, Honokiol by Thin Layer Chromatography. Supramolecular Chemistry,2002 ,14 (4):323–328）、脂质体(Calvin Yu-Chian Chen. Inhibiting the vascular smooth muscle cells proliferation by EPC and DPPC liposomes encapsulated magnolol. Journal of the Chinese Institute of Chemical Engineers,2008,39(5): 407–411)、磷脂复合物(朱骤海,李稳宏,朱禹同,等. 厚朴酚磷脂复合物理化性质与大鼠口服生物利用度.西北大学学报（自然科学版,2012,42(3):415-421）、纳米粒(Yen-Jen Wang, Yin-Chih Chien, Chieh-Hsi Wu,et al. Magnolol-Loaded Core Shell Hydrogel Nanoparticles: Drug Release,Intracellular Uptake, and Controlled Cytotoxicity for the Inhibition of Migrationof Vascular Smooth Muscle Cells. Molecular Pharmaceutics,2011,8(6):2339-2349)等。目前已公开的厚朴酚液体制剂专利有溶液剂（200310121303.0）、固体脂质纳米粒（201110116835.X）、喷雾剂(申请号201010178441.2)等。尚无厚朴酚脂肪乳制剂的文献公开，脂肪乳剂将药物包裹在油滴中，避免了大量使用助溶剂或增溶剂带来的负面作用，可有效提高药物溶解度，增加药物稳定性，减少刺激性及毒副作用，具有一定的缓控释作用以及一定的靶向定位性等优点；同时制备工艺简单、生产技术路线成熟，可进行工业化大生产，是很有发展前景的一种新型药物载体。因此研究厚朴酚脂肪乳制剂是非常必要的。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种厚朴酚的脂肪乳剂及其制备方法，可有效解决厚朴酚水溶性差的问题。

本发明解决的技术方案是，该厚朴酚的脂肪乳剂是由以下重量百分比计的：厚朴酚 0.01-5%，注射用油 2-30%，乳化剂0.1-20%，等渗调节剂 1-10%，稳定剂0.001-1%，抗氧剂 0.001-3%，pH调节剂0.00001-0.5%，余量为注射用水制成，所述的注射用油为大豆油、玉米油、葵花籽油、茶油、橄榄油、花生油、红花油、棉子油、蓖麻油、中链甘油三酸酯中的一种或两种以上的混合物；所述的乳化剂为乳化剂Ⅰ或乳化剂Ⅰ和乳化剂Ⅱ，所述的乳化剂Ⅰ为大豆磷脂、蛋黄磷脂、聚氧乙烯蓖麻油 (Cremophor ELP或Cremophor EL)、聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油中的一种或两种以上的混合物；所述的乳化剂Ⅱ为泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、吐温80中的一种或两种以上的混合物；所述的等渗调节剂为甘油、葡萄糖、甘露醇或氯化钠中的一种或两种以上的混合物；所述的稳定剂为油酸；所述的抗氧剂为维生素E；所述的pH调节剂为盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、磷酸盐、柠檬酸、柠檬酸盐的一种或两种以上的混合物。

本发明厚朴酚的脂肪乳剂的制备方法包括以下步骤：

（1）制备油相：按照配比将厚朴酚、乳化剂Ⅰ用无水乙醇溶解，在30-45°C下，减压旋转蒸发除去乙醇，加入注射用油、稳定剂和抗氧剂，在50-100KHz的水浴超声条件下不断搅拌1-5min使溶解，形成油相，在40-70°C水浴下保温，备用；或按配比将厚朴酚、乳化剂Ⅰ、注射用油、稳定剂和抗氧剂于室温下以无水乙醇溶解，在30-45°C下减压旋转蒸发除去乙醇，形成油相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（2）制备水相：将注射用水、等渗调节剂混合，形成水相，在40-70°C水浴下保温，备用；或将注射用水、等渗调节剂以及乳化剂Ⅱ于室温下混合，在50-100KHz的水浴超声分散条件下搅拌5-10min使溶解得到水相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（3）制备初乳：在40-70°C下，将水相和油相缓慢混合，并不断搅拌，在6500-24000rpm速度下高速剪切匀质4-15min，得初乳；

（4）制备终乳：将初乳经过微射流仪，在3Kpsi-18Kpsi的压力下反复匀质3-20次；或将初乳经过超声波细胞粉碎机，在100w-1200w的功率下，超声2-15分钟；最后用pH调节剂调节pH值为4.0-9.0，得终乳；

（5）熔封、灭菌：将终乳过0.22μm-0.8μm的微孔滤膜，分装于安瓿瓶中，充氮气、熔封，在100-121℃温度下灭菌15-30min，得厚朴酚的脂肪乳剂。

还可以采用下列方法：

（1）制备油相：将厚朴酚、注射用油、稳定剂和抗氧剂混合，在50-100KHz水浴超声条件下,不断搅拌1-5min使溶解形成油相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（2）制备水相：将注射用水、等渗调节剂、乳化剂于室温下混合，在50-100KHz水浴超声条件下不断搅拌5-10min使溶解，形成水相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（3）制备初乳：在40-70°C条件下，将水相和油相缓慢混合，并不断搅拌，在6500-24000rpm速度下高速剪切匀质4-15min，得初乳；

（4）制备终乳：将初乳经过微射流仪，在3Kpsi-18Kpsi的压力下反复匀质3-20次；或将初乳采用超声波细胞粉碎机，在100w-1200w的功率下，超声2-15分钟；最后用pH调节剂调节pH为4.0-9.0，得终乳；

（5）熔封、灭菌：将终乳过0.22μm-0.8μm的微孔滤膜，分装于安瓿瓶中，充氮气、熔封，在100-121℃温度下灭菌15-30min，得厚朴酚的脂肪乳剂。

通过调整处方组成或制备参数，可以制备出厚朴酚普通乳、亚微乳或者纳米乳制剂，可以用于胃肠紊乱性疾病，心脑血管疾病，神经系统方面疾病及各种肿瘤的治疗，可经静脉注射、肌肉注射或口服等途径给药。

本发明厚朴酚脂肪乳剂组方科学、制备简单、质量可靠，稳定性好，适合工业化大生产；本发明提供的制剂载药量高，可长期稳定储存，安全性好，有利于厚朴酚更好的发挥药效，是药物制剂上的一大创新。

附图说明

图1为本发明各组荷瘤小鼠在治疗期间肿瘤的具体生长曲线图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

实施例1

称取大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，厚朴酚500mg，油酸0.2g，维生素E 0.05g，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得油相，60℃保温待用；另称取大豆磷脂1g，聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油2g，甘油2.5g，加入注射用水至100ml，在70KHz水浴超声条件下不断搅拌6min使溶解，得到水相，60℃保温待用，将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质6min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在13Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下循环10次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节终乳的pH值为7.68，得终乳，将终乳过0.22μm微孔滤膜，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例2

称取大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，厚朴酚500mg，油酸0.1g，维生素E 0.05g，在60KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得油相，65℃保温待用；另称取大豆磷脂1.8g，泊洛沙姆407 1.2g，甘油2.25g，加入注射用水至100ml，在60KHz水浴超声条件下不断搅拌9min使溶解，得到水相，得到水相，65℃保温待用；将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质7min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在18Kpsi压力下循环12次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节终乳的pH值为7.83，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

实施例3

称取茶油5g，中链甘油三酸酯5g，厚朴酚450mg，油酸0.05g，维生素E 0.05g，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌4min使溶解，得油相，65℃保温待用；另称取大豆磷脂1.8g，泊洛沙姆407 1.2g，葡萄糖1.5g，加入注射用水至100ml，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌10min使溶解，得到水相，65℃保温待用；将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质5min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在18Kpsi压力下循环15次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为8.53，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例4

称取大豆油5g，葵花籽油5g，厚朴酚500mg，油酸0.05g，维生素E 0.05g，在70KHz水浴超声条件下不断搅拌3min使溶解，得油相，70℃保温待用；另称取大豆磷脂2g，泊洛沙姆188 1g，甘油2.5g，加入注射用水至100ml，在70KHz水浴超声条件下不断搅拌10min使溶解，得到水相，70℃保温待用；将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质8min得初乳。然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在10Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质13次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为8.01，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例5

称取厚朴酚500mg，大豆磷脂2g，加入5ml乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，再加入葵花籽油5g，中链甘油三酸酯5g，油酸0.2g，维生素E 0.1g，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌2min使溶解，得油相，70℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 1g，甘油2.5g，加入注射用水至100ml，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得到水相，70℃保温待用；将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质6min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在13Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质12次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.14，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例6

称取大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，厚朴酚500mg，大豆磷脂2.4g，油酸0.2g，维生素E 0.2g，加入10ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，得油相，70℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 0.6g，甘油2.25g，加入注射用水至100ml，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得到水相，70℃保温待用，将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质6min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在9Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质10次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.08，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

实施例7

称取橄榄油20g，厚朴酚600mg，聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor ELP)1.2g，油酸0.5g，维生素E 0.1g，加入20ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，得油相，70℃保温待用；另称取泊洛沙姆407 0.5g，甘露醇5g，加入注射用水至100ml，在60KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得到水相，70℃保温待用，将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质10min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在18Kpsi压力下匀质8次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.08，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

实施例8

称取玉米油15g，厚朴酚550mg，聚氧乙烯蓖麻油1g，油酸0.05g，维生素E 0.05g，加入15ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，得油相，65℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 0.6g，甘油2.25g，加入注射用水至100ml，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解得到水相，65℃保温待用，将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质10min得初乳。然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在12Kpsi压力下循环3次，再在18Kpsi压力下匀质11次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为8.06，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在115℃下灭菌30min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例9

称取大豆油8g，厚朴酚400mg，油酸0.05g，维生素E 0.05g，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得油相，60℃保温待用；另称取大豆磷脂0.8g，泊洛沙姆188 0.4g，甘油2g，加入注射用水余量至100ml，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌10min使溶解得到水相，60℃保温待用，将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质10min得初乳，然后用超声波细胞粉碎机，在超声功率400W下，用探头超声60次，每次超声6S、间隔13S，将初乳分散，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为8.29，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例10

称取大豆油10g，厚朴酚700mg，蛋黄磷脂（LIPOID E80）1.8g，油酸1g，维生素E 0.1g加入10ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，得油相，60℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 1.2g，葡萄糖2g，加入注射用水余量至100ml，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解得到水相，60℃保温待用；将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质10min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在18Kpsi压力下匀质10次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.06，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例11

称取茶油6g，中链甘油三酸酯6g，厚朴酚550mg，油酸0.2g，维生素E0.06g，在90KHz水浴超声条件下不断搅拌4min使溶解，得油相，65℃保温待用；另称取大豆磷脂0.8g，聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油1.6g，甘油2.5g，加入注射用水余量至100ml，在90KHz水浴超声条件下不断搅拌6min使溶解得到水相，65℃保温待用；将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质15min得初乳，然后用超声波细胞粉碎机，在超声功率300W下，用探头超声60次，每次超声10S、间隔20S，将初乳分散，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.10，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在115℃下灭菌30min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例12

称取大豆油10g，厚朴酚500mg，油酸0.2g，维生素E 0.03g，在80KHz水浴超声条件下不断搅拌4min使溶解，得油相，65℃保温待用；另称取大豆磷脂1.8g，泊洛沙姆188 1.2g，甘油2.5g，加入注射用水余量至100ml，在80KHz水浴超声条件下不断搅拌8min使溶解得到水相，65℃保温待用；将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质8min得初乳，然后用超声波细胞粉碎机，在超声功率400W下，用探头超声80次，每次超声6S、间隔12S，将初乳分散，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.28，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

实施例13

称取厚朴酚500mg，大豆磷脂2g，加入5ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，再加入大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，油酸0.2g，维生素E 0.05g，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌4min使溶解，制备油相，60℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 1g，甘油2.5g，加入注射用水余量至100ml，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌7min使溶解得到水相，60℃保温待用；将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质5min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在13Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质10次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.25，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚脂肪乳剂。

上述实施方式仅是本发明的具体实施方式说明，并不是限制于此，凡是采用等效替换手段做出的与本发明实质上相同的技术方案均为本发明保护的范围。

本发明经测试和试验取得了满意的效果，有关资料如下：

一、制剂表征方法和结果

（一）表征方法

1.含量测定采用HPLC法测定制剂中厚朴酚的含量

色谱条件：色谱柱：H ypersil BDS C18（4.6×250mm，5μm）；甲醇：水=75：25（v/v）;流速：1ml/min；紫外检测波长：294nm；柱温：25℃；进样量：20μl。

测定方法：精密量取厚朴酚脂肪乳剂50μl置于10mL容量瓶中，甲醇定容，破乳（涡旋2min、超声10min）后10000rpm离心3min，取上清液作为样品溶液供试液，进样、记录色谱峰及峰面积。将所测值带入事先做好的标准曲线求算厚朴酚的含量。

2.粒径及Zeta电位

精密量取50μl厚朴酚脂肪乳剂，以超纯水稀释200倍，用Nano-ZS90激光粒度分析仪测定其平均粒径（z均）、粒径的多分散指数（PDI）及zeta电位。样品池选用DTS1060-Disposable Zeta Cell，温度设为25℃。

(二)表征结果

1. 外观：本发明产品均为乳白色液体，外观无分层、絮凝、析油、沉淀、酸败等不稳定现象存在。

2. 物理稳定性：本发明产品平均粒径、多分散系数（PDI）及Zeta电位在经过一定的储存期后的变化见表1。

表1初步稳定性考察结果（n=3）

由上表可知，厚朴酚脂肪乳剂在冷藏避光条件下保存3-10个月，其平均粒径、多分散指数及Zeta电位与制备初期相比未发生显著变化，说明制剂具有良好的物理稳定性。

3. 综合稳定性：分别制备三批厚朴酚脂肪乳，冷藏避光条件下放置10个月，于第0、1、2、3、6、8、10个月取样，详细考察其在储存期间的平均粒径、PDI、Zeta电位、pH值及载药量的稳定性，结果见表2。

表2综合稳定性实验结果（n=3）

由上表可知，本发明在冷藏避光条件下长期放置，其粒径、PDI、Zeta电位、pH值及载药量等各项指标均未发生显著变化，说明厚朴酚脂肪乳具有良好的物理及化学的稳定性。

初步药效学研究方法及结果

二、考察厚朴酚脂肪乳剂对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤效果：

(一). 试验方法

按照《抗肿瘤药物药效学指导原则》在KM小鼠右腋下接种S180肿瘤细胞，密切观察肿瘤的生长情况。成功建立S180腹水瘤模型后，将荷瘤小鼠随机分成3组，每组8只，雌雄各半，包括生理盐水阴性对照组、厚朴酚脂肪乳剂组（15mg/kg）和环磷酰胺阳性对照组（15mg/kg）。各组荷瘤小鼠于接种后第四天，每天腹腔注射相应药物，连续给药7天。每次给药前用游标卡尺准确测量小鼠肿瘤的长、短径，计算肿瘤体积。最后一次给药24h后处死小鼠，称量体重，完整剥离瘤块和心、肝、脾、肺、肾等脏器，洗涤、擦干，称重；同时用游标卡尺测量肿瘤长径和短径。按以下公式计算肿瘤瘤重抑瘤率、体积抑瘤率和脏器指数，并将数据进行统计学分析处理。

瘤重抑瘤率% =（1-给药组平均瘤重/对照组平均瘤重）×100％

体积抑瘤率% =（1-给药组平均体积/对照组平均体积）×100％

脏器指数=脏器重量（g）/体重（kg）×1000

（二）试验结果

1、瘤体积生长曲线

 荷瘤小鼠在给药期间肿瘤的生长曲线如图1所示。

由图1可知，生理盐水组对荷瘤小鼠的肿瘤体积没有抑制作用，肿瘤呈现快速持续增长的状态。而厚朴酚乳剂组和环磷酰胺溶剂组对荷瘤小鼠的肿瘤体积有较显著的抑制作用，对荷瘤小鼠呈现较好的治疗效果，且在相同剂量下，厚朴酚乳剂组对肿瘤的抑制效果优于环磷酰胺组。

2、抑瘤率测定结果

给药组和对照组的体积抑瘤率结果见表3。

表3各组的抑瘤率

^*P<0.05(vs.生理盐水组)

由表3可以看出，厚朴酚乳剂给药组的平均瘤重和平均瘤体积低于生理盐水给药组和环磷酰胺给药组，其瘤重抑瘤率和体积抑瘤率分别高达53.44%和73.56%，说明厚朴酚乳剂对于荷瘤小鼠具有较好的治疗作用。

3、荷瘤小鼠内脏指数测定结果

荷瘤小鼠的脏器指数结果见表4。

表4各组的脏器指数（n=8）

由表4可知，荷瘤小鼠给予厚朴酚乳剂后，其肝脏指数有一定的增加，但未表现出显著性差异，此外厚朴酚乳剂对小鼠的免疫器官脾脏有一定的影响，增加了脾脏指数，这提示厚朴酚乳剂可能有增加机体免疫功能的作用。

本发明厚朴酚脂肪乳剂组方科学、制备简单、质量可靠，稳定性好，适合工业化大生产；本发明提供的制剂载药量高，可长期稳定储存，安全性好，有利于厚朴酚更好的发挥药效，是药物制剂上的一大创新。

Claims (8)

1.一种厚朴酚的脂肪乳剂，其特征在于，由以下重量百分比计的：厚朴酚0.01-5%，注射用油2-30%，乳化剂0.1-20%，等渗调节剂1-10%，稳定剂0.001-1%，抗氧剂0.001-3%，pH调节剂0.00001-0.5%，余量为注射用水制成，所述的注射用油为大豆油、玉米油、葵花籽油、茶油、橄榄油、花生油、红花油、棉子油、蓖麻油中的一种和中链甘油三酸酯的混合物；所述的乳化剂为乳化剂Ⅰ，或乳化剂Ⅰ和乳化剂Ⅱ，所述的乳化剂Ⅰ为大豆磷脂、蛋黄磷脂、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油中的一种或两种以上的混合物；所述的乳化剂Ⅱ为泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、吐温80中的一种或两种以上的混合物；所述的等渗调节剂为甘油、葡萄糖、甘露醇或氯化钠中的一种或两种以上的混合物；所述的稳定剂为油酸；所述的抗氧剂为维生素E；所述的pH调节剂为盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、磷酸盐、柠檬酸、柠檬酸盐中的一种或两种以上的混合物。

2.权利要求1所述的厚朴酚的脂肪乳剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备油相：按照配比将厚朴酚、乳化剂Ⅰ用无水乙醇溶解，在30-45°C下，减压旋转蒸发除去乙醇，加入注射用油、稳定剂和抗氧剂，在50-100KHz的水浴超声条件下不断搅拌1-5min使溶解，形成油相，在40-70°C水浴下保温，备用；或按配比将厚朴酚、乳化剂Ⅰ、注射用油、稳定剂和抗氧剂于室温下以无水乙醇溶解，在30-45°C下减压旋转蒸发除去乙醇，形成油相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（2）制备水相：将注射用水、等渗调节剂混合，形成水相，在40-70°C水浴下保温，备用；或将注射用水、等渗调节剂以及乳化剂Ⅱ于室温下混合，在50-100KHz水浴超声条件下搅拌5-10min，形成水相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（3）制备初乳：在40-70°C下，将水相和油相缓慢混合，并不断搅拌，在6500-24000rpm速度下高速剪切匀质4-15min，得初乳；

（4）制备终乳：将初乳经过微射流仪，在3Kpsi-18Kpsi的压力下反复匀质3-20次；或将初乳经过超声波细胞粉碎机，在100w-1200w的功率下，超声2-15分钟；最后用pH调节剂调节pH值为4.0-9.0，得终乳；

（5）熔封、灭菌：将终乳过0.22μm-0.8μm的微孔滤膜，分装于安瓿瓶中，充氮气、熔封，在100-121℃温度下灭菌15-30min，得厚朴酚的脂肪乳剂。

3.根据权利要求2所述的厚朴酚脂肪乳剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备油相：将厚朴酚、注射用油、稳定剂和抗氧剂混合，在50-100KHz水浴超声条件下,不断搅拌1-5min使溶解，形成油相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（2）制备水相：将注射用水、等渗调节剂、乳化剂于室温下混合，在50-100KHz水浴超声条件下不断搅拌5-10min使溶解，形成水相，在40-70°C水浴下保温，备用；

（3）制备初乳：在40-70°C条件下，将水相和油相缓慢混合，并不断搅拌，在6500-24000rpm速度下高速剪切匀质4-15min，得初乳；

（4）制备终乳：将初乳经过微射流仪，在3Kpsi-18Kpsi的压力下反复匀质3-20次；或将初乳采用超声波细胞粉碎机，在100w-1200w的功率下，超声2-15分钟；最后用pH调节剂调节pH为4.0-9.0，得终乳；

（5）熔封、灭菌：将终乳过0.22μm-0.8μm的微孔滤膜，分装于安瓿瓶中，充氮气、熔封，在100-121℃温度下灭菌15-30min，得厚朴酚的脂肪乳剂。

4.根据权利要求2所述的厚朴酚的脂肪乳剂，其特征在于，称取大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，厚朴酚500mg，油酸0.1g，维生素E 0.05g，在60KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得油相，65℃保温待用；另称取大豆磷脂1.8g，泊洛沙姆407 1.2g，甘油2.25g，加入注射用水至100ml，在60KHz水浴超声条件下不断搅拌9min使溶解，得到水相，65℃保温待用，将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质7min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在18Kpsi压力下循环12次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.83，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

5.根据权利要求2所述的厚朴酚的脂肪乳剂，其特征在于，称取厚朴酚500mg，大豆磷脂2g，加入5ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，再加入葵花籽油5g，中链甘油三酸酯5g，油酸0.2g，维生素E 0.1g，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌2min使溶解，得油相，70℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 1g，甘油2.5g，加入注射用水至100ml，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得到水相，70℃保温待用，将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质6min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在13Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质12次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.14，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

6.根据权利要求2所述的厚朴酚的脂肪乳剂，其特征在于，称取大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，厚朴酚500mg，大豆磷脂2.4g，油酸0.2g，维生素E 0.2g，加入10ml乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，得油相，70℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 0.6g，甘油2.25g，加入注射用水至100ml，在53KHz水浴超声条件下不断搅拌5min使溶解，得到水相，70℃保温待用，将油相缓慢滴加到水相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质6min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在9Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质10次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.08，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

7.根据权利要求2所述的厚朴酚的脂肪乳剂，其特征在于：称取茶油6g，中链甘油三酸酯6g，厚朴酚550mg，油酸0.2g和维生素E 0.06g混合在一起，在90KHz水浴超声条件下不断搅拌4min使溶解，得油相，65℃保温待用；另称取大豆磷脂0.8g，聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油1.6g，甘油2.5g，加入注射用水余量至100ml，在90KHz水浴超声条件下不断搅拌6min使溶解，得到水相，65℃保温待用，将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度24000rpm下匀质15min得初乳，然后用超声波细胞粉碎机，在超声功率300W的条件下，用探头超声60次，每次超声10S、间隔20S，将初乳分散，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.10，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在115℃下灭菌30min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。

8.根据权利要求2所述的厚朴酚的脂肪乳剂，其特征在于：称取厚朴酚500mg，大豆磷脂2g，加入5ml无水乙醇溶解，在45℃下减压旋转蒸发除去乙醇，再加入大豆油5g，中链甘油三酸酯5g，油酸0.2g，维生素E 0.05g，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌4min使溶解，得油相，60℃保温待用；另称取泊洛沙姆188 1g，甘油2.5g，加入注射用水余量至100ml，在50KHz水浴超声条件下不断搅拌7min使溶解，得到水相，60℃保温待用，将水相缓慢滴加到油相中，边加边搅拌，在匀质速度21500rpm下匀质5min得初乳，然后将初乳用微射流仪进行高压匀质，在13Kpsi压力下循环5次，再在18Kpsi压力下匀质10次，最后用0.1mol/L或2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH值为7.25，得终乳，将终乳用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于安瓿瓶中，充氮气，熔封，在121℃下灭菌15min，即得厚朴酚的脂肪乳剂。