CN103069981A - 一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法 - Google Patents

一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103069981A
CN103069981A CN2013100083207A CN201310008320A CN103069981A CN 103069981 A CN103069981 A CN 103069981A CN 2013100083207 A CN2013100083207 A CN 2013100083207A CN 201310008320 A CN201310008320 A CN 201310008320A CN 103069981 A CN103069981 A CN 103069981A
Authority
CN
China
Prior art keywords
catharanthus roseus
culture
water
survival rate
transplanting
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013100083207A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103069981B (zh
Inventor
龚一富
潘益芳
李君�
王何瑜
袁泉
卢鹏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ningbo University
Original Assignee
Ningbo University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ningbo University filed Critical Ningbo University
Priority to CN201310008320.7A priority Critical patent/CN103069981B/zh
Publication of CN103069981A publication Critical patent/CN103069981A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103069981B publication Critical patent/CN103069981B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • Y02P60/216—

Landscapes

  • Cultivation Of Plants (AREA)

Abstract

本发明公开了一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，特点是包括以下步骤：（1）选取生长健壮正常的长春花无菌试管苗，将培养瓶瓶盖打开，向培养瓶中加入适量蒸馏水浸没长春花根部，然后置于光照培养箱中培养3-4d完成炼苗；（2）将长春花无菌试管苗用镊子从培养瓶中小心取出，将根系上的培养基用流水冲洗干净，放入盛有水培营养液的试管或培养皿中，置光照培养箱中继续炼苗，培养2-7d后，从长春花植株根部长出新的水生根，完成水培；（3）将长出新根的长春花水培植株移栽到含有蛭石、珍珠岩和泥炭的移栽基质中，即完成移栽，优点是增强长春花组培苗的抗菌能力，显著提高长春花组培苗移栽成活率。

Description

一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法
技术领域
本发明涉及一种长春花组培苗移栽方法，尤其是涉及一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法。
背景技术
长春花(Catharanthus roseus L.) 属夹竹桃科一年生草本植物，可产生100多种具有很高药用价值的抗癌萜类吲哚生物碱(Terpenoid Indole Alkaloids, TIAs)。如长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、阿吗碱(Ajmalicine)、利血平(Reserpine)、文多灵（Vindoline）、长春质碱（Catharanthine）。长春碱临床上主要用于治疗何杰金氏病及绒毛膜癌，对乳腺癌的治疗效果也非常好。因此，长春花被认为是一种具有很高开发应用价值的药用植物。
目前，长春花抗癌生物碱主要从长春花植株的地上部分提取，但这些药物在长春花中的含量极其微少（仅为百万分之几至十万分之几），使长春花生物碱远远不能满足市场需求，导致长春花药用成分的供需矛盾相当严重（每年只能生产12 kg长春碱和1 kg长春新碱），使其价格极为昂贵（高达6000美元/克）。长春花快速繁殖和转基因均是以长春花组织培养为基础的，通过组织培养技术可获得大量长春花无菌试管苗。
现有的长春花组培苗移栽方法，通常是当植株长到一定程度的时候，将用于封口广口培养瓶的绳子解开，3～4天后，使广口培养瓶敞口，在光照培养箱中放置数天之后，直接移栽到花盆中。但长春花试管苗移栽到土壤中后，容易感染细菌，导致根部腐烂死亡，长春花试管苗的移栽成活率极低，仅仅在20％到30％之间，其主要原因是长春花再生植株的根系在清洗过程中不能彻底除去吸附在根系上的培养基，移栽到土壤后，一旦细菌和真菌接触到了植物根系上的培养基，培养基中的营养物质就导致了细菌和真菌的大量繁殖与生长，最终导致植株的根系出现腐烂问题，不能充分吸收营养，而使植株死亡。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种通过水培培养方式提高长春花组培苗移栽成活率的方法，该方法能增强长春花组培苗的抗菌能力，显著提高长春花组培苗移栽成活率。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，包括以下步骤：
（1）炼苗：选取生长健壮正常的长春花无菌试管苗，移栽前，将培养瓶瓶盖打开，向培养瓶中加入适量蒸馏水浸没长春花根部，然后置于光照培养箱中培养3-4d完成炼苗，培养条件为1500-2500 Lx、23-27℃、每天光照周期为光照8-12 h，黑暗12-16 h； 
（2）水培：将经步骤（1）炼苗的长春花无菌试管苗用镊子从培养瓶中小心取出，将根系上的培养基用流水冲洗干净，放入盛有水培营养液的试管或培养皿中，置光照培养箱中继续炼苗，培养2-7d后，从长春花植株根部长出新的水生根，完成水培，其中水培营养液隔天换一次；
（3）移栽：将长出新根的长春花水培植株移栽到含有蛭石、珍珠岩和泥炭的移栽基质中，即完成长春花组培苗的移栽。
所述的水培营养液为蒸馏水或者浓度100-200 mg/L的羧苄青霉素水溶液。
所述的移栽基质中蛭石、珍珠岩和泥炭的重量比为2：1：6。
步骤（1）中所述的光照培养箱的培养条件为2000 Lx、25℃、每天光照周期为光照8 h，黑暗16 h。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明首次公开了一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，该方法通过水培培养方式提高长春花组培苗移栽成活率，使长春花无菌试管苗经过一段时间的水培驯化以后，长出新的水生根，再将水培长春花再生植株移栽到培养基质中，增强长春花组培苗的抗菌能力，显著提高长春花组培苗的移栽成活率，使其移栽成活率达80%以上，该方法操作简单方便，费用低，适于批量处理和工厂化生产，具有很好的经济效益和社会效益。
本发明所用水培营养液为蒸馏水或添加羧苄青霉素的蒸馏水，而不用富含营养的培养基，目的是防止培养基中的营养物质招致细菌或真菌繁殖生长，而使试管苗污染死亡。放入蒸馏水中则可使根系中的一些细菌或真菌因缺乏营养物质而死亡，而对于长春花没有很大的影响，这样，能大大提高移栽的成活率。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1
本发明一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，具体包括以下步骤：
（1）炼苗：选取生长健壮正常的长春花无菌试管苗，移栽前，将培养瓶瓶盖打开，向培养瓶中加入适量蒸馏水浸没根部（以恰能浸没根部为宜），继续在光照培养箱中培养3-4d，培养条件为2000 Lx、25℃、每天光照周期为光照8 h，黑暗16h；
（2）水培：将炼苗的长春花无菌试管苗用镊子从培养瓶中小心取出，用流水将根系上的培养基冲洗干净，放入盛有水培营养液的试管或培养皿中，置光照培养箱中继续炼苗。水培营养液以浸没根为宜，注意隔天换水，一经发现根部长霉应及时用蒸馏水冲洗。培养2-7d后，从长春花植株根部长出新的水生根；
（3）移栽：将长出新根的长春花水培植株移栽到含有蛭石、珍珠岩、泥炭的移栽基质中，即完成长春花组培苗的移栽。
在此具体实施例中，水培营养液为蒸馏水或者浓度100-200 mg/L的羧苄青霉素水溶液。移栽基质中蛭石、珍珠岩和泥炭的重量比为2：1：6。
在水培炼苗的30株长春花再生植株中，一共有26株成活，成活率为86.67％。相比于以往的炼苗方法，这可以说是一种突破。以往的炼苗方法仅仅是当植株长到一定程度的时候，将用于封口广口培养瓶的绳子解开，3-4天后，使广口培养瓶敞口，在光照培养箱中放置数天之后，直接移栽到花盆中。这种旧的方法，长春花再生植株的成活率仅仅在20％到30％之间。
 实施例2
同实施例1，其区别在于：光照培养箱的培养条件为1500 Lx、23℃、每天光照周期为光照12h，黑暗12h。在水培炼苗的30株长春花再生植株中，一共有25株成活，移栽成活率为83.33％。
  实施例3
同实施例1，其区别在于：光照培养箱的培养条件为2500 Lx、27℃、每天光照周期为光照10h，黑暗14h。在水培炼苗的30株长春花再生植株中，一共有25株成活，移栽成活率为83.33％。
当然，上述说明并非对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内，作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）炼苗：选取生长健壮正常的长春花无菌试管苗，移栽前，将培养瓶瓶盖打开，向培养瓶中加入适量蒸馏水浸没长春花根部，然后置于光照培养箱中培养3-4d完成炼苗，培养条件为1500-2500 Lx、23-27℃、每天光照周期为光照8-12 h，黑暗12-16 h； 
（2）水培：将经步骤（1）炼苗的长春花无菌试管苗用镊子从培养瓶中小心取出，将根系上的培养基用流水冲洗干净，放入盛有水培营养液的试管或培养皿中，置光照培养箱中继续炼苗，培养2-7d后，从长春花植株根部长出新的水生根，完成水培，其中水培营养液隔天换一次；
（3）移栽：将长出新根的长春花水培植株移栽到含有蛭石、珍珠岩和泥炭的移栽基质中，即完成长春花组培苗的移栽。
2.根据权利要求1所述的一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，其特征在于：所述的水培营养液为蒸馏水或者浓度100-200 mg/L的羧苄青霉素水溶液。
3.根据权利要求1或2所述的一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，其特征在于：所述的移栽基质中蛭石、珍珠岩和泥炭的重量比为2：1：6。
4.根据权利要求3所述的一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的光照培养箱的培养条件为2000 Lx、25℃、每天光照周期为光照8 h，黑暗16 h。
CN201310008320.7A 2013-01-10 2013-01-10 一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法 Expired - Fee Related CN103069981B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310008320.7A CN103069981B (zh) 2013-01-10 2013-01-10 一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310008320.7A CN103069981B (zh) 2013-01-10 2013-01-10 一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103069981A true CN103069981A (zh) 2013-05-01
CN103069981B CN103069981B (zh) 2015-06-17

Family

ID=48146850

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310008320.7A Expired - Fee Related CN103069981B (zh) 2013-01-10 2013-01-10 一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103069981B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103563616A (zh) * 2013-10-10 2014-02-12 来宾市兴宾区科学技术局 一种提高甘蔗组培苗假植成活率的方法
CN108684523A (zh) * 2018-05-08 2018-10-23 贵州省蚕业研究所 提高辣椒花药培养再生苗成活率的炼苗移栽方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102144554A (zh) * 2011-01-25 2011-08-10 江苏九久环境科技有限公司 采用植物组织培养生产石蒜的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102144554A (zh) * 2011-01-25 2011-08-10 江苏九久环境科技有限公司 采用植物组织培养生产石蒜的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
曾智发等: "长春花组织培养研究进展", 《药学实践杂志》 *
龚一富等: "长春花毛状根再生植株的获得及抗癌生物碱的产生", 《中草药》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103563616A (zh) * 2013-10-10 2014-02-12 来宾市兴宾区科学技术局 一种提高甘蔗组培苗假植成活率的方法
CN108684523A (zh) * 2018-05-08 2018-10-23 贵州省蚕业研究所 提高辣椒花药培养再生苗成活率的炼苗移栽方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN103069981B (zh) 2015-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101180949B (zh) 一种铁皮石斛茎尖组培快速繁殖的育苗方法
CN105794495B (zh) 一种与天麻共生的蜜环菌菌种及其应用
CN102577952B (zh) 一种弗吉尼亚栎组织培养方法
CN107711290B (zh) 菌根食用菌共生苗的培养基及其同步培养方法
CN104686332A (zh) 一种茶树组织培养再生体系构建方法
CN106416744B (zh) 一种天麻共生蜜环菌菌种及其制备方法
CN103125244A (zh) 一种金花茶植株的扦插繁殖方法
CN104823666A (zh) 一种油茶的扦插繁殖方法
CN102835317B (zh) 一种硒化霍山石斛培养物的生产方法
CN104620933A (zh) 一种提高移栽树木成活率的方法
WO2019062354A1 (zh) 真菌诱导子、其制备方法及利用该真菌诱导子进行白芨种苗快繁的方法
CN103288538A (zh) 一种果木用培养土
CN101692784A (zh) 一种云南山茶无土栽培基质
CN105075795A (zh) 一种提高园林植物移栽成活率的方法
CN102870683A (zh) 马来沉香的微体扩繁方法
CN103069981B (zh) 一种提高长春花组培苗移栽成活率的方法
CN103340153A (zh) 一种以马尾松离体成熟胚为外植体的组织培养方法
CN101569284B (zh) 以砂为基质菌根化烟苗的生产方法
CN105123328A (zh) 一种半夏组培苗炼苗、驯化基质及其制备和使用方法
CN108402082A (zh) 促进油茶苗木生根的生根剂及其生根方法
CN106171996B (zh) 一种野生白桦的快速繁殖方法
CN104813932A (zh) 一种铁皮石斛的离体保存方法
CN104322371A (zh) 一种铁皮石斛组织培养培养基及其铁皮石斛组织培养方法
CN110604048B (zh) 一种木本植物菌根多接种方法和应用
CN103380697A (zh) 一种银杏移栽的快速成活方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150617

Termination date: 20180110

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee