CN103055185A - 黑米花色苷提取物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种黑米花色苷提取物的用途，其特征在于：用于制备肾损伤性疾病的预防和治疗药物。尤其是用于溴酸钾诱导机体氧化应激性肾损伤的预防和治疗。本发明提供了黑米花色苷提取物的一种新用途，使用安全性高的天然黑米花色苷提取物在溴酸钾诱导的机体氧化应激性肾损伤方面发挥保护作用，今后开发更多的抗氧化应激性疾病的天然产物药物奠定了基础。
Description
技术领域
本发明涉及一种医药产品，具体涉及黑米花色苷提取物的用途，尤其是黑米花色苷提取物对溴酸钾诱导小鼠氧化应激性肾损伤的保护作用。
背景技术
近年来研究确认溴酸钾可诱发人和其他哺乳动物的肾组织损伤。Watanabe等的研究证明溴酸钾引起的肾损伤病理过程是来自氧化应激反应，肾脏在应激负荷状态下因氧自由基大量产生和蓄积而发生脂质过氧化，进而影响细胞膜功能导致肾脏器病变。
黑米（Oryza sativa L.）是稻米中的珍品，自古享有“贡米”之美誉，是一种药、食兼用的大米，具有滋阴润脑肺、健脾开胃、补中益气、活血化淤等功效。研究发现黑米中花色苷含量非常丰富。同时研究发现不同的黑米花色苷含量有差别，且其花色苷单体构成在不同的研究报道中也各不相同。《中国粮油学报》2010年第25卷第12期“黑米种皮中花色苷组成及含量的HPLC分析”一文中公开了不同研究者对黑米种花色苷成分分析的差异包括Xia等检测到矢车菊素-3-葡萄糖苷和芍药-3-葡萄糖苷两种，而Hiemori等则检测到7种不同的花色苷及其异构体。
《中国生化药物杂志》2010年第31卷第1期“中国黑米花色苷研究现状及展望”一文中公开了黑米花色苷提取物的药用用途，包括对动脉粥样硬化斑块发展的抑制、对癌细胞的浸润和转移的抑制、对高脂血症的治疗效果等，但是未提及其对溴酸钾引起的肾损伤的作用。
发明内容
本发明的发明目的是提供一种黑米花色苷提取物的新的用途。
为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：一种黑米花色苷提取物的用途，用于制备肾损伤性疾病的预防和治疗药物。
黑米花色苷提取物的制备方法：
将黑米粉碎用50%乙醇（含1%盐酸）30℃震荡提取2h，滤渣再用等体积的同一溶剂在上述条件下提取2h。合并两次滤液用旋转蒸发仪减压蒸馏除去乙醇。将浓缩液经AB-8大孔树脂纯化得到暗红色黑米花色苷提取物粉末。
进一步的技术方案，所述肾损伤性疾病为溴酸钾诱导机体氧化应激性肾损伤。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：
本发明提供了黑米花色苷提取物的一种新用途，使用安全性高的天然黑米花色苷提取物在溴酸钾诱导的机体氧化应激性肾损伤方面发挥保护作用，今后开发更多的抗氧化应激性疾病的天然产物药物奠定了基础。
附图说明
图1是实施例中黑米花色苷提取物对血清肌酐的影响；
图2是实施例中黑米花色苷提取物对血清尿素氮水平的影响；
图3是实施例中黑米花色苷提取物对肾组织黄嘌呤氧化酶（XOD）活性水平的影响；
图4是实施例中黑米花色苷提取物对肾组织丙二醛（MDA）含量水平的影响。
具体实施方式
下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：
实施例：
黑米花色苷提取物对溴酸钾诱导小鼠氧化应激性肾损伤的保护作用实验
1 实验材料
1.1 实验动物
昆明清洁级小鼠，雄性，体重18-22g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号SCXK（沪）2012-0002。饲养温度23±1℃，照明时间12h/d（7:00-19：00）。
1.2 材料与试剂
黑米花色苷提取物。
丙二醛（MDA）测定试剂盒、黄嘌呤氧化酶（XOD）试剂盒、血清尿素氮（BUN）试剂盒、考马斯亮蓝蛋白试剂盒（南京建成生物工程研究所）；肌酐（上海Sinopharm化学公司）；磷酸二氢钾、氢氧化钾（国药集团化学试剂有限公司）；亚硝酸钠（江苏强盛功能化学股份有限公司）、溴酸钾（上海琳帝化工有限公司）、萘乙二胺（西亚试剂）。
1.3 实验仪器
BS210S电子分析天平，德国Sartorius公司；
高速冷冻离心机，长沙湘仪离心机公司；
UV-2600紫外可见分光光度计，日本岛津公司；
Agilent 1260 高效液相色谱系统；
Cosmosil系列5C18（4.6mm×150mm）色谱柱，日本Nacalai Tesque公司；
SB-5200DTN超声清洗器，宁波新芝生物科技股份有限公司。
2．方法
2.1动物分组
小鼠40只适应性喂养一周后，称重后按体重均匀分为正常组、肾损伤模型组、低剂量黑米花色苷提取物治疗组、高剂量黑米花色苷提取物治疗组，每组10只。给药剂量为0.1ml/10g。
2.2给药设计
正常组：给以正常的食物和水。
模型组：腹腔注射给以溴酸钾生理盐水溶液，剂量200mg/Kg。
低剂量组：灌胃给以花色苷提取物，剂量100mg/Kg。
高剂量组：灌胃给以花色苷提取物，剂量200mg/Kg。
2.3动物给药
各给药组连续灌胃5天，每天一次，正常组和模型组均灌胃同体积蒸馏水。第5天肾损伤模型组和各给药组一次性腹腔注射溴酸钾生理盐水溶液，正常对照组腹腔注射等体积生理盐水，9h后进行多项指标的测定。
2.4测定
2.4.1血清肌酐水平测定
小鼠眼球取血后，静置30min，在4℃条件下5000rpm的速度离心10min，分离血清，加等计量6%高氯酸去蛋白，12000rpm离心15min，取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，-20℃保存用于肌酐测定。测定使用日本Nacalai Tesque 公司Cosmosil 系列5C18柱（4.6mm×150mm），流动相为20mmol/L磷酸盐缓冲溶液（PH=6.5）。柱温为25℃，流速1ml/min，检测波长235nm。标准对照肌酐用流动相溶解并稀释成不同浓度用于制作标准曲线。
2.4.2血清尿素氮水平测定（二乙酰一肟法）
小鼠眼球取血后，静置30min，在4℃条件下5000rpm的速度心10min，分离血清，按下表操作：
| 空白管(B) | 标准管(S) | 测定管(U) | |
| 蒸馏水(ml) | 0.02 | ||
| BUN标准液(ml)(10mmol/L) | 0.02 | ||
| 待测样本（ml） | 0.02 | ||
| 试剂一（ml） | 1 | 1 | 1 |
| 试剂二应用液（ml） | 1 | 1 | 1 |
混匀，置沸水中准确水浴15min，立即用自来水冷却。用波长520nm，1cm光径玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定各管OD值。通过说明书给出的公式计算出尿素氮的含量。
2.4.3 肾组织XOD活性测定
准确称取组织重量按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的0.9%的生理盐水，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，4℃，10000rpm离心10min，取上清液进行测定。按试剂盒说明书中表格操作：
混匀，530nm，1cm光径，双蒸水调零，测各管吸光度OD值。将测定结果带入说明书指定公式计算出XOD活力。
2.4.4 肾组织MDA含量测定（硫代巴比妥酸法）
将10%肾组织匀浆液加入等体积的生理盐水制成5%匀浆液按试剂盒说明书中表格操作：
涡旋混匀器混匀，试管口用保鲜膜扎紧，用针头刺一小孔，95℃水浴40min，取出后流水冷却，然后4000转/分，离心10min。取上清液，532nm处，1cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。将测得的光度值代入公式：
组织MDA含量=（测定OD值-对照OD值）/（标准OD值-空白OD值）×标准品浓度÷待测样本蛋白浓度
2.5统计学方法
实验结果以mean±S.E.M 表示，采用SPSS 13.0（statistical package program for social science）软件，利用one-way ANOVA和Dunnett 检验进行统计学处理，P<0.05 表示有显著性差异，有统计学意义，并绘制出了柱形图。
3. 实验结果
3.1 黑米花色苷提取物对给以溴酸钾小鼠的血清肌酐、血清尿素氮水平的影响，测定如图1和图2所示。
从图1和图2中可以看出，肾损伤模型组与正常组相比血清肌酐与尿素氮含量显著升高（p<0.001），而黑米花色苷提取物高、低剂量治疗组与模型组相比较血清肌酐与血清尿素氮水平显著降低（p<0.05）。
3.2 黑米花色苷提取物对给以溴酸钾小鼠肾组织XOD活性水平以及MDA含量水平的影响，测定结果如图3和图4所示。
从图3和图4可以看出，肾损伤模型组与正常组相比肾组织XOD活性与丙二醛含量显著升高（p<0.001），而黑米花色苷提取物高、低剂量治疗组与模型组相比较肾组织XOD活性与丙二醛含量显著降低（p<0.001）。
综合以上四个指标的测定结果表明，高、低剂量的黑米花色苷提取物对溴酸钾引起的肾损伤有保护作用。
4. 结论
以上实验结果表明，黑米花色苷提取物对溴酸钾诱导的氧化应激性肾损伤起到明显的保护作用。
Claims (2)
1. 一种黑米花色苷提取物的用途，其特征在于：用于制备肾损伤性疾病的预防和治疗药物。
2. 根据权利要求1所述的黑米花色苷提取物的用途，其特征在于：所述肾损伤性疾病为溴酸钾诱导机体氧化应激性肾损伤。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103405674A (zh) * | 2013-08-29 | 2013-11-27 | 苏州大学 | 黑米花色苷提取物在制备保护拘束应激性肝损伤药物中的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101514219A (zh) * | 2009-03-24 | 2009-08-26 | 温州医学院 | 一种黑米花色素苷的提取方法 |
| CN101723996A (zh) * | 2009-12-03 | 2010-06-09 | 中山大学 | 一种从黑米中分离制备高纯度花色苷单体的方法 |
| CN102626246A (zh) * | 2012-03-23 | 2012-08-08 | 温州医学院 | 一种花色素苷新型功能饮料 |
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101514219A (zh) * | 2009-03-24 | 2009-08-26 | 温州医学院 | 一种黑米花色素苷的提取方法 |
| CN101723996A (zh) * | 2009-12-03 | 2010-06-09 | 中山大学 | 一种从黑米中分离制备高纯度花色苷单体的方法 |
| CN102626246A (zh) * | 2012-03-23 | 2012-08-08 | 温州医学院 | 一种花色素苷新型功能饮料 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 宝丽: "欧洲越橘花色苷提取物抗氧化应激作用及其机制学研究", 《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》, no. 10, 31 October 2009 (2009-10-31) * |
| 李永菊;: "浅谈黑米中色素的提取与应用", 《河北农业科技》, no. 10, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 51 - 52 * |
| 秦玉 等: "黑米花色苷提取物胶囊对高血脂症病人的降血脂作用", 《食品科学》, vol. 29, no. 10, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 540 - 542 * |
| 金丽琴 等: "黑米花色素苷对大鼠组织器官功能的影响", 《中国生化药物杂志》, no. 1, 20 February 2012 (2012-02-20), pages 16 - 19 * |
| 马淑青 等: "紫甘薯花色苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用", 《中国食品添加剂》, no. 4, 31 December 2009 (2009-12-31), pages 79 - 82 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103405674A (zh) * | 2013-08-29 | 2013-11-27 | 苏州大学 | 黑米花色苷提取物在制备保护拘束应激性肝损伤药物中的应用 |
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