CN103039723A

CN103039723A - 一种肉鸡饲料添加剂及其制备方法

Info

Publication number: CN103039723A
Application number: CN2012105172151A
Authority: CN
Inventors: 彭焕伟; 张克英; 丁雪梅; 曾秋凤; 白世平; 罗玉衡; 沈亚欧
Original assignee: 彭焕伟
Priority date: 2012-12-06
Filing date: 2012-12-06
Publication date: 2013-04-17

Abstract

本发明公开了一种肉鸡饲料添加剂的制备方法，取辣蓼全草，切割成0.2-0.5cm长度，按照1∶5(g/ml)比例加水，浸泡30分钟后，煮沸后文火煎熬15分钟，4层纱布过滤药液；再将剩下的药渣按1∶2-3(g/ml)加水，煮沸后文火煎15分钟，过滤；滤渣再按1∶2-3(g/ml)加水，煮沸后文火煎熬15分钟，过滤。合并3次药液，文火浓缩至膏状，采用冷冻干燥机干燥药膏，得到提取物。通过肉鸡养殖试验，根据体外法得到的最低抑菌浓度，设定两个添加水平。结果表明，添加水平为0.2wt％-0.4wt％。可少减少肉鸡死亡率，提高回肠、盲肠有益菌(以乳酸菌和双歧杆菌为代表)数量，而减少有害菌(以大肠杆菌为代表)的数量。

Description

一种肉鸡饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及禽类饲养技术领域，尤其涉及的是一种肉鸡饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

现代化养殖中，为了提高肉鸡存活率、生产性能和抵抗疾病，饲料中往往会添加抗生素，但这也带来了细菌耐药性和食品安全问题。

发明内容

本发明针对现有技术的不足提供一种肉鸡饲料添加剂及其制备方法。

本发明技术方案如下：

一种肉鸡饲料添加剂的制备方法，取辣蓼全草(干草与鲜草均可)，切割成0.2-0.5cm长度，按照1∶5(g/ml)比例加水，浸泡30分钟后，煮沸后文火煎熬15分钟，4层纱布过滤药液；再将剩下的药渣按1∶2-3(g/ml)加水，煮沸后文火煎15分钟，过滤；滤渣再按1∶2-3(g/ml)加水，煮沸后文火煎熬15分钟，过滤。合并3次药液，文火浓缩至膏状，采用冷冻干燥机干燥药膏，得到提取物。

传统提取物干燥采用烘干或者微波干燥，这样在干燥到快失去水分时，提取物中的活性成分会与空气接触，在高温下很容易被氧化而失去活性，而本研究采用的冷冻干燥法是在低温、负压情况下干燥，最大程度保护了提取物中的有效活性成分不被破坏；

抑菌验证：为了开发作为肉鸡饲料中替代抗生素的添加剂，就必须验证其有效抑菌性。

1、体外法：本研究选用三种典型肠道病原菌(金黄色葡萄球菌；大肠杆菌ATCC25922；鸡白痢沙门氏菌)作为代表，验证辣蓼提取物对这些细菌是否有影响。通过最低抑菌浓度试验，本研究制备的辣蓼提取物对大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为：0.025、0.0125、0.025g/ml。说明辣蓼提取物对鸡肠道主要病原菌有抑制作用，并且革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的抑制效果优于对革兰氏阴性菌大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌，目前抗生素中能有效抑制革兰氏阳性菌的是恩拉霉素，其价格昂贵，本研究发现的辣蓼提取物具备抑制革兰氏阳性菌的特点，为开发成饲料添加剂的重要条件之一。

2、体内法：通过肉鸡养殖试验，根据体外法得到的最低抑菌浓度，设定两个添加水平。结果表明，添加水平为0.2wt％-O.4wt％。可少减少肉鸡死亡率，提高回肠、盲肠有益菌(以乳酸菌和双歧杆菌为代表)数量，而减少有害菌(以大肠杆菌为代表)的数量。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。

实施例一辣蓼提取物的制备

材料与方法

1、辣蓼草来源及预处理

辣蓼草采集自中国四川省广汉市，取全草阴干。提取前将阴干辣蓼置于60-70℃烘箱内烘干备用。

2、辣蓼提取物的制备

2.1辣蓼提取物实验室制备将烘干的辣蓼草全草剪短成0.2-0.5cm左右长度，然后称取1OOg加蒸馏水0.5L，浸泡30分钟，敞开容器煮沸后文火煎煮15分钟，用4层纱布过滤药液；剩下药渣加水0.3L，煮沸后文火煎煮15分钟，4层纱布过滤药液；再将剩下的药渣加水0.2L，煮沸后文火煎15分钟。合并3次药液，文火浓缩至膏状，采用冷冻干燥机干燥药膏，得到提取物。称取提取物重量，计算得率。

3结果

实验室制备辣蓼水溶性提取物的得率为：4.96％

实施例二辣蓼提取物在体外对鸡肠道典型病原菌的抑菌试验

辣蓼在民间药典里通常用作治疗肠道疾病用药，说明其中有效成分可能对肠道微生物的生长有抑制作用或杀灭作用。因此，本试验选用三种典型肠道病原菌作为代表，体外法考察辣蓼提取物对这些细菌是否有影响。

一材料与方法

1菌株

金黄色葡萄球菌；大肠杆菌ATCC25922；鸡白痢沙门氏菌。以上菌种由四川农业大学禽病教研室提供。

2培养基

普通营养肉汤，营养琼脂培养基，按常规方法配置[李影林.培养基手册.吉林：吉林科学技术出版社，1991.]。

3提取物水溶液配置

取10克辣蓼粉，溶于20ml水中(可适当加热溶解)，待完全溶解后转至50ml容量瓶，定容后摇匀后待用，用时用滤纸过滤，提取物浓度为0.2g/ml。

无菌检测提取物水溶液：取0.2ml提取物水溶液，加入到2ml营养肉汤，37℃培养过夜，观察是否有细菌生长。做三个重复，同时设阴性对照。

如果有菌过滤除菌。

4菌液的制备

将活化菌种接种到营养肉汤中，置37℃恒温培养16-18h，测定活菌数，用营养肉汤调整细菌浓度为10⁶CFU/ml，置4℃冰箱保存备用。

5最低抑菌浓度MIC的测定

采用两倍稀释法测定药液的MIC值。即取9支无菌试管编号，1-8号各加1×10⁶CFU/ml菌液1ml，取1ml配制好的提取物液置于试管中，均匀混合，继而吸取1ml加入第2只试管内，依次类推稀释至7号管，弃去1ml，第8管作为不加药液的阳性对照管，第9号管只加药液1ml，而不加菌液作为阴性对照管。稀释后1-7号试管药物的最终浓度为0.1，0.05，0.025，0.0125，0.00625，0.003125，0.0015625g/ml。将各试管摇匀后置于37℃恒温箱中培养24h观察结果。每个样品做3个重复。

二结果与分析

从表1可以看出，辣蓼提取物对大肠杆菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌的最低抑菌浓度分别为：0.025、0.0125、0.025g/ml。说明辣蓼提取物对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌的抑制效果优于对革兰氏阴性菌大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌。

表1辣蓼提取物抑菌结果

注：表中“-”表示无菌生长，“+”表示细菌生长。

实施例三辣蓼提取物对肉鸡肠道典型微生物和肉鸡死亡率的影响

1试验设计

采用单因子试验设计，设3个处理，每个处理4个重复。各处理的情况如下：

处理一：对照组(饲喂不含抗生素的基础日粮)

处理二：低剂量辣蓼添加组(基础日粮+0.2wt％辣蓼提取物)

处理三：高剂量辣蓼添加组(基础日粮+0.4wt％辣蓼提取物)

2实验动物与分组

试验选用110只艾维因肉鸡，0-21日龄不分组，均饲喂相同的育雏料，以期在相同的环境中，肉鸡能建立较稳定的肠道微生物区系。21日龄称重后，选出健康，体重相近，公母各半的试验鸡共96只。将这些鸡按体重相近的原则分为12个组，分别放置于12个独立的饲养笼中，每笼8只，公母各半。然后，根据条件一致分组的原则，将这12个独立饲养笼分到3个处理中，并于笼上标记处理号和重复号，饲喂相应的试验日粮。

3饲养管理

按照肉鸡饲养的常规管理进行。

4试验日粮及配制方法

基础日粮参照中华人民共和国农业行业标准《鸡饲养标准》(NY/T33-2004)中肉鸡营养需要配制，日粮配方如下：

表2、试验日粮

注：a.每千克日粮含VA25000IU；VD₃5000IU；VE12.5IU；VK₃2.5mg；VB₁1.0mg；VB₂8mg；VB₆3.0mg；VB₁₂15μg；叶酸250μg；烟酸17.5mg；泛酸钙12.5mg。

b.每千克日粮含Fe60mg、Cu20mg、Mn100mg、Zn80mg、Se0.3mg、I0.4mg，其中Fe、Cu、Mn、Zn分别来源于FeSO₄.7H₂O、CuSO₄.5H₂O、MnSO₄.7H₂O、ZnSO₄.7H₂O，Se和I来源于含Se为1％的Na₂SeO₃预混料和含I3.8％的KI预混料。

先按配方配制400kg基础日粮，然后从中称出200kg，加入0.8kg辣蓼提取物，混合均匀后作为处理三的日粮，即含0.4wt％辣蓼提取物的试验日粮；从处理三日粮中称出70kg，再从基础日粮中也称出70kg，等量混合均匀后，作为处理二的日粮，即含辣蓼提取物0.2wt％的试验日粮。最后得到各处理日粮重量为：处理一，130kg；处理二，140kg；处理三，130kg。

5指标测定

5.1生产性能指标

测定各组试验鸡的21-42日龄阶段的增重，饲料消耗，然后根据要求计算这个阶段的平均日增重、日采食量和料肉比，记录死亡鸡只数。

5.2鸡只全部于42日龄称重后通过颈部放血处死，迅速腹腔剖开，对回肠、盲肠进行两头结扎后取出，用75％酒精对结扎口及肠道表面进行消毒，放入已消毒并编好号的塑料袋中，立即送试验室进行回肠内容物和盲肠内容物中大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌的菌落总数的测定。

6数据处理数据表示为平均数±标准差，采用SPSS统计软件对数据进行ANOVA方差分析和Duncan多重比较。

7结果与分析

7.1生产性能

从表3和表4中可以看出，在本试验条件下，0.2wt％和0.4wt％辣蓼的添加对21-42日龄肉鸡的生产性能没有显著影响，但肉鸡死亡率下降，回肠、盲肠的有益微生物乳酸菌和双歧杆菌数量增加，而有害的大肠杆菌数量降低。

表3生产性能及肉鸡死亡率

表4肠道典型微生物数量(logCFU/g食糜)

应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims

1.一种肉鸡饲料添加剂的制备方法，其特征在于，取辣蓼全草，切割成0.2-0.5cm长度，按照1∶5(g/ml)比例加水，浸泡30分钟后，煮沸后文火煎熬15分钟，4层纱布过滤药液；再将剩下的药渣按1∶2-3(g/ml)加水，煮沸后文火煎15分钟，过滤；滤渣再按1∶2-3(g/ml)加水，煮沸后文火煎熬15分钟，过滤。合并3次药液，文火浓缩至膏状，采用冷冻干燥机干燥药膏，得到提取物。

2.根据权利要求1所述的制备方法制备的肉鸡饲料添加剂，添加量为基础日粮的0.2wt％-0.4wt％。