CN103025296A - 用于改善或促进机体的缺血区域的血液循环状态的二氧化碳雾压浴方法以及二氧化碳雾压浴装置 - Google Patents

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Abstract

通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗机体的缺血性疾病。使下述步骤（a）至（d）的二氧化碳雾的压浴至少1日1次持续4周。（a）使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾的步骤；（b）在将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元内进行所述二氧化碳雾喷雾的步骤；（c）在将所述二氧化碳雾包围单元内的气体维持在高于大气压的规定值以上的条件下，根据需要，与所述步骤（b）同时进行，使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的步骤；（d）使对于所述二氧化碳雾包围单元内的所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟的步骤。

Description

用于改善或促进机体的缺血区域的血液循环状态的二氧化碳雾压浴方法以及二氧化碳雾压浴装置
技术领域
本发明涉及用于通过使二氧化碳在规定的条件下直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗缺血性疾病（例如，闭塞性动脉硬化症或缺血性心脏疾病等）的二氧化碳雾压浴方法以及二氧化碳雾压浴装置。
背景技术
由于二氧化碳（CO2）同时具有不仅易溶于水（水溶性），还易溶于油（脂溶性）的性质，因此，一直以来公知二氧化碳具有，通过与同时具有水和油的性质的机体的皮肤和粘膜接触，渗透到机体的皮下，使渗透部位的血管扩张，改善血液循环的作用。
另外，二氧化碳具有通过渗透到机体的皮下，从而发挥出扩张血管、促进血液循环、使血压下降、改善代谢、促进疼痛物质或废物的排除等各种生理效果的可能性。另外，还具有抗炎、抗菌作用。因此，近年来，二氧化碳除了在医疗目的方面，在增进健康、促进美容方面也受到广泛关注。
在机体的组织中，二氧化碳具有与红血球内的血红蛋白结合以释放出所输送的氧的作用。在二氧化碳浓度高的地方，红血球释放出更多的氧。这样，主要由二氧化碳来控制红血球向细胞供给氧。即，没有二氧化碳，血红蛋白处于与氧结合着的状态，细胞就不能接受氧。另外，CO2在机体内的代谢中也起着重要的作用。由此可以看出，CO2在机体中起着各种重要的作用，而不仅仅是细胞的能量活动的结果带来的废物。
因此，为了使机体的皮肤和粘膜直接吸收二氧化碳，以往，以在浴缸的热水中使用能产生二氧化碳的沐浴剂为代表，提出了用于使二氧化碳与机体的皮肤和粘膜接触的各种装置（例如参照专利文献1-3）。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：特开平7-171189号公报
专利文献2：特开2006-263253号公报
专利文献3：特开2009-183625号公报
发明内容
本申请的发明人鉴于以往公知的二氧化碳的上述的在机体中的各种生理作用，特别是血液循环促进效果、血管扩张效果、代谢机能亢进作用，认为在持续使二氧化碳与机体接触时，二氧化碳具有改善或促进缺血区域的血液循环的效果。即，渗透到皮下的二氧化碳进入组织（肌肉）和血液中。
含有大量的二氧化碳的血液，被认为是所谓的“缺氧”状态，在使血管扩张，促进血流增加的同时，在缺血区域促进新的血管形成（血管新生）。认为在组织内使用CO2，促进代谢，支持血管新生。
另外，本申请的发明人进行了各种实验，结果表明，仅使二氧化碳与机体的皮肤和粘膜接触，进入到血液中的二氧化碳浓度低。因此，本申请的发明人发现了，为了使二氧化碳有效地进入血液中，通过使二氧化碳成为雾状（mist状），即，使二氧化碳成为包裹在液体的薄膜状的泡沫中的状态（在本申请中，将其称作“二氧化碳雾”），对机体的皮肤和粘膜施加规定的压力（机体的内部压以上），并与机体的皮肤和粘膜接触，从而提高进入到血液中的二氧化碳浓度，改善缺血区域。
此外，本预防、改善或治疗，还包括外科手术后或植入人工脏器后的缺血区域。
由此，本发明提供一种二氧化碳雾压浴方法，该方法通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗机体的缺血性疾病，其特征在于，该方法具有以下各步骤：（a）使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾的步骤；（b）在将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元内进行所述二氧化碳雾喷雾的步骤；（c）在将所述二氧化碳雾包围单元内的气体维持在高于大气压的规定值以上的条件下，根据需要，与所述步骤（b）同时进行，使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的步骤；（d）使对于所述二氧化碳雾包围单元内的所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟的步骤；以及使所述步骤（a）至（d）的二氧化碳雾的压浴至少1日1次持续4周的步骤。
此外，在本申请中，将使液体雾化成微小的液滴，并与气体（二氧化碳）接触混合称作“雾化并溶解”。
另外，本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，所述步骤（d）为测量所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度，并且使所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟，使所述二氧化碳雾的浓度为规定值以上的步骤（权利要求2中记载的发明）。
另外，本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，在所述步骤（d）中，控制所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾包围单元内的气压为规定值。
本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，所述二氧化碳雾含有粒径为10μm以下的二氧化碳雾。另外，本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，所述步骤（c）中，所述二氧化碳雾包围单元内的气压为1.01至2.5个大气压。另外，本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，所述步骤（d）中，所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度为60％以上。
本发明还提供了一种二氧化碳雾压浴装置，该装置通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗机体的缺血性疾病，其特征在于，该装置包括以下各单元：用于将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元；使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾，将该二氧化碳雾供给到所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾生成供给单元；用于使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的排出单元；使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部，并且根据需要，控制来自所述二氧化碳雾生成供给单元的所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾包围单元内的气压为规定值范围内的控制单元。
在此，本发明的二氧化碳雾压浴装置的特征在于，所述二氧化碳雾压浴装置还包括测量所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度的浓度检测单元；所述控制单元控制所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾的浓度为规定值以上。另外，本发明的二氧化碳雾压浴装置的特征在于，所述二氧化碳雾压浴装置还包括测量所述二氧化碳雾包围单元内的气压的气压检测单元；所述控制单元控制所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾包围单元内的气压为规定值。
另外，所述二氧化碳雾包围单元为形成将所述二氧化碳雾密封在内部的空间的、可折叠的罩型或袋型或者固定放置型的箱型。在此，本发明的二氧化碳雾压浴装置的特征在于，所述二氧化碳雾包围单元包括：用于向其内部导入所述二氧化碳雾的、内部具有单向阀的二氧化碳雾供给口；用于排出内部的气体的排出口；用于机体出入的出入口；以及使机体的头部从所述箱主体内露出的开口。在所述开口设置有防止二氧化碳雾从该开口与机体之间的间隙漏出的漏出防止单元。
如以下详细说明的那样，本发明得到与改善或促进缺血区域的血液循环相关的各种动物实验的试验结果，通过使规定值以上的浓度的二氧化碳雾与机体的皮肤和粘膜接触一定时间以上，确认了缺血区域的血液循环的改善或促进。另外，确认了通过本发明的处理，血液中硝酸根离子（NO3 －）显著增加。即，由于NO3 －是作为血液中的内皮细胞源性舒张因子EDRF的主体的NO（一氧化氮）的比较稳定的氧化代谢产物，并且NO从血管内皮细胞释放出，因此明示了，由高浓度（80至100％）二氧化碳雾压浴处理带来的血流改善效果源于血管内皮机能的参与。
此外，本申请说明书中记载的表示改善或促进机体的缺血区域的血液循环状态的各种动物实验的试验结果，主要是针对8周龄Wistar老鼠等的，但是，也适用于人体及其它哺乳类的机体，其从该种类的其它很多实验例与临床数据之间的相关性可以明确。
附图说明
图1是本发明的二氧化碳雾压浴方法的流程图；
图2是本发明的二氧化碳雾压浴装置的第1实施例的示意图；
图3是图2中所示的二氧化碳雾压浴装置的压浴用罩的示意图；
图4是将图3的压浴用罩适用于人体的状态的示意图；
图5是使用了吹雾方式的二氧化碳雾生成单元的二氧化碳雾压浴装置（第1实施例）的示意图；
图6是将具有多个图2中所示的二氧化碳雾生成供给单元的二氧化碳雾压浴装置适用于作为例子的马的状态的示意图；
图7是本发明的改善或促进缺血区域的血液循环的二氧化碳雾压浴装置的第2实施例的示意图；
图8是图7中所示的二氧化碳雾压浴装置的压浴用罩的示意图；
图9是将图8的压浴用罩适用于人体的状态的示意图；
图10是图7中所示的二氧化碳雾压浴装置的压浴用罩的其它形状例的示意图；
图11是表示老鼠的缺血模型刚作成后以及第28天利用激光多普勒血流计测定的血流的图；
图12是用1/N比表示老鼠的缺血模型刚作成后以及分别经过4天、7天、14天、21天、28天后的血流的变化的图；
图13是表示取出缺血模型作成后经过28天后的老鼠的缺血部组织（大腿内收肌），利用抗CD31抗体进行免疫组织染色的结果的图；
图14是表示进行免疫组织染色后的每1平方mm的毛细血管密度的定量解析的结果的图；
图15是表示老鼠的缺血模型作成后经过4天后合成的VEGF（血管内皮生长因子）与GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）的比的图；
图16是表示老鼠的缺血模型作成后经过4天后合成的FGF（成纤维细胞生长因子）与GAPDH的比的图；
图17是表示老鼠的缺血模型作成后经过4天后合成的eNOS（内皮型一氧化氮合成酶）与GAPDH的比的图；
图18是表示老鼠的缺血模型作成后经过7天后合成的VEGF与GAPDH的比的图；
图19是表示老鼠的缺血模型作成后经过7天后合成的FGF与GAPDH的比的图；
图20是表示老鼠的缺血模型作成后经过7天后合成的eNOS与GAPDH的比的图；
图21是表示老鼠的缺血模型作成4天后的血浆中所含的硝酸的量的图；
图22是表示以光的吸收测定为基础，测量作成老鼠下肢缺血模型时组织的氧量的结果的图；
图23是表示以光的吸收测定为基础，测量老鼠下肢缺血模型二氧化碳雾处理中的、缺血6天后的组织的氧量的结果的图；
图24是表示以光的吸收测定为基础，测量老鼠下肢缺血模型合成空气处理中的、缺血6天后的组织的氧量的结果的图；
图25是表示测量老鼠下肢缺血模型合成空气处理中的、缺血6天后的组织的氧量的结果的图；
图26是表示测量老鼠下肢缺血模型二氧化碳雾处理中的、缺血6天后的组织的氧量的结果的图；
图27是表示“由iTRAQ与LC/MS/MS同定的蛋白质的数量”与下肢缺血后由二氧化碳雾处理带来的对蛋白质的影响的图；
图28是说明生成二氧化碳雾的单元的原理构成的图；
图29是表示碳酸标准溶液的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图30是表示根据碳酸标准溶液的EIC色谱的测定结果制作的12CO2的标准曲线的图；
图31是表示非处理No.1老鼠的血浆中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图32是表示非处理No.4老鼠的血浆中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图33是表示实施了13CO2雾处理的No.1老鼠的血浆中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图34是表示实施了13CO2雾处理的No.4老鼠的血浆中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图35是表示非处理No.1老鼠的心脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图36是表示非处理No.4老鼠的心脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图37是表示实施了13CO2雾处理的No.1老鼠的心脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图38是表示实施了13CO2雾处理的No.4老鼠的心脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图39是表示非处理No.1老鼠的肝脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图40是表示非处理No.4老鼠的肝脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图41是表示实施了13CO2雾处理的No.1老鼠的肝脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图42是表示实施了13CO2雾处理的No.4老鼠的肝脏中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图43是表示非处理No.1老鼠的肌肉中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图44是表示非处理No.4老鼠的肌肉中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图45是表示实施了13CO2雾处理的No.1老鼠的肌肉中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图46是表示实施了13CO2雾处理的No.4老鼠的肌肉中的12CO2和13CO2的EIC色谱的测定结果的图；
图47是表示不同样品的12CO2的检出量的棒状图；
图48是表示不同处理方法的12CO2的检出量的棒状图；
图49是表示不同样品的13CO2的检出量的棒状图；
图50是表示不同处理方法的13CO2的检出量的棒状图；
图51是表示不同样品的13CO2检出量相对于12CO2检出量的比例的棒状图；
图52是表示不同处理方法的13CO2检出量相对于12CO2检出量的比例的棒状图；
图53是表示二氧化碳雾生成单元的其它构成例的结构的截面示意图；
图54是表示使用了覆盖身体的局部皮肤和粘膜的压浴用罩的本发明的二氧化碳雾压浴装置的第3实施例的示意图。
具体实施方式
以下，参照附图对本发明的实施方式进行详细说明。
首先，对本发明的通过使二氧化碳雾直接或通过衣服与机体的皮肤接触，以改善或促进缺血区域的血液循环的二氧化碳雾压浴方法进行说明。
图1表示本发明的用于改善或促进机体的缺血区域的血液循环的二氧化碳雾压浴方法的流程。本发明提供一种二氧化碳雾压浴方法，该方法使用后面（在图2、图5中）详细说明的二氧化碳雾生成供给装置，如图1的（A）部所示，具有以下各步骤：使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾的步骤（a）；在将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元内进行所述二氧化碳雾喷雾的步骤（b）；在将所述二氧化碳雾包围单元内的气体维持在高于大气压的规定值以上的条件下，根据需要，与所述步骤（b）同时进行，使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的步骤（c）；以及使对于所述二氧化碳雾包围单元内的所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟，使二氧化碳雾的浓度为规定值以上的步骤（d），通过使该二氧化碳雾的压浴至少每日1次持续4周（e），以改善或促进机体的缺血区域的血液循环。
改变上述步骤（d），还可以测量所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度，并且使所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟，使所述二氧化碳雾的浓度为规定值以上（如图1的（B）部中所示的步骤（d’）所述）。
此外，在步骤（e）中，控制所述二氧化碳雾的供给量，使之持续至少20分钟以上，但是，优选持续30分钟以上，在改善或促进缺血区域的血液循环方面最佳。
在此，本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，所述二氧化碳雾含有粒径为10μm以下的二氧化碳雾。由此，二氧化碳雾从机体的毛孔或者皮肤和粘膜有效渗透到机体的皮下。
另外，本发明的二氧化碳雾压浴方法的特征在于，所述二氧化碳雾包围单元内的气压为1.01至2.5个大气压。由于机体的体内压力为基本与大气压（1个大气压）相同的程度，因此，在本二氧化碳雾压浴方法中，二氧化碳雾在高于大气压的压力下与机体的皮肤和粘膜接触，能够进一步提高二氧化碳雾向机体的皮下的渗透性。
并且，在本二氧化碳雾压浴方法中，二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度为60％以上。
如图28所示的生成二氧化碳雾的单元的原理构成，通过将水槽T中的水喷射到内部由二氧化碳供给装置G施加二氧化碳压而处于二氧化碳气氛中的密闭容器C中，使二氧化碳和水雾化并溶解，形成二氧化碳雾。
图2是本发明的改善或促进缺血区域的血液循环的二氧化碳雾压浴装置的第1实施例的示意图。如图2所示，二氧化碳雾压浴装置10包括：进行二氧化碳雾的生成供给的二氧化碳雾生成供给单元11；用于将二氧化碳雾与机体一同包围成密闭状态的压浴用罩12（二氧化碳雾包围单元）；用于测量该压浴用罩12内的二氧化碳雾的浓度的浓度计13（浓度检测单元）；以及在使压浴用罩12内的气体排出到外部的同时，控制来自二氧化碳雾生成供给单元11的二氧化碳雾的供给量，使二氧化碳雾的浓度为规定值以上的控制装置14（控制单元）。
首先，二氧化碳雾生成供给单元11由供给二氧化碳的二氧化碳供给单元111；供给液体的液体供给单元112；以及生成、供给使这些来自二氧化碳供给单元111的二氧化碳与来自液体供给单元112的液体雾化并溶解而成的雾状的气雾（以下，称作“二氧化碳雾”）的二氧化碳雾生成单元113构成。
二氧化碳供给单元111例如由储气罐等构成，向二氧化碳雾生成单元113供给二氧化碳。虽然省略了图示，但是在该二氧化碳供给单元111上设置有用于调节气体的压力的调节器。另外，还可以配置用于加热气体的加热器和用于控制温度的温度计。
液体供给单元112由泵等构成，向二氧化碳雾生成单元113供给液体。或者，例如也可以为臭氧水生成装置等气体混合水的供给单元。
作为供给的液体，优选使用水、离子水、臭氧水、生理盐水、纯净水、或者无菌纯净水。这些液体中还可以含有对使用者的疾病、症状等有效的药剂。所谓药剂，可举出例如抗变态反应药、抗炎药、解热镇痛药、抗真菌药、抗流感病毒药、流感疫苗、类固醇、抗癌药、降压药、化妆剂、增毛剂、生毛剂、育毛剂等。进一步，还可以将具有清凉作用的薄荷醇；促进血液循环的维生素E；易被皮肤组织吸收且美肤效果好的维生素C衍生物；使皮肤的角质化作用正常且保护粘膜的松香油；用于缓和对粘膜的刺激的麻醉剂；用于除去臭气的环糊精；具有杀菌、消炎效果的光催化剂、或光催化剂和磷灰石的复合体；保水力良好、具有肌肤保湿效果的透明质酸；活化细胞、提高免疫力的辅酶Q10；含有抗氧化物质和大量的营养素的棉籽油；具有抗氧化作用、抗菌作用、抗炎作用、镇痛和麻醉作用、免疫作用等的蜂巢蜡胶等。单独或者多种组合并混合，可以产生与气体的生理作用的协同效果。或者，还可以添加乙醇、葡萄糖酸氯己定、两性表面活性剂、苯扎氯铵、乙酸烷基二氨基醚甘氨酸、次氯酸钠、过乙酸、倍半碳酸钠、二氧化硅、聚维酮碘、碳酸氢钠。进一步，还可以添加以碳酸盐和有机酸为主要成分的高浓度碳酸泉剂（作为有效成分的一个例子，有：硫酸盐、碳酸盐、有机酸、二氯异氰尿酸钠）、杀菌剂、清洗剂等。
此外，虽然未图示，但是优选在该液体供给单元112上配置用于加热液体的加热器和用于控制温度的温度计。
二氧化碳雾生成单元113为将由二氧化碳供给单元111供给的气体、与由液体供给单元112供给的液体雾化并溶解生成二氧化碳雾，并将其向压浴用罩12供给的装置。此时，生成的雾的粒径为10μm以下最佳。作为二氧化碳雾生成单元113，例如可以适用超声波式或吹雾式、使用流体喷嘴的方式等各种雾生成装置。
接着，压浴用罩12由能够覆盖机体（在此，以人体为例）的皮肤和粘膜、并且能够形成将二氧化碳雾封入内部的空间的罩主体121构成。图3是压浴用罩12的示意图，图4表示将压浴用罩12适用于人体的状态。如这些图所示，罩主体121优选由能够基本覆盖机体的全身皮肤和粘膜的大小的耐压性、非透气性、非透湿性材料形成的袋状部件构成。此时，优选由能够折叠、或在穿着的状态下坐在椅子上（参照图4）等的、能够在内部自由活动的柔软的材料构成。作为具体的材料，例如优选由天然橡胶、硅橡胶、聚乙烯、聚丙烯、聚偏二氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚酰胺系树脂、聚四氟乙烯等形成。
图4的袋状罩体覆盖全身，但是，也可以仅将需要通过二氧化碳雾压浴来改善或促进缺血区域的血液循环的机体的部位包围成密闭状态。例如，预防、改善或治疗缺血性心脏疾病时，也可以为仅将上半身包围成密闭状态的袋状的罩体，另外，主要预防、改善或治疗下肢的大血管闭塞的闭塞性动脉硬化症状时，也可以为仅将下半身包围成密闭状态的袋状的罩体。
如上所述，在此，图示了袋状的罩主体121，但是，除此之外，也可以具有如后述的箱型等形状。
在罩主体121上设置有机体能够出入内部的开闭部122，并且设置有用于使机体的头部露出罩12的外部的开口部123。进一步，还具有用于将二氧化碳雾导入罩主体121的内部的供给口124、和排出罩主体121内的二氧化碳雾的排出口125（排出单元）。另外，还可以设置压浴用罩12内达到一定压力以上时自动打开阀门的安全阀（溢流阀）。
开闭部122优选由实施了耐压性、非透气性、非透湿性加工的线状扣件（拉链）构成。除此之外，还可以为尼龙搭扣等。
开口部123是为了使机体的头部露出罩12的外部而设置的，为了防止二氧化碳雾从间隙漏出，在其周围，利用由橡胶等伸缩性材料形成的漏出防止单元，使开口部123适合于使用者的头部。漏出防止单元还可以使用细绳或带、尼龙搭扣等。
供给口124是为了将二氧化碳雾导入压浴用罩12内，而与罩主体121连通设置的，在此，通过二氧化碳雾供给管119与二氧化碳雾生成单元113连接。在供给口124的内部设置有用于防止二氧化碳雾逆流的单向阀。
排出口125为用于通过排出压浴用罩12内的气体来调节内部的压力和二氧化碳雾的浓度的通风口。该排出口125根据控制装置14的指令而开闭。
浓度计13设置在压浴用罩12内，测量罩12内的二氧化碳雾的浓度，将该测量值向控制装置14输出。
另一方面，控制装置14由包括CPU、存储器、显示器的电脑构成，根据浓度计13的测量值来控制二氧化碳雾生成供给单元11和压浴用罩12的排出口125，使压浴用罩12内的二氧化碳雾的浓度为规定值以上（优选为60％以上），而且维持该浓度。除此之外，还可以控制压浴用罩12内的温度和压力值等。另外，控制装置14具有定时功能，可以在设定的时间内进行二氧化碳雾压浴。
以下，进一步具体地对本二氧化碳雾压浴装置的一个例子进行说明。图5是使用了吹雾方式的二氧化碳雾生成单元的二氧化碳雾压浴装置10A（第1实施例）的示意图。在此，作为二氧化碳雾生成单元113的例子，使用吹雾式的二氧化碳雾生成单元113′。
在二氧化碳雾生成单元113′中形成有用于存储来自液体供给单元112的液体的液体存储部114；将从二氧化碳供给单元111供给的二氧化碳从前端开口吐出的喷嘴115A；将存储于液体存储部114的液体吸至喷嘴115A的前端的吸液管115B；设置于与喷嘴115A和吸液管115B的前端开口相对的位置的挡板116。另外，还具有从二氧化碳供给单元111将二氧化碳供给到二氧化碳雾生成单元113′内，将二氧化碳导入到喷嘴115A的周边，同时形成排出二氧化碳雾的气流的二氧化碳供给部117A和二氧化碳导入部117B；以及用于收集并排出二氧化碳雾的二氧化碳雾收集部118A和二氧化碳雾导出部118B。从二氧化碳雾导出部118B排出的二氧化碳雾通过二氧化碳雾供给管119供给到压浴用罩12。
此外，在该二氧化碳雾压浴装置10A中，在压浴用罩12内除浓度计13之外，还设置有压力计151。控制装置14根据这些的测量值进行控制。例如，使压浴用罩12内的气压为1个大气压以上（更优选为1.01至2.5个大气压）。进一步，在压浴用罩12内的气压为规定值以上时，控制装置14还可以进行使二氧化碳雾生成供给单元11停止，从排出口125排出压浴用罩12内的二氧化碳雾等控制。
另外，在该二氧化碳雾压浴装置10A中，可以在从二氧化碳供给单元111到二氧化碳雾生成单元113′中的二氧化碳供给部117A之间设置流量阀141，调节向二氧化碳雾生成单元113′的气流量，并且可以在二氧化碳雾供给管119上设置用于切换来自二氧化碳雾生成单元113′中的二氧化碳雾导出部118B的二氧化碳雾和来自二氧化碳供给单元111的二氧化碳的切换阀142，调节压浴用罩12内的二氧化碳雾浓度等。
接着，对使用本二氧化碳雾压浴装置10A进行二氧化碳雾压浴的步骤进行说明。首先，使用者打开压浴用罩12的开闭部122，进入罩主体121内，使开口部123与头部吻合后，关闭开闭部122，使压浴用罩12内成为密闭状态。
接着，向二氧化碳雾生成单元113′中的液体存储部114中注入来自液体供给单元112的液体，接着，从二氧化碳供给单元111向二氧化碳雾生成单元113′供给二氧化碳。
二氧化碳被供给到喷嘴115A时，如图5所示，由于喷嘴115A向前端变狭窄，因此，二氧化碳被增速吐出。液体在由此时的气流产生的负压下被吸入吸液管115B，在吸液管115B的前端部（喷嘴前端部）被喷向二氧化碳，并撞向挡板116，生成雾。二氧化碳进一步从二氧化碳供给部117A和二氧化碳导入部117B被供给到二氧化碳雾生成单元113′内，提高了所生成的二氧化碳雾的排出压。所生成的二氧化碳雾通过二氧化碳雾收集部118A、二氧化碳雾导出部118B，从二氧化碳雾供给管119被供给到压浴用罩12。控制装置14根据浓度计13、压力计151的值，控制二氧化碳雾生成供给单元11和压浴用罩12的排出口125。并且，进行二氧化碳雾压浴，直到经过预先设定的定时器的规定时间。
气雾供给管119，优选其全部或部分由管径粗的柔软的波纹管构成。波纹管由于可以自由弯曲、伸缩，因此不会限制使用者的活动。进一步，通过在该波纹管的内侧，在管的轴向形成槽，可以在流过气雾供给管119内的气雾液化时，容易收集并回收液滴。
另外，在上述中，举出了从一个二氧化碳雾生成供给单元11，通过一个供给口124向压浴用罩12供给二氧化碳雾的例子，除此之外，还可以从多个二氧化碳雾生成供给单元通过多个供给口供给二氧化碳雾。另外，在上述中，作为适用本二氧化碳雾压浴装置10的机体，以人体为例进行了说明，但是，不限于人体，还可以为动物（例如赛马或宠物等）。
图6是将具有多个二氧化碳雾生成供给单元的二氧化碳雾压浴装置适用于作为例子的马的状态的示意图。另外，与图2相同的部分，附以相同的符号，省略详细说明。
如图6所示，二氧化碳雾压浴装置20具有多个（在此以两个为例）二氧化碳雾生成供给单元21A、21B。另外，马用的压浴用罩22的罩主体221形成为基本覆盖马的全身的大小，具有开闭部222、开口部223，并且具有多个（在此以两个为例）供给口224A、224B和排出口225。
供给口224A、224B分别与二氧化碳雾生成供给单元21A、21B连接。在此，在各二氧化碳雾生成供给单元21A、21B中，可以由不同的液体生成二氧化碳雾，使各种液体的作用作用于机体。
在上述中，对由袋状的罩主体121形成的压浴用罩12进行了说明，但是，压浴用罩12并不限于此，可以适用各种形状。图7是具有可以固定放置的箱型的压浴用罩的二氧化碳雾压浴装置（第2实施例）的示意图。与图2相同的部分，附以相同的符号，省略详细说明。另外，图8是本实施例的箱型的压浴用罩的示意图，图9表示将其适用于人体的状态。
如图7所示，二氧化碳雾压浴装置30包括：进行二氧化碳雾的生成供给的二氧化碳雾生成供给单元11；用于将二氧化碳雾与机体一同包围成密闭状态的压浴用罩32（二氧化碳雾包围单元）；测量该压浴用罩32内的二氧化碳雾的浓度的浓度计13（浓度检测单元）；以及在使压浴用罩32内的气体排出到外部的同时，控制来自二氧化碳雾生成供给单元11的二氧化碳雾的供给量，使二氧化碳雾的浓度为规定值以上的控制装置14（控制单元）。进一步，设置压力计151，在压浴用罩32内的气压为规定值以上时，控制装置14还可以进行使二氧化碳雾生成供给单元11停止，从排出口329排出压浴用罩32内的二氧化碳雾等控制。另外，还可以设置压浴用罩32内达到一定压力以上时自动打开阀门的安全阀（溢流阀）。
在此，压浴用罩32由能够基本覆盖机体全身的大小的箱型的罩主体321构成。即，由上部322、底部323、以及多个（在此为4个）侧部324（324A、324B、324C、324D）形成。其中，为了使使用者出入压浴用罩32内，一个侧部（在此以324A为例）为如图8（b）所示的可开闭的门325。在该门325的外部设置有把手325A。另外，虽然省略了图示，但是，优选在内部也设置有把手，使得能够从罩32的内侧也开闭门325。
在罩主体321的上部322设置有用于使使用者的头部露出罩32的外部的开口326。该开口326有富余，具有头部能出入的程度的直径。进一步，为了防止二氧化碳雾从间隙漏出，在开口326的周围设置有漏出防止单元327。在此，进一步在开口326的内侧设置有具有开口327A的非透气性材料（例如聚乙烯片等），并且在该开口327A的边缘安装有橡胶等伸缩性部件，并适合于使用者的头部，防止二氧化碳雾漏出。此外，还可以使用细绳或带、尼龙搭扣等来代替橡胶。
压浴用罩32具有与二氧化碳雾供给管119连接的、用于将二氧化碳雾导入内部的供给口328。在该供给口328的内部设置有用于防止二氧化碳雾逆流的单向阀。进一步，压浴用罩32具有用于通过排出压浴用罩12内的气体来调节内部的压力和二氧化碳雾的浓度的排出口329。该排出口329根据控制装置14的指令而开闭。
此外，在此，在压浴用罩32内配置有椅子330，使使用者能够在座位上进行二氧化碳雾压浴。该椅子330优选使用能够根据使用者的座高而改变座面的高度的椅子。
使用本实施方式的压浴用罩32进行二氧化碳雾压浴时，使用者首先打开罩32的门325，进入罩主体321内，调节椅子330的高度，使头部的位置相对于开口326合适。然后，坐在椅子330上，使头部通过开口326，进一步使漏出防止单元327适当地安装于脖颈儿，防止二氧化碳雾漏出。之后，关闭门325，使罩32内成为大致密闭状态。在该状态下，从二氧化碳雾生成供给单元11供给二氧化碳雾，进行二氧化碳雾压浴。
此外，至此图示了在压浴用罩32内设置椅子330、使用者在座位上进行二氧化碳雾压浴的例子，但是，压浴用罩32也可以变形为用于以其它姿势进行二氧化碳雾压浴的形状。图10表示以其它姿势进行二氧化碳雾压浴时的压浴用罩32的形状例。
图10（a）为站立用压浴用罩32a。这样，站立用压浴用罩32a形成为竖长形状。在罩主体321a上设置有开口326a和漏出防止单元327a。进一步，设置有二氧化碳雾的供给口328a、排出口329a、用于出入的门325a。
图10（b）为仰卧用压浴用罩32b。这样，仰卧用压浴用罩32b形成为横长形状。在罩主体321b上设置有开口326b和漏出防止单元327b。进一步，设置有二氧化碳雾的供给口328b、排出口329b、用于出入的门325b。
此外，与上述第1实施例相同，适用压浴用罩32的机体不限于人体，还可以为动物（例如赛马或宠物等）。
在图5中，作为图2的二氧化碳雾生成单元113的具体构成例，示出了二氧化碳雾生成单元113′，进一步，参照图53来说明其它构成例的二氧化碳雾生成单元130。图53为表示二氧化碳雾生成单元130的结构的截面示意图，二氧化碳雾生成单元130预先将液体存储于内部，通过由二氧化碳供给单元111供给的气体的高速流，使液体与气体雾化并溶解，生成气雾，进一步使气体混合，将其供给到如图2等所示的压浴用罩12。
如图53所示，二氧化碳雾生成单元130包括：与气体供给单元111连接的连接部131；使来自连接部131的气流分支的分支部132；存储液体的液体存储部133；吐出利用分支部132分支的一个气流的喷嘴134；将液体输送至喷嘴134的前端的输液管135A；使被喷嘴134吐出的气流而喷上来的液体冲撞，生成气雾的挡板（冲撞部件）136；从上方使气体与生成的气雾合流的合流部137；将利用分支部132分支的另一个气流引导至合流部37的气体导入部38；以及收集并排出所生成的气雾的气雾排出部139，这些部件形成为一体。
气体供给单元111直接、或者通过气体软管（ガスコード）等与连接部131连接。连接部131的结构为，可以以一次接触连接与气体供给单元111连接的气体软管等或直接连接气体供给单元111的结构，根据所连接的气体供给单元111，可以适用各种方式。
由气体供给单元10通过连接部131供给的气体，利用分支部132被分支为两股。并且，一股流向喷嘴134，另一股流向气体导入部138。流向喷嘴134的气体从喷嘴前端134A吐出。另一方面，流向气体导入部138的气体被引导至合流部137。
图5所示的二氧化碳雾生成单元113′中的液体存储部114为从液体供给单元112直接供给液体的结构，但是，规定的液体在预先制备阶段被存储、密封于图53的二氧化碳雾生成单元130。然后，使用时将其开封，进行气雾压浴。但是，所存储的液体与二氧化碳雾生成单元113′中的液体存储部114相同，如上所述，使用水、离子水、臭氧水、生理食水、纯净水、无菌纯净水，进一步，还可以在这些液体中添加对使用者的疾病、症状等有效的物质。
在液体存储部133的底部中央配置有喷嘴134。喷嘴134从液体存储部133的底部凸起，向挡板136缩小，形成大致圆锥筒状。喷嘴134的基端与分支部132的一个分支连接，可以从喷嘴134的前端开口134A吐出气体。
吸液管135A形成于喷嘴134的外周面与比喷嘴134大一圈的大致圆锥筒状的吸液管形成部件135之间。即，如图53所示，通过以在喷嘴134上套上吸液管形成部件135的方式进行配置，由此在喷嘴134的外周面与吸液管形成部件135的内周面之间形成吸液管135A，虽然省略了图示，但是在吸液管形成部件135的基端（大致圆锥筒状部的下部）设置有微小的爪状突起部，因此，在吸液管形成部件135的基端与液体存储部133的底面之间形成有间隙，存储于液体存储部133的液体从该间隙通过吸液管135A而被吸上来。另外，吸液管形成部件135的前端部135B在喷嘴134的前端开口134A的附近开口，使吸液管135A吸上来的液体冲撞从喷嘴134吐出的气流。
吸液管135A吸上来的液体与从喷嘴134吐出的气流冲撞并被喷出，撞上配置于与喷嘴134的前端开口134A相对的位置的挡板136并雾化，生成气雾。在此，挡板136通过挡板支持部136A被固定于合流部137的内壁，但是，也可以被固定于吸液管形成部件135等。
另一方面，利用分支1部32向气体导入部138分支的气体，沿着气体导入部138到达合流部137。气体导入部138为从设置于二氧化碳雾生成单元130下部的分支部132，通过二氧化碳雾生成单元130内侧的侧面，流向上部的气体的引导路径，在二氧化碳雾生成单元130中一体形成。另外，合流部137在喷嘴134的前端开口134A上由以包围挡板136的方式配置的圆筒状的部件形成，与气体导入部138相通。因此，向利用分支部132分支的气体导入部138导入的气体，与在合流部137中生成的气雾从上方合流，向形成于圆筒状的合流部137的周围的气雾排出部139挤出气雾。
由气体导入部138向合流部137供给的气体，可以根据气体导入部138的直径大小来调节供给压。通过调节气体供给压，还可以调节二氧化碳雾生成单元130的气雾供给量。另外，气雾浓度（气体中的雾浓度）和雾的粒子大小也可以通过气体导入部138的直径大小来调节。
气雾排出部139在形成于圆筒状的合流部137的周围的空间内，收集被来自气体导入部138的气体从合流部137中赶出的气雾，与气体一同排出。被赶至气雾排出部139的气雾，从作为配置于二氧化碳雾生成单元130的上部的开口的气雾排出口139A向压浴用罩12排出。气雾排出口139A与压浴用罩12之间通过气雾供给管119连接。
此外，二氧化碳雾生成单元130还可以拆下至少包括液体存储部133的部位，与其它的新的液体存储部133更换。即，以二氧化碳雾生成单元130为组装式，通过将包括液体存储部133的更换部与其它部位组装，形成气体导入部138成为一体的二氧化碳雾生成单元130的结构。这样，通过可更换液体存储部133，使液体存储部133为一次性部件，保持卫生。另外，通过可更换液体存储部133，省略了用于向吸液管135A中补充液体的结构。此外，上述二氧化碳雾生成单元130优选在制备阶段预先进行杀菌处理。
在上述二氧化碳雾生成单元130中，如下所述，生成气雾。气体从气体供给单元10供给到喷嘴134时，喷嘴134向前端变狭窄，因此，气体被增速吐出。液体存储部133中的液体在由此时的气流产生的负压下被吸入吸液管135A，在吸液管135A的前端部135B被喷向气体，撞向挡板136，生成气雾。优选通过该冲撞生成的雾的粒径微小，具体地为10μm以下最佳。这样微小雾化的雾能够发挥出负离子的效果。
气体进一步经过分支部132从气体导入部138被导向合流部137，提高了所生成的气雾的排出压。生成的气雾与来自分支部132的气体混合，从气雾排出口139A排出。即，利用图5进行说明的话，气雾通过二氧化碳雾供给管119向压浴罩12供给。
至此说明过的压浴用罩12、22、32、32a和32b，全部收纳除了机体的头部以外的身体全身，但是，也可以为覆盖身体的局部皮肤和粘膜。图54为本发明的二氧化碳雾压浴装置的第3实施例的示意图。在此的压浴用罩150覆盖机体的局部（在本图中图示了人体的前臂的例子），形成将气雾和气体封入内部的空间。压浴用罩150由配置于内侧的第一罩（内侧罩）161；配置于外侧的包覆第一罩161整体且可大致密闭的第二罩（外侧罩）155构成。另外，压浴用罩150优选由耐压性、非透气性、非透湿性材料形成，例如由天然橡胶、硅橡胶、聚乙烯、聚丙烯、聚偏二氯乙烯、聚苯乙烯、聚乙酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚酰胺系树脂、聚四氟乙烯等形成。
内侧罩161为用于局部覆盖气雾的吸收率高的部位的大致袋状的罩，同时作为绝热用罩而起作用。即，机体罩部件150内随着时间的推移，温度上升后，在常温下生成的比较低温的气雾被供给，但是，为了使温度不立即上升，内侧罩161优选由绝热材料构成。通过穿着该内侧罩161，可以防止供给到气雾压浴中的气雾气化。内侧罩161特别是穿着在欲吸收气雾的部位、或者手掌或脚掌等汗腺多、易出汗的部位时，效果好。
在内侧罩161上设置有与气雾供给管119连接并用于将气雾和气体导入内部的供给口152。虽然未图示，但是，在该供给口152的内部设置有用于防止气雾和气体逆流的单向阀。在此，内侧罩161的端部为开口154。因此，供给到内侧罩161的气雾和气体同时通过开口154，供给到外侧罩155。
外侧罩155比内侧罩161大，为能够覆盖机体的皮肤和粘膜、以及内侧罩161整体的罩，形成为大致袋状。在外侧罩155的开口部设置有机体能够穿脱并且用于防止封入内部的气雾和气体漏出的闭锁部157。闭锁部157优选例如由具有伸缩性的尼龙搭扣构成。或者还可以单独或组合使用细绳或橡胶等。进一步，由于外侧罩155必须具有密闭性，因此，还可以在闭锁部157的内侧面配置粘着于机体的皮肤的材料。该粘着材料优选为例如由聚氨酯或硅橡胶等形成的粘弹性凝胶。进一步，该粘着材料优选设置成可拆下、且每次使用时或粘性变弱时可以交换的结构。
进一步，在外侧罩155上设置有与内侧罩161的供给口152连接、密闭外侧罩155内部并与内侧罩161和气雾供给管119连接的连接部158。进一步，虽然未图示，但是，优选在外侧罩155上设置有用于从罩内抽出气雾和气体的气雾的排出口、和用于调节罩内的压力的阀门等。罩内的压力调节可以手动进行，但是，优选根据后述的压力计171的测量值，与气雾的供给控制一同，通过控制装置160自动进行。另外，还可以设置外侧罩155内达到一定压力以上时自动打开阀门的安全阀（溢流阀）。
此外，在此，列举出了设置连接部158、与内侧罩161的供给口152连接的结构的例子，但是，只要是能够密闭外侧罩155内部、并且能够将气雾供给到内侧罩161的结构，可以适用任意的结构。
在外侧罩155内设置有用于测量其内部的压力的压力计171。控制装置160为了将外侧罩155内的压力值保持在1个大气压以上（更优选为1.01～2.5个大气压），根据该压力计171的测量值，控制气雾的生成、供给。例如，调节、停止来自气体供给单元110的气体的供给，或者从内侧罩161或外侧罩155排出气雾和气体。此外，在本实施方式中，由于使用利用开口154而使内侧罩161成为开放的状态的压浴用罩150，因此，只在外侧罩155内设置一个压力计171就足够了。另外，还可以在内侧罩161或者外侧罩155内（在此，在内侧罩161内）设置用于测量温度的温度计172。控制装置160由温度计172的测量值进行气雾供给的开关。
除此之外，还可以在压浴用罩150内设置测量氧浓度、二氧化碳浓度、湿度等的传感器类，通过控制装置60将罩内的环境控制在预先设定的各值的范围内。
控制装置160由包括CPU、存储器、显示器的电脑构成。并且，进行从气体供给单元110供给的气体的压力调节和开关切换、气雾的供给的开关切换等各种控制，使得能够在最佳的状态下进行气雾压浴。特别是由设置在压浴用罩150内的压力计171、温度计172等传感器类的测量值，调节各单元，使得在压浴用罩150内进行气雾压浴的基础上，保持最佳的状态。优选在压浴用罩150内的压力值为规定值以上时，通过控制装置160来停止气体供给单元110的气体供给。此外，上述调节也可以手动进行，而不使用控制装置160。
下面，参照表和图（图表），对表示由本发明的二氧化碳雾压浴处理带来的改善或促进缺血区域的血液循环的各种动物实验的试验结果进行详细说明。
实验时使用的个体为雄性8至10周龄的野生型老鼠，这些老鼠，利用戊巴比妥麻醉后，在显微镜下切开左大腿部，保存大腿神经，从周围组织剥离并外科摘出大腿动静脉。此外，动脉摘出部位为从大腿动脉的腹壁浅动脉分支部位中枢侧至腘动脉，进行在其间存在的股深动脉等的结扎（2处）处理，制作下肢缺血模型。
然后，将这些个体分为（1）无处理（NM）的个体组；（2）将合成空气（含有80%氮/20%氧）加压封入气雾压浴单元内，进行雾处理（AIRM）的个体组；（3）将100%氧气雾加压封入气雾压浴单元内，进行雾处理（OM）的个体组；（4）将100%二氧化碳雾加压封入气雾压浴单元内，进行雾处理（CM）的个体组；（5）除了100%二氧化碳雾处理以外，给予一氧化氮合成酶（NOS）抑制剂（L-NAME）（CM+L）的个体组。
二氧化碳雾处理每天在麻醉下进行10分钟，用聚乙烯袋覆盖老鼠的下半身，用橡皮筋束紧入口部后，使气雾充满袋内，进行二氧化碳雾处理。
个体的血流测定使用激光多普勒血流计（LDBF），从下肢缺血模型作成前到28天后经时进行该LDBF测定，从电脑上读取利用LDBF测定得到的血流图像，进行定量解析，计算出患病侧相对于健康侧的血流比例（1/N比）。另外，使用抗CD31抗体进行免疫组织染色后，将28天后作为缺血区域的大腿内收肌中的毛细血管密度定量。
图11表示各组的刚手术（缺血模型作成）后以及第28天利用激光多普勒血流计测定的血流。图12用1/N比表示各组的缺血模型刚作成后以及分别经过4天、7天、14天、21天、28天后的血流的变化。刚缺血后，各组的1/N比均为0.1以下，几乎没有血流。此时的各自的个体数，（NM）组为14个个体，（AIRM）组为15个个体，（CM）组为18个个体，（CM+L）组为8个个体。该数据还包括将100%氧雾加压封入气雾压浴单元内，进行雾处理的9个个体组。
缺血模型刚作成后，在所有的组中，1/N比低于0.05以下。（NM）组的1/N比，在缺血模型制作7天后，约为0.35；14天后，约为0.52；28天后，改善至约0.6。
（AIRM）组的1/N比，在缺血模型制作7天后，恢复至约0.5；第14天以后，与NM组无差别。100%氧雾的个体组也显示出与（AIRM）组大致相同的趋势。
（CM）组的1/N比，在缺血模型制作7天后，约为0.55；14天后，约为0.7；28天后，改善至约0.78；第7天以后，与NM组相比，具有显著的改善。（CM+L）组虽然实施了二氧化碳雾处理，但是，通过给予L-NAME，显示出1/N比被抑制。
此外，100%氧雾处理组与AIRM组之间没有差别，因此，省略了其它结果中的与100%氧雾处理相关的数据。
图13是取出缺血模型作成后经过28天后的（NM）组、（AIRM）组、（CM）组、（CM+L）组的缺血部组织（大腿内收肌），利用抗CD31抗体进行免疫组织染色的结果。图14表示根据图13，进行（NM）组、（AIRM）组、（CM）组、（CM+L）组的每1平方mm的毛细血管密度的定量解析的结果，其中，（CM）组显示出最高值。在CM组中观察到的毛细血管密度的增加，在CM+L组中未观察到。
从图15到图20，表示（NM）组、（AIRM）组、（CM）组、（CM+L）组各组的细胞内mRNA表达（mRNA expression）的相对增减。细胞基于mRNA（转录核糖核酸）合成各种蛋白质，图15、图16、图17分别表示缺血模型作成后经过4天后合成的VEGF（血管内皮生长因子）与GAPDH（甘油醛-3-磷酸脱氢酶）的比、FGF（成纤维细胞生长因子）与GAPDH的比、eNOS（内皮型一氧化氮合成酶）与GAPDH的比。另外，图18、图19、图20分别表示缺血模型作成后经过7天后合成的VEGF与GAPDH的比、FGF与GAPDH的比、eNOS与GAPDH的比。
GAPDH是随细胞刺激等变动小的蛋白质，通过求出与同时测定的GAPDH的比，表示出VEGF、FGF、eNOS的相对量。在这些图15到图20中，（CM）组与其它组相比，通过二氧化碳处理对血管再生有重要的作用的VEGF、FGF增加了。
图21表示（NM）组、（AIRM）组、（CM）组、（CM+L）组各自的缺血模型作成4天后的血浆中所含的硝酸的量。对血管的扩张作用有效的硝酸的含量，（CM）组最高。
图22以光的吸收测定为基础，测量老鼠下肢缺血模型作成时组织的氧量，表示氧合血红蛋白（oxyHb）、去氧血红蛋白（deoxyHb）、以及作为氧合血红蛋白与总血红蛋白的比的组织血氧饱和度（StO2）。在开始测定后约4分钟，进行大腿动脉支的结扎，在11分钟时进行主干结扎（本幹結紮），主干结扎后oxyHb大幅减少，因此，组织血氧饱和度（StO2=oxyHb/totalHb）也显著降低。
图23和图24以光的吸收测定为基础，测量分别进行二氧化碳雾处理中和合成空气处理中的、缺血6天后的组织的氧量，用氧合血红蛋白（oxyHb）、去氧血红蛋白（deoxyHb）、氧合血红蛋白与总血红蛋白（totalHb）、组织血氧饱和度（StO2）表示。
图25和图26测量分别进行合成空气处理中和二氧化碳雾处理中的、缺血6天后的组织的氧量，用氧合血红蛋白（oxyHb）、去氧血红蛋白（deoxyHb）、以及氧合血红蛋白与总血红蛋白（totalHb）表示。图25和图26显示出，二氧化碳雾处理与合成空气处理相比，氧合血红蛋白增加。
图27表示“由iTRAQ与LC/MS/MS同定的蛋白质的数量”与下肢缺血后由二氧化碳雾处理带来的对蛋白质的影响。为了进行蛋白质的质量分析乃至同定分析，对于每个蛋白质检体（样品），用稳定的同位素原子的分配不同的4种iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）样品（114、115、116、117）进行修饰，将修饰后的样品混合，成为用于质量分析的样品。对于每个肽的MS/MS图谱，观测反映氨基酸序列的信号与反映各个样品中所含的蛋白质的质量的报告离子（レポーターイオン）。比较研究在MS/MS解析中同定的信号强度，即，为利用了表示各个肽的量比的比较定量。通过该方法，可以明确二氧化碳雾对于细胞（特别是骨骼肌）内的蛋白质表达水平的有效性和机理。
由本发明的二氧化碳雾压浴处理带来的二氧化碳的高吸收效果，利用动物实验的各种试验结果得到了证明。以下，参照表和图表，对该实验进行说明。
首先，地球上存在的碳的原子量基本上（存在率为98.93％）是12（12Ｃ），作为稳定的同位素，存在1.07％的原子量为13的碳（13Ｃ）。稳定的同位素13Ｃ不具有放射能，为半永久稳定的同位素。另外，机体内存在的CO2也与大气中相同，基本上是12CO2。
因此，利用本发明的二氧化碳雾压浴装置，使老鼠的皮肤吸收人工制备的高浓度（99％）的13CO2，定量分析作为二氧化碳CO2的2种同位素的来自呼吸的12CO2和来自皮肤吸收的13CO2，调查老鼠组织中的碳酸性能，能够验证是否进行了有效的皮肤吸收。由此，实验分为利用本发明的二氧化碳雾压浴装置进行了13CO2雾处理的组和非处理的组，分析从皮肤吸收的13CO2在体内脏器中的分布。
分析使用作为未实施由13CO2进行的二氧化碳雾压浴处理的NO.1和NO.2这两种老鼠（以下，表示为非处理NO.1和非处理NO.2）的血浆、心脏、肝脏和肌肉各组织、以及实施了二氧化碳雾压浴处理的NO.1和NO.2这两种老鼠（以下，表示为13CO2雾处理NO.1和13CO2雾处理NO.2）的血浆、心脏、肝脏和肌肉各组织的冷冻品的16个检体为样品，从16个检体中检出碳酸（12CO2、13CO2）。以下，关于分析、试验的方法和结果，按顺序进行说明。
（1）分析、试验方法
（1.1）测定条件的设定
（1.1.1）标准溶液的制备
将碳酸钠溶于水中，调节任意浓度的溶液，采集一定量于测定用管型药瓶中，加入硫酸并密闭。测定用管型药瓶内的碳酸量为10、50、100、250、500μg这5个标准，这些操作在氮气气氛的球型箱内进行。
（1.1.2）测定
在以下的条件下，利用气体色谱质量分析计测定测定用管型药瓶中的气相部。
＜测定条件＞
·色谱柱：Pora BOND Q，长度为25m，内径为0.25mm，膜厚为3μm
·柱温：40°Ｃ（8分钟）
·载气：He
·样品注入法：顶空法（60°Ｃ、加热1分钟）
·离子化法：电子轰击质谱法（EI法：70eV）
·测定方式：选择离子监测（SIM）
·检测离子：定量离子m/z44（12CO2）、m/z45（13CO2）
（1.1.3）标准曲线的制作
测定标准溶液，以浓度（μg/管型药瓶）为纵轴，以m/z44的提取离子色谱（EIC）检出的CO2的量为横轴，进行绘制，制作标准曲线。
（1.2）老鼠组织的分析
（1.2.1）前处理方法
在样品中加入氢氧化钠溶液，解冻后，利用研钵使之均匀，采集一定量于测定用管型药瓶中，加入硫酸并密闭。这些操作在氮气气氛的球型箱内进行。在研钵中使之均匀后的操作，每个样品重复1至3次。
（1.2.2）分析值计算方法
测定前处理后的测定用管型药瓶中的样品后，根据m/z44的CO2标准曲线，将所测定的m/z44和m/z45的CO2定量。另外，用CO2的检出量除样品量，求出单位质量样品的12CO2量和13CO2量。
另外，为了修正来自呼吸的CO2中存在的天然同位素（m/z45）的影响，从13CO2的检出量中减去由12CO2量求出的13CO2量，计算出来自皮肤吸收的、即通过气雾处理吸收的13CO2量。
（2）分析、试验结果
（2.1）测定条件的准确性
（2.1.1）标准曲线的直线性
图29为在所测定的EIC色谱中，上半部分为12CO2量、下半部分为13CO2量的色谱。色谱中，横轴表示保持时间，纵轴表示浓度，正规分布的三角形状部分的面积（峰面积）为所测定的CO2的量。图30表示所制作的12CO2的标准曲线，为相关系数（R）为0.9987、接近直线的二次曲线的标准曲线。
（2.1.2）重复测定的再现性
碳酸量为500μg的标准溶液的重复测定的结果为，日内再现性为：相对标准偏差（RSD）为3至5％；样品测定间（10日间）再现性为：RSD为11％。
另外，重复从采集利用研钵均匀化的样品于测定用管型药瓶中的前处理到测定的结果显示，在所有的样品中，RSD均不足20％，为高再现性。此外，对于标准溶液的RSD为3至5％，样品的RSD为不足20％的范围的原因，认为是样品的均匀化不足或添加、密闭试剂的每个样品的时间差等的缘故，但是，是无问题的再现性水平。
（2.2）老鼠组织的分析结果
从图31到图46表示16个样品各自的EIC色谱的测定结果。在各图中，上半部分表示12CO2的色谱，下半部分表示13CO2的色谱。
另外，横轴表示保持时间、纵轴表示浓度的各色谱的峰面积为所测定的CO2的量，通过m/z44的CO2标准曲线来对所测定的m/z44（上半部分）和m/z45（下半部分）的CO2的值进行定量。
表1表示各样品中的12CO2和13CO2的定量结果。
表1
单位：μg/g
Figure BDA00002632328200301
例如，图31的色谱中，上半部分表示非处理NO.1的血浆中的12CO2的量，下半部分表示13CO2的量，用这些定量的结果除血浆的量，所求出的血浆的每单位质量的12CO2量为860μg/g，另外，13CO2量为7.6μg/g，表示在表1中。
举出另一个实例，图33的色谱中，上半部分表示13CO2雾处理NO.1的血浆中的12CO2的量，下半部分表示13CO2的量，用这些定量的结果除血浆的量，所求出的血浆的每单位质量的12CO2量为960（μg/g），另外，13CO2量为59（μg/g），表示在表22中。
这样，通过m/z44的CO2标准曲线，对非处理和13CO2雾处理的老鼠的血浆、心脏、肝脏和肌肉的各组织中的利用色谱测得的12CO2和13CO2的测定结果进行定量，用定量的结果除血浆的量，所求出的血浆的每单位质量的12CO2量和13CO2量表示在表1中。
但是，表1中表示的该定量结果为使用m/z44的CO2标准曲线计算出的值，关于13CO2，为包括来自呼吸的CO2中存在的天然同位素（m/z45）的值。因此，表2表示根据表1中所示的结果，通过从13CO2中减去来自呼吸的CO2中存在的天然同位素12CO2（m/z45）而修正的13CO2的检出值。
表2
单位：μg/g
Figure BDA00002632328200311
由于CO2的天然同位素比（m/z44：m/z45）为0.984：0.0113，因此，此时的计算式用下式表示。
13CO2检出量（修正值）＝13CO2检出量－12CO2检出量×0.0113/0.984
如表2中所示，未实施二氧化碳雾压浴处理的非处理NO.1和NO.2的老鼠的血浆、心脏、肝脏和肌肉的各组织的13CO2的检出值定量下限不足2.5μg/g，比实施了13CO2の气雾压浴处理的NO.1和NO.2的老鼠的相同各组织的13CO2的检出值低很多。
从图47至图52表示将12CO2检出量和13CO2检出量（修正值）按照不同样品和不同处理方法进行汇总的图表。
图47分别用柱状图表示对于血浆、心脏、肝脏和肌肉的各不同样品，非处理NO.1、非处理NO.2、13CO2雾处理NO.1和13CO2雾处理NO.2的各12CO2检出量。利用该图表比较非处理和13CO2雾处理的12CO2检出量时，各组织中的12CO2检出量在13CO2雾处理的样品中表现出高的趋势，但是，没有显著的差别。
图48用柱状图表示对于血浆、心脏、肝脏和肌肉的每个样品，在图47中按照非处理和13CO2雾处理的不同处理的非处理NO.1、非处理NO.2、13CO2处理NO.1和13CO2雾处理NO.2中的各12CO2检出量。在该图表中也显示出，12CO2检出量没有由处理带来的显著差。
图49分别用柱状图表示对于血浆、心脏、肝脏和肌肉的各不同样品，非处理NO.1、非处理NO.2、13CO2雾处理NO.1和13CO2雾处理NO.2的各13CO2检出量（修正值）。该图表显示出，在非处理时，各组织中的13CO2量几乎未被检出。另外，实施了13CO2雾处理时，在血浆、心脏、肝脏和肌肉各组织中，检出有效量的13CO2，表示有效地进行了二氧化碳雾压浴处理。
图50用柱状图表示对于血浆、心脏、肝脏和肌肉的每个样品，在图49中按照非处理和13CO2雾处理的不同处理的非处理NO.1、非处理NO.2、13CO2雾处理NO.1和13CO2雾处理NO.2的13CO2检出量。在该图表中也显示出，非处理时，13CO2量几乎未被检出，但是，13CO2雾处理时，在各组织中，检出有效量的13CO2雾。
图51用柱状图表示非处理NO.1、非处理NO.2、13CO2处理NO.1和13CO2处理NO.2的各13CO2检出量（修正值）相对于12CO2检出量的比例。该图表显示出，非处理时，相对于12CO2的检出量，13CO2几乎未被检出。另外，实施了13CO2雾处理时，在血浆、心脏、肝脏和肌肉各组织中，检出有效量的13CO2，表示有效地进行了二氧化碳雾压浴处理。
图52用柱状图表示在图51中按照非处理和13CO2处理的不同处理的非处理NO.1、非处理NO.2、13CO2处理NO.1和13CO2处理NO.2的各13CO2检出量（修正值）相对于12CO2检出量的比例。从该图表中也可以看出，非处理时，相对于12CO2的检出量，13CO2几乎未被检出，另一方面，实施了13CO2雾处理时，在血浆、心脏、肝脏和肌肉各组织中，13CO2被检出。
下面，表3汇总了关于非处理组的老鼠的检体1至检体4以及13CO2处理组的老鼠的检体1至检体4的同样的实验结果。
表3
Figure BDA00002632328200331
在表3中，在非处理组的检体1至检体4的各组织中检出的13CO2和12CO2的各自的平均值的比例大致为0.01（例如，血浆时，为7.15/917.25＝0.008），为与大气中相同程度的值，相对于此，在13CO2处理组中的相同比例（例如，血浆时，为49.0/966＝0.05），在血浆中，增加到非处理组的6倍以上；在心脏、肝脏、骨骼肌中，均增加到非处理组的3倍以上。
另外，关于非处理组的检体1至检体4的各组织中检出的总CO2的平均值、与13CO2处理组的检体1至检体4的各组织中检出的总CO2的平均值的比例，在血浆中，为1.10（1015.05/924.4）倍，为轻度的增加，但是，在心脏中，增加到1.59（640.5/402.0）倍，认为有助于促进脏器内的代谢机能。
上述的分析结果表明了，利用本发明的二氧化碳雾压浴处理，使老鼠的皮肤吸收13CO2时，在老鼠的体内脏器中，有效地分布有13CO2，由此可以证明，使用本发明的二氧化碳雾压浴处理时，二氧化碳能够有效地从机体的皮肤进入机体内。
由此，通过使二氧化碳雾对机体的皮肤和粘膜施加规定的压力（机体的内部压以上），并与机体的皮肤和粘膜接触，二氧化碳能够有效进入到血液中，能够提高二氧化碳浓度，由此能够改善缺血区域。
如以上详细说明的那样，在本二氧化碳雾压浴方法中，使下述步骤（a）至（d）的二氧化碳雾的压浴至少1日20分钟以上持续4周。（a）使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾的步骤；（b）在将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元内进行所述二氧化碳雾喷雾的步骤；（c）在将所述二氧化碳雾包围单元内的气体维持在高于大气压的规定值以上的条件下，根据需要，与所述步骤（b）同时进行，使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的步骤；（d）控制对于所述二氧化碳雾包围单元内的所述二氧化碳雾的供给量的步骤。由此，能够通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤接触，改善或促进缺血区域的血液循环。
工业实用性
本发明涉及通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗机体的缺血性疾病的二氧化碳雾压浴方法以及二氧化碳雾压浴装置，具有工业实用性。
附图标记说明
10、10A二氧化碳雾压浴装置
11   二氧化碳雾生成供给单元
111  二氧化碳供给单元
112  液体供给单元
113  二氧化碳雾生成单元
113′二氧化碳雾生成单元（吹雾式）
114  液体存储部
115A 喷嘴
115B 吸液管
116  挡板
117A 二氧化碳供给部
117B 二氧化碳导入部
118A 二氧化碳雾收集部
118B 二氧化碳雾导出部
119  二氧化碳雾供给管
12   压浴用罩
121  罩主体
122  开闭部
123  开口部
124  供给口
125  排出口
13   浓度计
14   控制装置
141  流量阀
142  切换阀
150  压浴用罩
151  压力计
20   二氧化碳雾压浴装置
21A、21B二氧化碳雾生成供给单元
22   马用压浴用罩
221  罩主体
222  开闭部
223  开口部
224A、224B 供给口
225  排出口
30   二氧化碳雾压浴装置
32   压浴用罩
321  罩主体
322  上部
323  底部
324  侧部
325  门
325A 把手
326  开口
327  漏出防止单元
327A 开口
328  供给口
329  排出口
32a  站立用压浴用罩
32b  仰卧用压浴用罩
321a、321b 罩主体
325a、325b 门
326a、326b 开口
327a、327b 漏出防止单元
328a、328b 供给口
329a、329b 排出口
330  椅子

Claims (16)

1.一种二氧化碳雾压浴方法，该方法通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗机体的缺血性疾病，其特征在于，该方法具有以下各步骤：
（a）使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾的步骤；
（b）在将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元内进行所述二氧化碳雾喷雾的步骤；
（c）在将所述二氧化碳雾包围单元内的气体维持在高于大气压的规定值以上的条件下，根据需要，与所述步骤（b）同时进行，使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的步骤；
（d）使对于所述二氧化碳雾包围单元内的所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟的步骤；以及
使所述步骤（a）至（d）的二氧化碳雾的压浴至少1日1次持续4周的步骤。
2.根据权利要求1所述的二氧化碳雾压浴方法，其中，所述步骤（d）为测量所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度，并且使所述二氧化碳雾的供给至少持续20分钟，使所述二氧化碳雾的浓度为规定值以上的步骤。
3.根据权利要求1或2所述的二氧化碳雾压浴方法，其中，在所述步骤（d）中，控制所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾包围单元内的气压为规定值。
4.根据权利要求2所述的二氧化碳雾压浴方法，其中，所述二氧化碳雾含有粒径为10μm以下的二氧化碳雾。
5.根据权利要求4所述的二氧化碳雾压浴方法，其中，所述步骤（d）中，所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度为60％以上。
6.根据权利要求3所述的二氧化碳雾压浴方法，其中，所述步骤（c）中，所述二氧化碳雾包围单元内的气压为1.01至2.5个大气压。
7.一种二氧化碳雾压浴装置，该装置通过使二氧化碳直接或通过衣服与机体的皮肤和粘膜接触，以改善或促进缺血区域的血液循环，从而预防、改善或治疗机体的缺血性疾病，其特征在于，该装置包括以下各单元：
用于将机体包围成密闭状态的二氧化碳雾包围单元；
使二氧化碳在液体中雾化并溶解，生成雾状的二氧化碳雾，将该二氧化碳雾供给到所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾生成供给单元；
用于使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部的排出单元；
使所述二氧化碳雾包围单元内的气体排出到外部，并且根据需要，控制来自所述二氧化碳雾生成供给单元的所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾包围单元内的气压为规定值范围内的控制单元。
8.根据权利要求7所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，该装置还包括测量所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度的浓度检测单元；
所述控制单元控制所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾的浓度为规定值以上。
9.根据权利要求8所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，该装置还包括测量所述二氧化碳雾包围单元内的气压的气压检测单元；
所述控制单元控制所述二氧化碳雾的供给量，使所述二氧化碳雾包围单元内的气压为规定值。
10.根据权利要求7所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，所述二氧化碳雾生成供给单元生成粒径为10μm以下的二氧化碳雾。
11.根据权利要求7所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，所述控制单元将所述二氧化碳雾包围单元内的二氧化碳雾的浓度维持在60％以上。
12.根据权利要求9所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，所述控制单元将所述二氧化碳雾包围单元内的气压维持为1.01至2.5个大气压。
13.根据权利要求7所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，所述二氧化碳雾包围单元为形成将所述二氧化碳雾密封在内部的空间的、可折叠的罩型、袋型或固定放置型的箱型中的任意一种包围单元。
14.根据权利要求13所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，所述二氧化碳雾包围单元包括：
用于向其内部导入所述二氧化碳雾的、内部具有单向阀的二氧化碳雾供给口；
用于排出内部的气体的排出口；
用于机体出入的出入口；以及
使机体的头部从所述箱主体内露出的开口。
15.根据权利要求14所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，在所述开口设置有防止二氧化碳雾从该开口与机体之间的间隙漏出的漏出防止单元。
16.根据权利要求13所述的二氧化碳雾压浴装置，其中，所述箱型的二氧化碳雾包围单元的内部具有椅子。
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