CN103006718A - 一种有效降解血脂的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种云芝多糖与银杏黄酮的复配物及其降解血脂方法，该方法采用云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药，降低高血脂大鼠模型血脂水平。分别提取药用真菌云芝多糖，天然药用植物银杏叶中的黄酮类化合物。云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，可显著性降低大鼠肝指数、血清TC值、TG值、LDL-C值及NEFA含量，并显著性增加血清的HDL-C值，同时云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药对高血脂大鼠肝损伤模型有一定的改善作用。

Description

一种有效降解血脂的组合物

技术领域

本发明属于生物医学和食品保健技术领域，尤其涉及一种云芝多糖与银杏黄酮的复配物及其作用。

背景技术

高脂血症，又称高血脂症、高脂蛋白血症，是一种严重威胁人类健康的疾病，是非酒精性脂肪肝病及动脉粥样硬化等心脑血管疾病的重要病理基础。高脂血症可引起全血黏度和血浆黏度的升高。后者常导致红细胞变形能力下降，血液循环状态紊乱，使血管内皮细胞与血液有形成分之间的相互作用方式发生了改变，血小板、白细胞的黏附及聚集性增强，血管壁受到的变应力增强，内皮细胞更易于损伤，加重心血管疾病的发生。目前，临床常用的降血脂药物他汀类、胆酸螯合树脂类、烟酸类、氯贝丁酯类、亚油酸类等，在一定程度上可阻遏高血脂所致的系列心脑血管疾病发展，但多数存在着停药反跳现象，长期服用可导致不同的严重不良反应。因此从自然界中寻找有效的降低血脂的生物活性物质成为研究的热点。

云芝多糖是从担子菌纲云芝菌丝体中提取的一种蛋白多糖，具有多种生物活性。早期对云芝多糖的研究主要集中在免疫调节和抗肿瘤等方面。近年来发现云芝多糖有一定调血脂作用。而银杏黄酮是银杏叶的提取物，研究证明银杏黄酮具有改善人体心血管功能，增强记忆力，提高机体免疫机能和降血脂作用。而多种生物活性物质的复配经常能进一步提高其作用，但到目前为止，还没有利用云芝多糖和银杏黄酮复配物来进行降血脂的研究被报道。本专利主要对云芝多糖和银杏黄酮复配物对降血脂作用进行了研究。

发明内容

本发明提供了一种云芝多糖与银杏黄酮的复配物及其降解血脂的技术方案，旨在解决现有技术提供的用于降低高血脂的药物，用药周期长，副作用大，降脂效果不明显的问题。

本发明的目的在于提供一种有效降解血脂的组合物，云芝多糖中多糖含量为30％，银杏黄酮中黄酮含量为25％，云芝多糖和银杏黄酮按重量比例复配，云芝多糖和银杏黄酮以1-9份∶9-1份混合。

进一步，云芝多糖和银杏黄酮按重量比例复配，云芝多糖和银杏黄酮以1-9份∶9-1份混合，优选5∶5。

进一步，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，云芝多糖75mg/kg/d、银杏黄酮75mg/kg/d，降低大鼠肝指数、血清中的TC值、TG值、LDL-C值及NEFA含量，并增加血清中的HDL-C值。

本发明提供的一种云芝多糖与银杏黄酮的复配物及其降解血脂方法，该方法采用云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药，降低高血脂大鼠模型血脂水平。分别提取药用真菌云芝多糖，天然药用植物银杏叶中的黄酮类化合物。云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，可显著性降低大鼠肝指数、血清TC值、TG值、LDL-C值及NEFA含量，并显著性增加血清的HDL-C值，同时云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药对高血脂大鼠肝损伤模型有一定的改善作用。

附图说明

图1是本发明实施例提供的正常对照组中大鼠肝组织形态学变化图；

图2是本发明实施例提供的高血脂模型组中大鼠肝组织形态学变化图；

图3是本发明实施例提供的阳性对照组中大鼠肝组织形态学变化图；

图4是本发明实施例提供的云芝多糖单用组中大鼠肝组织形态学变化图；

图5是本发明实施例提供的银杏黄酮单用组中大鼠肝组织形态学变化图；

图6是本发明实施例提供的云芝多糖与银杏黄酮联合用药组1中大鼠肝组织形态学变化图；

图7是本发明实施例提供的云芝多糖与银杏黄酮联合用药组2中大鼠肝组织形态学变化示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步的详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定发明。

本发明的目的在于提供一种降低高血脂大鼠模型血脂的方法，该方法采用云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药，降低高血脂大鼠模型血脂水平。

在本发明实施例中，云芝多糖中多糖含量为30％，银杏黄酮中黄酮含量为25％。

在本发明实施例中，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时的用药剂量为：云芝多糖75mg/kg/d、银杏黄酮75mg/kg/d。

在本发明实施例中，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，可显著性降低大鼠肝指数、血清TC值、TG值、LDL-C值及NEFA含量，并显著性增加血清的HDL-C值。

在本发明实施例中，云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药对高血脂大鼠肝损伤模型有一定的改善作用。

下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。

一.实验目的

观察云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药对高血脂大鼠模型的降血脂作用。

二.实验材料

1.受试药物

云芝多糖：多糖含量：30％

银杏黄酮：黄酮含量：25％

阳性对照药：血脂康胶囊(北京北大维信生物科技有限公司，国药准字Z10950029，适应症：除湿祛痰，活血化瘀，健脾消食。用于脾虚痰瘀阻滞症的气短、乏力、头晕、头痛、胸闷、腹胀、食少纳呆等；高脂血症；也可用于由高脂血症及动脉粥样硬化引起的心脑血管疾病的辅助治疗。规格：0.3g*24片，批号：20110707，有效期至2013年6月。

溶剂：0.5％CMC-Na

2.实验动物

2.1来源、种属、品系、合格证：SPF级SD大鼠84只，动物合格证：浙江省实验动物中心，合格证号：SCXK(浙)2008-0033。

2.2体重：200～250g

2.3性别：雄性

2.4各组动物数：12只/组

2.5饲养：动物饲养于25±3℃，相对湿度40-60％，昼夜明暗交替时间12h，动物自由摄食、饮水，适应性饲养7天后用于实验。

3.主要试剂

血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和游离脂肪酸(NEFA)试剂盒均购自南京建成生物科技有限公司，由北京北化康泰临床试剂有限公司生产；CMC-Na：国药集团化学试剂有限公司，批号F20100719；胆固醇，安徽天启化工科技有限公司；胆酸钠，安徽天启化工科技有限公司；蔗糖，南京化学试剂有限公司，批号：11081120778。

4.主要仪器

SH-1000全波长酶标仪：日本株式会社日立制造所；80-2台式低速离心机：上海医疗器械(集团)有限公司手术器械厂；Sartorius分析天平：北京多利斯天平有限公司；HW-1000水浴锅：成都泰盟科技有限公司；EPED-20TF实验室级超纯水机：南京易普达科技发展有限公司。

三.实验方案

1.动物分组：将84只SD雄性大鼠随机分为7组，每组12只。分别为：

正常对照组：溶剂0.5％CMC-Na溶液

高血脂模型组：溶剂0.5％CMC-Na溶液

云芝多糖单用组：150mg/kg/d，多糖含量：30％(英骏生物技术有限公司)

银杏黄酮单用组：150mg/kg/d，黄酮含量：25％(英骏生物技术有限公司)

云芝多糖与银杏黄酮联合用药组(联合用药组)：云芝多糖75mg/kg/d+银杏黄酮75mg/kg/d

阳性对照组：血脂康150mg/kg/d

2.造模和给药：除正常对照组给予普通饲料外，其他各组均用高脂饲料喂养，自由饮水。各给药组连续灌胃饲养7周，每2周称量体重一次。第5周开始正常对照组和高血脂模型组大鼠自眼眶静脉丛取血测定血清总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量，以判断高血脂模型成功与否，每周1次，至第7周时TC和TG值达到文献参考值，初步判断高血脂模型形成。

3.高脂饲料的配方：胆固醇2％，胆酸钠0.5％，蔗糖5％，猪油10％，基础饲料82.5％。

4.检测指标：于末次给药后禁食不禁水12h，各组大鼠均从颈动脉取血，分离血清，按试剂盒方法测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(NEFA)水平。剖取肝组织测定肝指数，最后福尔马林固定，行病理组织学检查。

四.统计学处理方法

实验数据用SPSS 11.5软件处理，多组样本均数间比较用Dunnett t检验，不符合t检验条件的样本用Tamhane-T2检验。所有数据均用均数±标准差表示。p＞0.05，表示无统计学意义；p＜0.05，表示有显著性差异。

五.实验结果

1.受试药各组对高血脂模型大鼠体重及肝指数的影响

表1受试药各组对高血脂模型大鼠体重及肝指数的影响(n＝8，

)

注：与正常对照组比较，^**p＜0.01；与模型组比较，^#p＜0.05，^##p＜0.01。

由表1可见，各组大鼠体重均逐步增加，与正常对照组相比，高血脂模型组大鼠的肝指数显著性增加(p＜0.001)，这与大鼠长期进食高脂饲料，导致肝内胆固醇等脂类物质的蓄积，肝湿重增加有关。与高血脂模型组比较，受试药各组均可显著性降低大鼠肝指数(p＜0.05)，分别降低14.29％、12.96％和11.64％，其中联合用药组肝指数的下降值最明显。

2受试药各组对高血脂模型大鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C的影响

表2受试药各组对高血脂模型大鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平影响(n＝8，

)

注：与正常对照组比较，^**p＜0.01，^***p＜0.001；

与模型组比较，^#p＜0.05，^##p＜0.01，^###p＜0.001。

由表2可见，与正常对照组相比，高血脂模型组大鼠血清TC、TG和LDL-C水平均显著性升高(p＜0.001)。HDL-C为动脉粥样硬化性心血管病的保护因子，高血脂模型组HDL-C值显著性降低(p＜0.001)，说明高血脂大鼠模型的制备是成功的。与高血脂模型组比较，联合用药组的TC值显著性下降(p＜0.001，)，下降19.90％；受试药各组均可显著性降低TG值和LDL-C值，显著性增加HDL-C值，其中联合用药组1和联合用药组2改善程度最显著(p＜0.001)。由表2分析，受试药各组均对高血脂大鼠模型有一定的降血脂作用，云芝多糖和银杏黄酮联合应用有协同作用。

3.受试药各组对高血脂模型大鼠血清NEFA的影响

表3受试药各组对高血脂模型大鼠血清NEFA的影响(n＝8，

)

注：与正常对照组比较，^***p＜0.001；

与模型组比较，^#p＜0.05，^##p＜0.01，^###p＜0.001。

由表3可见，本实验通过连续7周给予高脂饲料喂养大鼠，造成高血脂模型，与正常对照组相比，高血脂模型组大鼠血清中NEFA含量显著增加(p＜0.001)。高脂饮食会导致NEFA进入肝细胞增多，超过肝脏的氧化能力，脂质过氧化反应加重干扰了肝内脂类代谢使过剩的NEFA酯化为TG在肝内蓄积，促进脂肪肝的形成。受试药各组与模型组相比NEFA含量均显著降低(p＜0.001)，联合用药组降低幅度最明显，下降率为21.17％。提示受试药各组对肝脏脂质类物质的蓄积有一定的调节作用，云芝多糖和银杏黄酮联用对高血脂模型的降血脂有协同作用。

4.受试药各组对高血脂模型大鼠肝脏病理组织学变化的影响

组织病理学检查，各种随机取3份，各标本经10％福尔马林固定、取材、脱水、浸蜡、包埋，再切成4μm厚切片，HE染色，光镜观察。结果如下：

(1)、正常对照组：

肝小叶、汇管区结构正常。肝细胞未见明显变性、坏死，无淤胆，无急慢性炎细胞浸润及纤维间隔形成等病理改变。

(2)、高血脂模型组：

本组3/3例肝脏均可见肝细胞脂肪变性，其中2/3例肝脏可见部分肝细胞崩解坏死，坏死灶内及周围见数量不等的炎细胞浸润，未见明显纤维间隔形成。

(3)、阳性对照组：

本组3/3例肝脏见部分肝细胞胞浆疏松化，未见肝细胞脂肪变性，未见坏死，未见明显纤维间隔形成。

(4)、云芝多糖单用组：

本组3/3例肝脏见部分肝细胞胞浆疏松化，未见肝细胞脂肪变性，未见坏死，未见明显纤维间隔形成。

(5)、银杏黄酮单用组：

本组2/3例肝脏见部分肝细胞胞浆疏松化，未见肝细胞脂肪变性，未见坏死，未见明显纤维间隔形成；另1/3例肝脏未见明显病理改变。

(6)、云芝多糖与银杏黄酮联合用药组1：

本组1/3例肝脏见部分肝细胞胞浆疏松化，未见肝细胞脂肪变性，未见坏死，未见明显纤维间隔形成；另2/3例肝脏未见明显病理改变。

由以上结果可以得出，云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药对实验所致高血脂大鼠肝损伤模型有一定的改善作用。

六.结论

云芝多糖和银杏黄酮联用对高血脂模型大鼠具有一定的降血脂作用，联合用药组比单用组降血脂效果明显。

本发明实施例提供的降低高血脂大鼠模型血脂的方法，该方法采用云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药，降低高血脂大鼠模型血脂水平，云芝多糖中多糖含量为30％，银杏黄酮中黄酮含量为25％，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时的用药剂量为：云芝多糖75mg/kg/d、银杏黄酮75mg/kg/d，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，可显著性降低大鼠肝指数、血清TC值、TG值、LDL-C值及NEFA含量，并显著性增加血清的HDL-C值，同时云芝多糖与银杏黄酮联合经口给药对高血脂大鼠肝损伤模型有一定的改善作用。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种有效降解血脂的组合物，其特征在于，云芝多糖中多糖含量为30％，银杏黄酮中黄酮含量为25％，云芝多糖和银杏黄酮按重量比例复配，云芝多糖和银杏黄酮以1-9份∶9-1份混合。

2.如权利要求1所述的有效降解血脂的组合物，其特征在于，其特征在于，云芝多糖和银杏黄酮按重量比例复配，云芝多糖和银杏黄酮以1-9份∶9-1份混合，优选5∶5。

3.如权利要求1所述的有效降解血脂的组合物，其特征在于，云芝多糖与银杏黄酮联合用药时，云芝多糖75mg/kg/d、银杏黄酮75mg/kg/d，降低大鼠肝指数、血清中的TC值、TG值、LDL-C值及NEFA含量，并增加血清中的HDL-C值。

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