CN103002863B

CN103002863B - 利用多种活性物质改善色素沉着斑点外观的方法

Info

Publication number: CN103002863B
Application number: CN201080068174.1A
Authority: CN
Inventors: C·L·斯万松; 箱崎智洋; L·T·劳克林二世
Original assignee: Procter and Gamble Ltd
Current assignee: Procter and Gamble Ltd; Procter and Gamble Co
Priority date: 2010-07-22
Filing date: 2010-07-22
Publication date: 2014-11-12
Anticipated expiration: 2030-07-22
Also published as: CA2804830A1; WO2012011905A1; KR20130027040A; EP2448548B1; KR20150048918A; EP2448548A1; CN103002863A; JP2012519734A

Abstract

改善色素沉着斑点外观的方法可包括将组合物施用到皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤，所述组合物包含安全且有效量的用于色素沉着斑点的速效剂，其中所述速效剂是糖海带提取物，和安全且有效量的用于色素沉着斑点的缓效剂，其中所述缓效剂选自维生素B3、1,3-二羟基-4-烷基苯、以及它们的组合，其中至少每天施用述组合物一段足以使所述速效剂和缓效剂两者改善色素沉着斑点外观的时间。所述方法可包括识别面部皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤。

Description

利用多种活性物质改善色素沉着斑点外观的方法

发明领域

本发明涉及使用一种速效剂和缓效剂来改善哺乳动物皮肤中的色素沉着斑点外观的方法。

发明背景

人类皮肤包括三个主要层：表皮、真皮和皮下脂肪层。表皮包括四层（从顶部至底部）：角质层、颗粒层、棘层和基底层。单独的第五层（透明层）可存在于角质层和颗粒层之间。基底层产生细胞，这些细胞会逐渐向上转移以形成其它表皮层。当这些细胞向上转移时，它们失去了它们的中央核并开始产生皮肤蛋白（角蛋白）和脂肪（脂质）。当存在于表皮的上层时，这些细胞被识别为角质细胞。黑素细胞是位于表皮基底层的另一类细胞。黑素细胞负责黑素的产生，所述黑素是皮肤色素沉着的主要因素。

黑素是在黑素细胞内由一组复杂的反应产生的，这些反应在基本水平上涉及酪氨酸酶以及作为底物的L-酪氨酸。酪氨酸酶催化L-酪氨酸至DOPA（L-3,4-二羟基苯丙氨酸）的转化和DOPA至多巴醌的转化。多巴醌经历进一步转化以形成黑素。黑素在被称作黑素小体的细胞器中聚集，黑素小体沿着被称为枝状体的黑素细胞的细丝被转移到角质细胞。在黑素小体中表达有大约1500种基因产物，其中600种在任何时候都能表达，同时其中100种被认为是黑素小体所独有的。此外，还有许多调控元件涉及信号发送、黑素小体在黑素细胞内的传送、以及将黑素小体转移到角质细胞的过程。

黑素的产生可由多种外部的和内部的事件引发。例如，当皮肤经受紫外线辐射时，黑素细胞产生附加的黑素。接着，黑素经由黑素小体运输到角质细胞，这使得皮肤留下了“晒黑的”外观。一旦移除紫外线，黑素细胞就恢复到黑素产生的正常水平。炎症可通过由介体如IL-1、内皮素-1和/或干细胞因子直接刺激黑素细胞引发色素沉着过度。在受损皮肤中产生的或从炎性的细胞作为副产物释放的反应性氧物质，例如过氧化物和一氧化氮，可为黑素细胞的刺激物。

随着时间推移，慢性紫外线曝光和其它固有的及外在的老化因素可导致角质细胞和/或黑素细胞中持久的基因表达的改变从而引起年龄相关的色素沉着斑点。据报导，一些黑素生成相关的基因的mRNA含量（例如酪氨酸酶，TYRP1）随着光化雀斑（老年斑）而增加。在色素沉着过度中也可有表皮内皮素的瀑布状的强化和干细胞因子的作用。这些变化可引起黑素的过度产生和因此而得到的、甚至在避免如紫外线曝光的侵害时所仍持续的黑素沉着斑点。甚至超出色素沉着斑点，慢性紫外线曝光和其它固有的或外部的老化因素可导致更多皮肤色调的微小变化。通常，这些变化被描述为不均匀的色调或斑点纹状外观。至少一项研究表明，老年斑有时使人看上去比实际年龄要老10到12岁，而且黑素的分布可加深对肤色相关的年龄的感知。

现在也有必要研发组合物以用于改善色素沉着斑点的外观，这些组合物同时提供快速的改善和长期的改善。使用者需要一种组合物，这种组合物产生快速的、明显的色素沉着斑点的改善，同时也提供持续的、长期的改善。因此，持续期望存在对能提供可迅速和持续地改善色素沉着斑点外观的治疗的组合物和方法有着持续的愿望。

糖海带（Laminaria Saccharina）（一种褐色藻类）的提取物是本领域已知的。一个实例是以商品名菲罗蕊金由Marine Biotech,France出售的产品。如美国专利申请公开2008/0119527A1中所描述的，菲罗蕊金已知为可调控皮脂腺活性的反脂溢性剂。褐色藻类的提取方法也是已知的。欧洲专利1074262B1描述了褐藻类与楔基海带（Laminaria Ochroleuca）种的提取方法。这些提取物被描述为用于如渗透保护膜、自由基清除剂、或抗皮肤老化作用的化妆品组合物中。一种以商品名为SK-II面部精华(Procter&Gamble,Cincinnati,OH)的化妆品组合物具有约1.25%的菲罗蕊金浓度。SK-II面部精华以一种滋润皮肤而不增加油性光泽的补水水凝面膜进行市售。

发明概述

改善色素沉着斑点外观的方法包括将组合物施用到皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤，所述组合物包含安全且有效量的用于治疗色素沉着斑点的速效剂（其中所述速效剂是糖海带提取物）和安全且有效量的用于色素沉着斑点的缓效剂（其中所述缓效剂选自维生素B3、1,3-二羟基-4-烷基苯、以及它们的组合），其中至少每天施用所述组合物一段足以使速效剂和缓效剂两者改善色素沉着斑点外观的时间。

减轻色素沉着斑点外观的方法，所述方法包括将包含安全且有效量的速效剂的第一组合物施用到面部皮肤上的色素沉着斑点的步骤，其中所述速效剂是糖海带提取物，并且其中施用所述速效剂足以使糖海带提取物改善色素沉着斑点外观的第一段时间；同时第二组合物包含安全且有效量的缓效剂，其中所述缓效剂选自维生素B3，1,3-二羟基-4-烷基苯、以及它们的组合，并且其中施用所述缓效剂足以改善色素沉着斑点外观的第二段时间。

为回应在发明背景中已被确认的技术问题，本发明可采用其它形式。如在说明中可更充分地理解的，发明人惊奇地发现：用以治疗色素沉着斑点的速效剂不一定提供最好的持续的改善。为强调这个问题，本文所述的组合物和方法利用一种速效活性物质和一种缓效活性物质来改善色素沉着斑点。在下文的发明详述中将更好地理解本发明的其它形式。

附图简述

据信，通过以下结合附图的说明将更好地理解本发明。参考图片不应理解为是对本发明范围的限制。

图1是点滴器形式的示例性施用装置。

图2是棒状形式的示例性施用装置。

图3是窄头管形式的示例性施用装置。

图4是一张参与者的全彩图像。

图5是如图4所示的同一位参与者的黑素浓度图谱。

发明详述

除非另外指明，本文所用的所有百分比和比率均按总组合物的重量计，并且所有的测量均在25℃下进行。所有数值范围是包括端值在内的较窄范围；所述的范围上限和下限是可互换的以形成没有明确描述的其它范围。

本发明的组合物可包含本文所述的基本组分以及任选成分、基本上由其组成、或由其组成。如本文所用，“基本上由…组成”是指所述组合物或组分可包括附加成分，只要所述附加成分不会在本质上改变本发明权利要求保护的组合物或方法的基本特性和新型特性。

如关于组合物所用的术语“施用”是指将本发明的组合物施用或铺开在人类的皮肤表面例如表皮上。

如本文所用，术语“皮肤病学可接受的”是指所述组合物或组分适用于与人类的皮肤组织接触，而无不适当的毒性、不相容性、不稳定性、过敏性反应等等。

如本文所用的术语“安全且有效量”是指足以显著地引起积极有益效果的化合物或组合物的量。

如本文所用的术语“发炎后色素沉着过度”是指对瞬时发炎事件产生响应而引起色素沉着的急性到慢性的增加。发炎后色素沉着过度是尤其普及于但不限于黑色皮肤受检者。一旦瞬时发炎事件消失，发炎后色素沉着过度通常就平息了。瞬时发炎事件的实例包括但并不限于痤疮病变、毛发向内生长、刮伤、昆虫叮咬、表面活性剂的伤害和短期紫外线曝光。

如本文所用的术语“色素沉着斑点”是指限定的皮肤区域，其中由于局部的和慢性的或系统性过度产生的黑素，所述色素沉着大于邻近区域的皮肤的色素沉着。色素沉着斑点的直径通常介于约2mm和约10mm之间，但是斑点也可能更大或更小。色素沉着斑点可包括老年斑、太阳斑、阳光雀斑、低黑色素病变、雀斑和黄褐斑点中的一者或多者。

如本文所用的术语“老年斑”是指限定的皮肤区域，其中因由固有的或外在的老化因素引起的局部的和慢性的黑素过度产生而使得该区域的色素沉着大于相邻区域的皮肤色素沉着。

如本文所用的术语“皮肤色调”是指在皮肤上由系统性而非瞬时的黑素合成所形成的黑素的总体外观。皮肤色调通常在较大的皮肤区域之上进行表征。理想地，所述区域可小于100mm²，但是想象成整个面部皮肤或任何面部皮肤表面的较大区域。皮肤色调可通过图像分析来测量。例如，总体明度可通过在L*a*b色彩空间中的L*坐标来测量（国际照明委员会）。发色团作图，例如黑素作图和黑素浓度，可用作整体皮肤色调的指示。平均黑素可由发色团图谱数据来计算。另外，皮肤色调的均匀度可由黑素的均匀度进行确定，黑素的均匀度也可由发色团图谱数据来计算。合适的发色团作图技术在以下实例中进行了讨论。

如本文所用的术语“面部皮肤表面”是指额头、眶周、脸颊、口周、下巴和鼻部皮肤表面中一者或多者。

如本文所用的术语“速效的”是指在少于或等于4周的时间内提供在黑素沉着斑点上的明显改善（例如尺寸或暗度）。

如本文所用的术语“缓效的”是指在约4周至约8周以后提供在黑素沉着斑点上的明显改善（例如尺寸或暗度）。

I.组合物

本发明涉及多种组合物，并且更具体地涉及用于局部施用到皮肤表面的组合物。所述组合物可被制成多种产品形式，包括但不限于溶液、悬浊液、乳液、面霜、凝胶、爽肤水、棒状产品、笔状产品、喷剂、气溶胶、油膏、液体清洗液和固体棒、香波和毛发调理剂、软膏、泡沫、粉末、摩丝、剃刮膏、湿巾、试纸、遮瑕膏、电子粉片遮瑕膏、伤口敷料和粘性绷带、水凝胶、成膜产品、面部和皮肤面膜（有或没有不溶薄片），如基础粉底、眼线和眼影的化妆品等等。所述组合物形式可按照特定的皮肤病学可接受的载体选择，如果这些载体在所述组合物中存在的话。

A.用于色素沉着斑点的速效剂(“速效剂”)

本发明的组合物包含可用于改善色素沉着斑点的速效剂。在某些实施方案中，所述速效剂可包括安全且有效量的糖海带提取物（一种褐色藻类提取物）。优选的提取物是购自Marine Biotech,France的菲罗蕊金和/或菲罗蕊金BG。另一种合适的糖海带提取物是从Ennagram,France公司的产品代号为HG657的产品获得的。所述组合物可包含菲罗蕊金和/或菲罗蕊金BG，其量按所述组合物的重量计为0.008%至50%，在一个实施方案中为约0.04%至20%，在另一个实施方案中为0.2%至10%。在另一个实施方案中，所述组合物包含按所述总组合物的重量计约1%至5%，并且在另一个实施方案中1%至3%的菲罗蕊金和/或菲罗蕊金BG。

所述糖海带提取物可包括其它化合物，例如水、增稠剂、保湿剂、溶剂和增溶剂等。例如，菲罗蕊金和/或菲罗蕊金BG大约包含约1%至约2.5%的干提取物，其中剩余材料为惰性载体。因此，本发明的组合物可包含糖海带提取物，其量按所述组合物的重量计为约0.00008%至约1.25%，在一个实施方案中为约0.0004%至约0.5%，在另一个实施方案中为约0.002%至约0.25%。在另一个实施方案中，所述组合物包含按所述总组合物的重量计约0.01%至约0.125%，并且在另一个实施方案中约0.01%至约0.075%的糖海带提取物。所述糖海带提取物可通过本领域已知的方法来制备，所述方法为例如在欧洲专利1074262B1中所描述的。

在某些实施方案中，所述速效剂可包含安全且有效量的N-酰基氨基酸化合物。所述氨基酸可为本领域已知的任何一种氨基酸。N-酰基氨基酸化合物包括N-酰基氨基酸、它们的异构体、它们的盐、以及它们的衍生物。本发明的组合物可包含按所述组合物的重量计约0.0001至约25%、约0.001至约10%、约0.01至约5%、或约0.2至约2.5%的N-酰基氨基酸。本发明所述的N-酰基氨基酸化合物符合下式I：

式I

其中R可为氢、烷基（取代或未取代的，支链或直链的）、芳基、或者烷基和芳族基团的组合。本领域已知的氨基酸可能的侧链的列表描述于1981年由W.H.Freeman and Company出版的Stryer的“Biochemistry”中。R¹可为饱和或不饱和的、直链或支化的、取代或未取代的C₁-C₃₀的烷基；取代或未取代的芳族基团；或它们的混合物。

N-酰氨基酸化合物可选自：N-酰基苯丙氨酸、N-酰基酪氨酸、它们的异构体、它们的盐、以及它们的衍生物。氨基酸可为D或L异构体、或它们的混合物。N-酰基苯丙氨酸符合下式II：

式II

其中R¹可为饱和或不饱和的、直链或支化的、取代或未取代的C₁-C₃₀的烷基；取代或未取代的芳族基团；或它们的混合物。

N-酰基酪氨酸符合下式III：

式III

在一个实施方案中，N-酰基氨基酸化合物包括N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸。此试剂属于广义的N-酰基苯基丙氨酸衍生物类别，其酰基是C₁₁单不饱和脂肪酸部分，并且氨基酸是苯基丙氨酸的L-异构体。N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸符合下式IV：

式IV

N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸可以商品名酰苯胺（酰苯胺）从SEPPIC商购获得。

在某些实施方案中，速效剂可包含安全且有效量的N-酰基氨基酸化合物和安全且有效量的糖海带提取物。

B.用于色素沉着斑点的缓效剂（“缓效剂”）

本发明的组合物包含用于改善色素沉着斑点的缓效剂。当存在时，本发明的组合物包含按所述组合物的重量计至多约50%、40%、30%、20%、10%、5%、或3%的缓效剂。当存在时，本发明的组合物包含按所述组合物的重量计至少约0.001%、0.01%、0.1%、0.2%、0.5%、或1%的缓效剂。合适的范围包括所述下限和上限的任何组合，包括按所述组合物的重量计的合适的范围为约0.1%至约50%；约0.2%至约20%；或约1%至约10%的附加缓效剂。本文所列的量仅用作指导，因为所述缓效剂的最佳量将取决于所选的具体活性物质。

合适的缓效剂包括但不限于糖胺、维生素B3化合物、1,3-二羟基-4-烷基苯（例如己基间苯二酚、熊果苷、脱氧熊果苷、蔗糖二月桂酸酯、补骨脂酚（4-[(1E,3S)-3-乙烯基-3,7-二甲基-1,6-亚辛基]苯酚或单萜苯酚））、焦宁（购自Biotech Marine,France）、稷籽提取物、十八烯二酸、肉桂酸、阿魏酸、芥末花提取物、甲基烟酰胺、油溶性甘草提取物、叶酸、十一碳烯酸(如十一烯酸)、十一碳烯酸锌、硫胺（维生素B1）及其盐酸盐、L-色氨酸、己基间苯二酚、向日葵（太阳花）和葡萄（葡萄树）叶提取物，肌肽（carnosine）（即肌肽（dragosine））、龙胆酸甲酯、1,2-己二醇和1,2-辛二醇(即由德国Symrise AG公司以Symdiol68为名出售的组合）、肌醇基、N-酰基氨基酸化合物（例如N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸）、曲酸、去氧苯比妥化合物、水杨酸、以及维甲酸类（包括视黄醇和丙酸视黄酯）。

在某些实施方案中，附加的缓效剂选自维生素B3化合物、1,3-二羟基-4-烷基苯、以及它们的组合。在某些实施方案中，所述附加的缓效剂选自烟酰胺、己基间苯二酚、以及它们的组合。

如本文所用，“维生素B₃化合物”是指具有下式的化合物：

其中R为-CONH₂（即烟酰胺）、-COOH（即烟酸）或-CH₂OH（即烟醇）；它们的衍生物；以及任何前述化合物的盐。如本文所用，“糖胺”包括此类物质的异构体和互变异构体以及它们的盐（例如盐酸盐）和它们的衍生物。糖胺的实例包括葡糖胺、N-乙酰基葡糖胺、甘露糖胺、N-乙酰基甘露糖胺、半乳糖胺、N-乙酰基半乳糖胺、它们的异构体（例如立体异构体）、以及它们的盐（例如盐酸盐）。如本文所用，“去氧苯比妥化合物”是指具有下式的化合物：

其中R¹和R²是任选的，或为有机酸（例如磺酸等）。在一个实施方案中，去氧苯比妥化合物包括二羟乙基磺酸己氧苯醚。

C.抗炎剂

色素沉着过度可由皮肤炎症引起。引起色素沉着过度的瞬时发炎事件，并且更具体地发炎后色素沉着过度包括但并不限于痤疮病变、毛发向内生长、刮伤、昆虫叮咬、表面活性剂的损害和短期紫外线曝光。炎症引起的（含发炎后色素沉着过度）色素沉着过度可向本发明的组合物中混入抗炎剂来治疗。当存在时，本发明的组合物包含按所述组合物的重量计至多约20%、10%、5%、3%、或1%的抗炎剂。当存在时，本发明的组合物包含按所述组合物的重量计至少约0.001%、0.01%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、或1%的抗炎剂。合适的范围包括所述下限和上限的任何组合。合适的抗炎剂包括但不限于非甾族抗炎剂(NSAIDS，包括但不限于布洛芬、萘普生、氟芬那酸、依托芬那酯、阿司匹林、甲芬那酸、甲氯芬那酸、吡罗昔康和联苯乙酸）、甘草酸（也被称为甘草素、甘草甜素和甘草皂甙）的盐和如甘草酸二钾、甘草次酸、甘草提取物，小烛树腊、红没药醇（例如α-红没药醇）、茜草（提取自茜根属植物，尤其是红根）和乳香树脂（提取自没药属植物，尤其是印度穆库尔没药）、可乐果提取物、春黄菊、红三叶草提取物和海鞭提取物、上述任何物质的衍生物、以及它们的混合物。

D.防晒活性物质

本主题发明的组合物可包含一种或多种防晒活性物质（或防晒剂）和/或紫外线吸收剂。本文中，“防晒活性物质”包括防晒剂和物理防晒霜两者。防晒剂活性物质和紫外线吸收剂可为有机的或无机的。合适的防晒活性物质和紫外线吸收剂的实例以“防晒剂”在个人护理产品委员会的第三版《国际化妆品成分词典和手册》中公开。尤其合适的防晒活性物质是2-乙基己基-对甲氧基肉桂酸酯（如可商购获得的PARSOL^TM MCX）、4,4'-叔丁基甲氧基二苯甲酰甲烷(如可商购获得的PARSOL^TM 1789）、2-羟基-4-甲氧基二苯酮、辛基二甲基-对氨基苯甲酸、二倍酰三油酸酯、2,2-二羟基-4-甲氧基二苯酮、4-(双(羟丙基)氨基苯甲酸乙酯、2-乙基己基-2-氰基-3,3-二苯基丙烯酸酯、水杨酸2-乙基己基酯，对氨基苯甲酸甘油酯，3,3,5-三甲基环己基水杨酸酯，邻氨基苯甲酸薄荷酯、对二甲基氨基苯甲酸或氨基苯甲酸酯，对二甲基-氨基-苯甲酸-2-乙基己酯、2-苯基苯并咪唑-5-磺酸、2-（对二甲基氨基苯基）-5-磺酸苯并恶唑酸、氰双苯丙烯酸辛酯、氧化锌、亚苄基樟脑及其衍生物、二氧化钛、以及它们的混合物。

在一个实施方案中，所述组合物可包含按所述组合物的重量计约1%至约20%，并且作为另外一种选择约2%至约10%的防晒活性物质和/或紫外线吸收剂。确切的量将根据所选的防晒活性物质和/或紫外线吸收剂以及所期望的防晒因子（SPF）而变化，并且在本领域技术人员的理解和判断范围内。

E.任选组分

本发明的组合物可包含多种既定产品类型中常用的其它成分，前提条件是它们不会不可接受地改变本发明的有益效果。当存在时，本发明的组合物可包含按所述组合物的重量计约0.0001%至约50%、约0.001%至约20%，或者作为另外一种选择约0.01%至约10%的任选组分。本文所列的量仅用作指导，因为用于组合物中的任选组分的最佳量将取决于所选的具体的活性物质，这是由于它们的功效的确相差很大。因此，用于本发明中的一些任选组分的量可在本文所列的范围之外。

当混入到组合物中时，任选组分应适用于与人类皮肤组织接触，而在合理的判断范围内无不适当的毒性、不相容性、不稳定性、过敏性反应等等。本发明的组合物可包含任选组分，例如抗痤疮活性物质、脱屑活性物质、抗蜂窝炎剂、螯合剂、类黄酮、美黑活性物质、非维生素抗氧化剂和自由基清除剂、毛发生长调节剂、抗皱纹活性物质、抗萎缩活性物质、矿物、植物甾醇和/或植物激素、N-酰基氨基酸化合物、抗微生物的或抗真菌的活性物质，以及其它有用的护肤活性物质，这些进一步详述于美国专利申请US2006/0275237A1和US2004/0175347A1中。

个人护理产品委员会的第三版《国际化妆品成分词典和手册》描述了多种非限制性地常用于护肤行业的美容和药物成分，这些成分是用于本发明的组合物的合适的任选组分。这些成分类别的实例包括：研磨剂、吸收剂、诸如芳香剂的美学组分、颜料、染色剂/着色剂、精油、抗结块剂、消泡剂、粘结剂、生物添加剂、缓冲剂、增量剂、螯合剂、化学添加剂、着色剂、化妆品收敛剂、化妆品灭生物剂剂、变性剂、药物收敛剂、外用止痛剂、成膜剂或成膜材料（例如二十碳烯和乙烯基吡咯烷酮的共聚物可用于辅助组合物成膜特性和亲和性的聚合物）、遮光剂、pH调节剂、推进剂、还原剂、多价螯合剂和增稠剂。

F.皮肤病学可接受的载体

本发明的组合物也可包含所述组合物的皮肤病学可接受的载体（“载体”）。如本文所用，短语“皮肤病学可接受的载体”是指载体适于局部施用到角质组织，具有良好的美学性质，与本发明的活性物质相容，并且不引起任何安全或毒性问题。在一个实施方案中，所述载体按所述组合物的重量计以约50%至约99%、约60%至约98%、约70%至约98%、或者作为另外一种选择约80%至约95%的含量存在。

所述载体可为多种形式。非限制性实例包括简单溶液（水性的或油基的）、乳液和固体形式（凝胶、棒状物、可流动的固体、无定形材料）。在某些实施方案中，所述皮肤病学可接受的载体为乳液形式。乳液一般可被归类为具有连续水相（例如水包油和水包油包水）或连续油相（例如油包水和油包水包油）。本发明的油相可包含有机硅，非有机硅油诸如烃油、酯、醚等、以及它们的混合物。

水相通常包含水。然而，在其它实施方案中，水相可包含不是水的组分（非水组分），包括但不限于水溶性保湿剂、调理剂、抗微生物剂、湿润剂和/或其它水溶性护肤活性物质。在一个实施方案中，所述组合物中的非水组分包括湿润剂，诸如甘油和/或其它多元醇。然而，应当认识到：所述组合物可为基本上无水（即小于1%的水）或完全无水的。

选择合适的载体以得到所需的产品形式。此外，所述组合物组分的溶解度或分散性（例如糖海带提取物、防晒活性物质、附加组分）可决定载体的形式和组成。在一个实施方案中，水包油或油包水的乳液是优选的。

乳液还可包含乳化剂。所述组合物可包含任何合适百分比的乳化剂以充分乳化载体。基于所述组合物的重量计，合适的重量范围包含约0.1%至约10%、或约0.2%至约5%的乳化剂。乳化剂可为非离子的、阴离子的或阳离子的。合适的乳化剂公开于例如美国专利3,755,560、美国专利4,421,769以及北美版的McCutcheon的“Detergents and Emulsifiers”，第317-324页(1986)中。根据所需的产品形式，合适的乳液可具有宽范围的粘度。

所述载体可进一步包含为本领域所熟知的增稠剂以使组合物具有合适的粘度和流变学特性。

II.示例性组合物

以下是本发明组合物的非限制性实施例。实例的给出仅是为了举例说明之目的，不应被解释为是对本发明的限制，因为在不脱离本发明的实质和范围的情况下，可作出许多改变，这将被本领域的普通技术人员所认识到。在实施例中，除非另外指明，所有浓度均按重量百分比列出，并且可排除次要材料，如稀释剂、填料等。因此，所列的制剂包括所列的组分以及与该组分有关的任何次要材料。对本领域普通的技术人员显而易见的是，这些次要材料的选择将根据所选成分的物理和化学特性而变化，从而制备本文所述的发明。

所述实例可用于对一个或多个色素沉着斑点进行全面的或局部的施用与治疗。

*1-购自Biotech Marine,France。

*2-酰苯胺，购自SEPPIC,France。

*3-Emulgade PL68/50，购自Cognis GmbH。

*4-Sepigel305，购自SEPPIC,France。

*5-Dow Corning DC1503，购自Dow Corning，Inc.,Midland,MI。

本发明的组合物通常通过常规方法，如本领域已知的制备局部用组合物的方法制备。上述方法通常涉及在一个或多个步骤中将成分混合至相对均匀的状态，可进行或不进行加热、冷却、施加真空等。通常，乳液通过以下来制备：首先将水相材料和油脂相材料分别混合，并然后将两相适当地混合，直至获得所需的连续相。优选制备所述组合物以优化活性物质的稳定性（物理稳定性、化学稳定性、光稳定性）和/或递送。这种最优化可包括合适的pH值（例如小于7）、排除可与活性剂复合并因此负面影响稳定性或递送的物质（例如排除杂质铁）、使用预防复合物形成的方法（例如合适的分散剂或双层包装）、使用合适的光稳定性方法（例如混入防晒油/防晒霜、使用不透明的包装）等等。

III.治疗方法

各种治疗、施用、调控、或改善方法可利用前述组合物。在一个实施方案中，所述方法包括识别色素沉着的斑点以通过所述组合物进行改善的步骤。色素沉着斑点可由使用者或如皮肤科医师、美容师或其他护理师的第三方进行识别。根据基于尺寸或颜色的治疗的需要，可通过目视检查皮肤识别色素沉着斑点。识别也可通过可商购获得的成像装置如V（购自Astron Clinica,Ltd.,UK）或肤色分析系统（购自Canfield Scientific,Inc.,Fairfield,NJ）来进行。两台装置都能够采集皮肤的图像并识别黑素沉着斑点。在某些情况下，所述方法包括识别多个色素沉着斑点以通过所述组合物进行治疗的步骤。所有以下步骤均适用于单个黑素沉着斑点以及多个黑素沉着斑点两者。

黑素沉着斑点的识别可在主体的任何皮肤表面上进行。最令人关心的皮肤表面大多是那些通常未被衣服覆盖的部分，例如面部皮肤表面、手和臂皮肤表面、脚和腿部皮肤表面、以及颈和胸部皮肤表面（例如（经常穿）坦胸露背的衣服（的））。具体地，色素沉着斑点的识别在面部皮肤表面包括前额、口周、下巴、眶周、鼻部和/或面颊皮肤表面上进行。

所述方法可包括将所述组合物施用到一个或多个色素沉着斑点的步骤。具有许多方案来将所述组合物施用到色素沉着斑点。在治疗期，可每天至少一次，并且更优选每天两次施用所述组合物。当每天两次施用时，第一次与第二次施用应相隔至少1至约12个小时。通常，可在早上和/或晚上（临睡前）施用所述组合物。

所述治疗期最理想地为足以提供改善色素沉着斑点的时间。所述改善可为可检测的色素沉着斑点的尺寸减小、色素沉着斑点的淡化（例如颜色更淡）、或色素沉着斑点的黑素减少。所述治疗期可为至少约1周。所述治疗期可持续约4周或约8周。在某些实施方案中，治疗期将延续至多个月（即3-12个月）或多年。在一个实施方案中，至少每天一次将所述组合物施用到一个或多个色素沉着斑点至少约4周或至少约8周的治疗期。在一个实施方案中，每天两次将所述组合物施用到一个或多个色素沉着斑点至少约4周或8周的治疗期。

将所述组合物施用到色素沉着斑点的步骤可通过局部施用来完成。关于所述组合物的施用，术语“局部的”、“局部”、“局部地”是指将所述组合物递送到目标区域（如色素沉着斑点）而最小化对无需治疗的皮肤表面的递送。所述组合物可被施用并轻轻按摩进色素沉着斑点中。已经认识到，局部施用确实允许将合理量的所述组合物施用到色素沉着斑点的临近区域（即所述组合物不太可能被施用到在色素沉着斑点的边界或保留在其内而没有某些铺展）。所述组合物的形式或皮肤病学可接受的载体应被选择成有利于局部施用。虽然本发明的某些实施方案设想将组合物局部施用到色素沉着斑点，但应当理解本发明的组合物可更通用地或广义地施用到一种或多种面部皮肤表面以降低在那些面部皮肤区域的色素沉着斑点的外观。

在一些实施方案中，所述组合物可由多种适于局部或全面施用的施用装置递送。多个施用装置在图1-3中以举例的方式示出。在图1中，合适的施用装置10可为点滴器12，该图显示该点滴器具有可包含组合物的瓶子14。图2显示施用装置20为具有可包含所述组合物的外壳24的棒状体22。所述棒状体22可包括柄部26、杆27和施用头28。所述施用头28可包括纤维、泡沫、棉花、或任何其它合适的可释放地保持所述组合物的材料。图3显示施用装置30为具有主体34和窄分配头36的窄头管32。所述组合物可保存在主体34内并通过尖头36分配。也可使用其它能够将第一组合物局部施用到色素沉着斑点的施用装置，例如棉签。其它合适的施用装置包括购自Shya Hsin Plastic Works，Inc.,Taiwan的SH-0127笔式施用装置和购自SwabPlus，Inc.,China的Xpress Tip（高粘度定量充填棒）或液体充填式棉棒。施用装置可被构造成易于将所述组合物施用到色素沉着斑点（这些斑点具有介于约2mm和约10mm之间的近似直径并允许所述组合物的剂量在约1至约50μL/cm²之间或在约1至约5μL/cm²之间）。在另一个实施方案中，将所述组合物同时施用到一个或多个色素沉着斑点，并且更一般地讲施用到一个或多个面部皮肤表面（即在少于30分钟，或更典型地少于5分钟的一段时间内）。

虽然本文所述的一些方法设想用施用装置施用本发明的组合物，但应当理解：施用装置并不是必须的，并且本发明的组合物也是可直接施用或用手指或以其它常规的方式施用。

合适的方法可包括上述步骤中的中任何一个或多个。所有上述步骤适用于单个色素沉着斑点以及多个色素沉着斑点两者的施用、治疗、调控、和/或改善。同样，以下的示例性方法都适用于单个色素沉着斑点以及多个色素沉着斑点两者。

改善色素沉着斑点外观的一个合适的方法包括将包含速效剂和缓效剂的组合物施用到皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤，其中至少每天施用所述组合物足以使所述速效剂和缓效剂两者改善色素沉着斑点外观的一段时间。改善色素沉着斑点外观的另一个合适的方法包括以下步骤：识别皮肤表面上的色素沉着斑点，以及将包含速效剂和缓效剂的组合物施用到皮肤表面上的色素沉着斑点，其中至少每天施用所述组合物足以使所述速效剂和缓效剂两者改善色素沉着斑点外观的一段时间。

改善色素沉着斑点外观的另一种方法包括将包含安全且有效量的速效剂的第一组合物施用到色素沉着斑点的步骤，其中所述速效剂是糖海带提取物，并且其中施用所述速效剂足以使糖海带提取物改善色素沉着斑点外观的第一段时间；同时将包含安全且有效量缓效剂的第二组合物施用到色素沉着斑点的步骤，并且其中施用所述缓效剂足以改善色素沉着斑点外观的第二段时间。

IV.测试方法

本发明提供了以下方法以示出本发明的多种实施方案的某些特征和优点，并且不应被理解为是对本发明范围的限制。

A.黑素合成测定

在测定中采用A B16-F1小鼠黑素瘤细胞品系。B16-F1细胞可从American Tissue CμLture Collection（Virginia,USA）获得。在分析中使用的细胞培养基包含500mL的达尔伯格氏改良伊格尔培养基（Dulbecco’sModified Eagle’s Medium）（DMEM），50mL牛胎血清（FBS），和5mL青霉素-链霉素液体。在这种培养基中培养并生长到铺满度大于90%的B16-F1细胞合成黑素。然而并不旨在受任何理论的束缚，假设培养基和/或细胞生长到高铺满度时引起的应力刺激了黑素的合成。所述DMEM和FBS可从American Tissue Culture Collection获得，并且青霉素-链霉素液体可从Invitrogen,Inc.,California,USA获得。在测定中使用的仪器包括CO₂培养箱（例如由Therma Scientific,Massachusets,USA制造的FormaSeries Model3110），血球计（例如由Hauser Scientific,Pennsylvania,USA制造的Bright Line model）；以及紫外可见光谱读板仪（例如得自Molecular Devices,California,USA的SpectraMax250）。测定步骤包括：

1.第0天-细胞生长：将细胞培养基升温至37℃并将29mL放入T-150培养瓶中。将大约1×10⁶个B16-F1通道-1小鼠细胞放入到该T-150培养瓶中并且在37℃、5%CO₂、90%相对湿度条件下培养3天，直至约80%的铺满度。

2.第3天，引发一个96孔板反应：在第3天，使T-150培养瓶中的细胞胰蛋白酶化并用血球计确定细胞的浓度。在100μL的细胞培养基中以2,500个细胞/孔引发96孔板反应。将所述板在37℃、5%CO₂、90%的相对湿度下培养2天，直至至少20%至40%的铺满度。

3.第5天-从板中除去细胞培养基，并且用新鲜的培养基替换（100μL/孔）。加入1μL用水稀释过的菲罗蕊金。可测定多次稀释比率以产生剂量响应曲线，其中优选以每一种稀释比例处理三个孔。对照物包括具有所述细胞培养基，B16-F1细胞和所述溶剂的孔（对照物#1)；包含所述细胞培养基和所述溶剂的孔（对照物#2）；以及包含所述细胞培养基、溶剂和[测试化合物]（当必要时对照[测试化合物]背景色）的任选孔（对照物#3）。

4.第7天-测量黑素的产生：细胞应该具有大于约80%的铺满度。如果没有，这个数据点就不予采用。将100μL的0.75%氢氧化钠溶液加入到每个孔中。用紫外可见读板仪在410nm处读取所述96孔板以光学测量在用[测试化合物]处理的孔和未用[测试化合物]处理的对照孔之间生成的黑素的量。在其中产生黑素的孔呈现棕色。在其中产生很少黑素的孔呈现浅紫色。黑素合成的抑制百分比通过以下公式进行计算：

其中OD₄₁₀是如通过紫外可见光谱读板仪测量的在410nm处的光密度。

当使用对照物#3时，黑素合成抑制百分比的计算公式是：

一般使用上面概述的测定法，如下表1中所示，菲罗蕊金处理过的B16-F1细胞的黑素合成与对照细胞相比是受抑制的。

表1

B.体内测试色素沉着斑点的减少和黑素的均匀度

对270个受检者采用循环的、媒介物控制的、半张脸模式的包括1周的归一化时期的设计进行9周的体内研究。所述270个受检者按照纳入/排除标准进行筛选，该标准包括以下内容：

纳入

1.在面部两侧的脸颊和/或眶周区周围都有黑素沉着斑点。

2.在他们面部的每一侧的面颊区域有至少1个8-10mm直径的色素沉着斑点，4个4-6mm直径的斑点或10个2-3mm直径的斑点（太阳斑、雀斑、或黄褐斑点）或等同的斑点区域。

3.愿意通过使用所提供的紫外乳液和如帽子的物理防晒手段来避免阳光曝光以避免面部晒斑、美黑或风炙。

排除

1.已被诊断为患有过敏性疾病、湿疹、牛皮癣、或其它慢性皮肤病。

2.有明显的面部皮肤病标记（例如多于5个疙瘩、红色鳞屑皮肤区域、浅细血管等）。

3.在面部有脱色或疤痕的显著区域。

4.在面部有多于3个突出的痣（>3mm）。

为本研究招募了二百七十个受检者。大约60个受检者在研究过程中退出。

治疗方案：所述方案以一周的洗脱期开始。每天早上，受检者用合适的清洁剂洗脸（例如购自Procter & Gamble Company,Cincinnati,OH的Olay Purifying Mud Lathering Cleanser），用毛巾轻轻地擦干，将保湿剂原液（例如表2中所述的含3%甘油、不含泛醇以及含0.3%EDTA二钠盐的媒介物）施用到脸的合适侧，等待5分钟，然后施用紫外阻挡乳液（例如购自Procter & Gamble Company,Cincinnati,OH的Olay Natural WhiteUV Moisturizing Lotion SPF15）。每天晚上，受检者用合适的清洁剂（例如购自Procter & Gamble Company,Cincinnati,OH的Olay Purifying MudLathering Cleanser）洗脸，用毛巾轻轻地擦干，并且施用保湿剂原液。

每名受检者接受两个已编码的测试制剂以进行每天两次施用到面部的左侧或者右侧。每天早上，受检者用合适的清洁剂洗脸（例如购自Procter& Gamble Company,Cincinnati,OH的Olay Purifying Mud LatheringCleanser），用毛巾轻轻地擦干，将测试制剂施用到脸的合适侧，等待5分钟，然后施用紫外阻挡乳液（例如购自Procter & Gamble Company,Cincinnati,OH的Olay Natural White UV Moisturizing Lotion SPF15）。每天晚上，受检者用合适的清洁剂（例如购自Procter & Gamble Company,Cincinnati,OH的Olay Purifying Mud Lathering Cleanser）洗脸，用毛巾轻轻地擦干，并且将测试制剂施用到脸的合适侧。参与者们将0.5g的合适的测试制剂施用在脸的每一侧。测试制剂应该能用手指采用轻轻的压力以圆周运动的方式施用。测试制剂包含媒介物对照物，媒介物+1%的菲罗蕊金，以及媒介物+5%的维生素B3。这些测试制剂如表2中所示。

表2

*A-Sepigel305，购自SEPPIC,France。

*B-Dow Corning1503Fluid，购自Dow Corning,Midland,MI。

*C-Emulglade PL68/50，购自Cognis GmbH,Germany。

*D-Tospearl2000，购自Performance Materials,Albany,NY。

在基线（第0周）时，以及经过4和8周的治疗后获取面部治疗部位的图像，同时分析图像以了解皮肤颜色及斑点尺寸和着色的变化。在图像采集之前，参与者的脸部用上面提到的清洁剂清洗并使其变干（大约20分钟）。采集参与者的脸部右侧和左侧的图像。图像由装备有用于面部成像的合适镜头（例如60mm Nikor镜头）的数码相机（例如Fuji F2Prodigital SLR）进行采集。将图像以合适的相机分辨率存储成合适的文件格式，如RAW格式。照明由闪光源提供（如，有色温为约5600K的1000W的频闪观测器）。所述相机和照明设备配备有偏振滤光镜以减轻镜面反射。在每个图像中获取的一个固定的着色表允许计算机化色彩校正和研究图像的修改。

所述图像文件通过算法处理以产生真黑素的灰度浓度图谱。所述算法分析RAW图像的每个像素并且计算存在的真黑素的浓度。合适的算法涉及反编译每个像素的红色、绿色和蓝色值。对每个像素的RGB值进行处理并与已知的标准相比较以得到黑素浓度。指定每个像素的黑素浓度灰度值为0至255。在重组像素阵列时，产生真黑素的灰度浓度图谱参数（和/或如氧合血红蛋白的其它发色团）。图4示出所采集的一位参与者的全彩图像。图5示出该位参与者的黑素浓度图谱。

通过RGB算法进行图像采集和黑素作图的合适方法描述于Cotton等人的美国专利申请公布2008/0075340A1（发表于2008年3月27日）和Preece等人的2007/0161910A1（发表于2007年7月12日）中。发色团作图的描述也可在Matts,P.J.等人于2007年4月发表于British Journal ofDermatology,156(4):620-628上的文章“The Distribution of Melanin inSkin Determined In Vivo”中找到。

附加的图像分析软件，如Optimas^TM6.5（购自Media Cybernetics,Inc.,Bethesda,MD），可用于从RAW图像或从所得的黑素图谱中选择受关注的区域。选择受关注的区域以压缩图像至用于施用的测试制剂所针对的脸部区域或压缩图像至特别受关注的脸部区域。例如，在本研究中，面部皮肤表面的合适的所关注区域包括脸颊和眶周区域（即限定于距发际线大约1cm的一侧的区域；与鼻梁相平行的线为界限的另一侧，沿着上边缘，然后沿着鼻唇褶线下边缘的区域；限定于沿着穿过与上眼皮相平行的鬓角的一条线的顶部与大约沿着眼窝骨下缘的区域；以及限定于沿着与下唇相平行的一条线的底部的区域）。进一步分析所述黑素图谱的受关注区域以计算黑素斑点的面积分数和黑素的均匀度。

另一个市售的图像采集和黑素作图系统是采用SIAscope V的接触式的SIAscopy（购自Astron Clinica,Ltd.,UK）或采用传统的数码成像装置的非接触式的SIAscopy（购自Astron Clinica,Ltd.,UK）。另一个市售的图像采集和黑素作图系统是采用Complexion Analysis系统（购自Canfield Scientific,Inc.,Fairfield,NJ），该系统采用RBX^TM技术。RB X^TM技术将图像由RGB色彩转变为RBX色彩空间，其中RBX色彩空间中红色和褐色通道表示红血蛋白和黑素的分布。/RBX^TM能够进行斑点区域检测。参见RBX^TM技术概述白皮书，得自：

http://www.canfieldsci.com/FileLibrary/RBX%20tech%20overview-LoRz1.pdf

或Canfield Imaging Systems,253Passaic Avenue,Fairfield,New Jersey07004-2524。

黑素图谱中取得的数据可用于计算黑素斑点面积分数百分比和黑素均匀度。黑素斑点面积分数百分比（SAF）按被黑素斑点占据的面积占皮肤测量面积（即受关注的区域）的比率乘以100进行计算。这个百分比可用于表示黑素沉着区域的尺寸变化。较低的百分比反映较小的和/或较少的黑素斑点。

黑素均匀度可按平均的单个像素灰度值的标准偏差除以皮肤测量面积（即受关注的区域）进行计算。较低的值反映更均匀的黑素沉着。黑素斑点面积分数和黑素均匀度的其它描述可从由Kinball，A.B.等人在2010年2月发表于British Journal of Dermatology,162(2):435-441中的“Reductionin the appearance of facial hyperpigmentation after use of moisturizers witha combination of topical niacinamide and N-acetyl glucosamine:results of arandomized,double-blind,vehicle-controlled study”中找到。

4周后，菲罗蕊金表现最好，比参照物和其它测试组合物更加显著地（p<=0.10）减少了色素沉着斑点。8周后，维生素B3组合物表现最好，比其它媒介物更加显著地（p<=0.10）减少了色素沉着斑点。另外，己基间苯二酚同菲罗蕊金一样比其它媒介物更加显著地（p<=0.10）减少了色素沉着斑点。

表3总结了图像分析数据，其中“SAF”是平均斑点面积分数，并且“ΔSAF”是来自调整了通用基线（第0周）的斑点面积分数的平均变化，并且“ΔSAF测试腿部-ΔSAF媒介物”是所述测试制剂的斑点面积分数的平均变化减去所述媒介物的斑点面积分数的平均变化的差值。

表3

*1-统计意义上的显著性（ΔSAF测试腿-ΔSAF媒介物）值，以粗体显示。

*2-调整的通用基线

已经认识到，表示媒介物和测试腿部的SAF从基线（第0周）到第8周增加了。本测试是在中国北京从大约1月21日至大约3月21日期间进行的。在本段时间内，白天的长度增加了大约2.5小时。虽然在测试期间为降低季节性的皮肤颜色变深而使用了防紫外线产品，据信从基线至第8周的SAF增加可能是由季节性的皮肤颜色加深所引起的。季节性的皮肤颜色加深是自然的颜色变深（即美黑），这是由于增强的阳光和紫外线曝光而季节性地发生的。

与上述体内测试相似的另一项研究采用媒介物（与表2所述的媒介物相似的），媒介物中5%的烟酰胺以及媒介物中1%的酰苯胺（N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸）进行。表4总结了所述图像分析的数据，其中“SAF”是平均斑点面积分数，而“ΔSAF”是来自调整了通用基线（第0周）的斑点面积分数的平均变化，并且“ΔSAF测试腿部-ΔSAF媒介物”是所述测试制剂的斑点面积分数的平均变化减去所述媒介物的斑点面积分数的平均变化的差值。

表4

*1-统计意义上的显著性（ΔSAF测试腿部-ΔSAF媒介物）值，以粗体显示

*2-调整后的通用基线

4周后，酰苯胺组合物表现最好，比对照物和其它测试组合物更加显著地（p<=0.05）减少了色素沉着斑点。8周后，所述酰苯胺组合物表现最好，比其它媒介物更加显著地（p<=0.05）减少了色素沉着斑点。同样地，维生素B3比其它媒介物更加显著地（p<=0.05）减少了色素沉着斑点。

本文所公开的量纲和数值不旨在被理解为严格地限于所述的精确值。相反，除非另外指明，每个这样的量纲旨在表示所引用的值和围绕该值功能上等同的范围。例如，所公开的量纲“40mm”旨在表示“约40mm”。

除非明确排除或换句话讲有所限制，本文所引用的每篇文献，包括任何交叉引用或相关专利或专利申请，均据其全文以引用方式并入本文。对任何文献的引用均不是承认其为本文公开的或受权利要求书保护的任何发明的现有技术、或承认其独立地或以与任何其它一个或多个参考文献的任何组合的方式，或者引用、传授、提出建议或公开任何此类发明。此外，当本发明中术语的任何含义或定义与以引用方式并入的文件中相同术语的任何含义或定义相矛盾时，应当服从在本发明中赋予该术语的含义或定义。

尽管举例说明和描述了本发明的特定实施方案，但是对本领域的技术人员显而易见的是，在不脱离本发明的实质和范围的情况下可作出许多其它的改变和变型。因此，随附权利要求书中旨在涵盖本发明范围内的所有这些改变和变型。

Claims

1.一种改善色素沉着斑点外观的非治疗方法，包括将组合物施用到皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤，所述组合物包含：

a.安全且有效量的用于色素沉着斑点的速效剂，其中所述速效剂包含按所述组合物的重量计介于0.00008％和1.25％之间的糖海带提取物，和

b.安全且有效量的用于色素沉着斑点的缓效剂，其中所述缓效剂选自维生素B3化合物、1,3-二羟基-4-烷基苯、以及它们的组合，

其中至少每天施用所述组合物一段足以使所述速效剂和所述缓效剂两者改善所述色素沉着斑点外观的时间。

2.如权利要求1所述的非治疗方法，其中所述皮肤表面是面部皮肤表面。

3.如权利要求1－2中任一项所述的非治疗方法，其中每天至少一次或两次施用所述组合物至少8周。

4.如权利要求1－2中任一项所述的非治疗方法，其中所述改善是所述色素沉着斑点的尺寸减小、所述色素沉着斑点的明度增加、或所述色素沉着斑点的黑素减少。

5.如权利要求1－2中任一项所述的非治疗方法，其中所述组合物还包含防晒活性物质、皮肤调色剂、或它们的组合。

6.如权利要求1－2中任一项所述的非治疗方法，其中通过分配1至50μL/cm²的剂量的所述组合物的施用装置将所述组合物局部施用到所述色素沉着斑点。

7.如权利要求1－2中任一项所述的非治疗方法，还包括识别皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤。

8.如权利要求7所述的非治疗方法，其中通过成像装置识别色素沉着斑点。

9.如权利要求1－2中任一项所述的非治疗方法，其中所述速效剂还包括N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸。

10.一种改善色素沉着斑点外观的非治疗方法，所述方法包括将以下组合物施用到面部皮肤表面上的色素沉着斑点的步骤：

a.包含安全且有效量的速效剂的第一组合物，其中所述速效剂选自(i)糖海带提取物和(ii)糖海带提取物和N-十一碳烯酰-L-苯基丙氨酸，并且其中施用所述速效剂一段足以改善所述色素沉着斑点外观的第一时间段；和

b.包含安全且有效量的缓效剂的第二组合物，其中所述缓效剂选自维生素B3化合物、1,3-二羟基-4-烷基苯、以及它们的组合，并且其中施用所述缓效剂一段足以改善所述色素沉着斑点外观的第二时间段；

其中所述第一组合物中的糖海带提取物的浓度按所述组合物的重量计为0.00008％至1.25％。