CN102912622B - 一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法 - Google Patents
一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法，本发明涉及具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料制备方法。本发明是要解决现有氧化纤维素止血材料比表面积小、不溶于水、止血作用机理单一和止血速度慢的问题，从而提供的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法。方法：一、制备胶原蛋白水溶液；二、制备黏胶纤维纱布；三、制备氧化黏胶短纤及氧化黏胶纤维纱布；四、制备氧化再生纤维素钠溶液或氧化再生纤维素钾溶液；五、制备氧化再生纤维素纱布；六、喷涂胶原蛋白粒子后真空冷冻干燥即完成了具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备。本发明应用于氧化再生纤维素类止血材料的制备领域。
Description
技术领域
本发明涉及具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料制备方法。
背景技术
氧化再生纤维素(Oxidized regenerated cellulose，ORC)是纤维素衍生物的一种，已被用于不少行业如用于医疗业，作为医用可吸收止血纱布。但它的另一大潜在用途是：由于在纤维素葡萄糖基环中引入了羧基这一活性基团，它可被用作纤维素进一步改性的中间产物，尤其是选择性氧化所得氧化纤维素。
医用可吸收止血纱布Surgical有两种产品：氧化纤维素和氧化还原纤维素。我们通常所见的就是氧化纤维素。“速即纱”比表面积小，止血慢，需要2～8分钟达到止血，比较适合出血量较小的创面，而对出血严重的部位不能有效及时地止血。
目前，纳米纤维素及其衍生物的制备方法主要有生物法、机械法、化学法三种办法。生物法是指被囊类动物可以合成动物纤维素，木醋杆菌可以合成细菌纤维素等，这种方法受到生物本身的限制，且产量太低。但机械法制备纤维素纳米纤维存在高能耗、纤维束含量高等缺点。化学法中硫酸的水解作用会导致产品得率急剧降低，纤维长度降至100～150纳米。
胶原具有良好的止血作用，目前广泛使用的胶原蛋白止血材料几乎都是单一的胶原蛋白组分，海绵状形态性能下降，而人工提取的胶原蛋白一般很难保持其天然的状态，一般制成海绵状，这就使其相关性能总会有所下降，同时海绵状止血材料体积较大，存在极大抗原性危险，临床应用有很多限制。经过制备后的胶原蛋白产品，其拉伸强度较弱，纯胶原蛋白在体内降解较快，以及存在潜在的抗原性。
发明内容
本发明是要解决现有氧化纤维素止血材料比表面积小、不溶于水、止血作用机理单一和止血速度慢的问题，从而提供的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法。
一、制备胶原蛋白水溶液，于0～4℃密封储存；
二、以木浆黏胶长纤为原料，采用针织机制备黏胶纤维纱布；其中，所述针织机幅宽8～18m，牵引带间距4.2～6.2m，牵引带宽度4.2～6.2m，牵引速度180～360r/m，网眼宽度0.5～2.5mm；
三、采用氧化剂溶液将黏胶短纤与步骤二中制成的黏胶纤维纱布分别进行氧化，将氧化后的产物分别经环己烷、体积浓度为50％～70％乙醇水溶液及无水乙醇洗涤，然后-20～-55℃真空冷冻干燥24～72小时，得到氧化黏胶短纤及氧化黏胶纤维纱布，于0～4℃密封储存；其中，所述氧化剂溶液的制备方法是将二氧化氮溶解到环己烷中，氧化剂溶液中二氧化氮的质量分数为17～23％；所述氧化反应中黏胶短纤质量与氧化剂溶液的体积比为0.5～2.5g∶42.6ml，黏胶纤维纱布质量与氧化剂溶液的体积比为0.5～2.5g∶42.6ml；
四、将步骤三中得到的氧化黏胶短纤放入溶液A中反应，反应结束后将产物过滤，得到B溶液；其中，所述A溶液为1.0～1.6mol/L氢氧化钠水溶液或为1.0～1.6mol/L氢氧化钾水溶液，所述氧化黏胶短纤质量与A溶液体积比为25～40g∶100ml，所述B溶液为0.9～1.5mol/L的氧化再生纤维素钠溶液或为0.9～1.5mol/L氧化再生纤维素钾溶液；
五、以步骤三中的氧化粘胶纤维纱布作为基底，采用静电纺丝机作为喷涂设备将步骤四中制备的B溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在40～60％，在静电喷雾状态下间歇喷涂10～20次，得到的产品在-20～-55℃真空冷冻干燥6～24小时后，得到氧化再生纤维素纱布，于0～4℃密封储存；其中，耐酸碱PP材料注射器温度为4～10℃，电压40～60kV，喷头孔径0.6～0.8mm，接收距离15～25cm，接收温度为20～25℃；
六、以步骤五中得到的氧化再生纤维素纱布作为基底，采用静电纺丝机作为喷涂设备，将步骤一中制备的胶原蛋白溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在40～60％，在静电喷雾状态下间歇喷涂胶原蛋白粒子10～20次，得到的产品在-20～-55℃真空冷冻干燥12～24小时后，于0～4℃密封储存即完成了具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备；其中，所述耐酸碱PP材料注射器温度为1～4℃，电压30～40kV，喷头孔径0.8～1.0mm，接收距离15～25cm，接收温度为10～15℃。
发明效果：应用于手术中，本产品表层由于比表面积大，并且由于止血材料含有氧化再生纤维素钠部分因而为水溶性物质，遇血能迅速吸收血液，并凝胶封闭毛细血管末端而达到快速止血的作用；而胶原蛋白表层可引起血小板聚集，并能刺激血小板释放一些亚细胞颗粒和分泌物，包括各种凝血因子，凝血因子粘附在受损血管上，以填塞受损血管，达到止血目的，另外，胶原还能直接激活内源性凝血，最终产生凝血酶，凝血酶再催化纤维蛋白原转化为纤维蛋白，使血液凝固。
本发明从改变表层结构出发，获得了改进的氧化纤维素止血材料，该材料表层具有纳米级氧化再生纤维素钠以及胶原蛋白粒子。
同时，在制备纳米级氧化再生纤维素过程中，为了避免单一方法制备的纳米纤维素的缺陷，本发明将以上两种方法结合，在对天然纤维素机械处理之前，先对纤维素纤维进行一些化学表面改性，通物理法与化学法相结合，通过氧化、碱化两步化学改性，使得纤维素易溶于水，这样也阻止了纤维素内部强大氢键的形成，使得纤维素高分子链条之间的附着力降低，以期制备符合产品要求的纳米纤维。
本产品止血效果比速即纱、普通纱布均要好，具有较好的止血效果，吸血量优于普通纱布，在肝脏、脾脏止血中亦优于速即纱，吸附性能好，有利于血小板黏附，对创面渗血更有效，从而减少术后血肿的发生。自制产品能明显缩短家兔的出、凝血时间，亦能缩短临床手术术中止血时间，从而缩短手术时间。
本发明自制产品的孔隙率达到了90％，接近海绵的孔隙率，相比普通纱布和速即纱，自制产品具有更高的孔隙率，即更大的比表面积，这使得其可以具有更好的吸附性能，与血液作用时将具有更大的接触面。
附图说明：
图1为试验1中得到的具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料500倍放大图；
图2为试验1中得到的具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料单根纤维2000倍放大图；
图3为试验1中得到的表面喷涂纳米氧化再生纤维素钠的氧化再生纤维素类止血材料单根纤维2000倍放大图；
图4为试验1中得到的表面喷涂纳米氧化再生纤维素钠及胶原蛋白粒子的氧化再生纤维素类止血材料单根纤维2000倍放大图。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法按以下步骤实现：
一、制备胶原蛋白水溶液，于0～4℃密封储存；
二、以木浆黏胶长纤为原料，采用针织机制备黏胶纤维纱布；其中，所述针织机幅宽8～18m，牵引带间距4.2～6.2m，牵引带宽度4.2～6.2m，牵引速度180～360r/m，网眼宽度0.5～2.5mm；
三、采用氧化剂溶液将黏胶短纤与步骤二中制成的黏胶纤维纱布分别进行氧化，将氧化后的产物分别经环己烷、体积浓度为50％～70％乙醇水溶液及无水乙醇洗涤，然后-20～-55℃真空冷冻干燥24～72小时，得到氧化黏胶短纤及氧化黏胶纤维纱布，于0～4℃密封储存；其中，所述氧化剂溶液的制备方法是将二氧化氮溶解到环己烷中，氧化剂溶液中二氧化氮的质量分数为17～23％；所述氧化反应中黏胶短纤质量与氧化剂溶液的体积比为0.5～2.5g∶42.6ml，黏胶纤维纱布质量与氧化剂溶液的体积比为0.5～2.5g∶42.6ml；
四、将步骤三中得到的氧化黏胶短纤放入溶液A中反应，反应结束后将产物过滤，得到B溶液；其中，所述A溶液为1.0～1.6mol/L氢氧化钠水溶液或为1.0～1.6mol/L氢氧化钾水溶液，所述氧化黏胶短纤质量与A溶液体积比为25～40g∶100ml，所述B溶液为0.9～1.5mol/L的氧化再生纤维素钠溶液或为0.9～1.5mol/L氧化再生纤维素钾溶液；
五、以步骤三中的氧化粘胶纤维纱布作为基底，采用静电纺丝机作为喷涂设备将步骤四中制备的B溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在40～60％，在静电喷雾状态下间歇喷涂10～20次，得到的产品在-20～-55℃真空冷冻干燥6～24小时后，得到氧化再生纤维素纱布，于0～4℃密封储存；其中，耐酸碱PP材料注射器温度为4～10℃，电压40～60kV，喷头孔径0.6～0.8mm，接收距离15～25cm，接收温度为20～25℃；
六、以步骤五中得到的氧化再生纤维素纱布作为基底，采用静电纺丝机作为喷涂设备，将步骤一中制备的胶原蛋白溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在40～60％，在静电喷雾状态下间歇喷涂胶原蛋白粒子10～20次，得到的产品在-20～-55℃真空冷冻干燥12～24小时后，于0～4℃密封储存即完成了具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备；其中，所述耐酸碱PP材料注射器温度为1～4℃，电压30～40kV，喷头孔径0.8～1.0mm，接收距离15～25cm，接收温度为10～15℃。
本实施方式效果：应用于手术中，本产品表层由于比表面积大，并且由于止血材料含有氧化再生纤维素钠部分因而为水溶性物质，遇血能迅速吸收血液，并凝胶封闭毛细血管末端而达到快速止血的作用；而胶原蛋白表层可引起血小板聚集，并能刺激血小板释放一些亚细胞颗粒和分泌物，包括各种凝血因子，凝血因子粘附在受损血管上，以填塞受损血管，达到止血目的，另外，胶原还能直接激活内源性凝血，最终产生凝血酶，凝血酶再催化纤维蛋白原转化为纤维蛋白，使血液凝固。
本实施方式从改变表层结构出发，获得了改进的氧化纤维素止血材料，该材料表层具有纳米级氧化再生纤维素钠以及胶原蛋白粒子。
同时，在制备纳米级氧化再生纤维素过程中，为了避免单一方法制备的纳米纤维素的缺陷，本实施方式将以上两种方法结合，在对天然纤维素机械处理之前，先对纤维素纤维进行一些化学表面改性，通物理法与化学法相结合，通过氧化、碱化两步化学改性，使得纤维素易溶于水，这样也阻止了纤维素内部强大氢键的形成，使得纤维素高分子链条之间的附着力降低，以期制备符合产品要求的纳米纤维。
本产品止血效果比速即纱、普通纱布均要好，具有较好的止血效果，吸血量优于普通纱布，在肝脏、脾脏止血中亦优于速即纱，吸附性能好，有利于血小板黏附，对创面渗血更有效，从而减少术后血肿的发生。自制产品能明显缩短家兔的出、凝血时间，亦能缩短临床手术术中止血时间，从而缩短手术时间。
本实施方式自制产品的孔隙率达到了90％，接近海绵的孔隙率，相比普通纱布和速即纱，自制产品具有更高的孔隙率，即更大的比表面积，这使得其可以具有更好的吸附性能，与血液作用时将具有更大的接触面。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤一中的胶原蛋白水溶液中胶原蛋白的质量分数为0.8～1.5％。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：步骤三中氧化反应过程反应温度维持在18～19.5℃，持续搅拌反应24～56h。其它步骤及参数与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：步骤四中的反应温度为10～30℃，持续浸泡反应0.5～10h。其它步骤及参数与具体实施方式一至三之一相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至三四之一不同的是：步骤五与步骤六中喷涂每次间隔5～15min，1～2.5min/次。其它步骤及参数与具体实施方式一至四之一相同。
通过以下试验验证本发明有益效果：
试验1
一、将新鲜牛腱去除脂肪、筋膜后，-10℃冷冻硬化后取出，再用手术刀刮去牛腱表面的残余筋膜，沿着牛腱纤维方向切1mm×1mm的薄片，称重，再用质量分数为0.1％的碳酸钠溶液浸泡2h，用蒸馏水漂洗5次，用不锈钢丝网滤去水溶液，晾干备用，将上述处理的牛腱放入三角烧瓶中，加入1％的无花果酶和0.3％乙酸溶液适量，在2℃下搅拌3天，用高速离心机6000r/min处理10min所得溶液，去上层清液即为粗提取的胶原蛋白溶液，在胶原溶液加入蒸馏水配制成浓度为1.5％的蛋白溶液；将充分溶解的蛋白溶液过滤，取滤液即为精提的胶原蛋白溶液；
二、采用河南新乡化纤厂制备的木浆黏胶长纤为原料，以南通兴龙线带机械有限公司PDF型针织机，幅宽8m，牵引带间距4.2m，牵引带宽度4.2m，牵引速度180r/m，网眼宽度1.0mm，制备黏胶纤维纱布。
三、采用氧化剂溶液将黏胶短纤与步骤二中制成的黏胶纤维纱布分别进行氧化，然后经环己烷粗洗、50％乙醇水溶液冲洗及纯乙醇精洗然后在-55℃真空冷冻干燥后24～72小时后，于0～4℃密封储存，得到氧化黏胶短纤及氧化黏胶纤维纱布；其中，所述氧化剂溶液是按二氧化氮质量分数为14％将二氧化氮溶解到环己烷中配制成，氧化反应中黏胶短纤或步骤二中制成的黏胶纤维纱布质量与氧化剂溶液的体积比为1.0g∶42.6ml，反应温度维持在18℃，持续搅拌反应48h；
四、将步骤三中得到的氧化黏胶短纤放入摩尔质量分数为1.0mol/L氢氧化钠(或氢氧化钾)溶液中，氧化黏胶短纤质量与氢氧化钠溶液体积比为25g∶100ml，反应温度为15℃，持续浸泡8h，过滤，得到摩尔质量分数为0.9mol/L的氧化再生纤维素钠(钾)溶液；
五、以步骤二中的氧化粘胶纤维纱布作为基底，采用北京富马友科技有限公司的XJJ-10型静电纺丝机作为喷涂设备，将步骤四中制备的摩尔质量分数为0.9mol/L的氧化再生纤维素钠(钾)溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，注射器温度为8℃，电压40kV，喷头孔径0.6mm，接收距离20cm，接收温度为20℃，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在50％，在静电喷雾状态下间歇喷涂20次，每次间隔15min，1min/次，得到的产品在-55℃真空冷冻干燥后24小时后，得到氧化再生纤维素纱布，于4℃密封储存，
六、以步骤五中得到的产品作为基底，采用北京富马友科技有限公司的XJJ-06型静电纺丝机作为喷涂设备，将步骤一中制备的摩尔质量分数为1.5％的蛋白溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，注射器温度为4℃，电压40kV，喷头孔径1.0mm，接收距离25cm，接收温度为15℃，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在50％，在静电喷雾状态下间歇喷涂10次，每次间隔5min，1min/次，得到的最终产品具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料在-55℃真空冷冻干燥后24小时后，于4℃密封储存；
本试验得到的具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料即自制产品；
止血效果验证：
1、动物活体止血试验
(1)取健康家兔30只(雌12只，雄18只)，用1％戊巴比妥钠30mg/kg体重耳缘静脉麻醉。切割其不同脏器和部位(肝脏、脾脏和肌肉)，在同一脏器上制取3个相同出血创面(长宽各8mm，深5mm)，用单位重量的止血材料敷在创口表面进行止血，同时用普通纱布、速即纱作对照，记录出血时间，止血后的材料用干燥的镊子夹入称量瓶中，并用分析天平称量止血材料止血后的重量计算出血量。出血量(或材料吸附血量)＝止血后重量-止血前重量；
(2)取健康家兔10只，雌雄各半，麻醉方法同上，固定后分离腹腔动、静脉，然后分别用大三角皮针在腹腔动、静脉上针刺10秒钟，用单位重量的止血材料敷在创口表面进行止血，同时用普通纱布、速即纱作对照，记录止血时间。止血后，用肝素125单位/公斤体重，经耳缘静脉注入，使实验动物肝素化，重复进行上述操作，记录止血时间，进而观察止血效果。
本试验中的家兔由哈尔滨医科大学提供；
图1为试验中得到的具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料500倍放大图；
图2为试验中得到的具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料单根纤维2000倍放大图；
图3为试验中得到的表面喷涂纳米氧化再生纤维素钠的氧化再生纤维素类止血材料单根纤维2000倍放大图；
图4为试验中得到的表面喷涂纳米氧化再生纤维素钠及胶原蛋白粒子的氧化再生纤维素类止血材料单根纤维2000倍放大图。
表1是家兔不同部位不同材料止血试验结果结果，其中，n为家兔数量，n＝30，P＜0.05；
表1家兔不同部位不同材料止血试验结果(n＝30，P＜0.05)
| 创伤部位 | 项目 | 普通纱布 | 速即纱 | 自制产品 |
| 肝表面 | 止血时间s | 118.23±44.65 | 94.2±27.15 | 41.6±29.12 |
| 肝表面 | 出血量g | 0.38±0.25 | 0.56±0.6 | 0.87±0.66 |
| 脾表面 | 止血时间s | 112.22±46.78 | 88.2±25.87 | 39.54±20.33 |
| 脾表面 | 出血量g | 0.5±0.26 | 1.10±0.65 | 2.0±0.45 |
| 肌肉 | 止血时间s | 169.2±30.25 | 69.8±26.54 | 34.68±29.26 |
| 肌肉 | 出血量g | 0.66±0.23 | 0.98±0.39 | 0.89±0.84 |
从表1可以看出，本产品止血效果比速即纱、普通纱布均要好，具有较好的止血效果，吸血量优于普通纱布，在肝脏、脾脏止血中亦优于速即纱，吸附性能好，有利于血小板黏附，对创面渗血更有效，从而减少术后血肿的发生。自制产品能明显缩短家兔的出、凝血时间，亦能缩短临床手术术中止血时间，从而缩短手术时间。
2、孔隙率测定：选用一个容积为10ml的塑料瓶，倒满乙醇称重W1，把重为WS的样品进入乙醇中，超声脱气，务必使乙醇充盈于材料的孔中，然后加满乙醇，称重为W2，把浸满了乙醇的样品取出后，称剩余的乙醇与比重瓶重W3，计算孔隙率θ，每组测三个样，最后求平均值；
表2是孔隙率测定，其中，θ1表示第一次测得孔隙率的值，θ2表示第二次测得孔隙率的值，θ3表示第三次测得孔隙率的值，
表2孔隙测定
| 孔隙率θ1 | 孔隙率θ2 | 孔隙率θ3 | 平均孔隙率θ | |
| 普通纱布 | 70.30％ | 76.87％ | 77.75％ | 74.97％ |
| 速即纱 | 69.21％ | 61.56％ | 70.95％ | 67.24％ |
| 自制产品 | 92.86％ | 88.23％ | 89.54％ | 90.21％ |
由表2可知，自制产品的孔隙率达到了90％，接近海绵的孔隙率，相比普通纱布和速即纱，自制产品具有更高的孔隙率，即更大的比表面积，这使得其可以具有更好的吸附性能，与血液作用时将具有更大的接触面。
Claims (5)
1.一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法，其特征在于具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法按以下步骤实现：
一、制备胶原蛋白水溶液，于0～4℃密封储存；
二、以木浆粘胶长纤为原料，采用针织机制备粘胶纤维纱布；其中，所述针织机幅宽8～18m，牵引带间距4.2～6.2m，牵引带宽度4.2～6.2m，牵引速度180～360r/m，网眼宽度0.5～2.5mm；
三、采用氧化剂溶液将粘胶短纤与步骤二中制成的粘胶纤维纱布分别进行氧化，将氧化后的产物分别经环己烷、体积浓度为50%～70%乙醇水溶液及无水乙醇洗涤，然后-20～-55℃真空冷冻干燥24～72小时，得到氧化粘胶短纤及氧化粘胶纤维纱布，于0～4℃密封储存；其中，所述氧化剂溶液的制备方法是将二氧化氮溶解到环己烷中，氧化剂溶液中二氧化氮的质量分数为17～23%；所述氧化反应中粘胶短纤质量与氧化剂溶液的体积比为0.5～2.5g:42.6ml，粘胶纤维纱布质量与氧化剂溶液的体积比为0.5～2.5g:42.6ml；
四、将步骤三中得到的氧化粘胶短纤放入溶液A中反应，反应结束后将产物过滤，得到B溶液；其中，所述溶液A为1.0～1.6mol/L氢氧化钠水溶液或为1.0～1.6mol/L氢氧化钾水溶液，所述氧化粘胶短纤质量与溶液A体积比为25～40g:100ml，所述B溶液为0.9～1.5mol/L的氧化再生纤维素钠溶液或为0.9～1.5mol/L氧化再生纤维素钾溶液；
五、以步骤三中的氧化粘胶纤维纱布作为基底，采用静电纺丝机作为喷涂设备将步骤四中制备的B溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在40～60%，在静电喷雾状态下间歇喷涂10～20次，得到的产品在-20～-55℃真空冷冻干燥6～24小时后，得到氧化再生纤维素纱布，于0～4℃密封储存；其中，耐酸碱PP材料注射器温度为4～10℃，电压40～60kV，喷头孔径0.6～0.8mm，接收距离15～25cm，接收温度为20～25℃；
六、以步骤五中得到的氧化再生纤维素纱布作为基底，采用静电纺丝机作为喷涂设备，将步骤一中制备的胶原蛋白溶液放于耐酸碱PP材料注射器中，开启设备箱内除湿功能，湿度控制在40～60%，在静电喷雾状态下间歇喷涂胶原蛋白粒子10～20次，得到的产品在-20～-55℃真空冷冻干燥12～24小时后，于0～4℃密封储存即完成了具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备；其中，所述耐酸碱PP材料注射器温度为1～4℃，电压30～40kV，喷头孔径0.8～1.0mm，接收距离15～25cm，接收温度为10～15℃。
2.根据权利要求1所述的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法，其特征在于步骤一中的胶原蛋白水溶液中胶原蛋白的质量分数为0.8～1.5%。
3.根据权利要求1所述的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法，其特征在于步骤三中氧化反应过程反应温度维持在18～19.5℃，持续搅拌反应24～56h。
4.根据权利要求1所述的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法，其特征在于步骤四中的反应温度为10～30℃，持续浸泡反应0.5～10h。
5.根据权利要求2所述的一种具有表层纳米结构的氧化再生纤维素类止血材料的制备方法，其特征在于步骤五与步骤六中喷涂每次间隔5～15min，1～2.5min/次。
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