CN102899376A - 一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法 - Google Patents

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郑斌
钟明杰
杨会成
廖秒飞
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Abstract

本发明涉及一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法,其特征在于包括以下步骤:清洗鱿鱼皮,沥干水分,匀浆后按一定的料液比加入去离子水,搅拌均匀,并调节pH值到7.5~8.5;加入鱿鱼皮质量0.4~0.6%的胰蛋白酶,混匀后在50~60℃条件下水解80~100min,得到鱼皮酶解液;按鱿鱼皮质量1.3~1.7%加入活性炭粉末混匀,调节pH为5.5~6.5,在30~40℃条件下脱色20~40min;最后将用板框压滤机将活性炭滤除,并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。本发明以鱿鱼加工后的废弃鱿鱼皮作为原料制备胶原蛋白多肽,不仅成本低,还可以减少对环境的污染,提高水产品加工利用水平;同时制备工艺简单、易操作,采用活性炭粉末进行脱色,较活性炭柱脱色效果好,色差变化率达到80%以上;脱色时间短,仅为30min;胶原损失率低于10%。

Description

一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法
技术领域
本发明属于生物技术中蛋白质材料领域,具体涉及一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法。
背景技术
近年来,随着疯牛病、口蹄疫等危机的出现,不少国家禁止或减少了猪、牛来源胶原的生产和使用,源于水产类的胶原产品成为了研究的热点。我国鱿鱼加工主要分布在浙江、广东、福建和山东,鱿鱼年加工量为30~40万吨,其中鱿鱼皮占加工量的8%~10%。鱿鱼皮中含有大量的胶原蛋白,是提取胶原的很好原料,如果不对其进行进一步加工处理利用,不仅造成资源的极大浪费,更严重的是直接导致环境污染,从鱿鱼加工废弃物鱿鱼皮中提取胶原蛋白,制备胶原蛋白多肽,既可以减少对环境的污染,又能提高企业的经济效益,提高水产品加工利用水平。
但由于鱿鱼皮胶原含有一定量的色素,提取得到的胶原为暗红色,使胶原多肽在应用上受到很大的限制,因此,鱿鱼皮必须进行脱色处理,以提高产品的顺应性。目前尚未见鱿鱼皮胶原产品脱色的相关报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白质的制备方法,采用活性炭粉末进行脱色,不仅工艺简单、脱色时间短、效果好,而且胶原损失率低,提高了胶原蛋白的顺应性。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)清洗鱿鱼皮,沥干水分,匀浆后按一定的料液比加入去离子水,搅拌均匀,并调节pH值到7.5~8.5;
2)加入鱿鱼皮质量0.4~0.6%的胰蛋白酶,混匀后在50~60℃条件下水解80~100min,得到鱼皮酶解液;
3)按鱿鱼皮质量1.3~1.7%加入活性炭粉末混匀,用盐酸调节pH为5.5~6.5,在30~40℃条件下脱色20~40min;
4)最后将用板框压滤机将活性炭滤除,并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。
作为改进,所述步骤1)中鱿鱼皮的质量与水的质量的料液比为1∶9~11。
再改进,所述步骤1)的pH值是采用0.1mol/LNaOH进行调节。
再改进,所述步骤3)的pH值是采用3mol/LHCl进行调节。
最后,所述步骤4)中活性炭滤除后经水洗,在160~200℃下烘烤2~4小时可重复使用。
与现有技术相比,本发明的优点在于:
以鱿鱼加工后的废弃鱿鱼皮作为原料制备胶原蛋白多肽,不仅成本低,还可以减少对环境的污染,提高水产品加工利用水平;同时制备工艺简单、易操作,采用活性炭粉末进行脱色,较活性炭柱脱色效果好,色差变化率达到80%以上;脱色时间短,仅为30min;胶原损失率低于10%。本发明具有工艺简单、成本低、脱色效果好的特点,而且制备的胶原损失率低,提高了胶原蛋白的顺应性。
附图说明
图1是本发明实施例1中的胶原脱色前后冻干对比图;
图2是本发明实施例1中提取胶原全波长扫描吸收光谱图。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1:
取新鲜鱿鱼皮0.4kg,清洗后沥干水分,匀浆后加水4kg,并用0.1mol/L NaOH调节pH值到8.0,搅拌均匀。加入2g的胰蛋白酶混匀,在55℃条件下水解90min,得到鱼皮酶解液,加入6g活性炭粉末,用3mol/L盐酸调节pH为6.0,常温下脱色40min,用冷冻离心机在4-10℃离心15min,活性炭水洗后180℃烘烤3小时重复应用,将脱色后的胶原液放入真空冷冻干燥机冻干。
1.明胶脱色前后冻干对比:不经活性炭脱色的胶原液和经过活性炭脱色的胶原液经真空冷冻干燥机冻干后颜色对比,如图1所示。
2.胶原的紫外图谱分析:将胶原冻干品溶于0.5mol/L醋酸中,配成质量分数为0.05%的胶原溶液。以0.5mol/L醋酸溶液做空白对照,全波长(200nm-800nm)扫描,用紫外分光光度计测定其吸收光谱,如图2所示。
可以看到,全波长(200nm-800nm)扫描发现在225nm处有明显吸收峰,与鱿鱼皮胶原的报道一致。
3.胶原提取率
鱿鱼皮含有胶原蛋白的质量等于羟脯氨酸含量×14.1。计算得:胶原蛋白的含量为11.624%。将40g鱿鱼皮提取的胶原脱色后冻干称重得3.8722g
Figure BSA00000547500600032
Figure BSA00000547500600033
4.色差变化率和胶原蛋白损失率
以脱色前后的明胶液与蒸馏水作为空白测定色差值,并记为ΔE1、ΔE2。色差变化率=(ΔE1-ΔE2)/ΔE1×100%。脱色前后的明胶液用考马斯亮蓝法测定其吸光度记为脱色前A595、脱色后A595。
Figure BSA00000547500600034
Figure BSA00000547500600035
Figure BSA00000547500600036
多肽损失率=(脱色前A595-脱色后A595)/脱色前A595×100%。
Figure BSA00000547500600038
Figure BSA00000547500600039
实施例2:
取新鲜鱿鱼皮4kg,清洗后沥干水分,匀浆后加水40kg,并用0.1mol/L NaOH调节pH值到8.0,搅拌均匀。加入20g的胰蛋白酶混匀,在55℃条件下水解90min,得到鱼皮酶解液,加入60g活性炭粉末,用3mol/L盐酸调节pH为6.0,常温下脱色40min,用板框压滤机除去活性炭粉末,活性炭水洗后180℃烘烤3小时重复应用,将脱色后的胶原液放入真空冷冻干燥机冻干。
1.明胶脱色前后冻干对比结果同前。
2.胶原的紫外图谱分析结果同前。
3.胶原提取率
鱿鱼皮含有胶原蛋白的质量等于羟脯氨酸含量×14.1。计算得:胶原蛋白的含量为11.624%。将40g鱿鱼皮提取的胶原脱色后冻干称重得3.8722g
Figure BSA00000547500600041
Figure BSA00000547500600043
4.色差变化率和胶原蛋白损失率
以脱色前后的明胶液与蒸馏水作为空白测定色差值,并记为ΔE1、ΔE2。色差变化率=(ΔE1-ΔE2)/ΔE1×100%。脱色前后的明胶液用考马斯亮蓝法测定其吸光度记为脱色前A595、脱色后A595。
Figure BSA00000547500600044
Figure BSA00000547500600045
Figure BSA00000547500600046
多肽损失率=(脱色前A595-脱色后A595)/脱色前A595×100%。
Figure BSA00000547500600047
Figure BSA00000547500600048
Figure BSA00000547500600049
实施例3:
取新鲜鱿鱼皮400kg,清洗后沥干水分,匀浆后加水4吨,并用0.1mol/L NaOH调节pH值到8.0,搅拌均匀。加入2kg的胰蛋白酶混匀,在55℃条件下水解90min,得到鱼皮酶解液,加入6kg活性炭粉末,用3mol/L盐酸调节pH为6.0,常温下脱色40min,用板框压滤机除去活性炭粉末,活性炭水洗后180℃烘烤3小时重复应用,将脱色后的胶原液放入真空冷冻干燥机冻干。
1.明胶脱色前后冻干对比结果同前。
2.胶原的紫外图谱分析结果同前。
3.胶原提取率
鱿鱼皮含有胶原蛋白的质量等于羟脯氨酸含量×14.1。计算得:胶原蛋白的含量为11.624%。将40g鱿鱼皮提取的胶原脱色后冻干称重得3.8722g。
Figure BSA00000547500600051
Figure BSA00000547500600052
Figure BSA00000547500600053
4.色差变化率和胶原蛋白损失率
以脱色前后的明胶液与蒸馏水作为空白测定色差值,并记为ΔE1、ΔE2。色差变化率=(ΔE1-ΔE2)/ΔE1×100%。脱色前后的明胶液用考马斯亮蓝法测定其吸光度记为脱色前A595、脱色后A595。
Figure BSA00000547500600055
Figure BSA00000547500600056
多肽损失率=(脱色前A595-脱色后A595)/脱色前A595×100%。
Figure BSA00000547500600057
Figure BSA00000547500600058

Claims (5)

1.一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)清洗鱿鱼皮,沥干水分,匀浆后按一定的料液比加入去离子水,搅拌均匀,并调节pH值到7.5~8.5;
2)加入鱿鱼皮质量0.4~0.6%的胰蛋白酶,混匀后在50~60℃条件下水解80~100min,得到鱼皮酶解液;
3)按鱿鱼皮质量1.3~1.7%加入活性炭粉末混匀,用盐酸调节pH为5.5~6.5,在30~40℃条件下脱色20~40min;
4)最后将用板框压滤机将活性炭滤除,并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤1)中鱿鱼皮的质量与水的质量的料液比为1∶9~11。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤1)的pH值是采用0.1mol/L NaOH溶液进行调节。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述步骤3)的pH值是采用3mol/L盐酸进行调节。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于所述步骤4)中活性炭滤除后经水洗,在160~200℃下烘烤2~4小时可重复使用。
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