CN102885803A - 联苯乙酸氨丁三醇盐在制备治疗眼部炎症反应药物中的应用 - Google Patents

Abstract

一种用于治疗结膜炎的药物，这种药物的主要成分为联苯乙酸氨丁三醇盐、水和用于调节pH值的碳酸钠或氢氧化钠组成，所制成的滴眼液经过药理实验证明，能够治疗结膜炎，并且具有较好的耐受性，能够用于临床上治疗结膜炎等眼部的炎症反应。

Description

联苯乙酸氨丁三醇盐在制备治疗眼部炎症反应药物中的应用

技术领域：

本发明涉及一种用于治疗眼部炎症反应的滴眼液，这种滴眼液由联苯乙酸氨丁三醇、水、PH值调节剂或联苯乙酸、氨丁三醇、水、PH值调节剂组成。

背景技术：

变态反应性结膜炎是最常见的免疫性眼病之一，据统计.世界上约有5％以上的人因变态反应性眼病而就诊，而其中变态反应性结膜炎的比例超过50％。近年来，由于眼部化妆品的使用和某些地区空气污染的加重，其发病率进一步上升，因此研究变态反应性结膜炎的治疗方法意义重大。

人类应用解热镇痛药已有150余年历史，现在，解热镇痛药已成为人们日常生活中不可缺少的重要药品，是全球应用面最广，应用量最大的医药品种之一。全球解热镇痛药年产量已达20余万吨，制剂几千亿片。扑热息痛、阿司匹林、布洛芬、萘普生、双氯芬酸为五大支柱产品，合计年销售额达50多亿美元。大多数的非甾类抗炎药由于其水溶性、刺激性等原因不能制备成滴眼液用于眼部炎症反应的治疗，有时即使解决了其水溶性，但仍然具有较强的刺激性，我们在实验过程中发现布洛芬虽然与精氨酸可以配制成注射液使用，但依然对于眼部有较强的刺激性，不能制备成滴眼液。我们采用联苯乙酸氨丁三醇盐或联苯乙酸和氨丁三醇通过药学、药理试验摸索出了能够有效治疗眼部炎症反应并同时具有良好耐受性的药效成分浓度范围和制备方法，能够用于治疗眼部炎症反应。

发明内容：

本发明的目的之一是提供治疗眼部炎症反应的滴眼液，这种滴眼液可以治疗眼部炎症反应，并且具有良好的耐受性，它的主要药效成分为联苯乙酸氨丁三醇盐或联苯乙酸和氨丁三醇组成。

本发明同时提供了这种滴眼液的制备方法，所制备的滴眼液，无菌、无刺激性，可以治疗眼部炎症反应。

为了实现上述目的，本发明采用了如下的技术方案：

设计系列联苯乙酸氨丁三醇盐浓度的药效、刺激性实验方案，配制浓度0.04％、0.08％、0.16％、0.32％、0.48％、0.96％的联苯乙酸氨丁三醇溶液，并调节PH值至7-8，进行“联苯乙酸氨丁三醇系列不同浓度滴眼液对豚鼠结膜炎的影响试验研究”及刺激性试验，结果发现，0.04％的联苯乙酸氨丁三醇溶液对豚鼠结膜炎症状就具有良好的改善作用，0.08％、0.16％、0.32％、0.48％、0.96％对豚鼠结膜炎症状的改善具有剂量相关性，并且优于0.1％的普拉洛芬滴眼液(市售)。另外刺激性试验发现浓度达到0.5％时对新西兰兔眼睛未见刺激性反应。

具体实施例：

实施例1：联苯乙酸氨丁三醇不同浓度滴眼液的制备

称取0.4g、0.8g、1.6g、3.2g、4.8g、9.6g的联苯乙酸氨丁三醇盐，分别加入到1000ml的注射用水中，搅拌5-10分钟，用碳酸钠调节PH值至7-8之间，过滤除菌，灌装到5ml的经过洗涤干燥的滴眼液用塑瓶中，封盖，包装。

实施例2：联苯乙酸氨丁三醇系列不同浓度滴眼液对豚鼠结膜炎的影响试验研究

试验方法：

豚鼠120只，除溶媒对照组(10只)外，其余各组按文献报道的方法制备变应性结膜炎动物模型。①致敏：每只豚鼠分别予腹腔注射OVA(卵清白蛋白)混悬液(OVA 0.1mg与AL(OH)₃5mg，溶于1mL生理盐水配成)，同时给溶媒对照组每只注射生理盐水1ml，14天后再次注射。②模型评价及分组：腹腔注射完成以后第7天，行被动皮肤免疫反应(PCA)试验，确定OVA-IgE抗体效价升高为造模成功。随机选取造模成功动物80只分为模型组，联苯乙酸氨丁三醇系列滴眼液剂量1-6(浓度为：0.04％、0.08％、0.16％、0.32％、0.48％、0.96％)，普拉洛芬滴眼液对照组，模型对照组，与溶媒对照组一起，共计9组，每组10只，雌雄各半。③激发及给药：将OVA生理盐水稀释液(5mg/mL)用微量加样器滴入双眼球结膜囊内，每眼20μL，每日1次，间隔一天激发一次，持续一周。同时，每组双眼给相应药液每眼20μL，每日1次，连续一周，模型组和溶媒对照组给予生理盐水。④症状观察及指标测定：

(1)眼部症状观察和评分

于末次抗原攻击后30min，用裂隙灯对豚鼠眼部症状进行观察评分，评分标准如下：

A.结膜充血(指睑结膜、球结膜部位)：血管正常0分；血管充血呈鲜红色1分；血管充血呈深红色，血管不易分辨2分；弥漫性充血呈紫红色3分。

B.结膜水肿：无0分；轻微水肿(包括瞬膜)1分；明显水肿，伴部分眼睑外翻2分；水肿至眼睑近半闭合3分；水肿至眼睑大半闭合4分。

C.分泌物：无0分；少量分泌物1分；分泌物使眼睑和睫毛湿或粘着2分；分泌物使整个眼区潮湿或粘着3分。评分的结果为3项分值累计，即为充血、水肿和分泌物得分的合计得分。

(2)搔抓反应计数

抗原攻击后连续观察20min，记录掻抓次数，眼部掻抓反应以豚鼠前肢移向眼部超过2次为一次定义。

试验结果：

2.1眼部症状观察评分

试验结果(表1)表明：模型组症状评分明显高于溶媒对照组(p＜0.001)，各用药组的症状评分均低于模型组(p＜0.05或p＜0.01或0.001)。联苯乙酸氨丁三醇系列滴眼液剂量2-剂量6均优于普拉洛芬滴眼液组(p＜0.05或p＜0.01或0.001)。

2.2搔抓反应计数

试验结果(表1)表明：模型组豚鼠搔抓反应次数明显高于溶媒对照组(p＜0.001)，各用药组豚鼠搔抓反应次数均低于模型组(p＜0.05)，联苯乙酸氨丁三醇系列滴眼液剂量2-剂量6均优于普拉洛芬滴眼液组(p＜0.05或p＜0.01或0.001)。

表1联苯乙酸氨丁三醇系列滴眼液对豚鼠结膜炎症状评分及搔抓反应的影响

与模型组比较：*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001

与普拉洛芬滴眼液组比较：#p＜0.05，##p＜0.01，###p＜0.001试验结论：

联苯乙酸氨丁三醇系列不同浓度滴眼液对豚鼠结膜炎症状具有良好的改善作用，并且优于普拉洛芬滴眼液。

实施例3：联苯乙酸氨丁三醇滴眼液新西兰兔眼刺激性试验研究方法：

(1)试验方法：

a)选用检疫合格并且用0.5％荧光素钠及裂隙灯显微镜进行双眼检查合格(无眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤)的6只动物用于本试验专题研究。荧光素钠染色后1小时才能进行试验。采用同体左右侧眼自身对比法，左侧给予2滴浓度为0.5％联苯乙酸氨丁三醇滴眼液(每滴体积约为50uL，每次给药体积为100uL)，使兔眼睑被动闭合约10秒；右侧给予等体积的0.9％氯化钠注射液。给药顺序为先左侧后右侧。

b)荧光素钠检查方法：将试验眼的眼睑拉低呈杯状，滴入一滴0.5％荧光素钠溶液到角膜表面，约10秒后，用0.9％氯化钠注射液充分冲洗，在暗室内用手握式长波紫外照明灯照明，如果出现角膜损伤，表现为亮的黄绿色荧光区域。

c)裂隙灯检查方法：打开主电源开关，将照明亮度调节适当。调节裂隙宽度调节旋钮，使裂隙宽度为2-3mm。用双手向两边掰动显微镜棱镜盒，调节瞳距至双眼同时通过目镜观察到瞄靶上的图像，即获得立体图像。把动物固定在颌托架前，调节颌托高度调节手柄，使动物的眼角大致在瞄靶的中心水平线上。移动滑盘，使光斑和显微镜大致对准目标。通过目镜边观察边调节，以准确对准目标，得到清晰得观察像。在水平面内转动滤色片选择杆，可在光路中分别转换四种不同的滤色片。首先使用隔热滤色片(白光)，这样可以使动物感觉更舒适，检查角膜表面及虹膜并拍照，然后使用蓝色滤色片(蓝光)进行荧光素检查并拍照。拍照时，用USB连接线使显微镜与计算机连接起来，打开Phmias图像采集软件进行图像采集。

(2)观察指标：

动物称重：检疫结束期、给药的第8天、第15天、第22天、第28天和末次给药后72小时进行称重。

动物状态观察：给药期及停药期间，每天观察1次每例动物的状态。

动物眼部观察：

a)观察兔眼的局部反应情况：每天每次给药前，第8天、第15天、第22天末次给药后约1小时及第28天末次给药后1、2、4、24、48及72小时观察动物双眼的局部反应情况和对眼部反应进行评分，评分标准详见表2。按表2的要求，将每一个观察时间点每一动物的眼角膜、虹膜和结膜的刺激反应分值相加得总积分，将一组的积分总和除以动物数，即得最后均值。除了观察所列出的结膜、角膜和虹膜损伤外，其他所观察到的损伤也应记录。

表2眼刺激反应评分

b)荧光素染色检查：每天第一次给药前、第8天、第15天、第22天末次给药后约1小时及第28天末次给药后1、2、4、24、48及72小时均对兔双眼进行荧光素染色检查。

c)裂隙灯检查：检疫结束期、给药的第8天、第15天、第22天和末次给药后72小时均对兔双眼进行裂隙灯检查。

(3)动物处理方法：试验结束后，动物移交至动物管理组用于试验技能培训。

(4)结果判定：按表3判断联苯乙酸氨丁三醇滴眼液的眼刺激程度，对所有肉眼观察结果进行综合评价。

表3眼刺激性评价标准

结果

(1)动物一般状况观察：试验期间各例动物外观特征、行为活动、呼吸及粪便性状等均未见明显异常。

(2)肉眼观察：

眼刺激反应评分结果：各例动物左右眼分别给予联苯乙酸氨丁三醇滴眼液和0.9％氯化钠注射液后，在各个观察时间点内分别观察眼角膜、虹膜和结膜刺激反应情况，结果表明各例动物左右眼在各个观察时间点内角膜、虹膜的刺激性反应评分值均为0，但部分动物左右眼出现结膜血管轻微充血现象，评分值较小，均为1分，左眼评分均值在0-1.00范围，右眼评分均值在0-0.83范围。6例动物左右眼刺激性反应评分情况，详见附表1和2。

荧光素钠眼部检查结果：观察期间，各例动物左右眼角膜区域均出现不同程度的浅绿色或亮绿色荧光区域或荧光点现象，详见附表3和4。

裂隙灯检查：给药前、给药第8、15、22天及第28天末次给药后72小时均对兔双眼裂隙灯检查及拍照。白光检查结果为各检查时间点内，各例动物双眼角膜，虹膜及结膜均未见明显异常变化；蓝光检查结果为个别动物出现不同程度的浅绿色或亮绿色荧光区域或荧光点现象。

附表1联苯乙酸氨丁三醇滴眼液眼刺激性试验

受试物侧(左眼)每天眼刺激性反应评价表(n＝6)

附表2联苯乙酸氨丁三醇滴眼液眼刺激性试验

阴性对照侧(右眼)每天眼刺激性反应评价表(n＝6)

附表3联苯乙酸氨丁三醇滴眼液眼刺激性试验

受试物侧(左眼)角膜发生荧光现象一览表(n＝6)

备注：“+”表示角膜出现荧光区域，“-”表示未出现荧光区域。

附表4联苯乙酸氨丁三醇滴眼液眼刺激性试验

阴性对照侧(右眼)角膜发生荧光现象一览表(n＝6)

备注：“+”表示角膜出现荧光区域，“-”表示未出现荧光区域。

结论

在本试验条件下，联苯乙酸氨丁三醇滴眼液(给药浓度：0.5％)连续28天多次滴眼，对兔眼未见引起刺激性反应。

Claims (9)

1.联苯乙酸氨丁三醇盐在制备治疗眼部炎症反应药物中的应用。

2.联苯乙酸氨丁三醇盐在制备治疗结膜炎药物中的应用。

3.一种用于治疗眼部炎症反应的滴眼液，这种滴眼液由联苯乙酸氨丁三醇、水及用于调节PH值的PH值调节剂组成。

4.一种用于治疗眼部炎症反应的滴眼液，这种滴眼液由联苯乙酸、氨丁三醇、水及用于调节PH值的PH值调节剂组成。

5.如权利要求3所述的滴眼液，其中联苯乙酸氨丁三醇的浓度为0.05-0.5％。

6.如权利要求4所述的滴眼液，其中联苯乙酸的浓度为0.05-0.5％。

7.如权利要求4所述的滴眼液中PH值调节剂为碳酸钠或氢氧化钠。

8.如权利要求5所述的滴眼液用于治疗眼部炎症反应。

9.如权利要求5所述的滴眼液在治疗结膜炎药物中的应用。