CN102872450B

CN102872450B - 一种用于复合给药的组合物

Info

Publication number: CN102872450B
Application number: CN201210393144.9A
Authority: CN
Inventors: 刘洪臣; 韩勇
Original assignee: Chinese PLA General Hospital
Current assignee: Chinese PLA General Hospital
Priority date: 2012-10-17
Filing date: 2012-10-17
Publication date: 2014-09-03
Anticipated expiration: 2032-10-17
Also published as: CN102872450A

Abstract

本发明涉及一种用于复合给药的组合物，更加具体地涉及一种含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物。该缓释给药组合物包含有有效量的胰岛素、足以维持其释放的生物可降解聚合物和进一步延长胰岛素释放、降低药物突释且将生物可降解聚合物微球固定在靶部位的纤维蛋白胶。

Description

一种用于复合给药的组合物

技术领域

本发明涉及一种用于复合给药的组合物。具体的说，涉及一种含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物，以用于促进糖尿病患者种植体骨结合。

背景技术

人工种植技术是牙列缺损、牙列缺失和颌面部缺损的有效修复手段，目前已作为一种成熟可靠的修复方法广泛应用于临床。糖尿病患者的种植修复往往存在较差的初期骨结合和较高的失败率，病情未得到良好控制的糖尿病患者，易发生种植失败。临床研究和实验研究显示糖尿病引起的骨愈合能力的减弱(尤其是种植术后的第2周)是导致种植体骨结合发生时间上的延迟和质量上的下降的最重要原因之一。糖尿病状态下成骨细胞增殖和分化功能的抑制是糖尿病骨愈合受损并进一步导致种植体初级骨结合差的最重要的分子机制之一。

国外一篇综述对人和动物的数据进行归纳分析，考察了内源性胰岛素、外源性胰岛素、胰岛素的敏感性和胰岛素通路对骨的作用，认为胰岛素是骨代谢因子，可以通过直接和间接作用影响骨形成、保持和促进骨的密度和强度(Am J Physiol Endocrinol Metab，2005)。国内研究报道，胰岛素能促进MG-63细胞的增殖与分化(Cell BiochemFunct，2010)。国外一研究报道，在糖尿病BB wistar大鼠股骨骨折后立刻对骨折断端进行10天的胰岛素局部持续给药治疗，能纠正受损的骨折愈合能力(骨愈合初期细胞的增殖和软骨形成，后期的矿化和骨痂的生物机械指标)(Bone，2005)。国内研究报道，在自发性糖尿病大鼠(GK大鼠)胫骨种植体周局部持续应用胰岛素，发现种植体-骨结合明显高于空白对照组，表明了局部缓释胰岛素的应用能改善糖尿病种植体-骨结合(Br J Oral Maxillofac Surg，2010)。

胰岛素体内半衰期短、稳定性差，通过采用生物可降解材料将胰岛素制成缓释微粒制剂，可提高药物的稳定性，实现药物缓释，减少给药次数，增加患者顺应性。生物可降解聚合物具有生物相容性好、生物可降解、无毒、良好的成囊性能、缓控释等优点，其中聚乳酸(PLA)、聚乳酸羟基乙酸(PLGA)等在美国通过FDA认证，被正式作为药用辅料收录进美国药典。国内外均报道了胰岛素能被生物可降解聚合物包裹形成缓释微球(Int J Pharm，2010；Br J Oral Maxillofac Surg，2010)。但是在种植体周直接放置缓释微球存在药物突释作用的影响，而且由于扩散作用和血流的冲刷作用会导致实际保持在靶部位的药物量减少，从而无法发挥最大药效，不能达到最佳治疗效果。

纤维蛋白胶(Fibrin gel)是经FDA批准而应用于临床的一种生物粘结剂，无细胞毒性，可吸收，具有良好的生物相容性。纤维蛋白胶由纤维蛋白单体与凝血酶聚合而成，模拟人体自身凝血反应最后阶段形成稳定的多聚纤维蛋白原纤维，再进一步聚合成为具有三维网状结构的纤维蛋白多聚物，既可用于外科手术止血、封闭创面等，也被用于开发组织工程支架和生长因子释放系统，此胶在人体内两周左右被组织吸收。

发明内容

本发明旨在提供一种含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物。本发明以生物可降解聚合物和纤维蛋白胶为胰岛素的缓释载体，以纤维蛋白胶作为生物粘结剂，提供一种纤维蛋白胶复合胰岛素/生物可降解聚合物微球作为糖尿病种植体周胰岛素缓释给药组合物，该复合物可于施用后，由纤维蛋白胶将胰岛素/生物可降解聚合物微球固定在靶部位，并在体外和体内维持一定的有效的作用时间(种植术后2周即种植体骨愈合初期)，从而促进糖尿病种植体骨结合，提高糖尿病患者的种植成功率。

本发明所要解决的另一个技术问题在于提供一种含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物的制备方法，其中该胰岛素/生物可降解聚合物微球采用溶剂挥发法进行制备。

本发明还要解决的另一个技术特征在于提供一种促进糖尿病种植体骨结合，提高糖尿病患者的种植成功率的含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物。

本发明所述的含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物，在该胰岛素/生物可降解聚合物微球中，胰岛素的重量与生物可降解聚合物的重量的比例为1∶1000～20∶80，优选1∶100～1∶10。该胰岛素可以为猪胰岛素、牛胰岛素和人胰岛素。

而生物可降解聚合物选自聚乳酸、聚乳酸羟基乙酸、聚丙交酯-乙交酯、聚羟基乙酸、聚磷腈、聚氰基丙烯酸酯、聚酰胺中的一种或任意混合物，优选聚乳酸、聚乳酸羟基乙酸、聚丙交酯-乙交酯中的一种或任意混合物，最优选聚乳酸。该生物可降解聚合物分子量为3000～100000道尔顿，优选5000～10000道尔顿。

而含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物，其中胰岛素/生物可降解聚合物微球与纤维蛋白胶的复配比为1毫克：10毫升～10毫克：1毫升，优选胰岛素/生物可降解聚合物微球与纤维蛋白胶的复配比为5毫克：1毫升。

该含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物的制备方法如下：

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

首先采用水包油包水(W/O/W)复乳-溶剂蒸发法将胰岛素包裹于生物可降解聚合物微球中：将生物可降解聚合物溶解于有机溶剂中，制成有机相(O)(生物可降解聚合物与有机溶剂比例为：500mg∶1ml～10mg∶1ml，优选100mg∶1ml)，然后将一定体积的胰岛素溶液加入到有机相中，超声(80kW～450kW)形成初乳(W/O)；另配制乳化剂水溶液，将初乳倒入该溶液中，搅拌形成复乳(W/O/W)，然后倒入适量乳化剂水溶液，置于机械搅拌器上搅拌，待有机溶剂挥发完全后，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，置布氏漏洞抽滤，真空干燥或冷冻干燥即得胰岛素/生物可降解聚合物载药微球。其中由于胰岛素稳定性差，不耐高温，所以在超声时，优选在冰浴中进行，以避免胰岛素的降解。

此外，有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、醋酸乙酯、二氧乙环、丙酮、四氢呋喃中的一种或任意混合物，优选二氯甲烷。乳化剂水溶液为PVA、PVPk-30、明胶、CMC-Na、低粘度HPMC或HPC水溶液，优选PVA水溶液；并且优选所述乳化剂水溶液的浓度为0.1～5％，更优选1％。此外在形成复乳过程中，搅拌为在100～10000rpm，优选800～2000rpm的速度下搅拌1～5min。而在挥发有机溶剂中，搅拌为在100～1000rpm，更优选300～800rpm的速度下搅拌5～10h。

然后分别将纤维蛋白原冻干粉溶解于磷酸二氢钾溶液、将凝血酶冻干粉溶解于氯化钙溶液并与胰岛素/生物可降解聚合物微球混合形成混悬液后，将纤维蛋白原溶液和凝血酶-微球混悬液分别装载于药物输送器的两个注射器中，通过药物输送器，上述两组分按照1∶10～10∶1，优选1∶1的体积比混合并经同一针头注射至给药部位，并在数秒内形成凝胶，达到将药物局部给药的目的。

其中纤维蛋白原冻干粉是由经病毒灭活处理的猪源纤维蛋白原冻干粉，并且所述纤维蛋白原冻干粉与所述磷酸二氢钾溶液的比例为1mg∶1ml～100mg∶1ml，优选25mg∶1ml。并且磷酸二氢钾溶液的浓度为10～50mM，凝血酶冻干粉与所述氯化钙溶液的比例为10IU∶1ml～500IU∶1ml，优选160IU∶1ml，并且优选所述氯化钙溶液浓度为10～80mM，优选40mM。

由于该释药系统胰岛素的释放需经过胰岛素从微球中释放、胰岛素从纤维蛋白胶中扩散至组织的两个过程或胰岛素微球从纤维蛋白胶中释出、胰岛素从微球中释放的两过程，因此，胰岛素的释放更持久，也避免了药物突释作用的影响。药物一次施用后能在糖尿病患者种植体周维持10天左右的胰岛素持续给药。

本发明的有益效果是：提供了一种糖尿病种植体周胰岛素缓释给药组合物，在促进糖尿病种植体骨结合的同时，有效避免了药物从靶部位移位和药物突释作用的影响，局部药物浓度高，无肝首过效应影响，变态反应率低，组织相容性好，无毒副作用，可被机体完全吸收，无需二次手术取出，增加了患者的顺应性，是一种安全、有效、经济、方便的糖尿病种植体周给药组合物，有着重大的社会经济效益。

附图说明

附图1是本发明含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物示意图。

附图1中1为纤维蛋白原溶液，2为凝血酶溶液，3为胰岛素/生物可降解聚合物微球，4、5分别为给药组合物的两个单独的注射器，6为混合输出头，7为加载在输送器中的纤维蛋白原溶液，8为加载在输送器中的凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液。使用该系统时，将纤维蛋白原溶液(1)加载到输送器的注射器(4)中(7)，将凝血酶溶液(2)和胰岛素/生物可降解聚合物微球(3)混合形成凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液(8)并加载到输送器的注射器(5)中，然后使两者混合并从同一输送头(6)中输出，形成负载微球的纤维蛋白胶。

附图2所示为本发明应用在糖尿病种植术中的流程图：用预备钻在牙槽骨上制备好种植窝后，使用含有纤维蛋白胶和胰岛素/生物可降解聚合物微球的复合给药组合物向种植窝内注入负载有微球的纤维蛋白胶，然后在其凝固为胶体前将种植体植入，与此同时负载微球的纤维蛋白胶将均匀的分散在种植体和牙槽骨的交界面上，在形成胶体后开始向种植体周围骨发挥持续释放胰岛素的作用。

图3是胰岛素/PLA微球和胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物的体外累积释放曲线。

图4是胰岛素/PLGA微球和胰岛素/PLGA微球-纤维蛋白胶复合物的体外累积释放曲线。

图5是胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物所释放的胰岛素的MTT吸光度值。

图6是胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物所释放的胰岛素的碱性磷酸酶的活性结果。

图7是胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物所释放的胰岛素的茜素红染色吸光度值结果。

具体实施方式

以下结合实施例和试验例具体说明本发明，本发明的实施例仅用于说明本发明的技术方案，并非限定本发明的实质。

实施例一

胰岛素/PLA微球的制备

胰岛素/PLA微球采用复乳-溶剂蒸发法制备：将100mgPLA溶解于1ml二氯甲烷中，制成有机相(O)，然后将0.1ml的胰岛素溶液(30mg/ml)加入到有机相中，超声(190kW)形成初乳(W/O)；将初乳倒入8ml浓度为1％的PVA水溶液中，在1500rpm转速下搅拌形成复乳(W/O/W)，然后倒7mlPVA水溶液，置于机械搅拌器上在600rpm转速下搅拌6-8小时，待二氯甲烷挥发完全后，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，置布氏漏洞抽滤，冷冻干燥即得胰岛素/PLA载药微球。

实施例二

胰岛素/PLGA微球的制备

胰岛素/PLGA微球采用复乳-溶剂蒸发法制备：将100mgPLGA溶解于1ml二氯甲烷中，制成有机相(O)，然后将0.1ml的胰岛素溶液(30mg/ml)加入到有机相中，超声(190kW)形成初乳(W/O)；将初乳倒入8ml浓度为1％的PVA水溶液中，在1500rpm转速下搅拌形成复乳(W/O/W)，然后倒7mlPVA水溶液，置于机械搅拌器上在600rpm转速下搅拌6-8小时，待二氯甲烷挥发完全后，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，置布氏漏洞抽滤，冷冻干燥即得胰岛素/PLGA载药微球。

实施例三

胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合给药组合物的制备

胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合给药组合物由胰岛素/PLA微球和纤维蛋白胶复配而成，其复配比为5mg∶1ml。

其中胰岛素/PLA微球提前采用复乳-溶剂蒸发法制备(实施例一)。纤维蛋白胶是由经病毒灭活处理的哺乳动物纤维蛋白原冻干粉、凝血酶冻干粉、磷酸二氢钾溶液和氯化钙溶液组成。该给药组合物可在糖尿病种植术中现场配置使用：首先用预备钻在牙槽骨上制备好种植窝，与此同时由助手操作分别将纤维蛋白原冻干粉溶解于磷酸二氢钾溶液、将凝血酶冻干粉溶解于氯化钙溶液并与胰岛素/PLA微球混合形成混悬液后，将纤维蛋白原溶液和凝血酶-微球混悬液分别装载于药物输送器的两个注射器中，通过输送器将两者经同一针头混合推送注射人种植窝，在其凝固为胶体前将种植体植入，这样负载微球的纤维蛋白胶将均匀的分散在种植体和牙槽骨的交界面上，发挥持续给药作用。按种植术规程要求缝合切口。

实施例四

取实施例1所得胰岛素/PLA微球5mg，置于含1ml PH＝7.4的PBS液的离心管中，于37℃摇床中，以50rpm转速振摇，定时离心取上清液检测不同时间药物累计释放率，原瓶中补充同体积PBS液。在含有2ml PH＝7.4的PBS液的离心管中聚合形成1ml的胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物(含5mg微球)，定时取上清液检测不同时间药物累计释放率，原瓶中补充同体积PBS液。

附图3为胰岛素/PLA微球和胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物的体外累积释放曲线。说明纤维蛋白胶与胰岛素/PLA微球复合后与胰岛素/PLA微球相比突释率由51％下降到了27％，释药时间由5天延长到了10天。首日较高的突释率对治疗无益，反而会产生毒副作用，纤维蛋白胶与胰岛素/PLA微球复合后降低了这种作用；而10天的释药时间能够满足在种植体骨愈合初期对种植体周持续给药(胰岛素)以促进种植体骨结合的需要。

实施例五

取实施例2所得胰岛素/PLGA微球5mg，置于含1ml PH＝7.4的PBS液的离心管中，于37℃摇床中，以50rpm转速振摇，定时离心取上清液检测不同时间药物累计释放率，原瓶中补充同体积PBS液。在含有2ml PH＝7.4的PBS液的离心管中聚合形成1ml的胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物(含5mg微球)，定时取上清液检测不同时间药物累计释放率，原瓶中补充同体积PBS液。

附图4为胰岛素/PLGA微球和胰岛素/PLGA微球-纤维蛋白胶复合物的体外累积释放曲线。纤维蛋白胶与胰岛素/PLGA微球复合后与胰岛素/PLA微球相比突释率由43％下降到了24％，释药时间由7天延长到了14天。

实施例六

对比实施例四和实施例五所得胰岛素/生物可降解聚合物微球-纤维蛋白胶复合物，二者突释率分别为27％和24％，释药时间分别为10天和14天。考虑到胰岛素的不稳定性，其在体内容易被降解，所以优选胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物能够使胰岛素，其更加稳定的释放，更好的避免胰岛素在体内的降解。

实施例七

采用实施例四取得的样本验证给药组合物释出的胰岛素的活性及对高糖下人成骨样MG-63细胞的分化和增殖的作用。MG-63细胞置于培养瓶中用MEM/EBSS培养基培养(其中含10％的胎牛血清(FBS)和非必需氨基酸(NEAA))。当细胞在培养瓶中贴壁融合达80～90％左右时传代。将MG-63细胞按2000个/孔接种于96孔板细胞培养24小时，血清饥饿12小时后，培养基更换为下列之一：(a)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS和1.0g/L葡萄糖(生理糖浓度，NG))；(b)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS和4.5g/L葡萄糖(高糖浓度，HG))；(c)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和100nM的新鲜胰岛素)；(d)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和100nM的从复合给药组合物释放出的胰岛素)；(e)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和在空白微球-纤维蛋白胶的体外释放试验中取得的上清液)。释放样本取自体外释放试验的第1、5、10天。细胞在上述培养基中培养3天后，进行MTT试验。

图5是胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合物所释放的胰岛素MTT吸光度值。表明了在整个释药周期释放的胰岛素保持了高的活性，并能纠正高糖下MG-63细胞增殖受到的抑制作用。

将MG-63细胞按20×10⁴个/孔接种于24孔板细胞培养24小时，血清饥饿12小时后，培养基更换为下列之一：(a)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS和1.0g/L葡萄糖(生理糖浓度，NG))；(b)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS和4.5g/L葡萄糖(高糖浓度，HG))；(c)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和100nM的新鲜胰岛素)；(d)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和100nM的从复合给药组合物释放出的胰岛素)；(e)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和在空白微球-纤维蛋白胶的体外释放试验中取得的上清液)。接受上述培养基处理的第4天换液。释放样本取自体外释放试验的第1天和第5天。细胞首先接受取自第1天的样本处理并培养4天，然后更换为取自第5天的样本培养3天。细胞培养7天后，检测碱性磷酸酶(ALP)活性。

图6是碱性磷酸酶的活性结果。进一步说明了在整个释药周期释放的胰岛素保持了高的活性，并能纠正高糖下MG-63细胞早期分化受到的抑制作用。

将MG-63细胞按20×10⁴个/孔接种于24孔板细胞培养24小时，血清饥饿12小时后，培养基更换为下列之一：(a)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS和1.0g/L葡萄糖(生理糖浓度，NG))；(b)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS和4.5g/L葡萄糖(高糖浓度，HG))；(c)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和100nM的新鲜胰岛素)；(d)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和100nM的从复合给药组合物释放出的胰岛素)；(e)MEM/EBSS(含有NEAA，5％FBS，4.5g/L葡萄糖和在空白微球-纤维蛋白胶的体外释放试验中取得的上清液)。释放样本取自体外释放试验的第1、5、7、10、14、18和21天。细胞首先接受取自第1天的样本处理并培养4天，然后更换为取自第5天的样本培养3天；之后，在相应的细胞培养时间点更换培养基为取自相对应时间点的样本。细胞培养21天后，用茜素红染色吸光度值评估矿化结节的形成状况。

图7是茜素红染色吸光度值结果。进一步说明了在整个释药周期释放的胰岛素保持了高的活性，并能纠正高糖下MG-63细胞矿化受到的抑制作用。

细胞试验说明胰岛素/PLA微球-纤维蛋白胶复合给药组合物在整个释药周期释放的胰岛素保持了高的活性，并能纠正高糖下MG-63细胞增殖和分化所受到的抑制。

Claims

1.一种制备用于复合给药的组合物的方法，其包括下列步骤：

a)将生物可降解聚合物溶解于有机溶剂中，制成有机相，其中所述有机溶剂为二氯甲烷，并且所述生物可降解聚合物为聚乳酸或聚乳酸羟基乙酸，此外所述生物可降解聚合物的分子量为3000～100000道尔顿，此外所述生物可降解聚合物与有机溶剂比例为500mg∶1ml～10mg∶1ml；

b)将胰岛素溶液加入到有机相中，超声形成初乳，其中所述胰岛素可为猪胰岛素、牛胰岛素或人胰岛素，胰岛素的重量与生物可降解聚合物的重量的比例为1∶1000～20∶80，并且所述超声的功率为80kW～450kW；

c)配制乳化剂水溶液，将初乳倒入所述溶液中，搅拌形成复乳，然后倒入适量乳化剂水溶液，其中所述乳化剂水溶液为PVA水溶液，并且所述乳化剂水溶液的浓度为5～0.1％，此外所述搅拌为在100～10000rpm的速度下搅拌1～5min；

d)置机械搅拌器上搅拌，待有机溶剂挥发完全后，离心，收集所得微球，用蒸馏水洗涤多次后，再离心收集，置布氏漏斗抽滤，其中所述搅拌为在100～1000rpm的速度下搅拌5～10h；

e)经真空干燥或冷冻干燥即得胰岛素/生物可降解聚合物微球；

f)分别将纤维蛋白原冻干粉溶解于磷酸二氢钾溶液中形成纤维蛋白原混合溶液、将凝血酶冻干粉溶解于氯化钙溶液中并与胰岛素/生物可降解聚合物微球混合形成凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液；

g)将所形成的纤维蛋白原混合溶液和凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液分别装载于双腔推液器的两个注射器中；

h)通过药物输送器将所述纤维蛋白原混合溶液和凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液经同一针头混合并推送出来，形成胰岛素/生物可降解聚合物微球-纤维蛋白胶。

2.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤a)中生物可降解聚合物的分子量为5000～10000道尔顿。

3.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤a)中生物可降解聚合物与有机溶剂比例为100mg∶1ml。

4.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤b)中胰岛素的重量与生物可降解聚合物的重量的比例为1∶100～1∶10。

5.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤c)中乳化剂水溶液的浓度为1％。

6.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤c)中搅拌为800～2000rpm的速度。

7.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤d)中搅拌为300～800rpm的速度。

8.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤f)中所述纤维蛋白原冻干粉为由经病毒灭活处理的猪源纤维蛋白原冻干粉，并且所述纤维蛋白原冻干粉与所述磷酸二氢钾溶液的比例为1mg∶1ml～100mg∶1ml，并且所述磷酸二氢钾溶液的浓度为10～50mM，所述凝血酶冻干粉与所述氯化钙溶液的比例为10IU∶1ml～500IU∶1ml，并且所述氯化钙溶液浓度为10～80mM。

9.根据权利要求8所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述纤维蛋白原冻干粉与所述磷酸二氢钾溶液的比例为25mg∶1ml。

10.根据权利要求8所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述凝血酶冻干粉与所述氯化钙溶液的比例为160IU∶1ml。

11.根据权利要求8所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述氯化钙溶液浓度为40mM。

12.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述步骤b)中超声是在冰浴下进行的。

13.根据权利要求1所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述纤维蛋白原混合溶液和凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液按照1∶10～10∶1的体积比混合并推送出来。

14.根据权利要求13所述的制备用于复合给药的组合物的方法，其中所述纤维蛋白原混合溶液和凝血酶-胰岛素/生物可降解聚合物微球混悬液按照1∶1的体积比混合并推送出来。

15.根据权利要求1-14任一项的方法制备出的用于复合给药的组合物。

16.根据权利要求15所述用于复合给药的组合物在制备用于治疗糖尿病的药物制剂中的用途，其中在施用所述用于复合给药的组合物之后，由纤维蛋白胶将胰岛素/生物可降解聚合物微球固定在靶部位，并在体外和体内维持一定的有效的作用时间，从而促进糖尿病种植体骨结合，提高糖尿病患者的种植成功率。