CN102870824A

CN102870824A - 茶树油粕的活性混合提取物的制备方法及提取物和应用

Info

Publication number: CN102870824A
Application number: CN2012103177517A
Authority: CN
Inventors: 孟祥春; 李俊; 张爱玉; 姜波; 毕方铖
Original assignee: Pomology Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Pomology Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2012-08-31
Filing date: 2012-08-31
Publication date: 2013-01-16

Abstract

本发明公开了一种茶树油粕的活性混合提取物的制备方法及提取物和应用。本发明采用水或乙醇作为溶剂浸提废弃的茶树油粕废渣制备得到所述活性混合提取物，对多种果蔬采后微生物病害的病原菌具有抑制作用，尤其是对香蕉、芒果或番木瓜炭疽病、柑橘青霉菌和绿霉病等水果的采后病菌具有明显的离体抑菌效果，而且在活体条件下，能防治香蕉、芒果、柑桔等水果的采后病害，对果蔬的采后无公害保鲜具有良好的作用，可作为植物源抑菌剂或果蔬保鲜剂使用。

Description

茶树油粕的活性混合提取物的制备方法及提取物和应用

技术领域

本发明属于果蔬保鲜技术和农药技术领域，具体涉及一种茶树油粕活性混合提取物的制备方法以及制备得到的提取物及其作为杀菌剂和保鲜剂在果蔬保鲜和采后病害防治中的应用。

背景技术

果蔬采后贮藏过程中因微生物病害引起的腐烂所造成的损失是十分巨大的，据资料报道，发达国家的果蔬在采收后因腐烂而造成的损失在15～24%左右，发展中国家由于缺乏冷藏设备及卫生条件较差，果蔬采后病害导致的损失可高达20～50%。

目前国内外应用于采后果蔬保鲜的化学防腐剂主要有施保功、扑海因（抑菌脲）、特克多、多菌灵、甲基托布津、仲丁胺等。然而，长期使用化学杀菌剂极易导致病菌产生抗药性，并导致这些杀菌剂的使用剂量不得不不断加大，从而也引发了食品安全、环境污染和有害生物抗药性等一系列严重问题。人们越来越担心食物链中化学杀菌剂残留对人类健康的影响，要求降低果蔬产品化学杀菌剂的使用量，许多生产上常用的杀菌剂已被许多国家明令禁止在果蔬保鲜中使用。因此，迫切要求研究者寻找新的保鲜药剂用于水果蔬菜的采后保鲜及控制采后果蔬的微生物病害。为了解决上述问题，人们加大了生物农药的开发力度，植物源农药作为生物农药的重要组成部分而倍受重视，国内外均有植物源农药的研发报道。然而以往很多植物源农药的研发均采用中草药或珍稀名贵等优稀植物，这些原材料的缺乏给大量规模生产应用带来很大限制。

在果蔬保鲜方面，有报道茶皂素与抑霉唑和咪鲜胺按比例混合可抑制柑橘青绿霉菌菌丝生长和孢子萌发，申请号为200810220328.9的中国专利申请公开了茶皂素及其合剂在水果防腐保鲜方面的应用，是采用茶皂素粗提物以及纯品在防治水果采后病原真菌方面的应用，这些文献中述及的茶皂素是从山茶科植物种子中直接提取出来的一种粗品或纯品。

我国现有油茶栽培面积约3.67×10⁶hm²，每年的茶籽产量在65万吨左右，约生产15万吨茶树油以及产生50万吨的茶树油粕，我国潜在的可利用茶树油粕资源十分丰富。茶树油粕又称茶饼、枯饼、茶粕，是油茶籽榨油后剩余物。目前，一少部分茶树油粕作肥料使用，长期以来也被水产养殖业用于鱼塘和虾塘的清塘消毒。但多数均弃去，利用率很低，因此资源浪费严重。

但未见直接采用茶树油粕的提取物在果蔬采后病害防控方面的研发应用报道。

发明内容

本发明的一个目的是克服现有茶树油粕应用的技术不足，提供一种茶树油粕的活性混合提取物的制备方法。采用适宜的溶剂，利用现有茶树油压榨提取过程中产生的大量茶树油粕废渣作为原料，提取获得具有对果蔬采后病原菌防治效果的活性混合物。

本发明的另一个目的是提供上述制备方法制备得到的活性混合提取物。

本发明还有一个目的是提供所述活性混合提取物的应用。特别是在作为杀菌剂和保鲜剂在果蔬保鲜和采后病害防治中的应用。

本发明的目的通过以下技术方案予以实现：

提供一种茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，是将茶树油粕粉碎磨粉后往其中加入溶剂，浸提，过滤，萃取去除滤液中多余的油脂，得到的滤液即为茶树油粕提取液，然后将茶树油粕提取液浓缩干燥得到茶树油粕活性混合提取物。

所述茶树油粕为山茶树果实种仁榨油后的废渣，也可以是晒干、阴干或烘干后的干废渣。

所述粉碎磨粉是将晒干、阴干或烘干后的茶树油粕粉碎至30～100目。

所述溶剂为水或者体积比浓度为75%的乙醇水溶液。

所述茶树油粕活性混合提取物是采用水或75%的乙醇水溶液浸提干燥粉碎后的茶树油粕细粉，得到的茶树油粕提取液；或者将茶树油粕提取液浓缩得到的浓缩提取液；或者将茶树油粕浓缩提取液干燥得到的固体活性混合提取物。

本发明基于对茶树油粕的研究分析，结合提取溶剂和萃取溶剂的筛选试验，总结大量实验分析结果，发现采用常规的其他萃取剂对提取物进行萃取，萃取部分很少，且很难分液。经过综合对比，本发明所述萃取去除滤液中多余的油脂优选采用石油醚作为萃取溶剂，进一步地，优选按照滤液：石油醚的体积比为1：1～3的比例确定石油醚的加入量，萃取时间优选为24小时，操作简便，萃取得率高。

具体地，本发明所述茶树油粕活性混合提取物的制备方法包括以下步骤：

（1）将茶树油粕干燥后磨粉过筛得茶树油粕细粉；

（2）往步骤（1）所得茶树油粕细粉中加入溶剂，浸提后过滤得滤液；

（3）往步骤（2）所得的滤液经萃取去除滤液中多余的油脂得茶树油粕提取液；

（4）将步骤（3）所得茶树油粕提取液经旋转浓缩得茶树油粕浓缩提取液；（5）将步骤（4）所得茶树油粕浓缩提取液进一步冰浴浓缩，恒温（优选

100～120℃）烘箱干燥得茶树油粕固体提取物。

步骤（1）所述过筛为过30～100目筛。

步骤（2）所述溶剂为水或75%乙醇，加入的量按照茶树油粕细粉：溶剂的重量体积比（g/ml）为1：5～7的比例确定。

步骤（2）所述浸提的时间为12～24小时，优选24小时；浸提温度为85℃～95℃，优选95℃。

步骤（3）所述油脂萃取剂为石油醚，加入量按照滤液：石油醚的体积比为1：1～3的比例确定。

步骤（4）所述旋转浓缩或干燥参照常规方法。

其中，步骤（3）、（4）、（5）所得的产物都为本发明终产物，包括采用茶树油粕提取得到的提取液、浓缩提取液或干燥得到的固体提取物。优选干燥得到的固体提取物。所述终产物具有新的应用价值，可以应用作为杀菌剂或果蔬保鲜剂。

本发明从茶树油粕中提取得到的提取物，经过长期大量的反复试验证明：茶树油废渣活性混合提取物对多种果蔬采后微生物病害的病原菌具有抑制作用，尤其是对香蕉、芒果或番木瓜等水果，对其炭疽病、柑桔青绿霉菌、荔枝霜疫霉病等水果采后病菌具有明显的离体抑菌效果，而且在活体条件下，能防治香蕉、芒果、柑桔等水果的采后病害，对果蔬的无害保鲜具有良好的作用。因此，从茶树油粕中得到的混合提取物可作为植物源抑菌剂或果蔬保鲜剂使用。

本发明的有益效果是：

（1）本发明提供了一种新的植物源杀菌剂或果蔬保鲜剂，为抗菌和蔬果保鲜技术领域提供新的技术成果。本发明克服了目前茶树油粕利用的局限性和资源浪费问题，将茶树油粕应用于水果防腐保鲜技术领域，所述水果涉及人们日常食用的多种水果，通过实验总结得出茶树油粕的混合提取物对香蕉炭疽病菌、芒果炭疽病菌、番木瓜炭疽病菌、柑橘青霉病菌、荔枝霜疫霉病菌等多种病原真菌的抑制作用。

（2）现有技术关于茶皂素及茶皂素与化学杀菌剂的合剂在几种水果保鲜上的应用，所述的茶皂素是从山茶科植物种子中提取出来，包括粗品或纯品。茶皂素的获得需要消耗山茶科植物种子，资源消耗较多；而且无论是粗品还是纯品，都需要摈弃其他绝大部分组成成分的活性功能。本发明成功利用种子榨油后产生的废渣（茶树油粕），所述活性混合提取物是利用废渣采用水或乙醇浸提浓缩后的产物。首先，本发明不消耗原始资源，利用的是废弃物茶树油粕，变废为宝，而且解决了长期以来困扰茶树产品生产厂家茶树油粕的处置问题，不仅如此，本发明还获得了意想不到的显著效果，本发明所述茶树油粕的活性混合提取物应用于果蔬防腐保鲜领域对所试采后病原真菌的抑制作用优于茶皂素提取物和茶皂素纯品，而本发明混合提取物的制备方法简单易行，成本低，不需要进一步提纯，收到了双重的有益效果。

（3）本发明采用水和乙醇水溶液作为提取溶剂成功获得有很好防腐保鲜作用的茶树油粕活性混合提取物，避免了大量有害有机化学试剂的应用对环境和操作人员造成的潜在危害，所述茶树油粕的混合提取物使用安全，符合可持续农业发展的要求。

（4）本发明基于创造性思维，提供了新的技术途径，采用适当的方法处理废弃的茶树油粕制备有益的抗菌保鲜剂，变废为宝，着实解决了长期以来茶树油加工企业处置废渣的难题，为推广茶树油的生产加工应用扫平障碍。

（5）本发明方法简单易行，原料易得且成本很低，具有优良的推广价值。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步详细说明本发明。本发明的技术方案是通过大量的实施例总结得出，但实施例中选取的水果是一些常见的代表性水果，相同或相似的实施例不能一一赘述，但本发明并不因此局限于此。

实施例1 茶树油粕提取物的制备

茶树油粕来自广东省肇庆市某茶树油生产厂家（也可以采用其他厂家榨油产生的茶树油粕，并不因此限定本发明），其他试剂均为市购常规产品。为了便于说明，本实施例采用的茶树油粕来自制备茶树油的南山茶种仁。

将茶树油粕干燥后用粉碎机粉碎磨成粉状，过100目筛，快速分离，得茶树油粕细粉；往500 g茶树油粕细粉中加入3500 mL纯净水，在85℃下过夜浸提茶树油粕细粉，过滤或离心得到滤液800 mL，滤液中加入石油醚800 mL，萃取24小时后得到茶树油粕提取液360mL，即为茶树油粕提取液；

也可以将茶树油粕提取液经旋转浓缩得到浓缩提取物180mL，即为茶树油粕浓缩提取液；

也可以将浓缩提取物于100～120℃恒温干燥后得茶树油粕固体提取物75 g，所得茶树油粕混合提取物的为褐色粉状颗粒物，可溶于水，溶解率在90%以上。所得茶树油粕固体提取物低温（1～7℃）贮存备用。

将本实施例所得茶树油粕提取液、浓缩提取物、固体提取物分别加适量水后与NYDA培养基（常规组成）混合均匀，分别制成浓度为5mL茶树油粕提取液/mL培养基、5mL茶树油粕浓缩提取液/mL培养基、5mg茶树油粕固体提取物/mL培养基。采用改进的生长速率法，将带药培养基倒入直径为9 cm的培养皿中，冷却后，在培养皿中央接种5 mm香蕉炭疽病菌（Collectotrichun musae）、番木瓜炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、柑橘指状青霉菌（Penicillium digitatum）或荔枝霜疫霉菌菌片（所述菌种实验室常规使用菌株），以纯NYDA培养基平板作为空白对照。置于28℃恒温箱中培养，测量记录菌落大小（用十字交叉法测定菌落直径），计算抑菌率。

抑菌率（%）=（对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径×100

实验结果见表1所示，从表1可知，本发明茶树油粕三种提取物都能明显抑制所述病原菌的生长，抑菌率都达到35.5%以上，以对香蕉炭疽病菌的效果最好。对同一病原菌来说，因为含有活体提取物的浓度高，固体提取物的效果最好。

Figure 2012103177517100002DEST_PATH_IMAGE001

实施例2 茶树油粕提取物的制备

茶树油粕来自广东省肇庆市某茶树油生产厂家（也可以采用其他厂家榨油产生的茶树油粕，并不因此限定本发明，茶树种类不做限定），其他试剂均为市购常规产品。将茶树油粕干燥后用粉碎机粉碎磨成粉状，过50目筛，快速分离，得茶树油粕细粉；往500 g茶树油粕细粉中加入3000 mL纯净水，在90℃下过夜浸提茶树油粕细粉。过滤或离心得到滤液450 mL，滤液中加入石油醚900mL，萃取24小时后，得到茶树油粕提取液300mL，经旋转浓缩得到浓缩提取物140mL，将浓缩提取物于100～120℃恒温干燥后得茶树油粕固体提取物58 g，所得茶树油粕固体提取物低温（1～7℃）贮存备用。

所得茶树油粕混合提取物的为褐色粉状颗粒物，可溶于水，溶解率在90%以上。

实施例3 茶树油粕提取物的制备

茶树油粕来自广东省肇庆市某茶树油生产厂家（也可以采用其他厂家榨油产生的茶树油粕，并不因此限定本发明），其他试剂均为市购常规产品。将茶树油粕干燥后用粉碎机粉碎磨成粉状，过30目筛，快速分离，得茶树油粕细粉；往500 g茶树油粕细粉中加入2500 mL纯净水，在95℃下过夜浸提茶树油粕细粉。过滤或离心得到滤液680 mL，滤液中加入石油醚1800mL，萃取24小时后，得到茶树油粕提取液340mL，经旋转浓缩得到浓缩提取物160mL，将浓缩提取物于100～120℃恒温干燥后得茶树油粕固体提取物75 g，低温（1～7℃）贮存备用。

实施例4茶树油粕提取物的制备

茶树油粕来自广东省肇庆市某茶树油生产厂家（也可以采用其他厂家榨油产生的茶树油粕，并不因此限定本发明），其他试剂均为市购常规产品。将茶树油粕干燥后用粉碎机粉碎磨成粉状，过100目筛，快速分离，得茶树油粕细粉；往5000 g细粉中加入体积比浓度为75%的乙醇水溶液35000 mL，在90℃下浸提茶树油粕细粉12小时。过滤或离心得到滤液4750 mL，滤液中加入石油醚5000 mL，萃取24小时后，得到茶树油粕提取液2700mL，经旋转浓缩得到浓缩提取物1600mL，将浓缩提取物于100～120℃恒温干燥后得茶树油粕固体提取物900 g，所得茶树油粕提取物低温（1～7℃）贮存备用。

实施例5茶树油粕提取物的制备

茶树油粕来自广东省广宁某茶树油生产厂家（也可以采用其他厂家榨油产生的茶树油粕，并不因此限定本发明），其他试剂均为市购常规产品。将茶树油粕干燥后用粉碎机粉碎磨成粉状，过50目筛，快速分离，得茶树油粕细粉；1000 g细粉加入75%乙醇6000 mL，在90℃下浸提茶树油粕细粉24小时。过滤或离心得到滤液1450 mL，滤液中加入石油醚2900 mL，萃取24小时后，得到茶树油粕提取液860mL，经旋转浓缩得到浓缩提取物330mL，将浓缩提取物于100～120℃恒温干燥后得茶树油粕固体提取物150 g，所得茶树油粕提取物低温贮存备用。

实施例6茶树油粕提取物的制备

茶树油粕来自广东省广宁某茶树油生产厂家（也可以采用其他厂家榨油产生的茶树油粕，并不因此限定本发明），其他试剂均为市购常规产品。将茶树油粕干燥后用粉碎机粉碎磨成粉状，过30目筛，快速分离，得茶树油粕细粉；5000 g细粉加入75%乙醇15000 mL，在90℃下浸提茶树油粕细粉24小时。过滤或离心得到滤液3200 mL，滤液中加入石油醚9600mL，萃取24小时后，得到茶树油粕提取液2400mL，经旋转浓缩得到浓缩提取物780mL，将浓缩提取物于100～120℃恒温干燥后得茶树油粕固体提取物340 g，所得茶树油粕提取物低温贮存备用。所得茶树油粕混合提取物为褐色粉状颗粒物，可溶于水，溶解率在90%以上。

实施例7茶树油粕不同溶剂或方法提取物对水果采后病原菌的抑制作用试验

采用改进的生长速率法，称取本发明不同溶剂的茶树油粕提取物与NYDA培养基混合均匀，分别制成浓度为0.2 mg茶树油粕固体提取物/mL培养基、0.5 mg茶树油粕固体提取物/mL培养基、1 mg茶树油粕固体提取物/mL培养基、2 mg茶树油粕固体提取物/mL培养基和5 mg茶树油粕固体提取物/mL培养基的带药培养基，将带药培养基倒入直径为9 cm的培养皿中，冷却后，在培养皿中央接种5 mm香蕉炭疽病菌（Collectotrichun musae）、番木瓜炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、柑橘指状青霉菌（Penicillium digitatum）或荔枝霜疫霉菌菌片（所述菌种均为实验室常规实验菌株），以纯NYDA培养基平板作为空白对照。置于28℃恒温箱中培养，测量记录菌落大小（用十字交叉法测定菌落直径），计算抑菌率。

实验结果见表2、表3、表4和表5所示。从表2中可以发现，本发明茶树油粕的水和乙醇提取物对香蕉炭疽病菌的生长均有很强的抑制作用，以乙醇提取物的抑菌效果最强，且水和乙醇提取物对香蕉炭疽病菌的抑菌作用显著优于纯度为98%的茶皂素。从表3中可以发现，与抑制香蕉炭疽病菌的效果相比，本发明茶树油粕提取物对番木瓜炭疽病菌的抑菌效果略有降低，但仍存在显著的抑制作用，水和乙醇提取物的抑菌效果差异不大，5.0 mg/ml的水和乙醇提取物对该病原菌的抑菌率是同浓度98%茶皂素的2倍之多。从表4中可以发现，与抑制炭疽病菌的效果相比，本发明茶树油粕提取物在5.0 mg/ml以上能明显抑制柑橘指状青霉病菌的生长，以乙醇提取物的抑菌效果最强，10.0 mg/ml的75%乙醇提取物即可完全抑制柑橘青霉病菌的生长，而98%茶皂素的最大抑菌率在50 mg/ml时才达到58.5%。表5显示对荔枝霜疫霉菌的抑菌效果最强达60%以上，略差于前述几种病原真菌，但仍优于同浓度下的纯度为98%茶皂素。

Figure 2012103177517100002DEST_PATH_IMAGE003

实施例8 本发明茶树油粕提取物对香蕉采后炭疽病的抑制效果试验

将本发明实施例1～6制备得到的茶树油粕固体提取物加水分别配成0.5 mg茶树油粕固体提取物/mL水、2.0 mg茶树油粕固体提取物/ mL水和5.0 mg茶树油粕固体提取物/mL水溶液，香蕉果实在所述溶液中浸泡2 min后晾干，用灭菌铁钉在果实侧面打3个孔（深3mm，直径2mm），然后往孔中接种10 μl 1.0×10⁶CFU/mL炭疽病菌孢子悬液。待果实自然晾干后放到塑料筐内于20℃，90%～95% RH条件下贮藏12天，统计发病率和防治效果。试验设空白对照，并以水果保鲜方面常用的施保功（Sporgon）作为商品杀菌剂对照。实验结果见表6。从表6可以看出，本发明茶树油粕水和乙醇提取物对香蕉采后炭疽病（由炭疽病菌引起）的控制均有明显效果，茶树油粕提取物浓度越高，防效越好。虽然本发明茶树油粕水和乙醇提取物对香蕉采后炭疽病防治，其最佳高浓度防效比商品杀菌剂施保功效果略差，但因为本发明茶树油粕水和乙醇提取物的制备方法简单易行，成本低，不需要进一步提纯，而且采用水和乙醇水溶液作为提取溶剂，避免了大量有害有机化学试剂的应用对环境和操作人员造成的潜在危害，所述茶树油粕的混合提取物使用安全，符合可持续农业发展的要求，不失为价格昂贵、纯化学试剂的商品杀菌剂施保功很好的替代品。

实施例9 本发明茶树油粕提取物对芒果炭疽病的控制效果试验

在华南地区，芒果的采后病害主要是由胶胞炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的炭疽病。炭疽病是目前芒果果实上最严重的病害，在芒果采后贮运及后熟期间引起果实大量腐烂，使芒果保鲜与销售企业蒙受重大损失。目前主要依靠化学杀菌剂如特克多、扑海因、苯菌灵、异菌脲、施保功等控制。将本发明实施例1～6任一例制备的固体提取物加水溶解配成1 mg/mL（1 mg提取物/mL水，下同）、5 mg/mL和10 mg/mL溶液，采收后的芒果果实（品种：粤引台农芒果）在所述溶液中浸泡5 min，待自然晾干后用灭菌铁钉在果实侧面打3个孔（深3mm，直径2mm），然后往孔中接种10 μl 1.0×10⁶CFU/mL芒果炭疽病菌孢子悬液。待果实自然晾干后放到塑料筐内于20℃，90%～95% RH条件下贮藏10天，统计发病率和防治效果。试验设空白对照，并以水果保鲜方面常用的特克多（1000 ppm）作为商品杀菌剂对照。实验结果见表7。从表7可以看出，虽然比商品化学杀菌剂特克多效果略差，但本发明茶树油粕水和酒精提取物对芒果采后炭疽病的控制均有明显效果，最大防效可达60%以上，以水提取物的效果较好，在茶树油粕水提取物的处理下，果实的发病率也显著降低。

实施例10 本发明茶树油粕提取物对柠檬指状青霉病菌的控制效果试验

将本发明实施例1～6茶树油粕固体提取物加水分别配成10 mg/mL（10 mg提取物/mL水，下同）、20 mg/mL和50 mg/mL溶液，柠檬果实在所述溶液中浸泡3 min后晾干，用灭菌铁钉在果实侧面打2个孔（深3mm，直径2mm），然后往孔中接种10 μl 1.0×10⁶CFU/mL青霉菌孢子悬液。待果实自然晾干后放到塑料筐内于20℃，90%～95% RH条件下贮藏10天，统计发病率和防治效果。试验设空白对照，并以柑橘保鲜方面常用的施保功（Sporgon）作为商品杀菌剂对照。实验结果见表8。从表8可以看出，本发明茶树油粕水和酒精提取物对柠檬的接种青霉病的控制均有一定的效果，茶树油粕水和乙醇提取物浓度在50 mg/mL时，对病斑扩展的抑制率分别是55.5%和73.5%，发病率分别降低22%和38%，以乙醇提取物的防效较好。

实施例11 本发明茶树油粕提取物对香蕉采后病害的控制效果试验

炭疽病、冠腐病和黑星病是目前香蕉果实上最严重的病害，高温高湿会加速这些病害的发生，影响产品的品质和经济价值，在香蕉采后贮运及销售期间造成严重损失。对于由病原菌引起的这些病害，在防治上采前做好蕉园清洁卫生，定期喷洒杀菌剂，及采后进行适当的防腐保鲜处理。目前采后的防腐保鲜处理主要依靠化学杀菌剂如特克多、异菌脲、抑霉唑、施保功等控制。将本发明实施例1～3茶树油粕的水固体提取物加水配成10 mg水提取物固体/mL水的溶液，采收后的香蕉果实（品种：巴西蕉）先用500 ppm乙烯利溶液浸果3～5秒钟（以催熟香蕉），待自然风干后在所述溶液中浸泡5 min，待自然晾干后放到塑料筐内于20℃，85%～95% RH条件下贮藏8天，统计病情指数和防治效果。试验设空白对照，并以香蕉果实保鲜最常用的特克多作为商品杀菌剂对照。试验结果见表9。从表9可以看出，本发明茶树油粕的水提取物对香蕉果实采后病害（主要由胶胞炭疽菌引起）有明显效果，但比商品杀菌剂特克多效果略差。

实施例12 本发明茶树油粕提取物对沙糖橘采后病害的抑制效果试验

砂糖橘采后易发生的病害主要是青绿霉病、酸腐病等，90%以上的砂糖橘果实腐烂是由于这些病的爆发引起在砂糖橘采后贮运期间造成严重损失。目前主要依靠如咪鲜胺、施保克、抑霉唑、百可得等化学杀菌剂在采后进行砂糖橘果实浸泡处理以控制这些采后病害的发生。但化学杀菌剂的处理容易造成农药残留超标，另外，长期使用也容易造成病原菌的抗药性。将本发明实施例4～6茶树油粕的乙醇提取物加水配成1000 mg固体提取物/mL水的溶液，采收后的砂糖橘果实在所述溶液中浸泡5 min，待自然晾干后放到塑料筐内于20℃，85%～95% RH条件下贮藏40天，统计病情指数和防治效果。试验设水处理对照。试验结果见表10。从表10可以看出，本发明茶树油粕的提取物对砂糖橘果实采后病害（主要由青绿霉菌引起）有明显效果。

Claims

1.一种茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于是往粉碎茶树油粕得到的细粉中加入溶剂浸提，过滤，萃取去除滤液中多余的油脂，得到的滤液即为茶树油粕活性提取液；或将茶树油粕提取液浓缩得到浓缩活性提取液；或将浓缩提取液干燥得到茶树油粕活性混合提取物；

所述茶树油粕的活性混合提取物包括茶树油粕活性提取液、茶树油粕浓缩活性提取液或茶树油粕活性混合固体提取物；

所述溶剂为水或者体积比浓度为75%的乙醇水溶液。

2.根据权利要求1所述茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于所述溶剂加入的量按照茶树油粕细粉：溶剂为1 g：5～7 ml的比例确定。

3.根据权利要求1所述茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于所述浸提的时间为12～24小时，浸提温度为85℃～95℃。

4.根据权利要求1所述茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于所述细粉粒度为30～100目。

5.根据权利要求1所述茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于所述萃取去除滤液中多余的油脂采用石油醚作为萃取溶剂。

6.根据权利要求5所述茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于所述石油醚的加入量按照滤液：石油醚的体积比为1：1～3的比例确定。

7.根据权利要求1、2、3、4、5或6所述茶树油粕的活性混合提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将茶树油粕干燥后磨粉过筛得茶树油粕细粉；

（3）将步骤（2）所得的滤液中加入萃取剂，萃取去除滤液中多余的油脂得茶树油粕提取液；

（4）将步骤（3）所得茶树油粕提取液经旋转浓缩得茶树油粕浓缩提取液；

（5）将步骤（4）所得茶树油粕浓缩提取液浓缩干燥得茶树油粕固体提取

物。

8.权利要求1、2、3、4、5或6所述制备方法制备得到的茶树油粕的活性混合提取物。

9.权利要求8所述茶树油粕的活性混合提取物作为植物源抑菌剂或果蔬保鲜剂的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于在对香蕉、芒果或番木瓜的炭疽病、柑桔青绿霉菌、荔枝霜疫霉病抑菌防治方面的应用。