CN102870780A

CN102870780A - 一种诱导黄瓜抗根结线虫的制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN102870780A
Application number: CN2012103581623A
Authority: CN
Inventors: 史凤玉; 朱英波
Original assignee: Hebei Normal University of Science and Technology
Current assignee: Hebei Normal University of Science and Technology
Priority date: 2012-09-25
Filing date: 2012-09-25
Publication date: 2013-01-16

Abstract

一种诱导黄瓜抗根结线虫的制剂，其特征是由壳寡糖溶液和水杨酸钠配制而成，其中壳寡糖和水杨酸钠的重量比例为10～100：1～10。制备时以壳聚糖、酵母提取物、NH₄Cl、葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、MnSO₄、水为培养基，发酵培养能生产壳聚糖酶的真菌，制备含有壳聚糖酶的发酵液，用此发酵液酶解壳聚糖获得壳寡糖溶液，再与水杨酸钠配制而成。本发明的制剂用于防治黄瓜根结线虫，防治效果可达50%-70%，同时还能促进黄瓜根的生长，对土壤的生态修复具有显著的作用。

Description

一种诱导黄瓜抗根结线虫的制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种诱导黄瓜抗根结线虫的制剂及其制备方法。

背景技术

由根结线虫（Meoidogyne spp.）引起的黄瓜根结线虫病是一种世界性病害，病害发生时，一般每年造成10%-15%的经济损失，发病严重时经济损失可达30%-40%，甚至绝产。近年来大棚黄瓜的迅猛发展，重茬种植现象普遍，使得土壤中根结线虫日益累积，为害逐年加重。对于黄瓜根结线虫的防治，目前主要依赖于化学杀虫剂，但其只能短期内控制线虫的数量，同时还存在污染环境、农产品残留超标和抗药性等弊端。因此，急需开发安全、有效的无公害生物农药来控制黄瓜根结线虫的危害，同时大幅度降低化学杀虫剂的使用量。

壳聚糖是一种由几丁质通过脱乙酰化而生产的半合成衍生物。近年来发现壳聚糖的水解产物-壳寡糖（特别是聚合度在20以下的部分）具有诱导植物产生免疫力、防治病虫害、促进生长和增产的效果，已引起国内外科技界的高度重视，认为其具有极高的研究价值和应用价值。但现有的壳寡糖对植物寄生线虫病的防治效果与化学杀虫剂相比仍有较大差距，存在诱导强度不高的问题，从而限制了壳寡糖在黄瓜根结线虫病防治上的应用。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种可在不使用化学杀虫剂前提下能有效地控制黄瓜根结线虫病的诱抗剂，以能够诱导黄瓜产生对根结线虫病抗性的壳寡糖和水杨酸钠为激发子，进行合理的混配，互为补充，能最大限度地提高壳寡糖的诱导免疫活性、克服单用的不足，可使黄瓜获得对根结线虫病的持久抗性，解决了黄瓜根结线虫无公害防治的问题，同时不会造成对土壤环境的污染。

本发明的上述目的可通过以下技术方案得以实现。

本发明的一种诱导黄瓜抗根结线虫的制剂，它是由壳寡糖溶液和水杨酸钠配制而成，其中壳寡糖和水杨酸钠的重量比例为：10～100：1～10。

本发明制剂的制备方法如下：

1、壳聚糖酶发酵液的制备：以下列成分及按重量百分比配制液体培养基：壳聚糖：0.5%-2%、酵母提取物：0.01-0.1%、NH₄Cl： 0.05-0.2%、葡萄糖：0.05-0.2%、KH₂PO₄：0.05-0.2%、MgSO₄·7H₂O ：0.05-0.2%、MnSO₄：0.05-0.2%、其余为水，pH自然，121℃灭菌30分钟，按3%-10%接种量接种产壳聚糖酶的拟青霉属真菌（Paecilomyces sp.），在28℃条件下培养2天，板框过滤发酵液，滤液为壳聚糖酶发酵液；

2、壳寡糖溶液的制备：以1%-3%的冰乙酸溶液为溶剂，配制3%-8%的壳聚糖溶液100L，搅拌下加入壳聚糖酶发酵液1-4L，在40℃-60℃下搅拌反应2-5h，板框过滤得壳寡糖溶液，其中壳寡糖的平均分子量为2000-10000；

3、取步骤（2）壳寡糖溶液0.6-0.8L，与浓度为0.25%的水杨酸钠溶液0.2-0.4L搅拌混合均匀，得到诱导黄瓜抗根结线虫的制剂。

本发明的制剂为天然来源的，对动物和农作物无毒性的分子量范围为2000-10000的壳寡糖和无植物毒性的水杨酸钠的农用组合物，具有促进黄瓜根的生长，生态修复土壤，防治黄瓜根结线虫作用。

具体实施方式

下面将通过实施例对本发明作进一步地说明。

其制备方法如下：

1、壳聚糖酶发酵液的制备：以下列成分及按重量百分比配制液体培养基：壳聚糖：15g、酵母提取物：0.5g、NH₄Cl：1.5g、葡萄糖：1.0g、KH₂PO₄：1.0g、MgSO₄·7H₂O ：0.5g、MnSO₄：0.5g、水：980g，pH自然，121℃灭菌30分钟，按3%-10%接种量接种产壳聚糖酶的拟青霉属真菌（Paecilomyces sp.）,在28℃条件下培养2天，板框过滤发酵液，滤液为壳聚糖酶发酵液；

2 、壳寡糖溶液的制备：以1.5%的冰乙酸溶液为溶剂，配制浓度为4%的壳聚糖溶液100L，搅拌下加入壳聚糖酶发酵液2L，50℃下搅拌反应3h,板框过滤得壳寡糖溶液，壳寡糖溶液中含有少量NH₄Cl、KH₂PO₄、MgSO₄和MnSO₄物质，这些物质对植物生长无害而有益，这些物质不需要分离；

3、诱导黄瓜抗根结线虫的制剂的制备：取上述壳寡糖溶液0.6L，与浓度为0.25%的水杨酸钠溶液0.4L搅拌混合均匀，即得到诱导黄瓜抗根结线虫的制剂。

为了说明本发明的效果，并对黄瓜根结线虫的诱抗效果进行了对照检测：

选择河北科技师范学院生命科技学院农场根结线虫发病严重的蔬菜温室大棚，种植黄瓜品种为大叶三（辽宁省新民市金明蔬菜种子站生产）。实验采用随机区组试验，共设三个区组，每个区组设4个小区（处理），每个小区的面积为20平方米。在黄瓜移栽7天后，将供试药剂采用灌根处理的方法，试验期间采用常规方法进行黄瓜管理。施药后60天，挖出黄瓜的根，统计各处理各重复中各级（0-10级）病株数目，计算病情指数及防治效果，结果见下表。结果表明，使用本发明的制剂后对黄瓜上的根结线虫有一定程度的诱抗效果，与空白对照相比能够显著降低根结线虫的危害，防治效果与目前生产上常规药剂阿维菌素相当。

根结线虫分级调查指标：0级代表没有根结；1级代表1-10%的根上有根结；2级代表11-20%的根上有根结；3级代表21-30%的根上有根结；4级代表31-40%的根上有根结；5级代表41-50%的根上有根结；6级代表51-60%的根上有根结；7级代表61-80%的根上有根结；8级代表71-80%的根上有根结；9级代表81-90%的根上有根结；10级代表91-100%的根上有根结。

病情指数=100×∑（各级病株数×各级代表值）∕调查总株数×最高代表值；

诱抗效果=100%×（空白对照的病情指数-处理后的病情指数）∕空白对照的病情指数；

各处理及药剂如下：

处理1：不施任何药剂（空白对照）

处理2：本实施例的制剂1：500倍稀释，每株用200ml；

处理3：本实施例的制剂1：1000倍稀释，每株用200ml；

处理4：1.8%阿维菌素乳油1：1000倍稀释，每株用200ml；

处理	病情指数	防治效果（%）
			处理1（空白对照）	92.7±3.1	--
处理2（本实施例制剂1：500）	23.4±4.3	74.8
			处理3（本实施例制剂1：1000）	32.3±2.6	65.2
处理4（对照药剂：阿维菌素）	26.0±4.8	71.9

注表中数值为各重复的平均值。

Claims

1.一种诱导黄瓜抗根结线虫的制剂，其特征是由壳寡糖溶液和水杨酸钠配制而成，其中壳寡糖和水杨酸钠的重量比例为：10～100：1～10。

2.根据权利要求1所述的诱导黄瓜抗根结线虫的制剂，其特征是，其中，水杨酸钠浓度为0.05%～0.1%。

3.一种用于权利要求1的制备方法，其制备方法是：

（1）壳聚糖酶发酵液的制备：以下列成分及按重量百分比配制液体培养基：壳聚糖：0.5%-2%、酵母提取物：0.01-0.1%、NH₄Cl： 0.05-0.2%、葡萄糖：0.05-0.2%、KH₂PO₄：0.05-0.2%、MgSO₄·7H₂O ：0.05-0.2%、MnSO₄：0.05-0.2%、其余为水，pH自然，121℃灭菌30分钟，按3%-10%接种量接种产壳聚糖酶的拟青霉属真菌，在28℃条件下培养2天，板框过滤发酵液，滤液为壳聚糖酶发酵液；

（2）壳寡糖溶液的制备：以1%-3%的冰乙酸溶液为溶剂，配制3%-8%的壳聚糖溶液100L，搅拌下加入壳聚糖酶发酵液1-4L，在40℃-60℃下搅拌反应2-5h，板框过滤得壳寡糖溶液；

（3）取步骤（2）壳寡糖溶液0.6-0.8L，与浓度为0.25%的水杨酸钠溶液0.2-0.4L搅拌混合均匀，得到诱导黄瓜抗根结线虫的制剂。