CN102846734A - 广升麻提取物在制备治疗心血管疾病药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及了广升麻提取物，该药物在预防和治疗心血管疾病方面具有良好的用途，包括影响大鼠急性血瘀症模型血液流变，抑制血小板聚集，抗血栓等作用。

Description

广升麻提取物在制备治疗心血管疾病药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种广升麻提取物在医药中的新用途，具体地说，是涉及广升麻提取物在制备治疗心血管疾病药物中的新应用。

背景技术

心血管病每年夺走1200万人的生命，接近世界人口总死亡的1/4，成为人类健康的头号大敌，在今天的世界上，心血管疾病比其他任何疾病杀死更多的人，并使千百万人致残。尽管近30年来心血管病死亡率除东欧各国外的大多数国家都有不同程度的下降，但其仍是多数国家45岁以上男性第一位的死亡原因，在女性则是仅次于肿瘤的第二位死因，严重影响着人类的期望寿命和生存质量。

中国发明专利200410014710.6公开了广升麻提取物、其制备方法及其用途。具体的公开了广升麻提取物、其制备方法、含其的药物组合物及其医药用途。用途方面主要指广升麻提取物可用于治疗脑血管疾病，特别是治疗脑缺血或脑缺氧。

到目前为止，尚未有广升麻提取物在制备心血管药物方面的应用报道，而通常患有脑血管疾病的患者或多或少的都有一些心血管方面得疾病。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供了广升麻提取物(药物制备方法见中国专利200410014710.6)在医药中的新用途，具体地说，是在制备治疗心血管疾病药物中的应用。

广升麻提取物应用于制备治疗心肌梗塞症药物。

广升麻提取物应用于制备治疗急性心肌缺血的药物。

药理试验中，发明人在对各种模型的筛选中，意外地发现广升麻提取物能够影响大鼠急性血瘀症模型血液流变，抑制血小板聚集，抗血栓等，体内体外筛选结果表明该药物具有治疗心血管疾病的作用，因此广升麻提取物为那些既患有脑血管疾病又患有心血管疾病的病人提供了便利，减少了药品服用量，降低了不良反应发生率。

具体实施例

实施例1

广升麻提取物对大鼠急性血瘀症模型血液流变学的影响

1.实验操作

取SD雄性大鼠60只，体重350～450g，随机分为6组，即对照组、模型组(以上两组给予等容积的生理盐水)、复方丹参组(8g/kg复方丹参片)、广升麻提取物低(0.375mg/kg)、中(0.75mg/kg)、高(1.5mg/kg)3个剂量组，给药容积为10ml/kg，连续灌胃给药三天，于末次给药8小时后，除正常对照组外，各组动物皮下注射盐酸肾上腺素注射液0.8ml/kg共2次，间隔4小时，在第二次注射肾上腺素之前，将大鼠置于冰水中浸泡5分钟，造成血瘀症模型。禁食24小时后，于手术前8小时给药1次，以10％水合氯醛麻醉(300mg/kg，ip)，仰位固定，颈动脉插管放血，用3.8％的枸椽酸钠或肝素钠生理盐水溶液(500u/ml)按1∶9抗凝，检测血液流变学的各项指标。

2.实验检测指标

对大鼠血小板聚集率的影响：将3.8％的枸椽酸钠抗凝的血液以800r/min离心10分钟，取富血小板血浆(PRP)，剩余部分以3000r/min离心，取贫血小板血浆(PPP)，利用LG-PABER型血小板聚集及凝血因子分析仪记录最大聚集率并按下列公式计算抑制率。

(2)血液粘度检测

①全血粘度：将肝素抗凝的血液采用LG-R-80系列血液粘度仪测定。

②血浆粘度：全血测试完毕后，剩余血样以3000r/mi n离心，进行血浆粘度的测试。

③红细胞变形能力、红细胞聚集能力检测：将肝素抗凝的血液采用LG-R-190型红细胞变形/聚集能力测定仪进行测定。

(3)凝血系统的检测：

将3.8％的枸椽酸钠抗凝的血液以3000r/min离心10分钟，分离贫血小板血浆，采用LG-PABER型血小板聚集及凝血因子分析仪测定活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原含量(FIB)。

3.实验结果

实验表明：广升麻提取物高剂量组可以显著地降低血瘀大鼠血小板聚集率，延长PT、TT时间，降低FIB含量，增强红细胞变形能力，降低红细胞聚集能力，在中、低切降低全血粘度，降低血浆粘度，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05、P＜0.01)；广升麻提取物中剂量组可改善红细胞变形能力，降低FIB含量，在低

表1广升麻提取物对血瘀症模型大鼠血小板聚集率的影响(n＝10，

)

注：与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表2广升麻提取物对血瘀症模型大鼠红细胞变形及聚集能力的影响(n＝10，

)

注：与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01。

切降低全血粘度，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)。结果见表1、2、3、4。

表3广升麻提取物对血瘀症模型大鼠APTT、PT、FIB及TT的影响(n＝10，

)

注：与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表4广升麻提取物对血瘀症模型大鼠血液粘度的影响(n＝10，

)

注：与模型组比较：^*P＜0.05，^**P＜0.01。

实施例2

广升麻提取物对家兔血小板聚集的影响

1.实验操作

取家兔50只，随机分为五组，每组10只，第一组家兔灌胃等体积的生理盐水，第二组灌胃舒胸颗粒450mg/kg，第三四五组家兔灌胃广升麻提取物0.2、0.4、0.8mg/kg，连续灌胃14天，末次给药后40分钟，取兔血与3.8％枸橼酸钠以9∶1比例混合后，以500rpm离心1分钟，吸取上层米色血浆，得到富血小板血浆(PRP)，

再将剩余血液以3000rpm离心10分钟，吸取上清液，得贫血小板血浆(PPP)，取250uLPPP和PRP分别加入到两只测试管中，再加10ul生理盐水，作为空白管和受试药管，将两支试管放到测试孔中预热3分钟，然后将PPP管放到测试孔中，按下“Z”键，取出后，再将PRP管置测试孔中，加入搅拌棒，按下“STAR”键，听到搅拌声后，按下“E”键，待试验报告框图打印完毕，加入ADP溶液50uL(10ug/50uL)按下“START”键5分钟后即打印出血小板聚集曲线。

2.实验结果

结果如表5所示，广升麻提取物高、中剂量和阳性对照药舒胸颗粒对血小板聚集都有非常好的抑制作用。

表5广升麻提取物对家兔血小板聚集的影响

注：与空白对照对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01

实施例3

广升麻提取物对家兔体外血栓的影响

1.实验操作

取家兔30只，随机分为五组，每组6只。第一组家兔灌胃等体积的生理盐水；第二组家兔灌胃舒胸颗粒450mg/kg；第三四五组家兔灌胃广升麻提取物0.2、0.4、0.8mg/kg，连续灌胃14天，末次给药后40分钟，将家兔用乌来糖1g/kg耳静脉注射麻醉后，仰位固定于家兔解剖台上，剪去颈部前方的毛，消毒后手术

分离颈总动脉约2.5cm，近心端用动脉夹夹闭，将一根带有绣花线的缝衣针沿颈总动脉穿入血管内约2cm以上，打开动脉夹，使血液在血管内自由流动，4小时后，处死动物，小心剪下血管，仔细剖开血管，取出带有血栓的绣花线，扭力天平上称血栓的湿重。

2.实验结果

结果如表6所示，广升麻提取物高、中剂量和阳性对照药舒胸颗粒具有明显的抑制家兔体外血栓形成的作用。

表6广升麻提取物对家兔体外血栓的影响

注：与空白对照对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01

实施例4

广升麻提取物对麻醉犬实验性心肌梗塞的保护作用

1.实验操作

健康杂种犬30只，体重9～15kg，雄雌兼备，在校实验动物中心驯养，经检疫及驱虫后，用于该项实验。将犬随机分为6组，每组5只，给药剂量按公斤体重转换公式Db＝Da×(Kb/Ka)×(Wa/Wb)1/3计算而得，根据实验结果，选取了高、中、低三个剂量组。(1)模型组：等容积生理盐水；(2)消心痛组：2mg/kg；(3)复方丹参滴丸组：60mg/kg；(4)广升麻提取物低剂量组：0.1mg/kg；(5)广升麻提取物中剂量组：0.2mg/kg；(6)广升麻提取物高剂量组：0.4mg/kg。

参照相关文献报告的方法进行实验。动物称重后以3％戊巴比妥钠30mg/kg静脉麻醉，分离气管并插入气管插管，接SC-M5型麻醉呼吸机，待开胸后行机械通气，呼吸频率16～18次/分，潮气量350～550mL。沿胸骨左缘第4肋间开胸，暴露心脏，剪开心包并作心包吊床。在左冠状动脉前降支第二至第三分支间游离冠状动脉，并在其下穿二根丝线，备用于两步结扎。采用Harris两步结扎法：首次结扎前2min，从股动脉静注利多卡因5mg/kg预防心律失常。在结扎时将一段直径1mm的钢丝插入第一松结内，将钢丝与冠状动脉一起结扎，而后抽出钢丝，30min后完全结扎第二结。完全结扎时灌胃给药，给药体积为2mL/kg，阴性对照组给同体积生理盐水。冠脉结扎前及结扎3h后各取冠状窦静脉血及股动脉动脉血3mL测血液生化学指标。取血200uL直接注入预冷的内含0.4mLTris-HCl缓冲液中，使总体积为3mL，摇匀立刻在沸水中煮沸5min，3000rpm离心5min，放入冰浴，取上清20uL于小玻管中，放入FG J-91发光光度计暗室，注入0.4mL荧光素-荧光素酶缓冲液，立刻记录发光强度，取3次平均值，标准曲线制备参照有关说明书。血清肌酸激酶(CK)、游离脂肪酸(FFA)及血乳酸测定使用RANDOX公司试剂盒。

2.给药途径及检测指标

给药途经：灌胃给药；观察指标：血清FFA、CK、血乳酸及全血ATP的改变。用方差分析检验差异的显著性。

3.结果

冠状动脉结扎后各组血清CK、FFA及乳酸均升高。其中，广升麻提取物0.2～0.8mg/kg及阳性对照药消心痛、丹参滴丸均能不同程度地降低血清CK、FFA、乳酸的升高程度，其中广升麻提取物中、高剂量组(0.2、0.4mg/kg)效果显著，具体实验结果见表5，表6。冠状动脉结扎后各组全血ATP含量均降低，广升麻提取物中、高剂量组(0.4、0.8mg/kg)能显著减缓动脉血及冠状窦静脉血ATP的降低程度(P＜0.01)，阳性对照药消心痛可减缓冠状窦静脉血的ATP降低程度(P＜0.05)，丹参滴丸可显著减缓冠状窦静脉血和动脉血ATP降低程度(P＜0.01)，实验结果见表7、8、9。

实施例5

广升麻提取物对脑垂体后叶素诱发大鼠心肌缺血的影响

1.实验操作

取经筛选合格的大鼠50只(去除T波，S-T段有异常改变者和心律失常者)，随机分别分成五组，每组10只，第一组大鼠经口灌胃等体积的生理盐水；第二组大鼠灌胃复方丹参8g/kg；第三四五组大鼠灌胃广升麻提取物0.375、0.75、1.5mg/kg，连续灌胃14天，末次给药后40分钟，腹腔注射1.5％的戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉，仰位固定于解剖台上，大鼠四肢及胸部安装心电图针状电极，标定电压为1mV/cm，低速50mm/秒，描记V₃正常心电图，然后尾静脉注射脑垂体后叶素0.6U/kg，立即描记V₃心电图，1分钟内每15秒记录心电图一次，2分钟内每30秒描记心电图一次，2～5分钟内每1分钟描记心电图一次，即(15秒，30秒，45秒，60秒，1分30秒，2分，3分，4分，5分钟的心电图)，在心电图上测量并比较各组动物注射垂体后叶素后T波及S-T段的缺血性变化。

2.实验结果

结果表明，广升麻提取物1.5mg/kg能够抑制垂体后叶素诱导的大鼠在给药后60s，90s，120s和300sST段的降低；广升麻提取物0.375mg/kg能够抑制垂体后叶素诱导的大鼠在给药后60s，90s，180sST段的降低，复方丹参滴丸8g/kg对给与垂体后叶素后60sST段的降低有抑制作用，表明广升麻提取物对冠状动脉狭窄造成的心肌缺血具有保护作用。

实施例6

广升麻提取物对异丙肾上腺素诱发大鼠心肌缺血的影响

1.实验操作

取正常大鼠50只(去除T波，S-T段有异常改变者和心律失常者)，随机分为六组，每组10只。第一组大鼠经口灌胃等体积的生理盐水；第二组大鼠灌胃复方丹参8g/kg；第三四五组大鼠灌胃广升麻提取物0.375、0.75、1.5mg/kg，连续灌胃14天，末次给药后40分钟。腹腔注射1.％5戊巴比妥钠(30mg/k妇麻醉，仰位固定在解剖台上，四肢插入针状电极，测定正常心电图，然后按6mg/kg的剂量皮下注射异丙肾上腺素，连续注射两天，第一次和第二次给异丙肾上腺素后30分钟内每隔5分钟记录心电图(II，aVF，V₃)一次。

2.实验结果

实验结果表明，广升麻提取物1.5mg/g能够抑制第一天给予异丙肾上腺素后10，15min大鼠标II导联心电图T波的抬高；广升麻提取物0.75mg/kg能够抑制第一天给予异丙肾上腺素后5min。大鼠标II导联心电图ST段的降低；能够抑制第二天给予异丙肾上腺素后5，30min大鼠标II导联心电图TS段的降低和第三天ST段的降低。广升麻提取物1.5mg/kg能够抑制第一天给予异丙肾上腺素后10，15，30min大鼠标VaF导联心电图T波的抬高，且能够抑制第一天给予异丙肾上腺素后5min大鼠标VaF导联心电图ST段的降低；0.75mg/kg能够抑制第一天和第二天给予异丙肾上腺素后5，10min大鼠标VaF导联心电图ST段的降低。广升麻提取物0.75mg/kg能够抑制第二天给予异丙肾上腺素后30min大鼠V3导联心电图T波的降低；广升麻提取物0.375mg/kg能够抑制第一天给予异丙肾上腺素后5，10min大鼠V3导联心电图T波的抬高。广升麻提取物1.5mg/kg能够抑制第二天给予异丙肾上腺素后15min和第三天大鼠V3导联心电图ST段降低；0.75mg/kg能够抑制第一天给予异丙肾上腺素后10，15min，第二天给予异丙肾上腺素后5，10，15，30min大鼠V3导联心电图ST段的降低；0.375mg/kg能够抑制第二天给予异丙肾上腺素后10，15min大鼠标V3导联心电图ST段的降低；复方丹参能够抑制第二天给予异丙肾上腺素后10，15min大鼠V3导联心电图ST段的降低。广升麻提取物0.75mg/kg能够抑制异丙肾上腺素诱导的大鼠心率的加快。

结果表明，广升麻提取物对异丙肾上腺素诱导的β受体兴奋，心肌耗氧量增加而导致的大鼠心电图的改变具有保护作用。

Claims (3)

1.广升麻提取物在制备治疗心血管疾病药物中的应用。

2.如权利要求1所述的广升麻提取物在制备治疗心血管疾病药物中的应用，其特征在于所述的广升麻提取物应用于制备治疗心肌梗塞症药物。

3.如权利要求1所述的广升麻提取物在制备治疗心血管疾病药物中的应用，其特征在于所述的广升麻提取物应用于制备治疗急性心肌缺血的药物。