CN102813208B - 预防肺癌的饮食补充剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种预防肺癌的饮食补充剂及其制备方法。它包括各组分的重量份数比为:去核干大枣肉4-6份,茶多酚0.9-1.1份,咖啡因0.008-0.016份,牛磺酸0.01-0.02份。本发明具有以下优点:发挥复方的优势,达到预防肺癌的突出效果:所依据的哺乳动物实验以乌来糖诱发小鼠肺癌作为实验模型。这些实验证明,将本发明的饮食补充剂应用于接受过乌来糖腹腔注射而处于肺癌潜伏期的模型小鼠,不但使其个体平均发生的肺肿瘤数减少七成,个体平均肺肿瘤体积减小近八成,而且使肺肿瘤发生率下降近三成。本发明的补充剂在通常摄入的剂量范围内它们没有任何毒副作用,且成本低、制备工艺简便易行。
Description
技术领域
本发明涉及一种预防肺癌的饮食补充剂及其制备方法。
背景技术
在全球范围,肺癌的发病率和死亡率均居癌症之首。预防是抗癌的首选,但随着工业化的发展,人们很难避免对致癌和促癌物的接触和摄入。因此,近二、三十年来,应用饮食补充剂增强机体预防肺癌能力一直是研究的热门。但目前尚未有较为有效的预防肺癌的饮食补充剂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种预防肺癌的饮食补充剂及其制备方法,所述饮食补充剂由天然的食物或其所含成分构成,能够较为有效地预防肺癌,且成本低廉,加工制作简便易行。
本发明的内容由以下部分构成:
(一)一种预防肺癌的饮食补充剂,其特征在于:它包括大枣肉、茶多酚、咖啡因及牛磺酸,各组分的重量份数比为:去核干大枣肉(大枣俗称红枣,学名Fructus Jujubae)4-6份,茶多酚0.9-1.1份,咖啡因0.008-0.016份,牛磺酸0.01-0.02份。
(二)上述预防肺癌的饮食补充剂的制备方法,其特征在于,分三种剂型,按照下述步骤制备:
(1)基本型: 将 0.9–1.1份茶多酚(其中表没食子儿茶酚没食子酸,即EGCG,含量占40%-60% )和0.008 - 0.016份咖啡因、0.01 - 0.02份牛磺酸均匀混合。为便利混匀,枣肉可预先制成干粉,方法之一是枣肉充分水煮后将枣汤和枣肉渣分别在60-70℃的温度下(不致烤焦碳化)蒸去水分后磨成粉状再行混合。上述各组份以干粉或结晶状态均匀混合即构成本剂。
(2)低糖型:在干大枣肉预加工成干粉的过程中,用葡萄糖氧化酶去除其所含的葡萄糖,其余同基本型。
(3)精制型:干大枣肉水煮后先去除不溶性纤维和枣皮渣,其余步骤同基本型。
较之现有技术而言,本发明具有以下优点:
发挥复方的优势,达到预防肺癌的突出效果:所依据的哺乳动物实验以乌来糖(urethane)诱发小鼠肺癌作为实验模型。这些实验证明,将本发明的饮食补充剂应用于接受过乌来糖腹腔注射而处于肺癌潜伏期的模型小鼠,不但使其个体平均发生的肺肿瘤数减少七成,个体平均肺肿瘤体积减小近八成,而且使肺肿瘤发生率(发生肺肿瘤的小鼠所占的百分比)下降近三成。
本发明的预防肺癌的饮食补充剂的配方成分,在通常摄入的剂量范围内它们没有任何毒副作用,且成本低、制备工艺简便易行。
根据动物实验的结果和小鼠与人体之间药物等效剂量的药理学换算系数,推荐试应用于人类的较佳剂量为:每日服用本发明配制好的饮食补充剂60-65克,可分次服用,服用方法不拘,可温水冲服或送服,亦可添加在食物中。每周至少服用5天。尽可能持续服用,以便取得减少患肺癌,特别是重度肺癌风险的预期效果。
附图说明
图1是本发明的动物实验乌来糖实验组小鼠代表性的肺肿瘤病理切片. 其中A图为63倍,B图是200倍。
具体实施方式
以下结合具体实施例和实验对本发明内容进行详细说明:
一. 饮食补充剂及其制备方法的实施例组
实施例1(基本型)
取干大枣肉5份,茶多酚1份,咖啡因0.012份,牛磺酸0.02份。
按照下述步骤制备:
(1)将干大枣肉加相当于其重量30倍量的水煮沸1小时,至剩余水量(枣汤)为原加入水量的三分之二(即水量蒸发掉三分之一),得到所要的枣汤,随后将煮好的枣肉渣捞出并将其所携带的汤汁沥入枣汤。将枣汤和枣肉渣分别置70℃左右的温度下烘干后磨成干粉;
(2)将步骤(1)制备的大枣肉干粉与茶多酚、咖啡因和牛磺酸按上述比例均匀混合。实施例2(低糖型)
(1)在干大枣肉中加入30倍于干大枣肉重量的水,煮沸1小时,至剩余水量(枣汤)为原加入水量的三分之二(即水量蒸发掉三分之一),并凉至30℃左右时,在枣汤中加入1U/升的葡萄糖氧化酶和0.002%增效剂(均指在枣汤中的最终浓度),搅匀,避光继续保温3-8小时。
(2)其余方法和步骤均同基本型。
实施例3(精制型)
(1)在干大枣肉中加入30倍于干大枣肉重量的水,煮沸1小时,至剩余水量(枣汤)为原加入水量的三分之二(即水量蒸发掉三分之一),将枣肉渣捞起,置枣汤上沥下所夹带汤汁后,在沥干的枣肉渣中加入10倍于枣肉重量的水量,将枣肉捣磨至稀糊状,与枣汤分别经过滤和/或离心除去沉淀物而后合并。
(2)其余方法和步骤同基本型。
本发明所述的干大枣肉指的是去核后的风干或晒干的红枣(Fructus Jugubae)肉。茶多酚和咖啡因通常为粉状固体,牛磺酸通常为固体结晶。
二.饮食补充剂应用于动物的实验方法、实验数据及实验结论
1. 材料与方法
1.1 实验动物 3周龄离乳雄性昆明小鼠购自中科院上海实验动物中心或福建医大实验动物中心,经一周检疫观察后移入饲养室。室内温度(23±3)℃,湿度50%-60%,光暗周期各12小时。据李寿祺等人的研究,昆明小鼠基本上可代替国外常用的A/J小鼠用于诱发的肺癌实验(参见李寿祺、肖邦良、董奇男等,小鼠肺肿瘤诱发试验的实验条件.中国药理与毒理学杂志,1993,7(1):68-72.)
1.2 仪器设备 主要有Leitz Orthoplan 正置荧光显微镜(德国Ernest Leitz公司);MP3.3型数字显微相机(加拿大Q Imagine公司);IPE6.0图像分析软件(美国Media Cybernetics公司)等。
1.3 试剂及天然物 牛磺酸购自Sigma公司。乌来糖为国产化学纯,其余试剂均为分析纯。大枣(宁夏银川市永福元公司),用前去核;绿茶提取物(茶多酚)为杭州禾田生物技术有限公司提供,茶多酚含量为98-99%,其中表没食子儿茶酚没食子酸,即EGCG, 含量占50%,表儿茶酚没食子酸,即ECG,含量占13-17%;表没食子儿茶酚,即EGC,含量占11-13%;表儿茶酚,即EC,含量占4-5% 。咖啡因含量为0.86-1.37%。
1.4 小鼠的饲养 采取分笼饲养,一般每笼5只,自由进食实验小鼠标准颗粒饲料,自由饮用自来水。
1.5 肺肿瘤的诱发 4周龄小鼠,体重18-22克,一次性腹腔注射1㎎/g体重乌来糖(浓度为10%)以诱发肺肿瘤。正常对照小鼠注射同体积的生理盐水。
1.6 饮食补充剂的喂饲
按本发明的饮食补充剂配方配制1%茶多酚+0.012%咖啡因+5%大枣+0.02%(或0.5%)牛磺酸复方水溶液。 该溶液每日新鲜制备。具体方法为:按上述浓度及每只小鼠平均10毫升的预期需要量备好配方各组分,以干大枣肉在自来水中煮沸1小时所得的5%枣汤溶解茶多酚(干粉)、咖啡因(干粉)和牛磺酸(结晶),放置凉至室温后完全代替自来水供指定的实验组小鼠自由饮用。大枣煮后的枣肉渣亦留下放回该实验组小鼠的笼中与常规的标准颗粒饲料一起供这些小鼠自由食用。
1.9 肺肿瘤检查 存活的小鼠于22周龄时处死,作肺肿瘤检查。每只取全肺,逐叶记录出现在肺表面的肿瘤结节数并测量其三维直径后,将这些结节连同周边少量组织一起剪下,置含4%多聚甲醛的磷酸缓冲液中固定,余下的组织放入0.5M的KOH溶液中透明1周,在20倍体视显微镜下检查肺肿瘤结节,其数量并入原先的记录。固定后的标本经石蜡包埋切片(5μm),HE染色后作病理学检查。肿瘤体积按(V)=(4/3)πr3 计算,其中 r为三维半径平均值。
2.0 实验分组 小鼠按体重相近原则随机分入各实验组,每组至少20只。每组实验观察时间为4.5-5个月。分组一览表如下(表1):
表1 实验编组及实验处理
实验组编号 | 实验处理 |
1 | 正常对照 Ⅰ(实施例4) |
2 | 乌来糖诱发肺肿瘤Ⅰ(实施例5) |
3 | 1%茶多酚+0.012%咖啡因+5%大枣水煎物+0.02%牛磺酸(实施例6) |
4 | 正常对照 Ⅱ(实施例7) |
5 | 乌来糖诱发肺肿瘤Ⅱ(实施例8) |
6 | 乌来糖+1%茶多酚+0.012%咖啡因+5%大枣水煎物+0.5%牛磺酸(实施例9) |
7 | 乌来糖+1%茶多酚+0.012%咖啡因+5%大枣水煎物+0.02%牛磺酸(实施例10) |
注:实施例4-6昆明小鼠购自福建医科大学,实施例7-10组昆明小鼠购自上海中科院实验动物中心
实施例4和实施例7:
(1)4周龄小鼠20-30只,采取分笼饲养,每笼5只,体重18-22克,一次性腹腔注射生理盐水,生理盐水的注射量与实施例5和8中乌来糖溶液的注射量相当。
(2)自由进食实验小鼠标准颗粒饲料,自由饮用自来水,直至22周龄。
(3)存活的小鼠于22周龄时处死,作肺肿瘤检查,其结果见表2。
实施例5和实施例8:
(1)4周龄小鼠20-95只,采取分笼饲养,每笼5只,体重18-22克,一次性腹腔注射乌来糖1㎎/g体重(浓度为10%),以诱发肺肿瘤。
(2)自由进食实验小鼠标准颗粒饲料,自由饮用自来水,直至22周龄。
(3)存活的小鼠于22周龄时处死,作肺肿瘤检查,其结果见表2.
实施例6:
(1)4周龄小鼠21只,采取分笼饲养,每笼一般5只,体重18-22克,一次性腹腔注射生理盐水,生理盐水的注射量与实施例5中乌来糖的注射量相同。
(2)自腹腔注射生理盐水后5小时起,每周连续5天,直至22周龄实验终末,每日以5%大枣+1%茶多酚+0.012%咖啡因+0.02%牛磺酸复方水溶液(见材料与方法1.6 饮食补充物的喂饲),按每只小鼠平均10毫升的预期饮用量,完全代替自来水供小鼠自由饮用。同时将相应的大枣水煮后的枣肉渣放回笼中与常规标准颗粒饲料一起供小鼠自由食用。每周的其余两天,小鼠仍自由饮用普通自来水,自由食用标准颗粒饲料。
(3)存活的小鼠于22周龄时处死,作肺肿瘤检查,其结果见表2.
实施例9和实施例10:
(1)4周龄小鼠20-47只,采取分笼饲养,每笼一般5只,体重18-22克,一次性腹腔注射乌来糖1㎎/g体重 (浓度为10%),以诱发肺肿瘤。
(2)自腹腔注射乌来糖后5小时起,每周连续5天,直至22周龄实验终末,每日以5%大枣+1%茶多酚+0.012%咖啡因+0.02%(或0.5%)牛磺酸复方水溶液(见材料与方法1.6 饮食补充物的喂饲),按每只小鼠平均10毫升的预期饮用量,完全代替自来水供小鼠自由饮用。同时将相应的大枣水煮后的枣肉渣放回笼中与常规标准颗粒饲料一起供小鼠自由食用。每周的其余两天,小鼠仍自由饮用普通自来水,自由食用标准颗粒饲料。
(3)存活的小鼠于22周龄时处死,作肺肿瘤检查,其结果见表2.
3.1 各实验组肺肿瘤发生的比较 数据见表2
表2
从表2可以看出,与致肺癌对照组(实施例8)相比,饮水中含 1%茶多酚+0.012%咖啡因+5%大枣+0.02%牛磺酸,饲料中含相应的大枣煮汤后的枣肉渣(实施例10)使乌来糖诱发肺肿瘤的发生率下降27.1%( P﹤0.005),鼠均肺瘤数下降70.1%( P﹤0.001),鼠均肺瘤体积减小78.7%( P﹤0.05)。若将该复方中的牛磺酸用量增至25倍(实施例6),则非但不能有效抑制肺肿瘤的发生,反而可能使鼠均肺瘤体积显著增大(83.2倍, P﹤0.05)。
从表2还可看出,与正常鼠自发肺肿瘤的状况(实施例4)相比,饮食中添加茶多酚+咖啡因+大枣水煎物+牛磺酸(实施例6)的小鼠肺肿瘤的发生率、鼠均肺瘤数、鼠均肺瘤体积的数值都较低。虽然这些差异并无统计学意义,但至少可看出这种添加没有诱发肺肿瘤的任何风险。
解剖所见的肺肿瘤绝大部分为出现在肺叶表面的结节,较小者呈半透明,较大者呈不透明白色,质硬。肺叶经碱透明后可见到内部的结节,占很少数,基本上不靠近气管。病理切片证实,所有的结节均为肺泡腺瘤,而非气管上皮肿瘤。瘤组织中肺泡结构消失,细胞密集、核大,有些部位呈腺样构造。代表性的组织切片见附图(图1)。
3.2各组小鼠生长发育的一般状况 各组小鼠在实验终末时检查,肝、肾无明显异常,行为学亦无无病态表现。摄食量开始时随鼠龄增长而增加,在4周龄前后达最大,此后略下降趋平稳。全程平均每只每日摄食5g左右,各组间无明显差异,实施例6、9和10每日所放回饲料中的枣肉渣也都被食尽。正常对照组(实施例4和7)和乌来糖组(实施例5和8)小鼠每只每日平均饮水约6ml。实施例6、9和10小鼠每只每日平均饮本发明的饮食补充剂溶液约8ml,排尿也相对明显较多。各组小鼠体初重和终重数据见表3。
表3. 头4.5个月内各类实验组小鼠体重比较
组别 实验初始 实验初始 实验终末 实验终末
小鼠数(只) 体重(g) 小鼠数(只) 体重(g)
实施例4和7 50 20.03±1.08 50 55.22±4.05
实施例5和8 117 20.21±1.54 117 54.80±6.51
实施例6、9和10 62 20.51±1.06 62 52.84±4.83
注:各实施例的实验处理见表2及其说明。
从表3可见,在头4.5个月(18周)内,乌来糖组、乌来糖+饮食补充茶多酚+咖啡因+大枣+牛磺酸组小鼠体重均在正常范围,表明其生长发育未受不利影响。
Claims (2)
1.一种预防肺癌的饮食补充剂,其特征在于:它主要由干大枣肉、茶多酚、咖啡因及牛磺酸配制而成,各组分的重量份数比为:干大枣肉4 -6份,茶多酚0.9-1.1份,咖啡因0.008-0.016份,牛磺酸0.01-0.02份;按照下述步骤制备饮食补充剂:
(1)将干大枣肉加相当于其重量30 倍量的水煮沸1 小时,至剩余水量为原加入水量的三分之二,得到所要的枣汤,随后将煮好的枣肉渣捞出并将其所携带的汤汁沥入枣汤;将枣汤和枣肉渣分别置70℃的温度下烘干后磨成干粉;
(2)将步骤(1)制备的枣汤和枣肉渣干粉与茶多酚、咖啡因和牛磺酸按上述比例均匀混合。
2.根据权利要求1所述的预防肺癌的饮食补充剂,其特征在于:饮食补充剂中各组分的重量份数为:干大枣肉5份,茶多酚1份,咖啡因0.012份,牛磺酸0.02份。
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