CN102796092B

CN102796092B - 噁唑烷酮衍生物及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN102796092B
Application number: CN201110135602.4A
Authority: CN
Inventors: 易崇勤; 王振国; 李付鸾; 陶晶; 林松文; 钟学超; 崔畅; 邓小兵
Original assignee: Peking University Founder Group Co Ltd; PKU International Healthcare Group Co Ltd; PKUCare Pharmaceutical R&D Center
Current assignee: New Founder Holdings Development Co ltd; Peking University Medical Management Co ltd; Peking University Founder Group Co Ltd; PKU Healthcare Industry Group; PKUCare Pharmaceutical R&D Center
Priority date: 2011-05-24
Filing date: 2011-05-24
Publication date: 2015-04-08
Anticipated expiration: 2031-05-24
Also published as: CN102796092A

Abstract

本发明涉及噁唑烷酮衍生物及其制备方法和应用，一组通式结构表示的取代的噁唑烷酮化合物，属于药物化学领域。具体涉及通式I表示的取代的噁唑烷酮化合物，其中，R₁表示氯、溴、甲基或三氟甲基；R₂表示C1-10直链或支链的饱和或不饱和的亚烷基链。该化合物或其药用盐作为直接Xa因子抑制剂，用作抗血栓剂，用于治疗心脑血管疾病和血栓栓塞类疾病。

Description

噁唑烷酮衍生物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类取代的噁唑烷酮化合物，以及它们的制备方法和作为抗血栓剂的用途。

背景技术

血栓是指血液成分在血液流动过程中，在血管或心脏内膜表面形成的一种半凝块状物质。血栓形成与心血管疾病密切相关，是威胁中老年人身体健康的重要疾病之一。根据其形成的部位、原因、结构和性质，可将其分为白色血栓、红色血栓和混合血栓等。促使血栓形成的因素很多，主要有血管内皮损伤、内外凝血系统异常和血流动力学异常等。

随着血栓形成机制的进一步阐明，针对血栓形成的特点和原因，研究和开发了很多抗血栓形成的新药，既有抑制血栓形成(抗凝血)和抑制血小板聚集的药物，又有溶解血栓的药物。前者主要是对血栓的形成和增大具有抑制作用，后者主要是将已形成的血栓进行溶解，从而消除血栓性疾病对人类造成的危害。

Xa因子抑制剂(FXa inhibitor，FXaI)，Xa因子是一种对凝血酶的形成具有重要作用的凝血因子。FXaI可选择性抑制Xa因子，延长凝血时间，减少凝血酶生成而达到抗血栓作用。FXaI与常用药物及食物间的相互作用很小，无需调整剂量和用药监控。作用于Xa因子的Xa因子抑制剂可分为间接Xa因子抑制剂和直接Xa因子抑制剂。

随着人口的老龄化、心血管疾病发病率的增加，预计抗凝血药的市场结构将发生变化，垄断半个多世纪的华法林和肝素将逐渐被新一代的直接凝血酶抑制剂和Xa因子抑制剂所替代。

发明内容

本发明利用药效团模型等计算机辅助药物设计手段建立了取代的噁唑烷酮化合物的构效关系模型和药物筛选模型，在此基础上设计了一系列全新结构的取代的噁唑烷酮化合物。

本发明的取代的噁唑烷酮化合物作为直接Xa因子抑制剂，其对Xa因子具有高度的选择性，除可抑制呈游离状态的Xa因子外还可抑制结合状态的Xa因子，对血小板聚集没有直接作用。本发明化合物具有生物利用度高，治疗疾病谱广，量效关系稳定，抗凝效果可预测，无需监控抗凝活性，与食物和药物相互作用小，临床使用方便等特点。药理药效学试验表明，本发明化合物既可预防和治疗静脉血栓，又可预防和治疗动脉血栓。将本发明的取代的噁唑烷酮化合物或其药用盐(药学上可接受的盐)用作抗血栓剂，可用于治疗弥散性血管内凝血、肺栓塞、血栓栓塞、心血管病、深静脉血栓形成、心脏病、脑血管局部缺血等心脑血管疾病和血栓栓塞类疾病。

本发明所述取代的噁唑烷酮化合物是如下式I所示的化合物：

式I

其中，R₁表示氯、溴、甲基或三氟甲基；R₂表示C1-10直链或支链的饱和或不饱和的亚烷基链

在式I的基础上进一步优选，本发明所述取代的噁唑烷酮化合物是如下式II结构的化合物：

式II

其中，R₁表示氯、溴、甲基或三氟甲基；R₂表示C1-10直链或支链的饱和或不饱和的亚烷基链。

进一步的，上述式I和式II中，R₁优选为氯；R₂优选为C1-6亚烷基链，更优选为C3-6亚烷基链。

本发明通过对先导化合物的构效关系研究，向活性分子引入新的取代基或官能团，合成了几百个新化合物，进而依照“生物活性的测定”试验设计，对所有新化合物进行初步筛选，依据初筛的结果，再进行结构优化，对初筛得到的新化合物行复筛。用整体动物模型进行评价，进行药理学、药效学、毒理学研究，最终确定了本发明中公开的化合物。

具体的，本发明通式的化合物包括但不限于下述几种噁唑烷酮衍生物：

(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-；

(S)-5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-CH₂-；

5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-；

5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-CH₂-；

(S)-5-氯-N-({3-[(3-氧代-4-吗啉基)甲基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-；

(S)-5-氯-N-({3-[2-(3-氧代-4-吗啉基)乙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-；

(S)-5-氯-N-({3-[5-(3-氧代-4-吗啉基)戊基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-；

(S)-5-氯-N-({3-[6-(3-氧代-4-吗啉基)己基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-；

(S，E)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁-2-烯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-CH＝CH-CH₂-；

(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁-2-炔基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺，其中R₁为Cl，R₂为-CH₂-C≡C-CH₂-。

本发明的特别优选的化合物是：

式III

式IV

式V

式VI

本发明还涉及上述化合物的药用盐，即其药学上可接受的盐，包括但不限于通式I或II化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸或苯甲酸。

本发明的式I化合物可以使用如下制备方法得到：首先是3-吗啉酮与首尾各含一个卤素的烷烃(或烯烃或炔烃)反应合成含卤代烃支链的吗啉酮，再将该含卤代烃支链的吗啉酮与叠氮钠反应，之后将叠氮基还原成氨基，得到伯胺；同时将5-位被R₁取代的噻吩酸与3-氨基丙二醇反应得到的产物在乙酸和酸酐下进行合环生成5-位被R₁取代的N-(2，3-环氧丙烷基)噻吩-2-甲酰胺，之前的伯胺对此化合物进行开环反应，然后再在羰基二咪唑作用下合环得到最终产物。反应流程如下所示：

上述反应流程中，X代表卤素，R₁表示氯、溴、甲基或三氟甲基；R₂表示C1-10直链或支链的饱和或不饱和的亚烷基链。

上述反应流程中，所述5-位被R₁取代的N-(2，3-环氧丙烷基)噻吩-2-甲酰胺可以是光学纯或消旋的，相应的所合成的式I化合物是光学纯或消旋的。

对映体和非对映体混合物的合成方法是本领域技术人员所熟悉的。本发明包括任何具有抗血栓活性的、分离的消旋或光学活性形式的式I化合物。

本发明还包括包含式I化合物和生理学上认可的载体的药物组合物。本发明化合物可通过注射、吸入或喷洒或直肠给药，经口、皮肤、胃肠外给予，或以单位制剂剂型给予。“注射给予”包括静脉、肌内、皮下和胃肠外注射，以及应用输液技术。皮肤给药包括外用或透皮给予。一种或多种化合物可与一种或多种药学上认可的无毒载体，以及视需要而定的其他活性成分共存。口服组合物可按照任何药物组合物制造领域已知的合适方法制备。为了改善制剂口感，所述组合物可含一种或多种以下试剂：稀释剂、甜味剂、香料、着色剂和防腐剂。片剂含有活性成分，它们与药学上认可的、适合片剂生产的无毒赋形剂混合。所述赋形剂例如惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；粒化剂和崩解剂，例如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如硬脂酸镁，硬脂酸或滑石粉。片剂可以没有包衣，也可以用已知技术进行包裹，以延迟其在胃肠道内的崩解与吸收，提供长期的持续作用。例如，可采用诸如一硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯之类延时物质。所述化合物也可以制成快释形式。口服制剂还可以是硬明胶胶囊，其中的活性成分与例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土等惰性固体稀释剂相混合，或者是软明胶胶囊，其中的活性成分与水或例如花生油、液体石蜡或橄榄油等油混合。

所述药物组合物也可使用含有活性物质与适合制造水性悬浮液的赋形剂混合的水性悬浮液。所述赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基丙基-甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、西黄耆胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可以是天然磷脂，例如卵磷脂，或环氧乙烷与脂肪酸的缩合产物，例如硬脂酸聚氧乙烯酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物，例如十七氧乙烯十六烷醇，或环氧乙烷与脂肪酸与己糖醇所成偏酯的缩合产物，例如单油酸聚氧乙烯山梨醇酯。水性悬浮液还可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种香料，和一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。适合加水成为水性悬浮液的可分散粉末或颗粒中，活性成分与分散剂或润湿剂，悬浮剂和一种或多种防腐剂混合。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂可以上文所述为例。还可以含其他赋形剂，例如甜味剂，香料和着色剂。

本发明药物组合物的形式还可以是非水性液体制剂，例如油性悬浮液，这可以通过将活性成分悬浮在花生油、橄榄油、芝麻油或花生油等植物油或诸如液体石蜡等矿物油中来配制。该油性悬浮液可含增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。为了改善口感，可加入上述甜味剂和香料。所述组合物可通过添加诸如抗坏血酸等抗氧化剂来保质。

本发明药物组合物的形式还可以是水包油乳液。油相可以是诸如橄榄油或花生油等植物油或例如液体蜂蜡等矿物油，或它们的混合物。合适的乳化剂可以是西黄耆胶和阿拉伯树胶等天然树胶，或天然磷脂，例如大豆卵磷脂或卵磷脂：脂肪酸与脱水己糖醇形成的偏酯，例如但油酸脱水山梨醇醋；所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如单油酸聚氧乙烯脱水山梨醇酯。所述乳液还可含有甜味剂和香料。

本发明化合物也可用例如甘油、聚丙二醇、山梨醇或蔗糖等甜味剂配制糖浆剂。这类制剂还可含有润药，防腐剂和香料及着色剂。

所述化合物还可以栓剂的形式用于直肠或阴道给药。这类组合物可通过将药物与合适的无刺激赋形剂混合来制备，所述赋形剂常温下是固态，但在直肠温度或阴道温度是液态，因此，它会在直肠或阴道内融化而释放出药物。这样的材料包括可可脂和聚乙二醇。

在本发明说明书和权利要求中，化合物的命名都是依据化学结构式，如果表示同一化合物时化合物的命名与化学结构式不符，以化学结构式为准。

现结合实施例，对本发明作进一步描述：

具体实施方式

实施例1：(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺(式IV化合物)

制备流程如下：

1a：4-(4-溴丙基)-3-吗啉酮的合成：

将10.1g(0.1mol)3-吗啉酮溶于200mL干燥的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，冰水浴控温下分批加入氢化钠5.2g(0.13mol，60％)，室温下搅拌1h后，加入1，4-二溴丁烷，继续室温反应5h，TLC检测显示反应完全，加入1L水和300mL乙酸乙酯，分液后水相用900mL乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相，水洗两次(500mL/次)，再用400mL饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品柱层析纯化后得12.5g棕黄色液体，收率为53％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ4.16(s，2H)，3.89(t，J＝4.8Hz，2H)，3.47-3.36(m，6H)，1.92-1.69(m，4H).MS(ESI+)：m/z 236.0[M+H]⁺

1b：4-(4-叠氮基丙基)-3-吗啉酮的合成：

将11g(0.047mol)4-(4-溴丙基)-3-吗啉酮溶于55mL N，N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮钠9.16g(0.141mol)，缓慢升温至110℃，保温7h，将反应体系降至室温，加入300mL水和100mL乙酸乙酯，分液，水相用400mL乙酸乙酯萃取4次，合并乙酸乙酯相，水洗两次(100mL/次)，再用100mL饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品柱层析纯化后得8.16g黄色粘稠状液体，收率为88％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ4.14(s，2H)，3.87(t，J＝5.1Hz，2H)，3.42(t，J＝6.9Hz，2H)，3.36-3.29(m，4H)，1.67-1.59(m，4H).MS(ESI+)：m/z 199.1[M+H]⁺

1c：4-(4-氨基丙基)-3-吗啉酮的合成：

将2g(0.011mol)4-(4-叠氮基丙基)-3-吗啉酮溶于120mL甲醇中，加入0.2g Pd/C(10％)，室温加压催化氢化反应3h，TLC检测显示反应完全，经硅藻土抽滤，旋干得1.6g无色透明胶体，收率为93％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ4.15(s，2H)，3.87(t，J＝4.8Hz，2H)，3.45-3.33(m，4H)，2.72(t，J＝6.9Hz，2H)，1.63-1.41(m，4H).MS(ESI+)：m/z173.1[M+H]⁺

1d：(S)-N-(2，3-二羟基丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的合成：

将2.0g(21.95mmol)(S)-3-氨基丙二醇，3.55g(21.95mmol)5-氯-2-噻吩甲酸，4.26g(28.02mmol)1-羟基苯并三氮唑(HOBT)，4.98g(26.07mmol)1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)溶于50mL DMF中，室温搅拌下滴加8.24mL N，N-二异丙基乙胺(DIEA)，室温下继续搅拌3h，TLC检测显示反应完全，浓缩出DMF，水洗除去残余DMF，水相用乙酸乙酯萃取1次，干燥，柱色谱分离，得产品2.52g，产率48.7％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.28(d，J＝3.9Hz，1H)，6.91(d，J＝3.9Hz，1H)，6.33(br s，1H)，3.89(m，1H)，3.70-3.49(m，6H).MS(ESI+)：m/z 236.0[M+H]⁺

1e：(S)-N-(2-羟基-3-溴丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的合成：

将2.0g(8.5mmol)(S)-N-(2，3-二羟基丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺溶解于100mL乙酸中，加入4.3mL 45％(m/v)氢溴酸乙酸溶液，滴加0.8mL乙酸酐，65℃下回流3h，将体系降温至室温，再加入20mL甲醇，70℃下回流5h。旋除溶剂，加入乙酸乙酯100mL和水100mL，分液，有机相用饱和食盐水洗1次，无水硫酸钠干燥，旋干，柱色谱分离得产品1.4g，产率49.5％。¹H NMR(300M Hz，CDCl₃)：δ7.30(d，J＝3.9Hz，1H)，6.91(d，J＝3.9Hz，1H)，6.43(br s，1H)，4.08-4.01(m，1H)，3.78(ddd，J＝3.3，6.3，14.4Hz，1H)，3.57-3.37(m，4H).MS(ESI+)：m/z 299.9[M+H]⁺，321.9[M+Na]⁺

1f：(S)-N-(2，3-环氧丙烷基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的合成：

将1.40g(4.6mmol)(S)-N-(2-羟基-3-溴丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺溶解于30mL无水THF中，加入4.2g(30mmol)K₂CO₃，35℃下搅拌18h，过滤除去固体K₂CO₃，旋除溶剂，得产品970mg，产率95.4％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ8.81(t，J＝5.7Hz，1H)，7.67(d，J＝4.2Hz，1H)，7.18(d，J＝4.2Hz，1H)，3.55(dddd，J＝3.9，5.7，14.4Hz，1H)，3.25(ddd，J＝5.4，5.4，14.4Hz，1H)，3.08(m，1H)，2.74(dd，J＝4.2，4.8Hz，1H)，2.55(dd，J＝2.7，4.8Hz，1H).MS(ESI+)：m/z 299.9[M+H]⁺

1g：(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺的合成：

将(S)-N-(2，3-环氧丙烷基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺360mg溶于10mL甲醇中，加入上述未经纯化的4-(4-氨基丙基)-3-吗啉酮550mg，搅拌升温至50℃，反应16h，点板确定无原料(S)-N-(2，3-环氧丙烷基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺剩余，将反应液冷却至室温，旋干反应溶剂，加入四氢呋喃10mL，N，N-羰基二咪唑(CDI)320mg(1.99mmol)，4-二甲氨基吡啶(DMAP)5mg(0.4mmol)，升温至回流反应1.5h，点板确定反应完全，将反应液冷却至室温，旋干溶剂，所得粗品柱层析纯化后得70mg白色固体，再用乙酸乙酯重结晶得28mg纯品，收率为4％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.33(d，J＝4.2Hz，1H)，6.90(d，J＝3.9Hz，1H)，6.83(t，J＝6.3Hz，1H)，4.73(m，1H)，4.15(s，2H)，3.88(dd，J＝4.2，6.0Hz，2H)，3.70-3.59(m，3H)，3.42-3.24(m，7H)，1.60-1.50(m，4H).MS(ESI+)：m/z 416.1[M+H]⁺，438.1[M+Na]⁺

实施例2：(S)-5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺(式III化合物)

制备流程如下：

2a：4-(3-溴丙基)-3-吗啉酮的合成：

将10.1g(0.1mol)3-吗啉酮溶于200mL干燥的N，N-二甲基甲酰胺中，冰水浴冷却下分批加入氢化钠4g(0.1mol，60％)，室温下搅拌1h后，加入1，3-二溴丙烷，继续室温反应3h，TLC检测显示反应完全，加入100mL饱和氯化铵溶液终止反应，加入1L水和300mL乙酸乙酯，分液后水相用900mL乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，水洗两次(500mL/次)，再用400mL饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得17.5g棕黄色液体，收率为78％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ4.19(s，2H)，3.90(t，J＝4.8Hz，2H)，3.55(t，J＝6.9Hz，2H)，3.46-3.41(m，4H)，2.17(q，J＝6.6Hz，2H).MS(ESI+)：m/z223.0[M+H]⁺

2b：4-(3-叠氮基丙基)-3-吗啉酮的合成：

将10.23g(0.046mol)4-(3-溴丙基)-3-吗啉酮溶于60mLN，N-二甲基甲酰胺中，加入叠氮钠8.98g(0.138mol)，再将反应体系缓慢升温至110℃，保温反应5h，TLC检测显示反应完全，将反应体系降至室温，加入300mL水和100mL乙酸乙酯，分液后水相用400mL乙酸乙酯萃取4次，合并乙酸乙酯层，水洗两次(100mL/次)，再用100mL饱和食盐水洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，所得粗品柱层析纯化后得2g无色粘稠状液体，收率为23％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.16(s，2H)，3.89(t，J＝4.8Hz，2H)，3.48(t，J＝7.2Hz，2H)，3.41-3.345(m，4H)，1.87(q，J＝6.9Hz，2H).MS(ESI+)：m/z 185.1[M+H]⁺

2c：4-(3-氨基丙基)-3-吗啉酮的合成：

将2g(0.011mol)4-(3-叠氮基丙基)-3-吗啉酮溶于120mL甲醇中，加入0.2g Pd/C(10％)，室温加压催化氢化反应3h，TLC检测显示反应完全，抽滤，旋干得1.55g无色透明胶体，收率为90％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ4.16(s，2H)，3.88(t，J＝4.5Hz，2H)，3.50(t，J＝6.6Hz，2H)，3.36(t，J＝4.8Hz，2H)，2.85(br s，2H)，2.73(t，J＝6.6Hz，2H)，1.74(q，J＝6.9Hz，2H).MS(ESI+)：m/z 159.2[M+H]⁺

2d：(S)-5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)-丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺的合成：

将600mg(2.76mmol)(S)-N-(2，3-环氧丙烷基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺(制备方法见实施例1步骤1d-1f)溶于10mL二氯甲烷(DCM)中，加入900mg(5.69mmol)4-(3-氨基丙基)-3-吗啉酮，氩气保护下升温至回流，20h后TLC监测体系剩余原料相对较少，体系降至室温后，将溶剂旋干，呈黄色油状，加入THF 15mL，加CDI(1.2eq)和DMAP 5mg，将体系升温至回流，2h后反应完全，将体系旋干，柱层析纯化得745mg粗品，对粗品进行多次柱层析得纯品18mg，HPLC＞98％，Y：1.62％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.37(d，J＝3.9Hz，1H)，7.12(t，J＝5.7Hz，1H)，6.89(d，J＝3.9Hz，1H)，4.80(m，1H)，4.17(s，2H)，3.91(dd，J＝5.1Hz，2H)，3.82(m，1H)，3.66-3.24(m，8H)，3.15(m，1H)，1.85(m，2H).MS(ESI+)：m/z 402.0[M+H]⁺，424.1[M+Na]⁺

实施例3：5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺(式V化合物)

3a：N-(2，3-二羟基丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的合成：

将140mg(1.54mmol)3-氨基丙二醇，250mg(1.54mmol)5-氯-2-噻吩甲酸，300mg(1.97mmol)HOBT，400mg(2.08mmol)1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)溶于12mL DMF中，室温搅拌下按每次25微升滴加0.58mL DIEA，室温下继续搅拌2.5h。旋除DMF，水洗除去残余DMF，水相用乙酸乙酯萃取3次，干燥，柱色谱分离，得产品263mg，产率72.6％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ8.58(t，J＝5.7Hz，1H)，7.70(d，J＝4.0Hz，1H)，7.20(d，J＝4.0Hz，1H)，4.85(d，J＝5.1Hz，1H)，4.60(t，J＝5.7Hz，1H)，3.63(m，1H)，3.41-3.33(m，3H)，3.14(ddd，J＝6.0，6.9，13.2Hz，1H)，MS(ESI+)：m/z 236.0[M+H]⁺

3b：N-(2-羟基-3-溴丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的合成：

将400mg(1.7mmol)N-(2，3-二羟基丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺溶解于20mL乙酸中，加入0.885mL 45％(m/v)氢溴酸乙酸溶液，滴加0.16mL乙酸酐，65℃下回流3h。反应体系降温至室温，再加入10mL甲醇，70℃下回流4.5h。旋除溶剂，加入乙酸乙酯、水，洗涤萃取，有机相用饱和食盐水洗2次，无水硫酸钠干燥，柱色谱分离得产品300mg，产率59.3％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.29(d，J＝3.9Hz，1H)，6.92(d，J＝3.9Hz，1H)，6.33(br s，1H)，4.03(br s，1H)，3.79(ddd，J＝3.0Hz，6.1Hz，14.2Hz，1H)，3.58-3.36(m，4H)MS(ESI+)：m/z 299.9[M+H]⁺

3c：N-(2，3-环氧丙烷基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺的合成：

将1.0g(3.35mmol)N-(2-羟基-3-溴丙基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺溶解于25mL无水THF中，加入3.0g(2.17mmol)K₂CO₃，35℃下搅拌15h，过滤除去固体K₂CO₃，旋除溶剂，得产品701mg产率96.0％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ8.81(t，J＝5.7Hz，1H)，7.67(d，J＝4.2Hz，1H)，7.18(d，J＝4.2Hz，1H)，3.52(dddd，J＝3.9，5.7，14.4Hz，1H)，3.25(ddd，J＝5.4，5.4，14.4Hz，1H)，3.08(m，1H)，2.74(dd，J＝4.2，4.8Hz，1H)，2.55(dd，J＝2.7，4.8Hz，1H).MS(ESI+)：m/z 299.9[M+H]⁺。

3d：5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)-丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺的合成：

将330mg(1.5mmol)(S)-N-(2，3-环氧丙烷基)-5-氯-2-噻吩甲酰胺溶于10mLDCM中，加入1018mg(6.4mmol)4-(3-氨基丙基)-3-吗啉酮，氩气保护下升温至回流，20h后TLC监测体系剩余原料相对较少，体系降至室温后，将溶剂旋干，呈黄色油状，加入THF 15mL，加CDI 280mg(1.2eq)和DMAP 5mg，将体系升温至回流，2h后反应完全，将体系旋干，对粗品进行多次柱层析得纯品6mg，HPLC＞98％。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.36(d，J＝3.9Hz，1H)，7.08(brs，1H)，6.89(d，J＝3.9Hz，1H)，4.78(m，1H)，4.18(s，2H)，3.91-3.78(m，3H)，3.65-3.10(m，9H)，2.00-1.75(m，2H).MS(ESI+)：m/z 402.1[M+H]⁺，424.0[M+Na]⁺

实施例4：5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-恶唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺(式VI化合物)

制备方法：

将217mg(1mmol)5-氯-N-(2-环氧乙烷基甲基)-2-噻吩甲酰胺(制备方法见实施例3步骤3a-3c)溶于10mL甲醇中，加入上述未经纯化的4-(4-氨基丙基)-3-吗啉酮344mg(2.0mmol)，搅拌升温至50℃，反应16h，TLC确定无原料5-氯-N-(2-环氧乙烷基甲基)-2-噻吩甲酰胺剩余，将反应液冷却至室温，旋干反应溶剂，加入四氢呋喃10mL，CDI 194.4mg(1.2mmol)，4-二甲氨基吡啶5mg(0.4mmol)，升温至回流反应2h，TLC监测反应完全，将反应液冷却至室温，旋干溶剂，粗品柱层析纯化后76mg白色固体，再用乙酸乙酯重结晶得52mg纯品，收率为12.5％。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：δ7.47(br s，1H)，7.14(br s，1H)，6.46(br s，1H)，3.99-3.68(m，9H)，2.94(m，6H)，1.32-1.24(m，4H).MS(ESI+)：m/z 416.1[M+H]⁺，438.1[M+Na]⁺

实施例5：(S)-5-氯-N-({3-[(3-氧代-4-吗啉基)甲基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺

制备方法同实施例1，其中1a中的1，4-二溴丁烷替换为二溴甲烷。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.39(d，J＝3.9Hz，1H)，7.10(t，J＝5.7Hz，1H)，6.93(d，J＝3.9Hz，1H)，4.83(m，1H)，4.78(s，2H)，4.19(s，2H)，3.95(dd，J＝5.1Hz，2H)，3.80(m，1H)，3.66-3.24(m，4H)，3.15(m，1H).MS(ESI+)：m/z 374.1[M+H]⁺，396.1[M+Na]⁺

实施例6：(S)-5-氯-N-({3-[2-(3-氧代-4-吗啉基)乙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺

制备方法同实施例1，其中1a中的1，4-二溴丁烷替换为1，2-二溴乙烷。

¹H NMR(300M Hz，CDCl₃)：δ7.39(d，J＝3.9Hz，1H)，7.10(t，J＝5.7Hz，1H)，6.85(d，J＝3.9Hz，1H)，4.80(m，1H)，4.19(s，2H)，3.87(dd，J＝5.1Hz，2H)，3.85(m，1H)，3.69-3.19(m，8H)，3.15(m，1H).MS(ESI+)：m/z 388.1[M+H]⁺，410.1[M+Na]⁺

实施例7：(S)-5-氯-N-({3-[5-(3-氧代-4-吗啉基)戊基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺

制备方法同实施例1，其中1a中的1，4-二溴丁烷替换为1，5-二溴戊烷。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.33(d，J＝4.2Hz，1H)，6.90(d，J＝3.9Hz，1H)，6.83(t，J＝6.3Hz，1H)，4.73(m，1H)，4.15(s，2H)，3.88(dd，J＝4.2，6.0Hz，2H)，3.70-3.59(m，3H)，3.42-3.24(m，7H)，1.60-1.48(m，4H)，1.29(m，2H).MS(ESI+)：m/z 430.1[M+H]⁺，452.1[M+Na]⁺

实施例8：(S)-5-氯-N-({3-[6-(3-氧代-4-吗啉基)己基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺

制备方法同实施例1，其中1a中的1，4-二溴丁烷替换为1，6-二溴己烷。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.33(d，J＝4.2Hz，1H)，6.90(d，J＝3.9Hz，1H)，6.83(t，J＝6.3Hz，1H)，4.73(m，1H)，4.15(s，2H)，3.88(dd，J＝4.2，6.0Hz，2H)，3.70-3.59(m，3H)，3.42-3.24(m，7H)，1.60-1.50(m，4H)，1.30-1.21(m，4H).MS(ESI+)：m/z444.1[M+H]⁺，466.1[M+Na]⁺

实施例9：(S，E)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁-2-烯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺

制备方法同实施例1，其中1a中的1，4-二溴丁烷替换为(E)-1，4-二溴丁二烯。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.33(d，J＝4.2Hz，1H)，6.90(d，J＝3.9Hz，1H)，6.83(t，J＝6.3Hz，1H)，5.75-5.71(m，2H).4.73(m，1H)，4.15(s，2H)，3.88(dd，J＝4.2，6.0Hz，2H)，3.70-3.59(m，5H)，3.42-3.24(m，5H)，MS(ESI+)：m/z 414.1[M+H]⁺，436.1[M+Na]⁺

实施例10：(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁-2-炔基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺

制备方法同实施例1，其中1a中的1，4-二溴丁烷替换为1，4-二溴丁二炔。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ7.33(d，J＝4.2Hz，1H)，6.90(d，J＝3.9Hz，1H)，6.83(t，J＝6.3Hz，1H)，4.73(m，1H)，4.15(s，2H)，3.92-3.84(m，4H)，3.70-3.59(m，5H)，3.42-3.24(m，5H).MS(ESI+)：m/z 412.1[M+H]⁺，434.1[M+Na]⁺

实验例11：本发明化合物和利伐沙班IC50的测定对比

实验药品：本发明实施例1-10制备的化合物、利伐沙班、FXa(凝血因子)

实验步骤：

1.倍比稀释本发明化合物和利伐沙班，分别得到系列浓度的试验样品。

2.活性检测：96孔板中分别加入145μl的FXa(凝血因子)和10μl溶媒(DMSO)或稀释样品，然后加入145μl的FXa底物，混匀25℃温育10min，用酶标仪在405nm分别测定0min和10min的OD值，用下式计算抑制率：I％＝(ΔOD_溶酶-ΔOD_样品)×100％/ΔOD_溶酶

FXa的终浓度为1nmol/L。发色底物的终浓度为200μmol/L。

实验结果见表1和表2：

表1.利伐沙班的抑制作用

表2.本发明化合物的抑制作用

实验结论：

本发明化合物对于凝血因子Fxa具有很高的抑制活性，其中部分化合物优于对照品利伐沙班，显示本发明化合物具有很强的抗血栓活性。

Claims

1.式Ⅰ所示化合物或其药用盐：

其中，R₁表示氯、溴、甲基或三氟甲基；R₂表示-CH₂-、-CH₂-CH₂-、-CH₂-CH＝CH-CH₂-、-CH₂-C≡C-CH₂-或C3-6亚烷基链。

2.如权利要求1所述的化合物或其药用盐，其特征在于，所述化合物是光学纯的，具有式Ⅱ所示的结构：

其中，R₁和R₂如权利要求1所定义。

3.如权利要求1或2所述的化合物或其药用盐，其特征在于，R₁为氯。

4.如权利要求1所述的化合物或其药用盐，其特征在于，所述化合物选自下列化合物之一：

(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S)-5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

5-氯-N-({3-[3-(3-氧代-4-吗啉基)丙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S)-5-氯-N-({3-[(3-氧代-4-吗啉基)甲基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S)-5-氯-N-({3-[2-(3-氧代-4-吗啉基)乙基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S)-5-氯-N-({3-[5-(3-氧代-4-吗啉基)戊基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S)-5-氯-N-({3-[6-(3-氧代-4-吗啉基)己基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S，E)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁-2-烯基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺；

(S)-5-氯-N-({3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)丁-2-炔基]-2-氧代-1，3-噁唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩甲酰胺。

5.如权利要求4所述的化合物或其药用盐，其特征在于，所述化合物是下列式Ⅲ、式Ⅳ、式Ⅴ或式Ⅵ所示化合物

6.如权利要求1或2所述的化合物或其药用盐，其特征在于，所述化合物的药用盐是式Ⅰ或式Ⅱ化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸或苯甲酸。

7.权利要求1所述化合物的制备方法，反应流程如下所示：

首先是3-吗啉酮与首尾各含一个卤素的烷烃或烯烃或炔烃反应合成含卤代烃支链的吗啉酮，再将该含卤代烃支链的吗啉酮与叠氮钠反应，之后将叠氮基还原成氨基，得到伯胺；同时将5-位被R₁取代的噻吩酸与3-氨基丙二醇反应得到的产物在乙酸和酸酐下进行合环生成5-位被R₁取代的N-(2,3-环氧丙烷基)噻吩-2-甲酰胺，与所述伯胺进行开环反应，然后再在羰基二咪唑作用下合环得到式I所示化合物，其中X代表卤素，R₁表示氯、溴、甲基或三氟甲基；R₂表示-CH₂-、-CH₂-CH₂-、-CH₂-CH＝CH-CH₂-、-CH₂-C≡C-CH₂-或C3-6亚烷基链。

8.一种药物组合物，含有权利要求1或2所述的化合物或其药用盐作为有效成分，并含有药用载体。

9.权利要求1或2所述的化合物或其药用盐在制备抗血栓药物中的用途。