CN102772785A - 止血用复合药剂、药膏及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种止血用复合药剂、药膏及制备方法，该复合药剂是由植物血凝素、壳聚糖按照一定的比例加入适量蒸馏水配制而成，该复合药膏是由植物血凝素、壳聚糖、羧甲基纤维素钠按照一定的比例加入适量蒸馏水配制成膏状。复合药剂及药膏均可长期保存于4℃冰箱中，随时使用。本发明复合药剂及复合药膏，止血速度快，效果好，无副作用，携带方便，可方便地制成止血喷雾、止血绷带等多种形式的产品，不仅可以用于战场上，减少因失血过多而造成的大量伤亡，还可用于灾害抢险、意外伤害及各种出血性疾病和轻中度外伤性出血等场合的快速止血。

Description

止血用复合药剂、药膏及制备方法

技术领域

本发明涉及一种可快速止血并促进创伤愈合的复合药剂、药膏及其制备方法。

背景技术

在战场上、自然灾害及各种日常突发性事故中，难以控制的创伤性出血往往是导致死亡的主要原因。战争中因出血早期死亡的伤员占死亡伤员的49%，是伤员死亡的第一位原因。而出血是和平时期伤员死亡的第二位原因，约占39%。我国每年使用止血药物的患者大约有900多万人，其中包括进行手术的患者、有外伤的患者以及患有出血性疾病的患者。创伤性出血多为外出血，且为最常见的危急病症之一，具有出血速度快、出血量大等特点。轻度创伤会造成机体皮肤或浅表组织损伤，可引起疼痛和出血，严重的创伤不仅引起软组织下静脉或小动脉的破损造成大量出血，影响机体电解质平衡，而且创伤和感染可刺激机体产生应激反应，使各器官、组织等代谢失衡，破坏内环境的稳定，使机体不能维持正常的生命活动。组织损伤如果不能及时被止血处理，将会引起局部组织感染化脓，严重者出现全身症状。研究发现，伤后1小时是救治伤员的“黄金时间”，如伤势能在此时间内得到控制，80%以上伤员的生命都能得到充分救治，及时止血便成为抢救出血者生命、减少伤残最有效的举措。快速止血必须做到迅速、准确、轻柔，防止加重损伤。

虽然止血药物的使用十分广泛，但快速、安全、有效的很少见，目前市售的止血药有三种：第一类是促凝血药,如维生素K，这类药物仅适合维生素K缺乏性出血；第二类是抗纤维蛋白溶解药，如氨甲苯酸，这类药物只适用于纤溶亢进性出血；第三类是缩血管药，如垂体后叶素，这类药物只适用于血管破裂性出血；三种止血药都有禁忌及较大的副作用，如果不能正确地选择止血药，不仅无效，还可能导致严重的不良后果。传统的止血方法会造成远端组织缺血和代谢异常而导致严重的并发症，不能达到良好的止血效果，这是造成高死亡率的一大因素。此外，使用止血带压力不足时难以止血，压力过大时造成止血以下部位因缺血而坏死，单兵作业受伤时难以自救等，也是传统止血急救方法的不足之处。因此，如何及时、有效的止血，稳定伤情、降低出血伤员的病死率，受到野战外科和急诊医学等学科学者的高度重视，同时对提高平时、战时伤员的救治水平具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可促进创伤愈合的快速止血止痛的复合药剂、药膏，可用于各种灾害抢险、意外伤害及各种出血性疾病和轻中度外伤性出血等，本发明的另一目的是提供一种上述复合药剂、药膏的制备方法。为了达到快速止血、抗感染、促进组织创伤的主动修复和功能恢复，缩短愈合时间，充分止血，

为达到以上目的，本发明是采取如下技术方案予以实现的：

一种止血用复合药剂，其特征在于，包括下述组分：植物血凝素0.01-0.02g，壳聚糖0.2-0.5g，蒸馏水10~30ml。

一种止血用复合药膏，其特征在于，包括下述组分：植物血凝素0.01-0.02g，壳聚糖0.2-0.6g，羧甲基纤维素钠1.5~3g，蒸馏水10~30ml。

一种止血用复合药剂的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

（1）称量0.01-0.02g植物血凝素，0.2-0.5g壳聚糖，混匀；

（2）将上述混合物加入到10~30ml蒸馏水中搅拌均匀制得复合药剂。

一种止血用复合药膏的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

（1）称量0.01-0.02g植物血凝素，0.2-0.5g壳聚糖，混匀；

（2）称量1.5-3g羧甲基纤维素钠作为成膜材料，在10~30ml蒸馏水中融化成胶状液体，将步骤（1）混合物加入到步骤（2）胶状液体中搅拌均匀制得复合药膏。

上述复合药剂及制备方法中，最好的组成或配比为：植物血凝素0.0154g，壳聚糖0.4g，蒸馏水20ml。

上述复合药膏及制备方法中，最好的组成或配比为：植物血凝素0.0154g，壳聚糖0.4g，羧甲基纤维素钠2g，蒸馏水20ml。

壳聚糖与植物血凝素是两种促使血液凝固效果较好且对人体无毒的物质，羧甲基纤维素钠具有成膜的优良性能，壳聚糖强大的吸水作用、植物血凝素凝集细胞和增强免疫的作用、羧甲基纤维素钠吸水和利于保存的作用结合在一起，使其缺点互补，优点突出，形成止血良好的止血复合药剂及药膏。将这种复合药剂及药膏直接涂抹于伤口处，伤口周围的血液就会开始凝结，伤口就进入愈合过程。

针对本发明的止血复合药剂或药膏，对各种创伤的止血效果进行试验，结果表明：止血效果好，可促进血液自动凝结、伤口快速愈合、防止感染，既安全又方便。不仅可以用于战场上防止因失血过多而造成死亡，还可用于灾害抢险、意外伤害及各种出血性疾病和轻中度外伤性出血等场合的快速止血。

本发明的止血复合药剂、药膏的止血作用机制与传统的止血药完全不同。它主要由植物凝血素和壳聚糖组成，具有强吸水性和抗炎功效，作用于急性出血部位，可快速吸收水分或血液中的液体成分，增强血小板功能，促使血小板快速聚集、形成血栓，加速、加强血液凝固过程，达到快速止血的目的。壳聚糖的快速吸水作用减小了创伤部位的液体体积，利于植物凝血素促凝聚的发生。将壳聚糖强大的吸水作用和植物血凝素凝集细胞和增强免疫的作用结合在一起，使其缺点互补，优点突出，形成良好的止血效果。

附图说明

以下结合附图及具体实施方式对本发明作进一步的详细描述。

图1为本发明复合药剂实施例2与几种止血药物的功效比较示意图。

其中：（a）图为全血凝固时间的比较；（b）图为凝血酶原时间的比较。图中：n（样本数）=8,*表示P（结果可信程度指标）<0.05vs（比较）生理盐水；^#表示P＜0.05vs云南白药。

图2为本发明复合药剂实施例2与几种止血药物的止血时间的比较。图中：n=8,*表示P＜0.05vs纱布组；^#表示P＜0.05vs云南白药组。

图3为本发明复合药膏实施例5与几种止血药物的止血起效时间的比较。

具体实施方式

一种止血用复合药剂的制备方法：

（1）称量0.01-0.02g植物血凝素，0.2-0.5g壳聚糖，混匀；

（2）将上述混合物加入到10~30ml蒸馏水中搅拌均匀制得复合药剂。

一种止血用复合药膏的制备方法：

（1）称量0.01-0.02g植物血凝素，0.2-0.5g壳聚糖，混匀；

（2）称量1.5-3g羧甲基纤维素钠作为成膜材料，在10~30ml蒸馏水中融化成胶状液体，将步骤（1）混合物加入到步骤（2）胶状液体中搅拌均匀制得复合药膏。

具体配方参见表1

表1

以下采用本发明实施例2和5结合其它几种药物所进行的对比试验

步骤一：实验动物及分组

本实验分为体内实验和体外实验，体外实验采用清洁级健康新西兰大白兔40只(雄雌各半),重2.3~3kg。体内实验采用40只8周龄健康雄性大鼠，体质量180~220g，均随机分为五组：生理盐水组(体外实验)或普通纱布组(体内实验)、云南白药粉组、复合药剂组/复合药膏组(1.5g/L PHA+40g/Lchitosan)、植物血凝素组（1.5g/L）、壳聚糖组(40g/L)，每组8只。

步骤二：观察指标

体外实验指标为①全血凝固时间（CT）；②凝血酶原时间(PT)；③血小板聚集实验（PA）。体内实验指标为：①止血效果：完全止血：出血完全停止；不完全止血：出血较用药前减轻但未完全停止；止血失败：用药前后出血情况无变化。②止血时间（HT）：从止血药剂到接触到伤口至完全止血的时间。③起效时间（OT）：从用药至不完全止血出现的时间。

步骤三：体外实验测定复合药剂的凝血效果。

1、测定全血凝固时间：取干燥无抗凝剂试管40支，分为5组，每组8支，均置于37℃水浴中。将普通纱布各单层、适量云南白药粉、复合药剂、植物血凝素、壳聚糖分别置于试管中待用。抽取健康大白兔全血3ml，迅速加入试管中、混匀，每只大白兔血平均加入5组试管中，组成一个配对组，同时计时，每隔30S倾斜试管一次，直至血液不再流动为止，即为全血凝固时间。

2、测定凝血酶原时间：分普通纱布组、适量云南白药粉组、复合药剂组、植物血凝素组、壳聚糖组，每组8支试管，抽取大白兔血6ml(草酸钠抗凝)，2000r/min离心10min分离血浆；每只试管取待试血浆0.1ml (血小板浓度调至50万/mm3)，加入兔脑浸液0.1ml，37℃水浴1~2min，再加入0.025mol/L氯化钙，同时计时，不断倾斜观察至液体开始凝固，立即记录时间，即为PT时间。

3、血小板聚集实验：分普通纱布组、适量云南白药粉组、复合药剂组、植物血凝素组、壳聚糖组，每组8支，取大白兔血20ml于硅化离心管中，并用3.8%枸橼酸钠9:1(V/V)抗凝，离心(1000r/min)10min，取上层血浆即为富血小板浆(PRP)。剩余血液3000r/min离心15min，取上层液即乏血小板血浆(PPP)，血小板聚集程度的测定按Bom氏(1962年)比浊原理的修改进行(比浊杯中先加入待测PPP，分别加入ADP液、生理盐水、云南白药混悬液、快速止血复合药剂，观察血小板聚集的峰值及出现峰值的时间)。计算药物血小板最大聚集百分率(%)=最大聚集百分率时距PPP基线的高度／90×100%；聚集抑制百分率(%)=空白对照聚集百分率一药物聚集百分率)／空白对照聚集百分率×100%。

步骤四：体内实验测定复合药膏对伤口的止血效果。

将40只雄性大鼠，随机分为五组，普通纱布组、云南白药组、复合药膏组、植物血凝素组、壳聚糖组，每组8只。大鼠用2％戊巴比妥钠（0.002mL/g）腹腔注射麻醉后，用特制固定装置将其固定，露出尾部，距大鼠尾根部2cm处剪断后，覆上述5种止血剂，用秒表测凝血时间。

步骤五：对实验结果进行统计学分析。实验结果数据均以表示，采用Prism5.0软件进行统计学分析，方差分析进行显著性检验，显著性水准为0.05。

实验结果

1、体外实验结果

大白兔取血后测定的全血凝固时间（CT）、凝血酶原时间(PT)、血小板聚集百分率（PA）和抑制率结果如下：

（1）全血凝固时间、凝血酶原时间

如图1所示，复合药剂组较生理盐水组全血凝固时间及凝血酶原时间明显缩短，具有显著性差异（P＜0.01）；较云南白药粉组明显降低，差异明显（P＜0.05）；植物血凝素组和壳聚糖组与云南白药组无明显差异。

（2）血小板聚集百分率和抑制率

复合药剂组和阳性对照ADP组的血小板聚集率较云南白药组明显增高；ADP组比复合药剂组高；植物血凝素组和壳聚糖组与云南白药组血小板聚集百分率差异不明显；提示复合药剂组在体外对血小板的促聚集作用弱于作为阳性对照的ADP液，但强于云南白药组和其他对照组（表2）。

表2血小板聚集性的影响(%)

n=8,*P<0.05,*P<0.01vs.生理盐水；^#P<0.05vs.ADP组；^￡P<0.05vs.云南白药。

2、体内实验结果

将每组大鼠用2％戊巴比妥钠（0.002mL/g）腹腔注射麻醉后，用特制固定装置将其固定，露出尾部，距大鼠尾根部2cm处剪断后，覆5种止血剂，测定断尾创面止血效果、止血时间（HT）、止血起效时间（OT）结果如下：

（1）止血效果

大鼠断尾经复合药膏治疗后，所有伤口均成功止血，平均止血时间为32.7S，其中，最短时间为18s，最长时间52s，而普通纱布组和云南白药组平均止血时间分别为87.5S和62.6S，提示复合药膏较其他对照组能够促进血液快速形成血凝快，达到快速凝血（表3）。

表3止血效果

止血时间,++:<35s,+:<65s,-:>85s

（2）止血时间

如图2所示，云南白药组的止血时间较普通纱布组明显缩短（P＜0.05），复合药膏组的平均止血时间则较云南白药组进一步减少（P＜0.05）；植物血凝素组和壳聚糖组与云南白药组无明显差异，说明复合药膏止血效果优于其它对照组。

（3）起效时间

如图3所示，云南白药组较纱布组止血起效时间明显缩短，复合药膏组较云南白药组进一步缩短；植物血凝素组和壳聚糖组与云南白药组差异不明显，提示复合药膏止血起效时间最短，止血作用最佳。

实验结果表明，在体外实验中，快速止血合剂组均在1min以内完全凝血，全血凝固时间平均为（0.6±0.15）min，凝血酶原时间平均为（14.1±2.2）s，较普通纱布组明显减少，较经典的云南白药粉也具有显著性差异。复合药剂组血小板最大聚集百分率为（37.4±2.6）%，较生理盐水和云南白药聚集能力强。植物血凝素和壳聚糖与普通纱布组间差异明显，说明植物血凝素和壳聚糖单独使用也具有止血效果，但均弱于止血合剂。

复合药膏治疗急性创伤出血有效率为100%，8只大鼠伤口止血时间18~52s，平均止血时间为（31.1±2.8）s，所有伤口均在52s内成功止血，且80％以上的伤口止血时间短于35s。为验证其潜在的应用价值，将云南白药粉作为阳性对照，其平均止血时间为（62.6±5.1）s，60%以上的伤口止血时间均超过50s。这些结果显示，复合药膏组超强的止血效果是目前常规药物不可比拟的。

本发明涉及得得快速止血复合药剂及药膏可适用于各类中、轻度创伤出血情况，止血速度快，效果好，无副反应，能及时有效地止血。该药剂可直接涂抹于伤口上，用法灵活，不需再次配制，快捷方便；也可方便地制成多种形式的产品，如膏状止血药剂、止血绷带、止血雾剂等，便于战士和野战医生随身携带，不仅可以用于战场上，减少因失血过多而造成的大量伤亡，还可用于灾害抢险、意外伤害及各种出血性疾病，特别是对于部队战斗舱室各种战伤狭小范围内的自救、互救有明显的优势，可达到止血、止痛、防止感染的目的。因此，植物血凝素—壳聚糖快速复合药剂及药膏可能作为用于战伤救治的新型药剂开发使用。

Claims (6)

1.一种止血用复合药剂，其特征在于，包括下述组分：植物血凝素0.01-0.02g，壳聚糖0.2-0.5g，蒸馏水10~30ml。

2.如权利要求1所述的止血用复合药剂，其特征在于，所述植物血凝素0.0154g，所述壳聚糖0.4g，所述蒸馏水20ml。

3.一种止血用复合药膏，其特征在于，包括下述组分：植物血凝素0.01-0.02g，壳聚糖0.2-0.6g，羧甲基纤维素钠1.5~3g，蒸馏水10~30ml。

4.如权利要求3所述的止血用复合药膏，其特征在于，所述植物血凝素0.0154g，所述壳聚糖0.4g，所述羧甲基纤维素钠2g，所述蒸馏水20ml。

5.一种止血用复合药剂的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

（1）称量0.01-0.02g植物血凝素，0.2-0.5g壳聚糖，混匀；

（2）将上述混合物加入到10~30ml蒸馏水中搅拌均匀制得复合药剂。

6.一种止血用复合药膏的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

（1）称量0.01-0.02g植物血凝素，0.2-0.5g壳聚糖，混匀；

（2）称量1.5-3g羧甲基纤维素钠作为成膜材料，在10~30ml蒸馏水中融化成胶状液体，将步骤（1）混合物加入到步骤（2）胶状液体中搅拌均匀制得复合药膏。

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