CN102757440A - 1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药技术领域，涉及1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪（哌嗪类化合物WY-42）和药学上可接受的盐，或其立体异构体和前药，及其药学上配伍可接受的载体或稀释剂用于制备肠管平滑肌痉挛性疾病药物应用,作为钙离子通道拮抗剂在胃肠疾病中的应用。在动物离体实验中WY-42能够舒张氯化乙酰胆碱、氯化钡、氯化钾引起的小肠平滑肌的收缩。另外在对其舒张机制的初步研究中发现，肠管平滑肌经钙通道阻断剂维拉帕米孵育过后，WY-42的舒张作用被抑制。因此，WY-42可以用于制备肠管平滑肌痉挛性疾病药物及作为钙离子通道阻断剂。

Description

1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪及其用途

技术领域

   本发属于及医药技术领域，涉及1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪（哌嗪类化合物WY-42）及其制备方法，包含其药物组合物，以及哌嗪类化合物WY-42用于制备肠管平滑肌解痉剂以及止泻剂的用途。

背景技术

   引起胃肠痉挛性疼痛的原因有许多，但大多数是由于胃肠功能失调所致，部分是由胃肠道器质性病变所致。一般胃肠痉挛首选抗胆碱药，它通过选择性地阻断胃肠平滑肌M胆碱受体发挥作用，这类药物包括阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱（654-2），以及合成解痉药，如普鲁本辛、胃复康等。但是一般剂量的抗胆碱药会伴有常见的副作用，包括鼻干、口干、怕光、尿闭、近距离视力模糊、心悸、抑制出汗、皮肤干燥潮红等。大剂量使用时，会产生中枢兴奋症状，如烦躁不安、幻觉谵妄、运动失调，甚至昏迷惊厥。而且青光眼、虹膜和晶状体粘连、胃肠梗阻性病变以及前列腺肥大者忌用此类药物。，如上药物均存在不同程度的缺点和不足，因此，寻找到一种选择性比较强、不良反应较少的胃肠道解痉药物，应具有广阔的应用前景。

发明内容：

  哌嗪类化合物WY-42的化学名称是1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪，是由我们合成的一系列哌嗪类化合物系列中的一种。经试验筛选，首次发现该化合物具有肠管平滑肌解痉作用。

哌嗪类化合物WY-42的制备方法如下：

本发明的目的是提供哌嗪类化合物WY-42用于制备肠管平滑肌解痉剂以及止泻剂的用途。

肠管平滑肌强烈收缩致痉挛可引起多种疾病，如腹痛、腹鸣、腹胀、腹泻，所以研究肠平滑肌解痉药有很大的现实意义，对治疗胃肠痉挛性绞痛，肠易激综合症，溃疡性结肠炎等引起的胃肠功能紊乱等疾病以及各种原因导致的功能性腹泻均有指导意义和参考价值。

研究表明：WY-42能够降低家兔离体小肠自发活动的张力和振幅，能够舒张氯化乙酰胆碱、氯化钡、氯化钾引起的小肠平滑肌的收缩。因此，WY-42可以用于制备治疗肠管平滑肌痉挛的解痉剂和止泻药。其最小有效剂量为10^-9mol/L。

附图说明：

图1为WY-42对家兔离体小肠平滑肌自主收缩活动的影响。（n=7）。

图2为WY-42对致痉剂收缩的家兔离体小肠舒张作用的量效曲线 （n=7）。

图3为WY-42舒张维拉帕米孵育后BaCl2收缩的家兔离体小肠舒张作用的量效曲线（n=7）。

图4 为WY-42舒张维拉帕米孵育后高钾收缩的家兔离体小肠舒张作用的量效曲线（n=7）。

图5为WY-42舒张维拉帕米孵育后乙酰胆碱收缩的家兔离体小肠舒张作用的量效曲线（n=7）。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行进一步的说明，实施例给出了代表性化合物的制备以及部分生物活性数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进均属于本发明要求保护的范围。

实施例1：1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪（WY-42）的制备

在圆底烧瓶中加入2’,4’-二羟基苯乙酮0.26mol，与232mL原甲酸三乙酯混合均匀，再向其中缓慢滴加高氯酸26.4mL。反应30min后加入300mL乙醚，析出固体。抽滤，将晾干的固体转移入1000mL圆底烧瓶，加入250mL热水，回流两小时，抽滤，用乙醇进行重结晶得7-羟基色酮22.69g，收率53.2%，MS: m/z 162 (M⁺)。

将7-羟基色酮0.15mol放入1000mL圆底烧瓶中，加入5%钯碳2.50g和300mL乙醇，通入氢气，于50℃下反应48h后，抽滤除去钯碳，旋蒸除去乙醇，得7-羟基色满21.39 g，收率92.4%，MS: m/z 150 (M⁺)。

将7-羟基色满0.036mol和70%硫酸40ml置于100ml 单口瓶中，搅拌下滴加氯乙酰乙酸乙酯0.044mol，室温反应12h，将反应液倾入150ml冰水中，搅拌2h，有白色固体析出，抽滤，固体用20ml无水乙醇重结晶，得白色固体4-氯甲基-7,8-二氢-6H-吡喃并[2,3-g]色烯-2-酮7.75g，收率81.6%。

将4-氯甲基-7,8-二氢-6H-吡喃并[2,3-g]色烯-2-酮0.01mol 和2M氢氧化钠置于100ml单口瓶中，80℃搅拌2h，反应液冷却至室温，用6M盐酸酸化至PH约2-3，有固体析出，抽滤，固体用无水乙醇重结晶，得白色固体2.0g，收率86.21%。ESI-MS : m/z 232.8[M+H]⁺。

将1-苯基哌嗪盐酸盐 0.0025mol、EDC0.0025mol、HOBt0.03g, 0.00025mol、二氯甲烷10mol置于50mol单口瓶中，室温反应12h，反应液依次用 6%盐酸10ml洗三次、5%氢氧化钠10ml洗三次，无水硫酸镁干燥，旋蒸，柱层析（石油醚：乙酸乙酯=1:1）得白色固体1-(6,7-二氢-5H-呋喃并[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪0.35g，收率37.2%。Mp：155-156℃。¹H-NMR (600 MHz, CDCl₃): δ 2.00-2.04(m, 2H, CH₂), 2.90-2.92(t, 2H, CH₂), 3.06-3.07(t, 2H, CH₂-N), 3.14-3.17(t, 2H, CH₂-N), 3.66(s, 2H, CH₂-N), 3.74(s, 2H, CH₂), 3.82(s, 2H, CH₂-N), 4.20-4.21(t, 2H, CH₂), 6.89-6.91(m, 4H, Ar-H), 7.25-7.26(m, 1H, Ar-H), 7.27-7.28(m, 2H, Ar-H), 7.41(s, 1H, Ar-H); ESI-MS : m/z 377.4[M+H]⁺。

实施例2：WY-42对家兔离体小肠平滑肌的舒张作用

1．实验材料：（1）动物：新西兰兔，雌雄兼用，体重2.0～2.5kg，沈阳药科大学实验动物中心提供，合格证号：scxk（辽）2009-2002。（2）仪器：HSS-1(B)型恒温浴槽、RM6240B型多道生理信号采集处理系统、JZJ01型肌肉张力换能器、TG-328A电光分析天平、T-500型电子天平、医用供氧器(95%O2+5%CO2)、微量移液器ⅢWKY型50-250μl。（3）药品与试剂：氯化钠（NaCl）：、氯化钾(KCl)、硫酸镁(MgSO₄·7H2O)、磷酸二氢钠(NaH₂PO4)、无水氯化钙(CaCl₂)、碳酸氢钠(NaHCO₃)、葡萄糖(Glucose)、氯化钡(BaCl₂)、磷酸二氢钾(KH₂PO₄)、氯化乙酰胆碱(ACh) 、二甲基亚砜（(CH₃)₂SO）。WY-42，纯度>99%，以二甲基亚砜为溶剂配置成相应浓度。

2. 实验方法

（1）标本的贮备

选健康普通家兔，体重2.0～2.5 kg，雌雄兼用。实验前动物禁食24h，自由饮水。将动物击昏后迅速剖开腹腔找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点，先将肠系膜沿肠缘剪去，再剪取10cm～15cm肠管，迅速放入盛有Tyrode’s液的平皿中洗净并浸浴，当肠管活动明显时，将其剪成约1cm的肠段标本，两端细线结扎，一端固定在通气钩上，置于盛有Tyrode’s液的浴管中(定容15ml)；另一端连于张力换能器上，调节标本基本张力为1g左右，由恒温浴槽提供恒温(37±0.5℃)水浴，通气管以每秒1～2个气泡的速度持续通空气。小肠平滑肌自发收缩活动及变化信号经张力换能器引至RM6240多道生理信号采集处理系统，每隔20分钟换一次营养液，标本平衡1小时。

（2） WY-42对家兔离体小肠自发活动的作用

待标本张力稳定后，向浴管中分别加入不同终浓度的WY-42（10^-6mol/L、10^-5mol/L、10^-4mol/L）0.1ml和溶剂水，观察并记录每种浓度下小肠自主收缩的变化，记录给药前、给药后的张力、振幅的变化。以给药前的张力或振幅为100%，计算给药后小肠张力或振幅的百分数。实验数据以均值±标准差表示，并作配对t检验，判定差异的显著性。

（3）对致痉剂引起的家兔离体小肠收缩的作用

待标本张力稳定后，向浴管中加入致痉剂（氯化乙酰胆碱10^-4mol/L，氯化钡2mg/ml，氯化钾 60mmol/L）,获得最大收缩后，充分冲洗组织，加入同浓度的致痉剂再次诱导对照收缩，当与前一次收缩基本一致后，分别加入WY-42（10^-9mol/L～10^-3mol/L），记录量效曲线。以致痉剂的最大收缩幅度为100%,绘制量效曲线，数据以平均值±标准差表示，并求出EC₅₀。

3.  实验结果

（1）WY-42对家兔离体小肠自发活动的作用

由表1,表2和图1, 可知WY-42能够降低家兔离体小肠自主收缩的张力和振幅。

（2）WY-42对致痉剂引起的家兔离体小肠收缩的作用

由图2和表3可知WY-42舒张乙酰胆碱、氯化钡、氯化钾收缩的家兔离体小肠平滑肌。

实施例3： WY-42 对小肠平滑肌的舒张作用机制与钙离子通道的关系

1.  实验材料：同实施例2。

2.  实验方法：

（1）标本制备：同实施例2。

（2）维拉帕米对WY-42舒张BaCl ₂ 收缩的家兔离体小肠平滑肌的影响

待家兔小肠标本张力稳定后,将基线调节到零，记录一段波形，向浴管中加入BaCl₂(2mg/ml),获得稳定的收缩后,分别加入WY-42（10^-9mol/L～10^-4mol/L）,得到WY-42舒张BaCl₂收缩的量效曲线；充分冲洗组织,标本恢复活性后,加入格列维拉帕米（10^-7 mol/L ），孵育10分钟阻断Ca⁺通道，再次向浴管中加入BaCl₂ (2mg/ml), 获得稳定的收缩后，分别加入WY-42(10^-9mol/L～10^-4mol/L)，重新建立WY-42舒张BaCl₂收缩的量效曲线。比较两次获得的量效曲线图形，对EC₅₀值进行统计学检验，判定差异显著性以确定WY-42的舒张作用与Ca⁺通道的关系。

（3）维拉帕米对对WY-42舒张高钾液收缩的家兔离体小肠平滑肌的影响

家兔小肠标本张力稳定后,将基线调节到零，记录一段波形，向浴管中加入高钾液(60mmol/L),获得稳定的收缩后,分别加入WY-42(10^-9mol/L～10^-4mol/L), 得到WY-42舒张高钾液收缩的量效曲线；充分冲洗组织,标本恢复活性后,加入格列维拉帕米（10^-7 mol/L ） ，孵育10分钟阻断Ca⁺通道，再次向浴管中加入高钾液(60mmol/L), 获得稳定的收缩后，分别加入WY-42（10^-9mol/L～10^-4mol/L），重新建立WY-42舒张高钾液收缩的量效曲线。比较两次获得的量效曲线图形，对EC₅₀值进行统计学检验，判定差异显著性以确定WY-42的舒张作用与Ca⁺通道的关系。

（4）维拉帕米对WY-42舒张氯化乙酰胆碱收缩的家兔离体小肠平滑肌的影响

待家兔小肠标本张力稳定后,将基线调节到零，记录一段波形，向浴管中加入氯化乙酰胆碱（10^-4mol/L），获得稳定的收缩后,分别加入WY-42（10^-9mol/L～10^-4mol/L）,得到WY-42舒张氯化乙酰胆碱收缩的量效曲线；充分冲洗组织,标本恢复活性后,加入格列维拉帕米（10^-7 mol/L ），孵育10分钟阻断Ca⁺通道，再次向浴管中加入氯化乙酰胆碱（10^-4mol/L）, 获得稳定的收缩后，分别加入WY-42（10^-9mol/L～10^-4mol/L），重新建立WY-42舒张氯化乙酰胆碱收缩的量效曲线。比较两次获得的量效曲线图形，对EC₅₀值进行统计学检验，判定差异显著性以确定WY-42的舒张作用与Ca⁺通道的关系。

3.  实验结果

由表和图(表4, 图3～图5), 可知小肠平滑肌加入Ca⁺通道阻断剂维拉帕米（10^-7 mol/L ）孵育后,分别由氯化钡、高钾液和乙酰胆碱引起收缩的WY-42的舒张量效曲线均发生明显变化, WY-42的舒张作用被抑制。

 

   表1.  WY-42对家兔离体小肠自发活动振幅（g）的影响(

±S.D) 

表2.  WY-42对家兔离体小肠自发活动张力(g)的影响(

±S.D)

表3.  WY-42对致痉剂引起小肠平滑肌痉挛的舒张作用的EC ₅₀ 值(

±S.D)

表4. WY-42对给予维拉帕米前后致痉剂引起小肠平滑肌痉挛的舒张作用EC ₅₀ 值(

±S.D)

Claims (6)

1.1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪(I)，其前体药物和药物活性代谢物，以及上述化合物的立体异构体及其药学上可接受的盐：

。

2.1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪在制备治疗肠管平滑肌痉挛性疾病药物中的应用。

3.1-(6,7-二氢-5H-呋喃[3,2-g]色烯-3-乙酰基)-4-苯基哌嗪在制备治疗与钙离子通道引起的胃肠疾病药物中的应用。

4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述的肠管平滑肌痉挛性疾病为胃肠痉挛性绞痛，肠易激综合症引起的胃肠功能紊乱。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：所述的胃肠功能紊乱包括各种原因导致的功能性腹泻。

6.根据权利要求2或3所述的用途，其特征在于：其最小有效剂量为10^-9 mol/L。

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