CN102719513A - 一种纤维素降解菌降解能力的判定方法 - Google Patents
一种纤维素降解菌降解能力的判定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102719513A CN102719513A CN2012102410463A CN201210241046A CN102719513A CN 102719513 A CN102719513 A CN 102719513A CN 2012102410463 A CN2012102410463 A CN 2012102410463A CN 201210241046 A CN201210241046 A CN 201210241046A CN 102719513 A CN102719513 A CN 102719513A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cellulose
- growth rate
- culture medium
- cellulose degradation
- cultivate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种功能菌的筛选方法,具体地说涉及一种纤维素降解菌降解能力的判定方法,属微生物分离筛选技术领域。该判定方法的具体步骤如下:按常规方法制作羧甲基纤维素钠培养基,冷却至20℃—80℃,加入灭菌的培养皿内,待培养基冷却后,把纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,10℃—35℃培养3 h —96 h;用打孔器打取生长整齐一致的菌饼,置于盛有羧甲基纤维素钠培养基的培养皿中央,10℃—35℃培养;培养3 h —96 h,十字交叉法测量菌落直径,并按下式计算菌丝生长速率:菌丝生长速率=菌落直径-打孔器内直径,所得菌丝生长速率值越大表示纤维素降解菌降解能力越强。本发明的优点在于:判定方法快速、简便,为大量筛选纤维素降解菌提供了一种快捷的方法。
Description
技术领域:
本发明涉及一种功能菌的筛选方法,具体地说涉及一种纤维素降解菌降解能力的判定方法,属微生物分离筛选技术领域。
背景技术:
纤维素是地球上储存量最大的可再生生物质资源,广泛存在于植物的枝叶和茎秆中。纤维素能被具有纤维素降解能力的微生物分解成相关产物,广泛应用于食品、化工、纺织、饲料、酿酒、石油、勘探、药物提取、及生物能源领域。纤维素利用的关键是纤维素降解菌(也叫纤维素分解菌)。因此,从自然界中分离筛选降解能力强的纤维素降解菌株非常重要。目前,通过以滤纸为唯一碳源的初筛培养基和羧甲基纤维素钠复筛培养基的方法能够从自然界中分离纯化得到纤维素降解菌。然后对分离出来的纤维素降解菌进行降解能力的判定,从中筛选出具有广泛应用前景的降解能力强的菌株。而目前纤维素降解菌降解能力的判定,一般是通过比较其中纤维素酶活力来进行的。纤维素酶活力的测定方法有很多,包括内切葡聚糖酶活力测定、外切葡聚糖酶活力测定、β-葡萄糖苷酶活力测定和滤纸酶活测定方法。这些方法测定过程非常繁琐且漫长。首先要把分离到的纤维素降解菌株接种到液体培养基中振荡培养6天左右,离心分离得到粗酶液。然后制备柠檬酸缓冲液,将粗酶液加入该缓冲液中,50℃保温一定时间。接着采用DNS法测定还原糖。DNS法测定还原糖的过程也是比较复杂繁琐的,需要采用分光光度计测定并制作相关糖的标准曲线。最后根据测定结果计算酶的活力,通过酶的活力比较纤维素降解菌的降解能力。因此,目前,关于纤维素降解菌降解能力的判定方法非常繁琐,且耗时较长。
发明内容:
本发明拟解决现有技术的不足,提供一种快速、简便的纤维素降解菌降解能力的判定方法。
本发明是这样实现的:
(1)按常规方法制作羧甲基纤维素钠培养基,冷却至20℃—80℃,加入灭菌的培养皿内,待培养基冷却后,把纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,10℃—35℃培养3 h —96 h ;
(2)用打孔器打取生长整齐一致的菌饼,置于盛有羧甲基纤维素钠培养基的培养皿中央,10℃—35℃培养;
(3)培养3 h —96 h,十字交叉法测量菌落直径,并按下式计算菌丝生长速率:菌丝生长速率=菌落直径-打孔器内直径,所得菌丝生长速率值越大表示纤维素降解菌降解能力越强。
本发明的有益效果是:本发明所提供的纤维素降解菌降解能力的判定方法快速、简便,为大量筛选纤维素降解菌提供了一种快捷的方法。
具体实施方式:
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细描述:
实施例一:
(1)按常规方法制作羧甲基纤维素钠培养基,冷却至50℃,加入灭菌的培养皿内。待培养基冷却后,把纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,28℃下培养24h;
(2)用打孔器打取生长整齐一致的菌饼,置于盛有羧甲基纤维素钠培养基的培养皿中央,28℃下培养;
(3)48h后,十字交叉法测量菌落直径,并按下式计算48小时菌丝生长速率:菌丝生长速率=菌落直径-打孔器内直径。所得菌丝生长速率值越大表示纤维素降解菌降解能力越强。
实施例二:
(1)按常规方法制作羧甲基纤维素钠培养基,冷却至20℃,加入灭菌的培养皿内。待培养基冷却后,把纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,10℃下培养3h;
(2)用打孔器打取生长整齐一致的菌饼,置于盛有羧甲基纤维素钠培养基的培养皿中央,10℃下培养;
(3)3h后,十字交叉法测量菌落直径,并按下式计算3h菌丝生长速率:菌丝生长速率=菌落直径-打孔器内直径。所得菌丝生长速率值越大表示纤维素降解菌降解能力越强。
实施例三:
(1)按常规方法制作羧甲基纤维素钠培养基,冷却至80℃,加入灭菌的培养皿内。待培养基冷却后,把纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,35℃下培养46h;
(2)用打孔器打取生长整齐一致的菌饼,置于盛有羧甲基纤维素钠培养基的培养皿中央,35℃下培养;
(3)96h后,十字交叉法测量菌落直径,并按下式计算96h菌丝生长速率:菌丝生长速率=菌落直径-打孔器内直径。所得菌丝生长速率值越大表示纤维素降解菌降解能力越强。
实施例四:
基本同实施例三,不同之处在于:纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,35℃下培养的时间为68h。
实施例五:
基本同实施例三,不同之处在于:纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,35℃下培养的时间为96h。
Claims (1)
1.一种纤维素降解菌降解能力的判定方法,其特征在于该判定方法的具体步骤如下:
(1)按常规方法制作羧甲基纤维素钠培养基,冷却至20℃—80℃,加入灭菌的培养皿内,待培养基冷却后,把纤维素降解菌菌株接种于培养皿中,10℃—35℃培养3 h —96 h;
(2)用打孔器打取生长整齐一致的菌饼,置于盛有羧甲基纤维素钠培养基的培养皿中央,10℃—35℃培养;
(3)培养3 h —96 h,十字交叉法测量菌落直径,并按下式计算菌丝生长速率:菌丝生长速率=菌落直径-打孔器内直径,所得菌丝生长速率值越大表示纤维素降解菌降解能力越强。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2012102410463A CN102719513A (zh) | 2012-07-12 | 2012-07-12 | 一种纤维素降解菌降解能力的判定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2012102410463A CN102719513A (zh) | 2012-07-12 | 2012-07-12 | 一种纤维素降解菌降解能力的判定方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102719513A true CN102719513A (zh) | 2012-10-10 |
Family
ID=46945379
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2012102410463A Pending CN102719513A (zh) | 2012-07-12 | 2012-07-12 | 一种纤维素降解菌降解能力的判定方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102719513A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103114057A (zh) * | 2013-01-19 | 2013-05-22 | 吉林农业大学 | 一株高效降解纤维素的门多萨假单孢菌 |
CN111690710A (zh) * | 2020-06-16 | 2020-09-22 | 贵州省草业研究所 | 一种牛粪纤维素降解菌降解能力的判定方法 |
-
2012
- 2012-07-12 CN CN2012102410463A patent/CN102719513A/zh active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103114057A (zh) * | 2013-01-19 | 2013-05-22 | 吉林农业大学 | 一株高效降解纤维素的门多萨假单孢菌 |
CN103114057B (zh) * | 2013-01-19 | 2016-04-06 | 吉林农业大学 | 一株高效降解纤维素的门多萨假单孢菌 |
CN111690710A (zh) * | 2020-06-16 | 2020-09-22 | 贵州省草业研究所 | 一种牛粪纤维素降解菌降解能力的判定方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Akhter et al. | Production of pectinase by Aspergillus niger cultured in solid state media | |
CN105524840B (zh) | 一株新的藤仓镰刀菌及其发酵生产赤霉素a4的方法 | |
US11279961B2 (en) | Aspergillus oryzae BLCY-006 strain and application thereof in preparation of galactooligosaccharide | |
Rathnan et al. | Isolation, screening, identification and optimized production of extracellular cellulase from Bacillus subtilis using cellulosic waste as carbon source | |
CN101550401B (zh) | 一种低产尿素黄酒酵母的筛选方法 | |
Anisa et al. | Isolation and screening of Aspergillus spp. for pectinolytic activity | |
CN109161495A (zh) | 一种高效降解秸秆纤维素的复合菌剂 | |
CN103773700A (zh) | 一种产高温多聚半乳糖醛酸酶的草酸青霉菌菌株及其应用 | |
CN104805017A (zh) | 一株产β-葡萄糖苷酶的植物内生真菌及其应用 | |
CN102796670B (zh) | 一种黑曲霉菌株及其应用 | |
CN102719513A (zh) | 一种纤维素降解菌降解能力的判定方法 | |
Reddy et al. | Isolation, screening, identification and optimized production of extracellular cellulase from Bacillus subtilis Sub. sps using cellulosic waste as carbon source | |
CN101712940B (zh) | 一株肺炎克雷伯氏菌株及其用途 | |
CN105176852A (zh) | 一种工业化快速发酵生产皮状丝孢酵母的方法 | |
CN102653746A (zh) | 微生物发酵生产低温β-半乳糖苷酶的方法 | |
CN112725194B (zh) | 一株高产纤维素酶的真菌Flavodon sp.x10及其应用 | |
CN102181490B (zh) | 一种生产柠檬酸的方法 | |
ES2714370T3 (es) | Procedimiento para la producción de biogás a partir de un digerido sólido | |
CN102250857A (zh) | 一种提高纤维素酶单位活性的液体发酵工艺 | |
JP5984195B2 (ja) | 菌類を用いた植物バイオマスからのバイオガスの製造装置および方法 | |
KR101856849B1 (ko) | 배추 폐기물로부터 포도당을 생산하는 방법 및 포도당을 포함하는 미세조류 배양액 | |
JP2010081826A (ja) | セルラーゼ生産菌用培地、セルラーゼ生産菌の培養方法、及びセルロースの糖化方法 | |
CN101665819A (zh) | 转基因抗旱大豆土壤环境安全评价方法 | |
CN107903093A (zh) | 一种酵素肥及其制备方法 | |
Lateef et al. | Study the Effect of Some Growth Factor on the Production of Pectinase Enzyme by Locally Isolation Bacteria |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20121010 |