CN102719353A - 一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置及方法 - Google Patents
一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置及方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102719353A CN102719353A CN2012101931459A CN201210193145A CN102719353A CN 102719353 A CN102719353 A CN 102719353A CN 2012101931459 A CN2012101931459 A CN 2012101931459A CN 201210193145 A CN201210193145 A CN 201210193145A CN 102719353 A CN102719353 A CN 102719353A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- cell
- square
- kapillary
- pbs
- square kapillary
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M33/00—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
- C12M33/04—Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus by injection or suction, e.g. using pipettes, syringes, needles
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高选择性,高灵敏度,具有普适性的细胞特异性捕获装置及方法,本发明的核酸适配体固定一次性完成,可以实现对目标癌细胞高选择性和高特异性的捕获,并提供了一种简便易行的洗脱方法。本发明所述捕获方法,无需复杂的表面修饰过程,成本低廉且耗时少,操作简单,具有极为广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及细胞特异性捕获装置及方法,尤其涉及一种基于方形毛细管通道和核酸适配体的细胞亲和色谱对外周血中循环肝癌细胞进行捕获的装置及方法。
背景技术
恶性肿瘤是危害人类健康的一种主要疾病,其致死的主要原因是具有侵袭能力的肿瘤细胞转移其它组织器官。目前肿瘤转移理论认为,肿瘤细胞需要先从原发病灶脱离并进入血液或淋巴循环,才能在远处形成转移灶。同时研究表明循环肿瘤细胞数目与预后有着非常密切的关联。因此对外周血中循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTC)的检测和分析有助于肿瘤的早期诊断、术后监测、疗效评估,为发展个体化治疗提供新的依据。
然而,CTC在外周血中细胞数目稀少,一般在106-107个细胞中仅含有一个CTC。另外CTC缺少有别于其它血细胞的特异性标志物;而且不同组织学类型和分子表型的肿瘤表达不同的标志物。这些问题使得CTC检测和分析面临这重大挑战。目前,CTC检测和分析方法主要有基于细胞形态学或细胞免疫学的细胞计数法、流式细胞术、镭射扫描细胞计数器和光导纤维阵列扫描技术等。这些方法在临床应用上取得不同程度的进展。但是分析仪器昂贵、样品细胞需要预处理和较长的分析时间,以及特异性抗体的缺失等问题使得这些方法无法满足CTC便捷、快速和高特异性和高灵敏的分析要求。
核酸适配体是通过指数富集的配基系统进化技术(SELEX)获得的,能通过折叠成特定空间结构特异性结合小分子,蛋白质乃至细胞的单链DNA或RNA。与和抗体相比,核酸适配体具有获取迅速、稳定、可再生、易于合成和修饰等优点。目前识别活肿瘤细胞的核酸适体已经广泛用于淋巴瘤、肝癌和肺癌等多种肿瘤细胞分型、富集和检测。2009年,W. Tan小组和U. Dharmasiri小组分别报道了基于核酸适配体的微流体通道细胞捕获技术(Y. Xu, J. A. Phillips, J. Yan, Q. Li, Z. H. Fan and W. Tan, Analytical chemistry, 2009, 81,7436-7442.)(J. A. Phillips, Y. Xu, Z. Xia, Z. H. Fan and W. Tan, Analytical chemistry, 2009, 81,1033-1039.)(U. Dharmasiri, S. Balamurugan, A. A. Adams, P. I. Okagbare, A. Obubuafo and S. A.Soper, Electrophoresis, 2009, 30, 3289-3300.)。这些研究给发展核酸适体探针识别和捕获CTC技术提供了基础。
发明内容
本发明旨在克服现有技术中的不足,提供一种便捷、快速和通用性的细胞特异性捕获装置及方法。
为了达到上述目的,本发明提供的技术方案为:
所述用于细胞特异性捕获的装置包括注射器1,通过Teflon细管2与注射器1连通的方形毛细管3;所述方形毛细管3内壁通过生物素-亲和素体系修饰有核酸适配体。
所述基于上述装置特异性捕获外周血中循环癌细胞的方法,包括如下步骤:
(1)合成特异性识别靶细胞的核酸适配体探针;
(2)核酸适配体探针的固定:清洗方形毛细管;用注射器将含5 mg/mL亲和素的D-PBS导入已处理的方形毛细管中,孵育5~15min;用D-PBS洗涤方形毛细管,去除过量亲和素;将合成好的核酸适配体探针注入方形毛细管,培养1min后用D-PBS洗涤方形毛细管,去除游离的或未特异性吸附在方形毛细管壁的核酸适配体探针;
(3)靶细胞的捕获:将含有靶细胞的细胞悬浊液加入开有小口的平皿中,并将平皿置于磁力搅拌器上搅拌;将吸附有核酸适配体探针的方形毛细管插入平皿的小口中,抽动注射器,使含有靶细胞的悬液缓慢通过方形毛细管;用D-PBS洗涤方形毛细管,去除未与核酸适配体探针特异性结合的细胞;
(4)被捕获细胞的洗涤和浓度测定:将空气导入方形毛细管,使被捕获的癌细胞洗脱并用D-PBS收集;用血细胞计数器测定所得溶液中被捕获细胞的数目。
其中,所述核酸适配体探针从5端至3端由三部分组成,分别为肿瘤细胞识别序列、降低空间位阻的T10序列和生物素
其中,所述的靶细胞为肝癌细胞或肺癌细胞。
下面对本发明做进一步说明:
所述用于细胞特异性捕获的装置包括注射器1,通过Teflon细管2与注射器1连通的方形毛细管3,具体制作方法如下:截取一段8cm的方形毛细管,用乙醇清洗以去除残余碎片。然后用一2cm Teflon细管(聚四氟乙烯,PTFE)将该方形毛细管和一支500uL U-100胰岛素注射器连接,500 uL U-100胰岛素注射器作为核酸适体探针固定的载体和流体通道的方形毛细管。
所述基于上述装置特异性捕获外周血中循环癌细胞的方法,包括如下步骤:
(1)合成特异性识别靶癌细胞的核酸适配体探针,其中,特异性识别癌细胞的核酸适配体探针使用DNA/RNA合成仪合成,核酸适配体探针从5端至3端由三部分组成,分别为肿瘤细胞识别序列、降低空间位阻的T10序列和生物素;DNA纯化通过HPLC实现;DNA浓度通过紫外-可见光谱仪测定;
(2)核酸适配体探针的固定:用50 uL 1M NaOH清洗和活化方形毛细管,再用50 uL去离子水洗涤后用注射器将50 uL含5 mg/mL亲和素的D-PBS导入已处理的方形毛细管中,孵育15分钟;用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管,去除过量亲和素;将10 uL合成好的核酸适配体探针注入方形毛细管,培养1min后用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管,去除游离的或未特异性吸附在方形毛细管壁的核酸适配体探针;
(3)癌细胞的捕获:为避免细胞沉降,将1 mL含有癌细胞的细胞悬浊液加入开有小口的平皿中,并将平皿置于磁力搅拌器上搅拌;将吸附有核酸适配体探针的方形毛细管插入平皿的小口中,抽动注射器,使含有癌细胞的悬液缓慢通过方形毛细管;整个过程持续10min,用不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管,去除未与核酸适配体探针特异性结合的细胞;
(4)被捕获细胞的洗涤和浓度测定:将空气导入方形毛细管,使被捕获的癌细胞洗脱并用10 uL不含亲和素的D-PBS收集;用血细胞计数器测定所得溶液中癌细胞的数目。
其中,所述的癌细胞为肝癌细胞或肺癌细胞。
与传统微通道相比,本发明的装置中方形毛细管在亲和细胞分离中具有以下优点:
(1)表面容易修饰捕获探针。
(2)可以通过并联或串联的方式进行多目标物结合,为同时捕获多种肿瘤细胞提供了可能。
(3)在同一直径下,方形毛细管比圆形毛细管拥有更大的表面积和容积,可以在表面修饰更多的捕获探针,实现更大的液体通量。
(4)能显著减少光散射和扭曲变形,提高信背比。
采用本发明的细胞捕获装置及方法,使细胞捕获更加灵敏、便捷和快速;本发明的核酸适配体固定一次性完成,可以实现对目标癌细胞高选择性和高特异性的捕获,并提供了一种简便易行的洗脱方法,本发明所述捕获方法,无需复杂的表面修饰过程,成本低廉且耗时少,操作简单,具有极为广泛的应用前景;本发明的装置不仅适用于对外周血中循环癌细胞的特异性捕获,还适用于从含有复杂细胞成分的样本(全血样本或组织样本)中通过一次样本进样进行特异性靶细胞捕获。
附图说明:
图1为本发明用于细胞特异性捕获的装置的结构示意图;
图2为图1所示装置在捕获细胞时方形毛细管的透视放大图。
图中:1、注射器;2、Teflon细管;3、方形毛细管;6、亲和素;7、生物素-适配体复合物;8、靶细胞。
具体实施方式:
实施例1
如图1和图2所示,所述用于细胞特异性捕获的装置包括注射器1,通过Teflon细管2与注射器1连通的方形毛细管3;所述方形毛细管3内壁吸附有亲和素6和生物素-适配体复合物7。
实施例2:外周血中循环肝癌细胞的特异性捕获方法
(1) DNA序列L1的合成
核酸适配体探针L1(斜体部分为识别肝癌细胞的核酸序列,3’末端修饰生物素):
5’-AGTCCATTTTATTCCTGAATATTTGTTAACCTCATGGACTTTTTTTTTT-3’-biotin
用于捕获肝癌细胞的DNA序列L1使用ABI3400 DNA/RNA合成仪合成。合成原料购自Glen Research (Sterling, VA)。DNA纯化通过ProStar HPLC (Varian)实现。DNA浓度通过Cary Bio-300 紫外-可见光谱仪 (Varian) 测定。
(2) DNA序列L1在捕获装置上的固定
用50 uL 1M NaOH清洗和活化方形毛细管;用50 uL去离子水洗涤5次后用注射器将50 uL含5 mg/mL亲和素的D-PBS导入已处理的方形毛细管中,孵育15分钟;用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管,去除过量亲和素;将10 uL 浓度为50Um 的核酸适配体探针L1注入方形毛细管,培养1min后用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管3次,去除游离的或未特异性吸附在方形毛细管壁的核酸适配体探针L1。
(3)目标肝癌细胞的捕获
为避免细胞沉降,将1mL含有肝癌细胞的悬浊液加入平皿并置于磁力搅拌器上搅拌。将毛细管插入平皿后,缓慢使抽动注射器,使含细胞溶液缓慢通过方形毛细管。整个过程持续10min后,用50 uL D-PBS洗涤三次,移除非特异性吸附的细胞。
为避免细胞沉降,将1 mL含有癌细胞的细胞悬浊液加入开有小口的平皿中,并将平皿置于磁力搅拌器上搅拌;将吸附有核酸适配体探针L1的方形毛细管插入平皿的小口中,抽动注射器,使含有癌细胞的悬液缓慢通过方形毛细管;整个过程持续10min,用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管3次,去除未被特异性吸附的细胞。
(4)目标肝癌细胞的洗涤和浓度测定
将空气导入毛细管,将捕获的细胞被洗脱并用10 uL不含亲和素的D-PBS收集,用血细胞计数器测定所得溶液中细胞的数目。
实施例3:外周血中循环小细胞肺癌细胞(SCLC)的特异性捕获方法
(1) DNA序列L2的合成
核酸适配体探针L2(斜体部分为识别小肺癌细胞的核酸序列,3’末端修饰生物素):
5’-GTGGATTGTTGTGTTCTGTTGGTTTTTGTGTTGTGTTTTTTTTTT-3’ –biotin;
用于捕获小肺癌细胞的DNA序列L2使用ABI3400 DNA/RNA合成仪合成。合成原料购自Glen Research (Sterling, VA)。DNA纯化通过ProStar HPLC (Varian)实现。DNA浓度通过Cary Bio-300 紫外-可见光谱仪 (Varian) 测定。
(2) DNA序列L2在捕获装置上的固定
用50 uL 1M NaOH清洗和活化方形毛细管;用50 uL去离子水洗涤5次后用注射器将50 uL含5 mg/mL亲和素的D-PBS导入已处理的方形毛细管中,孵育15分钟;用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管,去除过量亲和素;将10 uL 浓度为50Um 的核酸适配体探针L2注入方形毛细管,培养1min后用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管3次,去除游离的或未特异性吸附在方形毛细管壁的核酸适配体探针L2。
(3)目标小肺癌细胞的捕获
为避免细胞沉降,将1mL含有目标小肺癌细胞的细胞悬浊液加入平皿并置于磁力搅拌器上搅拌。将毛细管插入平皿后,缓慢使抽动注射器,使含细胞溶液缓慢通过方形毛细管。整个过程持续10min后,用50 uL D-PBS洗涤三次,移除非特异性吸附的细胞。
为避免细胞沉降,将1 mL含有小肺癌细胞的细胞悬浊液加入开有小口的平皿中,并将平皿置于磁力搅拌器上搅拌;将吸附有核酸适配体探针L2的方形毛细管插入平皿的小口中,抽动注射器,使含有癌细胞的悬液缓慢通过方形毛细管;整个过程持续10min,用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管3次,去除未被特异性吸附的细胞。
(4)目标小肺癌细胞的洗涤和浓度测定
将空气导入毛细管,将捕获的细胞被洗脱并用10 uL不含亲和素的D-PBS收集,用血细胞计数器测定所得溶液中细胞的数目。
实施例4:外周血中循环非小细胞肺癌细胞(NSCLC)的特异性捕获方法
(1) DNA序列L3的合成
核酸适配体探针L3(斜体部分为识别非小肺癌细胞的核酸序列,3’末端修饰生物素):
5’-CGAACAGGTGGGTGGGTTGGGTGGATTGTTCGTTTTTTTTTT-3’ –biotin;
用于捕获非小肺癌细胞的DNA序列L3使用ABI3400 DNA/RNA合成仪合成。合成原料购自Glen Research (Sterling, VA)。DNA纯化通过ProStar HPLC (Varian)实现。DNA浓度通过Cary Bio-300 紫外-可见光谱仪 (Varian) 测定。
(2) DNA序列L3在捕获装置上的固定
用50 uL 1M NaOH清洗和活化方形毛细管;用50 uL去离子水洗涤5次后用注射器将50 uL含5 mg/mL亲和素的D-PBS导入已处理的方形毛细管中,孵育15分钟;用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管,去除过量亲和素;将10 uL 浓度为50Um 的核酸适配体探针L3注入方形毛细管,培养1min后用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管3次,去除游离的或未特异性吸附在方形毛细管壁的核酸适配体探针L3。
(3)目标小非肺癌细胞的捕获
为避免细胞沉降,将1mL含有目标非小肺癌细胞的细胞悬浊液加入平皿并置于磁力搅拌器上搅拌。将毛细管插入平皿后,缓慢使抽动注射器,使含细胞溶液缓慢通过方形毛细管。整个过程持续10min后,用50 uL D-PBS洗涤三次,移除非特异性吸附的细胞。
为避免细胞沉降,将1 mL含有非小肺癌细胞的细胞悬浊液加入开有小口的平皿中,并将平皿置于磁力搅拌器上搅拌;将吸附有核酸适配体探针L3的方形毛细管插入平皿的小口中,抽动注射器,使含有癌细胞的悬液缓慢通过方形毛细管;整个过程持续10min,用50 uL不含亲和素的D-PBS洗涤方形毛细管3次,去除未被特异性吸附的细胞。
(4)目标非小肺癌细胞的洗涤和浓度测定
将空气导入毛细管,将捕获的细胞被洗脱并用10 uL不含亲和素的D-PBS收集,用血细胞计数器测定所得溶液中细胞的数目。
Claims (6)
1.一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置,其特征在于,所述装置包括注射器(1),通过Teflon细管(2)与注射器(1)连通的方形毛细管(3)。
2.如权利要求1所述的装置,其特征在于,所述方形毛细管(3)内壁通过生物素-亲和素体系修饰有核酸适配体。
3.一种基于权利要求1或2所述的装置特异性捕获外周血中循环癌细胞的方法,包括如下步骤:
(1)合成特异性识别靶细胞的核酸适配体探针;
(2)核酸适配体探针的固定:清洗方形毛细管;用注射器将含5 mg/mL亲和素的D-PBS导入已处理的方形毛细管中,孵育5~15min;用D-PBS洗涤方形毛细管,去除过量亲和素;将合成好的核酸适配体探针注入方形毛细管,培养1min后用D-PBS洗涤方形毛细管,去除游离的或未特异性吸附在方形毛细管壁的核酸适配体探针;
(3)靶细胞的捕获:将含有靶细胞的细胞悬浊液加入开有小口的平皿中,并将平皿置于磁力搅拌器上搅拌;将吸附有核酸适配体探针的方形毛细管插入平皿的小口中,抽动注射器,使含有靶细胞的悬液缓慢通过方形毛细管;用D-PBS洗涤方形毛细管,去除未与核酸适配体探针特异性结合的细胞;
(4)被捕获细胞的洗涤和浓度测定:将空气导入方形毛细管,使被捕获的癌细胞洗脱并用D-PBS收集;测定所得溶液中被捕获细胞的数目。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述核酸适配体探针从5端至3端由三部分组成,分别为肿瘤细胞识别序列、降低空间位阻的T10序列和生物素。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的靶细胞为肝癌细胞或肺癌细胞。
6.如权利要求1所述的装置在从含有复杂细胞成分的样本中通过一次样本进样进行特异性靶细胞捕获中的应用;其中所述的含有复杂细胞成分的样本是全血样本或组织样本。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210193145.9A CN102719353B (zh) | 2012-06-13 | 2012-06-13 | 一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置及方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210193145.9A CN102719353B (zh) | 2012-06-13 | 2012-06-13 | 一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置及方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102719353A true CN102719353A (zh) | 2012-10-10 |
CN102719353B CN102719353B (zh) | 2014-07-30 |
Family
ID=46945230
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210193145.9A Active CN102719353B (zh) | 2012-06-13 | 2012-06-13 | 一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置及方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102719353B (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018076592A1 (zh) * | 2016-10-31 | 2018-05-03 | 广州益养生物科技有限公司 | 一种用于血液液体活检的体内收集装置 |
CN108085236A (zh) * | 2016-11-21 | 2018-05-29 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种可特异性捕获肿瘤细胞的毛细管柱的制备与应用 |
CN112113948A (zh) * | 2020-08-05 | 2020-12-22 | 武汉市农业科学院 | 一种病原微生物快速检测方法 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101634629A (zh) * | 2009-08-27 | 2010-01-27 | 电子科技大学 | 一种基于光学拉伸和光纤干涉传感技术的癌细胞检测方法 |
CN101738418A (zh) * | 2010-01-21 | 2010-06-16 | 重庆大学 | 集成细胞操纵和检测的微流控芯片系统 |
CN101754719A (zh) * | 2007-05-21 | 2010-06-23 | 新动力学有限公司 | 用于细胞取样的细针组件 |
CN101896599A (zh) * | 2007-10-09 | 2010-11-24 | 圣母大学 | 多靶标检测用微流体平台 |
CN102176882A (zh) * | 2008-08-07 | 2011-09-07 | 生物活性外科公司 | 医疗器械和植入物的干细胞捕获和固定涂层 |
CN202011883U (zh) * | 2007-12-12 | 2011-10-19 | 里兰斯坦福初级大学理事会 | 用于捕获和分离目标细胞的装置 |
CN102227637A (zh) * | 2008-09-26 | 2011-10-26 | 通用医疗公司 | 捕获粒子 |
CN102414562A (zh) * | 2009-03-24 | 2012-04-11 | 生物概念股份有限公司 | 细胞捕获和分析的装置和方法 |
-
2012
- 2012-06-13 CN CN201210193145.9A patent/CN102719353B/zh active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101754719A (zh) * | 2007-05-21 | 2010-06-23 | 新动力学有限公司 | 用于细胞取样的细针组件 |
CN101896599A (zh) * | 2007-10-09 | 2010-11-24 | 圣母大学 | 多靶标检测用微流体平台 |
CN202011883U (zh) * | 2007-12-12 | 2011-10-19 | 里兰斯坦福初级大学理事会 | 用于捕获和分离目标细胞的装置 |
CN102176882A (zh) * | 2008-08-07 | 2011-09-07 | 生物活性外科公司 | 医疗器械和植入物的干细胞捕获和固定涂层 |
CN102227637A (zh) * | 2008-09-26 | 2011-10-26 | 通用医疗公司 | 捕获粒子 |
CN102414562A (zh) * | 2009-03-24 | 2012-04-11 | 生物概念股份有限公司 | 细胞捕获和分析的装置和方法 |
CN101634629A (zh) * | 2009-08-27 | 2010-01-27 | 电子科技大学 | 一种基于光学拉伸和光纤干涉传感技术的癌细胞检测方法 |
CN101738418A (zh) * | 2010-01-21 | 2010-06-16 | 重庆大学 | 集成细胞操纵和检测的微流控芯片系统 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
崔承等: "核酸适配体及其相关药物研究进展", 《中国新药杂志》 * |
樊春海等: "《DNA纳米技术:分子传感、计算与机器》", 31 December 2011, 科学出版社 * |
滕小梅等: "激光捕获显微切割技术在肿瘤研究中的作用", 《中外医疗》 * |
王国庆等: "基于核酸适配体和纳米粒子的光学探针", 《化学进展》 * |
胡燕等: "核酸适配体在肿瘤学中的应用研究进展", 《基础医学与临床》 * |
赵强等: "核酸适配体亲和色谱的研究进展", 《色谱》 * |
郭秋平等: "基于聚合酶反应和发夹型核酸适体的蛋白质荧光检测新方法", 《高等学校化学学报》 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2018076592A1 (zh) * | 2016-10-31 | 2018-05-03 | 广州益养生物科技有限公司 | 一种用于血液液体活检的体内收集装置 |
CN108085236A (zh) * | 2016-11-21 | 2018-05-29 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种可特异性捕获肿瘤细胞的毛细管柱的制备与应用 |
CN112113948A (zh) * | 2020-08-05 | 2020-12-22 | 武汉市农业科学院 | 一种病原微生物快速检测方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102719353B (zh) | 2014-07-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6352588B2 (ja) | 希少ではない細胞を用いて希少細胞を検出する方法 | |
Wang et al. | Recognition and capture of metastatic hepatocellular carcinoma cells using aptamer-conjugated quantum dots and magnetic particles | |
Xiong et al. | DNA walker-powered ratiometric SERS cytosensor of circulating tumor cells with single-cell sensitivity | |
US20210310970A1 (en) | Single cell analysis using secondary ion mass spectrometry | |
CN104651315A (zh) | 一种在微流控芯片中同时利用抗原抗体特异性识别和细胞尺寸差别分选肿瘤细胞的方法 | |
Cheng et al. | Enumeration and characterization of circulating tumor cells and its application in advanced gastric cancer | |
US20170297036A1 (en) | Method and apparatus for performing contactless optically-induced dielectrophoresis for separation of circulating tumor cells | |
CN102719353B (zh) | 一种用于外周血中循环癌细胞的特异性捕获的装置及方法 | |
JP6277894B2 (ja) | 上皮間葉転換の有無を判別する方法 | |
CN103602658A (zh) | 一种新型靶向核酸分子的捕获与富集技术 | |
ES2799705T3 (es) | Procedimientos de multiplexación cíclica de muestras y obtención de imágenes in situ | |
Hu et al. | Noninvasive diagnosis of nasopharyngeal carcinoma based on phenotypic profiling of viral and tumor markers on plasma extracellular vesicles | |
CN207130273U (zh) | 一种可捕获细菌的磁力微流控芯片 | |
CN106754938B (zh) | 一种检测人肾透明细胞癌细胞的核酸适体及其在制备检测制剂中的应用 | |
Guo et al. | Study on the Method of Isolating the Aptamer from the Surface of HepG2 Cells | |
CN101936992A (zh) | 快速检测大肠杆菌的方法及所用到的微流控芯片及其制备工艺 | |
CN106442459A (zh) | 一种不同亲和配基功能化的金基萃取材料及其在表面等离激元光学亲和夹心分析中的应用 | |
CN103353527A (zh) | 检测肿瘤侵袭性的pnc检测试剂盒及其应用 | |
Chen et al. | Aptamer‐based thrombin assay on microfluidic platform | |
Yang et al. | Recent advances in protein profiling of tissues and tissue fluids | |
Zeng et al. | Development of a potential TiO2-nanofiber platform for isolation of circulating tumor cells of nasopharyngeal carcinoma | |
Li et al. | Microfluidic chip for cancer cell detection and diagnosis | |
Sozmen et al. | Utilizing magnetic levitation to detect lung cancer-associated exosomes | |
Xia et al. | Size‐resolved counting of circulating tumor cells on pinched flow‐based microfluidic cytometry | |
Liu et al. | A Versatile Design‐Enabled Analysis of Circulating Extracellular Vesicles in Disease Diagnosis |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |