CN102712918A - 低温和高温酶体系 - Google Patents
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Abstract
一种酶体系，包含第一pH中性组合物和第二pH中性组合物。所述第一pH中性组合物包含有效除去血液和血红蛋白的低温酶。所述第二pH中性组合物包含有效除去粘液、血纤蛋白和脂肪的高温酶。在一个实施方式中，所述低温酶的活化温度为约50℉至约120℉，以及所述高温酶的活化温度为约140℉至约180℉。
Description
技术领域
本发明主要涉及酶促洗涤剂领域。具体而言，本发明涉及包含低温酶组合物和高温酶组合物的酶洗涤剂体系和使用该酶洗涤剂体系清洗手术装置或器械的方法。
背景技术
设计为被洗涤或重复使用的在医疗卫生行业中使用的手术装置和器械需要适当地清洗，从而在完成医疗操作后,在从所述装置中除去生物质（例如,粘液、血纤蛋白、脂肪和血红蛋白）方面符合由美国医疗仪器促进会(AAMI)和美国手术室护理协会(AORAN)建议的健康规范要求。一般而言，在手术装置已经被使用之后，其被置于容器中并喷洒液体以防止在污垢变性过程中污垢硬化。所述装置被送到无菌区域待清洗。在人工预清洗步骤之后，所述装置被分类并再次置入到线编网篮中。然后，所述手术装置被置入到自动再处理清洗机消毒器中清洗。
在自动再处理清洗机消毒器中,所述手术装置经历多种清洗方案。通常地，首先用第一洗涤溶液喷雾所述装置，该第一洗涤溶液可以包含预浸泡溶液或低温机械洗涤溶液。在用第一洗涤溶液喷雾后，用第二洗涤溶液或主洗涤剂洗涤洗涤所述装置。一般而言，所述第一洗涤步骤使用温度为约50华氏度(℉)至约120℉的冷自来水。因为通常使用冷水更容易除去血液，所以在较低的温度下实施第一洗涤步骤。为了在第一洗涤步骤中帮助进一步促进除去血液和血红蛋白，现有的预浸泡洗涤剂可以包含一种或多种酶。
所述第二洗涤步骤通常使用加热至约140℉至约180℉的温度的水,从而有利于从所述手术装置中除去生物质。在第二次洗涤步骤之后，接着，使所述手术器件经历一系列的漂洗，从而漂洗掉所述洗涤剂组合物。例如，所述清洗机(washer)可以包括热水漂洗、热漂洗或纯净水漂洗。在所述热漂洗步骤中，水被加热至约180℉的温度。在所述纯净水漂洗步骤中，使用去离子水或纯化水。在再处理所述手术装置中的最后步骤之一可以为润滑步骤以确保适当的润滑，因此延长了所述手术装置或器械的保存期。在清洗后，所述手术装置被移动至其它的待消毒区域。
发明内容
在一个实施方式中，本发明为包含第一组合物和第二组合物的酶体系。所述第一组合物包含有效除去血液和血红蛋白的低温酶。所述第二组合物包含有效除去粘液、血纤蛋白和脂肪的高温酶。
在另一实施方式中,本发明为用于清洗器械的洗涤剂体系。所述洗涤剂体系包含第一pH中性酶组合物和第二pH中性酶组合物。第一和第二酶组合物各自包含约5%至约20%的酶。
在又一实施方式中,本发明为清洗手术器械的方法。所述方法包括如下步骤：使所述手术器械与第一酶组合物接触，在第二酶组合物中洗涤所述手术器械，和漂洗所述手术器械。
虽然公开了多个实施方式，但是从显示和描述本发明的说明性的实施方式的下面的详细描述中，本发明的其它实施方式对于本领域的技术人员而言是显而易见的。因此，附图和详细说明应被视为实质说明性的，而非限制性的。
具体实施方式
本发明涉及一种酶体系和使用用于从手术装置或器械中除去污垢的酶体系的方法。所述酶体系能有效清洗在临床操作中通常出现的污垢，例如，蛋白质、生物质、血纤蛋白、粘液、脂肪、碳水化合物和血红蛋白。所述酶体系还产生了最低限度的快速破裂泡沫至无泡、耐硬水、不会促进结垢并且在各种表面上使用安全。例如，所述酶体系与不锈钢、黄铜、铜、软金属(包括铝)和塑料相容。所述酶体系包含：在洗涤周期的第一洗涤步骤(例如，预浸泡步骤或低温机械洗涤步骤)中使用的第一pH中性酶组合物；和在洗涤周期的第二洗涤步骤(例如，主洗涤剂洗涤步骤或高温洗涤步骤)中使用的第二pH中性酶组合物。在一个实施方式中，所述酶体系基本无表面活性剂和含磷化合物，并且完全是生物可降解的。所述酶体系在宽范围的水硬度条件下有效，并且可以用于多种行业，包括，但不限于，医疗卫生行业。例如，所述酶体系可以用于医疗卫生行业的清洗用途，包括，但不限于，手术装置。特别地，所述酶体系被设计用于处理适当的医疗装置(包括手术器械)的在医院使用的清洗机/消毒器单元和自动机械清洗机。尽管所述酶体系被描述为用于医疗卫生行业以清洗手术器械和装置，但是所述酶体系可以用于需要从表面上除去蛋白质、生物质、血纤蛋白、粘液、脂肪、碳水化合物和血红蛋白的任何行业。
在一个实施方式中,所述酶体系形成极少量的泡沫,使得其适合于手洗水槽或自动设备再处理用途。所述组合物特别有利的是在器械保养环境下低起泡。例如，当人工清洗手术装置或器械时，对于技术人员有利的是当它们被浸没时能够看到器械，从而当伸进水槽时他们不会割伤或伤害到他们自己。在器械的再处理领域，低起泡组合物允许机器适当地并容易地将所述组合物从手术装置或器械中漂洗掉并适当地清洗它们。此外，高起泡洗涤剂组合物将也会降低自动清洗机的加压能力(pressure capabilities)。
在一个实施方式中，所述酶体系包含第一酶组合物和第二酶组合物。两种酶组合物都包含酶和一种或多种的酶稳定剂、填料、凝固剂、螯合剂、水质调理剂、增效剂、加工助剂和防腐剂。所述第一酶组合物包含在低温下活化的酶，以及所述第二酶组合物包含在高温下活化的酶。例如，所述第一酶组合物的酶在约50℉至约120℉的温度下被活化，以及所述第二酶组合物的酶在约140℉至约180℉的温度下被活化。所述酶组合物的pH确保保护酶，并应该在中性范围内。所述第一和第二酶组合物都具有约5至约9的中性pH。特别是，所述酶组合物的pH为约8至约9。
酶
酶为极其有效的催化剂。实际上，非常少的量将会加速污垢的降解和污垢的转变反应(alteration reaction)的速率，而在该过程中其本身不会被消耗。在本发明中使用的酶起到使在表面上遭遇到的一种或多种类型的污垢残留物降解或转变，由此除去污垢或使得污垢更容易被所述酶体系的其它组分除去。特别是，在本发明中使用的酶提供了从基体上除去生物质(例如，粘液、血纤蛋白、脂肪和血红蛋白)的合意的活性。污垢残留物的降解和转变通过降低使污垢结合到被清洗的表面或织物上的物理化学力(即，所述污垢变得更易溶于水)都可以提高去垢性。例如，一种或多种的蛋白酶将存在于污垢残留物中的配合物、大分子蛋白结构分裂为更简单的短链分子，它们本身更容易从表面解吸附、溶液化或者更容易被包含所述蛋白酶的去污溶液除去。
基于所述组合物所靶向的污垢或待清洗的表面上或位置所存在的污垢的类型选择酶。在本发明所述的酶体系中，低温酶被用于清洗血液和血红蛋白，以及高温酶被用于清洗粘液、血纤蛋白和脂肪。在本发明示例性的酶体系中，用于冷的预浸泡或洗涤步骤的所述第一酶组合物包含低温作用酶，以及用于热的主洗涤剂洗涤步骤的所述第二酶组合物包含高温作用酶。在一个实施方式中，低温作用酶为活化温度为约50℉至约120℉的酶，以及高温作用酶为活化温度为约140℉至约180℉的酶。
使一种或多种的污垢降解或转变(即，促进或协助将污垢从待清洗的表面上除去)的酶已经被确认，以及根据在这样的降解或转变过程中它们所催化的化学反应的类型可以分为六大类。这些类为(1)氧化还原酶；(2)转移酶；(3)水解酶；(4)裂合酶；(5)异构酶；和(6)连接酶。数种酶可能适合于多于一类。关于酶的有价值的参考文献为"工业酶(Industrial Enzymes)",Scott,D.,in Kirk-Othmer Encyclopedia ofChemical Technology,3rd Edition,(editors Grayson,M.和EcKroth,D.)Vol.9,pp.173-224,John Wiley&Sons,New York,1980。
一般而言，所述氧化还原酶、水解酶、裂合酶和连接酶降解污垢残留物，而因此除去污垢或使得污垢更容易被除去；以及转移酶和异构酶使残留物以相同的效果转变。在这些酶分类中，所述水解酶(包括酯酶、糖酶或蛋白酶)特别适合于本发明。
所述水解酶催化水加成到污垢中，通过与它们相互作用，以及通常导致所述污垢残留物降解或瓦解。污垢残留物的这种瓦解在洗涤剂用途中特别重要并具有实际意义，因为粘附到表面的污垢松脱并被除去，或者通过去污作用更容易被除去。因此，水解酶为用于清洗组合物的合适的一类酶。特别合适的水解酶包括，但不限于，酯酶、糖酶和蛋白酶。特别是，蛋白酶适合于本发明的组合物。
所述蛋白酶催化氨基酸聚合物的肽键连接的水解。例如，所述蛋白酶可以催化肽、多肽、蛋白质和相关物质，通常为蛋白复合体，例如酪蛋白，其包含作为蛋白质必要成分的碳水化合物(糖基(glycogroup))和磷，并作为被磷酸钙保持在一起的球形颗粒存在。其它的球形颗粒包括乳球蛋白，其可以被认为是包括乳脂肪球膜的蛋白质和脂质的夹心物。因而，蛋白酶将存在于污垢残留物中的配合物、大分子蛋白结构分裂为更简单的短链分子，它们本身更容易从表面解吸附、溶液化或者更容易被包含所述蛋白酶的去污溶液除去。
蛋白酶可以进一步分为三种不同的亚类(根据最适宜的pH分类)(即，在某一pH范围内最佳的酶活性)。这些三个亚类为碱性、中性和酸性的蛋白酶。特别适合于本发明的为pH中性蛋白酶。
本发明的所述酶体系特别包含至少一种蛋白酶。特别地，所述酶体系包含：在第一酶组合物中的低温蛋白酶和在第二酶组合物中的高温蛋白酶。还令人惊奇地发现本发明的酶体系不仅在显著延长的保存期内稳定蛋白酶，还显著提高了蛋白酶对分解蛋白质的活性并提高了污垢除去性。此外，在一种或多种的额外的酶，例如，淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、过氧化物酶、内切葡聚糖酶及其混合物，特别是在脂肪酶或淀粉酶的存在下出现提高的蛋白酶活性。
可以用于本发明的组合物中的商购可得的蛋白水解酶的实例包括(商品名)：
来自迟缓芽胞杆菌型的蛋白酶，例如
和
来自藓样芽胞杆菌的蛋白酶，例如
和
和来自解淀粉芽胞杆菌的蛋白酶，例如
特别合适的商购可得的蛋白酶包括：Novoenzymes(丹麦)生产的商品名为
或的酶；Gist-Brocades(荷兰)生产的商品名为
或的酶；Genencor International生产的商品名为
Purafect OX和Properase的酶；Solvay Enzymes生产的商品名为
或
的酶等。也可以使用这些蛋白酶的混合物。例如，为用于洗涤循环的第一洗涤步骤的特别合适的蛋白酶，可以应用于低温清洗程序中，例如，从约70℉至约120℉。
为选择用于高温去污溶液的蛋白酶，例如，从约140℉至约170℉。在如下专利公开中描述了合适的去污蛋白酶：关于Novoenzyme的GB 1,243,784,WO 9203529A(酶/抑制剂体系),WO 9318140A和WO 9425583(重组类似胰岛素的蛋白酶)；关于宝洁公司的WO9510591A,WO 9507791(具有降低的吸附和增强的水解的蛋白酶),WO 95/30010,WO 95/30011,WO 95/29979；关于GenencorInternational的WO 95/10615(解淀粉芽胞杆菌枯草杆菌蛋白酶)；EP130,756A(蛋白酶A);EP 303,761A(蛋白酶B)；和EP 130,756A。与在这些参考文献中的蛋白酶的氨基酸序列相比，在本发明的固态组合物中使用的变异的蛋白酶优选为至少80%同源染色体，优选具有至少80%的序列同一性。
适合于本发明的组合物中的脂肪酶可以来自植物、动物或微生物。由于脂肪酶还可以有利于清洗包含脂肪、油或蜡的污垢，例如动物或植物脂肪、油或蜡(例如，沙拉酱、黄油、猪油、巧克力、唇膏)，脂肪酶可以用作第二酶组合物中的酶。此外，纤维素酶可以有利地用于清洗包含纤维素或包含起到其它污垢附着点作用的纤维素血纤蛋白的污垢。合适的脂肪酶包括来自假单胞细菌属(Pseudomonas)(例如，假单胞细菌ATCC 19.154)或来自腐质霉属(例如，腐质霉菌(通常在米曲霉中重组地制备))的脂肪酶。所述脂肪酶可以为纯的或是提取物的组分，以及或者为野生型或变异体(或者化学变异体或重组体)。
在本发明的组合物中可以使用的脂肪酶的实例包括:由AmanoPharmaceutical有限公司(日本)生产的商品名为Lipase P"Amano"或"Amano-P"的脂肪酶，或者Novoenzymes生产的商品名为
的脂肪酶等。在本发明的固态组合物中可以使用的其它商购可得的脂肪酶包括：Amano-CES，由粘稠色杆菌(Chromobacter viscosum)衍生得到的脂肪酶，例如，来自东洋酿造公司(Tagata,日本)的Chromobacter viscosum var.lipolyticum
LB 3673；来自U.S.Biochemical Corp.(美国)和Disoynth公司的Chromobacter viscosum脂肪酶，以及来自Pseudomonas gladioli或Humicola lanuginosa的脂肪酶。
合适的脂肪酶为由Novoenzymes生产的商品名为
的脂肪酶。在下面的专利文件中描述了合适的脂肪酶：关于Novoenzymes的WO 9414951A(稳定的脂肪酶)、WO 9205249、RD 94359044、GB1,372,034、关于Amano Pharmaceutical有限公司的在1978年2月24日公开的日本专利申请第53,20487号，以及EP 341,947。例如，脂肪酶可以用于洗涤步骤中以除去粘液、脂肪或血纤蛋白。
适合于本发明的组合物中的淀粉酶可以来自植物、动物或微生物。所述淀粉酶可以为纯的或是微生物提取物的组分，以及或者为野生型或变异体(或者化学变异体或重组体)，特别是在洗涤或预浸泡条件下比野生型淀粉酶更稳定的变异体。在本发明的酶体系中可以使用的淀粉酶的实例包括：Gist-
(荷兰)生产的商品名为Rapidase的酶；Novoenzymes生产的商品名为
或的酶；Genencor生产的商品名为Purastar STL或PurastarOXAM的酶等。特别合适的商购可得的淀粉酶包括：Novoenzymes生产的商品名为
稳定性提高的变异的淀粉酶。也可以使用这些淀粉酶的混合物。适合于本发明的组合物的淀粉酶包括：在关于Novoenzymes的WO 95/26397、PCT/DK96/00056和GB 1,296,839中描述的α-淀粉酶和J.Biol.Chem.,260(11):6518-6521(1985)；关于Novoenzymes的WO 9510603A、WO 9509909A和WO 9402597；在WO 9402597中公开的引用文献；和关于杰能科国际(GenencorInternational)的WO 9418314中描述的稳定性提高的酶。与在这些参考文献中的蛋白质的氨基酸序列相比，在本发明的固态组合物中使用的变异的α-淀粉酶可以为至少80%同源性，优选具有至少80%的序列同一性。
适合于本发明的组合物中的纤维素酶可以来自植物、动物或微生物。所述纤维素酶可以为纯化的或是微生物提取物的组分，以及或者为野生型或变异体(或者化学变异体或重组体)，特别是在洗涤或预浸泡条件下比野生型淀粉酶更稳定的变异体。在本发明的组合物中可以使用的纤维素酶的实例包括：Novoenzymes生产的商品名为
或
的酶，或者Genencor生产的纤维素酶等。也可以使用这些纤维素酶的混合物。在下面的专利文件中描述了合适的纤维素酶：属于Novoenzyme的美国专利号第4,435,307号、GB-A-2.075.028、GB-A-2.095.275、DE-OS-2.247.832、WO 9117243和WO 9414951A(稳定化的纤维素酶)。
适合用于本发明的固态的组合物的其它酶包括：角质酶、过氧化物酶、葡萄糖酶等，以及可以来自植物、动物或微生物。所述酶可以为纯的或是微生物提取物的组分，以及或者为野生型或变异体(或者化学变异体或重组体)，特别是在洗涤或预浸泡条件下比野生型淀粉酶更稳定的变异体。
可以将不同的另外的酶的混合物加入到本发明中。虽然上面已经描述了多种具体的酶，但是应该理解可以使用可以赋予所述组合物所需的酶活性的任何额外的酶，本发明的实施方式不以任何方式受限于酶的特定选择。
酶稳定体系
酶体系的第一和第二酶组合物还各自包含酶稳定体系以使各自组合物中的酶稳定。例如，本发明的酶体系可以包含水溶性的钙和/或镁离子源。如果仅使用一种阳离子，钙离子通常比镁离子更有效且在此更适合。尽管可以根据包括加入酶的多样性、类型和浓度的因素变化，组合物，特别是液体，可以包含约1至约30毫摩尔，特别地约2至约20毫摩尔，更特别地约8至约12毫摩尔的钙离子每升最终的组合物。特别地，使用水溶性的钙或镁盐，包括，例如，氯化钙、氢氧化钙、甲酸钙、苹果酸钙、马来酸钙、氢氧化钙和乙酸钙。更普遍地，可以使用硫酸钙或对应于所列出的钙盐的镁盐。进一步提高钙和/或镁的浓度可能是有用的，例如，促进某些类型的表面活性剂的去油脂作用(grease-cutting action)。
合适的酶稳定体系的实例包括，但不限于，硫酸钠(可获自GilesChemical Industries)和无水氯化钙(calcium chloride dehydrate)(可获自Dow Chemical Company)。
填料
所述酶体系包括有效量的洗涤剂填料,其本身不起清洗剂的作用,但是与清洁剂协作以提高所述组合物的总的清洁能力。适合用于本发明的清洗组合物的去污填料的实例包括：硫酸钠、氯化钠、淀粉、糖、C1-C10的烷二醇，例如丙二醇等。商购可得的填料的实例包括，但不限于，硫酸钠(可获自Giles Chemical Industries)和葡萄糖酸钠(可获自Jungbunzlauer公司)。
凝固剂
除了增效剂,或以增效剂的形式外,所述酶体系还包括凝固剂。凝固剂为有机或无机的一种化合物或多种化合物的体系，其显著地促进所述组合物的均匀固化。所述凝固剂与清洁剂和本发明的组合物的其它活性成分相容，并且能够为处理的组合物提供有效量的硬度和/或水溶解性。当混合并固化时，所述凝固剂还能够与其它组分形成均一的基体以在使用过程中由固态组合物的组分均匀地溶解。
在所述固态洗涤剂组合物中包含的凝固剂的量根据包括，但不限于如下因素而变化：制备的固态组合物的类型、固态组合物的组分、固态组合物的预期的用途、在使用过程的时间内施加到固态组合物调剂用预制溶液(dispensing solution)的量、调剂用预制溶液的温度、调剂用预制溶液的硬度、固态组合物的物理尺寸和其它组分的浓度。特别是，在连续混合条件下和在或低于所述凝固剂的熔融温度下，包含在所述酶体系中的凝固剂的量有效与其它组分组合以形成均一的混合物。
在约30℃至约50℃环境温度下的,特别是在约35℃至约45℃的环境温度下,所述凝固剂与其它组分形成基体,并硬化为固态形式。在混合停止后约1分钟至约3小时，特别是在约2分钟至约2小时，且特别优选在约5分钟至约1小时的时间内由所述混合体系调剂(dispense)所述混合物。可以向混合物应用来自外源的最小量的热量以促进混合物的处理。优选地，当置入到水性介质中时，在所述组合物中包含的凝固剂的量有效地提供所需的硬度和所需的加工的组合物的受控的溶解速率以在使用过程中达到来自固化的组合物的所需的调剂速率。
所述凝固剂可以为有机或无机硬化剂。合适的有机硬化剂为聚乙二醇(PEG)化合物。包含聚乙二醇硬化剂的固体组合物的固化速率将根据，至少部分地根据加入到组合物中的聚乙二醇的量和分子量而变化。合适的聚乙二醇的实例包括，但不限于：通式为H(OCH2CH2)nOH的固态聚乙二醇，其中，n大于15，特别地为约30至约1700。通常地，所述聚乙二醇为片状的或自流动粉末形式的固体，其分子量为约1,000至约100,000，特别地，分子量约为至少1,450至约20,000，更特别地，约1,450至约8,000。所述聚乙二醇以约2wt%至约30wt%，特别的约2.4wt%至约25wt%，且更特别地约3%至约22wt%的浓度存在。合适的聚乙二醇化合物包括，但不限于：尤其是，PEG 4000、PEG 1450和PEG 8000，其中PEG 4000和PEG 8000为最优选。商购可得固态的聚乙二醇的实例为可获自BASF公司的聚乙二醇。
合适的无机凝固剂为能水合的无机盐，包括，但不限于，磺酸盐和碳酸氢盐。
尿素颗粒可以用作凝固剂。所述组合物的固化速率将根据，至少部分地根据，包括但不限于下面的因素：加入到组合物中的尿素的量、颗粒尺寸和形状。例如，颗粒形式的尿素可以与其它组分组合，且任选少量但有效量的水。尿素的量和颗粒尺寸有效与其它组分组合以形成均一的混合物而无需施用来自外源的热以将尿素和其它组分熔融至熔融阶段。当置入到水性介质中时，在所述固态组合物中包含的尿素的量有效提供所需的硬度和所需的组合物的溶解速率，以在使用过程中达到所需的所述固化的组合物调剂清洁剂速率。
螯合剂
所述螯合剂或掩蔽剂有利于除去金属化合物污垢且有利于降低工业水的硬组分的有害影响。多价金属阳离子或化合物(例如，钙、镁、铁、锰、钼等)，阳离子或化合物，或其混合物可以存在于工业水和复合污垢中。在清洗应用中，这些化合物或阳离子可以有效地与洗涤或漂洗的组合物相互作用。螯合剂可以有效地配合，并从被污表面除去这样的化合物或阳离子，且可以降低或消除与包括本发明的非离子表面活性剂和阴离子表面活性剂的不适当的相互作用。有机和无机螯合剂都为普通的螯合剂并且可以使用。无机螯合剂包括例如三聚磷酸钠和其它更高级的线性或环状聚磷酸盐这样的化合物。有机螯合剂既包括聚合螯合剂又包括小分子螯合剂。有机小分子螯合剂通常为有机羧酸盐化合物或有机磷酸盐螯合剂。聚合螯合剂通常包括聚阴离子组合物，例如聚丙烯酸化合物。小分子有机螯合剂包括，但不限于，葡萄糖酸钠、葡庚糖酸钠、N-羟基乙二胺三乙酸(HEDTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、氨基三乙酸(NTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、乙二胺四丙酸、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)及其各自的碱金属盐、铵盐和取代的铵盐，乙二胺四乙酸四钠盐(EDTA)、氨基三乙酸三钠盐(NTA)、N-羟乙基亚氨基二乙酸二钠盐(EDG)、二(羟乙基)甘氨酸钠盐(DEG)，和1,3-丙二胺四乙酸(PDTA)，谷氨酸二乙酸四钠盐(GLDA)，甲基甘氨酸-N-N-二乙酸三钠盐(MGDA)，亚胺基二丁二酸钠盐(IDS)。所有的这些都是已知的并商购可得的。合适的商购可得的已知的螯合剂的实例包括，但不限于，可获自Azko Nobel的Dissolvine GL PD。合适的商购可得铁螯合剂的实例包括可获自Jungbunzlauer公司的葡萄糖酸钠。
增效剂
所述酶体系还包括在这样的清洗配方中通常使用的增效剂或助剂。可以使用的合适的增效剂的实例包括,但不限于,硅酸盐和柠檬酸盐。类似的，可以使用的合适的助剂的实例包括,但不限于,氢氧化钠、氢氧化钾、TEA和MEA。合适的商购可得的增效剂的实例包括，但不限于，可获自Rohm & Haas的Acusol 445ND。
水质调理剂
水质调理剂调节聚合物可以用作不含磷的增效剂。示例性的水调节聚合物包括，但不限于：聚羧酸盐。可以用作增效剂和/或水调节聚合物的示例性的聚羧酸盐包括，但不限于，具有侧链羧酸根(-CO2 -)的聚羧酸盐，例如，聚羧酸、马来酸、马来酸/烯烃共聚物、磺酸化的共聚物或三元共聚物，丙烯酸/马来酸共聚物，聚甲基丙烯酸、丙烯酸-甲基丙烯酸共聚物、水解的聚丙烯酰胺、水解的聚甲基丙烯酰胺、水解的聚酰胺-甲基丙烯酰胺共聚物、水解的聚丙烯腈、水解的聚甲基丙烯腈和丙烯腈-甲基丙烯腈共聚物。特别合适的水质调理剂的实例包括，但不限于，柠檬酸钠无水物。
溶剂/加工助剂
所述酶体系还包含溶剂或加工助剂以提高组合物的加工能力。特别合适的溶剂或加工助剂的实例包括，但不限于，丙二醇。
防腐剂
所述酶体系还包含防腐剂以防止由微生物生长或由不希望的化学变化引起的分解。特别合适的防腐剂的实例包括，但不限于，1,2-苯并异异噻唑啉-3-(2H)-酮。示例性的商购可得的1,2-苯并异噻唑啉-3-(2H)-酮包括，但不限于，Proxel GXL和Acticide B 20。
在一个实施方式中,本发明的酶体系为基本不含磷的化合物,使得所述酶体系更合乎环境要求。无磷指的是其中未加入含磷的化合物的组合物、混合物或组分。如果通过无磷组合物、混合物或成分的污染而存在含磷的化合物，在所得的组合物中的含磷化合物的浓度低于约0.5wt%，低于约0.1wt%，且通常低于约0.01wt%。
在一个实施方式中,本发明的酶体系为基本无表面活性剂。无表面活性剂指的是其中未加入表面活性剂的组合物、混合物或成分。如果通过无表面活性剂的组合物、混合物或成分的污染而存在表面活性剂，在所得的组合物中的表面活性剂的浓度低于约0.5wt%，低于约0.1wt%，且通常低于约0.01wt%。
额外的功能性物质
所述酶体系可以包括额外的组分或试剂,例如,额外的功能物质。这样，在一些实施方式中，包含第一酶组合物和第二酶组合物的酶体系可以提供大量的、甚至所有的总重量的酶体系，例如，在具有加入到其中的很少或没有额外的功能性物质的实施方式中。所述功能性物质为所述酶体系提供了所需的性能和功能。基于该应用目的，术语“功能性物质”包括当将其分散至或溶解到使用溶液和/或浓缩溶液（例如水溶液）中时在特定的应用中提供有益性能的物质。包含第一酶组合物和第二酶组合物的配制剂非必需地包含其它分解污垢的组分、消毒剂、卫生消毒剂、酸化剂、配合剂、缓蚀剂、抑泡剂、染料、增稠剂或胶凝剂和香料。将在下面个更加详细地讨论功能性物质的一些具体的实例，但是本领域的技术人员和其它人员应该理解所讨论的具体的实例仅以实例的方式给出，也可以使用宽范围的功能性物质。
卫生消毒剂/抗微生物剂
所述酶组合物可以非必须地包括卫生消毒剂(或抗微生物剂)。卫生消毒剂，又称作抗微生物剂，为可以用于防止微生物污染和物质体系、表面等的微生物致变质的化学组合物。一般而言，这些物质会落入到具体的分类中，包括酚类、卤素化合物、季铵化合物、金属衍生物、胺、链烷醇胺、硝基衍生物、苯胺类、有机硫化合物和硫-氮化合物和混杂化合物（miscellaneous compound）。
根据化学组成和浓度，给定的抗微生物剂简单地限制微生物的数量进一步增殖，或者可以消灭所有的或部分的微生物群体。术语“微生物”和“微有机体”通常主要指的是细菌、病毒、酵母、孢子和真菌微生物。在使用中，所述抗微生物剂通常形成为固体功能材料，使得当非必需地,例如使用水流稀释和调剂时,形成可以与多个表面接触的消毒剂或卫生消毒剂组合物水溶液,从而防止部分的微生物群体的生长或杀死部分的微生物群体。卫生消毒剂组合物导致所述微生物群减少3个数量级。例如，所述抗微生物剂可以被装入胶囊，以提高其稳定性。
合适的抗微生物剂的实例包括,但不限于,酚类抗微生物剂,如五氯酚、邻苯基酚、氯-对苄基苯酚、对氯间二甲酚；季铵化合物，如烷基二甲基苄基氯化铵、烷基二甲基乙基苄基氯化铵、辛基癸基二甲基氯化铵、二辛基二甲基氯化铵和二癸基二甲基氯化铵。合适的含卤素的抗菌剂的实例包括，但不限于：三氯异氰脲酸钠；二氯异氰酸钠(无水的或二水合物)；碘-聚(乙烯吡咯烷酮)复合物；溴化合物，例如，2-溴-2-硝基-丙烷-1,3-二醇；和季铵抗微生物剂，例如氯化苯甲烃铵、二癸基二甲基氯化铵、二碘氯化胆碱(choline diiodochloride)，和四甲基三溴化铵(tetramethyl phosphonium tribromide)。其它的抗微生物组合物，例如六氢-1,3,5-三(2-羟乙基)均三嗪；二硫代氨基甲酸盐，例如，二甲基二硫代氨基甲酸钠和关于其抗微生物性能在本领域内已知的一系列其它物质。
还应该理解所述活性氧化合物,例如,在上面的漂白剂部分讨论的化合物,还可以起到抗微生物的作用,并可以提供卫生消毒活性。实际上，在一些实施方式中，起到抗微生物剂作用的活性氧化合物的能力降低了对组合物中的额外的抗微生物剂的需求。例如，已经显示，过碳酸盐组合物提供优异的抗微生物作用。
活化剂
在一些实施方式中,当将所述酶体系置入使用时，可以通过加入与活性氧反应形成活化的组分的物质来提高所述酶组合物的抗微生物活性。例如，在一些实施方式中，形成了过酸或过酸盐。在一些实施方式中，所述酶组合物可以包含四乙酰基乙二胺以与活性氧反应并形成起到抗微生物剂的过酸或过酸盐。活性氧活化剂的其它实例包括过渡金属及其化合物，包含羧酸结构部分、腈结构部分或酯结构部分的化合物，或本领域内已知的其它这样的化合物。在实施方式中，所述活化剂包括四乙酰基乙二胺；过渡金属；包含羧酸结构部分、腈结构部分、胺结构部分和酯结构部分的化合物；或其混合物。在一些实施方式中，用于活性氧化合物的活化剂与活性氧组合形成抗微生物剂。
在一些实施方式中,用于活性氧的活化剂物质被偶联到固态结构块(solid block)上。通过用于将一种固态洗涤剂偶联到另一固态洗涤剂上的多种方法中的任一种可以将所述活化剂偶联到固态块上。例如，所述活化剂可以为固态形式，结合、附着、胶着或粘附到所述固态块上。或者，所述固态活化剂可以围绕所述块形成并包围所述块。作为另外的实例，通过用于洗涤剂组合物的容器或包装(例如塑料包装，吸塑包装或膜)可以将所述固态活化剂偶联到固态块上。
pH缓冲剂
此外，可以配制所述酶组合物使得在用于含水操作(例如，含水清洗操作)的过程中，洗涤水将具有所需的pH。例如，可以向所述组合物中加入酸化剂(souring agent)使得织物的pH与适当的处理pH大致匹配。所述酸化剂为用于中和残留的碱并降低织物pH的弱酸，使得当衣服与皮肤接触时，织物不刺激皮肤。合适的酸化剂的实例包括，但不限于，磷酸、甲酸、乙酸、氟硅酸、饱和脂肪酸、二羧酸、三羧酸及其任何组合。饱和脂肪酸的实例包括，但不限于，含有10个或更多个的碳原子的饱和脂肪酸，例如，棕榈酸、硬脂酸和花生酸(C20)。二羧酸的实例包括，但不限于，草酸、酒石酸、戊二酸、丁二酸、己二酸和氨基磺酸。三羧酸的实例包括，但不限于：柠檬酸和丙三羧。合适的商购可得的酸化剂的实例包括，但不限于：TurboLizer、Injection Sour、TurboPlex、AdvaCare 120Sour、AdvaCare 120Sanitizing Sour、C arboBrite和Econo Sour，所有均可获自Ecolab公司，圣保罗，明尼苏达州。
抗再沉淀剂
所述酶组合物可以非必需地包含能够促进在清洗溶液中的污垢持续悬浮并防止污垢再沉淀到待清洗的基体上的额外的抗再沉淀剂。合适的抗再沉淀剂的实例包括，但不限于：脂肪酰胺、氟碳化物表面活性剂、复合磷酸酯、聚丙烯酸酯、苯乙烯马来酸酐共聚物和纤维素衍生物，例如，羟乙基纤维素和羟丙基纤维素。
分散剂
所述酶组合物还可以包含分散剂。可以用于固态洗涤剂组合物的合适的分散剂的实例包括，但不限于：马来酸/烯烃共聚物、聚丙烯酸及其混合物。
硬化剂/溶解度改性剂(Solubility Modifier)
所述酶组合物可以包括少量,但是有效量的硬化剂。合适的硬化剂的实例包括，但不限于：酰胺，例如，硬脂酰单乙醇酰胺或月桂酰二乙醇酰胺；烷基酰胺；固态的聚乙二醇；固态的EO/PO嵌段共聚物；通过酸或碱处理方法已经制成水溶性的淀粉和在冷却后赋予加热的组合物固化性能的多种无机物。这样的化合物还可以在使用过程中改变所述组合物在水性介质中的溶解度使得在较长的时间内可以由固态的组合物调剂清洁剂和/或其它活性成分。
染料和芳香剂
在所述酶组合物中也可以包含多种染料、包括香料的香味剂和其它的美感促进剂(aesthetic enhancing agent)。可以包含染料以改变所述组合物的外观，例如，一系列的FD&C染料、D&C染料等中的任一种。额外的合适的染料包括：Direct Blue 86(Miles)、Fastusol Blue(Mobay化学公司)、Acid Orange 7(美国氰胺(American Cyanamid))、Basic Violet 10(山德士(Sandoz))、Acid Yellow 23(GAF)、Acid Yellow17(Sigma Chemical)、Sap Green(Keystone Aniline and Chemical)、Metanil Yellow(Keystone Aniline and Chemical)、Acid Blue 9(HiltonDavis)、Sandolan Blue/Acid Blue 182(Sandoz)、Hisol Fast Red(Capitol Color and Chemical)、Fluorescein(Capitol Color andChemical)、Acid Green 25(汽巴嘉基)、Pylakor Acid Bright Red(Pylam)等。在所述组合物中可以包含的芳香剂或香料包括，例如，萜类，如香草醇；醛类，如戊基肉桂醛；茉莉属，如C1S-茉莉或茉莉吡喃；香草醛等。
佐剂
所述酶组合物还可以包含任意量的佐剂。具体而言，除了可以加入到组合物中的任意量的其它成分之外，所述酶组合物可以包含稳定剂、润湿剂、起泡剂、缓蚀剂、杀虫剂和过氧化氢。所述佐剂可以在与本发明的组合物预配制，或者同时加入到体系中，或者甚至在加入本发明的组合物之后加入。如果本申请需要，所述酶组合物还可以包含任意量的已知的和可以提高本发明的组合物的活性的其它成分。
本发明组合物的实施方式
第一和第二酶组合物各以多种浓缩形式提供。例如，所述酶组合物可以被铸塑、挤出、压制或以粉末形式或浓缩的液体形式。用于所述酶体系的固态和液态形式的第一和第二酶组合物的合适的示例性的浓缩物组合物示于表1-4中。
表1：第一酶组合物-固态
表2：第一酶组合物-液态
表3：第二酶组合物-固态
表4：第二酶组合物-液态
在一个实施方式中，所述的酶体系的第一和第二酶组合物可以通过挤出方法制备。将所述凝固剂和溶剂/加工助剂预混合至保持在所述凝固剂的熔点之上的熔融的液态预混料中。在一个实施方式中，使所述预混料保持在至少约130℉。将所述预混料以适当的比例连续地加料到挤出机中以加料到所有其它项目的进料中。在挤出机内，随着所述液态与其它物质混合形成均一的混合物，所述液体被冷却。在示例性的实施方式中，混合所述固态洗涤剂组合物的组分约1分钟。该混合的物料(mass)被输送至挤出机的末端并逐渐开始固化。当产物到达挤出机的末端，其形成为特定的剖面形状，同时被压制，并被其后面的物质推出。当其离开挤出机时，所述产物被切割成特定的长度形成单独的块，其在被输送至包装区域的同时被室温空气进一步冷却以完全固化。然后，它们被吸塑包装、贴标签并被装箱。
在一个实施方式中，可以铸塑所述第一和第二酶组合物。当所述酶组合物被铸塑时，所述酶被封装在凝固剂中，例如聚乙二醇(PEG)、防止水被吸收至体系中。这提高了组合物中的酶的寿命，而因此提高了组合物的寿命。
在一个实施方式中,所述酶组合物可以以浓缩物的形式提供使得所述酶组合物基本无任何加入的水或所述浓缩物可以包含微量的水。所述浓缩物可以配制成无任何水或可以提供相对少量的水以降低运输浓缩物的成本。例如，所述组合物浓缩物可以提供为胶囊或压缩的粉末、固态或松散的粉末的丸粒，所述胶囊包含水溶性物质或非水溶性物质。如果通过胶囊或丸粒递送所述组合物，所述组合物可以被引入到一定体积的水中，以及如果存在的话，水溶性物质可以溶液化、降解或分散使得所述组合物浓缩物与水接触。基于本公开的目的，术语“胶囊”或“丸粒”用于示例性的目的，并非意欲将本发明的释放模式限制为特定的形状。
在一个实施方式中，直至被置入到容器之前，所述浓缩组合物可以被提供为抗粉碎或抗降解的其它固态形式。可以在将所述组合物浓缩物加入到容器之前，将这样的容器充以水，或者在将所述组合物浓缩物置入到容器之后将容器充以水。在任一种情形下，所述固态浓缩组合物在与水接触后溶解、溶液化或者分解。在优选的实施方式中，所述固态浓缩组合物快速溶解，因此使得浓缩组合物能够变为使用组合物，并还使得最终用户将使用组合物应用到需要清洗的表面上。
在另一实施方式中,可以通过分配装置稀释所述固态浓缩组合物,其中水被喷雾至固态块上形成使用溶液。使用机械、电子或液压控制等以相对恒定的速率递送水流。也可以通过分配装置稀释所述固态浓缩组合物，其中，水沿着固态块周围流动，当所述固态浓缩物溶解时形成使用溶液。还可以通过丸粒、片剂、粉末或糊状物分配器(pastedispenser)等稀释所述固态浓缩组合物。在一个实施方式中，第一和第二酶组合物各自自动地以约0.25至约1盎司/加仑的速率调剂。然而，所述调剂率将部分地依据用来稀释酶体系的水的量和酶体系的用途。
预期将用稀释的水稀释所述浓缩物以提供具有所需级别的清洁性能的使用溶液。如果使用溶液需要除去顽固或重污垢，预期所述浓缩物以至少约1:1以及至多达约1:8的重量比的水稀释。如果需要轻垢型洗涤剂使用溶液，预期所述浓缩物可以以至多达约1:256的浓缩物对水的重量比稀释。所述比值部分地依据稀释的水的硬度。当所述稀释的水包含至少约1GPG的水硬度时，该稀释的水可以被定义为硬水。预期稀释的水可以包含至少约5GPG的水硬度，至少约10GP G的水硬度，或至少约20GPG的水硬度。
在一个可选的实施方式中，所述固态酶组合物可以提供为即用(RTU)的组合物。如果所述固态酶组合物提供为RTU组合物，向洗涤剂组合物中加入更大量的水作为稀释剂。当所述浓缩物被设置成液态时，其较合意地提供为可流动形式以便其可被泵送或抽吸。通常难以精确地泵送少量的液体。通常更有效地泵送更大量的液体。因此，尽管较合意地为设置所述浓缩物体积尽可能地小从而降低运输成本，还合意的是提供可以精确调剂的浓缩物。
在RTU组合物的情况下，应该注意到，如果需要，基于所述固态酶组合物的重量，上述公开的洗涤剂组合物可以进一步被至多约98wt%的水稀释。
在使用中，所述酶体系是以两个分开的步骤递送的。在第一步骤中调剂第一酶组合物并配制成从待清洗的装置的表面上除去血液和血红蛋白。在第一洗涤步骤中使用温度为约50℉至约120℉的冷水稀释第一酶组合物。在一个实施方式中，稀释第一酶组合物使得使用溶液具有约0.25至约1盎司每加仑的浓度。一旦第一酶组合物已经被稀释，就使第一酶组合物与待洗涤的表面接触有效地从表面除去污垢的量的时间。在示例性的实施方式中，第一酶组合物的使用溶液在表面上保持至少约1分钟至约3分钟。
在第二步骤中调剂第二酶组合物并配制成从待清洗的装置的表面上除去生物质，例如，粘液、血纤蛋白、脂肪和血红蛋白。在主洗涤剂洗涤步骤中使用温度为约140℉至约180℉的热水稀释第二酶组合物。在一个实施方式中，稀释第二酶组合物使得使用溶液具有约0.25至约1盎司每加仑的浓度。一旦第二酶组合物已经被稀释，使第二酶组合物与待洗涤的表面接触有效地从表面除去污垢的量的时间。在示例性的实施方式中，第二酶组合物的使用溶液在表面上保持至少约1分钟至约8分钟。
然后漂洗待清洗的装置的表面以除去第一和第二酶组合物。在一个实施方式中，使所述表面经历一系列的漂洗。例如，所述表面可以运送经过热水漂洗、热漂洗或纯净水漂洗。
实施例
在意欲仅作为说明目的的实施例中更加详细地描述了本发明，因为在本发明范围内的许多的修改和变化对于本领域的技术人员而言是显而易见的。除了另外指出，在下面的实施例中的所有的份、百分比或比率都是以重量为基础的，以及在实施例中使用的所有的试剂来自或可获自下面描述的化学品供应商，或者可以通过常规的技术合成。
使用的材料
固态的酶洗涤剂：本发明的酶组合物的组分浓度如表5所示。使用的酶为Alcalase，其为可获自Novozymes(丹麦)的低温蛋白酶。所述组合物还包含：可获自BASF公司Florham Park,NJ的聚乙二醇，PEG4000；可获自Arch化学品公司(乔治亚州,奥特兰大)的1,2-苯并异噻唑啉-3(2H)-酮防腐剂,Proxel GXL；可获自Thor,Speyer(德国)的1,2-苯并异噻唑啉-3(2H)-酮防腐剂，Acticide B 20；和可获自Dow ChemicalCompany的(Midland,MI)的分子量为约4,5000g/mol的固态的丙烯酸酯聚合物，Acusol 445ND。
表5：固态的酶洗涤剂
| 组分 | (wt%) |
| 酶 | 12-16 |
| 凝固剂 | 15-22 |
| 溶剂/加工助剂 | 0.75-3 |
| 填料 | 15.75-49.3 |
| 酶稳定剂 | 0.4-3 |
| 螯合剂 | 2.5-4 |
| 水质调理剂 | 12-22 |
| 防腐剂 | 2-4 |
| 增效剂 | 6-10 |
| 染料 | 0.01-0.25 |
固态的中性洗涤剂：本发明的酶组合物的组分浓度如下面表6所示。使用的酶为Experase 12MG，其为可获自Novozymes(丹麦)的高温蛋白酶。所述组合物还包含：可获自BASF公司Florham Park,NJ的聚乙二醇，PEG 4000；可获自Arch化学品公司(乔治亚州,奥特兰大)的1,2-苯并异噻唑啉-3(2H)-酮防腐剂,Proxel GXL；可获自Thor,Speyer(德国)的1,2-苯并异噻唑啉-3(2H)-酮防腐剂，Acticide B 20；和可获自Dow Chemical Company的(Midland,MI)的分子量为约4,5000g/mol的固态丙烯酸酯聚合物，Acusol 445ND。
表6：固态的中性洗涤剂
| 组分 | (wt%) |
| 酶 | 12-16 |
| 凝固剂 | 15-22 |
| 溶剂/加工助剂 | 0.75-1.25 |
| 填料 | 17.5-49.3 |
| 酶稳定剂 | 0.4-3 |
| 螯合剂 | 2.5-4 |
| 水质调理剂 | 12-22 |
| 防腐剂 | 2-4 |
| 增效剂 | 6-10 |
| 染料 | 0.01-0.25 |
Dissolvine GL PD：谷氨酸N,N-二乙酸四钠盐可获自Azko NobelFunctional Chemicals,Amersfoort(德国)。
PowerCon三酶：可获自Getinge,Rochester,NY的酶组合物。
PowerCon中性pH洗涤剂：可获自Getinge,Rochester,NY的洗涤剂组合物。
Prolystica超浓缩酶：可获自Steris公司,Mentor,OH的酶组合物。
Prolystica超浓缩中性洗涤剂：可获自Steris公司,Mentor,OH的洗涤剂组合物。
清洗能力-TOSI等级
为了测定一些酶体系的清洗效率,在Steris 444型清洗机中洗涤多个TOSI试样(coupons),同时经历仪器周期。TOSI试样为用血液污垢预制备的，并可获自Pereg GmbH,Waldkraiburg，德国。在TOSI试样上的血液污垢被设计为直接与手术器械相关并模拟手术器械的难以清洗的污垢，并提供一致的、可重复的和可靠的评价自动的器械清洗机或清洗组合物的清洗效率的方法。当对不锈钢板进行测试时，TOSI试样类似于被干的血液污染的不锈钢器械。
使用不同的第一酶组合物和第二酶组合物洗涤TOSI试样。使用大约1盎司/加仑的第一酶组合物和大约1盎司/加仑的第二酶组合物。使所述试样首先与第一酶组合物接触大约1分钟。在第一洗涤步骤中使用冷的自来水。
当测定清洗局限性(cleaning limitation)时，接着使所述试样与用热的自来水稀释的第二酶组合物接触约3分钟。在该步骤之后为洗涤剂洗涤，持续约5分钟。
当测定相对于对比组合物的清洗性能时，使所述试样与用热的自来水稀释的第二酶组合物接触约1分钟。在该步骤之后为洗涤剂洗涤，持续约2分钟。
在洗涤剂洗涤过程中,通过自动的清洗机加热装置将自来水逐渐加热至约160℉。然后，用热的自来水漂洗试样约1分钟，接着在约180℉的温度下热漂洗约1分钟。最后，用纯的、去离子水漂洗所述试样约10秒。除了纯水漂洗之外，使用5或17GPG水进行测试。
该测试使用2-因子广义因子6×3交叉设计(2-factor generalfactorial 6×3crossed design)。第一因素，包括多种第一酶组合物和第二酶组合物的清洁剂类型，具有6个等级。第二因素为试样在清洗机中的位置。所述清洗机包括垂直排列的3对篮筐：上、中和下。位置1为左上篮筐的左侧。位置2为左中篮筐的中心，以及位置3为右下篮筐的右侧。使用第一酶组合物和第二酶组合物组合各重复进行4次(洗涤周期)。
在第一洗涤步骤后和在第二洗涤步骤后评价各TOSI试样的清洁度。基于0至4的等级评价。TOSI等级为0表示测试的污垢完全地溶解，以及仅有少量的血纤蛋白残留物残留。TOSI等级为1表示看不到水溶性的蛋白质，但是仍然存在少量的血纤蛋白物质层使得所述酶体系清洗水溶性蛋白质而不能清洗不溶于水的蛋白质。TOSI等级2表示看不见水溶性的蛋白质，但是大部分或所有的血纤蛋白层和少量的血红蛋白残留物残留使得血纤蛋白被溶解，但是一些水溶性的蛋白质残留。TOSI等级3表示可见少量的水溶性蛋白质的残留物，而不是仅仅可见或少量的血纤蛋白层残留物。TOSI等级4表示可见大量的水溶性蛋白质的残留物且残留大部分或所有的血纤蛋白层。TOSI等级5表示测试污垢大部分或完全残留。
本发明的体系的组合物包含作为第一酶组合物的固态的酶洗涤剂和作为第二酶组合物的固态中性洗涤剂。
对比体系包含商购可得的产品的组合。特别地，所述第一对比体系包含作为第一酶组合物的Prolystica超浓缩酶和作为第二酶组合物的Prolystica超浓缩中性洗涤剂。特别地，所述第二对比体系包含作为第一酶组合物的PowerCon三酶和作为第二酶组合物的PowerCon中性pH洗涤剂。水被用作对照。
使用5GPG水硬度(1盎司用量)TOSI试样
表7显示在机器内的不同位置与第一酶组合物接触之后的TOSI试样的平均等级。TOSI试样是基于各第一酶组合物的清洗性能而分等级的。
表7：
| TOSI等级 | |
| 固态的酶洗涤剂 | 2 |
| Prolystica超浓缩酶 | 1.75 |
| Powercon三酶 | 2.5 |
| 水 | 2.67 |
在表7中的数据统计分析显示固态酶洗涤剂的性能与Prolystica超浓缩酶和PowerCon三酶的性能之间没有明显差异。在酶组合物与水的性能之间也没有统计差异。这并不让人感到惊奇，因为在该步骤中，被污的表面准备被清洗。TOSI试样通常被用于测量清洗效率，而非评估准备状态(preparedness)。
表8显示在与第一酶组合物和第二酶组合物接触之后的TOSI试样的等级。TOSI试样是基于各第一和第二酶组合物组合的清洗性能而分等级的。
表8：
| TOSI等级 | |
| 固态酶洗涤剂+固态中性洗涤剂 | 0.06 |
| Prolystica超浓缩酶+prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 0.71 |
| Powercon三酶+powercon中性pH洗涤剂 | 1 |
| 水 | 1.83 |
如在图8中的数据所示，当将TOSI试样与整个酶体系接触时，包含固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂的本发明的酶体系导致最低的TOSI等级，始终如一地表现优于
Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂体系和PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂体系。
与预期一样,在除去污垢方面所有的体系表现优于水。
使用17GPG水(1盎司剂量)的TOSI试样
表9显示在与第一酶组合物和第二酶组合物接触之后的TOSI试样的平均等级。TOSI试样是基于各第一和第二酶组合物组合的清洗性能而分等级的。
表9：
| TOSI等级 | |
| 固态酶洗涤剂+固态中性洗涤剂 | 0.67 |
| Prolystica超浓缩酶+prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 1.33 |
| Powercon三酶+powercon中性pH洗涤剂 | 2.17 |
| 水 | 1.33 |
如图9中的数据所示，结果与表8中的那些相似。当使TOSI试样与本发明中的整个酶体系接触时，导致最低的TOSI等级，始终如一地表现优于Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂体系和PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂体系。
使用17GPG水硬度(0.75盎司剂量)的TOSI试样
表10显示在与第一酶组合物和第二酶组合物接触之后的TOSI试样的平均等级。TOSI试样是基于各第一和第二酶组合物组合的清洗性能而分等级的。
表10：
| TOSI等级 | |
| 固态酶洗涤剂+固态中性洗涤剂 | 0.5 |
| Prolystica超浓缩酶+prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 1.67 |
| Powercon三酶+powercon中性pH洗涤剂 | 1.83 |
表10显示固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂体系导致比Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂体系和PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂体系。特别地，所述固态酶洗涤剂和固态的中性洗涤剂体系是被评价为平均等级小于1的唯一组合。
使用5GPG水硬度的TOSI试样
为了测定清洗局限性，测试本发明的酶组合物。表11显示在与本发明的第一酶组合物、本发明的第二酶组合物和本发明的酶体系接触之后TOSI试样的平均等级。TOSI试样是基于各第一和第二酶组合物和酶组合的清洗性能而分等级的。
在30ppm、60ppm和235ppm的使用溶液浓度下测试所述组合物。30ppm的使用溶液是基于0.25盎司/加仑的1.5%的污池溶液(sump solution)。60ppm的使用溶液是基于0.25盎司/加仑的3%的污池溶液。235ppm的使用溶液是基于0.75盎司/加仑的4%的污池溶液。
表11：
如在表11中所列的结果所示，使用5GPG水硬度的固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂的性能之间没有显著差异。固态中性洗涤剂的浓度对所述组合物的性能也不具有显著的影响。
使用17GPG水硬度的TOSI试样
为了测定清洗局限性，测试本发明的酶组合物。表12显示在与本发明的第一酶组合物、本发明的第二酶组合物和本发明的酶体系接触之后TOSI试样的平均等级。TOSI试样是基于各第一和第二酶组合物和酶组合的清洗性能而分等级的。
在30ppm、60ppm和235ppm的使用溶液浓度下测试所述组合物。30ppm的使用溶液是基于0.25盎司/加仑的1.5%的污池溶液。60ppm的使用溶液是基于0.25盎司/加仑的3%的污池溶液。235ppm的使用溶液是基于0.75盎司/加仑的4%的污池溶液。
表12：
如在表12中所列的结果所示，使用17GPG水硬度的固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂的性能之间没有显著差异。固态中性洗涤剂的浓度对所述组合物的性能也不具有显著的效果。当组合使用固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂时，TOSI等级得到改善。
清洗能力-洗涤效果检验试样(Wash-Check coupon)
为了测定一些酶体系的清洗效果,使用不同的第一酶组合物和第二酶组合物洗涤多个洗涤效果检验试样。洗涤效果检验试样为用血液污垢预制备，并可获自Steritec Products Inc.,Castle Rock公司。在洗涤效果检验试样上的血液污垢被设计为直接与手术器械相关并模拟手术器械的难以清洗的污垢，并提供一致的、可重复的和可靠的评价自动的器械清洗机或清洗组合物的清洗效率的方法。当测试不锈钢板时，洗涤效果检验试样类似于被干的血液污染的不锈钢器械。
使用大约1盎司/加仑的第一酶组合物和大约1盎司/加仑的第二酶组合物。在洗涤试样之前,测量并记录试样上的污垢的量。使所述试样首先与第一酶组合物接触大约1分钟。在第一洗涤步骤中使用冷的自来水。
使所述试样与用热的自来水稀释的第二酶组合物接触约3分钟。在该步骤之后为洗涤剂洗涤，持续约2分钟。在洗涤剂洗涤过程中，将自来水加热器逐渐加热至约160℉。
然后，用热的自来水漂洗试样约1分钟，接着在约180℉的温度下热漂洗约1分钟。最后，用纯的、去离子水漂洗所述试样约10秒。除了纯水漂洗之外，使用5GPG水进行测试。然后测量并记录所述试样上残留的污垢的百分比。
该测试使用2-因子广义因子6×3交叉设计(2-factor generalfactorial 6×3crossed design)。第一因素，包括多种第一酶组合物和第二酶组合物的清洁剂类型，具有6个等级。第二因素为试样在清洗机中的位置。所述清洗机包括垂直排列的3对篮框：上、中和下。位置1为左上篮框的左侧。位置2为左中篮筐的中心，以及位置3为右下篮筐的右侧。使用第一酶组合物和第二酶组合物组合各重复进行4次(洗涤周期)。
本发明的体系包含作为第一酶组合物的固态酶洗涤剂和作为第二酶组合物的固态中性洗涤剂。
对比体系包含商购可得的产品的组合。特别地，所述第一对比体系包含作为第一酶组合物的Prolystica超浓缩酶和作为第二酶组合物的Prolystica超浓缩中性洗涤剂。特别地，所述第二对比体系包含作为第一酶组合物的PowerCon三酶和作为第二酶组合物的PowerCon中性pH洗涤剂。水被用作对照。
表13显示在与第一酶组合物和第二酶组合物接触之后从洗涤效果检验试样中除去污垢的百分比。表13还显示各组合从所述洗涤效果检验试样中除去的污垢的平均量。
表13：(洗涤效果检验第一酶组合物+第二酶组合物-5GPG水)
| 污垢除去率(%) | |
| 固态酶洗涤剂+固态中性洗涤剂 | 73 |
| Prolystica超浓缩酶+prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 65 |
| Powercon三酶+powercon中性pH洗涤剂 | 78 |
| 水 | 44 |
如从表13中的数据可以看出，固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂体系从洗涤效果检验试样中除去与PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂体系基本相同百分比的污垢，并且表现优于Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂体系。
清洁能力-总有机碳(TOC)测试
用于在TOSI试样上评估酶体系的清洗能力的其它技术为用于化学评估在TOSI试样上的总有机碳(TOC)，并将其与在未使用的TOSI试样上的基底量(base amount)的TOC。所述TOC为在有机物中结合的碳的量。所述TOC测试通过用药签(swab)从TOSI试样的表面上收集残留物并将其萃取到用于分析的水溶液中而测量有机碳的低浓度。
通过用弄湿的药签擦拭限定的区域收集表面残留物，然后将残留物从药签中萃取到用于TOC分析的水溶液中。通过自动采样仪将基于水的样品引入到分析仪器中，并将H3PO4注射到样品中以使pH降低至2以使得精确测量总碳(TC)和无机碳(IC)。然后将酸化的样品与过硫酸盐合并以促进有机物的氧化反应，然后分成两等份且分开的流体(separate flows)。一股流体被处理以测量IC，而另一股流体被处理以测量TC。使TC流体流入到氧化反应器中，并在产生高反应性的硫酸盐和羟基自由基的UV光中曝光。所述硫酸盐、羟基自由基和过硫酸盐完全氧化样品中的有机化合物，将碳转化为CO2。通过相应电导率试池测量来自TC和IC样品流体中的CO2，并且电导率读数被用于计算TC和IC的浓度。TC和IC浓度之间的差异为TOC浓度。
对于被药签擦拭的各TOSI试样存在对应的TOC小瓶。各TOC小瓶被40mL的高纯水填充并被盖住。在即将药签擦拭试样的表面之前，将该药签浸没在被高纯水填充的相应的TOC小瓶中。通过向容器壁的内部挤压从药签头中除去过量的水从而如果以任何角度握住则不会形成水滴。然后用药签擦拭TOSI试样的表面。在药签擦拭过程进行一半时，将药签再浸渍到TOC小瓶中以除去一些有机物并重新润湿药签。然后使用干净的金属剪将药签头折断至TOC小瓶中。然后，使所述小瓶在被水填充至刚好位于小瓶的盖子下面的超声器中超声至少约30分钟。在超声之后，打开小瓶盖子，并使用干净的、精细的镶齿金属钳从小瓶中除去药签头。根据仪器SOP A&P 99009，使用TOC仪器分析药签。TOC分析定量了来自TOSI试样上的血红蛋白、血蛋白和血纤蛋白的有机碳。
通过平均5个新的TOSI试样的TOC测量结果评估基准量的TOC。平均的TOC浓度为约55.8ppm。
本发明的体系包含作为第一酶组合物的固态酶洗涤剂和作为第二酶组合物的固态中性洗涤剂。
对比体系包含商购可得的产品的组合。特别地，所述第一对比体系包含作为第一酶组合物的Prolystica超浓缩酶和作为第二酶组合物的Prolystica超浓缩中性洗涤剂。特别地，所述第二对比体系包含作为第一酶组合物的PowerCon三酶和作为第二酶组合物的PowerCon中性pH洗涤剂。水被用作对照。
表14显示在与在5GPG的水的固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂体系、PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂体系和Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂体系接触之后，TOSI试样上存在的TOC的量。对照为5GPG水。
表14：
| TOC平均值(μg) | |
| 固态酶洗涤剂+固态中性洗涤剂 | 5.5 |
| Prolystica超浓缩酶+prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 4.3 |
| Powercon三酶+powercon中性pH洗涤剂 | 5.4 |
| 水 | 21.3 |
表14中的数据显示：在从TOSI试样上降低TOC的量的方面，本发明的体系表现基本类似于商购可得的PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂体系和Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂体系。
在不同位置残留的TOC量的平均差异低于约10%，因此位置效应被认为是不可靠的。
表15显示在与在17GPG的水中的固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂的组合、PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂的组合和Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂的组合接触之后，TOSI试样上存在的TOC的量。对照使用17GPG水。
表15：
| TOC平均值(μg) | |
| 固态酶洗涤剂+固态中性洗涤剂 | 2.9 |
| Prolystica超浓缩酶+prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 2.4 |
| Powercon三酶+powercon中性pH洗涤剂 | 7.6 |
| 水 | 19.3 |
表15中的数据显示：在从TOSI试样上降低TOC的量的方面，本发明的组合物表现基本类似于两种商购可得的产品PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂，和Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂。
清洗能力-TOSI和洗涤效果检验试样(Wash-Check coupon)
测试本发明的酶体系的关于TOSI试样和洗涤效果检验试样的清洗能力。关于TOSI试样，在与本发明的酶体系接触之后，如果TOSI试样的表面上没有残留在其表面上的红色残留物或仅有少许残留物，则认为所述酶体系合格。至于洗涤效果检验试样，在与本发明的酶体系接触之后，如果洗涤效果检验试样的表面上没有残留在其表面上的白色或红色残留物，则认为所述酶体系合格。
表16显示在机器的不同位置所述固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂组合是否通过所述测试。
表16：
如表16所示，所述固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂组合在从TOSI试样和洗涤效果检验片的所有位置除去污垢方面是高效的。
其它组分的效果
进行多种测试以测定本发明的酶组合物的清洗性能是否通过组合物中的任意的其它组分提高。测试是使用5GPG和17GPG水进行的。客观等级是使用HunterLab仪器和EMPA 116型系统进行评定的。所述EMPA 116型系统测试织物被血液、牛奶和日本油墨均匀地染污，适合于确定包含蛋白酶的洗涤剂的有效性。污垢除去百分比是使用如下公式计算的：
%污垢除去=((L2-L1)/(L1-STD))*100
还采用被分级为0至5的范围的试样主观读数。等级0表示所述试样外观上是干净的。等级5表示几乎没有污垢被除去。测量各组分的pH以确保它们在中性范围内(5-9)从而确保酶的保护。
测试的组分包括柠檬酸钠、硫酸钠、食用盐、PEG 4000、PEG 8000、葡萄糖酸钠和去离子水。组分和各自的pH总结于下表17中。
表17：
如表17所示，在5GPG和17GPG的水中，所有的组分都在中性范围内。
表18列出了仅在第一次洗涤步骤之后和在第一次洗涤和第二次洗涤步骤之后EMPA 116型的污垢除去百分比。
表18：
表18显示了当使用5GPG水时，在第一次洗涤步骤之后，所有的上述组分除去约5%以内的相同量的污垢。仅在第一洗涤步骤之后，硫酸钠除去最大量的污垢，而葡萄糖酸钠除去最小量的污垢。然后，在第一洗涤和第二洗涤步骤之后，柠檬酸钠除去最大量的污垢，而去离子水除去最小量的污垢。
当使用17GPG水时，在第一次洗涤步骤之后和在第一次洗涤和第二次洗涤步骤之后，柠檬酸钠均除去最大量的污垢。在所述两种条件下，PEG 4000除去最少量的污垢。
表19列出了在第一次洗涤步骤之后和在第一次和第二次洗涤步骤之后的TOSI等级。
表19：
示于表18和19中的结果显示填料为清洗过程中有用和重要的组分。填料和丙二醇的聚合物可能单独使用无效果，但是组合使用时有用。表18和19还显示一般而言较低格令(grain)的水在清洗方面比高格令的水更有用。
螯合测试
进行螯合测试以测定不同量的碳酸氢盐和其它的螯合剂对所述组合物的碱性有何影响,并比较不同样品的螯合值。
本发明的组合物包含具有不同浓度的碳酸氢盐和螯合剂、Dissolvine的固态酶洗涤剂。对照包括固态酶洗涤剂和10%碳酸氢盐。
对比组合物包含商购可得的产品。特别地，所述对比组合物包含Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂。
使用Metrohm 780pH计首先分析各溶液5%浓度时的pH。所述溶液的pH涉及酶的保护，其具有在中性范围(pH 5-9)内的合适的pH，且特别接近于对照的pH。各溶液的pH示于下面的表20中。
表20：
| pH | |
| 固态的酶洗涤剂 | 7.79 |
| 固态酶洗涤剂+5%碳酸氢盐+3%dissolvine | 8.38 |
| 固态酶洗涤剂+3%dissovine | 8.65 |
| 固态酶+10%碳酸氢盐 | 8.73 |
| Prolystica超浓缩酶 | 6.79 |
| Prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 7.70 |
从对照中可以看出，为了保护溶液中的酶，确定溶液的pH必须为约8至约9。然后分析5%浓度时的各溶液以测定溶液的螯合值。首先，计算固体百分比。所述组合物的固体百分比示于表21中。
表21：
| 固体% | |
| 固态酶洗涤剂 | 4.86 |
| 固态酶洗涤剂+5%碳酸氢盐+3%dissolvine | 4.93 |
| 固态酶洗涤剂+3%dissovine | 4.86 |
| 固态酶+10%碳酸氢盐 | 4.86 |
| Prolystica超浓缩酶 | 2.29 |
| Prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 2.03 |
为了测定溶液螯合钙的能力，首先将碳酸钠以约0.2克的递增量加入到组合物中以螯合Ca2+。溶液的pH保持在约11。由于组合物的pH可能随着碳酸钠的加入而降低，加入足量的氢氧化钠以保持组合物的pH为11。一旦加入了碳酸钠且pH调节至11，以约0.25mL的递增量用乙酸钙水合物滴定组合物直至碳酸钙开始从溶液中沉淀。在pH为11时，首次出现碳酸钙沉淀的迹象时被认为是滴定的终点。表22列举了各组合物的重量、滴定剂的mL，碳酸钙的mg/g、使用溶液的碳酸钙的mg/g。
表22：
分析约1g的干物质的组合物，其中，对照的组合物的比重假定为约1g/mL,Prolystica超浓缩酶的比重为约1.03g/mL以及Prolystica超浓缩中性洗涤剂的比重为约1.14g/mL。对照的使用浓度为5%溶液的0.75盎司/加仑或约0.3mL/L。Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂的使用浓度为0.10盎司/加仑，或约0.8mL/L。使用下面的公式测定mg CaCO3/g：
mg CaCO3/gram=((mL滴定剂)(0.25))/((干重)(0.1))，
其中，干重=(溶液重量)(%固体)/100。
如在表22中所述，固态酶洗涤剂和固态酶洗涤剂+3%Dissolvine的螯合能力基本类似于两种商购可得的洗涤剂的Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂的螯合能力。为了进一步显示本发明的组合物和对比组合物的螯合能力，测定固态酶洗涤剂、固态酶洗涤剂+5%碳酸氢盐+3%Dissolvine、固态酶洗涤剂+3%Dissolvine和固态酶洗涤剂+10%碳酸氢盐组合物，其需要再稀释2.69倍以得到与Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂组合物的浓度(0.8mL/L)。换言之，Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂组合物需要被进一步稀释约37.1%以得到与本发明组合物的相同的浓度(0.3mL/L)。这些结果示于下面的表23中。
表23：
进行第二螯合测试以测定各组合物的螯合能力。本发明的组合物包括固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂。
对比组合物的组分包含多种商购可得的产品。特别地，所述对比组合物包含Prolystica超浓缩酶、Prolystica超浓缩中性洗涤剂、PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂。
对于各产品，制备4%溶液(w/v)，并通过QATM 262分析，通过微波干燥技术干燥总固体或挥发物以测定固体百分比。表24列举了各4%溶液的固体百分比和各溶液的固体百分比。
表24：
| 4%溶液的固体% | 固体% | |
| 固态酶洗涤剂 | 3.93 | 98.25 |
| 固态的中性洗涤剂 | 3.78 | 94.50 |
| Prolystica超浓缩酶 | 1.66 | 41.50 |
| Prolystica超浓缩中性洗涤剂 | 1.45 | 36.25 |
| Powercon三酶 | 0.51 | 12.75 |
| Powercon中性pH洗涤剂 | 1.28 | 32.00 |
然后通过QATM 072分析4%溶液(w/w)，钙螯合（CalciumChelation）以测定各溶液的钙螯合能力。使用各产品的比重和各产品的使用溶液说明，使用上述公式计算在使用溶液中各组合物的的钙螯合值。使用浓度(g/L)是通过用产品的比重乘以使用浓度(mL/L)计算的。使用浓度(干重(g)/L)是通过用产品的固体%乘以使用浓度(g/L)计算的。然后用使用浓度(干重(g)/L)乘以通过QATM 072测定的钙螯合值。
表25列举了各组合物的重量、滴定剂的mL，碳酸钙的mg/g、使用溶液中的碳酸钙的mg/g。
表25：
从该比较结果可以看出，固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂都比
超浓缩酶清洁剂和PowerConTM三酶洗涤剂浓缩物具有更好的钙螯合性能。进一步比较可以显示钙的螯合性能怎样根据各产品的使用浓度而变化。这些结果示于下面的表26中。
测量并在0.23mL/L的浓度(固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂的使用浓度)、0.80mL/L的浓度(Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂的使用浓度)和3.9mL/L的浓度(PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂的使用浓度)下计算螯合能力。0.23mL/L的浓度的数据为固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂实验的数据，并用于计算剩下的组合物的数据；0.80mL/L浓度的数据为Prolystica超浓缩酶和Prolystica超浓缩中性洗涤剂的实验数据，并用于计算剩下的组合物的数据；以及0.80mL/L的浓度的数据为PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂的实验数据，并用于计算剩下的组合物的数据。
表26显示不同的浓度下的组合物的螯合能力。
表26：
表26中的结果显示在相同的稀释度下所述固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂比其它商购可得的产品具有更高的钙螯合能力。
起泡测试
为了测定不同的第一和第二酶组合物在使用溶液浓度下产生的泡沫的水平,在118.4℉和约160℉下进行起泡测试。使用5GPG的冷的城市自来水以1%的稀释比例测试酶组合物。将约25mL的酶组合物倒入到量筒中，并塞住量筒。将该量筒旋从垂直位置转至120度，并返回至垂直位置。以约1循环/秒的频率重复50次。然后将该量筒置于平面上，并使泡沫和液面分离约30秒。
在0秒(在刚摇动后)和30秒后读取读数。泡沫的高度测量为液面的上端和泡沫面的上端之差。泡沫面的上端为其中不透光或不透明的泡沫的面。较低的泡沫高度值对于本发明所预期的用途而言是合意的。
本发明的组合物包含固态酶洗涤剂和固态中性洗涤剂。
对比组合物的组分包含多种商购可得的产品。特别地，所述对比组合物包含Prolystica超浓缩酶、Prolystica超浓缩中性洗涤剂、PowerCon三酶和PowerCon中性pH洗涤剂。
表27显示起初的泡沫高度和在摇动之后30秒的泡沫高度。在约118.4℉下测试第一酶组合物，以及在约160℉下测试第二酶组合物。使用5GPG和17GPG的水测试各组合物。
表27：
从表27中可以看出，在5GPG的水中，固态酶洗涤剂的泡沫高度的平均变化显著高于Prolystica超浓缩酶或PowerCon超浓缩酶。在17GPG的水中，固态酶洗涤剂的泡沫高度的平均变化显著高于Prolystica超浓缩酶。
在5和17GPG的水中，固态酶中性洗涤剂的泡沫高度的平均变化都显著大于PowerCon超浓缩中性洗涤剂。
在室温和约122℉下进行第二起泡测试。仅使用第一酶组合物的1%溶液进行第二起泡测试。所有的其它条件与上面进行的其它起泡测试相同。本发明的组合物包括固态酶洗涤剂。
对比组合物的组成包含多种商购可得的产品。特别是，对比组合物包含Enzycare 2(可获自Steris公司，门托市，俄亥俄州)；EndozimeAW Triple Plus(可获自Ruhof公司，米尼奥拉，纽约州)；PowerCone三酶(可获自Getinge，罗彻斯特市，纽约州)；和Prolystica超浓缩酶(可获自Steris公司)。
表28显示在室温下和约122℉下各组合物的起初的泡沫高度和摇动后30秒后的泡沫高度。
表28：
如表28所示，在30秒时，固态酶洗涤剂表现基本类似于作为两种商购可得的产品的Enzycare 2和PowerCon三酶。固态酶洗涤剂也优于Endozime AW Triple Plus和Prolystica超浓缩酶。
所述数据还显示在室温下，尽管固态酶洗涤剂起初形成泡沫，但是在约30秒后迅速破裂为非常小的泡沫。Enzycare 2为唯一的起初形成泡沫然后迅速破裂的其它组合物。Endozime AW Triple Plus和Prolystica超浓缩酶都起泡，但是在30秒后没有破裂多少。
表28还显示在约122℉下，固态酶洗涤剂起初的确起泡，但是在约30秒后再次破裂至少量的泡沫。Enzycare 2再次地为唯一的起初起泡并迅速破裂的其它组合物。实际上，Enzycare 2破裂为在表面上无泡沫。Endozime AW Triple Plus和Prolystica超浓缩酶都起泡，但是并没有像固态酶洗涤剂的破裂的那样多。尽管它们少许破裂，但是仍然在表面上存在相对大量的泡沫。
水硬度耐受性测试
为了测定组合物耐受硬水的能力，在不同程度的水硬度下测试多种酶组合物。通过在1升的容量瓶加入约33.45g的氯化钙和约23.24g的氯化镁并用去离子水稀释至容积而制备氯化钙和镁的水硬度溶液。1毫升的所述溶液等于约2克每格令(GPG)的硬度。
通过向1升的容量瓶中加入约56.25g的碳酸氢钠并用去离子水稀释至容量而制备NaHCO3溶液。
通过向去离子水中加入4g的固态酶洗涤剂以得到约4%浓度的溶液而制备测试溶液。
向各烧杯中加入约1000mL的去离子水和约5mL的NaHCO3溶液。然后向烧杯中加入水硬度溶液以达到所需的水硬度。为了获得2GPG的水硬度，加入约1mL的水硬度溶液。至于4GPG的水硬度，加入约2mL的水硬度溶液，等。
以得到320ppm的使用溶液的量向烧杯中加入测试溶液。将烧杯中的溶液充分混合，并加热至约160℉。
然后使用分光光度计测量溶液起初的透光率。然后，在约30分钟后再次测量溶液的透光率作为最终的透光率读数。
测量包括约4GPG的水、约6GPG的水、约8GPG的水、约10GPG的水、约12GPG的水、约14GPG的水和约16GPG的水的组合物的透光率读数。表29显示在不同的水硬度水平的起初和最终的透光率读数。
表29：
| 硬度水平(GPG) | 起初读数(%T) | 最终读数(%T) |
| 4 | 100 | 100 |
| 6 | 100 | 100 |
| 8 | 101 | 100 |
| 10 | 100 | 100 |
| 12 | 99 | 99 |
| 14 | 99 | 99 |
| 16 | 98 | 99 |
所有的酶组合物在外观上都是清澈的。如可从表29看到的，在所有的水硬度水平上，所有的组合物具有高的起初和最终透光率读数。一般而言，起初和最终的透光率读数在所有的水硬度水平上保持一致。尽管所述组合物在4GPG至10GPG时显示100%的透光率读数，但是包含最高达16GPG的组合物仍然具有至少约98%的透光率读数。
金属相容性测试
为了测定本发明的酶组合物与多种金属的相容性，测试酶组合物对多种金属的相容性。所述金属包括：黄铜型353(黄铜353)、铜型10(铜10)、铝型1001(Al1001)、不锈钢型430(SS430)、不锈钢型316(SS316)、铝型3003(A13003)、铝型6061(A16061)和阳极氧化铝(阳极氧化Al)。通过电感耦合等离子体(ICP)使用元素分析进行一系列的测试，所述ICP可以检测最高达24种金属，并在洗涤之前和之后测量试样的重量。
将所述金属试样如实际处于自动清洗机消毒器中那样，使它们与本发明的组合物接触。一组金属经历固态酶洗涤剂溶液，而另一组经历固态中性洗涤剂溶液。两种溶液都是以1盎司/加仑的用量的6%的槽浓度。所述试样的接触(exposure)时间等效于手术器械一天再加工两次连续使用两年。
第一组金属试样静止地浸泡在加热至约122℉的恒温槽的固态酶洗涤剂中约38小时。这等效于一天一次3分钟接触时间连续两年。第二组金属试样静止地浸泡在加热至约160℉的恒温槽的固态中性洗涤剂中约62小时。这等效于一天一次5分钟接触时间连续两年。
表30显示当使各试样与122℉的固态酶洗涤剂、160℉的固态中性洗涤剂和122℉以及160℉的5GPG的水接触时检测到的金属类型和含量(ppm)。
表30：
如可以从图30中的数据看出的，在溶液中检测到的金属的量可以忽略不计。当用固态中性洗涤剂洗涤时，检测到的最大量的金属为来自铝6061试样的约15ppm的铝。然而，当在相同的温度下使试样接触时，甚至5GPG水就导致约6ppm的铝。一般而言，当用固态酶洗涤剂或固态中性洗涤剂洗涤试样时，如果检测到金属，则当在相同的温度下用5GPG的水洗涤试样时也检测到金属。
表31显示在用固态酶洗涤剂于122℉、固态中性洗涤剂于160℉和5GPG于122℉以及160℉的水洗涤之前和之后金属试样的重量。
表31：
如可以从表31中的数据看出的，当称量金属试样在于溶液中洗涤之前和于溶液中洗涤之后的重量时，金属试样并没有显著量的变化。当铝3031试样与固态中性洗涤剂接触时，最大量的重量百分比变化为约9%。所有的其它重量变化为约0.1%以下。这表示可忽略不计量的金属试样因与固态酶洗涤剂或固态中性洗涤剂接触而形成凹陷或腐蚀并被除去。
在不偏离本发明的范围的情况下，可以对所讨论的示例性的实施方式作出多种修改和补充。例如，尽管上述的实施方式涉及具体的特征，但是本发明的范围还包括具有不同的特征组合的实施方式和没有包括所有上述特征的实施方式。
Claims (20)
1.一种酶体系，其包含：
(a)第一组合物，其包含有效除去血液和血红蛋白的低温酶；和
(b)第二组合物，其包含有效除去粘液、血纤蛋白和脂肪的高温酶。
2.根据权利要求1所述的酶体系，
其中，所述低温酶包括蛋白酶、脂肪酶或其组合。
3.根据权利要求1所述的酶体系，
其中，所述低温酶的活化温度为约50至约120华氏度。
4.根据权利要求1所述的酶体系，
其中，所述高温酶包括蛋白酶、脂肪酶或其组合。
5.根据权利要求1所述的酶体系，
其中，所述高温酶的活化温度为约140至约180华氏度。
6.根据权利要求1所述的酶体系，
其中，所述第一组合物和第二组合物的pH为约5至约9。
7.根据权利要求1所述的酶体系，
其中，所述第一和第二组合物各自进一步包含：
(c)溶剂；
(d)酶稳定剂；
(e)填料；
(f)螯合剂；和
(g)增效剂。
8.用于清洗器械的洗涤剂体系，其包含：
(a)第一pH中性酶组合物，其包含约5%至约20%的第一酶；
(b)第二pH中性酶组合物，其包含约5%至约20%的第二酶。
9.根据权利要求8所述的洗涤剂体系，
其中，所述第一和第二酶组合物各自的pH为约5至约9。
10.根据权利要求9所述的洗涤剂体系，
其中，所述第一和第二酶组合物各自的pH为约8至约9。
11.根据权利要求8所述的洗涤剂体系，
其中，所述第一pH中性酶组合物包含活化温度为约50至约120华氏度的酶。
12.根据权利要求8所述的洗涤剂体系，
其中，所述第二pH中性酶组合物包含活化温度为约140至约180华氏度的酶。
13.根据权利要求8所述的洗涤剂体系，
其中，所述第一pH中性酶组合物包含蛋白酶、脂肪酶或其组合。
14.根据权利要求8所述的洗涤剂体系，
其中，所述第二pH中性酶组合物包含蛋白酶、脂肪酶或其组合。
15.一种清洗手术器械的方法，其包括：
(a)使手术器械与包含低温酶的第一酶组合物接触；
(b)在包含高温酶的第二酶组合物中洗涤所述手术器械；和
(c)漂洗所述手术器械。
16.根据权利要求15所述的方法，
其中，接触所述手术器械包括将所述手术器械浸没在温度为约50华氏度至约120华氏度的水中。
17.根据权利要求15所述的方法，
其中，洗涤所述手术器械包括在温度为约140华氏度至约180华氏度的水中洗涤所述手术器械。
18.根据权利要求15所述的方法，
其中，所述低温和高温酶为pH中性酶。
19.根据权利要求15所述的方法，
其中，使所述手术器械与第一酶组合物接触包括使所述手术器械与所述第一酶组合物接触约1分钟至约5分钟。
20.根据权利要求15所述的方法，
其中，所述低温酶包含蛋白酶、脂肪酶或其组合物，以及，其中，所述高温酶包含蛋白酶、脂肪酶或其组合。
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