CN102688235A - 盐酸乐卡地平组合药物片、制备方法及其在治疗高血压药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了盐酸乐卡地平组合药物片、制备方法及其应用，所述片剂为盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱作为活性成分，添加辅料制成的胃漂浮片；本发明提供的药物组合能够有效的治疗糖尿病引发的高血压，并且对于肾脏具有一定的保护作用。同时本发明将上述药物组合制备成为胃漂浮片剂更有利于药物的吸收，增加了药物组合的生物利用度，对高血压的治疗效果更好。

Description

盐酸乐卡地平组合药物片、制备方法及其在治疗高血压药物中的应用

技术领域

    本发明涉及一种药物组合及其制剂，更具体的说涉及盐酸乐卡地平组合药物片、制备方法及其在治疗高血压药物中的应用。

技术背景

盐酸乐卡地平为第三代二氢吡啶类钙通道阻滞剂，作用机制与同类药物相似，即可逆地阻滞血管平滑肌细胞膜L型钙通道的Ca²⁺内流，扩张外周血管而降低血压 。本品亲脂性较高，因此起效时问较慢，而作用持续时问较长。体内外试验表明，本品选择性血管扩张作用所致的负性肌力作用较硝苯地平、尼群地平和非洛地平弱；而血管选择性强于氨氯地平、非洛地平、尼群地平及拉西地平。此外，本品还具有抗动脉粥样硬化和保护终末器官作用。本品在治疗剂量时不干扰高血压患者的正常心脏兴奋性和传导性。动物实验表明，本品对肾脏有保护作用，其机制可能与血流动力学无关。小檗碱(berberine)是一种异喹啉类生物碱，研究发现：小檗碱不仅有显著的降血糖作用，而且对糖尿病人伴有的合并症高血压、高血脂、血栓形成及对神经病变均有很好的防治作用。胃漂浮片又称胃内滞留片，是将药物与一种或多种亲水胶体及其他辅料混合制成的缓控释剂型，利用浮力延长制剂在胃部的停留时间，药物从凝胶层缓缓扩散出来，其速度与亲水性高分子化合物的种类、性质和用量有关。胃内漂浮型缓释制剂使释放出的药物在胃部或缓缓经过十二指肠时而有充分的局部作用或吸收时间，对于一些在胃及十二指肠吸收或产生局部作用的药物，有利于充分发挥药效，提高生物利用度。

中国专利（公开号：CN1901888A）公开了一种包含乐卡地平的药物组合物，所述乐卡地平在环境温度下溶解或分散在固体媒介物中，从而形成固体分散体，从而获得了较长时间的乐卡地平的延迟释放、降低了食物效应增加了药物的生物利用度。

发明内容

盐酸乐卡地平是一种二氢吡啶类钙拮抗剂是一种对血管的选择性远远高于对心脏选择性的钙拮抗剂，能够与细胞膜牢固地结合，并在细胞膜的脂质双层中缓慢地释放至钙离子通道上，起到抑制钙通道的作用。因此主要用于原发性高血压的治疗。高血压治疗的要求是24h平稳地控制血压，因此理想的降压药物应该具有24h持久的作用。将其制成胃漂浮片可在胃液中保持漂浮状态，并起缓释作用，使释放出的主药在胃部、十二指肠有充分的作用及吸收时间，因而能充分发挥药效，减少给药次数，有利于弱酸性药物在胃中的吸收，提高药物的生物利用度，提高患者耐受性，从而在治疗高血压病症中发挥更好的疗效。同时，盐酸小檗碱对糖尿病人伴有的合并症高血压、高血脂、血栓形成及对神经病变均有很好的防治作用，同时，盐酸小檗碱还具有良好的抗菌消炎活性，能够有效治疗因糖尿病等病症引发的炎症。将盐酸乐卡地平与盐酸小檗碱向配伍不仅能够有效治疗因糖尿病等病症引发的高血压，而且对于人体肾脏还具有一定的保护作用；盐酸小檗碱和盐酸乐卡地平均为亲脂化合物，采用胃漂浮片剂的剂型能更加有效促进药物吸收，增加组合药物的生物利用度。具体的发明内容为：

盐酸乐卡地平组合药物片，所述片剂为盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱作为活性成分，添加辅料制成的胃漂浮片。

所述盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱的重量比为1-12:1-7。

所述盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱的重量比为5-7:2-3。

所述片剂还包括作为辅料的：

亲水凝胶为K100M羟丙基甲基纤维素或K15M羟丙基甲基纤维素中任一种；

起泡剂为CaCO₃或NaHCO₃中任一种；

助漂剂为十八醇、CMC-Na和CMS-Na中任一种；

制孔剂为PFG600。

所述片剂的配方为盐酸乐卡地平、盐酸小檗碱、K15M羟丙基甲基纤维素、CMS-Na 、NaHCO₃、PFG600和硬脂酸镁。

所述盐酸乐卡地平、盐酸小檗碱、K15M羟丙基甲基纤维素、CMS-Na 、NaHCO₃、PFG600和硬脂酸镁的重量比为20:10:35:47:20:15:1.5。

盐酸乐卡地平组合药物片的制备方法，所述片剂为称取主药及各种辅料，分别研磨并过80目筛，用等量递加法充分混匀，加入适量硬脂酸镁，混匀，经浅凹冲模干法直接压片制备得到盐酸乐卡地平药物组合片剂。

所述浅凹冲模干法直接压片的片剂硬度为5kg/cm²。

所述的盐酸乐卡地平组合药物片在制备治疗高血压药物中的应用。

本发明的有益技术效果是：本发明提供的药物组合能够有效的治疗糖尿病引发的高血压，并且对于肾脏具有一定的保护作用。同时本发明将上述药物组合制备成为胃漂浮片剂更有利于药物的吸收，增加了药物组合的生物利用度，对高血压的治疗效果更好。

附图说明

图1  HPMC对片剂累积释放度的影响；

图2  HPMC(K15M)对片剂累积释放度的影响；

图3  起泡剂对片剂累积释放度的影响；

图4  起泡剂NaHCO₃对片剂累积释放度的影响；

图5  助漂剂对片剂累积释放度的影响；

图6  助漂剂CMS-Na对片剂累积释放度的影响；

图7  致孔剂对片剂累积施放的影响；

图8  硬度对片剂的影响。

具体实施方式

实施例1 盐酸乐卡地平药物组合片剂制备及影响因素考察

1、盐酸乐卡地平药物组合片剂的制备

胃漂浮片通常由主药、亲水性凝胶及其他一些辅料(如起泡剂、助漂剂、致孔剂等)组成，实际上是一种不崩解的亲水性骨架片。本实验所制盐酸乐卡地平药物组合胃漂浮片按处方量称取主药及各种辅料，分别研磨并过80目筛，用等量递加法充分混匀，加入适量硬脂酸镁，混匀，经浅凹冲模干法直接压片，每片活性成分含量为40mg。

2、体外漂浮性能试验分析方法的建立

采用《中国药典》2010年版二部附录XC第1法装置，将盐酸小檗碱胃漂浮片放入37℃的0.1mol/L盐酸中，转速为50 r/min，观察片剂起漂时间和持漂时间。结果表明，所制片剂的起漂时间及持漂时间均与处方有关。

采用《中国药典》2010年版二部附录XC第1法装置，按附录XD第1法测定，转速为50r／min，以0.1 mol／L盐酸为释放介质，温度保持在(37±0.5)℃。依法操作，分别于1，2，4，6，8，10，12 h时取样(同时补充同温等量介质)，用0.45μm滤膜过滤。取续滤液适当稀释后，于263 nm处测定吸光度，由标准曲线计算不同时间的药物质量浓度和累积释放度。

3、漂浮片影响因素考察

1）亲水凝胶的影响

羟丙基甲基纤维素规格的影响

分别采用K100M羟丙基甲基纤维素（HPMC）或K15M羟丙基甲基纤维素（HPMC）为亲水凝胶骨架材料，按照表1中的处方量，控制硬度为5kg/cm²，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能，结果见附图1和表1所示。

结果表明，各片剂均能在较短时间内起漂，但用HPMC(K100M)作为骨架材料的片剂，放入液体中很快溶解，不能达到持漂效果，未作释放度测定，故本实验选用HPMC(K15M)作为骨架材料。

表1HPMC对片剂漂浮性能的影响

HPMC用量的影响

其他辅料及制备工艺不变，按照表2中的处方量，控制硬度为5 kg，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能。结果见表2和图2所示。结果表明，HPMC(K15M)用量增大会导致释药速度明显减慢，且漂浮时起漂时间延长。

表2  HPMC（K15M）组对片剂漂浮性能的影响

2）起泡剂的影响

起泡剂类型的影响

分别采用CaCO₃，NaHCO₃作为起泡剂，按照表3中的处方量，控制硬度为5 kg，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能。结果见表3和图3所示。结果表明，用CaCO₃作为起泡剂的片剂起漂时问过长，不能达到胃漂浮片在5min之内起漂的一般要求。这是由于CaCO₃密度较大，增加了片剂的整体密度，导致其不能快速起漂。因其漂浮性能未达标，故未进行溶出度测定。因此本实验选用NaHCO₃作为起泡剂。

表3 起泡剂对片剂漂浮性能的影响

起泡剂用量的影响

其他辅料及制备工艺不变，按照表4中的处方量，控制硬度为5 kg，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能。结果见表4和图4。结果表明，NaHCO₃用量对漂浮性能影响显著，随着其用量的增加，起漂时间逐渐缩短，持漂时间都大于8 h。这是由于NaHCO₃遇胃酸产生气体，大量气泡藏匿在制剂骨架中以减轻片剂密度，有助于漂浮；而且随着NaHCO₃用量的增加，前6 h药物释放速度明显增加，这是由于NaHCO₃的用量增大后，会破坏凝胶层从而影响释放。

表4  起泡剂对片剂漂浮性能的影响

3）助漂剂的影响

助漂剂类型的影响

分别采用十八醇、CMC-Na和CMS-Na作为助漂剂，按照表5中的处方量，控制硬度为5 kg/cm²，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能，结果见表5和图5所示。结果表明，十八醇及CMS-Na可使片剂短时间内起漂，CMC-Na起漂时间相对较长，但仍可以在5min内起漂。对于释放度的影响，实验发现十八醇溶出过快，缓释效果不理想；CMC-Na溶出偏慢，最终的累积释放度不到60%，亦不是此片剂的理想助漂剂。

表5  助漂剂对片剂漂浮性能的影响

助漂剂用量的影响

其他辅料及制备工艺不变，按照表6中的处方量，控制硬度为5kg/cm²，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能。结果见表6和图6所示。结果表明，随着CMS-Na用量的增加，片剂的持续漂浮能力下降，当用量超过一定值时，持漂时间﹤8h，不能达标。

表6  助漂剂对片剂漂浮性能的影响

4）致孔剂用量的影响

其他辅料及制备工艺不变，按照表6中的处方量，控制硬度为5kg/cm²，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能。结果见表7和图7所示。结果表明，随着PEG6000用量的增加，片剂的持续漂浮能力随之增强，尤其是其质量分数超过15%后，起漂时间明显缩短。释放度方面，由于PFG6000易溶于水，一次可显著调节药物的溶出速度，PEG6000用量越大，释药速度和最终的累积释放度都呈上升趋势。

表7  致孔剂对片剂漂浮性能的影响

5）片剂硬度的影响

片剂硬度分别控制在3,5,7kg/cm²,按照表8中的处方量，制备片剂，测定其漂浮性能和释药性能。结果见表8和图8所示。结果表明，硬度对片剂的漂浮性能和释药性能都能有极其显著地影响，硬度越大，起漂时间越长，释药速率越慢，释药量越少。

表8  硬度对片剂漂浮性能的影响

6）正交试验

在单因素考察的基础上，进一步对处方中对片剂性能影响较大的因素进行正交试验，从而确定最优处方。根据以上实验数据，本实验选取的4个因素分别为亲水凝胶骨架HPMC（K15M）质量、起泡剂NaHCO₃质量、致孔剂PEG6000质量、硬度。以下按照L₉（3⁴）表进行4因素3水平正交试验设计，见表9所。实验中，控制主药盐酸小檗碱质量分数为20%，助漂剂CMS-Na质量分数为30%，润滑剂硬脂酸镁质量分数为1%，以片剂漂浮性能及体外释放度为评价指标，优化实验条件，结果见表10。

表1O中，y_漂浮为片剂漂浮性能得分，y_释放为片剂释放度得分，y_i为实验结果综合得分，计算公式为Y =y_漂浮×40 +y_释放×6O ，综合得分高者为优；K₁，K₂，K₃分别为1，2，3水平的综合得分平均值，R为水平间的极差，极差最大者为最大影响因素。方差分析见表11。

为进一步判断实验误差与实验条件是否影响实验结果，将正交试验数据进行方差分析。F检验结果表明，4个因素的影响都比较显著，尤其以第4个因素(硬度)对漂浮片的影响最为显著。从表10可看出各因素对盐酸乐卡地平药物组合胃漂浮片的影响作用从大到小顺序为D﹥B﹥C﹥A 。

通过单因素考察实验及正交试验，最终确定盐酸乐卡地平药物组合胃漂浮片的最优处方为盐酸盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱质量为3Omg，HPMC(K15M)质量为35mg，CMS-Na质量为47 mg，NaHCO₃质量为20 mg，PEG6000质量为15 mg，硬脂酸镁质量为1.5 mg。最佳工艺如下：按处方量称取主药及各种辅料，分别研磨并过8O目筛，用等量递加法充分混匀，加入硬脂酸镁，混匀。浅凹冲模干法直接压片，片剂硬度控制在5kg/cm²。制备得到盐酸乐卡地平药物组合片剂。

采取上述方法，称取盐酸盐酸乐卡地平3.75g和盐酸小檗碱26.25g,按上述辅料配方和方法，制备得到1000片得到盐酸乐卡地平药物组合片剂作为药物组Ⅰ。

采取上述方法，称取盐酸盐酸乐卡地平27.7g和盐酸小檗碱2.3g,按上述辅料配方和方法，制备得到1000片得到盐酸乐卡地平药物组合片剂作为药物组Ⅱ。

采取上述方法，称取盐酸盐酸乐卡地平15g和盐酸小檗碱15g,按上述辅料配方和方法，制备得到1000片得到盐酸乐卡地平药物组合片剂作为药物组Ⅲ。

采取上述方法，称取盐酸盐酸乐卡地平21.5g和盐酸小檗碱8.5g,按上述辅料配方和方法，制备得到1000片得到盐酸乐卡地平药物组合片剂作为药物组Ⅳ。

采取上述方法，称取盐酸盐酸乐卡地平18.75g和盐酸小檗碱11.25g,按上述辅料配方和方法，制备得到1000片得到盐酸乐卡地平药物组合片剂作为药物组Ⅴ。

表9  硬度对片剂漂浮性能的影响

表10  正交试验结果

表11  方差分析

注：F_{0.01（2,2）}=99.01；F_{0.05（2,2）}=19.00；^△表示误差项。

处方中HPMC(K15M)是亲水凝胶，遇水能迅速膨胀，使片形体积增大而有助于制剂起漂，并能缓慢溶蚀，阻滞药物在人工胃液中的释放；PEG6000易溶于水，在骨架片中为致孔剂，是调节药物释放速度的一种重要材料。CMS-Na和NaHCO₃是一组有助于制剂漂浮的材料，CMS-Na密度小，质轻，NaHCO₃遇胃液产生气泡，二者均有助于漂浮；而适量的硬脂酸镁可以增加粉末的流动性，有利于盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱药物组合胃漂浮片的粉末直接压片。

实施例2 盐酸乐卡地平药物组合片剂降压以及对肾脏保护作用考察1

12周龄自发性高血压大鼠30只，同龄空白组 (Wistar.Kyoto)大鼠10只，均为雄性，自发性高血压大鼠随机分成3组，对照组(10只) 药物治疗组(10只)和盐酸乐卡地平对照组(10只)，先适应性喂养3d， 盐酸乐卡地平对照组予以盐酸乐卡地平30mg/(kg·d)灌胃，药物治疗组采用实施例1所述的药物组Ⅰ按照缬沙坦含量15mg/(kg·d)，对照组及空白组组每日予以等量蒸馏水灌胃，2种大鼠均购自中国医学科学院实验动物繁育中心，均以普通饲料喂养，喂养12周+3d后同时处死、检测。

分别于实验前于大鼠眼眶后采集血液，实验结束时心脏采血，加入抗凝管，3000r/min离心5min送检，检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)，同时用代谢笼收集大鼠24h尿液，尿β₂-微球蛋白(β₂-MG)采用尿β₂-MG放免试剂盒(中国原子能科学研究所)检测。

肾组织标本经10％的中性福尔马林固定，石蜡包埋，切成3μm厚的切片，分别经二甲苯脱蜡、分级酒精水化后，按SP法试剂盒操作，一抗分别为羊抗大鼠CTGF多克隆抗体，二抗为兔抗羊单克隆抗体，DAB显色后苏木素复染、脱水封片、观察。镜下观察细胞，以细胞胞浆和管周间质出现棕黄色染色为阳性信号。

肾组织CTGF的免疫组化半定量分析采用图像分析软件，在每个标本放大400倍图像的肾皮质区依次选取5个视野，染色阳性部位的深浅及范围以平均光密度表示。

采用SPSS统计软件，五组间资料比较采用t检验。肾组织中CTGF的表达与尿微量蛋白的相关性采用spearman等级相关分析。具体结果如表12所示。

表12  五组大鼠不同阶段血压比较（

±s mmHg）

与其他组比较^** P﹤0.01  与实验前比较 ^△ P﹤0.05

12周后，与空白组组和药物治疗组相比，对照组的血压明显升高(P<0.01)。各组大鼠尿β₂-MG、肾功能改变如表13所示。

表13  五组大鼠实验前后和12周后尿β₂-MG、肾功能改变（

±s）

与空白组组实验前比较^*P﹤0.05  与12周后空白组组和SHR组比较^△ P﹤0.01 与药物治疗组实验前比较^△△ P﹤0.05

五组大鼠CTGF在肾脏中的表达与β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系在对照组，随着高血压持续时间的延长，肾脏CTGF的表达明显增加，同时，尿β2-MG也增高，与空白组组和药物治疗组相比差异有显著性(P<0.01)。尿β₂-MG与肾脏CTGF的表达呈正相关(r=0.783，P<0.05)，与大鼠的尾动脉压也呈正相关(r=0。723，P<0.05)。具体结果如表14所示。

 

表14  CTGF在各组大鼠肾脏中的表达与尿β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系（

±s）

与空白组组实验前比较^**P﹤0.01  与药物治疗组比较^△△P﹤0.01 

正常大鼠肾小球、肾小管仅有微量CTGF表达，而在对照组，CTGF表达明显增加，广泛分布于从近端小管到髓质集合管处的上皮细胞胞浆中，在某些坏死脱落细胞中也可见到CTGF的表达，而药物治疗组CTGF阳性表达则明显减少。

慢性进性行肾病是原发性高血压患者靶器官损伤的一个重要表现，也是临床导致末期肾功能衰竭最重要的疾病之一。自发性高血压大鼠类似于人类的原发性高血压，是研究高血压及其靶器官损害的良好动物模型。

尿中微量蛋白排泄增加是高血压靶器官损害的早期信号，而血BUN和Scr 一般只是反映中晚期肾功能改变的指标，另外，蛋白尿既是肾损害发生的起始信号，也是促进肾功能进一步恶化的主要因素。因为蛋白尿反过来会加剧肾小球的损害，两者相互促进，随着时间的推移，最后就会导致中晚期肾功能的改变。研究证实，高血压时肾组织中AngⅡ水平明显增高，且AngⅡ在蛋白尿的产生和肾脏纤维化的进程中起着重要作用。Wolf等证实在肾脏细胞AngⅡ也能刺激TGF-β₁合成，又发现AngⅡ能使TGF-β₁mRNA的表达升高。Oemar等 和Igarashi等 发现在成纤维细胞和血管平滑肌细胞中TGF-β₁可特异性诱导CTGF mRNA的表达，它能刺激细胞增殖及细胞外基质的合成，是TGF-β₁的下游效应介质。它只介导了TGF-β₁的负面效应，如ECM聚集等。故阻断CTGF就可阻断TGF-β₁的负面效应，而不影响TGF-β₁的正面效应，从而说明针对CTGF的治疗将会比针对TGF-β₁的治疗更具前景。缬沙坦是目前作用最强的AngⅡ受体拮抗剂(ARB)，其生理和药理作用主要通过AT₁受体发挥作用。ARB的作用主要是阻断AT₁受体介导的反应，从而阻断AngⅡ诱导的TGF-β₁的表达升高及尿微量蛋白的增加，发挥肾脏保护作用。

本研究显示，对照组伴尿β₂-MG明显增高者肾脏CTGF表达也明显增高，且CTGF表达与尿β₂-MG呈显著正相关。而药物治疗组及空白组组不伴尿β2-MG增高者，肾脏CTGF表达不增高，提示肾脏CTGF的表达水平与对照组肾脏靶器官的损害密切相关。这说明缬沙坦可能是通过阻断AngⅡ诱导的TGF-β₁的表达升高，从而间接阻断TGF-β₁诱导CTGF的表达增加而发挥肾脏保护作用。

总之，随着高血压的持续作用，对照组较正常组及治疗组肾脏CTGF的表达均显著增加，并与尿β₂-MG增加密切相关，而尿β₂-MG的增加又是高血压靶器官损害的早期信号。因此，进一步研究CTGF参与早期肾脏损害的机制，对于预防和控制高血压所致的肾损害的发生和发展将具有重要的临床意义。

实施例3盐酸乐卡地平药物组合片剂降压以及对肾脏保护作用考察2

采用实施例2所述的方法，考察实施例1所提供药物组Ⅱ对降低血压计对肾脏的保护，具体结果如表15所示。

表15 五组大鼠不同阶段血压比较（

±s mmHg）

与其他组比较^** P﹤0.01  与实验前比较 ^△ P﹤0.05

12周后，与空白组组和药物治疗组相比，对照组的血压明显升高(P<0.01)。各组大鼠尿β₂-MG、肾功能改变如表16所示。

 

表16 五组大鼠实验前后和12周后尿β2-MG、肾功能改变（

±s）

与空白组组实验前比较^*P﹤0.05  与12周后空白组组和SHR组比较^△ P﹤0.01 与药物治疗组实验前比较^△△ P﹤0.05

五组大鼠CTGF在肾脏中的表达与β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系在对照组，随着高血压持续时间的延长，肾脏CTGF的表达明显增加，同时，尿β₂-MG也增高，与空白组组和药物治疗组相比差异有显著性(P<0.01)。尿β₂-MG与肾脏CTGF的表达呈正相关(r=0.783，P<0.05)，与大鼠的尾动脉压也呈正相关(r=0。723，P<0.05)。具体结果如表17所示。

 

表17 CTGF在各组大鼠肾脏中的表达与尿β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系（

±s）

与空白组组实验前比较^**P﹤0.01  与药物治疗组比较^△△P﹤0.01 

综合本实验研究结果表明：药物组Ⅱ的实验结论同实施例3所述的实验结论相近。

实施例4 盐酸乐卡地平药物组合片剂降压以及对肾脏保护作用考察3

采用实施例2所述的方法，考察实施例1所提供药物组Ⅲ对降低血压计对肾脏的保护，具体结果如表18所示。

表18 五组大鼠不同阶段血压比较（

±s mmHg）

与其他组比较^** P﹤0.01  与实验前比较 ^△ P﹤0.05

12周后，与空白组组和药物治疗组相比，对照组的血压明显升高(P<0.01)。各组大鼠尿β₂-MG、肾功能改变如表19所示。

表19 五组大鼠实验前后和12周后尿β₂-MG、肾功能改变（

±s）

与空白组组实验前比较^*P﹤0.05  与12周后空白组组和SHR组比较^△ P﹤0.01 与药物治疗组实验前比较^△△ P﹤0.05

五组大鼠CTGF在肾脏中的表达与β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系在对照组，随着高血压持续时间的延长，肾脏CTGF的表达明显增加，同时，尿β₂-MG也增高，与空白组组和药物治疗组相比差异有显著性(P<0.01)。尿β₂-MG与肾脏CTGF的表达呈正相关(r=0.783，P<0.05)，与大鼠的尾动脉压也呈正相关(r=0。723，P<0.05)。具体结果如表20所示。

表20  CTGF在各组大鼠肾脏中的表达与尿β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系（

±s）

与空白组组实验前比较^**P﹤0.01  与药物治疗组比较^△△P﹤0.01 

综合本实验研究结果表明：药物组Ⅲ的实验结论同实施例3所述的实验结论相近。

实施例5 盐酸乐卡地平药物组合片剂降压以及对肾脏保护作用考察4

采用实施例2所述的方法，考察实施例1所提供药物组Ⅳ对降低血压计对肾脏的保护，具体结果如表21所示。

表21 五组大鼠不同阶段血压比较（±s mmHg）

与其他组比较^** P﹤0.01  与实验前比较 ^△ P﹤0.05

12周后，与空白组组和药物治疗组相比，对照组的血压明显升高(P<0.01)。各组大鼠尿β₂-MG、肾功能改变如表22所示。

表22 五组大鼠实验前后和12周后尿β₂-MG、肾功能改变（

±s）

与空白组组实验前比较^*P﹤0.05  与12周后空白组组和SHR组比较^△ P﹤0.01 与药物治疗组实验前比较^△△ P﹤0.05

五组大鼠CTGF在肾脏中的表达与β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系在对照组，随着高血压持续时间的延长，肾脏CTGF的表达明显增加，同时，尿β₂-MG也增高，与空白组组和药物治疗组相比差异有显著性(P<0.01)。尿β₂-MG与肾脏CTGF的表达呈正相关(r=0.783，P<0.05)，与大鼠的尾动脉压也呈正相关(r=0。723，P<0.05)。具体结果如表23所示。

表23  CTGF在各组大鼠肾脏中的表达与尿β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系（

±s）

与空白组组实验前比较^**P﹤0.01  与药物治疗组比较^△△P﹤0.01 

综合本实验研究结果表明：药物组Ⅳ的实验结论同实施例3所述的实验结论相近。

实施例6 盐酸乐卡地平药物组合片剂降压以及对肾脏保护作用考察5

采用实施例2所述的方法，考察实施例1所提供药物组Ⅴ对降低血压计对肾脏的保护，具体结果如表24所示。

表24 五组大鼠不同阶段血压比较（

±s mmHg）

与其他组比较^** P﹤0.01  与实验前比较 ^△ P﹤0.05

12周后，与空白组组和药物治疗组相比，对照组的血压明显升高(P<0.01)。各组大鼠尿β₂-MG、肾功能改变如表25所示。

表25 五组大鼠实验前后和12周后尿β₂-MG、肾功能改变（±s）

与空白组组实验前比较^*P﹤0.05  与12周后空白组组和SHR组比较^△ P﹤0.01 与药物治疗组实验前比较^△△ P﹤0.05

五组大鼠CTGF在肾脏中的表达与β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系在对照组，随着高血压持续时间的延长，肾脏CTGF的表达明显增加，同时，尿β₂-MG也增高，与空白组组和药物治疗组相比差异有显著性(P<0.01)。尿β₂-MG与肾脏CTGF的表达呈正相关(r=0.783，P<0.05)，与大鼠的尾动脉压也呈正相关(r=0。723，P<0.05)。具体结果如表26所示。

表26  CTGF在各组大鼠肾脏中的表达与尿β₂-MG及大鼠尾动脉压之间的关系（±s）

与空白组组实验前比较^**P﹤0.01  与药物治疗组比较^△△P﹤0.01 

综合本实验研究结果表明：药物组Ⅳ的实验结论同实施例3所述的实验结论相近。

Claims (9)

1.盐酸乐卡地平组合药物片，其特征在于：所述片剂为盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱作为活性成分，添加辅料制成的胃漂浮片剂。

2.根据权利要求1所述的盐酸乐卡地平组合药物片，其特征在于：所述盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱的重量比为1-12:1-7。

3.根据权利要求2所述的盐酸乐卡地平组合药物片，其特征在于：所述盐酸乐卡地平和盐酸小檗碱的重量比为5-7:2-3。

4.根据权利要求3所述的盐酸乐卡地平组合药物片，其特征在于：所述片剂还包括作为辅料的：

亲水凝胶为K100M羟丙基甲基纤维素或K15M羟丙基甲基纤维素中任一种；

起泡剂为CaCO₃或NaHCO₃中任一种；

助漂剂为十八醇、CMC-Na和CMS-Na中任一种；

制孔剂为PFG600。

5.根据权利要求4所述的盐酸乐卡地平组合药物片，其特征在于：所述片剂的配方为盐酸乐卡地平、盐酸小檗碱、K15M羟丙基甲基纤维素、CMS-Na 、NaHCO₃、PFG600和硬脂酸镁。

6.根据权利要求5所述的盐酸乐卡地平组合药物片，其特征在于：所述盐酸乐卡地平、盐酸小檗碱、K15M羟丙基甲基纤维素、CMS-Na 、NaHCO₃、PFG600和硬脂酸镁的重量比为20:10:35:47:20:15:1.5。

7.盐酸乐卡地平组合药物片的制备方法，其特征在于：所述片剂为称取主药及各种辅料，分别研磨并过80目筛，用等量递加法充分混匀，加入适量硬脂酸镁，混匀，经浅凹冲模干法直接压片制备得到盐酸乐卡地平药物组合片剂。

8.根据权利要求7所述的盐酸乐卡地平药物组合片剂的制备方法，其特征在于：所述浅凹冲模干法直接压片的片剂硬度为5kg/cm²。

9.权利要求1-5所述的盐酸乐卡地平组合药物片在制备治疗高血压药物中的应用。

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