CN102670660B - 九香虫的加工方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种九香虫的加工方法及应用，取九香虫鲜虫的虫体，采用压榨法或双管离心法提取虫体中的血淋巴液，将提取得到的血淋巴液置于装有抗凝剂的离心管中，在转速为12000r/min，温度为4℃的条件下离心10分钟，使血淋巴液中的水溶性组分与脂溶性组分分离，分别将血淋巴液的水溶性组分与脂溶性组分吸取到不同的离心管中，获得血淋巴液的水溶性组分及脂溶性组分；再将被提取过的虫体经文火炮制加工制得九香虫干燥药材。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药材的加工工艺，特别涉及一种对九香虫鲜虫进行加工的新型工艺，及利用此新型加工方法得到一种具抗癌活性作用的提取物。
背景技术
九香虫Asporgopus chinensis Dallas，属昆虫纲、半翅目、兜蝽科，为中国特有种，产于安徽、江苏、浙江、江西、福建、台湾、广东、广西、湖南、云南、贵州及四川等地。我国传统中医有用之入药的悠久历史，并为现代医药重视。《本草纲目》早有记载“咸温无毒，用于膈脘滞气，脾肾亏损，壮肾之阳。《本草纲目新编》载：“味甘辛，气微温，入肝肾经，虫中至佳者，亦兴阳之物”。 《中国药典》(2005年版) 收载中药,具有理气止痛、温中助阳之功能。在我国很多省区，民间多用九香虫泡酒服用以作壮阳之品。现代医学认为九香虫对某些种类的肿瘤和癌症有良好的治疗效果，由于其具有较高的药用和营养价值，近年来广泛应用于临床和保健食品开发。
九香虫在抗癌抑癌方面已经初步得到认可，国内中医时有报道。杨勤建等研制了中药复方香龙散，由半夏、天龙、九香虫、白术等组成，通过血清药理学方法，初步观察了其诱导人胃癌细胞凋亡的作用，从形态学和流式细胞仪检测均呈现明显的凋亡特征。宋文涛等利用蚕豆根尖微核技术，测定美洲大蠊和九香虫混合成分对环磷酰胺所诱导突变的抑制作用。结果显示，美洲大蠊和九香虫混合成分能有效抑制蚕豆根尖细胞微核率的升高，具有很好的抑制突变作用，这为进一步研究美洲大蠊和九香虫混合成分的抗肿瘤作用及其机制提供依据。中药癌痛克（全蝎、土元、九香虫、大黄、人参、灵芝、黄芪等组成）用于原发性和转移性中晚期肿瘤，可通过抑制HepG2细胞增殖或诱导其凋亡而发挥抗肝癌作用；林普莲在摸索中药防治癌症的过程中，自拟“九香抗癌定痛散”以治疗癌痛，取得一定效果。九香定痛散有效成分包括九香虫、乳香、九里香、粉防己、两面针山慈姑、甘草、大黄等，其中九香虫、乳香、山慈姑、甘草、大黄等主药都具有消肿止痛、祛瘀解毒和抗肿瘤功效。此药的直接镇痛作用和抗肿瘤作用消除了致病因素，对癌症有良好的止痛效果。
然而在上述研究中，全部是以九香虫干燥虫体入药，且传统的九香虫药材加工方式为将其放入陶罐或玻璃罐内,加酒少量,盖紧,闷死,后在通风处阴干。或置温热水中烫死,后晒干或微火焙干。取原药拣除杂质,用文火炒后筛去灰屑。或用10%黄酒喷洒,拌匀,待吸干后,置锅内炒至微有焦斑时,取出,晾干。此传统的加工方式仅得到九香虫的干燥体，其血淋巴液在干燥体中基本没有残留，因此现有技术没有对九香虫的血淋巴等活性成分进行充分利用。
发明内容
本发明的目的是：提供一种九香虫的加工方法及应用，它在制备获得九香虫干燥虫体的同时，能有效提取九香虫体内的各种活性成分，并将提取的活性成分应用于抗癌药物的制备。
本发明是这样实现的：九香虫的加工方法，取九香虫鲜虫的虫体，采用压榨法或双管离心法提取虫体中的血淋巴液，将提取得到的血淋巴液置于装有抗凝剂的离心管中，在转速为12000r/min，温度为4℃的条件下离心10分钟，使血淋巴液中的水溶性组分与脂溶性组分分离，分别将血淋巴液的水溶性组分与脂溶性组分吸取到不同的离心管中，获得血淋巴液的水溶性组分及脂溶性组分；再将被提取过的虫体经文火炮制加工制得九香虫干燥药材。
所述的取九香虫鲜虫的虫体是指，先将九香虫鲜虫清洗后用滤纸吸干，并放置于-20℃冰箱中速冻致死或在其死后二十分钟内放置于-20℃度冰箱中冰冻，使用前在4℃的温度下解冻30分钟，再将其头部及翅膀一起掰下，获得九香虫鲜虫的胸部及尾部。这样的方式可以避免九香虫中的活性蛋白变性失活。
所述的压榨法是将虫体放置于一支没有针头和充填器的塑料注射器内,压碎虫体,再通过玻璃棉粗过滤,获得血淋巴液。
所述的双管离心法是，将虫体放入吸管或底部带孔的内离心管中，将吸管或内离心管插入到外离心管中；经过离心后使虫体中的血淋巴液被分离到外离心管中，从而获得血淋巴液。
将被提取过的虫体先放置于锅中炒热，簸去碎屑，再于药料上均匀喷洒质量百分比浓度为12%的黄酒，炒至有药材香气后立即出锅，凉后备用，制得九香虫干燥药材。
九香虫血淋巴液的水溶性组分在制备抗癌药物中的应用。
为了证明九香虫血淋巴液的水溶性组的药效，因此进行了以下实验:
九香虫血淋巴液的水溶性组分作用于胃癌SGC-7901的MTT检测
1、培养胃癌SGC-7901细胞，用0.25%胰蛋白酶溶液消化胃癌SGC-7901细胞，以每孔5×103个细胞接种于96孔培养板上，每孔体积为100μl，每组四孔，待细胞贴壁后分别加入不同剂量的血淋巴液，设缓冲液PBS组为对照。
2、在CO2培养箱中37℃、2% CO2浓度下培养48h。
3、48h后，取出培养板，每孔加入MTT溶液（5mg/ml）10μl，在37℃继续孵育4h，每孔加入100μl Formazan溶解液，继续培养4h,待结晶充分溶解，在参考波长630nm,检测波长570nm处测定光吸收值（OD值）。统计分析处理数据如下图1所示。
根据图1可以得知，九香虫血淋巴液的水溶性组分在低浓度C5(0.5ug/ml)即对胃癌SGC-7901细胞的生长具有抑制作用，在C3（1.5ug/ml）浓度时抗癌效果最佳。
由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本发明采用现代化低温分离提取技术，将九香虫的虫体与血淋巴液进行分离，分别获得血淋巴液的水溶性组分和脂溶性组分，充分利用了九香虫体内的各种活性成分，除了制成传统的九香虫药材外，还分离得到一种提取物，该提取物经体外抗癌活性实验证明其对胃癌SGC-7901具有明显的抗癌效果。且九香虫是一种美味的食用昆虫，说明其对人体无毒负作用，此新型加工工艺得到的副产品既满足了人类对昆虫源蛋白、脂肪的需求，又可用于保健品、食品及药物进一步开发、生产，具有较大的应用推广前景。本发明方法简单，容易实施，成本低廉，使用效果好。
附图说明
附图1为九香虫血淋巴作用于胃癌SGC-7901的MTT检测。
具体实施方式
本发明的实施例1：九香虫的加工方法，先将九香虫鲜虫清洗后用滤纸吸干，将九香虫鲜虫放置于-20℃冰箱中速冻致死，将已死的九香虫在20分钟内放置于-20℃冰箱中冰冻，然后在4℃的温度下解冻30分钟，再将其头部及翅膀一起掰下，获得九香虫鲜虫的胸部及尾部，即得虫体；将虫体放置于一支没有针头和充填器的塑料注射器内,压碎虫体,再通过玻璃棉粗过滤,获得血淋巴液；将提取得到的血淋巴液置于装有抗凝剂的离心管中，在转速为12000r/min，温度为4℃的条件下离心10分钟，使血淋巴液中的水溶性组分与脂溶性组分分离，分别将血淋巴液的水溶性组分与脂溶性组分吸取到不同的离心管中，获得血淋巴液的水溶性组分及脂溶性组分；再将被提取过的虫体、头部及翅膀放置于锅中炒热，簸去碎屑，再于药料上均匀喷洒质量百分比浓度为12%的黄酒，炒至有药材香气后立即出锅，凉后备用，制得九香虫干燥药材。
取分离获得的血淋巴液的水溶性组分5g，药用淀粉75 g、微晶纤维素20 g，将药用淀粉先干燥，过120目筛，再与血淋巴液的水溶性组分、微晶纤维素混合，过两次120目筛，填入硬胶囊中，制成1000粒胶囊。
本发明的实施例2：九香虫的加工方法，先将九香虫鲜虫清洗后用滤纸吸干，将九香虫鲜虫放置于-20℃冰箱中速冻致死，将已死的九香虫在20分钟内放置于-20℃冰箱中冰冻，使用前在4℃的温度下解冻30分钟，再将其头部及翅膀一起掰下，获得九香虫鲜虫的胸部及尾部，即得虫体；将虫体放入吸管或底部带孔的内离心管中，将吸管或内离心管插入到外离心管中；经过离心后使虫体中的血淋巴液被分离到外离心管中，从而获得血淋巴液；将提取得到的血淋巴液置于装有抗凝剂的离心管中，在转速为12000r/min，温度为4℃的条件下离心10分钟，使血淋巴液中的水溶性组分与脂溶性组分分离，分别将血淋巴液的水溶性组分与脂溶性组分吸取到不同的离心管中，获得血淋巴液的水溶性组分及脂溶性组分；再将被提取过的虫体、头部及翅膀放置于锅中炒热，簸去碎屑，再于药料上均匀喷洒质量百分比浓度为12%的黄酒，炒至有药材香气后立即出锅，凉后备用，制得九香虫干燥药材。
取分离获得的血淋巴液的水溶性组分5g、羟丙甲纤维素6g、羧甲淀粉钠10g，微晶纤维素8g，乳糖115g、淀粉50g，硬脂酸镁1g；将主药与辅料充分混匀后投入高速搅拌机中，喷雾加水适量，整粒，水分控制在3~4%，然后压片，制成1000片，包薄膜衣。
本发明的实施例3：九香虫的加工方法，先将九香虫鲜虫清洗后用滤纸吸干，将九香虫鲜虫放置于-20℃冰箱中速冻致死，将已死的九香虫在20分钟内放置于-20℃冰箱中冰冻，然后在4℃的温度下解冻30分钟，再将其头部及翅膀一起掰下，获得九香虫鲜虫的胸部及尾部，即得虫体；将虫体放置于一支没有针头和充填器的塑料注射器内,压碎虫体,再通过玻璃棉粗过滤,获得血淋巴液；将提取得到的血淋巴液置于装有抗凝剂的离心管中，在转速为12000r/min，温度为4℃的条件下离心10分钟，使血淋巴液中的水溶性组分与脂溶性组分分离，分别将血淋巴液的水溶性组分与脂溶性组分吸取到不同的离心管中，获得血淋巴液的水溶性组分及脂溶性组分；再将被提取过的虫体、头部及翅膀放置于锅中炒热，簸去碎屑，再于药料上均匀喷洒质量百分比浓度为12%的黄酒，炒至有药材香气后立即出锅，凉后备用，制得九香虫干燥药材。
按重量百分比，将分离获得的血淋巴液的脂溶性组分与菜籽油、花生油按1:20:20比例配制可制作成具有保健功能的调和油。
Claims (2)
1.一种九香虫的加工方法，其特征在于：取九香虫鲜虫的虫体，采用压榨法提取虫体中的血淋巴液，将提取得到的血淋巴液置于装有抗凝剂的离心管中，在转速为12000r/min，温度为4℃的条件下离心10分钟，使血淋巴液中的水溶性组分与脂溶性组分分离，分别将血淋巴液的水溶性组分与脂溶性组分吸取到不同的离心管中，获得血淋巴液的水溶性组分及脂溶性组分；再将被提取过的虫体经文火炮制加工制得九香虫干燥药材；所述的压榨法是将虫体放置于一支没有针头和充填器的塑料注射器内,压碎虫体,再通过玻璃棉粗过滤,获得血淋巴液；将被提取过的虫体、头部及翅膀放置于锅中炒热，簸去碎屑，再于药料上均匀喷洒质量百分比浓度为12%的黄酒，炒至有药材香气后立即出锅，凉后备用，制得九香虫干燥药材。
2.根据权利要求1所述的九香虫的加工方法，其特征在于：所述的取九香虫鲜虫的虫体是指，先将九香虫鲜虫清洗后用滤纸吸干，并放置于-20℃冰箱中速冻致死或在其死后二十分钟内放置于-20℃度冰箱中冰冻，使用前在4℃的温度下解冻30分钟，再将其头部及翅膀一起掰下，获得九香虫鲜虫的胸部及尾部。
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