CN102661949A - 一种尿液肌酐检测试纸及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种尿液肌酐检测试纸及其制备方法，该试纸属于体外诊断试纸。该试纸是通过以下方法制备得到的：先将显色片充分浸入A液后取出，于70～100℃下干燥15～30min，然后将干燥后的显色片浸入B液，于70～100℃条件下干燥5～15min；其中，每1000mLA液含：2mol/LTris缓冲液(pH：6.0～8.0)，硫酸铜0.2～2.0g，柠檬酸钠或柠檬酸钾1.0～5.0g，橙黄G100～200mg，用纯水定容；每1000mLB液含：聚乙烯吡咯烷酮10～20g，还原性染料0.5～5.0g，用氯仿定容。本发明试纸制备方法简单，性能稳定，易保存，不同尿肌酐含量对应的色阶明显，便于医院检验科及非专业检验人员使用。
Description
技术领域
本发明涉及一种尿液肌酐检测试纸及其制备方法，属于体外诊断试剂。
技术背景
人体90％的肌酸存在于肌肉中，且大部分以磷酸肌酸的形式存在。磷酸肌酸脱去磷酸后生成肌酐，后者随尿液排出即为尿肌酐。尿肌酐主要来自血液，经肾小球过滤后随尿液排出体外。尿肌酐检查可以测定血液经肾滤过排出的肌酐含量。尿肌酐值正常范围：8.4～13.25mmol/24h尿或40～130mg/dl尿。正常人尿肌酐的日排出量相当稳定，基本不受食物蛋白质含量和尿量的影响。当尿液中肌酐含量显著增高或降低时，则反映出肾功能受到相当程度的损伤。因此，检测尿肌酐含量的变化对掌控疾病的变化及治疗可起到重要的参考作用。
测定肌酐的方法有氧化酶法、苦味酸法等，均存在耗时较长的缺陷，临床使用不便。已有的一种测定尿液肌酐的试纸，是在碱性条件下用3，5-二硝基苯甲酸与肌酐络合，生成紫红色络合物。该法与苦味酸法测定肌酐相似，存在假肌酐对测定造成干扰的问题，且络合需在强碱条件下进行，强碱性组分的存在使试纸易吸收水分和二氧化碳，纤维易降解，非常不利于试纸的长期稳定保存。
发明内容
本发明为一种尿液肌酐检验试纸及其制备方法，试剂条件温和，避免了强碱性条件下试纸不易保存和假肌酐干扰的问题，使检测结果更加准确。
本发明的目的是通过以下方式实现的：
一种尿液肌酐检测试纸，该试纸是通过以下方法制备得到的：
先将显色片充分浸入A液后取出，于70～100℃下干燥15～30min，然后将干燥后的显色片浸入B液，于70～100℃条件下干燥5～15min；其中，每1000mLA液含：2mol/LTris缓冲液(pH：6.0～8.0)，硫酸铜0.2～2.0g，柠檬酸钠或柠檬酸钾1.0～5.0g，橙黄G100～200mg，用纯水定容；每1000mLB液含：聚乙烯吡咯烷酮10～20g，还原性染料0.5～5.0g，用氯仿定容(每1000mLB液优选含：聚乙烯吡咯烷酮15～20g，还原性染料3～5.0g，用氯仿定容)。所述的显色片是层析、定性或定量滤纸，显色片重量大于240g/m2，所述的还原性染料为3，3′，5，5′-四甲基联苯胺。
上述尿液肌酐检测试纸的制备方法包括下列组分：
a)制备A液：2mol/LTris(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液，pH：6.0～8.0，硫酸铜0.2～2.0g，柠檬酸钠或柠檬酸钾1.0～5.0g，橙黄G(1-苯基偶氮-2-萘酚-6，8-二磺酸钠)100～200mg，用纯水定容至1000mL；
b)制备B液：聚乙烯吡咯烷酮10～20g，还原性染料0.5～5.0g，用氯仿定容至1000mL；
c)先将显色片充分浸入A液后取出，于70～100℃下干燥15～30min，然后将干燥后的显色片浸入B液，于70～100℃条件下干燥5～15min。
该方法所述的显色片是层析、定性或定量滤纸，显色片重量大于240g/m2，所用还原性染料为3，3′，5，5′-四甲基联苯胺(TMB)。
与现有技术比较本发明的优点是：本发明方法制备的肌酐检测试纸，在铜离子电荷转移的条件下，氧化性染料能够与尿液中的肌酐迅速发生显色反应，肌酐浓度在0.9～26.5mmol/L范围内，试纸呈现从浅黄到深绿的四级明显色阶，易于目视分辨和机读，且不受假肌酐的干扰，克服了强碱性条件下试纸难以长期稳定保存及假肌酐干扰的问题，试纸制备方法简单，易操作，性能稳定，测定结果准确。
具体实施方式
以下通过具体实施例进一步说明本发明。但实施例的具体细节仅用于解释本发明，不应理解为对本发明总的技术方案的限定。
实施例1
A液(1000mL)含：
2mol/LTris缓冲液，pH：6.0，
硫酸铜02g，
柠檬酸钠1.0g，
橙黄G100mg，
纯水定容至1000mL。
B液(1000mL)含：
聚乙烯吡咯烷酮10g，
3，3′，5，5′-四甲基联苯胺0.5g，
氯仿定容至1000mL。
将A液与B液分别配制完成。将层析、定性或定量滤纸(重量大于240g/m2)充分浸入A液，取出后将其置烘箱中于70℃下烘干15min.。然后将该滤纸浸入B液，取出后再将其置烘箱中于70℃下烘干5min。
实施例2
A液(1000mL)含：
2mol/LTris缓冲液，pH：7.0，
硫酸铜1.0g，
柠檬酸钠2.5g，
橙黄G150mg，
纯水定容至1000mL。
B液(1000mL)含：
聚乙烯吡咯烷酮20g，
3，3′，5，5′-四甲基联苯胺2.5g，
氯仿定容至1000mL。
将A液与B液分别配制完成。将层析、定性或定量滤纸(重量大于240g/m2)充分浸入A液，取出后将其置烘箱中于85℃下烘干20min.。然后将该滤纸浸入B液，取出后再将其置烘箱中于85℃下烘干10min。
实施例3
A液(1000mL)含：
2mol/LTris缓冲液，pH：8.0，
硫酸铜2.0g，
柠檬酸钾5.0g，
橙黄G200mg。
纯水定容至1000mL。
B液(1000mL)含：
聚乙烯吡咯烷酮15g，
3，3′，5，5′-四甲基联苯胺5.0g，
氯仿定容至1000mL。
将A液与B液分别配制完成。将层析、定性或定量滤纸(重量大于240g/m2)充分浸入A液，取出后将其置烘箱中于100℃下烘干30min.。然后将该滤纸浸入B液，取出后再将其置烘箱中于100℃下烘干15min。该试纸用于尿液肌酐测试，显色清晰度最高。
实施例4
标准比色卡的制备方法：
1)配制0.9mmol/L、4.4mmol/L、13.5mmol/L、26.5mmol/L的肌酐标准溶液；
2)将按照实施例制备好的尿液肌酐试纸分别浸于上述四种标准溶液中；
3)根据各试纸1分钟后的显色情况制备比色卡：色卡的色阶为浅黄-浅绿-草绿-深绿四级明显色阶。
使用时，将按照实施例制备好的尿液肌酐试纸浸入被测液中3秒立即取出，或将被测液滴加到试纸上，与标准比色卡比较，与测试样颜色最接近的标准比色卡所对应的浓度即为待测液的浓度，如果在两个色阶之间，则估读肌酐浓度。
Claims (6)
1.一种尿液肌酐检测试纸，其特征在于该试纸是通过以下方法制备得到的：
先将显色片充分浸入A液后取出，于70～100℃下干燥15～30min，然后将干燥后的显色片浸入B液，于70～100℃条件下干燥5～15min；其中，每1000mLA液含：2mol/L Tris缓冲液，硫酸铜0.2～2.0g，柠檬酸钠或柠檬酸钾1.0～5.0g，橙黄G 100～200mg，用纯水定容；每1000mL B液含：聚乙烯吡咯烷酮10～20g，还原性染料0.5～5.0g，用氯仿定容；其中，Tris缓冲液pH6.0～8.0。
2.根据权利要求1所述的尿液肌酐检测试纸，其特征在于所述的显色片是层析、定性或定量滤纸，显色片重量大于240g/m2。
3.根据权利要求1所述的尿液肌酐检测试纸，其特征在于所述的还原性染料为3，3′，5，5′-四甲基联苯胺。
4.一种权利要求1所述的尿液肌酐检测试纸的制备方法，其特征在于该方法包括下列组分：
a)制备A液：2mol/L Tris缓冲液，pH：6.0～8.0，硫酸铜0.2～2.0g，柠檬酸钠或柠檬酸钾1.0～5.0g，橙黄G 100～200mg，用纯水定容至1000mL；
b)制备B液：聚乙烯吡咯烷酮10～20g，还原性染料0.5～5.0g，用氯仿定容至1000mL；
c)先将显色片充分浸入A液后取出，于70～100℃下干燥15～30min，然后将干燥后的显色片浸入B液，于70～100℃条件下干燥5～15min。
5.根据权利要求4所述的尿液肌酐检测试纸的制备方法，其特征在于所述的显色片是层析、定性或定量滤纸，显色片重量大于240g/m2。
6.根据权利要求5所述的尿液肌酐检测试纸的制备方法，所用还原性染料为3，3′，5，5′-四甲基联苯胺。
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