CN102631515A - 一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂及其制备方法，该纳米乳粒径为1～100nm，由表面活性剂30%～45%、助表面活性剂0.1%～3%、乳香油1%～3%、当归油1%～3%、香附油1%～3%、艾叶油1%～3%、氮酮0.5%～2%、去离子水40%～55%组成，总组分为100%。本发明止痛起效迅速、作用持久，具有通经调经、活血暖宫、温经散寒、行气解肿、改善微循环等多方面的作用，对人体无毒无害。将本品涂抹于腹部皮肤按摩至吸收即可，气味芬芳，不污染衣物，极大的提高了患者使用药物的顺从性。本发明制备方法简单，适宜大规模生产，生产成本低，在医药领域有广阔的市场前景。

Description

一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂及其制备方法

技术领域

 本发明属于医药领域，涉及一种有效治疗痛经的中药复方配方以及将此配方制备成纳米级制品的制备方法，具体地说是一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂其制备方法。

 

背景技术

 痛经是指妇女在经期及其前后，出现小腹或腰部疼痛，甚至痛及腰骶。每随月经周期而发，严重者可伴恶心呕吐、冷汗淋漓、手足厥冷，甚至昏厥，给工作及生活带来影响。国内外痛经发病率每年呈上升趋势，国外痛经发生率大大高于国内，有报道美国有周期性月经的妇女中90%有疼痛，36%一直或常有痛经。据英国一家权威机构调查报告指出，全球女性中有80%有不同程度的痛经。牛津大学妇科专家肯尼迪博士在英国科学成就学会会议上说：“三分之二妇女患上痛经，四分之三病发无法工作。”长期痛经而不及时治疗，或者靠止痛药来止痛，都会给病人的健康带来一定的威胁，甚至有一部分人因此导致不孕。

痛经的治疗，目前有中药和西药、内治与外治等多种治疗方案，面临着以下三种不可避免的难题：1）中药口服用药对胃肠道刺激大，经期女性胃口不好、免疫力相对较低、情绪不稳定，患者常常排斥这种治疗方式；2）西药口服用药止痛快，但是治标不治本，不能从根源上改善子宫状态，西药的副作用仍会对肝、肾有不同程度的损伤；3）外用药膏是患者易于接受的治疗方式，但是用于其透皮吸收效果差，起效慢，止痛效果不明显，敷于患处容易污染衣物，异味明显，也很大程度上的限制了其应用。

中药乳香，别名熏陆香，为橄榄科植物卡氏乳香树（Boswellia carterii Birdw） 的胶状树脂，产自索马里和埃塞俄比亚。性辛、苦、温。入心、肝、脾经。中药乳香能活血行气、通经止痛、消肿生肌。主治心腹疼痛、风湿痹痛、经闭痛经、跌打淤痛、痈疽肿毒等。《纲目》：“乳香香窜，入心经，活血定痛，故为痈疽疮疡、心腹痛要药。”《本草拾遗》：“疗耳聋，中风口噤，妇人血气，能发酒，理风冷，止大肠泄？疗诸疮令内消。”《珍珠囊》：“定诸经之痛。”乳香油，由橄榄科植物卡氏乳香树树干渗出的树胶树脂，经水蒸气蒸馏得到，为无色至苍黄色，具清甜膏香带淡的柠檬香，主成分有含蒎烯、莰烯、香桧烯、榄香烯、消旋-柠檬烯及α-水芹烯、β-水芹烯、1-壬烯、己醛、庚醛、辛醛、壬醛、2，4-壬二烯醛、间-异丙基甲苯、桉树脑、异辛醇、1-辛醇、1-壬醇、乙酸正辛酯、乙酸龙脑酯等。乳香油有较显著的镇痛作用，以乳香为首味药的子宫丸比多种抗菌素有更强烈的抑菌作用，且能有效地杀灭滴虫。

 当归自古作为妇科之要药、血中之圣药，性甘、辛、温，归肝、心、脾经。补血活血，调经止痛，润肠通便。主治妇人漏下绝子，女人沥血、腰痛、崩中、月经不调等症。当归的化学成分可分为精油与水溶性物质两部分，研究表明，精油部分具有抑制兔、大鼠、狗等动物离体子宫平滑肌收缩的作用， 表现为张力下降，节律变慢，收缩力减弱。当归油即当归精油，中含藁本内酯、正丁烯基酜内酯、当归酮、香荆芥酚等40余种成分，具有补血活血、护肤抑菌、调节机体免疫力等功能，临床常用于痛经的治疗。

香附，原名“莎草”，始载于《名医别录》，《唐本草》始称香附子。香附油含香附烯、β-芹子烯、α-香附酮、β-香附酮、广藿香酮及少量单萜化合物：柠檬烯、1,8-桉油素、β-蒎烯、对-聚伞花素、樟烯等。现代研究表明：香附油所含成分对离体子宫具有缓解痉挛的作用，通过抑制离体子宫的收缩，对子宫肌张力具有迟缓作用；香附油能显著提高小鼠痛域，有很好的镇痛作用；香附油有微弱的雌激素作用。可见，香附油是极好的治疗痛经的药物，常用于治疗肝气郁结之月经不调、小腹胀痛。 　　

　艾叶油为菊科植物艾（Artemisia argyi）的干叶或鲜叶中所含挥发油，其主要有效成分为蒲品烯醇-4与α-萜品烯醇，具有散寒止痛，温经止血的功效。常用于治疗少腹冷痛，经寒不调，宫冷不孕，崩漏经多，妊娠下血。艾叶配香附子用于治寒凝气滞之行经腹痛。李时珍称之为“气病之总司、女科之主帅”，王好古称之为“妇人之仙药”。

以上四种中药挥发油配伍使用对于治疗痛经有良好的效果。可以根据痛经发生的阶段有针对性的用药敷于患处，但是由于挥发油的物理稳定性不佳，容易失效。如果制成膏霜剂涂抹于腹部皮肤使用，透皮吸收效果不好，难以发挥其药效，并且容易污染衣物。因此，一种透皮吸收效果好、起效快、能直接作用于患处的剂型具有极大的市场前景。

目前，有专利“治疗痛经的中药复方透皮吸收贴剂及其制备方法”，专利号200710060616.8，称该制剂为纳米微乳，并且用于痛经的治疗。本发明与该专利有本质的区别：1）有效成分：“治疗痛经的中药复方透皮吸收贴剂及其制备方法”的有效成分为当归油、姜黄油、延胡索提取物，其中止痛成分为延胡索提取物；而本发明有效成分为乳香油、当归油、香附油、艾叶油，其中止痛成分主要为乳香油。2)纳米成分：“治疗痛经的中药复方透皮吸收贴剂及其制备方法”中纳米级别的药物仅有当归油、姜黄油，用于止痛的主要成分延胡索提取物是水相成分，达不到纳米级别，仅具有普通的效果；而本发明中用于止痛的主要成分乳香油是标准的纳米级，具有纳米级药物的用量少、药效好、起效快、毒性低等优势。3）本发明采用的纳米技术，其原料成本及仪器成本远低于“治疗痛经的中药复方透皮吸收贴剂及其制备方法”中使用的β-环糊精包合技术，有更好的市场应用前景，包合后的粒径远小于“治疗痛经的中药复方透皮吸收贴剂及其制备方法”中的500nm，呈透明液体，因此药效更强。4）“治疗痛经的中药复方透皮吸收贴剂及其制备方法”是将药物涂布成贴剂，而本发明由于其100nm以下超微的粒径所达到的卓越的吸收迅速的特点，仅涂抹于皮肤上就可迅速吸收，避免了医用压敏胶可能导致的过敏情况，增加的患者用药的顺从性。

 

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的问题与缺陷，提供一种使用方便、止痛效果迅速、活血通经、不污染衣物、无毒副作用的外用治疗痛经喷剂。

实现上述发明目的的技术方法是水包油型治疗痛经的复方中药油纳米乳，它是由下述重量配比的原料组成：

    表面活性剂30%～45%、助表面活性剂0.1%～3%、乳香油1%～3%、当归油1%～3%、香附油1%～3%、艾叶油1%～3%、氮酮0.5%～2%、去离子水40%～55%组成，总组分为100%。

    制备本发明药物的配方优选重量百分比范围是：表面活性剂35%～40%、助表面活性剂0.1%～2%、乳香油2%～3%、当归油2%～3%、香附油2%～3%、艾叶油2%～3%、氮酮0.5%～1%、去离子水45%～50%组成，总组分为100%。

    制备本发明药物的配方最佳重量百分比是：表面活性剂39%、助表面活性剂1.2%、乳香油3%、当归油2.5%、香附油2.5%、艾叶油2%、氮酮0.8%、去离子水49%组成，总组分为100%。 

    所述的表面活性剂是EL-40、RH-40和吐温-80中的一种或几种的混合物。

所述的助表面活性剂是无水乙醇、1,2-丙二醇和PEG-600中的一种或几种的混合物。

在表面活性剂的选择上，本发明选用无毒性和生物相容性好的非离子型表面活性剂。非离子型表面活性剂在溶液中比较稳定，不易受强电解质、无机盐类的影响，也不易受酸碱的影响，与其他表面活性剂的相容性好，溶血作用较小。理论上，O/W型纳米乳状液的制备需要表面活性剂的HLB值介于8～18之间，考虑到制备工艺的简单性，即纳米乳的易形成性和纳米乳的稳定性，本发明选用HLB介于10～15之间的液态非离子型表面活性剂，或者与一种HLB＜10的非离子型表面活性剂复配。可选用的表面活性剂有：EL-40、RH-40和吐温-80中的一种或几种混合物。本发明所述助表面活性剂的作用是增大有效成分的溶解度以及提高纳米乳稳定性。

本发明所述的一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂具有通经止痛、活血暖宫、温经散寒、行气解肿、改善微循环等多方面的作用，用于痛经、产后瘀血刺痛的治疗。

用法：喷于腹部皮肤，缓缓按摩至完全吸收即可，一日可2~3次。

本发明经透射电子显微镜检测，液滴直径分布在1～100 nm之间，外观为黄色或无色透明液体，具有很好的稳定性：

1.经时稳定性

经时稳定性是指纳米乳透皮喷剂在室温自然变化条件下贮藏时，外观随间

延长而发生变化的程度。该纳米乳透皮喷剂持久透明，未发现浑浊或沉淀，说明其经时稳定性好。

2.热贮稳定性

    将该纳米乳透皮喷剂置于试管，密封，置于37℃恒温水浴箱中贮存14天，该液贮存后外观透明。

3.抗冷冻稳定性

将该纳米乳透皮喷剂于-4℃保存一周，取出后恢复至室温。该纳米乳透皮喷剂在-4℃时成固体，恢复至室温后其恢复至透明，且放置一周后仍透明，说明该纳米乳状液抗冷冻性好。

4.加速稳定性

将该纳米乳透皮喷剂置于试管中，密封，于15000 r/min离心20 min，未分层，仍澄清透明。

本发明的一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂与现有技术相比，具有以下优点：

1）本发明是复方纯中药制剂，相比市场上用于治疗痛经的西药，对人体无毒副作用；

2）本发明属于纳米级药物，增大了有效成分的透皮吸收率，提高了生物利用效率，起效快，药效好，减少了药物用量；

3）涂抹于腹部即可止痛通经，使用方便，吸收迅速，气味芬芳，不污染衣物； 

4）经期期间及经期前后使用均可，除止痛效果外，可活血暖宫、温经散寒、杀菌消炎，帮助妇女抵御经期免疫力低的困扰；

5）人体吸收后，能防止肝首过效应，减少药物用量；

6）使用3个月（一个疗程）以后，大多数患者即痊愈，无痛经复发；

7）热力学稳定性好，贮存稳定性高，久置不分层，经离心加速试验仍未分层；

8）防腐性能提高，分散相液体比较小，能防止细菌的侵入；

9）制备工艺简单，适合规模化生产。

具体实施方式

以下通过药效学试验和对比试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。（所用剂量为上述最佳重量百分比配方：表面活性剂39%、助表面活性剂1.2%、乳香油3%、当归油2.5%、香附油2.5%、艾叶油2%、氮酮0.8%、去离子水49%组成，总组分为100%。）

   试验例1  毒性试验 

   取30只小鼠按急性经口毒性试验测得半数致死量LD₅₀>4 g/kg(取LD₅₀为4 g/kg体重)计算蓄积毒性染毒剂量，第1~5天染毒剂量为0.1 LD₅₀，以后剂量按1.5倍每5天递增一次，直至20天，试验结果见表1。

                     表1：蓄积毒性试验结果

染毒天数（d）	染毒剂量×LD50	累积剂量×LD50	动物死亡数（只）
				1~5	0.10	0.5	0
5~10	0.15	1.25	0
				11~15	0.225	2.375	0
16~20	0.3375	4.0625	0

   实验结果表面本发明是口服弱毒性制剂。

   由于本发明是外用制剂，参考经皮肤给药的急性毒性试验及评价标准试验方法取大鼠6只，脱毛后采取浸尾法，给药24小时。给药量参考急性口服毒性试验的LD₅₀值，定为4 g/kg。给药24 h，无大鼠死亡。将大鼠处死解剖后，进行病理观察，无异常现象。结果表明本发明为经皮肤给药无毒性制剂。

试验例2   镇痛作用：醋酸致小鼠扭体试验（与市售外用痛经贴对比）

取小鼠20只，体重18~22 g，雌雄兼备，随机平均分为4组。Ⅰ正常对照组不给药；Ⅱ本发明比例复方中药挥发油组（各有效成分含量与办发明最佳配方含量相同，仅不将其制成纳米乳）；Ⅲ治疗痛经的复方纳米乳喷剂组；Ⅳ“痛经安”贴剂组。将小鼠腹部用自制脱毛膏脱去腹部毛，观察小鼠腹部无过敏、炎症等伤口。于次日腹部给药：Ⅰ组腹部涂抹生理盐水做空白对照；Ⅱ组腹部涂抹本发明比例复方中药挥发油；Ⅲ组涂抹治疗痛经的复方纳米乳喷剂；Ⅳ于腹部贴上“痛经安”贴剂。给药1 h后各鼠分别ip 0.5%醋酸溶液0.2 ml，观察并记录注射醋酸溶液后15 min内出现扭体反应的潜伏期以及扭体次数。结果见表2。

   表2 一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

组别	数量	潜伏期/s	扭体次数/15 min	镇痛百分率/%
					Ⅰ	5	220.3±118.4	18.9±5.6	-
Ⅱ	5	411.9±205.3	9.33±2.08	50.42
					Ⅲ	5	658.7±143.6	5.21±1.09	83.88
Ⅳ	5	302.5±111.3	15.1±0.57	23.90

结果显示，本发明的复方配方制剂有一定的镇痛效果，镇痛百分率达50.42%；而将本发明的复方配方制成纳米乳剂型，其在镇痛效果上又好于普通剂型，达83.88%。本发明一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂在镇痛效果上远远好于市面上常见的治疗痛经的贴剂。并且本发明制备方法简单，原料易得，生产成本低，效果好，有着巨大的市场前景。

   试验例3  小鼠急性痛经模型镇痛试验（与市售口服止痛西药对比） 

   取雌性小鼠30只，称重后随机分为3组，分别为模型对照组、治疗痛经的复方纳米乳喷剂组、阿司匹林组，用自制脱毛膏脱去腹部毛，观察小鼠腹部无过敏、炎症等伤口。各组小鼠每天同时皮下注射己烯雌酚0.2 mg/只，连续3 d。治疗痛经的复方纳米乳组于第3天给药后在腹部皮肤涂抹本发明一种治疗痛经的复发纳米乳喷剂；阿司匹林组口服灌胃阿司匹林0.01 g/kg。1 h后，各组小鼠腹腔注射缩宫素0.2 μL/只。观察注射缩宫素后30 min内各小组小鼠出现扭体反应的潜伏期和扭体次数，结果见表3。

    表3 一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂对小鼠急性痛经模型的影响

组别	数量	潜伏期/min	扭体次数/30 min	镇痛百分率/%
					模型对照组	10	2.1±1.7	18.9±5.6	-
复方纳米乳喷剂组	10	25.6±3.7	2.2±1.0	89.5
					阿司匹林组	10	17.5±11.0	2.4±0.5	85.1

   由结果可知：本发明一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂相比西药阿司匹林在治疗痛经的止痛方面见效快、效果好。除了由于本发明是直接在患处用药的优点外，相比阿司匹林，本发明无毒副作用，有广泛的市场前景。

试验例4  临床治疗痛经试验效果对比实验

对79例痛经患者进行了试验研究，年龄分布为19岁至45岁，其中52例采用本发明一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂的治疗，另27名患者采用市售“痛经安”贴剂治疗。治疗期间所有患者均无口服与治疗痛经有关的其他药物，试验时间为3个月。用药方式为每次月经来潮开始使用药物：采用复方纳米乳喷剂的Ⅰ组，每日涂抹腹部三次；采用“痛经安”贴剂的Ⅱ组，每日贴一片。连续用药7天后停药，直至下一次月经来潮。

参照卫生部《中药治疗痛经的临床研究指导原则》及国家中医药管理局《中医病证诊断疗效标准》（1994）。

1）确定痛经程度。轻度：经前或经期腹痛明显，但能坚持工作，无全身症状，有时需服止痛药；中度：经前或经期腹痛难忍，恶心呕吐，四肢不温，用止痛药能使疼痛暂缓；重度：经前或经期腹痛难忍，坐卧不宁，严重影响工作学习和日常生活，必须卧床休息，面色苍白，冷汗淋漓，四肢寒冷，呕吐腹泻，肛门坠胀，用止痛药效果不明显。

2）确定疗效标准。治愈：腹痛消失，其他症状消失，停药3个月后无复发；显效：腹痛明显减轻，其他症状消失或明显改善，不服止痛药能坚持工作；有效：腹痛减轻，其他症状好转，服止痛药能坚持工作；无效：腹痛及其他症状无改变。

    试验结果：

表4  一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂与“痛经安”贴剂疗效对比

组别	例数	治愈	显效	有效	无效	总有效率（%）
							Ⅰ	52	35	12	4	1	98.1
Ⅱ	27	9	8	5	5	81.5

  表5 一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂组痛经程度与治疗效果的关系

痛经程度	例数	治愈	显效	有效	无效	总有效率（%）
							轻度	30	28	2	0	0	100
中度	17	11	5	1	0	100
							重度	5	2	1	1	1	80
合计	52	35	12	4	1	98.1

         表6 “痛经安”贴剂组痛经程度与治疗效果的关系

痛经程度	例数	治愈	显效	有效	无效	总有效率（%）
							轻度	17	12	5	0	0	100
中度	7	1	3	1	2	71.4
							重度	3	0	0	0	3	0
合计	27	9	8	5	5	81.5

    结果表明：本发明在使用3个月后，有效率高达98.1%，而市售“痛经安”贴剂有效率则仅为81.5%。随着痛经程度的加深，本发明在治疗痛经上的优势更加明显，特别是对于重度痛经，市售“痛经安”贴剂几乎没有任何效果，而本发明的有效率仍高达80%。可见，本发明一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂有着巨大的市场前景。

以下通过发明人给出的实施例来进一步阐述本发明一种治疗痛经的复方纳米乳喷剂的制备方法。

实施例1 

制备方法：

1)按配方比例称取表面活性剂、助表面活性剂、乳香油、当归油、香附油、艾叶油、氮酮及去离子水备用；

2)将表面活性剂与助表面活性剂充分搅拌混匀；

3)加入配方比例的乳香油、当归油、香附油、艾叶油、氮酮，并充分混匀；

    4)在20℃～25℃缓慢滴加去离子水，充分搅拌，直至形成澄清透明、粘度小且具有流动性的淡黄色O/W型纳米乳状液，称其重量为100 g。

配方如下：EL-40 35 g、RH-40 4 g、无水乙醇1 g、PEG-600 0.2 g、乳香油3 g、当归油2.5 g、香附油2.5 g、艾叶油2 g、氮酮0.8 g、去离子水49 g，共计100 g。

实施例2

由EL-40 30 g、无水乙醇2 g、PEG-600 0.2 g、1,2-丙二醇 0.8 g、乳香油3 g、当归油3 g、香附油3 g、艾叶油1 g、氮酮2 g、去离子水55 g组成。

实施例3

由吐温-80 45 g、无水乙醇3 g、乳香油2.5 g、当归油3 g、香附油3 g、艾叶油3 g、氮酮0.5 g、去离子水40 g组成。

实施例4

由EL-40 35 g、无水乙醇1.5 g、1,2-丙二醇 0.5 g、乳香油3 g、当归油3 g、香附油3 g、艾叶油3 g、氮酮1 g、去离子水50 g组成。

实施例5

由EL-40 35 g、RH-40 5 g、无水乙醇2 g、PEG-600 0.2 g、乳香油2.7 g、当归油2.9 g、香附油2.7 g、艾叶油2.7 g、氮酮1.8 g、去离子水45 g组成。

实施例6

由吐温-80 40 g、RH-40 5 g、PEG-600 0.1 g、乳香油1 g、当归油1 g、香附油1 g、艾叶油1 g、氮酮0.9 g、去离子水50 g组成。

实施例7  

由EL-40 45 g、无水乙醇0.5 g、乳香油2 g、当归油2 g、香附油2 g、艾叶油2 g、氮酮0.5 g、去离子水46 g组成。

实施例8

由EL-40 40 g、吐温-80 3 g、无水乙醇2 g、PEG-600 0.2 g、乳香油1.5 g、当归油1.5 g、香附油1.5 g、艾叶油1.5 g、氮酮0.8 g、去离子水48 g组成。    

实施例9

由EL-40 35 g、RH-40 8 g、无水乙醇1 g、PEG-600 0.5 g、乳香油2 g、当归油2 g、香附油1.5 g、艾叶油1.5 g、氮酮1.5 g、去离子水47 g组成。

实施例10

由EL-40 35 g、RH-40 5 g、无水乙醇1 g、乳香油3 g、当归油2 g、香附油2 g、艾叶油2 g、氮酮0.5 g、去离子水49.5 g组成。

Claims (5)

1.一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂，其特征在于：由下列组分的原料组成：

表面活性剂30%～45%、助表面活性剂0.1%～3%、乳香油1%～3%、当归油1%～3%、香附油1%～3%、艾叶油1%～3%、氮酮0.5%～2%、去离子水40%～55%组成，总组分为100%；

所述的表面活性剂是EL-40、RH-40和吐温-80中的一种或几种的混合物；

所述的助表面活性剂是无水乙醇、1,2-丙二醇和PEG-600中的一种或几种的混合物。

2.根据权利要求1所述的一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂，其特征在于：由下列组分的原料组成：

表面活性剂35%～40%、助表面活性剂0.1%～2%、乳香油2%～3%、当归油2%～3%、香附油2%～3%、艾叶油2%～3%、氮酮0.5%～1%、去离子水45%～50%组成，总组分为100%。

3.根据权利要求1所述的一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂，其特征在于：由下列组分的原料组成：

   表面活性剂39%、助表面活性剂1.2%、乳香油3%、当归油2.5%、香附油2.5%、艾叶油2%、氮酮0.8%、去离子水49%组成，总组分为100%。

4.    根据权利要求1所述的一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂，其特征在于：该纳米乳的粒径为1～100 nm。

5.    权利要求1所述的一种治疗痛经的纳米乳透皮喷剂，其特征在于，包括下列步骤：

1)按配方比例称取表面活性剂、助表面活性剂、乳香油、当归油、香附油、艾叶油、氮酮及去离子水备用；

2)将表面活性剂与助表面活性剂充分搅拌混匀；

3)加入配方比例的乳香油、当归油、香附油、艾叶油、氮酮，并充分混匀；

    4)在20℃～25℃缓慢滴加去离子水，充分搅拌，直至形成澄清透明、粘度小且具有流动性的淡黄色O/W型纳米乳状液。