CN102630563A - 一种贯月忍冬的育苗方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种贯月忍冬的快速繁殖方法，主要通过对贯月忍冬移栽前后的管理，特别是组织培养过程中初代培养、继代培养、增殖培养、生根培养以及炼苗移栽的步骤，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、试管苗生长旺盛的优良效果，贯月忍冬的愈伤组织的萌动率达到了95.1%，增殖倍数达到了4.5倍，生根率达到了100%，最终的成活率达到了95%，移栽成活率达到了100%。

Description

一种贯月忍冬的育苗方法

技术领域

本发明涉及的是一种忍冬的育苗方法。

背景技术

贯月忍冬(Lonicera sempervirens)属于忍冬科忍冬属缠绕型攀缘藤本植物,原产北美。常绿缠绕藤本，北京植物园引种变为落叶性，具有生长蔓延快、抗性强、花期长、繁殖容易等特点,花色鲜艳,枝繁叶茂,单株覆盖面广,平面和立体效果好,是不可多得的园林观赏树种之一。春季在5 ℃以上植物体液开始流动, 10 ℃时芽开始膨大发育, 15 ℃时植株进入生长期, 在阳光充足的露地条件下, 叶色浓绿, 花色鲜艳, 从早春到晚秋均花开满枝, 入冬后在室内生长的贯月忍冬叶色依然浓绿, 正常开花, 在室外生长的植株叶片凋落, 以茎越冬。

目前，关于贯月忍冬的育苗技术主要为无性繁殖(即分株、压条、硬枝扦插、绿枝扦插)等技术，利用组培技术繁育贯月忍冬的技术及对贯月忍冬的育苗尚未有人研究，优良品种的推广普及尚未完成，苗木供求矛盾日益加剧，严重影响了贯月忍冬的园林应用和推广。

发明内容

本发明针对现有的不足提供了一种贯月忍冬的育苗方法。

本发明通过以下方法实现上述目的。

一种贯月忍冬的育苗方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

（1）移栽前准备：土壤若肥力不足，必须先进行土壤改良，施入基肥，每亩施腐熟有机肥3000kg，另加尿素50kg，为预防地下害虫，每亩施入杀虫剂乐果1.5kg，第一次翻耕，采用深翻，深度26cm以上，田间不留死角，然后细耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙细，平整床面后进行开沟，在田块四周开边沟，深度50～80cm，宽60cm，在田块中央开中沟，与边沟相通，深40～60cm，宽50～60cm，做床，床面宽110cm，床面土块整细，床面中央稍高，两侧稍低，每条苗床之间开步道，深25cm以上，宽40cm，步道中部稍高，两头稍低，保证沟沟相通，排水流畅；

（2）移栽以及管理：将经过炼苗后的组培苗移栽到步骤（1）所述的苗床上，移栽后当天要浇透定根水，如遇连续晴天，移栽后要每天浇1次水，保持土壤湿润，如遇雨天，要及时排水，移栽后35天内要架设遮阳网，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，结合施肥，松土除草，雨后晴天，要及时松土除草，以防止土壤表面板结；

所述的组培苗通过以下方法得到：

①外植体的选择：于5～8月采取生长健壮的贯月忍冬幼嫩茎段和叶片作外植体；

②材料处理方法：先用软毛刷将贯月忍冬表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1 h后用紫外灯照射20 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了2～3滴土温80的0. 1 %的升汞溶液中浸泡5-10min，依时间长短用无菌水冲洗5～6次，最后在无菌条件下分割材料。茎段切割成0. 5～0. 6 cm长，叶片分割成约0. 5 cm ×0. 5 cm的小片； 

③初代培养：在无菌的条件下将步骤（2）得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了0.6mg/L的2,4-D、0.2mg/L的NAA，0.3mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为1800-1900lux，待培养22天左右后，新芽长至3.5cm时，即开始下一个阶段；

④继代培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS常规培养基中添加了0.5mg/L的6-BA、0.4mg/L的IBA，0.2mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为1800-1900lux，待新芽长至2.5cm时，即开始下一个阶段；

⑤生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了0.7mg/L的IBA、0.5mg/L的NAA，0.2mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为2100lux，待新苗长至2.1-2.5cm时，即开始下一个阶段；

⑥炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，然后解开封口膜，炼苗3 d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的55%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土∶草炭∶珍珠岩=3∶2∶2 的混合基质中，温度控制在28℃，前5d 湿度控制在90%左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。

有益效果：本发明对贯月忍冬采用组织培养技术，以嫩茎段和叶片为外植体，经外植体灭菌、初代培养、继代培养、增殖培养、生根培养和炼苗移栽步骤，研究培养过程中试管苗的营养需求、激素对苗木生长分化的调控，解决贯月忍冬的微体快速增殖、诱导生根的重要技术问题，建立了完善的贯月忍冬组织培养体系，并通过移栽前后的管理达到了高效诱导外植体分化增殖和高质量保证幼苗成活的目的，并且保存了母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短期内形成大量优良试管苗，进行规模化、工厂化生产，并具体具有一下优点：

1、本发明针对贯月忍冬原产地的气候特点，提高了组培过程中的培养温度，并且缩短了光照周期，降低了光强度，从而使培养环境更接近其原生地的气候，通过对初代培养基、继代培养基、增殖培养基、生根培养基配方的精确筛选，达到了增殖速度快、遗传性状稳定、繁殖系数高、试管苗生长旺盛的优良效果。

2、在炼苗移栽中通过逐渐提高光照强度，并且在移栽过程中，逐渐降低湿度、严格控制温度，采用合适的基质配方，最终提高了生根试管苗的成活率。

3、移栽前通过对土地的改良、苗床的改造，以及移栽之后温度、水分、光照等因素的控制，保证了贯月忍冬的移栽成活率和苗木质量。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，下述各实施例仅用于说明本发明，对本发明并没有限制。

一种贯月忍冬的育苗方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

（1）移栽前准备：土壤若肥力不足，必须先进行土壤改良，施入基肥，每亩施腐熟有机肥3000kg，另加尿素50kg，为预防地下害虫，每亩施入杀虫剂乐果1.5kg，第一次翻耕，采用深翻，深度26cm以上，田间不留死角，然后细耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙细，平整床面后进行开沟，在田块四周开边沟，深度50～80cm，宽60cm，在田块中央开中沟，与边沟相通，深40～60cm，宽50～60cm，做床，床面宽110cm，床面土块整细，床面中央稍高，两侧稍低，每条苗床之间开步道，深25cm以上，宽40cm，步道中部稍高，两头稍低，保证沟沟相通，排水流畅；

（2）移栽以及管理：将经过炼苗后的组培苗移栽到步骤（1）所述的苗床上，移栽后当天要浇透定根水，如遇连续晴天，移栽后要每天浇1次水，保持土壤湿润，如遇雨天，要及时排水，移栽后35天内要架设遮阳网，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，结合施肥，松土除草，雨后晴天，要及时松土除草，以防止土壤表面板结；

所述的组培苗通过以下方法得到：

①外植体的选择：于5～8月采取生长健壮的贯月忍冬幼嫩茎段和叶片作外植体；

②材料处理方法：先用软毛刷将贯月忍冬表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1 h后用紫外灯照射20 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了2～3滴土温80的0. 1 %的升汞溶液中浸泡5-10min，依时间长短用无菌水冲洗5～6次，最后在无菌条件下分割材料。茎段切割成0. 5～0. 6 cm长，叶片分割成约0. 5 cm ×0. 5 cm的小片； 

③初代培养：在无菌的条件下将步骤（2）得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了0.6mg/L的2,4-D、0.2mg/L的NAA，0.3mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为1800-1900lux，待培养22天左右后，新芽长至3.5cm时，即开始下一个阶段；

④继代培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS常规培养基中添加了0.5mg/L的6-BA、0.4mg/L的IBA，0.2mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为1800-1900lux，待新芽长至2.5cm时，即开始下一个阶段；

⑤生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了0.7mg/L的IBA、0.5mg/L的NAA，0.2mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为2100lux，待新苗长至2.1-2.5cm时，即开始下一个阶段；

⑥炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，然后解开封口膜，炼苗3 d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的55%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土∶草炭∶珍珠岩=3∶2∶2 的混合基质中，温度控制在28℃，前5d 湿度控制在90%左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。

经过上述步骤的培养，贯月忍冬的愈伤组织的萌动率达到了95.1%，增殖倍数达到了4.5倍，生根率达到了100%，最终的成活率达到了95%，而移栽成活率达到了100%。

Claims (1)

1.一种贯月忍冬的育苗方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

（1）移栽前准备：土壤若肥力不足，必须先进行土壤改良，施入基肥，每亩施腐熟有机肥3000kg，另加尿素50kg，为预防地下害虫，每亩施入杀虫剂乐果1.5kg，第一次翻耕，采用深翻，深度26cm以上，田间不留死角，然后细耙一次，再第二次翻耕，床面平整，翻耕耙细，平整床面后进行开沟，在田块四周开边沟，深度50～80cm，宽60cm，在田块中央开中沟，与边沟相通，深40～60cm，宽50～60cm，做床，床面宽110cm，床面土块整细，床面中央稍高，两侧稍低，每条苗床之间开步道，深25cm以上，宽40cm，步道中部稍高，两头稍低，保证沟沟相通，排水流畅；

（2）移栽以及管理：将经过炼苗后的组培苗移栽到步骤（1）所述的苗床上，移栽后当天要浇透定根水，如遇连续晴天，移栽后要每天浇1次水，保持土壤湿润，如遇雨天，要及时排水，移栽后35天内要架设遮阳网，透光度60%，50天后后可全光照管理，另外，结合施肥，松土除草，雨后晴天，要及时松土除草，以防止土壤表面板结；

所述的组培苗通过以下方法得到：

①外植体的选择：于5～8月采取生长健壮的贯月忍冬幼嫩茎段和叶片作外植体；

②材料处理方法：先用软毛刷将贯月忍冬表面的灰尘轻轻刷去，用流水冲洗1 h后用紫外灯照射20 min，转入超净工作台，在超净工作台上先用70-75 %的乙醇浸泡20-70秒，然后用无菌水冲洗，再转入滴加了2～3滴土温80的0. 1 %的升汞溶液中浸泡5-10min，依时间长短用无菌水冲洗5～6次，最后在无菌条件下分割材料，茎段切割成0. 5～0. 6 cm长，叶片分割成约0. 5 cm ×0. 5 cm的小片； 

③初代培养：在无菌的条件下将步骤（2）得到的外植体接种在初代培养基上，该培养基是在MS常规培养基中添加了0.6mg/L的2,4-D、0.2mg/L的NAA，0.3mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为1800-1900lux，待培养22天左右后，新芽长至3.5cm时，即开始下一个阶段；

④继代培养：将初代培养的外植体新芽剪下接种在继代培养基上，该培养基是在3/4MS常规培养基中添加了0.5mg/L的6-BA、0.4mg/L的IBA，0.2mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为1800-1900lux，待新芽长至2.5cm时，即开始下一个阶段；

⑤生根培养：将继代培养的外植体新芽剪下接种在生根培养基上，该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了0.7mg/L的IBA、0.5mg/L的NAA，0.2mg/L的KT，PH 5.9，培养温度为29℃，光照周期11h/d，光强度为2100lux，待新苗长至2.1-2.5cm时，即开始下一个阶段；

⑥炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，然后解开封口膜，炼苗3 d，炼苗期间适当遮光，使光照强度为自然光的55%，炼苗完成后取出小苗洗净根部附着的培养基，移栽到经消毒的重量比腐殖土∶草炭∶珍珠岩=3∶2∶2 的混合基质中，温度控制在28℃，前5d 湿度控制在90%左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下。