CN102617529B

CN102617529B - 异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用及其制备方法

Info

Publication number: CN102617529B
Application number: CN201210045681.4A
Authority: CN
Inventors: 黄相中; 田凯; 郭俊明; 张英杰; 关小丽; 朱芸; 张润芝
Original assignee: Yunnan Minzu University
Current assignee: Yunnan Minzu University
Priority date: 2012-02-27
Filing date: 2012-02-27
Publication date: 2014-12-03
Anticipated expiration: 2032-02-27
Also published as: CN102617529A

Abstract

本发明公开了一种异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用及其制备方法，属于海洋污损生物驱避领域，主要解决海洋生物污损的问题。具体为本发明提供所述异苯并呋喃类化合物的在防止海洋生物污损中的应用，用于防止海洋生物对水下结构表面的附着和/或污损。该异苯并呋喃类化合物均系从菌株分类命名为头孢霉属AL031的真菌中分离而得，其菌株的保藏编号为CCTCC№：M2010140。对该真菌次生代谢产物提取物及两个异苯并呋喃类化合物进行了抗污损活性筛选，实验结果显示该真菌次生代谢产物提取物及两个异苯并呋喃类化合物显示出较强的抗污损活性，可抑制海洋污损生物附着，用于海洋生物污损防治，具有良好的应用前景。

Description

异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用及其制备方法

技术领域

本发明涉及海洋污损生物驱避领域，具体涉及从头孢霉属AL031真菌次生代谢产物中分离得到的异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用以及两种异苯并呋喃类化合物的制备方法。

背景技术

生物污损，是指海洋生物如藻类、甲壳类等聚集在船体的任何位置，包括船壳、舵、螺旋桨和其它船体附件，或船内海水系统如海水吸入箱、发动机冷却管线，船载及附属设备，或水产养殖设施等移动或固定设施上形成的生物聚集和结垢。近年来，随着航运、海防、水产养殖以及海滨电厂等的发展，海洋生物的污损所带来的危害越来越严重。目前发展得最快，应用最为广泛的控污损方法为施涂高效防污漆。普遍采用含有毒性化合物(如氧化亚铜、吡啶硫酮铜、Irgarol 1051、Econea等)的防污涂料进行防除，但这些有毒物质持续向海洋环境释放，特别是在船只活动密集的军港和民用港口，毒物往往达到高的水平，造成严重的海洋污染问题。氧化亚铜是目前应用最为广泛的一种防污剂，它对绝大多数的动物类海生物和多数的植物类海生物具有防污活性，但对软污损海生物防污效果不佳，需要添加辅助防污剂来达到全面的防污效果。由于铜元素会在海洋中，尤其是海港中大量积聚，产生“黑色污染”。氧化亚铜在海水中分解产生的铜离子，能够使海生物赖以生存的主酶失去活性，或使生物细胞蛋白质絮凝产生金属蛋白质沉淀物，导致生物组织发生变化而死亡。

传统的防污剂对附着生物有毒杀作用，造成不可恢复的损伤，且会污染环境，破坏生态平衡，而理想的海洋防污剂应当同时满足：（1）低浓度下具有活性；（2）经济；（3）对人体及其它有机体无害；（4）适用于各种附着基质；（5）无污染；（6）具有生物可降解性。仿生防污涂料中的天然产物防污剂或其经化学改性的类似物，易降解，且不危害生物的生命，有利于保持生态平衡，是开发无毒高效防污涂料的重要途径之一。目前已从海洋和陆地生物中发现了许多具有抗污损活性的物质，包括萜类、炔类、多环化合物、甾族化合物、异硫氰酸盐等类型的物质，其中的部分化合物对海洋污损生物显示了较好的驱避性，但对水体环境的危害较低或没有危害。

苯并呋喃类化合物是自然界中普遍存在的一类物质，具有抗菌、细胞毒素、杀虫、昆虫拒食及抑制组蛋白去乙酰化酶等作用。随着植化分离手段和鉴定方法的提高，先进的药物高通量筛选方法广泛应用，越来越多的该类化合物和相关生物活性被报道，旨在促进对苯并呋喃类化合物的研究和开发。

申请号为200810070639.1的中国发明专利公开了一种具有抗污损活性的化合物及其提取方法与应用，涉及一种异喹啉类化合物。提供一种具有抗污损活性的化合物及其提取方法和应用。化合物为3-甲氧基-5羟基-7-醛基异喹啉，分子式为C₁₁H₉NO₃，将干的海漆的根粉碎，得海漆根碎块，将海漆根碎块用溶剂浸泡，得提取液；将提取液过滤、减压、抽干溶剂制成浸膏，将浸膏分散在水中并用乙酸乙酯萃取，除去乙酸乙酯得到粗品，将粗品用石油醚、丙酮为洗脱剂硅胶柱层析纯化，在丙酮中重结晶，再用甲醇为溶剂柱层析精制，得到纯的具有抗污损活性的化合物(3-甲氧基-5羟基-7-醛基异喹啉)。化合物可用于制备高效的防污剂。

申请号为200810072921.3的中国发明专利公开了一种采用高速逆流色谱的方法从黑种草的粗提物中得到异苯并呋喃酮类化合物的制备方法，该方法所用溶剂为石油醚或正己烷或或正庚烷或正戊烷和乙酸乙酯和甲醇或乙醇或乙腈和水形成的四组分溶剂系统，通过一个分离步骤从黑种草中分离出异苯并呋喃酮类化合物。该方法分离量大，样品无损失、回收率高，分离环境缓和，节约溶剂。采用逆流色谱仪能直接进大量粗体样品或合成混合物，分离结果达到较高的纯度，取得良好的分离效果。该方法不仅适用于从植物粗提取物中制备纯度较高的产品，同时也适用于对各种途径获得的异苯并呋喃酮类物质粗提物提纯和各种型号的逆流色谱仪分离异苯并呋喃酮类物质。

发明内容

为解决背景技术中传统的抗海洋生物污损防污剂易对海洋生态环境造成破坏，而具有抗海洋生物污损活性的天然无毒化合物制备流程较为复杂的问题，本发明旨在提供一种异苯并呋喃类化合物抑制海洋生物污损的应用及制备异苯并呋喃类化合物的方法。

一种异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用，该异苯并呋喃类化合物化学结构通式为式Ⅰ：

（Ⅰ）

其中，R₁，R₂，R₃，分别为“-H”或“-CH₃”； R₄分别为“CH₂”或“C=O”，该异苯并呋喃类化合物用以防止海洋生物对水下结构表面的附着和/或污损，作为海洋生物防污剂加以应用。该异苯并呋喃类化合物用于抑制大型海洋生物污损，不会对水体环境造成污染，可应用于海洋生物污损防治。

当异苯并呋喃类化合物为式Ⅱ所示4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和式Ⅲ所示4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮时，该异苯并呋喃类化合物抑制大型海洋污损生物附着的活性较好，用以防止海洋生物对水下结构表面的附着和/或污损，作为海洋生物高效防污剂加以应用时效果较好；式Ⅱ和式Ⅲ结构如下：

本发明涉及的用于抗海洋生物污损的异苯并呋喃类化合物是通过生物测试指导的化学分离方法，从头孢霉属AL031的真菌固体发酵产物中分离鉴定出来的，或者是利用构效关系分析结果从其它来源的化合物中筛选而来，是天然无毒的抗生物污损化合物。并且具有式Ⅰ所示结构的化合物，具体为化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮，具有较强的抑制生物污损活性，用以防止海洋生物对水下结构表面的附着和/或污损，能作为高效防污剂加以应用。

具体应用为具有式Ⅰ所示结构的化合物中的一种或几种，优选化合物化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮，存在于用溶剂提取头孢霉属AL031的真菌固体发酵产物而得到的浸膏中并以该浸膏的形式应用于海洋生物污损的防治；其中所述溶剂为70~95体积%的乙醇/水、或70~90体积%的甲醇/水、或50-70体积%的丙酮/水、或乙酸乙酯。

本发明还涉及异苯并呋喃类化合物在制备海洋防污涂料中的应用，溶剂提取头孢霉属AL031的真菌固体发酵产物而得到的浸膏作为抗污损成分与成膜成分混合而制成应用于防止海洋生物对水下结构表面的附着和/或污损的防污涂料；或者用式Ⅰ所示结构的化合物中的一种或几种，异苯并呋喃类化合物选用化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮时，经分离提取后作为抗污损成分与成膜成分混合而制成应用于防止海洋生物对水下结构表面的附着和/或污损的防污涂料时效果较好。

采用抑制纹藤壶金星幼虫附着的实验模型（可参见科技文献：Xu Y., He H. P., Qian P. Y, et al. Potent antifouling compounds produced by marine streptomyces. Bioresource Technology. 2010,101(4):1331-1336）对头孢霉属AL031真菌提取物和上述异苯并呋喃类化合物进行测试，都展现出较强的抑制藤壶幼虫附着的能力。

本发明还提供一种用于防止海洋生物污损的防污涂料，该涂料包含抗污损成分与成膜成分，抗污损成分包含用溶剂提取头孢霉属AL031的真菌固体发酵产物而得到的浸膏，或者化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮；成膜成分为可水解、可溶或不溶性树脂中的一种或几种。

本发明还涉及具有式Ⅰ所示结构的异苯并呋喃类化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮的制备方法，其特征在于：该方法采用以下步骤：

（1）以米饭、玉米粉、甘蔗渣、麦麸为原料，按10 : 2 : 3 : 3（W/W/W/W）比例混合灭菌、冷却，得混合培养基；

（2）将菌株分类命名为头孢霉属AL031(Cephalosporium CordaAL031)的真菌接种到步骤（1）中的混合培养基中，在28 ℃下发酵，发酵 6天；该菌株的保藏编号为CCTCC№：M2010140；

（3）固体发酵产物用重蒸工业乙酸乙酯避光冷浸提 3 天，提取3次，合并提取液、过滤、减压浓缩提取液得到乙酸乙酯浸膏，避光保存；

（4）步骤（3）中的乙酸乙酯浸膏分散在水中，采用10g乙酸乙酯浸膏20mL水，用重蒸乙酸乙酯溶剂萃取，合并萃取液，减压蒸馏，再次浓缩成浸膏，浸膏用丙酮溶解后用100～200目硅胶拌样；

（5）200～300目的硅胶用湿法装柱进行粗分，用氯仿：甲醇 (体积比1:0 ~ 0:1)梯度洗脱，收集各个部分的洗脱液，经减压浓缩回收溶剂得到9个组分 (Fr. 1 ~ 9)。洗脱液的10 : 1 部分反复硅胶、凝胶柱层析进行分离，即得到所需化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮。

梯度洗脱方法如下：以氯仿-甲醇体积比1:0洗脱得到Fr.1，然后增大流动相氯仿-甲醇的极性至体积比20:1，洗脱得到Fr.2，接着增大流动相氯仿-甲醇的极性至体积比15:1，洗脱得到Fr.3，再增大流动相氯仿-甲醇的极性至体积比10:1，洗脱得到Fr.4，Fr.4 经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇体积比15:1 ~ 5:1洗脱，得到组分Fr.4-1 ~ 5，其中以氯仿-甲醇体积比15:1洗脱得到Fr.4-1，Fr.4-1经Rp-18柱色谱，以甲醇-水体积比45:55 ~ 80:20洗脱，得到化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮，以氯仿-甲醇体积比10:1洗脱得到Fr.4-2。Fr.4-2经Sephadex LH-20柱色谱甲醇纯化，得到4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃。

有益效果：

a、本发明中的异苯并呋喃类化合物展现出较强的抑制生物污损活性，可为抗污损涂料或其它抗污损产品的开发提供有价值的先导化合物，有良好的应用前景。

b、本发明中的异苯并呋喃类化合物为无毒化合物，不含有毒重金属，在海洋环境中易降解，不会造成水体环境的污染，属环境友好型抗生物污损物质。

c、本发明中的异苯并呋喃类化合物的制备可采用溶剂提取头孢霉属AL031的真菌固体发酵产物而得，原料来源简单，并且化合物制备操作流程简单，所获得的化合物纯度高，随后的工业化生产易实现。

附图说明

图1为本发明中所述的两种抗生物污损活性化合物的活性追踪分离流程图。

图2为4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃对纹藤壶(Balanus amphitrite)幼虫附着的抑制作用示意图，图中所示为至少3个重复样平均值和标准方差。

图3为4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮对纹藤壶(Balanus amphitrite)幼虫附着的抑制作用示意图，图中所示为至少3个重复样平均值和标准方差。

保藏生物材料的说明：

本发明所涉及的真菌菌株，已于2010年6 月9日保藏在中国典型培养物保藏中心；该中心地址：中国.武汉.武汉大学。该菌株分类命名为：头孢霉属AL031(Cephalosporium CordaAL031)，保藏编号为CCTCC:M2010140。

具体实施方式

实施例1

——头孢霉AL031 真菌提取物对纹藤壶幼虫附着的抑制活性。

头孢霉AL031 真菌固体发酵产物乙酸乙酯提取物的制备：以米饭、玉米粉、甘蔗渣、麦麸为原料，按 10 : 2 : 3 : 3（W/W/W/W）比例混合灭菌、冷却。头孢霉属AL031真菌接种到混合物中，在28 ℃下发酵，发酵 6 天, 菌株保藏编号为CCTCC:M2010140；用工业乙酸乙酯避光冷浸提 3 天，提取 3次，提取液过滤、减压浓缩，得乙酸乙酯浸膏，避光保存。

采用抑制纹藤壶金星幼虫附着的实验模型（可参见科技文献：Xu Y., He H. P., Qian P. Y, et al. Potent antifouling compounds produced by marine streptomyces. Bioresource Technology. 2010,101(4):1331-1336）测试了头孢霉AL031 真菌固体发酵产物乙酸乙酯提取物抑制藤壶幼虫附着的能力。采用24孔培养板测定在50 μg/mL和10 μg/mL的浓度下头孢霉AL031 真菌固体发酵产物提取物的抗幼虫附着活性。纹藤壶成虫（Darwin）采自香港(22° 19'N，114°16'E)潮间带。在12 L的聚苯乙烯塑料培养容器中放入8 L过滤的海水，然后将纹藤壶成虫放入容器中，放置让其释放幼虫，2.5 h后收集幼虫，该阶段的幼虫称为无节幼虫(nauplius)，没有附着能力。将无节幼虫放入装有8 L过滤海水(滤膜孔径为0.22 μm)的容器中，在24℃温度和15 h亮:9 h暗的光照周期下通气培养，并喂食角毛硅藻(Chaetoceros gracilis Schutt)，培养3天以后收集幼虫备用，该阶段的幼虫称为金星幼虫(cypris)，有附着能力。将头孢霉AL031 真菌固体发酵产物乙酸乙酯提取物与二甲亚砜(DMSO)混合，然后用无菌过滤海水稀释成不同的浓度。在24孔培养板的每个孔中加入1.0 mL测试液和15 ± 3 个金星幼虫，每个浓度均设3个复孔。等体积无菌过滤海水做空白对照。将24孔培养板在24℃温度和15 h亮:9 h暗的光照周期下培养48 h后，在显微镜下统计附着幼虫的数目。用SPSS Version 11数据统计软件进行统计分析。

结果表明上述浓度下，头孢霉AL031 真菌固体发酵产物乙酸乙酯提取物有显著抑制纹藤壶幼虫附着的能力。结果见表1：

表1. 头孢霉AL031 真菌固体发酵产物乙酸乙酯提取物对纹藤壶幼虫附着的抑制作用。

n=4

实施例2

——4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮的制备。

头孢霉AL031 真菌固体发酵产物中抗生物污损活性成分的分离鉴定流程如图1所示。

以米饭、玉米粉、甘蔗渣、麦麸为原料，按10 : 2 : 3 : 3（W/W/W/W）比例混合灭菌、冷却；将菌株分类命名为头孢霉属AL031的真菌接种到混合培养基中，在28 ℃下发酵，发酵 6天，菌株保藏编号为CCTCC:M2010140；固体发酵产物用重蒸工业乙酸乙酯避光冷浸提 3 天，提取 3次，合并提取液、过滤、减压浓缩提取液得乙酸乙酯浸膏(40 g)，将上述重蒸工业乙酸乙酯浸膏分散在水中，采用10g重蒸工业乙酸乙酯浸膏20mL水，用重蒸工业乙酸乙酯溶剂萃取(与水体积比1:1)，合并萃取液，减压蒸馏，再次浓缩成浸膏(28 g)，浸膏用丙酮溶解后用 100 ～ 200 目硅胶拌样；200 ~ 300目的硅胶用湿法装柱进行粗分，用氯仿：甲醇 (体积比1:0 ~ 0:1)梯度洗脱得到9个组分 (Fr. 1 ~ 9)。其中以氯仿-甲醇(体积比1:0)洗脱得到Fr.1，然后增大流动相氯仿-甲醇的极性至体积比20:1，洗脱得到Fr.2，接着增大流动相氯仿-甲醇的极性至体积比15:1，洗脱得到Fr.3，再增大流动相氯仿-甲醇的极性至体积比10:1，洗脱得到Fr.4。Fr.4 (7.7 g) 经硅胶柱色谱，以氯仿-甲醇(体积比15:1 ~ 5:1)洗脱，得到组分Fr.4-1 ~ 5，其中以氯仿-甲醇 (体积比15:1)洗脱得到Fr.4-1，Fr.4-1 (1.47 g) 经Rp-18柱色谱，以甲醇-水 (体积比45:55 ~ 80:20) 洗脱，得到化合物2#。以氯仿-甲醇(体积比10:1)洗脱得到Fr.4-2。Fr.4-2 (3.82 g)经Sephadex LH-20柱色谱 (甲醇) 纯化，得到化合物1#。

本发明的化合物的化学结构用核磁共振谱（¹H NMR, ¹³C NMR, DEPT, COSY HSQC, HMBC）、ESI-MS（阳离子模式）、及IR等波谱图鉴定。根据分析化合物1~2的波谱数据，并参考相关文献，分别鉴定为4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃(4,5,6-trihydroxy-7-methyl-1,3-dihydro-isobenzofuran)和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮(4,5,6-trihydroxy-7-methyl-3H-isobenzofuran-1-one)。

化合物1#的理化数据：化合物(4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃)为浅黄色粉末，ESI-MS m/z: 183 [M + H]⁺，分子式C₉H₁₀O₄。

IR (KBr) cm^-1: 3348, 2859, 1375, 1116, 1056 cm^-1; ¹H NMR (CD₃OD, 400 MHz) δ: 5.02 (2H, s, H-3), 4.96 (2H, s, H-1), 2.02 (3H, s, H-8); ¹³C NMR (100 MHz, CD₃OD) δ: 143.8 (C-6), 137.4 (C-4), 132.6 (C-5), 128.6 (C-7a), 115.6 (C-3a), 109.0 (C-7), 72.9 (C-1), 71.9 (C-2), 10.8 (-CH₃)。

化合物2#的理化数据：化合物(4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮)为粉红色晶体，ESI-MS m/z: 197 [M + H]⁺，分子式C₉H₈O₅。

IR (KBr) cm^-1: 3164, 1725, 1352, 1284, 1025；¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ: 5.25 (2H, s, H-3), 2.54 (3H, s, H-8); ¹³C NMR (100 MHz, CD₃OD) δ: 175.5 (C-1), 147.1 (C-6), 142.3 (C-4), 138.9 (C-5), 128.8 (C-3a), 119.2 (C-7), 114.9 (C-7a) , 68.9 (C-3), 10.6 (C-8)。

实施例 3

——化合物4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮抗藤壶幼虫附着活性的测定。

采用抑制纹藤壶金星幼虫附着的实验模型（可参见科技文献：Xu Y., He H. P., Qian P. Y., et al. Potent antifouling compounds produced by marine streptomyces. Bioresource Technology. 2010,101(4):1331-1336），测试化合物的抗藤壶幼虫附着活性。纹藤壶成虫（Darwin）采自香港(22°19'N，114°16'E)潮间带。在12 L的聚苯乙烯塑料培养容器中放入8 L过滤的海水，然后将纹藤壶成虫放入容器中，放置让其释放幼虫，2.5 h后收集幼虫，该阶段的幼虫称为无节幼虫(nauplius)，没有附着能力。将无节幼虫放入装有8 L过滤海水(滤膜孔径为0.22 μm)的容器中，在24℃温度和15 h亮:9 h暗的光照周期下通气培养，并喂食角毛硅藻(Chaetoceros gracilis Schutt)，培养3天以后收集幼虫备用，该阶段的幼虫称为金星幼虫(cypris)，有附着能力。将2种化合物溶于二甲亚砜(DMSO)中，然后用无菌过滤海水稀释成不同的浓度。在24孔培养板的每个孔中加入1.0 mL测试液和15 ± 3 个金星幼虫，每个浓度均设3个复孔。等体积无菌过滤海水做空白对照。将24孔培养板在24℃温度和15 h亮:9 h暗的光照周期下培养48 h后，在显微镜下统计附着幼虫的数目。用SPSS Version 11数据统计软件进行统计分析。

两种化合物在不同浓度下抗藤壶幼虫附着的实验结果如图2、3所示。

实验结果按照Rittschof等研究人员的方法（参见科技文献：Richard B. F., David A. Z. F., Dan R. Molting of megalopae from the blue crab Callinectes sapidus: effects of offshore and estuarine cues. Marine ecology progress series.1994,113:55-59）进行分析。根据实验结果可得到48 h的EC₅₀（半抑制附着浓度，即抑制幼虫附着率为最大抑制幼虫附着率的50%时所对应的浓度），由EC₅₀可知检测物质抗生物污损活性的高低。而在24 h后，计算幼虫的死亡数目，根据实验结果可得到24 h的LC₅₀ (半致死浓度)。实验分析结果表明4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮都有显著抑制纹藤壶幼虫附着的活性，其中4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃的活性尤其突出。2种化合物的LC₅₀都大于100 μg/mL，表明这2种化合物抑制纹藤壶幼虫附着，但对纹藤壶幼虫的毒性较小。结果见表2：

表2. 4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮对纹藤壶幼虫附着的抑制作用。

样品编号	样品名称	EC₅₀(μg/mL)	LC₅₀(μg/mL)
				1	4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃	8.42	＞ 100
2	4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮	17.63	＞ 100

n = 4, p<0.01

实施例4

——防污涂料的制备。

选取本发明涉及的抗生物污损活性成分，即用溶剂提取头孢霉属AL031的真菌固体发酵产物而得到的浸膏，或者具有式Ⅰ所示结构的化合物中的一种或几种，优选4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃和4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮，采用现有技术制备防污涂料，具体为将活性成分掺入或扩散于成膜天然树脂、氯乙烯醋酸乙烯共聚物以及其它可水解、可溶或不溶性树脂等聚合物中。防污涂料应释放出足量有效的活性成分至表面防止海洋生物污损。

Claims

1.一种异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用，该异苯并呋喃类化合物化学结构通式为式Ⅰ：

（Ⅰ）

其中，R₁，R₂，R₃，分别为“-H”或“-CH₃”； R₄，R₅分别为“-H”或“-O”。

2.根据权利要求1所述一种异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用，其特征在于：所述异苯并呋喃类化合物结构式为式Ⅱ和式Ⅲ，式Ⅱ命名为4,5,6-三羟基-7-甲基-1,3-二氢异苯并呋喃，式Ⅲ命名为4,5,6-三羟基-7-甲基-3H-异苯并呋喃-1-酮，式Ⅱ和式Ⅲ结构如下：

3.根据权利要求1或2所述一种异苯并呋喃类化合物在防止海洋生物污损中的应用，其特征在于：所述海洋生物为藤壶类生物。