CN102597781B - 判定高功能自闭症的发病危险度的方法及标记物 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于能够提供利用生物学标记物、客观且简便地判定自闭症的发病危险度的方法，还通过利用该方法早期发现自闭症者，能够在早期对自闭症者提供适当的治疗。本发明涉及一种判定自闭症的发病危险度的方法，所述方法包括测定从被检者分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度或胆固醇浓度、或血浆或血清中的中性脂肪浓度或胆固醇浓度的步骤。进而，本发明还提供一种利用该方法、用于判定自闭症的发病危险度的试剂盒、及使用非人哺乳类动物的自闭症治疗药的候选物质的筛选方法。
Description
技术领域
本申请要求基于日本专利申请2009-236976(2009年10月14日申请)的优先权，将其内容作为参照引入本说明书中。
本发明涉及一种早期发现自闭症者的方法。详细而言，本发明涉及一种判定自闭症的发病危险度的方法，所述方法包括测定从被检者分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白的步骤。另外，涉及一种判定自闭症的发病危险度的方法，所述方法包括测定血浆或血清中的胆固醇浓度及/或中性脂肪浓度的步骤。
背景技术
自闭症是由美国Kanner博士在1943年最初记载为“情绪接触的自闭性障碍”的障碍。发病最早出现在3岁，以难以形成与其他人的社会关系、语言发展迟钝、强迫性的同一性保持(兴趣和关心有限、局限于特定的范围)为主要症状。推测自闭症是随着发展过程而状态发生变化的发展障碍，是尚无法确定的高级中枢神经系统障碍。
所谓高功能自闭症，是指自闭症中不伴有智力发展迟钝的自闭症。已经报道了自闭症的罹患率在每1万个孩子中有7～16人，高功能自闭症占自闭症的约11～34％(Macintosh et al Journal of ChildPsychology and Psychiatry 2004)。
自闭症的原因目前尚未明确，没有确立根治的治疗法。因此，基于早期发现的专家的教育介入(将其称作疗育)在自闭症者的社会生活适应方面是重要的。开始疗育的时间越早越有效，期望能在自闭症症状首次出现的2岁左右开始。但是，由于针对自闭症没有客观·生物学检查判定基准，所以自闭症诊断必须由医师仅根据症状来进行，针对于此需要儿童精神医学临床的丰富经验。因此，在该领域的专家尚不充足的现阶段，现状是自闭症者的早期发现非常困难。
需要说明的是，目前自闭症的诊断采用美国精神医学会的诊断基准(DSM-IV)、世界保健机构WHO的ICD-10、ADI-R(AutismDiagnostic Interview-Revised)通过会面进行。
虽然自闭症的原因目前尚不清楚，但是目前为止已经有各种报道。例如自闭症中确认了在出生后早期头围扩大，认为与该时期的神经细胞和神经胶质细胞新生的增加或细胞凋亡的减少有关(McCaffery et al Progress in Neurobiology 2005)。此外，Fatemi等人着眼于Reeler小鼠中观察到的中枢神经发展障碍，报道了Reeler小鼠的责任基因Reelin的受体即超低密度脂蛋白受体(VLDL受体：Very Low Density Lipoprotein Receptor)mRNA的增大见于自闭症者死后脑的前头叶及小脑(Fatemi et al 2005)。另一方面，Sharp等人利用蛋白质组解析发现自闭症儿中特异性的脱脂载脂蛋白B-100浓度降低(Corbett et al 2007)。VLDL原本是含有脱脂载脂蛋白B-100的蛋白质·脂质的复合体，预计该分子在体内的表达变化与脂质代谢有关。但是，目前为止没有关于对自闭症者的末梢血脂质成分进行研究的报道，也没有表明自闭症者与血清脂质水平的关系的报道。
另外，公开了下述通过测定血清样品中特定的生长因子的量，诊断自闭症的发明(日本特开2008-32447)。但是，上述生长因子的动向与脂质代谢没有任何关系。
如上所述，由于自闭症病态的特殊性，以确立包括基于早期诊断的预防、或早期治疗、社会恢复支援等的治疗体系作为目标进行了研究，但尚未确立能够进行早期诊断的自闭症的生物学标记物。
专利文献1：日本特开2008-32447
非专利文献1：Macintosh et al Journal of Child Psychology andPsychiatry 2004
非专利文献2：McCaffery et al Progress in Neurobiology 2005
非专利文献3：Fatemi et al 2005
非专利文献4：Corbett et al 2007
发明内容
本发明的目的在于能够提供利用生物学标记物、客观且简便地判定自闭症的发病危险度的方法，还通过利用该方法早期发现自闭症者，能够在早期对自闭症者提供适当的治疗。
为了实现上述目的，发明人等收集高功能自闭症组和健康对照者组的血清，进行比较，发现未成年自闭症者的超低密度脂蛋白成分中的中性脂肪浓度显著降低，基于上述现象，完成了本发明。
另外，本发明人等收集高功能自闭症组和健康对照者组的血清，进行比较，发现未成年自闭症者的胆固醇及中性脂肪两者的总量显著降低，及未成年自闭症者的超低密度脂蛋白成分中的胆固醇浓度显著降低，基于上述现象，完成了本发明。
即，本发明涉及一种判定自闭症的发病危险度的方法，其特征在于，包括测定从被检者分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白的步骤，血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度为60mg/dl以下时，判断自闭症的发病危险度高。
上述被检者优选为18岁以下。
进而，上述被检者为8岁以下、血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度为30mg/dl以下时，可以判断自闭症的发病危险度高。
另外，本发明还提供一种自闭症的发病危险度判定用试剂盒，所述试剂盒含有选自下述酶中的1种或2种以上的酶和显色剂：脂蛋白脂肪酶、甘油激酶、甘油-3-磷酸氧化酶、过氧化物酶、抗坏血酸氧化酶、丙酮酸激酶、及乳酸脱氢酶。
进而，本发明还提供一种筛选方法，所述方法为筛选自闭症治疗药的候选物质的方法，其特征在于，包括下述步骤：
(a)对非人哺乳动物给与被检物质的步骤；
(b)从非人哺乳动物中分离血浆或血清的步骤；
(c)测定分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度的步骤；及
(d)以与给与被检物质之前相比血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度升高作为指标，判定被检物质为自闭症治疗药的候选物质的步骤。
另外，本发明还提供一种判定自闭症的发病危险度的方法，其特征在于，包括测定从被检者分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白的步骤，血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的胆固醇浓度低于健康者血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的胆固醇浓度的标准值-标准误差时，判断自闭症的发病危险度高。
进而，本发明还提供一种判定自闭症的发病危险度的方法，其特征在于，包括测定从被检者分离得到的血浆或血清中的胆固醇浓度及/或中性脂肪浓度的步骤，上述胆固醇浓度低于健康者的胆固醇浓度的标准值-标准误差时、及/或上述中性脂肪浓度低于健康者的中性脂肪浓度的标准值-标准误差时，判断自闭症的发病危险度高。
本发明还提供一种含有胆固醇氧化酶、过氧化物酶、及显色剂的自闭症的发病危险度判定用试剂盒。
上述自闭症可以为高功能自闭症。
根据本发明，首次确定了生物学性的高功能自闭症的发病危险度判定基准。另外，本发明可以通过采集末梢血之类简便且将被检者的负担抑制到最低限度的方法来进行。
根据本发明，目前为止较大程度上取决于医师主观的自闭症的诊断变为导入了生物学基准的诊断，因此可以预见诊断技术的提高。另外，自闭症者的疗育越早越能够期待其效果，而本发明法适用于幼儿和儿童，使早期发现、早期疗育成为可能。这对自闭症者将来从事社会生活方面非常有效。另外，在关注自闭症者所引起的事件的现在，从应对上述问题的观点来看社会效果明显。
根据本发明，能够早期、简便且具有可靠性地诊断自闭症。特别是通过分2步测定人血液试样中的中性脂肪VLDL成分浓度，可以容易地进行自闭症的诊断辅助。
附图说明
[图1]图1表示未成年的高功能自闭症者组和未成年的健康对照者组中的、血清中脂质的脂蛋白成分浓度平均值。
[图2]图2表示自闭症者和健康对照者的、VLDL成分中的胆固醇浓度与年龄的关系。
[图3]图3表示自闭症者和健康对照者的、VLDL成分中的中性脂肪浓度与年龄的关系、及判定高功能自闭症者的截断值(cut offvalue)。
具体实施方式
本发明涉及一种早期发现自闭症者的方法。详细而言，本发明涉及一种判定自闭症的发病危险度的方法，所述方法包括测定从被检者分离得到的血清中的超低密度脂蛋白的步骤。
1.定义
“自闭症”是在小儿期被诊断的广泛性发展障碍之一，作为主要症状，到3岁为止表现为交流障碍、社会相互作用障碍、局限的兴趣和行动、知觉过敏及多动倾向。所谓“高功能自闭症”，是指上述自闭症中不伴有智力发展迟钝的自闭症。
本申请发明中，所谓“自闭症的发病危险度”，是指用于判断被检者是否会患有自闭症、或自闭症是否正在发病的、自闭症的检查判定基准。自闭症的发病危险度越高判断自闭症发病的可能性越高或为自闭症者，自闭症的发病危险度越低判断发病的可能性越低或为健康者。
“超低密度脂蛋白(very low-density lipoprotein：VLDL)”为血液中的脂蛋白之一。脂蛋白根据利用离心分离测定得到的密度进行分类，除此之外，还包括乳糜微粒(CM)、中间密度脂蛋白(IDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)。上述脂蛋白在由蛋白质、中性脂肪、游离胆固醇、胆固醇酯、及磷脂形成的方面是共通的，但是在分别含有特征性脱辅基蛋白质、脂质组成不同的方面是不同的。
所谓“超低密度脂蛋白成分”或“VLDL成分”，是指将血浆或血清离心分离得到的、密度为0.950～1.006g/ml的成分。同样地所谓“乳糜微粒成分”或“CM成分”，是指将血浆或血清离心分离得到的、密度＜0.95g/ml的成分，所谓“低密度脂蛋白成分”或“LDL成分”，是指将血浆或血清离心分离得到的、密度为1.019～1.063g/ml的成分，所谓“高密度脂蛋白成分”或“HDL成分”，是指将血浆或血清离心分离得到的、密度为1.063～1.210g/ml的成分。
“中性脂肪”、“三酰甘油”或“TG”是脂肪酸和甘油形成的三酯化合物
本发明中所谓“未成年”或“儿童”，是指18岁以下的人。
所谓“截断值”，是指着眼于某一物质判定目标疾病组和非疾病组时规定的值。判定目标疾病和非疾病时，如果为截断值以下则为阴性，如果为截断值以上则为阳性，或如果为截断值以下则为阳性，如果为截断值以上则为阴性，从而可以判定疾病。
作为出于评价截断值的临床有用性的目的而使用的指标，可以举出灵敏度和特异度。
利用截断值判定某一母集团，在疾病患者中，判定为阳性的表示为a(真阳性)，为疾病患者且判定为阴性的表示为b(假阴性)，虽然不是疾病患者但是判定为阳性的表示为c(假阳性)，不是疾病患者且判定为阴性的表示为d(真阴性)，在上述情况下，可以将a/(a+b)表示的值表示为灵敏度(真阳性率)，将d/(c+d)表示的值表示为特异度(真阴性率)。
目标疾病组和非疾病组的测定值的分布通常一部分重复。因此，通过使截断值上下变化，灵敏度和特异度发生变化。通过降低截断值，灵敏度变高，但特异度降低，通过升高截断值，灵敏度变低，但特异度升高。作为判定方法，优选灵敏度和特异度两者的值高的方法。另外，确认了灵敏度和特异度的值不超过0.5的判定方法是没有用的。
2.判定自闭症的发病危险度的方法
本发明涉及一种判定自闭症的发病危险度的方法，所述方法包括测定从被检者分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白的步骤。
(1)分离步骤
对于本发明中测定的试样，由通常从被检者中采集的血液制备血浆或血清进行使用。本发明可以使用末梢血作为试样。作为制备血浆或血清的方法，可以采用本领域中公知的方法。取得的血浆或血清可以冷冻保存直至测定。
(2)测定步骤
本发明中，测定步骤可以如下进行，即，利用超离心法或凝胶过滤等本领域中公知的方法，将从被检者分离得到的血浆或血清分离，得到各成分，然后测定成分中的中性脂肪浓度或胆固醇浓度。使用凝胶过滤HPLC法时，可以将血清分离后对各成分进行检测及定量。血浆中及血清中，脂质浓度不存在差别。
如上所述，血浆或血清中的脂蛋白根据其密度分为乳糜微粒、IDL、VLDL、LDL、HDL。可以按照凝胶过滤HPLC法等公知的方法对血清中的各成分进行分离、定量。
(i)中性脂肪浓度的测定
本发明中，可以直接测定VLDL中的中性脂肪浓度，判定自闭症的发病危险度；或者也可以进行下述2步测定，即，首先测定血浆或血清中的中性脂肪的总量，中性脂肪的总量小于一定值时测定VLDL成分的中性脂肪浓度，判定自闭症的发病危险度。进行2步测定时，优选下述方案，即，中性脂肪的总量小于80mg/dl、优选小于70mg/dl、较优选小于60mg/dl时，测定VLDL成分的中性脂肪浓度，判定自闭症的发病危险度。如上所述通过将测定分为2步，可以容易地进行自闭症的诊断辅助。
中性脂肪的浓度可以基于测定通过脂蛋白脂肪酶(LPL)由甘油三酯生成的甘油的方法，利用甘油激酶(GK)-甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)法、甘油氧化酶(GOD)法、甘油脱氢酶(GDH)法等测定。
例如在GPO-DAOS法中，利用DAOS对使用脂蛋白脂肪酶(LPL)、甘油激酶(GK)、甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)、过氧化物酶(POD)生成的过氧化氢进行定量，由此可以测定中性脂肪量。具体而言，GPO-DAOS法包括以下步骤：
1)利用脂蛋白脂肪酶(LPL)的作用将试样中的中性脂肪分解为甘油和脂肪酸；
2)在ATP存在下、利用甘油激酶(GK)的作用使生成的甘油形成甘油-3-磷酸；
3)利用甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)的作用，使生成的甘油-3-磷酸氧化，同时生成过氧化氢；
4)利用过氧化物酶(POD)的作用，使生成的过氧化氢与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3，5-二甲氧基苯胺钠盐(DAOS)和4-氨基安替比林定量地氧化缩合，生成蓝色色素；及
5)通过测定生成的蓝色色素的吸光度，算出样品中的中性脂肪浓度。
同样地在“NAD”法中，对使用脂蛋白脂肪酶(LPL)、甘油激酶(GK)、丙酮酸激酶、及乳酸脱氢酶生成的过氧化氢进行定量。
(ii)胆固醇浓度的测定
本发明中，可以直接测定VLDL中的胆固醇浓度，判定自闭症的发病危险度；或者也可以进行下述2步测定，即，首先测定血浆或血清中的胆固醇的总量，胆固醇的总量小于一定值时测定VLDL成分的胆固醇浓度，判定自闭症的发病危险度。如上所述通过将测定分为2步，可以容易地进行自闭症的诊断辅助。
胆固醇浓度的测定可以通过胆固醇氧化酶·DAOS法等测定。
例如胆固醇氧化酶·DAOS法中，利用DAOS对使用胆固醇氧化酶生成的过氧化氢进行定量，由此可以测定胆固醇量。具体而言，胆固醇氧化酶·DAOS法包括以下步骤：
1)利用胆固醇氧化酶的作用使试样中的胆固醇氧化，生成酮体和过氧化氢；
2)利用过氧化物酶的作用，使生成的过氧化氢与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3，5-二甲氧基苯胺钠盐(DAOS)和4-氨基安替比林定量地氧化缩合，生成蓝色色素；及
3)通过测定生成的蓝色色素的吸光度，算出样品中的胆固醇浓度。
本发明的其他方案中，测定步骤可以如下进行，即，测定从被检者分离得到的血浆或血清中的中性脂肪的总量或胆固醇的总量。
(3)判定步骤
发明人等发现在健康者中无论年龄如何基本恒定的VLDL成分中的中性脂肪浓度在自闭症者中则年少时低，随着年龄增长而增加。
基于上述发现，本发明中，通过上述方法测定的VLDL成分中的中性脂肪浓度低于健康者的标准值-标准误差时，判断被检者的自闭症的发病危险度高。具体而言，中性脂肪浓度为60mg/dl以下、优选为50mg/dl以下时，判断被检者的自闭症的发病危险度高。优选在18岁以下的被检者中，VLDL成分中的中性脂肪浓度为50mg/dl以下、优选为40mg/dl以下时，判断自闭症的发病危险度高。较优选在8岁以下的被检者中，VLDL成分中的中性脂肪浓度为40mg/dl以下、优选为30mg/dl以下时，判断自闭症的发病危险度高。
另外，本发明人等发现与健康者相比，自闭症者的超低密度脂蛋白成分中的胆固醇浓度显著降低。基于上述发现，本发明中，通过上述方法测定的VLDL成分中的胆固醇浓度低于健康者的标准值-标准误差时，判断被检者的自闭症的发病危险度高。具体而言，胆固醇浓度为20mg/dl以下、优选为15mg/dl以下时，判断被检者的自闭症的发病危险度高。
进而，本发明人等发现与健康者相比，自闭症者的胆固醇及中性脂肪两者的总量显著降低。基于上述发现，本发明中，通过上述方法测定的血浆或血清中的中性脂肪浓度或胆固醇浓度低于健康者的标准值-标准误差时，判断被检者的自闭症的发病危险度高。具体而言，胆固醇浓度为160mg/dl以下、优选为150mg/dl以下时，或中性脂肪浓度为80mg/dl以下、优选为60mg/dl以下时，判断被检者的自闭症的发病危险度高。
根据本发明，通过利用末梢血的简便的方法，可以在早期以高的正确诊断率判定高功能自闭症的发病危险度。
3.自闭症的发病危险度判定用试剂盒
本发明的试剂盒只要用于实施判定上述2.栏中说明的自闭症的发病危险度的方法即可，对其中包含的具体的结构、材料、仪器等没有特别限定。
本发明的试剂盒不限定于此，例如含有用于测定分离得到的末梢血浆或末梢血清中、或末梢血VLDL中的中性脂肪的试剂：选自脂蛋白脂肪酶(LPL)、甘油激酶(GK)、甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)、甘油氧化酶(GOD)、甘油脱氢酶(GDH)、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、过氧化物酶等酶中的1种或2种以上、及DAOS、FDAOS等显色试剂。进而，还可以含有测定中必需的缓冲液。
例如利用GPO-DAOS法测定中性脂肪浓度时，本发明的试剂盒可以含有选自甘油、缓冲液(PIPES pH 6.5)、脂蛋白脂肪酶、腺苷-5’-磷酸二钠盐三水合物(ATP)、甘油激酶、甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)、过氧化物酶、N-乙基-N-(2’-羟基-3’-磺丙基)-3，5-二甲氧基苯胺钠(DAOS)、4-氨基安替比林、及抗坏血酸氧化酶中的1种或2种以上。
另外，本发明的试剂盒不限定于此，例如可以含有用于测定分离得到的末梢血浆或末梢血清中、或末梢血VLDL中的胆固醇的试剂：胆固醇氧化酶、过氧化物酶、及显色试剂。
可以使用上述试剂盒判定高功能自闭症的发病危险度。
进而，本发明的自闭症的发病危险度判定用试剂盒还可以作为用于下述筛选自闭症治疗药的候选物质的方法的试剂盒使用。
4.筛选自闭症治疗药的候选物质的方法
本发明的判定方法和判定试剂盒可以应用于使用了非人哺乳类动物的自闭症治疗药的候选物质的筛选方法。作为非人哺乳类动物，只要为除人之外的哺乳动物即可，例如可以使用小鼠、大鼠、及猴子等。
本发明提供一种筛选方法，所述方法为筛选自闭症治疗药的候选物质的方法，其特征在于，包括下述步骤：
(a)对非人哺乳动物给与被检物质的步骤；
(b)从非人哺乳动物中分离血浆或血清的步骤；
(c)测定分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度的步骤；及
(d)以与给与被检物质之前相比血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度升高作为指标，判定被检物质为自闭症治疗药的候选物质的步骤。
本发明的其他方案中，也可以以末梢血浆或末梢血清中的中性脂肪浓度、胆固醇浓度、或末梢血浆或末梢血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的胆固醇浓度升高作为指标，筛选自闭症治疗药的候选物质。
可以使用上述筛选方法选择高功能自闭症治疗药的候选物质。
以下给出实施例更详细地说明本发明，但这些实施例不限制本发明。
实施例
1.受试者
选择高功能自闭症男性106名〔平均年龄：14.7岁(标准偏差5.9)、年龄范围：6岁～30岁〕作为受试者，以及选择同一年龄层的健康者112名〔平均年龄：15.1岁(标准偏差6.2)、年龄范围：6岁～30岁〕作为健康对照的受试者。全部患者按照高功能自闭症的诊断基准ADI-R(Autism Diagnostic Interview-Revised)进行诊断。
2.实验方法
采集受试者的血清样品，在-80℃下保存直至测定。通过HPLC法测定比较胆固醇和中性脂肪的脂质成分。VLDL成分的中性脂肪浓度委托给Skylight-Biotech公司，利用凝胶过滤HPLC法进行测定。
3.统计分析
数据用平均值表示。用t检验解析2组间的统计分析。p值小于0.01的情况为统计学有意义。
4.结果
(1)自闭症者中的血清中脂质浓度的降低
健康对照的未成年受试者及高功能自闭症的未成年受试者中血清中脂质的脂蛋白成分浓度平均值示于表1及图1。
[表1]
由图1表明，与健康对照的未成年被检者相比，高功能自闭症的未成年被检者的血清中脂质中胆固醇及中性脂肪两者的总量显著降低。进而，考察乳糜微粒、VLDL、LDL、HDL各脂蛋白成分中的胆固醇及中性脂肪浓度时，确认了VLDL成分和HDL成分中两者的浓度均降低，特别是在VLDL成分中显著降低。对于乳糜微粒、LDL成分，未确认到显著性差异。
(2)VLDL成分的胆固醇浓度·中性脂肪浓度的降低与年龄的关系
自闭症者与健康对照者的、VLDL成分中的胆固醇浓度与年龄的关系示于图2，VLDL成分中的中性脂肪浓度与年龄的关系示于图3。
由图2表明，健康对照的VLDL成分的胆固醇浓度与年龄无关基本恒定，但自闭症者的VLDL成分的胆固醇浓度在年少时最低，随着年龄增长而增加。
由于VLDL中所含的脂质的中性脂肪占大部分，所以确认了在中性脂肪浓度中该倾向更明显(图3)。因此，认为VLDL成分的中性脂肪浓度的降低对高功能自闭症的早期诊断有效。
(3)截断值
与胆固醇浓度相比，VLDL成分的中性脂肪浓度在年少时低、随着年龄增长而增加的倾向明显，因此针对中性脂肪浓度检索截断值。
结果特别是在8岁以下的患者中，VLDL成分的中性脂肪浓度低于30mg/dl时，可以以灵敏度83％、特异度90％、正确诊断率86％的高百分率筛选高功能自闭症者(图3)。需要说明的是，对全部未成年、即18岁以下来说，灵敏度为63％、特异度为72％、正确诊断率为67％。
因此，根据本实验，可以确认血液中性脂肪VLDL成分作为自闭症的生物学标记物有用。
产业上的可利用性
根据本发明，目前为止较大程度上取决于医师主观的自闭症的诊断变为导入了生物学基准的诊断，因此可以预见诊断技术的提高。另外，自闭症者的疗育越早越能够期待其效果，而本发明的方法能适用于幼儿和儿童，能确立包括基于早期诊断的预防、或早期治疗、社会恢复支援等的治疗体系。
Claims (6)
1.用于测定从被检者分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白的试剂在制造用于判定自闭症的发病危险度的试剂盒中的用途，所述判定中，血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度为60mg/dl以下时，判断自闭症的发病危险度高。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，在18岁以下的被检者中，血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度为60mg/dl以下时，判断自闭症的发病危险度高。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，在8岁以下的被检者中，血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度为30mg/dl以下时，判断自闭症的发病危险度高。
4.如权利要求1～3中任一项所述的用途，其中，自闭症为高功能自闭症。
5.用于测定从非人哺乳动物分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度的试剂在制造用于筛选自闭症治疗药的候选物质的药剂中的用途，所述筛选包括下述步骤：
(a)对非人哺乳动物给予被检物质的步骤；
(b)从非人哺乳动物中分离血浆或血清的步骤；
(c)测定分离得到的血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度的步骤；及
(d)以与给予被检物质之前相比血浆或血清中的超低密度脂蛋白成分中所含的中性脂肪浓度升高作为指标，判定被检物质为自闭症治疗药的候选物质的步骤。
6.如权利要求5所述的用途，其中，自闭症为高功能自闭症。
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