CN102578590A - α1-酸性糖蛋白的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了α1-酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的新应用，从而拓展了其应用范围，也为抗疲劳领域提供了新途径。
Description
技术领域
本发明涉及α1-酸性糖蛋白的应用。
背景技术
α1-酸性糖蛋白，分子量41-43KD，含糖约45％，等电点为2.8-3.8，包括等分子的己糖，己糖胺和唾液酸。其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示(数据来源于NCBI.蛋白编号gi|16757980)。
据现有文献报道(Thierry Fournier，Najet Medjoubi-N，Dominique Porquet.Alpha-1-acid glycoprotein.BBA.2000；1482.157)，肝脏是a1-酸性糖蛋白最主要的合成器官，在炎症，肿瘤或者损伤的情况下，该蛋白会被肝脏大量合成释放入血。该蛋白在体内主要发挥免疫调节以及运载脂溶性小分子的作用。
但目前，尚未有文献报道α1-酸性糖蛋白在抗疲劳领域的应用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供α1-酸性糖蛋白的新应用，从而拓展其应用范围。
本发明涉及α1-酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的应用。其中，所述的α1-酸性糖蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
所述的抗疲劳的保健食品中，α1-酸性糖蛋白的含量为抗疲劳有效量以上，具体可根据情况选择。一般小鼠剂量为7mg/kg以上，人剂量可按本领域常规方法换算，一般为46mg以上(按人体重为60kg折算)。所述的抗疲劳的保健食品可以仅含α1-酸性糖蛋白作为唯一活性成分，也可以还含有除α1-酸性糖蛋白以外的其它活性成分。所述的其它活性成分为对α1-酸性糖蛋白的抗疲劳作用没有不良影响可联合使用的其他活性成分，如其他抗疲劳活性成分。
所述的抗疲劳的保健食品可为食品领域常规的适用于α1-酸性糖蛋白的各种剂型。根据所选择的剂型，可按本领域常规知识，选择合适的辅料，按常规方法制得所需剂型的保健食品。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：本发明公开了α1-酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的新应用，从而拓展了其应用范围，也为抗疲劳领域提供了新途径。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例α1-酸性糖蛋白的抗疲劳作用
1、材料
动物：KM小鼠，28只，雄性，体重18-22g，第二军医大学实验动物中心提供。
α1-酸性糖蛋白纯品(orosomucoid 1，ORM 1)：由上海开阳生物公司提供。该纯品获得的基本工艺流程如下：
(1)分子克隆：
a、抽提KM小鼠肝组织的RNA，RT-PCR钓出目的基因ORM；
b、构建真核质粒载体(Pichia)：构建ppICZa-ORM(xhol+Notl插入)质粒；
c、表达筛选。
(2)中试发酵
(3)蛋白纯化
发酵上清液层析；条件为20mMHAc-NaAc，pH4.5/SP-Sepharose FF层析。将洗脱液进行蛋白电泳，在相应分子量的位置上出现条带。将该条带切取，并进行质谱分析，以确保所合成的蛋白是α1-酸性糖蛋白。
所获得ORM 1溶液中，ORM 1浓度为0.78mg/ml，分子量41-43KD，含糖约45％，等电点为2.8-3.8，包括等分子的己糖，己糖胺和唾液酸。
生理盐水(NS)：称取4.5g氯化钠粉末溶于500ml双蒸水中充分溶解，再用高压灭菌锅在120度进行灭菌处理。
2、实验方法
小鼠自由进食饮水，自然光照，普通饲料适应性喂养3天，随后进行适应性游泳以让其适应之后的游泳测试，方法为每只小鼠自由游泳15分钟，再放回笼中饲养恢复一天进行后续实验。
随机分为对照组(n＝7只)和给药组(n＝21只，7只/每个剂量组)，分别对各组给药：按表1所示的剂量对给药组(ORM 1低剂量组、ORM 1中剂量组和ORM 1高剂量组)进行尾静脉注射，对照组给予同样剂量的生理盐水0.2ml。连续三天，在第四天进行游泳实验，在所有小鼠均负重8％的情况下测得其游泳时间。
小鼠游泳实验方法参考文献(Rong Sheng，Xianxiang Xu，Qin Tang，etal.Polysaccharide of Radix Pseudostellariae Improves Chronic FatigueSyndrome Induced by Poly I：C in Mice Evid.Based Complement.Altern.Med.，2009；10.1093.)报道的方法：将小鼠置入一个48×36×29厘米的不锈钢圆筒内，水深20cm，水温约22度，将相当于其自身体重8％的别针用细绳穿起固定在其尾根部，遂开始记录游泳时间，以小鼠下沉水面超过8秒不能自由浮起为疲劳标准，停止实验。
3、实验结果
各实验组实验结果如表1所示：
表1α1-酸性糖蛋白给药组和对照组游泳实验测试结果
*q＜0.01
由表1可见，经统计学检验SNK-q检验，与对照组相比，α1-酸性糖蛋白在高剂量时(0.2ml相当于7mg/kg)，能够显著延长小鼠游泳时间，具有抗疲劳作用。
Claims (1)
1.α1-酸性糖蛋白在制备抗疲劳的保健食品中的应用。
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| WO2000061170A2 (de) * | 1999-04-14 | 2000-10-19 | Hämosan Life Science Services Gmbh | Neue medizinische verwendung von alpha-1-saurem glykoprotein (aag oder orosomucoid) |
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