CN102559368A - 一种南极磷虾磷脂的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种南极磷虾磷脂的制备方法，步骤为：1、将南极磷虾沥干后匀浆。2、用紫外线照射匀浆液10～30分钟后自溶2～10小时。3、向匀浆液中加水，用超声波处理，调节pH值至7.5～8.0后，加入碱性蛋白酶，酶解获得酶解液；将酶解液干燥后得干粉。4、利用乙醇靠萃取法提取南极磷虾磷脂。本发明方法尤为适合在捕捞船上捕捞鲜活南极磷虾后即可操作。具有操作简单，效率高的特点；特别利用鲜活南极磷虾强烈的自溶能力，降低外源酶的用量，从而降低了生产成本。本发明提取方法条件温和，能最大限度的保存虾磷脂中原有的一些生理活性物质，使产品兼有营养性和功能性。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取南极磷虾磷脂的方法。
背景技术
南极磷虾(Euphausia superba)是地球上最大的单种生物资源之一，其现存量的估计值约为4～15亿吨，成熟虾年产量为3～5亿吨，年可捕获量可达1亿吨左右，形成巨大的潜在渔业资源。近年来，随着世界性传统渔业资源的逐渐衰竭，以及200海里专属经济区的提出，使南极水域中巨大的南极磷虾资源受到一些远洋渔业发达国家的关注。我国也已把南极磷虾资源列入今后远洋渔业发展的主要开发品种之一。
目前，对南极磷虾资源的开发以利用其蛋白质为主，而对南极磷虾油的开发利用尚不充分。南极磷虾生活在寒带水域，虾油中富含磷脂，可占总油脂的40％以上。南极磷虾磷脂中富含以DHA和EPA为代表的omega-3多不饱和脂肪酸。研究表明，omega-3多不饱和脂肪酸具有广泛的有益健康的功效，包括改善心脏病患者的预后、增加胎儿的生长速度、抑制肿瘤的生长和转移、抗炎、抗血小板聚集、抗高血压和高血脂及调节机体对胰岛素的敏感性等。日本学者指出，以磷脂形式存在的omega-3多不饱和脂肪酸在心血管活性方面更具优势。这表明，南极磷虾磷脂的营养和药用价值非常高，具有很好而开发利用前景。
南极洲地处遥远、南极磷虾捕捞后需长期运输、保藏。由于南极磷虾中富含多不饱和脂肪酸，易腐败变质。因此，南极磷虾捕捞需迅速冷冻、低温保存才能保证磷脂的原有品质，这大大提高了南极磷虾的运输保藏成本，成为制约南极磷虾磷脂资源开发利用的瓶颈。要解决南极磷虾运输、保藏困难的问题，最好的办法就是在捕捞后迅速将南极磷虾加工以制备磷脂，但目前尚缺乏南极磷虾磷脂的船上加工制备方法。
发明内容
本发明针对上述问题，本发明旨在提供一种简易方法在南极磷虾捕捞后提取南极磷虾磷脂的方法，是一种尤其适合船上操作的方法。
为了达到上述目的，本发明一种南极磷虾磷脂的制备方法，包括如下步骤：
Step 1、原料处理：将捕捞的南极磷虾沥干后匀浆，获得匀浆液；
Step 2、低温自溶：用功率20～40瓦、波长200～300纳米的紫外线距离0.5～1米照射所述匀浆液10～30分钟；之后在0～4℃(捕捞地区环境温度)下自溶2～10小时；
Step 3、超声辅助外源酶解，包括如下两步骤：
Step 31、向所述匀浆液中加入1～3倍体积的水，用300～800瓦超声波(波长200～400纳米)处理5～20分钟，调节所述匀浆液的pH值至7.5～8.0，向所述匀浆液中加入9～10×105U/kg底物的碱性蛋白酶，在55～65℃下酶解1～4小时获得酶解液；
Step 32、将所述酶解液经喷雾干燥后得干粉；
Step 4、南极磷虾磷脂的提取：向所述干粉中加入5～15倍体积95％乙醇，混匀，静置30～90分钟，离心分离，得第一次上层液相和第一次沉淀；所述第一次液相除去乙醇获得南极磷虾磷脂。
优选方式下，上述Step 3中调节所述匀浆液的PH值选用浓度为1～6M的HCl或NaOH；碱性蛋白酶选用枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶。
此外，为了提高南极磷虾磷脂的获取效率，在上述Step4中，在获得所述第一次沉淀后，首先向所述第一次沉淀加入2.5～7.5倍体积的乙醇，混匀，静置20～60分钟，离心分离，得第二次上层液相和第二次沉淀；混合所述第一次液相和所述第二次液相，除去乙醇获得南极磷虾磷脂。
上述步骤中除去乙醇的方法为：经40～60℃下减压浓缩除去乙醇，同时回收乙醇以便重复利用。
本发明优选在船上操作，以便获得质量高的南极磷虾磷脂产品，同时降低运输成本。为了进一步降低运输成本，上述步骤Step1和Step2最好在捕捞船上进行操作，同时在Step2与Step3之间，还包括在捕捞船上将匀浆液直接冻存以便运输。此后运回岸上后在Step3中，首先将冻存的匀浆液融化，制回匀浆液状态，而后完成上述Step 3和Step 4的操作。
在另一种优选方式下，步骤Step1和Step2在捕捞船上进行操作，同时在Step2与Step3之间，在捕捞船上将所述匀浆经喷雾干燥后得干粉保存以便运输。此后运回岸上后在Step3中，首先将所述干粉溶解于7～12倍体积水中制回匀浆液状态，而后完成上述Step 3和Step 4的操作。
此外，本发明中“沥干”目的是将鲜活南极磷虾附着的水清除，沥干后虾本身仍保持鲜虾状态。而紫外线照射的目的是为了增进南极磷虾的自溶能力；类似，超声波处理目的旨在增进酶解能力。
本发明首次将自溶技术和超声技术同时应用于南极磷虾脂的提取方法，提取过程操作简单，效率高，产品纯度和质量俱佳，适宜推广，具有较高的经济效益。由于利用了鲜活南极磷虾自身具备的强烈自溶能力，降低了外源酶的用量，降低了生产成本。由于采用超声处理，提高南极磷虾脂的提取率，增加了效益。本发明方法条件温和，能最大限度的保存南极磷虾脂中原有的一些生理活性物质，使产品兼有营养性和功能性。本发明具有以下优点：
1、本发明涉及的操作过程简单，不需要复杂的设备，适合在捕捞船上进行。
2、本发明利用南极磷虾自身存在的强烈自溶能力，可以减少外源酶用量，降低生产成本。
3、本发明首次将超声技术应用于南极磷虾脂的提取，大大提高了南极磷虾脂的得率，提高了经济效益。
4、本发明的整个操作过程温度均较低，在减少能量消耗的同时能最大限度的保存南极磷虾脂中原有的一些生理活性物质。
具体实施方式
实施例1：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.5米的200纳米紫外线照射处理10分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶2小时；
3.超声辅助外源酶解：向匀浆液中加入1倍体积的水，用300瓦超声波(200纳米)处理5分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.5，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9×105U/kg)，混匀，在60℃下酶解1小时；将经外源酶酶解后的样品经喷雾干燥处理得干粉。
4.南极磷虾磷脂的提取：向干粉中加入5倍体积95％乙醇，混匀，静置30分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入2.5倍体积的乙醇，混匀，静置20分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过40℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
实施例2：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率20瓦、距离1米的200纳米紫外线照射处理20分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶10小时；
3.超声辅助外源酶解：向匀浆液中加入3倍体积的水，用800瓦超声波(300纳米)处理10分钟，用2M的HCl或NaOH调pH至8.0，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(10×105U/kg)，混匀，在55℃下酶解4小时；将经外源酶酶解后的样品经喷雾干燥处理得干粉。
4.南极磷虾磷脂的提取：向干粉中加入15倍体积95％乙醇，混匀，静置90分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入7.5倍体积的乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过50℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
实施例3：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率30瓦波长200纳米的紫外线距离0.8米照射处理30分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶7小时；
3.超声辅助外源酶解：向匀浆液中加入2倍体积的水，用550瓦超声波(波长400纳米)处理15分钟，用3M的HCl或NaOH调pH至7.75，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9.5×105U/kg)，混匀，在65℃下酶解1小时；将经外源酶酶解后的样品经喷雾干燥处理得干粉。
4.南极磷虾磷脂的提取：向干粉中加入10倍体积95％乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入5.5倍体积的乙醇，混匀，静置40分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过60℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
实施例4：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.5米的200纳米紫外线照射处理20分钟，将处理完的匀浆液置于0～4℃下自溶5小时；
3.超声辅助外源酶解：向匀浆液中加入1倍体积的水，用800瓦超声波(400纳米)处理20分钟，用4M的HCl或NaOH调pH至7.5～8.0，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9～10×105U/kg)，混匀，在56℃下酶解1小时；将经外源酶酶解后的样品经喷雾干燥处理得干粉。
4.南极磷虾磷脂的提取：向干粉中加入5～15倍体积95％乙醇，混匀，静置30～90分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；液相A经过41℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
实施例5：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率20瓦、距离0.5米的200纳米紫外线照射处理15分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶10小时；
3.超声辅助外源酶解：向匀浆液中加入1.5倍体积的水，用450瓦超声波(300纳米)处理5分钟，用5M的HCl或NaOH调pH至7.6，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9×105U/kg)，混匀，在57℃下酶解2小时；将经外源酶酶解后的样品经喷雾干燥处理得干粉。
4.南极磷虾磷脂的提取：向干粉中加入11.5倍体积95％乙醇，混匀，静置66分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入7倍体积的乙醇，混匀，静置55分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过42℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
实施例6：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.6米的250纳米紫外线照射处理20分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶9小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液直接冻存于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将冻存的南极磷虾匀浆融化后，加入3倍体积的水，用800瓦超声波(200纳米)处理5分钟，用6M的HCl或NaOH调pH至8.0，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(10×105U/kg底物)，混匀，在58℃下酶解2小时；将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入15倍体积95％乙醇，混匀，静置90分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入7.5倍体积的乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过45℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的匀浆液运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例7：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.7米的250纳米紫外线照射处理10分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶2小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液直接冻存于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将冻存的南极磷虾匀浆融化后，加入1倍体积的水，用300瓦超声波(300纳米)处理10分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.5，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9×105U/kg底物)，混匀，在59℃下酶解1小时；将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入5倍体积95％乙醇，混匀，静置30分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入2.5倍体积的乙醇，混匀，静置20分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过46℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的匀浆液运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例8：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.8米的250纳米紫外线照射处理10～30分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶6小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液直接冻存于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将冻存的南极磷虾匀浆融化后，加入2倍体积的水，用550瓦超声波(400纳米)处理15分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.75，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9.5×105U/kg底物)，混匀，在60℃下酶解3小时；将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入10倍体积95％乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入5倍体积的乙醇，混匀，静置40分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过48℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的匀浆液运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例9：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.9米的250纳米紫外线照射处理10～30分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶2～10小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液直接冻存于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将冻存的南极磷虾匀浆融化后，加入1.5倍体积的水，用700瓦超声波(400纳米)处理20分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.5～8.0，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9～10×105U/kg底物)，55.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入10倍体积95％乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；液相A经过52℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的匀浆液运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例10：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.5米的250纳米紫外线照射处理25分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶8.5小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液直接冻存于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将冻存的南极磷虾匀浆融化后，加入2.5倍体积的水，用650瓦超声波(300纳米)处理5分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.9，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(10×105U/kg底物)，混匀，在62℃下酶解4小时；将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入12.5倍体积95％乙醇，混匀，静置75分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入6.5倍体积的乙醇，混匀，静置45分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过55℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的匀浆液运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例11：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率35瓦、距离0.6米的300纳米紫外线照射处理30分钟，将处理完的匀浆液在环境温度下自溶5小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液经喷雾干燥后得干粉C后于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将南极磷虾干粉溶解于12倍体积的水，混匀，用800瓦超声波(200纳米)处理5分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至8.0，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(10×105U/kg底物)，混匀，在63℃下酶解3小时。将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入15倍体积95％乙醇，混匀，静置90分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入7.5倍体积的乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过56℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的干粉运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例12：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率25瓦、距离0.8米的300纳米紫外线照射处理15分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶6小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液经喷雾干燥后得干粉C后于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将南极磷虾干粉溶解于7倍体积的水，混匀，用300瓦超声波(300纳米)处理10分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.5，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9×105U/kg底物)，混匀，在64℃下酶解3小时。将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入5倍体积95％乙醇，混匀，静置30分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入2.5倍体积的乙醇，混匀，静置20分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过57℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的干粉运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例13：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.5米的300纳米紫外线照射处理28分钟，将处理完的匀浆液置于捕捞环境温度下自溶7小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液经喷雾干燥后得干粉C后于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将南极磷虾干粉溶解于7.6倍体积的水，混匀，用600瓦超声波(400纳米)处理15分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.5～8.0，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9～10×105U/kg底物)，混匀，在60℃下酶解1小时。将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入13.5倍体积95％乙醇，混匀，静置76分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；液相A经过58℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的干粉运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例14：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.5米的300纳米紫外线照射处理20分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶6小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液经喷雾干燥后得干粉C后于-15至-25℃保存。
4.超声辅助外源酶解：将南极磷虾干粉溶解于9.5倍体积的水，混匀，用600瓦超声波(400纳米)处理20分钟，用1M的HCl或NaOH调pH至7.75，向匀浆液中加入碱性蛋白酶(9.5×105U/kg底物)，混匀，在60℃下酶解1小时。将经外源酶酶解后样品经喷雾干燥处理得干粉。
5.南极磷虾磷脂的提取：向南极磷虾干粉中加入10倍体积95％乙醇，混匀，静置60分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相A和沉淀A；向沉淀A中加入5倍体积的乙醇，混匀，静置40分钟，用沉降离心机离心分离，得上层液相B和沉淀B；混合液相A和液相B，经过59℃减压浓缩除去乙醇，即得南极磷虾磷脂，回收的乙醇可重复利用。
优选方式下，上述步骤1～3在捕捞船上完成，其优势在于利用了鲜活南极磷虾自溶能力强的特点，增加结构蛋白的自身溶解，提高磷脂得率。后续步骤可以将冻存的干粉运回岸边完成，也可根据需要在船上操作。
实施例15：一种南极磷虾磷脂的制备方法包括如下步骤：
1原料及处理：将捕捞的鲜活南极磷虾沥干后直接匀浆；
2.低温自溶：将南极磷虾匀浆液用功率40瓦、距离0.5米的300纳米紫外线照射处理25分钟，将处理完的匀浆液在捕捞环境温度下自溶8小时；
3.将经自溶处理后的南极磷虾匀浆液经喷雾干燥后得干粉C后于-15至-25℃保存。
Claims (7)
1.一种南极磷虾磷脂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、原料处理：将捕捞的南极磷虾沥干后匀浆，获得匀浆液；
S2、低温自溶：用功率20～40瓦、波长200～300纳米的紫外线距离0.5～1米照射所述匀浆液10～30分钟；之后在0～4℃下自溶2～10小时；
S3、超声辅助外源酶解，包括如下分步：
S31、向所述匀浆液中加入1～3倍体积的水，用300～800瓦、波长200～400纳米的超声波处理5～20分钟，调节所述匀浆液的pH值至7.5～8.0，向所述匀浆液中加入9～10×105U/kg底物的碱性蛋白酶，在55～65℃下酶解1～4小时获得酶解液；
S32、将所述酶解液经喷雾干燥后得干粉；
S4、南极磷虾磷脂的提取：向所述干粉中加入5～15倍体积90％乙醇，混匀，静置30～90分钟，离心分离，得第一次上层液相和第一次沉淀；所述第一次液相除去乙醇获得南极磷虾磷脂。
2.根据权利要求1所述南极磷虾磷脂的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述碱性蛋白酶为枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶。
3.根据权利要求2所述南极磷虾油的制备方法，其特征在于，步骤S3中调节所述匀浆液的PH值，选用浓度为1～6M的HCl或NaOH。
4.根据权利要求2所述南极磷虾磷脂的制备方法，其特征在于，
在步骤S4中，在获得所述第一次沉淀后，首先向所述第一次沉淀加入2.5～7.5倍体积的乙醇，混匀，静置20～60分钟，离心分离，得第二次上层液相和第二次沉淀；混合所述第一次液相和所述第二次液相，除去乙醇获得南极磷虾磷脂。
5.根据权利要求1～4任一所述南极磷虾磷脂的制备方法，其特征在于，步骤S5中除去乙醇的方法为：经40～60℃下减压浓缩除去乙醇，同时回收乙醇。
6.根据权利要求5所述南极磷虾磷脂的制备方法，其特征在于，步骤S1和S2在捕捞船上进行操作；且在所述步骤S2与S3之间，还包括如下在捕捞船上的操作：将所述匀浆液直接冻存；相应所述步骤S3首先将所述冻存的匀浆液融化，制回匀浆液状态。
7.根据权利要求5所述南极磷虾磷脂的制备方法，其特征在于，步骤S1和S2在捕捞船上进行操作；且在所述步骤S2与S3之间，还包括如下在捕捞船上的操作：将所述匀浆经喷雾干燥后得干粉保存；相应所述步骤S3首先将所述干粉溶解于7～12倍体积水中制回匀浆液状态。
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