CN102548987B

CN102548987B - 作为激酶抑制剂的氟取代化合物及其使用方法

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Publication number: CN102548987B
Application number: CN201080032019.4A
Authority: CN
Inventors: 张大为
Original assignee: MEDOLUTION Ltd
Current assignee: MEDOLUTION Ltd
Priority date: 2009-07-14
Filing date: 2010-07-13
Publication date: 2014-04-16
Anticipated expiration: 2030-07-13
Also published as: WO2011008788A1; CN102548987A

Abstract

本发明提供具有激酶抑制剂活性的式I的新化合物及其药学可接受的盐和溶剂合物。本发明还提供包含其的药物组合物以及治疗和预防作为一种或多种激酶抑制剂的适应症的Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R介导的病症的方法，所述病症包括肿瘤，例如慢性髓性白血病或胃肠道间质瘤。本发明还提供制备包括其盐和溶剂合物在内的式I化合物的方法，以及包含其的药物组合物。

Description

作为激酶抑制剂的氟取代化合物及其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2009年7月14日提交的第61/270,786号美国临时申请的优先权，其援引加入本文。

发明领域

本发明一般涉及药物领域，更具体地，涉及治疗多种肿瘤疾病的药学活性化合物、药物组合物及其使用方法。本发明还涉及用于制备这样的化合物的中间体和方法。

发明背景

蛋白激酶代表了催化靶蛋白质底物的磷酸化的一大酶家族。磷酸化通常是磷酸基团从ATP到蛋白质底物的转移反应。磷酸基团与蛋白质底物的通常的连接点包括例如酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基。例如，蛋白质酪氨酸激酶(PTK)是催化细胞蛋白质中的特定酪氨酸残基的磷酸化的酶。蛋白质激酶家族中的激酶的实例非限制性地包括Abl1(v-Abl Abelson鼠白血病病毒致癌基因同源体1)、Akt、Bcr-Abl1、Blk、Brk、Btk、c-Kit、c-Met、c-Src、c-Fms、CDK1-10、cRaf1、CSF1R、CSK、EGFR、ErbB2、ErbB3、ErbB4、Erk、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、FGFR5、Flt-1、Fps、Frk、Jak、KDR、MEK、PDGFR、PIK、PKC、PYK2、Ros、Tie、Tie2和Zap70。由于PTK在多种细胞过程中具有活性，它们已成为重要的治疗靶点。

在慢性髓性白血病(CML)中，费城染色体产生被称为Bcr-Abl蛋白质的Abl与Bcr的融合蛋白(断点簇区域)。该Bcr-Abl蛋白质的Abl-部分成为组成性活性PTK。该失调的PTK与多个细胞信号途径相互作用并导致细胞的转化和增殖失控(deregulated proliferation)[T.G.Lugo等人，Science 247，1079-1082(1990)]。

在另一实例中，胃肠道间质瘤(GIST)是由于被称为c-kit的基因的突变而产生的，所述c-kit编码被称为Scf(干细胞因子)的生长因子的跨膜受体。突变通常在作为激活其它酶的PTK的细胞内部分发生。突变使得c-Kit功能不依赖于Scf的激活，导致高细胞分裂速率并可能导致基因组不稳定性。

PTK的活性位点各自具有ATP的结合位点。可通过设计用于特异性地配合及占据所述活性位点的小分子治疗剂抑制各PTK，由此调节蛋白质的酶活性。例如，美国专利5,543,520和5,521,184记载了多种PTK抑制剂，其被研发用于治疗不同类型的临床病症。因此，期望鉴定靶向一种或多种PTK且可用于治疗由特定PTK的过度激活引起的疾病的其它化合物。

发明概述

一方面，本发明提供的化合物(包括其立体异构体、互变异构体、溶剂合物、药学可接受的盐、衍生物或前药)由通式I所定义，

其中：

R¹是-NHX；

R²是-NHC(O)R⁴；

X是任选地被一个或多个取代基R⁵独立地取代的吡啶或嘧啶环；

R⁴是任选地被一个或多个取代基R⁶取代的苯环；

R⁵是H、卤素、卤代烷基、CN、NO₂、NH₂、OH、甲基、甲氧基、乙基、乙氧基、丙基、丙氧基、异丙基、丁基、异丁基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、异丙基氨基、氧代、乙酰基、苄基、环丙基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基，或者R⁵是任选地被一个或多个取代基R⁷独立地取代的吡啶或嘧啶环；

R⁶是H、卤素、卤代烷基、CN、NO₂、C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基或C_4-10-环烯基，所述C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基和C_4-10-环烯基各自任选地包含1-4个选自N、O和S的杂原子，并且任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基是R⁷、R⁸、NR⁸R⁹、OR⁸、SR⁸、C(O)R⁸、OC(O)R⁸、C(O)OR⁸、C(O)NR⁸R⁹、NR⁸C(O)R⁹、NR⁸C(O)NR⁸R⁹、NR⁸(CO)OR⁹、OC(O)NR⁸R⁹、S(O)₂R⁸、S(O)₂NR⁸R⁹、NR⁸S(O)₂NR⁸R⁹或NR⁸S(O)₂R⁹；

R⁷是H、卤素、卤代烷基、CN、NO₂、NH₂、OH、甲基、甲氧基、乙基、乙氧基、丙基、丙氧基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、异丙基氨基、氧代、乙酰基、苄基、环丙基或者部分或完全饱和的或不饱和的3-8元单环体系或6-12元双环体系，由碳原子形成的所述环体系若为单环则任选地包含1-3个杂原子，或者若为双环则任选地包含1-6个杂原子，所述杂原子选自O、N或S，其中所述环体系任选地被1-5个取代基独立地取代，所述取代基是卤素、卤代烷基、CN、NO₂、NH₂、OH、甲基、甲氧基、乙基、乙氧基、丙基、丙氧基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、异丙基氨基、苄基或苯基；

R⁸和R⁹独立地选自H、C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基、C_4-10-环烯基、C_1-10-烷基氨基、C_1-10-二烷基氨基、C_1-10-烷氧基或C_1-10-烷硫基，所述C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基、C_4-10-环烯基、C_1-10-烷基氨基、C_1-10-二烷基氨基、C_1-10-烷氧基和C_1-10-烷硫基各自任选地被1-5个取代基R⁷独立地取代；

或者，R⁸和R⁹与它们所连接的原子一起形成任选地包含1-3个选自O、N或S的杂原子的部分或完全饱和的或不饱和的5-6元碳原子环，并且所述环任选地被1-5个取代基R⁷独立地取代。

另一方面，本发明提供包含式I化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。另一方面，本文提供调节酪氨酸激酶信号转导的方法，其包括向哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。又一方面，本文提供治疗或预防Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R介导的病症的方法，所述方法包括向哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。又一方面，本文提供治疗肿瘤的方法，其包括向有此需要的哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。

本发明还提供制备式I化合物的方法，以及用于这样的操作的中间体。

本发明提供的化合物能够调节诸如Abl、c-Kit或PDGF-R等酪氨酸激酶。

发明详述

在本发明一实施方案中，所述化合物(包括其立体异构体、互变异构体、溶剂合物、药学可接受的盐、衍生物或前药)由通式I所定义：

其中：

R¹是-NHX；

R²是-NHC(O)R⁴；

R⁴是任选地被一个或多个取代基R⁶取代的苯环；

R⁶是H、卤素、卤代烷基、CN、NO₂、C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基或C_4-10-环烯基，所述C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基和C_4-10-环烯基各自任选地包含1-4个选自N、O和S的杂原子，并且任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基是R⁷、R⁸、NR⁸R⁹、OR⁸、SR⁸、C(O)R⁸、OC(O)R⁸、C(O)OR⁸、C(O)NR⁸R⁹、NR⁸C(O)R⁹、NR⁸C(O)NR⁸R⁹、NR⁸(COOR⁹)、OC(O)NR⁸R⁹、S(O)₂R⁸、S(O)₂NR⁸R⁹、NR⁸S(O)₂NR⁸R⁹或NR⁸S(O)₂R⁹；

R⁷是H、卤素、卤代烷基、CN、NO₂、NH₂、OH、甲基、甲氧基、乙基、乙氧基、丙基、丙氧基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、异丙基氨基、氧代、乙酰基、苄基、环丙基或者部分或完全饱和的或不饱和的3-8元单环体系或6-12元二环体系，由碳原子形成的所述环体系若为单环则任选地包含1-3个杂原子，或者若为双环则任选地包含1-6个杂原子，所述杂原子选自O、N或S，其中所述环体系任选地被1-5个取代基独立地取代，所述取代基是卤素、卤代烷基、CN、NO₂、NH₂、OH、甲基、甲氧基、乙基、乙氧基、丙基、丙氧基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、异丙基氨基、苄基或苯基；

R⁸和R⁹各自独立地是H、C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基、C_4-10-环烯基、C_1-10-烷基氨基-、C_1-10-二烷基氨基-、C_1-10-烷氧基或C_1-10-硫烷基，所述C_1-10-烷基、C_2-10-烯基、C_2-10-炔基、C_3-10-环烷基、C_4-10-环烯基、C_1-10-烷基氨基、C_1-10-二烷基氨基、C_1-10-烷氧基和C_1-10-烷硫基各自任选地被1-5个取代基R⁷独立地取代；

在某些实施方案中，提供式I化合物，其中X选自：4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基、4，5′-联嘧啶-2-基、2，3′-联吡啶-6-基、3，4′-联吡啶-2′-基、4-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基和6-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基。在一些实施方案中，X是4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基。在其它实施方案中，X是4，5′-联嘧啶-2-基。在一些实施方案中，R⁴是任选地被一个或多个取代基R⁶取代的苯基。在其它实施方案中，R⁶是F、Cl或CF₃。在一些实施方案中，R⁶是(4-甲基哌嗪-1-基)甲基、(4-乙基哌嗪-1-基)甲基、哌嗪-1-基甲基和4-甲基-1H-咪唑-1-基。

在其它实施方案中，所述式I化合物是药学可接受的盐的形式。在某些实施方案中，所述式I化合物是盐酸盐、苯磺酸盐或甲磺酸盐。在一些实施方案中，所述式I化合物是溶剂合物的形式。在其它实施方案中，所述式I化合物是代谢物的形式。在其它实施方案中，所述式I化合物是前药的形式。

在某些实施方案中，提供非限制性地选自以下的化合物及其药学可接受的盐、溶剂合物、前药或代谢物：N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、3-氯-4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)苯甲酰胺、3-氯-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺、N-(3-(4，5′-联嘧啶-2-基氨基)-5-氟-4-甲基苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、N-(3-(2，3′-联吡啶-6-基氨基)-5-氟-4-甲基苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、N-(3-(3，4′-联吡啶-2′-基氨基)-5-氟-4-甲基苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、N-(3-氟-4-甲基-5-(6-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(嘧啶-5-基)吡啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-(哌嗪-1-基甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺、N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺和4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)苯甲酰胺。在一些实施方案中，所选择的化合物是药学可接受的盐的形式。在某些实施方案中，所选择的化合物是盐酸盐、苯磺酸盐或甲磺酸盐。在一些实施方案中，所选择的化合物是溶剂合物的形式。在其它实施方案中，所选择的化合物是代谢物的形式。在其它实施方案中，所选择的化合物是前药的形式。

在一些实施方案中，提供包含式I化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。在某些实施方案中，所述组合物用于治疗由蛋白激酶调节的疾病。在一些实施方案中，所述药物组合物还包含抗肿瘤剂、免疫抑制剂、免疫刺激剂或它们的组合。在其它实施方案中，所述药物组合物适于口服给药、肠胃外给药或静脉内给药。

在一些实施方案中，本发明提供调节酪氨酸激酶信号转导的方法，其包括向哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。

在其它实施方案中，本文提供治疗或预防Abl、c-Kit或PDGF-R介导的病症的方法，所述方法包括向哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。

在其它实施方案中，本文提供治疗肿瘤的方法，其包括向有此需要的哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。在某些实施方案中，所述肿瘤选自白血病、结肠癌、肾细胞癌、胃肠间质癌、实体瘤癌、多发性骨髓瘤、乳腺癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、肝细胞癌、甲状腺癌、膀胱癌、结直肠癌和前列腺癌。在某些实施方案中，所述肿瘤是慢性髓性白血病或胃肠间质癌。在一些实施方案中，所述方法还包括给药一种或多种抗癌剂。

在其它实施方案中，提供治疗或预防过度增殖性病症的方法，其包括向哺乳动物个体给药治疗有效量的式I化合物。

以下定义应有助于理解本文所描述的本发明。

术语“包含”是开放式的，包含所指明的一种或多种组分，但是不排除其它成份。

当单独使用或组合使用时，术语“卤素”或“卤代”表示诸如氟、氯、溴或碘原子的卤素。

术语“烷基”是指仅具有碳-碳单键的直链或支链或环链烃基团。代表性实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、戊基、环戊基、己基和环己基，它们均可任选地被取代。烷基是C₁-C₁₀烷基。

当单独使用或组合使用时，术语“烯基”包括在具有2至10个碳原子的基团中具有至少一个碳-碳双键的直链或支链基团。烯基的实例非限制性地包括乙烯基、丙烯基、烯丙基、丙烯基。如本领域技术人员所理解的那样，术语“烯基”和“低级烯基”包括具有“顺式”和“反式”取向(orientation)或者“E”和“Z”取向的基团。

当单独使用或组合使用时，术语“炔基”表示具有至少一个碳-碳三键且具有2至10个碳原子的直链、环状或支链基团。这样的基团的实例非限制性地包括乙炔基、丙炔基(炔丙基)、丁炔基等。

术语“芳基”是指这样的芳族基团，其具有5-14个环原子和至少一个具有共轭π电子体系的环，且包括碳环芳基、杂环芳基、双环芳基(例如萘基)和联芳基(例如联苯基)，所有这些基团均可任选地被取代。

本文使用的术语“卤代烷基”是指一个或多个氢原子已被卤素替代的低级烷基，包括但不限于三氟甲基、三氯甲基、二氟甲基、二氯甲基、氟甲基、氯甲基、氯乙基、2，2-二氯乙基等。

术语“杂芳基”是具有5-14个环原子(其中1-4个杂原子是芳环中的环原子，而其余的环原子是碳原子)的基团。适合的杂原子包括氧、硫、氮和硒。适合的杂芳基包括呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-低级烷基吡咯基、吡啶基N-氧化物、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基(benzothiophenyl)等，所有这些基团均任选地被取代。

本文中与有机基团或化合物有关的术语“低级”分别将这样的基团或化合物限定为含有至多10个碳原子(包括端点)。本发明的一方面提供含有至多6个碳原子(包括端点)的有机基团或化合物。本发明的另一方面提供含有1-4个碳原子的有机基团或化合物。这样的基团可以是直链的、支链的或环状的。

术语“氧代”是指当与碳连接时形成羰基的氧原子。

当提及式I化合物时所使用的术语“药学可接受的”意图表示可安全地向个体给药的所述化合物的形式。例如，由诸如美国食品药品管理局(FDA)的管理当局或管理机构批准的通过口服摄取或任何其它给药途径用于哺乳动物的式I的化合物的游离碱、盐形式、溶剂合物、水合物、前药或衍生物形式是药学可接受的。

式I化合物包括所述游离碱化合物的药学可接受的盐形式。术语“药学可接受的盐”包括经管理机构批准的常用于形成碱金属盐和形成游离酸或游离碱的加成盐的盐。盐是通过离子缔合、电荷-电荷相互作用、共价键合、络合、配位等作用形成的。只要盐是药学可接受的，则其性质不是关键性的。

在一些实施方案中，通过使式I化合物与酸反应来获得药学可接受的盐。还通过使式I化合物与碱反应以形成盐来获得药学可接受的盐。

在一些实施方案中，以药学可接受的盐的形式形成和/或使用本文所述的化合物。药学可接受的盐的类型包括但不限于：(1)通过使所述化合物的游离碱形式与药学可接受的无机酸或者与有机酸反应形成的酸加成盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸，所述有机酸例如乙酸、丙酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、桂皮酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸、丁酸、苯乙酸、苯基丁酸、丙戊酸等；(2)当存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子置换时形成的盐，所述金属离子例如碱金属离子(例如锂、钠、钾)、碱土金属离子(例如镁或钙)或铝离子。在一些情况下，本文所述的化合物与源自碱性含氮基团的有机碱配位，所述有机碱例如但不限于乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺、二环己基胺、三(羟基甲基)甲胺。在其它情况下，本文所述的化合物与氨基酸(例如但不限于精氨酸、赖氨酸等)形成盐。用于与包含酸性质子的化合物形成盐的可接受的无机碱包括但不限于氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化钠等。

在某些实施方案中，式I化合物是盐酸盐、苯磺酸盐或甲磺酸盐。

这样的盐的其它实例可参见Berge等人，J.Pharm.Sci.，66，1-19(1977)。

术语“衍生物”在本文中被广义地解释，并且意图包括本发明化合物的任意盐、本发明化合物的任意酯，或者向患者给药后能够(直接或间接)提供以调节激酶的能力为特征的本发明化合物或其代谢物或残基的任意其它化合物。

本文使用的术语“前药”表示向个体或患者给药后能够通过一个或多个自发化学反应、一个或多个酶催化化学反应和/或一个或多个代谢化学反应或者它们的组合(直接或间接)提供本发明化合物(即活性成分)的化合物。本文使用的“药学可接受的前药”表示前药，其是药学可接受的。前药在R.B.Silverman，The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action，Academic Press，San Diego(1992)第8章：Prodrugs and Drug delivery Systems第352-401页；H.Bundgaard，“Design of Prodrugs”，Elsevier Science，Amsterdam(1985)；E.B.Roche，Design of Biopharmaceutical Propertiesthrough Prodrugs and Analogs，American Pharmaceutical Association，Washington(1977)；和R.L.Juliano，Drug Delivery Systems，Oxford Univ.Press，Oxford(1980)中有述。

在一些实施方案中，通过以药物组合物形式给药一种或多种式I化合物来使用所述化合物治疗个体。为实现这一目的，在一实施方案中，将所述一种或多种化合物与一种或多种包括载体、稀释剂或辅剂在内的药学可接受的赋形剂混合以形成适合的组合物，本文对其进行了更详细地描述。

本文使用的术语“赋形剂”表示为了制剂和/或给药目的，除活性药物成分(API)之外通常包含的任意药学可接受的添加剂、载体、辅剂或其它适合的成分。“稀释剂”和“辅剂”如下文所定义。

本文使用的术语“稀释剂”是指当加入到制剂中时使得该制剂更稀或浓度更低并且还可改善可制造性(manufacturability)的试剂或试剂混合物。本发明的稀释剂还可具有其它功能。例如，稀释剂还可作为甜味剂。代表性的稀释剂包括但不限于蔗糖、山梨醇、木糖醇、葡萄糖、果糖、麦芽糖醇(malitol)、糖钾(sugar potassium)、阿司帕坦、糖精、糖精钠及它们的混合物。

术语“辅剂”是指促进或增加主要药物的作用或者以增强主要药物的效应的方式影响其吸收、作用机理、代谢或排泄的试剂。

本文使用的术语“治疗”和“疗法”指治疗，非限制性地包括治愈性治疗、预防性(prophylactic)治疗和防止性(preventive)治疗。预防性治疗一般包括在个体中完全防止病症发作或延迟处于临床上明显阶段之前的病症的发作。

短语“有效量”意图定量每一种药剂的量，其会在用每一种药剂本身治疗的过程中实现改善病症严重性和发病率的目的，同时避免通常与替代疗法相关的不良副作用。在一实施方案中，以单剂量形式或多剂量形式给药所述有效量。

LC-MS方法

在30℃下，在具有Agilent Technologies XDB-C₈(3.5μ)反相柱(4.6×75mm)的Agilent 1100型LC-MSD系统上运行样品。流速是恒定的，并且为约0.75mL/min至约1.0mL/min。

所用的流动相为溶剂A(H₂O/0.1％HOAc)和溶剂B(ACN/0.1％HOAc)的混合物，9分钟时间的梯度为10％至90％的溶剂B。在该梯度后，是0.5分钟的回到10％溶剂B的时间和2.5分钟的10％溶剂B的柱的再平衡(冲洗)。

质子NMR谱

除非另外指明，在Varian系列Mercury 300MHz仪器或Bruker系列400MHz仪器上运行所有的¹H NMR谱。在如此表征的情况下，将所有观察到的质子报告为从所指明的适当溶剂中的四甲基硅烷(TMS)或其它内标向低场的位移，单位为百万分之…(ppm)。

本文所述的所有合成操作均可在已知的反应条件下，有利地在本文所述的条件下，在不存在或(通常)存在溶剂或稀释剂的情况下进行。所述溶剂应当对所用的原料和其它试剂是惰性的，并且应当能够溶解它们。溶剂应当能够在存在或不存在催化剂、冷凝剂或中和剂的情况下部分或完全地溶解反应物。溶剂容许和/或影响所述反应的进程或速率的能力一般取决于所述一种或多种溶剂的类型和性质，包括温度、压力、气氛条件(例如在氩气或氮气的惰性气氛下)和浓度在内的反应条件以及反应物本身。

本发明还包括“中间体”化合物，其包括在获得最终期望的化合物之前由所述合成操作制备的分离的或未分离的结构。由从过渡性原料进行的步骤产生的结构、在任何阶段偏离本文所述的一种或多种方法而产生的结构以及在所述反应条件下形成原料的结构均是本发明所包括的“中间体”。另外，通过使用反应性的衍生物或盐的形式的原料所产生的结构，或由通过本发明方法可获得的化合物产生的结构以及原位处理本发明化合物而产生的结构也在本发明范围内。

新的原料和/或中间体以及它们的制备方法同样也是本发明的主题。在所选择的实施方案中，使用这样的原料并选择反应条件以获得一种或多种期望的化合物。

本发明的原料是已知的、可商购的或者可通过本领域已知的方法或与其类似的方法合成。许多原料可按照已知的方法制备，特别是可使用路线和实施例中描述的方法制备。在合成原料的过程中，在必要时在一些情况下用适合的保护基保护官能团。

可采用包括使用保护基的方法。具体而言，如果在制备本发明化合物的过程中因为不意图使一个或多个官能团(例如羧基、羟基、氨基或巯基)参与特定反应或化学转化而保护或需要保护它们，则可使用多种已知的常规保护基。例如，可使用在天然化合物和合成化合物(包括具有多个反应中心、手性中心和可能易受反应试剂和/或条件影响的其它位点的肽类、核酸类、它们的衍生物和糖类)的合成中常用的保护基。

所述保护基可已存在于前体中，并且应保护有关官能团以免不期望的二次反应，例如酰化、醚化、酯化、氧化、溶剂解及类似反应。保护基的特征是它们容易地(即没有不期望的二次反应)使自己在类似于生理条件的条件下被脱除，所述脱除通常是通过溶剂解、还原、光解或其它脱除方法(例如通过酶活性)实现的。还应理解，所述保护基不应存在于终产物中。本领域技术人员了解或者能够容易地确定哪些保护基适合于本文所述的反应。

保护基对官能团的保护、保护基本身以及它们的脱除反应(通常被称为“脱保护”)在例如标准参考文献(例如J.F.W.McOmie，Protective Groups inOrganic Chemistry，Plenum Press，London and New York(1973；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wileyand Sons(1999)；E.Gross和J.Meienhofer The Peptides，第3卷，AcademicPress，London and New York(1981)；H.Weyl，Methoden der OrganischenChemie(Methods of Organic Chemistry)，第4版，第15/1卷，Georg ThiemeVerlag，Stuttgart(1974)；H.-D.Jakubke和H.Jescheit，，Peptide，Proteine(Amino Acids，Peptides，Proteins)，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach和Basel(1982)；以及Jochen Lehmann，Chemie derKohlenhydrate：Monosaccharide und Derivate(Chemistry of Carbohydrates：Monosaccharides and Derivatives)，Georg Thieme Verlag，Stuttgart(1974))中有述。

合成式I化合物及它们的合成前体的其它方法(包括本文未明确显示的途径中的哪些方法)在本领域化学技术人员的技能范围内。本文所述的方法还可在本文具体描述的步骤之前或之后另外包括添加或脱除适合的保护基的步骤以最终合成本文的化合物。用于合成本文所述的抑制剂化合物的合成化学转化是本领域已知的，并且包括例如R.Larock，ComprehensiveOrganic Transformations，VCH Publishers(1989)；L.Fieser和M.Fieser，Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1994)；A.Katritzky和A.Pozharski，Handbook of Heterocyclic Chemistry，第2版(2001)和L.Paquette主编，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1995)以及其之后的版次中记载的那些。

可通过如下概述的多种方法，更具体地通过下文实施例中的方法制备本发明化合物。在以下方法描述中，当符号R¹-R⁹和X用于所示化学式时，应理解除非另外指明，它们表示与式I相关的上述那些基团。在本发明所述的路线中所含的所有适用的结构中，LG是离去原子或离去基团，包括卤素原子例如溴原子、碘原子或氯原子，以及磺酰氧基例如烷基磺酰氧基(例如三氟甲基磺酰氧基)和芳基磺酰氧基(例如对甲苯磺酰氧基)；PG是氨基的保护基；Alk是低级烷基、低级烯基或低级炔基；Ar是芳基或杂芳基。

所给出的试剂和条件仅用于示例目的，并且本领域技术人员可使用替代方法。应当理解，以下路线并不对由权利要求所限定的本发明造成限制。在一些情况下，脱保护可能是式I化合物的合成中的最后步骤，并且下文中所述的本发明的方法应理解为延伸至这样的保护基脱除。

因此根据本发明的又一方面，可按照路线1，通过苯胺中间体(1)与苯甲酸中间体(2)的反应制备式I化合物。

路线1

可在羧酸偶联剂的存在下，并任选地在诸如三乙胺(Et₃N)或N，N-二异丙基乙胺(DIEA)的碱的存在下，在诸如N N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙腈(CH₃CN)或四氢呋喃(THF)的溶剂中进行反应。所述羧酸偶联剂可包括常用于对羧酸进行活化和偶联的偶联剂，包括1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)、1-羟基苯并三唑(HOBt)、1-羟基-7-氮杂-苯并三唑(HOAt)、六氟磷酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓(HBTU)、六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓(HATU)和六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷磷鎓(PyBOP)。

苯甲酸中间体(2)的化学式的化合物是已知化合物或者可使用与那些用于制备已知化合物的方法类似的方法进行制备。对于苯甲酸中间体(2)(其中R⁴是4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)的化学式的化合物的详细合成可参见化合物合成部分的实施例18(参看下文)。

可按照路线2，通过还原硝基中间体(3)，还原叠氮化物中间体(4)或者将受保护的苯胺中间体(5)脱保护来制备苯胺中间体(1)。

路线2

可使用常规操作将硝基还原为氨基，所述常规操作例如在金属催化剂例如钯的存在下，在适合的溶剂例如乙醇(EtOH)、甲醇(MeOH)、乙酸乙酯(EtOAc)、四氢呋喃(THF)或它们的混合物中使用催化氢化；或者在升高的温度例如回流温度下，在溶剂例如乙醇中使用诸如连二硫酸钠或硫化钠的还原剂；或者任选地在无机酸(例如盐酸)或盐(例如氯化铵(NH₄Cl))的存在下，在溶剂例如水、乙醇(EtOH)或它们的混合物中使用诸如锌(Zn)或铁(Fe)的还原剂。

可使用常规操作将叠氮基还原为氨基，所述常规操作例如使用如适才对硝基的还原中所述的催化氢化；或者在升高的温度例如回流温度下，在无机盐例如氯化铵(NH₄Cl)的存在下，在溶剂例如水、乙醇(EtOH)或其混合物中使用诸如锌(Zn)或铁(Fe)的还原剂；或者在THF和水的溶剂混合物中使用诸如三苯基膦(PPh₃)的还原剂。

可取决于各具体保护基的性质，通过多种操作(优选地通过溶剂解或还原)，以本领域已知的方式进行受保护氨基的脱保护。优选的氨基保护基是碳酸半酯(semiester)的酰基基团，特别是叔丁氧羰基、乙氧羰基、未取代的或取代的苄氧羰基(例如4-硝基苄氧羰基)以及甲酰基或三苯甲基。

可按照路线3，通过苯胺中间体(6)与杂芳基中间体(7)的反应制备受保护的苯胺中间体(5)。

路线3

路线3中的反应可以是在升高的温度例如回流温度下，视需要在溶剂(例如，酮例如丙酮、醇例如乙醇或2-乙氧基乙醇或者芳族烃例如甲苯)的存在下，任选地在碱(例如，有机胺例如吡啶或三乙胺，或者无机碱例如氢化物(例如氢化钠)、醇盐(例如叔丁醇钾)或碳酸盐(例如碳酸钾))或酸(例如，无机酸例如盐酸)的存在下进行的置换反应。

此外，路线3中的反应可以是按照标准操作[参见例如B.H.Yang等人，J.Organomet.Chem.576，125-146(1999)；J.F.Hartwig等人，J.Org.Chem.64，5575-5580(1999)；J.P.Wolfe等人，J.Org.Chem.65，1158-1174(2003)；M.S.Driver等人，J.Am.Chem.Soc.118，7217-7218(J.Am.Chem.Soc.，1996，118(30)，第7217-7218页(1996)；X.Huang等人，J.Am.Chem.Soc.125，6653-6655(2003)；R.A Altman等人，Nature Protocols 2，2881-2887(2007)]进行的芳基卤化物和芳基磺酸酯与苯胺衍生物的钯催化胺化。

杂芳基中间体(7)是带有离去原子或离去基团(包括卤素原子例如溴原子、碘原子或氯原子，以及磺酰氧基例如烷基磺酰氧基(例如三氟甲基磺酰氧基)和芳基磺酰氧基(例如对甲苯磺酰氧基)的杂芳基化合物。杂芳基中间体(7)的化学式的化合物是已知化合物或者可使用与那些用于制备已知化合物的方法类似的方法进行制备。

可通过路线2中所述的从中间体3-5合成中间体(1)(参看上文)的类似反应制备苯胺中间体(6)。对于苯胺中间体(6)(其中PG是乙氧羰基)的化学式的化合物的详细合成可参见化合物合成部分的实施例10(参看下文)。

在本发明的另一方面，苯甲酰氯中间体(8)可按照路线4与中间体(1)反应以形成式I化合物：

路线4

该反应可在溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、乙腈(CH₃CN)、吡啶或四氢呋喃(THF)中，并且任选地在碱例如三乙胺(Et₃N)或N，N-二异丙基乙胺(DIEA)的存在下进行。终产物可能是式I化合物的盐酸盐。

苯甲酰氯中间体(8)的化学式的化合物是已知化合物或者可使用与那些用于制备已知化合物的方法类似的方法进行制备。例如，可通过中间体(2)与诸如草酰氯或亚硫酰氯的试剂的反应将中间体(2)转化为中间体(8)，所述反应是在溶剂例如二氯甲烷中，任选地在催化量的N，N-二甲基甲酰胺的存在下，在环境温度或在升高的温度例如回流温度下进行的。

在本发明的另一方面，带有离去原子或离去基团的杂芳基中间体(7)可按照路线5与苯胺中间体(9)反应以形成式I化合物：

路线5

路线5中的反应可以是按照路线3中所述的合成受保护的苯胺中间体(5)的标准操作进行的置换反应或者芳基卤化物和芳基磺酸酯与苯胺衍生物的钯催化胺化。

如路线6所示，可通过路线2中所述的从硝基中间体(3)合成苯胺中间体(1)(参看上文)的类似还原，从硝基中间体(10)制备苯胺中间体(9)。

路线6

如路线7所示，可通过路线1和3中所述的从苯胺中间体(1)合成式I(参看上文)的类似偶联反应，从苯胺中间体(11)制备硝基中间体(10)。

路线7

如路线8所示，可通过路线2中所述的从受保护的苯胺中间体(5)合成苯胺中间体(1)(参看上文)的类似脱保护，从受保护的苯胺中间体(12)制备苯胺中间体(11)。

路线8

对于苯胺中间体(11)(其中PG是乙氧羰基)的化学式的化合物的详细合成可参见化合物合成部分的实施例9(参看下文)。

还可通过其它式I化合物的互变制备式I化合物，并且应当理解，本发明延伸至这样的互变方法。因此，例如，可使用采用例如烷基化、芳基化、酰化、硫代酰化(thioacylation)、磺酰化、甲酰化或偶联反应的标准取代方法以在式I化合物中添加新的取代基和/或延伸式I化合物中的已有取代基。或者，可通过例如氧化、还原或断裂反应修饰式I化合物中的已有取代基以产生其它式I化合物。

以下概述可用于修饰式I化合物中已有的R⁵、R⁶、R⁷、R⁸和/或R⁹基团的多个方法。应当理解，仅当适合的官能团存在于式I化合物中时，这些反应中的每一个才是可能的。同样，以下反应中的任意一个均可用于产生被适当取代的中间体(1)-(10)。

因此，例如可通过式I化合物与试剂Alk-LG或Ar-LG(其中Alk是低级烷基；Ar是芳基或杂芳基)的反应来实现所述化合物的烷基化或芳基化。

所述烷基化或芳基化反应可在约0℃至约40℃下，在碱例如无机碱(例如，碳酸盐例如碳酸铯或碳酸钾，醇盐例如叔丁醇钾，或氢化物例如氢化钠)的存在下，在偶极非质子溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺或醚(例如四氢呋喃)中进行。

在该方法的变体中，离去基团LG也可以是式I化合物的一部分，并且在升高的温度例如回流温度下，在溶剂例如醇(例如乙醇)中，用适合的亲核试剂进行反应。

在互变方法的另一一般实例中，可将式I化合物酰化或硫代酰化。可在环境温度下，在碱例如叔胺(例如三乙胺)的存在下，在溶剂例如卤代烃(例如二氯甲烷)或醇(例如甲醇)中与酰卤或酸酐进行反应；或者通过在低温例如约0℃下，在惰性溶剂例如四氢呋喃中与硫代酸酯进行反应。

在互变方法的又一一般实例中，例如可通过式I化合物与混合酸酐HC(O)OC(O)CH₃或与甲酸和乙酸酐的混合物的反应将所述化合物甲酰化。

在互变方法的又一一般实例中，例如可通过在环境温度下，在碱例如无机碱(例如氢化钠)的存在下，在偶极非质子溶剂例如N，N-二甲基甲酰胺中使式I化合物与试剂Alk-S(O)₂-LG或Ar-S(O)₂-LG反应将所述化合物磺化。

在又一实例中，可通过在膦例如三苯基膦和活化剂(例如偶氮二甲酸二乙酯、偶氮二甲酸二异丙酯或偶氮二甲酸二甲酯)的存在下，在溶剂例如四氢呋喃中与试剂AlkOH或ArOH偶联，将式I化合物中的醇-OH基团转化成相应的-OAlk或-OAr基团。

在互变反应的另一实例中，可在约环境温度下，在酸例如乙酸的存在下，在溶剂例如二氯甲烷中使用采用醛和硼氢化物(例如三乙酰氧基硼氢化钠或硼氢化钠)的还原烷基化方法将式I的胺烷基化。

在又一实例中，可在升高的温度例如回流温度下，在有机碱例如吡啶的存在下，通过相应的胺与磺酰胺的反应获得式I化合物中的氨基磺酰氨基(-NHSO₂NH₂)。

本公开所包括的取代基和变量的组合仅是那些导致形成稳定化合物的取代基和变量。

在一些实施方案中，还以多种互变异构形式表示本发明化合物。本发明明确包括本文所述化合物的所有互变异构形式。

在一实施方案中，所述化合物还以顺式或反式或者E-或Z-双键异构形式存在。这样的化合物的所有这样的异构形式均明确包括在本发明中。本发明明确包括本文所述化合物的所有晶形。

任选地，通过附加适合的官能团修饰本发明化合物以增强选择性生物学性质。这样的修饰是本领域已知的，其增加向特定的生物区室(例如血液、淋巴系统、中枢神经系统)的生物渗透性、增加口服利用度、增加溶解度以使得能够注射给药、改变代谢和改变排泄速率。举例而言，修饰本发明化合物以引入疏水基团或“油脂性”基团从而尝试增强所述化合物通过疏水膜例如细胞壁。

这些详细描述仅用于示例目的而并非意图作为对本发明范围的限制。

尽管本发明化合物(式I)的药理性质随结构变化而改变，但一般而言，在一实施方案中，式I化合物所具有的活性在体外和体内均得到证明。具体而言，在一些实施方案中，本发明化合物的药理学性质通过许多体外药理学测定得到证实。用本发明化合物进行以下示例性药理学测定。发现本发明化合物在小于25μM的剂量下抑制多种激酶(非限制性地包括Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R激酶)活性。

化合物合成

实施例1-14(方法A)

实施例1.4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸甲酯的制备

向250-mL三颈圆底烧瓶中置入4-甲酰基苯甲酸甲酯(4.92g，30.0mmol，1.00当量)在CH₃CN(100mL)中的溶液、1-甲基哌嗪(3.6mL，1.30当量)和CF₃COOH(2.5mL，1.10当量)。将所得的溶液在室温下搅拌15分钟，然后分几批加入NaBH₃CN(3.78g，60.0mmol，2.00当量)。将所得的溶液在室温下搅拌过夜。通过加入10mL水终止反应。将所得的混合物真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用二氯甲烷/甲醇(80∶1)洗脱。获得4g作为白色固体的4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸甲酯。

实施例2.4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸的制备

向100-mL圆底烧瓶中置入4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸甲酯(2g，8.06mmol，1.00当量)在CH₃OH(25mL)中的溶液和HCl(25％，11mL，4.00当量)。将所得的溶液在60℃下搅拌5小时。将所得的混合物冷却并真空浓缩。将粗产物通过从CH₃OH中重结晶进行纯化。获得1.7g作为白色固体的4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸。

实施例3.4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸的制备

向2000-mL三颈圆底烧瓶中置入4-甲基-3-硝基苯甲酸(100g，552mmol，1.00当量)在H₂SO₄(800mL，98％)中的溶液，然后在100℃和搅拌下滴加HNO₃(33g，498mmol，0.90当量，95％)。将所得的溶液在100℃下搅拌2小时。然后将反应物冷却，并通过加入2000mL冰水终止其反应。收集析出的固体，用2×200mL冰水洗涤并干燥。获得100g作为黄色固体的4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸。

实施例5.4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸甲酯的制备

向500-mL三颈圆底烧瓶中置入4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸(18.0g，79.6mmol，1.00当量)在DMF(250mL)中的溶液、CH₃I(23.3g，165mmol，2.00当量)和K₂CO₃(30.0g，217mmol，2.73当量)。将所得的溶液在油浴中在50℃下搅拌18小时。将反应混合物冷却并用500mL乙酸乙酯稀释。将所得的溶液用2×250mL H₂O洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶10)洗脱。获得14g(79％)作为浅红色固体的4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸甲酯。

实施例6.4-甲基-3，5-二硝基苯甲酰肼的制备

向500-mL三颈圆底烧瓶中置入4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸甲酯(23.0g，102mmol，1.00当量)在CH₃OH(200mL)中的溶液和肼(85％，5mL)。将所得的溶液在室温下搅拌24小时。收集析出的固体，用1×50mL MeOH洗涤并干燥。获得20g作为黄色固体的4-甲基-3，5-二硝基苯甲酰肼。

实施例7.N-(4-甲基-3，5-二硝基苯基)氨基甲酸乙酯的制备

向500-mL三颈圆底烧瓶中置入4-甲基-3，5-二硝基苯甲酰肼(20.0g，83.3mmol，1.00当量)在AcOH/MeOH(100/150mL)中的溶液，然后在0℃和搅拌下滴加NaNO₂(6.0g)在H₂O(30mL)中的溶液。在0℃下搅拌1小时，然后将所得的溶液用甲苯萃取三次。合并有机层，用无水硫酸镁干燥并真空浓缩。将残余物溶于EtOH(200mL)中，并在油浴中加热至回流，持续24小时。将反应混合物冷却并真空浓缩。将残余物溶于300mL乙酸乙酯中，用1×150mL H₂O洗涤。收集有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上并用乙酸乙酯/石油醚(1∶15)洗脱。获得15g(64％)作为黄色固体的N-(4-甲基-3，5-二硝基苯基)氨基甲酸乙酯。

实施例8.N-(3-氨基-4-甲基-5-硝基苯基)氨基甲酸乙酯的制备

向250-mL三颈圆底烧瓶中置入N-(4-甲基-3，5-二硝基苯基)氨基甲酸乙酯(12.0g，44.6mmol，1.00当量)在EtOH(100mL)中的溶液。然后加入Na₂S·9H₂O(20.0g，83.3mmol，1.87当量)在H₂O(50mL)中的溶液。将所得的溶液在室温下搅拌18小时。将所得的溶液用300mL乙酸乙酯萃取。将有机层用2×200mL H₂O洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶5)洗脱。获得8.5g作为黄色固体的N-(3-氨基-4-甲基-5-硝基苯基)氨基甲酸乙酯。

实施例9.N-(3-氟-4-甲基-5-硝基苯基)氨基甲酸乙酯的制备

向100ml三颈圆底烧瓶中置入N-(3-氨基-4-甲基-5-硝基苯基)氨基甲酸乙酯(8.50g，35.6mmol，1.00当量)在HF(70％吡啶溶液，40mL)中的溶液，然后在0℃和搅拌下滴加NaNO₂(3.0g)在H₂O(10mL)中的溶液。在冰/盐浴中在0℃下搅拌1小时，将反应混合物溶液转移到80-mL密封管中，并在油浴中在80℃下再搅拌1小时。将反应混合物冷却，并通过加入100mLNa₂CO₃溶液终止其反应，然后用2×300mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶10)洗脱。获得6.8g(75％)作为黄色固体的N-(3-氟-4-甲基-5-硝基苯基)氨基甲酸乙酯。

实施例10.N-(3-氨基-5-氟-4-甲基苯基)氨基甲酸乙酯的制备

向250-mL三颈圆底烧瓶中置入N-(3-氟-4-甲基-5-硝基苯基)氨基甲酸乙酯(6.80g，28.1mmol，1.00当量)在H₂O(120mL)中的溶液和Fe(8g)。将所得的混合物在油浴中在100℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却并过滤。将滤液用2×200mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上并用乙酸乙酯/石油醚(1∶10)洗脱。获得5g作为黄色固体的N-(3-氨基-5-氟-4-甲基苯基)氨基甲酸乙酯。

实施例11.2-氯-4-(吡啶-3-基)嘧啶的制备

向吹扫并维持氮惰性气氛的500-mL三颈圆底烧瓶中置入吡啶-3-基硼酸(4.42g，36.0mmol，1.00当量)在THF/H₂O(30mL)中的溶液、2，4-二氯嘧啶(5.40g，36.2mmol，1.00当量)在THF/H₂O(30mL)中的溶液、Na₂CO₃(11.5g，108mmol，3.00当量)和PdCl₂(PPh₃)₂(1.80g，2.57mmol，0.06当量)。将所得的溶液在油浴中加热至回流，持续16小时。将反应混合物冷却，并通过加入100mL水终止其反应。将所得的溶液用5×200mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用3×200mL盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶1)洗脱。获得5g(73％)作为黄色固体的2-氯-4-(吡啶-3-基)嘧啶。

实施例12.N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)氨基甲酸乙酯的制备

向吹扫并维持氮惰性气氛的100-mL三颈圆底烧瓶中置入N-(3-氨基-5-氟-4-甲基苯基)氨基甲酸乙酯(1.00g，4.72mmol，1.00当量)在1，4-二噁烷(20mL)中的溶液、2-氯-4-(吡啶-3-基)嘧啶(500mg，2.62mmol，0.55当量)、K₂CO₃(1.3g)、Pd(PPh₃)₄Cl₂(0.1g)和X-Phos(0.1g)。将所得的溶液在油浴中加热至回流，持续18小时。将反应混合物冷却并真空浓缩。将残余物用水稀释，并用2×100mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶2)洗脱。获得0.42g(23％)作为浅黄色固体的N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)氨基甲酸乙酯。

实施例13.5-氟-6-甲基-N1-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)苯-1，3-二胺的制备

向50-mL圆底烧瓶中置入N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)氨基甲酸乙酯(300mg，0.82mmol，1.00当量)在30％HBr的AcOH(10mL)溶液中的溶液。将所得的溶液在油浴中在80℃下搅拌12小时。将反应混合物冷却，并用Na₂CO₃调节至pH 8，然后用100mL乙酸乙酯萃取。将有机层用1×50mL H₂O洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶1)洗脱。获得0.2g(81％)作为黄色固体的5-氟-6-甲基-N1-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)苯-1，3-二胺。

实施例14.N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺的制备

向吹扫并维持氮惰性气氛的100-mL三颈圆底烧瓶中置入4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酸(70mg，0.30mmol，1.20当量)在DMF(10mL)中的溶液、DIEA(1mL)、HATU(110mg，0.29mmol，1.22当量)和5-氟-6-甲基-N1-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)苯-1，3-二胺(70mg，0.24mmol，1.00当量)。将所得的溶液在室温下搅拌36小时。将所得的溶液用水稀释，并用2×100mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用2×50mL H₂O洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用二氯甲烷/甲醇(10∶1)洗脱。获得19mg(15％)作为黄色固体的N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯甲酰胺。MS(ES，m/z)：512[M+H]⁺。H-MR-PH-NC-LX-007-0(400MHz，DMSO-d6，ppm)：10.32(1H，s)，9.28(1H，s)，9.21(1H，s)，8.69-8.70(1H，d)，8.54-8.55(1H，d)，8.46-8.48(1H，d)，7.89-7.95(3H，d)，7.49-7.55(2H，d)，7.43-7.48(3H，d)，3.64(2H，s)，3.04(2H，s)，2.90-2.93(2H，d)，2.79(3H，s)，2.28-2.33(4H，m)，2.11(3H，s)。

实施例15-19(方法B)

实施例15.4-溴-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯的制备

向100-mL圆底烧瓶中置入4-溴-3-(三氟甲基)苯甲酸(5.00g，18.6mmol，1.00当量)在CH₃CH₂OH(50mL)中的溶液。向该混合物中加入H₂SO₄(98％，2mL)。将所得的溶液在油浴中加热至回流，持续3小时。将所得的混合物冷却并真空浓缩。将残余物用水稀释，并用3×50mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用6×50mL H₂O洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶10)洗脱。获得5.50g(98％)作为浅黄色油状物的4-溴-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯。

实施例16.4-甲酰基-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯的制备

向吹扫并维持氮惰性气氛的250-mL三颈圆底烧瓶中置入4-溴-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯(5.50g，18.5mmol，1.00当量)在THF(100mL)中的溶液。在-90℃和搅拌下向上述溶液中滴加n-BuLi(8.10mL，1.10当量，2.5M)。在-90℃下搅拌1小时，然后在-90℃和搅拌下滴加DMF(2.70g，2.00当量)。将所得的溶液在-90℃下搅拌1小时，并在室温下再搅拌1小时。通过加入20mL水终止反应混合物的反应，然后用2×50mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用3×50mL H₂O洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用乙酸乙酯/石油醚(1∶80)洗脱。获得3.00g(65％)作为浅黄色油状物的4-甲酰基-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯。

实施例17.4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯的制备

向100-mL三颈圆底烧瓶中置入4-甲酰基-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯(3.00g，12.2mmol，1.00当量)在CH₃OH(20mL)中的溶液。向其中加入1-甲基哌嗪(1.46g，14.6mmol，1.20当量)和AcOH(5mL)。将所得的溶液在室温下搅拌3小时，然后加入NaBH₃CN(1.10g，18.1mmol，1.50当量)。将所得的溶液在室温下再搅拌2小时，然后真空浓缩。将残余物用水稀释，并用3×50mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用3×50mL水洗涤，用Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脱。获得2.0g(49％)作为白色固体的4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯。

实施例18.4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酸的制备

向50-mL圆底烧瓶中置入4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酸乙酯(1.00g，3.03mmol，1.00当量)在THF(10mL)中的溶液，然后加入NaOH(180mg，4.50mmol，1.50当量)在H₂O(5mL)中的溶液。将所得的溶液在油浴中加热至回流，持续1小时。将反应混合物冷却，并用HCl(2N)调节至pH 7，然后用2×10mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用3×10mL H₂O洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脱。获得0.20g(21％)作为白色固体的4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酸。

实施例19.N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺的制备

向吹扫并维持氮惰性气氛的100-mL三颈圆底烧瓶中置入5-氟-6-甲基-N1-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)苯-1，3-二胺(80mg，0.27mmol，1.00当量)在DMF(30mL)中的溶液、4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酸(90mg，0.30mmol，1.10当量)、HATU(205mg，0.54mmol，2.00当量)和Et₃N(35mg，0.35mmol，1.30当量)。将所得的溶液在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物用水稀释，并用2×20mL乙酸乙酯萃取。合并有机层，用3×20mL水洗涤，用无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物施加到硅胶柱上，并用二氯甲烷/甲醇(50∶1)洗脱。获得40mg(25％)作为固体的N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺。MS(ES，m/z)：580[M+H]⁺。H-NMR-PH-NC-LX-006-0(400MHz，CD₃OD，ppm)：9.29(1H，s)，8.63(1H，s)，8.57(1H，s)，8.50(1H，m)，8.28(1H，s)，8.18(1H，m)，8.00(2H，m)，7.55(1H，d)，7.40(2H，m)，3.86(2H，m)，3.48(2H，m)，3.00(3H，m)，2.92(4H，m)，2.51(2H，m)，2.21(3H，m)。

实施例20.4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶 -2-基氨基)苯基)苯甲酰胺的制备

使用方法A制备标题化合物。

实施例21.4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶 -2-基氨基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺的制备

使用方法B制备标题化合物。

生物学评价

在激酶测定中测试本发明的化合物。以从10μM开始的3倍系列稀释的10剂量IC₅₀模式(10-dose IC₅₀mode)测试示例性化合物19和21。结果表明这两个化合物均为Abl1的强效抑制剂。

化合物	IC₅₀(激酶：Abl1)
		Gleevec	237nM
实施例19	＜100nM
		实施例21	＜100nM

实施例A.Z’-LYTE激酶测定条件

Z’-LYTE^TM生化测定采用基于荧光的偶联酶模式(fluorescence-based，coupled-enzyme format)，并且基于磷酸化的肽和非磷酸化的肽对溶蛋白性裂解的差异敏感度(differential sensitivity)。在初次反应中，所述激酶将ATP的γ-磷酸转移到合成FRET-肽中的单个酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基上。在二次反应中，位点特异性蛋白酶识别并断裂非磷酸化的FRET-肽。FRET-肽的磷酸化通过显色剂(Development Reagent)抑制断裂。断裂中断FRET-肽上的供体(即香豆素)和受体(即荧光素)荧光团之间的FRET，而未断裂的磷酸化FRET-肽则保持FRET。使用计算在400nm下激发供体荧光团之后的供体发射与受体发射之比(发射比(Emission Ratio))的参比方法来定量反应进程。断裂的和未断裂的FRET-肽均促成荧光信号，并因此促成发射比。可从发射比计算FRET-肽的磷酸化程度。如果FRET-肽是磷酸化的(即无激酶抑制)，则发射比会保持较低；而如果FRET-肽是非磷酸化的(即激酶抑制)，则发射比会较高。

在该孔中在1％DMSO(最终)中筛选测试化合物。对于10点滴定(10points titration)，从10μM起始浓度进行3倍系列稀释。在适合的激酶缓冲液中将所有的肽/激酶混合物稀释到2倍工作浓度。在激酶缓冲液(50mMHEPES pH 7.5，0.01％BRIJ-35，10mM MgCl₂，1mM EGTA)中将所有的ATP溶液稀释到4倍工作浓度。之前使用Z’-LYTE测定来测定ATP表观Km(Kmapparent)。将所述显色剂稀释于显色缓冲液中。

测定方案

条形码式Corning，低体积NBS，黑色384-孔板(Corning Cat.#3676)

1. 2.5μL-4×测试化合物或100nL 100×加2.4μL激酶缓冲液

2. 5μL-2×肽/激酶混合物

3. 2.5μL-4×ATP溶液

4. 30-秒钟板振荡(plate shake)

5.在室温下60-分钟激酶反应温育

6. 5μL-显色剂溶液

7. 30-秒钟板振荡

8.在室温下60-分钟显色反应温育

9.在荧光读板器上读数，并分析数据。

如Invitrogen PDF document：Z’-LYTE Screening Protocol and AssayConditions(2010年6月15日修订)中所述进行Z’-LYTE激酶特异性测定条件、测定对照、作图软件及其它细节。

适应症

本发明提供能够调节一种或多种包括但不限于Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R的信号转导途径的化合物，所述Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R是参与调节包括细胞生长、细胞存活和侵袭在内的许多关键细胞过程的重要的信号转导分子。

术语“调节”表示与不存在所述化合物时的正常活性相比，所述途径的功能活性(或其组分)被改变。这一作用包括任意量或任意程度的调节，包括增加、激动、增进(augment)、增强、促进、刺激、减少、阻断、抑制、降低、减小(diminish)、拮抗等。

本发明化合物还能够调节以下过程中的一种或多种，所述过程包括但不限于例如细胞生长(包括例如分化、细胞存活和/或增殖)、肿瘤细胞生长(包括例如分化、细胞存活和/或增殖)、肿瘤消退、内皮细胞生长(包括例如分化、细胞存活和/或增殖)等。

尽管不期望受到任何理论或作用机理的限制，但已发现本发明化合物具有调节激酶活性的能力。然而，本发明的方法不受限于任何特定机理或者所述化合物如何实现它们的疗效。

本发明化合物可用于治疗和/或预防涉及一种或多种包括Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R的细胞信号转导途径的任意疾病或病症。术语“治疗”常用于指例如为了对抗、缓解、减少、减轻疾病或病症、改善其状况等目的对个体进行管理或照料。

如上所述，本发明涉及治疗和/或预防疾病和病症的方法；和/或调节与Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R相关的途径、多肽、基因、疾病、病症等中的一种或多种的方法。

方法包括调节肿瘤细胞增殖，其包括抑制细胞增殖。后者指减少、降低、减小、减慢肿瘤细胞的生长和/或分化等。如上所述，Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R激酶在参与细胞增殖、分化和凋亡的细胞质信号级联的激活中起到关键作用。任何量的抑制均被视作治疗性的。

可治疗任何肿瘤或癌症，包括但不限于在Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R中以及在它们为其中一部分的信号转导途径的任何上游或下游成员中具有一个或多个突变的癌症。如前文所述，可用本发明化合物治疗癌症而与导致其疗效的机制无关。

白血病包括但不限于急性髓样白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性髓性白血病和毛细胞白血病。

除了抑制肿瘤细胞的增殖，本发明化合物还能够引起肿瘤消退，例如降低肿瘤大小或体内癌症的程度。

本发明还提供在哺乳动物中对疾病和病症进行治疗、预防、调节等的方法，其包括给药本发明化合物和包括但不限于Bcr-Abl、c-Kit或PDGF-R的信号转导途径的另一调节剂。这些物质可存在于同一组合物中或者分开的制剂或剂量单位中。可通过相同或不同的途径给药，并且可同时、序贯给药等。

可加入所述组合物中的任选的抗过度增殖剂包括但不限于在第14版Merck Index(2006)(其援引加入本文)中的癌症化疗用药中所列的化合物，例如门冬酰胺酶、博来霉素、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、左旋门冬酰胺酶(colaspase)、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪、更生霉素等。

适用于本发明组合物的其它抗过度增殖剂包括但不限于那些在Goodman and Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics(第9版)，Molinoff等人主编，McGraw-Hill出版，第1225-1287页(1996)(其援引加入本文)中公认用于治疗肿瘤疾病的化合物，例如氨鲁米特、L-门冬酰胺酶、硫唑嘌呤、5-氮胞苷、克拉屈滨、白消安、己烯雌酚、2′，2′-二氟脱氧胞苷、多西他赛、赤羟基壬基腺嘌呤(erythrohydroxynonyladenine)、炔雌醇、5-氟脱氧尿苷、5-氟脱氧尿苷一磷酸等。

给药途径

适合的给药途径包括但不限于口服、静脉内、直肠、气雾剂、肠胃外、眼、肺、经粘膜、经皮、阴道、耳、鼻和局部给药。另外，仅举例而言，肠胃外递送包括肌内、皮下、静脉内、髓内注射以及鞘内、直接心室内、腹膜内、淋巴管内和鼻内注射。

药物组合物/制剂

一实施方案提供药物组合物，其包含式I化合物或其立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物或药学可接受的盐和至少一种药学可接受的赋形剂。

在一些实施方案中，将本文所述化合物配制成药物组合物。使用一种或多种有助于将活性化合物加工成可药用的制剂的药学可接受的非活性成分，以常规方式配制药物组合物。适合的制剂取决于所选择的给药途径。本文所述的药物组合物的概述可参见例如Remington：The Science andPractice of Pharmacy，第19版，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania(1995)；J.E.Hoover，Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack PublishingCo.，Easton，Pennsylvania(1975)；H.A.Liberman和L.Lachman主编，Pharmaceutical Dosage Forms，Marcel Decker，New York，NewYork(1980)；以及Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，第7版，Lippincott Williams&Wilkins(1999)，这样的公开内容援引加入本文。

本文提供包含式I化合物和至少一种药学可接受的非活性成分的药物组合物。在一些实施方案中，以药物组合物形式给药本文所述化合物，与联合治疗中相同，在所述药物组合物中式I化合物与其它活性成分混合。在其它实施方案中，所述药物组合物包含其它医学或药学试剂、载体、辅剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂(wetting agent)或乳化剂、促溶剂(solutionpromoter)、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。在其它实施方案中，所述药物组合物包含其它具有治疗价值的物质。

本文使用的药物组合物指式I化合物与其它化学组分(即药学可接受的非活性成分)的混合物，所述其它化学组分例如载体、赋形剂、粘合剂、填充剂、助悬剂、芳香剂、甜味剂、崩解剂、分散剂、表面活性剂、润滑剂、着色剂、稀释剂、增溶剂、湿润剂(moistening agent)、增塑剂、稳定剂、渗透促进剂、润湿剂、消泡剂、抗氧化剂、防腐剂或者一种或多种它们的组合。所述药物组合物有助于将所述化合物给药至有机体。在实施本文提供的治疗或使用方法时，以药物组合物的形式将治疗有效量的本文所述化合物给药至患有待治疗的疾病、病症或病况的哺乳动物。在一些实施方案中，所述哺乳动物是人。治疗有效量可随疾病的严重性、个体的年龄和相对健康状况、所用化合物的效力和其它因素而大幅变化。所述化合物可单独使用或者作为混合物的组分与一种或多种治疗剂组合使用。

将包含式I化合物的本文所述药物组合物配制成任意适合的剂型，包括但不限于水性口服分散体、液体制剂、凝胶剂、糖浆剂、酏剂、膏剂(slurry)、混悬剂、固体口服剂型、气雾剂、控释制剂、崩解(fast melt)制剂、泡腾制剂、冻干制剂、片剂、散剂、丸剂、糖锭剂(dragee)、胶囊剂、延迟释放制剂、延长释放制剂、脉冲释放制剂、多颗粒制剂以及混合型速释和控释制剂。

用于口服给药的所有制剂均具有适合这样的给药的剂量。这样的剂量单位的实例是片剂或胶囊剂。在一些实施方案中，这些制剂含有约1-2000mg，有利地约1-500mg，并且通常约5-150mg的量的活性成分。用于人类或其它哺乳动物的适合的日剂量随患者的病症和其它因素而大幅变化，但同样可使用常规方法确定。

在一些实施方案中，本文公开的固体剂型是如下形式：片剂(包括悬浮片剂(suspension tablet)、崩解片剂、咀嚼崩解片剂(bite-disintegrationtablet)、速崩片剂、泡腾片剂或囊片剂(caplet))、丸剂、散剂、胶囊剂、固体分散体、固体溶液剂、生物蚀解剂型、控释制剂、脉冲释放剂型、多颗粒剂型、球剂(bead)、丹剂、颗粒剂。在其它实施方案中，所述药物制剂为散剂的形式。在其它实施方案中，所述药物制剂为片剂的形式。在其它实施方案中，式I化合物的药物制剂为胶囊剂的形式。

应当理解，本文所述的固体剂型中使用的添加剂间有相当大的重叠。因此，应理解以上所列的添加剂仅为对可包含在本文所述的药物组合物的固体剂型中的添加剂的类型的示例而非对其的限制。本领域技术人员可根据具体的期望性质容易地确定这样的添加剂的量。

可通过例如将上文所述的化合物的制剂的掺混物(bulk blend)置于胶囊中来制备胶囊剂。在一些实施方案中，所述制剂(非水性混悬剂和溶液剂)被置于软明胶胶囊中。在其它实施方案中，所述制剂被置于标准明胶胶囊或非明胶胶囊(例如包含HPMC的胶囊)中。在其它实施方案中，所述制剂被置于分散型胶囊(sprinkle capsule)中，其中将所述胶囊剂整个吞咽或者在食用前将所述胶囊打开并将内容物洒在食物上。

在多个实施方案中，将式I化合物与一种或多种赋形剂的颗粒干式混合并压制成硬度足以提供基本上在口服给药后少于约30分钟、少于约35分钟、少于约40分钟、少于约45分钟、少于约50分钟、少于约55分钟或少于约60分钟内崩解，从而将所述制剂释放到胃肠液中的药物组合物的团块(例如片剂)。

在一些实施方案中，配制所述药物固体口服剂型以提供式I化合物的控释。控释指在延长的时间内按照期望的曲线使式I化合物从其所掺入的剂型中释放。控释曲线包括例如持续释放、延长释放、脉冲释放和延迟释放曲线。与速释组合物相反，控释组合物使得能够按照预定曲线在延长的时间内向个体递送药剂。这样的释放速率可在延长的时间提供治疗有效水平的药剂，并由此在与传统速释剂型相比将副作用降至最低的同时提供较长的药理反应期。这样较长的反应期提供了许多固有益处，这是相应的短效、速释制剂所无法实现的。

一方面，用于口服给药的液体剂型是选自包括但不限于药学可接受的水性口服分散体、乳剂、溶液剂、酏剂、凝胶剂和糖浆剂的水性混悬剂的形式。参见例如Singh等人，Encyclopedia of Pharmaceutical Technology，第2版，第754-757页(2002)。除式I化合物的颗粒之外，所述液体剂型还包含添加剂，例如：(a)崩解剂；(b)分散剂；(c)润湿剂；(d)至少一种防腐剂；(e)增粘剂；(f)至少一种甜味剂；以及(g)至少一种芳香剂。在一些实施方案中，所述水性分散体还包含结晶抑制剂。

一方面，将式I化合物配制成适合肌内、皮下或静脉内注射的药物组合物。一方面，适合肌内、皮下或静脉内注射的制剂包括生理学可接受的无菌的水性或非水性的溶液剂、分散体、混悬剂或乳剂，以及用于复原成无菌注射液或分散体的无菌粉末。

对于静脉内注射，将本文所述的化合物优选地在生理相容的缓冲液(例如Hank溶液、林格溶液或生理盐水缓冲液)中配制成水溶液。对于经粘膜给药，在所述制剂中使用适于待渗透的屏障的渗透剂。这样的渗透剂是本领域公知的。对于其它肠胃外注射，适合的制剂包括优选地含有含有生理相容的缓冲剂或赋形剂的水溶液剂或非水溶液剂。这样的赋形剂是已知的。

肠胃外注射可包括弹丸注射或持续输注。用于注射的制剂可以单位剂型，例如在安瓿或多剂量容器中提供，并加入防腐剂。本文所述药物组合物可为适合肠胃外注射的形式，如油性或水性媒介物中的无菌混悬剂、溶液剂或乳剂，并且可包含配方剂，例如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。一方面，所述活性成分为用于在使用前用适合的媒介物例如无菌、无热原的水复原的粉末形式。

在一些实施方案中，肠胃外日剂量方案为约0.1-约30mg/kg总体重，优选约0.1-约10mg/kg，并且更优选约0.25mg-1mg/kg。

在一些实施方案中，提供制备用于治疗癌症的药物的方法，所述方法包括将一定量的式I化合物与药学可接受的载体组合以制备所述药物。

组合

尽管可将本发明化合物作为唯一的活性药剂服用或给药，但是它们也可与本发明的一种或多种化合物组合或者与其它药剂组合使用。

在一实施方案中，通过给药辅剂增强本文所述化合物之一的疗效(即辅剂本身可能具有很小的治疗益处，但是与另一治疗剂组合时增强对患者的整体治疗益处)。或者，在一些实施方案中，通过将本文所述化合物之一与也具有治疗益处的另一治疗剂(其还包括治疗方案)一起给药来增加患者获得的益处。

在一具体实施方案中，将式I化合物与另一种治疗剂共同给药，其中所述式I化合物和所述另一种治疗剂调节待治疗的疾病、病症或病况的不同方面，由此提供比单独给药每一种治疗剂更大的整体益处。

在任何情况下，无论所述待治疗的疾病、病症或病况是什么，患者所获得的整体益处可能简单地是这两种治疗剂的加和，或者患者可能获得协同益处。

在联合治疗中，以任意顺序或者甚至同时给药多种治疗剂(其中之一是本文所述的化合物)。如果是同时给药，仅举例而言，以单一的统一(unified)形式或以多种形式(例如以单个丸剂形式或以两个分开的丸剂形式)提供所述多种治疗剂。在一实施方案中，以多剂量形式提供所述治疗剂之一，在另一实施方案中，以多剂量形式提供两种(或更多种，如果存在的话)治疗剂。在非同时给药的一些实施方案中，多次剂量之间的时间在大于零周和小于四周之间变化。另外，所述组合方法、组合物和制剂不限于仅两种药剂的使用；还包括多种治疗组合的使用。

特别地，在一些实施方案中，将本发明化合物的给药与本领域技术人员已知的癌症预防和治疗中的其它疗法联合。

之前的描述仅为本发明的示例，而并非意图将本发明限制到所公开的化合物、组合物和方法。从之前的描述中，本领域技术人员能够容易地确定本发明的必要特征，并且能够在不脱离本发明的精神和范围的情况下对本发明做出多种改变和修改以使其适合于各种用途和条件。

Claims

1.选自以下的化合物或其药学可接受的盐：

N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺和4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-N-(3-氟-4-甲基-5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺。

2.权利要求1的药学可接受的盐，其是盐酸盐、苯磺酸盐或甲磺酸盐。

3.药物组合物，其包含权利要求1的化合物和药学上可接受的载体。

4.权利要求3的药物组合物，其中所述组合物用于治疗由蛋白激酶调节的疾病。

5.权利要求3的药物组合物，其中所述组合物用于治疗过度增殖性病症。

6.权利要求3的药物组合物，其还包含抗肿瘤剂、免疫抑制剂、免疫刺激剂或它们的组合。

7.权利要求3的药物组合物，其中所述组合物适于口服给药或肠胃外给药。

8.权利要求7的药物组合物，其中所述组合物适于静脉内给药。

9.权利要求1的化合物在制备用于调节酪氨酸激酶信号转导的药物中的用途，其中所述酪氨酸激酶为Abl。

10.权利要求1的化合物在制备用于治疗或预防Bcr-Abl介导的病症的药物中的用途。

11.权利要求1的化合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。

12.权利要求11的用途，其中所述肿瘤选自白血病和实体瘤癌。

13.权利要求12的用途，其中所述白血病为慢性髓性白血病。

14.权利要求12的用途，其中所述实体瘤癌为结直肠癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、胃肠道间质瘤(GIST)、肾细胞癌、多发性骨髓瘤、胰腺癌、非霍奇金淋巴瘤、肝细胞癌、甲状腺癌、膀胱癌或前列腺癌。

15.权利要求14的用途，其中所述结直肠癌为结肠癌。

16.权利要求14的用途，其中所述胃肠道间质瘤为胃肠间质癌。

17.权利要求12的用途，其中所述肿瘤是慢性髓性白血病或胃肠道间质瘤(GIST)。

18.权利要求11-17中任一项的用途，其中所述药物用于与一种或多种抗癌剂联合给药。

19.权利要求1的化合物在制备用于治疗或预防过度增殖性病症和血管发生病症的药物中的用途。