CN102539415B

CN102539415B - 一种快速检测鲜奶中植脂末掺假的方法

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Publication number: CN102539415B
Application number: CN 201110443169
Authority: CN
Inventors: 张宏强
Original assignee: BEIJING FUTONGHUA INVESTMENT Co Ltd
Current assignee: BEIJING FUTONGHUA INVESTMENT Co Ltd
Priority date: 2011-12-27
Filing date: 2011-12-27
Publication date: 2013-08-28
Anticipated expiration: 2031-12-27
Also published as: CN102539415A

Abstract

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种牛奶的检测方法，特别涉及鲜奶中植脂末掺假的检测。本发明公开的快速检测牛奶中植脂末的检测试剂，其为A液和B液，其中，A液含有2～10g/L增稠剂、1×10⁵～1×10⁷U/L葡萄糖氧化酶、1×10⁵～1×10⁶U/L辣根过氧化物酶和0.3～0.5g/L黄色染料，余量为水，pH5.0～7.5；B液含有6～10g/L的四甲基联苯胺，余量为有机溶剂。本发明还公开了包被所述试剂的检测试纸条以及应用所述检测试纸条进行鲜奶中植脂末掺假的快速检测。本发明方法具有操作简单、快速、灵敏度合适和成本低等特点，能快速检测鲜奶中的植脂末。

Description

一种快速检测鲜奶中植脂末掺假的方法

技术领域

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种牛奶的检测方法，特别涉及鲜奶中植脂末掺假的检测。

背景技术

植脂末又称奶精，是以氢化植物油、玉米糖浆或葡萄糖浆、乳化剂、抗结剂等为原料生产的一种调味品，具有浓郁的奶香气，脂肪含量大约为20％-75％，所以产热量一般都比较高。由于乳品企业对原奶收购采取以乳脂率论价，奶农为了提高鲜奶的乳脂率，在原奶中掺植脂末。廉价低质的植脂末中含有砷(砒霜)、铅、铜等有害物质，长期摄入，可增加患冠心病、肿瘤、哮喘等疾病的几率，幼儿更会变得智力低下。

由于植脂末是由棕榈油和糊精或饴糖生产而成，因而可利用糊精和饴糖中含有葡萄糖成分的原理来检测原奶中是否掺入植脂末。现有技术中，对原奶中掺入植脂末的检测，采取鲜奶中植脂末和油脂粉遇冷会有少量棕榈油络合物浮在奶样来判断，配合检测鲜奶中是否存在糖，但是这样的检测方法特异性较差。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种快速检测牛奶中植脂末的检测试剂以及包被所述试剂的检测试纸条以及应用所述检测试纸条进行鲜奶中植脂末掺假的快速检测。

为实现本发明目的，本发明提供一种快速检测牛奶中植脂末的检测试剂，其为A液和B液，其中，A液含有2～10g/L增稠剂、1×10⁵～1×10⁷U/L葡萄糖氧化酶、1×10⁵～1×10⁶U/L辣根过氧化物酶和0.3～0.5g/L黄色染料，余量为水，pH5.0～7.5；B液含有6～10g/L的四甲基联苯胺，余量为有机溶剂。

其中，A液优选的pH值为5.5～6.5。

其中，所述的增稠剂优选的含量为2.5～5g/L，可优选自羟甲基纤维素钠、明胶、聚乙烯醇和海藻酸钠中的一种或多种。其中，羟甲基纤维素钠优选的含量为2.5～10g/L，明胶Gelatin优选的含量为2.5～10g/L，聚乙烯醇PVA优选的含量为2～10g/L，海藻酸钠优选的含量为2～5g/L。

其中，所述的有机溶剂可选用乙醇、异丙醇、氯仿、甲苯及其他苯类、环己酮及其他酮类。

在本发明的一个实施方案中，所述的A液还含有控制溶液pH在5.0～7.5的pH缓冲剂和0.5～2g/L的稳定剂。优选的pH缓冲剂为柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、醋酸盐缓冲剂，最优选为柠檬酸盐缓冲剂。优选的稳定剂为磷酸壬基酚或亚磷酸三苯酯。

为实现本发明目的，本发明还提供一种快速检测牛奶中植脂末的检测试纸条，其包括试纸条基片和粘贴于其上的滤纸块，所述的滤纸块包被所述的检测试剂。

本发明所述滤纸块的制备过程中，优选先包被A液，烘干后再包被B液。

其中，所述试纸条的基片可由本领域技术人员公知的任何疏水性材质制成，优选为聚氯乙烯。

其中，所述试纸条的滤纸块优选为Whatman滤纸。

本发明还提供一种快速检测鲜奶中植脂末掺假的方法，其为将所述的检测试纸条插入待测鲜奶中，读取检测结果。具体的，1)将发明所述的检测试纸条直接插入装有鲜奶的试管中，约2秒钟取出。2)2分钟时将取出的试纸条观察滤纸块的颜色。3)滤纸块颜色如呈现黄绿色-浅绿色-绿色-蓝绿色的颜色变化，检测结果为阳性，并根据呈现的颜色可初步判断植脂末的含量；无颜色变化，则检测结果为阴性。

通过对标准样品进行检测，结果如下：

样品浓度(％)	现象	结果
			0	黄色	阴性
0.100	黄色	阴性
			0.125	黄绿色	阳性
0.150	浅绿色	阳性
			0.200	绿色	阳性
0.250	绿色	阳性
			0.500	蓝绿色	阳性

上述结果可制备标准色板，可将检测结果和标准色板进行比较，出现如表中所述的黄绿色至蓝绿色，表明鲜奶中掺入了植脂末，并且可以根据表中的颜色判断所掺入的植脂末的含量。

植脂末中含氢化植物油统称硬化油，再配入糊精、饴糖而成。本试纸条是根据检测葡萄糖的反应原理，因为饴糖中大部分是葡萄糖，糊精亦可转变为葡萄糖。葡萄糖在葡萄糖氧化酶作用下产生新生态氧，其在过氧化物酶的催化下释放过氧化氢，使四甲氧基联苯胺氧化成蓝色颜料，由于本试纸底色为黄色，所以阳性显色将根据植脂末的含量由少到多，呈现由黄绿色-浅绿色-绿色-蓝绿色的颜色变化。

用本发明提供的方法进行鲜奶中植脂末掺假的检测，待测鲜奶无需进行预处理，无需借助仪器设备，在2分钟即能检测确定鲜奶中是否掺入植脂末。因此，本发明具有操作简单、快速、灵敏度合适和成本低等特点，能快速检测鲜奶中的植脂末。

附图说明

图1为本发明试纸条的示意图。其中，1为基片，2为滤纸块。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1牛奶中植脂末的检测试剂

A液的制备：

在1000ml烧杯中加入400ml高纯水(电阻率要求达到18兆以上)，置磁力搅拌器上，边搅拌边加入2g羟甲基纤维素钠盐(CMC-要求外观洁白、低分子量、低黏度)，3.5g无水柠檬酸(分析纯)和4.25g一个结晶水柠檬酸钠(分析纯)，加热至60-65℃，搅拌约20min完全溶解，停止加热，待溶液降至室温后，边搅拌边加入2ml 10％RHODAFAC RE960稳定剂(磷酸壬基酚)，4g葡萄糖氧化酶(126U/mg)(购自美国Sigma公司)，1g过氧化物酶(114U/mg)(购自美国Sigma公司)，10ml 2％噻唑黄(购自美国Sigma公司)，搅拌约30min完全溶解，用高纯水定容至500毫升，备用。

B液的制备：

在1000ml烧杯中加入400ml无水乙醇(试剂级)，置通风橱内磁力搅拌器上，边搅拌边加入4g四甲基联苯胺(属高毒试剂，操作时要求戴上防护眼镜和手套)，搅拌约20min完全溶解，用无水酒精定容至500ml，备用。

实施例2牛奶中植脂末的检测试剂

A液的制备：

在1000ml烧杯中加入400ml高纯水(电阻率要求达到18兆以上)，置磁力搅拌器上，边搅拌边加入4g羟甲基纤维素钠盐(CMC-要求外观洁白、低分子量、低黏度)，3.5g无水柠檬酸(分析纯)和4.25g一个结晶水柠檬酸钠(分析纯)，加热至60-65℃，搅拌约20min完全溶解，停止加热，待溶液降至室温后，边搅拌边加入2ml10％亚磷酸三苯酯，2g葡萄糖氧化酶(126U/mg)(购自美国Sigma公司)，0.7g过氧化物酶(114U/mg)(购自美国Sigma公司)，40ml2％活性黄(购自美国Sigma公司)，搅拌约30min完全溶解，用高纯水定容至500毫升，备用。

B液的制备：

在1000ml烧杯中加入400ml氯仿(试剂级)，置通风橱内磁力搅拌器上，边搅拌边加入5g四甲基联苯胺(属高毒试剂，操作时要求戴上防护眼镜和手套)，搅拌约20min完全溶解，用氯仿定容至500ml，备用。

实施例3牛奶中植脂末的检测试剂

A液的制备：

在1000ml烧杯中加入400ml高纯水(电阻率要求达到18兆以上)，置磁力搅拌器上，边搅拌边加入6g聚乙烯醇，3.5g无水柠檬酸(分析纯)和4.25g一个结晶水柠檬酸钠(分析纯)，加热至60-65℃，搅拌约20min完全溶解，停止加热，待溶液降至室温后，边搅拌边加入2ml 10％RHDAFAC RE960稳定剂，3g葡萄糖氧化酶(126U/mg)(购自美国Sigma公司)，1.5g过氧化物酶(114U/mg)(购自美国Sigma公司)，20ml 2％酸性黄(购自美国Sigma公司)，搅拌约30min完全溶解，用高纯水定容至500毫升，备用。

B液的制备：

在1000ml烧杯中加入300ml无水甲苯(试剂级)，置通风橱内磁力搅拌器上，边搅拌边加入3g四甲基联苯胺(属高毒试剂，操作时要求戴上防护眼镜和手套)，搅拌约20min完全溶解，用无水甲苯定容至500ml，备用。

实施例4植脂末检测试纸条的制备

本发明的植脂末检测试纸条的示意图如图1所示。

将一卷Whatman滤纸(尺寸：70mm×106m；厚度：0.3mm；重量：165g/平方米；吸水率：2.30g/平方厘米)装在浸干机中的固定架上，将浸干机的转速设定为170转/小时，烘干温度设定为65℃，在浸干机加液槽中倒入实施例1配制的500ml A液后，启动浸干机让其开始运行，将浸干A液的试纸，卷入温度为65℃、设有23个滚轴的烘干室，约50min烘干、收卷。将已经浸干A液的试纸，装在浸干机中的固定架上，将浸干机的转速设定为170转/小时，烘干温度设定为65℃，在浸干机加液槽中倒入实施例1配制的B液，启动浸干机让其开始运行，将浸渍B液的滤纸，再次卷入65℃、设有23个滚轴的烘干室，约50min烘干、收卷。将植脂末半成品试纸(70mm×18m)放入装有13X的干燥剂的塑料袋中扎紧，最后装铝箔袋封口，避光、干燥保存直到使用。

备材质为PVC的白色疏水性塑料片，将塑料片切成260mm×90mm的塑料小板待用。

备前述制备的半成品试纸，先将整卷的70mm宽半成品试纸用切刀切成260mm长的小段半成品试纸，将医药专用等级的3M双面胶贴在小段半成品试纸的背面，并将其用专用滚切机切成5mm宽的试纸条，放入装有一定量分子筛的暗盒。

将塑料小板放在灯箱上定位，将5mm宽的植脂末纸条贴到塑料小板的上端位置，将贴好的植脂末板放入装有分子筛的暗盒。

将一块植脂末板放在切条机的定位处，开机、送板、切割成50条如图1所示的5mm×90mm的试条，试条上端为5mm×5mm的植脂末试纸块。

将每板切成的50根试条，装入一个高为98mm、直径为41mm的包装筒内，每筒加入1个5g的13X分子筛，封口，贴上植脂末标签。

实施例5植脂末试条的检测

制备下表中含有不同浓度植脂末的鲜奶样品，以不含植脂末的鲜奶为阴性对照。将实施例4制备的试纸条浸入盛有各个鲜奶样品的15ml试管中约2秒钟，顺试管边缘取出，以除去多余鲜奶。待2分钟时，不同样本出现下表所述的颜色。

样品浓度(％)	现象	结果
			0	黄色	阴性
0.100	黄色	阴性
			0.125	黄绿色	阳性
0.150	浅绿色	阳性

0.200	绿色	阳性
			0.250	绿色	阳性
0.500	蓝绿色	阳性

以上检测结果表明，本发明的植脂末试条的灵敏度达125mg/dL，说明本发明的试纸条检测结果准确可靠，检测灵敏度高，显色明显，而且操作简便快捷，适合大规模样品的检测。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种快速检测牛奶中植脂末的检测试剂，其为A液和B液，其中，A液含有2～10g/L增稠剂、1×10⁵～1×10⁷U/L葡萄糖氧化酶、1×10⁵～1×10⁶U/L辣根过氧化物酶和0.3～0.5g/L黄色染料，余量为水，A液的pH5.0～7.5；B液含有6～10g/L的四甲基联苯胺，余量为有机溶剂，所述的增稠剂选自羟甲基纤维素钠、明胶、聚乙烯醇和海藻酸钠中的一种或多种；所述的有机溶剂选自乙醇、异丙醇、氯仿、甲苯或环己酮；所述的黄色染料为噻唑黄、活性黄或酸性黄。

2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述A液还含有控制溶液pH在5.0～7.5的pH缓冲剂和0.5～2g/L的稳定剂。

3.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述的pH缓冲剂为柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂或醋酸盐缓冲剂，所述的稳定剂为磷酸壬基酚或亚磷酸三苯酯。

4.一种快速检测牛奶中植脂末的检测试纸条，其包括试纸条基片和粘贴于其上的滤纸块，所述的滤纸块包被权利要求1～3任一项所述的检测试剂。

5.根据权利要求4所述的检测试纸条，其特征在于，所述滤纸块先包被A液，烘干后再包被B液。

6.根据权利要求4或5所述的检测试纸条，其特征在于，所述基片材质为聚氯乙烯，所述滤纸块为Whatman滤纸。

7.一种快速检测鲜奶中植脂末掺假的方法，其为将权利要求4～6任一项所述的检测试纸条插入待测鲜奶中，读取检测结果。