CN102526348B - 一种用于降血糖的药物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于降血糖的药物组合物及其制备方法和应用，所述药物组合物含有黄连素和茶叶提取物，与单独使用相比，本发明提供的药物组合物在降血糖方面具有明显的协同增效的作用。
Description
技术领域
本发明涉及中药发明领域，具体涉及一种用于降血糖的药物组合物及其制备方法。
背景技术
糖尿病(diabetes)是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状，糖尿病(血糖)一旦控制不好会引发并发症，导致肾、眼、足等部位的衰竭病变，且无法治愈。
国内外专家一致认为，糖尿病实际上是体内代谢障碍与不良饮食方式共同作用的结果。那么，既然“坏的”饮食方式能诱发糖尿病，毫无疑问，好的饮食方式就能预防糖尿病。我国中医界素有“药食同源”之说，这一观点现已得到西方保健医学界的赞同，如美国、日本与欧洲医学界近几年来均在大力开发具有降血糖作用的天然降糖食品。据国外报道，已发现具有降血糖效果的天然植物多达250种以上，其中不少是可食食品。食物调养是预防和治疗疾病的重要方法之一，不仅为国内人民所欢迎，而且也为国外人民所接受，因此发展前景广阔。总而言之，“吃出健康、吃出正常血糖”将成为21世纪保健食品新时尚。
茶叶作为传统饮料在我国已有千年历史，是享誉国内外的“传统国饮”。古时茶只作为药用，《神龙本草》有“神龙尝百草，一日遇七十二毒，得茶而解之”的记载，《本草拾遗》也有“诸药为各病之药，茶为万病之药”的论述。
茶多糖是一种酸性糖蛋白，并结合有大量的矿质元素，称为茶叶多糖复合物，简称为茶叶多糖或茶多糖(Tea Polysaccharide)，具有增强免疫力、降血脂、降血糖、抗辐射、抗血凝、抗血栓等功效。茶多糖对小鼠实验性糖尿病具有防治作用，同时实验证明，茶叶提取物中的糖蛋白也具有良好的降血糖活性[Effects of Soluble TeaPolysaccharides on Hyperglycemia in Alloxan-Diabetic Mice，Journal ofAgricultural and Food chemistry，2007，55(14)，pp 5523-5528]。
自90年代清水岭夫得出茶叶治糖尿病的药理成分为茶叶多糖以来，尤其是近几年，有关茶叶多糖及其药理作用研究报道较多。研究发现，茶叶多糖能明显缓解以四氧嘧啶导致的I型糖尿病小鼠“三多一少”症状，降低其空腹血糖，并存在剂量-反应关系(茶多糖降血糖、改善糖尿病症状作用的研究[J].营养学报，2003，25(3)：253～255.)。倪德江等研究人员发现，茶叶多糖对糖尿病大鼠肝肾抗氧化功能有保护作用(乌龙茶多糖对糖尿病大鼠肝肾抗氧化功能及组织形态的影响[J].茶叶科学，2003，23(1)：11～15.)。这些研究成果为我国非常丰富的粗老茶资源的开发提供了有益参考。
发明人研究发现，分子量为10-150KD茶多糖降血糖效果显著，其余分子量的茶多糖效果较差。
黄连素(berberine)是从毛莨科黄连属植物黄连、云连、黄柏等含小檗碱植物药中提取的生物碱，也可以人工合成。其作为抗感染药已有数十年的应用历史和经验。近十年广泛的研究发现其具有降血糖、降血脂、抗心律失常、抗癌、抗血小板聚集、增强机体免疫功能等作用，其中降血糖报道日渐增多。目前认为可能的机制主要与：增加胰岛素敏感性改善胰岛素抵抗；促进胰岛B细胞再生及功能恢复；抑制蔗糖酶、麦芽糖酶等二糖酶活力，减少葡萄糖吸收等相关。
目前市场上降血糖药物具有低血糖反应、胃肠道反应、肝肾毒性、乳酸酸中毒危险等不良反应，且药物费用较高，给患者带来沉重的经济负担，发现新的物美价廉的降糖药物或保健品是这一领域专家学者的重要研究方向。
茶多糖虽有一定的降低血糖作用，但其疗效有待提高，截至目前，尚未有茶多糖与黄连素协同使用降血糖相关的专利、文献报道。
发明内容
本发明目的旨在提供一种治疗糖尿病的药物组合物。
本发明的另一目的是提供含上述药物组合物的制剂。
本发明的另一目的是提供上述药物组合物或制剂的应用。
本发明提供的一种用于降血糖的药物组合物，含有黄连素和茶叶提取物。
优选地，所述药物组合物含有以下重量份的成分：黄连素10-100份和茶叶提取物70-600份。
进一步优选，所述药物组合物含有以下重量份的成分：黄连素20-100份和茶叶提取物150-300份。
更进一步优选，本发明提供的药物组合物由以下重量份的成分组成：黄连素25份和茶叶提取物150份。
所述茶叶提取物为茶多糖，优选为分子量为10KD-150KD的茶多糖。所述分子量为10KD-150KD的茶多糖可由市场购得，也可通过如下方法制备：
1)取茶，加6-7倍量95％乙醇，回流提取3次，每次2小时；弃去乙醇提取液，残渣继续用7-8倍量去离子水回流提取3次，每次2小时；合并水提取液，浓缩至干，即得茶多糖；
2)称取茶多糖1.0g，加50mL去离子水加热溶解，热滤，滤液倒入超滤仪中。先用截留分子量为10KD的超滤膜超滤，超滤仪中剩余的溶液，换用30KD的超滤膜超滤，收集滤液A；超滤仪中剩余的溶液，换用50KD的超滤膜超滤，收集滤液B；超滤仪中剩余的溶液，换用100KD的超滤膜超滤，收集滤液C；超滤仪中剩余的溶液，换用150KD的超滤膜超滤，收集滤液D。将A、B、C、D四种溶液分别减压浓缩后，再冷冻干燥，得到样品A分子量为10KD-30KD，样品B分子量为30KD-50KD，样品C分子量为50KD-100KD，样品D分子量为100KD-150KD，混合A、B、C、D四种成分，混合均匀，即得分子量为10-150KD的茶多糖。
所述茶为铁观音、滇红茶、黑茶、茉莉花茶、龙井茶、绿茶、普洱茶、白茶等。
本发明所述的重量份可以是μg、mg、g、kg等医药领域公知的重量单位。
本发明还提供了含上述药物的制剂，由所述药物组合物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。
所述制剂为片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液，所述制剂优选为肠溶胶囊或肠溶片等的肠溶剂型。
所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、润湿剂、溶剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。
所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖等；
所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；
所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羧甲基纤维素钠等；
所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉或硬脂酸镁等；
所述助悬剂选自微粉硅胶、蜂蜡、纤维素、固态聚乙二醇等；
所述润湿剂选自甘油、吐温-80、乙氧基氢化蓖麻油或卵磷脂等；
所述溶剂选自乙醇、液态聚乙二醇、异丙醇、吐温-80、甘油、丙二醇或植物油，所述植物油选自大豆油、蓖麻油、花生油、调和油等；
所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等；
所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素、香精、柠檬酸或糖精钠等。
本发明还提供了上述制剂的制备方法，包括以下步骤：将茶多糖、黄连素与药学上可接受的载体或稀释剂按照等量递加法混合均匀，制成制剂。
本发明还提供了上述药物组合物或制剂在制备降血糖的药物和保健品中的应用。
所述降血糖为降低机体胰岛素分泌不足导致的高血糖或对胰岛素不敏感等原因所致的高血糖。
所述降血糖也可以为治疗糖尿病，所述糖尿病包括：1型糖尿病、2型糖尿病、妊娠糖尿病及其他特殊类型的糖尿病，其他特殊类型的糖尿病包括①β细胞功能缺陷糖尿病；②胰岛素功能缺陷；③胰腺外分泌病；④内分泌疾病；⑤药物或化学引起的糖尿病；⑥传染病；⑦不常见的免疫介导型糖尿病；⑧其它遗传综合征伴随糖尿病(关于糖尿病的新诊断标准与分型.中国糖尿病杂志，2000，8(1)：5～6)。
本发明提供的治疗糖尿病的药物组合物具有以下优点：
1、通过药效学研究发现，茶多糖和黄连素按照一定比例组合具有明显的降血糖作用。
2、与单独使用茶多糖或黄连素相比，本发明提供的茶多糖和黄连素在降血糖方面具有协同增效的作用。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实验例1：药效实验
依据中华人民共和国卫生部《保健食品检验与评价技术规范》，对茶多糖和黄连素混合物降血糖功能进行功能学及生化指标的评价。
1、实验动物：SD大鼠，雄性，180-200克，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号：SCXK(沪)2007-0005
2、实验药物：
茶多糖：上海中药创新研究中心提供，纯度为50.36％，为分子量10-150KD的茶多糖；
黄连素：宝鸡市永嘉天然植物开发有限公司批号YJ011223B，纯度98.23％；
二甲双胍：中美上海施贵宝制药有限公司生产，产品批号1102094，规格：0.5g。
3、实验分组：按体重随机分为以下几组，每组10只：
阴性对照组(给予注射用水0.4ml/100g)；
模型组：链脲佐菌素 80mg/kg/d；
阳性对照：二甲双胍 300mg/kg/d；
黄连素：20mg/kg/d；
黄连素：50mg/kg/d；
黄连素：100mg/kg/d；
茶多糖：300mg/kg/d；
黄连素+茶多糖：10mg/kg/d+150mg/kg/d；
黄连素+茶多糖：25mg/kg/d+150mg/kg/d；
黄连素+茶多糖：50mg/kg/d+150mg/kg/d。
4、药物配制：
称取茶多糖，加入少量枸橼酸缓冲液，研磨，并用枸橼酸缓冲液稀释至所需的浓度。在茶多糖溶液中加入黄连素配置成一定浓度的组合物。
5、实验方案：
1)造模方法
雄性SD大鼠，180-200克体重，饲养一周适应环境后，禁食不禁水12小时(晚9:30-次日上午9:30)。
造模前用枸橼酸缓冲液新鲜配制2％链脲佐菌素，大鼠每天腹腔注射80mg/kg新鲜配制的链脲佐菌素，剂量为0.4ml/100g，连续2天。作为正常对照的10只大鼠腹腔注射等容积的枸橼酸缓冲液。注射后30分钟给食。注射后一周，尾静脉取血100ul检测血糖及血清胰岛素水平，血糖浓度≥11mmol/L为造模成功的模型动物。
2)给药实验：
动物分组：模型动物按血糖水平随机分为模型组，模型阳性药组，黄连素高、中、低剂量组，茶多糖组，茶多糖和黄连素高、中、低剂量混合组，每组动物不少于8只，注射枸橼酸缓冲液的正常老鼠设为正常动物组，共10组动物。动物自由进食、进水，每日上午9:30-12:00间换垫料，禁食，下午2:00灌胃给药，给食。第7天早上6:00开始禁食，称取体重，下午14:00取尾静脉血50ul检测血糖。第14天早上6:00开始禁食，称取体重，下午14:00取尾静脉血50ul检测血糖。第21天早上6:00开始禁食，称取体重，下午14:00取尾静脉血100ul检测血糖和血清胰岛素。保存多余血样。
6、实验结果：
6.1血糖浓度≥11mmol/L为造模成功的模型动物，把模型动物按血糖量随机分为模型组，阳性对照组，黄连素高、中、低剂量组，茶多糖组，茶多糖和黄连素高、中、低剂量混合组，每组动物不少于8只，注射枸橼酸缓冲液动物设为正常动物组，共10组动物。
6.2每周血糖和体重结果
1)大鼠血糖值(mmol/l)：见表1
表1：血糖值
注：与糖尿病模型组相比，*p＜0.05，**p＜0.001
2)大鼠体重值：见表2
表2：体重值
3)黄连素-茶多糖合用结果评价：采用金氏公式计算，结果如下：见表3
表3：结果评价
| 第一周 | 第二周 | 第三周 | |
| 黄连素低剂量+茶多糖组q值 | 0.14(无效) | 200(明显增强) | 2.95(增强) |
| 黄连素中剂量+茶多糖q值 | 2.04(增强) | 1.52(增强) | 66.25(明显增强) |
注：q的意义：0.85-1.15为单纯相加(即加合作用)；＞1.15-20为增强(即协同作用)；＞20为明显增强；
表1-3的结果显示：
与模型组相比，二甲双胍组在给药第二周和第三周表现出一定的降血糖作用，结果有显著性差异(p＜0.01，p＜0.01)。黄连素高剂量组在第二周和第三周表现出一定的降血糖作用，结果有显著性差异(p＜0.05，p＜0.05)。黄连素低剂量和茶多糖混合组在第二周和第三周表现出一定的降血糖作用，结果有显著性差异(p＜0.05)。黄连素中剂量和茶多糖混合组在第一周、第二周和第三周表现出一定的降血糖作用，结果有显著性差异(p＜0.05，p＜0.01，p＜0.01)。黄连素高剂量和茶多糖混合组在第二周表现出一定的降血糖作用，结果有显著性差异(p＜0.01)。
用金(正均)氏公式计算表明：在给药第一周，第二周，第三周盐酸小檗碱中剂量和茶多糖混合组的降血糖作用具有协同增强效果，在给药第二周，第三周黄连素低剂量和茶多糖混合组的降血糖作用也具有协同增强效果。
与正常组相比，造模组动物的体重明显降低。与模型组相比，显示药效组的老鼠体重有一些增幅，但是幅度不明显。
7、其他配比组合剂量下大鼠血糖值降低值实验结果见数据汇总表(即表4)。
表4：茶叶提取物和黄连素的其他配比的血糖值
| 组别 | 剂量(mg/kg) | 动物数(只) | 第二周血糖增加值(％) |
| 黄连素 | 10 | 10 | 57.80±2.3 |
| 黄连素 | 20 | 10 | 43.57±3.5 |
| 黄连素 | 50 | 10 | 31.95±4.0 |
| 黄连素 | 100 | 10 | 19.01±3.8 |
| 茶多糖 | 70 | 10 | 70.32±5.1 |
| 茶多糖 | 150 | 10 | 61.32±3.5 |
| 茶多糖 | 300 | 10 | 47.08±2.9 |
| 茶多糖 | 600 | 10 | 40.32±5.5 |
| 黄连素+茶多糖 | 5+35 | 10 | 56.20±4.3 |
| 黄连素+茶多糖 | 5+75 | 10 | 50.32±5.5 |
| 黄连素+茶多糖 | 5+150 | 10 | 42.80±4.3 |
| 黄连素+茶多糖 | 10+35 | 10 | 36.21±3.9 |
| 黄连素+茶多糖 | 10+75 | 10 | 33.32±1.8 |
| 黄连素+茶多糖 | 10+150 | 10 | 24.10±3.3 |
| 黄连素+茶多糖 | 10+300 | 10 | 22.30±2.1 |
| 黄连素+茶多糖 | 25+35 | 10 | 34.21±6.1 |
| 黄连素+茶多糖 | 25+75 | 10 | 30.63±4.7 |
| 黄连素+茶多糖 | 25+150 | 10 | 14.23±3.1 |
| 黄连素+茶多糖 | 25+300 | 10 | 16.91±4.9 |
| 黄连素+茶多糖 | 50+35 | 10 | 18.23±3.8 |
| 黄连素+茶多糖 | 50+75 | 10 | 20.12±4.6 |
| 黄连素+茶多糖 | 50+150 | 10 | 19.53±5.6 |
| 黄连素+茶多糖 | 50+300 | 10 | 16.27±5.8 |
表4结果显示：黄连素和茶多糖组合用药对糖尿病大鼠的降糖效果明显优于二者单独使用的降糖效果，黄连素和茶多糖的最佳降糖作用的组合为25+150mg/kg。
实施例1：茶多糖的制备
取龙井茶，加6倍量95％乙醇，回流提取3次，每次2小时；弃去乙醇提取液，残渣继续用8倍量去离子水回流提取3次，每次2小时；合并水提取液，浓缩至干，即得茶多糖；
称取茶多糖1.0g，加50mL去离子水加热溶解，热滤(如：趁热用滤纸过滤)，滤液倒入超滤仪中。先用截留分子量为10KD的超滤膜超滤，超滤仪中剩余的溶液，换用30KD的超滤膜超滤，收集滤液A；超滤仪中剩余的溶液，换用50KD的超滤膜超滤，收集滤液B；超滤仪中剩余的溶液，换用100KD的超滤膜超滤，收集滤液C；超滤仪中剩余的溶液，换用150KD的超滤膜超滤，收集滤液D。将A、B、C、D四种溶液分别减压浓缩后，再冷冻干燥，得到样品A分子量为10KD-30KD，样品B分子量为30KD-50KD，样品C分子量为50KD-100KD，样品D分子量为100KD-150KD；
混合A、B、C、D四种成分，混合均匀，即得分子量为10-150KD的茶多糖。
实施例2：茶多糖的制备
取铁观音茶，加7倍量95％乙醇，回流提取3次，每次2小时；弃去乙醇提取液，残渣继续用6倍量去离子水回流提取3次，每次2小时；合并水提取液，浓缩至干，即得茶多糖；
称取茶多糖1.0g，加50mL去离子水加热溶解，热滤，滤液倒入超滤仪中。先用截留分子量为10KD的超滤膜超滤，超滤仪中剩余的溶液，换用30KD的超滤膜超滤，收集滤液A；超滤仪中剩余的溶液，换用50KD的超滤膜超滤，收集滤液B；超滤仪中剩余的溶液，换用100KD的超滤膜超滤，收集滤液C；超滤仪中剩余的溶液，换用150KD的超滤膜超滤，收集滤液D。将A、B、C、D四种溶液分别减压浓缩后，再冷冻干燥，得到样品A分子量为10KD-30KD，样品B分子量为30KD-50KD，样品C分子量为50KD-100KD，样品D分子量为100KD-150KD；
混合A、B、C、D四种成分，混合均匀，即得分子量为10-150KD的茶多糖。
实施例3：降血糖的片剂
称取黄连素25g，茶多糖(实施例1制备的茶多糖)1000g，加乳糖混匀，以70％乙醇为粘合剂，制粒，干燥，加入适量硬脂酸镁，压片，即得片剂。
实施例4：降血糖的胶囊剂
称取黄连素20g，茶多糖(实施例1制备的茶多糖)500g，加乳糖混匀，以70％乙醇为粘合剂，制粒，干燥，装入胶囊，即得胶囊剂。
实施例5：降血糖的口服液
乳化剂吐温-80 125g，溶于水中，称取黄连素25g，茶多糖(实施例2制备的茶多糖)150g，研磨制成初乳，再加水至5000mL，即得溶液(口服)。
实施例6：降血糖的肠溶胶囊
称取黄连素25g，茶多糖(实施例2制备的茶多糖)500g，装入肠溶性胶囊，即得肠溶胶囊。
实施例7：降血糖的肠溶片
称取黄连素25g，茶多糖(实施例2制备的茶多糖)500g，加入羧甲基淀粉纳700g，肠溶片包衣配制液800mL，药用硬脂酸镁600g，药用糊精适量，按常规薄膜包衣工艺制作本发明的肠溶片。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (11)
1.一种用于降血糖的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物由以下重量份的成分制成：黄连素25份，茶叶提取物150份，所述茶叶提取物为分子量为10KD-150KD的茶多糖。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述分子量为10KD-150KD的茶多糖由以下方法制备：
1）取茶，加6-7倍量95%乙醇，回流提取3次，每次2小时；弃去乙醇提取液，残渣继续用7-8倍量去离子水回流提取3次，每次2小时；合并水提取液，浓缩至干，即得茶多糖；
2）称取茶多糖1.0g，加50mL去离子水加热溶解，热滤，滤液倒入超滤仪中，先用截留分子量为10KD的超滤膜超滤，超滤仪中剩余的溶液，换用30KD的超滤膜超滤，收集滤液A；超滤仪中剩余的溶液，换用50KD的超滤膜超滤，收集滤液B；超滤仪中剩余的溶液，换用100KD的超滤膜超滤，收集滤液C；超滤仪中剩余的溶液，换用150KD的超滤膜超滤，收集滤液D；将A、B、C、D四种溶液分别减压浓缩后，再冷冻干燥，得到样品A分子量为10KD-30KD,样品B分子量为30KD-50KD,样品C分子量为50KD-100KD，样品D分子量为100KD-150KD，混合A、B、C、D四种成分，混合均匀，即得分子量为10-150KD的茶多糖。
3.含权利要求1或2所述的药物组合物的制剂，其特征在于，该制剂由药物组合物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。
4.根据权利要求3所述的制剂，其特征在于，所述制剂为片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。
5.根据权利要求3所述的制剂，其特征在于，所述制剂为肠溶制剂。
6.根据权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述制剂为肠溶胶囊或肠溶片。
7.一种制备权利要求3-5任一项所述制剂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将茶叶提取物、黄连素与药学上可接受的载体或稀释剂按照等量递加法混合均匀，制成制剂。
8.权利要求1或2所述的药物组合物或权利要求5-7任一项所述的制剂在制备用于降血糖的药物和保健品中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述降血糖为降低机体胰岛素分泌不足导致的高血糖或胰岛素不敏感所致的高血糖。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述降血糖为治疗糖尿病。
11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述糖尿病为I型糖尿病、II型糖尿病、妊娠糖尿病或其他特殊类型的糖尿病。
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