CN102482631A - 适于在离心处理后选择性地提取样品的微流体装置及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及适于在离心处理后选择性地提取样品的微流体装置及其使用方法。一些实施例利用染料来选择性地提取样品。其它实施例利用地理特征来选择性地提取样品。也公开了其它实施例。

Description

适于在离心处理后选择性地提取样品的微流体装置及其使用方法
关联申请的交叉引用
本申请要求享有申请日为2009年7月7日的美国临时专利申请No.61/223,412的优先权。本申请也要求享有申请日为2009年7月7日的美国临时专利申请No.61/223,413的优先权。在此通过引用将这两个申请的整体内容结合在本说明书中。
技术领域
本发明总体涉及微流体细胞仪系统，具体而言，涉及适于在离心处理后选择性地提取样品的微粒体装置及其使用方法。
背景技术
二十多年前，基于流式细胞仪的细胞分选术被首次引入到研究领域。这是一种已经被广泛用于生命科学研究等诸多领域的技术，成为遗传学、免疫学、分子生物学和环境学等领域工作人员的重要工具。与诸如免疫淘选(immuno-panning)和磁柱分离之类的体(bulk)细胞分离技术不同，基于流式细胞仪的细胞分选设备以每秒几千个细胞或者更高的速度对个别细胞或粒子连续地进行测量、归类并分选。这种对单个细胞“逐个”进行的快速处理使得流式细胞仪成了从其它异质细胞悬液中提取高纯度细胞亚群的、独特且极具价值的工具。
用以分选的材料通常用荧光材料以某种方式标记。当细胞经过聚焦集中、强度极高的光束(通常为激光光束)时，关联于该细胞的荧光探测器便发出荧光。计算机记录用于各细胞的发射强度。这些数据接着被用来对各细胞进行归类以用于具体的分选操作。基于流式细胞仪的细胞分选术已经被成功地应用到上百种细胞类型、细胞成分和微生物，以及多种尺寸相当的无机粒子中。
流式细胞仪也被广泛地用来快速地分析异质细胞悬液以识别成分亚群。其中发现使用了基于流式细胞仪的细胞分选的应用示例包括：用于AIDS研究的免疫系统细胞的稀有群体的分离、用于癌症研究的畸形细胞的基因分离、用于遗传学研究的特定染色体的分离和用于环境学研究的各种微生物的分离。例如，被荧光标记的单克隆抗体通常被用作识别免疫细胞诸如T淋巴细胞和B淋巴细胞的“标记”，临床实验室经常使用该技术来对HIV感染者的“CD4阳性”T细胞进行计数，并且他们还使用该技术来识别与各种白血病和淋巴瘤癌相关的细胞。
最近，人们感兴趣的两个领域除了严格的研究应用之外，便是让细胞分选走近临床和对病人的治疗应用。首先是从对化学制药的研发转向对生物制药的研发。例如，许多新的癌症疗法利用了生物材料。这些疗法包括一类基于抗体的癌症治疗。基于流式细胞仪的细胞分选器可以在这些产品的识别、发展、净化以及最终的生产过程中发挥重要的作用。
与此相关的便是在护理病人过程中转向使用细胞代替治疗。目前关于干细胞的热门研究均围绕一个全新的医学领域展开，其通常被称为再生疗法或再生医学。这些疗法可能往往要求从病人的组织中分离出大量的比较罕见的细胞。例如，可从骨髓中分离出成年干细胞，并且最终将其作为再注入物的一部分返回到分离了成年干细胞的病人体内。流式细胞仪和细胞分选是能够提供这种疗法的重要组织处理工具。
存在两种目前正被广泛使用基本类型的细胞分选器。他们分别是“液滴细胞分选器(droplet cell sorter)”和“流体切换细胞分选”。液滴细胞分选器利用微液滴作为容纳体来将所选择的细胞输送到收集器。通过将超声波能量耦合到喷射流来形成该微液滴。接着以静电方式将该液滴引导到所期望的位置，其中该液体含有被选择用以分选的细胞。这是一个非常高效的处理，每秒钟允许从单流中分选多达90,000个细胞，该处理主要受液滴生成频率和照明所需时间的限制。
Durack等人的美国公开专利申请No.2005/0112541 A1对现有的流式细胞仪系统进行了详细的描述。
然而，液滴细胞分选器在生物安全(biosafe)方面并不十分优异。在一部分液滴形成处理中所生成的气溶胶会携有生物危险材料。由此，已经发展了一种包含在生物安全柜中的生物安全液滴细胞分选器，其可以在基本封闭的环境中操作。不幸的是，这种类型的系统自身并不适用于临床环境下患者样本的常规分选所需求的无菌状态和操作保护。
基于流式细胞仪的细胞分选器的第二种类型为流体切换细胞分选器。大多数流体切换细胞分选器利用压电装置来驱动机械系统，其中该机械系统会将一部分流动样品转移到收集容器中。与液滴细胞分选器相比，流体切换细胞分选器因被用来转移样品流的机械系统的循环时间而具有较低的最大细胞分选率。该循环时间，即样品的初始分流与恢复到稳定的未分选的流动之间的时间，通常远远高于液滴细胞分选器上液滴生成器的周期。而该较长的循环时间限制了流体切换细胞分选器每秒钟处理细胞的速率。由于同样的原因，被流体细胞分选器所切割的流段通常至少是来自液滴发生器的单个微滴的体积的十倍。相应地，这会导致流体切换分选器的收集容器与液滴分选器的收集容器相比，细胞浓度较低。
新一代微流体技术极有希望提高流体切换装置的效率并在概念上类似于电子集成电路的芯片上提供细胞分选功能。已经证实：许多微流体系统能够成功地分选异质细胞群中的细胞。其优点在于其完全地自我包含、易于消毒并且可以作为一次性部件被大规模制造(由此获得足够的生产效率)。
图1示出了普通的微流体装置，总体上由标号10表示。微流体装置10包括基底12，其中基底12具有通过本领域所公知的任何常规处理形成于其中的流体流通道14。基底12可以由玻璃、塑料或任何其它常规材料形成，并且可以是大致透明的或者其一部分可以是大致透明的。在一些实施例中，基底12被注塑成型。在一些实施例中，基底12包括工业塑料，如环烯烃聚合物(Cyclo Olefin Polymer，COP)或其它塑料。因此，基底12是透明的，使得细胞仪光学模块可以如下所述来分析样品流体流。在一个实施例中，微流体装置10是一次性的。
基底12还具有三个耦合到该基底12的端口16、18和20。端口16是用于鞘流体的入口。端口16具有流体连通到与流体流通道14结合的流体流通道22的中心轴通路，使得从外部供应器(未示出)进入端口16的鞘流体可进入流体流通道22中，并接着流入到流体流通道14中。该鞘流体供应器可以通过本领域技术人员所公知的任何常规耦合机构连接到端口16。在一个实施例中，该鞘流体包括缓冲剂或缓冲液。例如，在PH值约为7.0的水中，该鞘流体包含0.96％的Dulbecco’s磷酸盐缓冲盐水(w/v)、0.1％BSA(w/v)。
端口18也具有通过样品注入管24流体连通到流体流通道14的中心轴通路。样品注入管24被布置为与流体流通道14的水平轴同轴。在鞘流体被注入到端口16中的同时，将细胞的液体样品注入到端口18中，因此这会导致流经流体流通道14的细胞被鞘流体所包围。流体流通道14和22，以及样品注入管24的维度和构造被选择为使得当鞘/样品流体流经该装置10时，其呈现出本领域所公知的层流。端口20被耦合到流体流通道14的末端，使得该鞘/样品流体可以从该微流体装置10中流出。
当鞘/样品流体流经流体流通道14时，可以在样品注入管24与出口20之间的一些位置处使光源透过基底12并照射到流体流通道14中，并通过细胞仪技术对其进行分析。另外，可以更改微流体装置10，以用于本领域所公知的细胞分选操作。
尽管已经证实与上述微流体装置类似的基本微流体装置运作状况良好，但是需要对现有技术中采用了微流体装置的细胞仪系统进行改进。本发明意在满足这种需要。
发明内容
本发明涉及适于在离心处理后选择性地提取样品的微流体装置及其使用方法。一些实施例利用染料来选择性地提取样品。其它实施例利用地理特征来选择性地提取样品。
在一些实施例中，公开了一种在微流体细胞仪系统中分析样品流体的方法，该方法包括以下步骤：a)将样品供给微流体装置中的样品槽；b)对所述微流体装置进行离心处理，以在所述样品槽内产生第一样品层和第二样品层；c)从所述第一样品层中提取第一流体；以及d)当被提取的所述第一流体处在所述微流体装置中时，对被提取的所述第一流体进行分析。
在其它实施例中，公开了一种微流体装置，所述微流体装置包括样品槽，所述样品槽具有样品入口，用以接收进入到所述微流体装置中的样品，所述样品槽具有第一末端和第二末端；以及样品出口，所述样品出口流体连通到所述样品槽，所述样品出口位于所述第一末端与所述第二末端之间，其中可通过所述样品出口对样品进行取样以形成取样样品，并且不在所述第一末端处和所述第二末端处对所述取样样品进行取样。
在另一实施例中，公开了一种微流体装置，所述微流体装置包括样品槽，所述样品槽具有样品入口，用以接收进入到所述微流体装置中的样品，所述样品槽具有第一末端和第二末端；第一样品出口，所述第一样品出口流体连通到所述样品槽，所述第一样品出口位于所述第一末端与所述第二末端之间；以及第二样品出口，所述第二样品出口流体连通到所述样品槽，所述第二样品出口位于所述第一样品出口和所述第二末端之间，其中可通过所述第一样品出口对样品进行取样以形成第一取样样品，并且不在所述第一末端处和所述第二末端处对所述第一取样样品进行取样，以及其中可通过所述第二样品出口对样品进行取样以形成第二取样样品，并且不在所述第一末端处和所述第二末端处对所述第二取样样品进行取样。
也公开了其它实施例。
附图说明
图1是现有技术的微流体装置的立体图。
图2是根据本发明第一实施例的微流体装置的概要正视图。
图3是根据本发明第二实施例的微流体装置的概要正视图。
图4是根据本发明第二实施例的微流体装置的概要正视图。
图5是根据本发明第二实施例的微流体装置的概要正视图。
具体实施方式
为了提高对本发明原理的理解，现在将参考附图中所示例的实施例，并且将使用特定的语言来描述相同的特征。然而，应理解，由此并不意在限制本发明的范围，而意在保护本发明所涉及领域的技术人员通常能够理解的、所示例装置和方法的替代和进一步修改以及所示例的本发明原理的进一步应用。
本发明总体针对用于在使用了细胞仪(诸如流式细胞仪或图像细胞仪)的微流体装置上对生物样品进行分离和/或分析的系统。为了增加细胞仪的工作效率，期望以通常包含了多种希望被单独研究或隔离的细胞的样品开始。本领域所公知的方法之一便是在进行细胞仪分析之前对该样品进行离心处理。在离心处理之后，样品成分将被分离到层中。由于质量、密度和比重等因素，接着可以更容易地提取所期望的成分或细胞群。该处理是非常普遍的试验手段，并且出于此目的，许多普通样品容器和离心装置在市场上都能够买到。但是，该流程可能导致样品层在从初始收集容器传送到微粒体装置的过程中重新混合。通过使该微粒体装置本身在离心处理过程中适于容纳样品，可以减少层在离心处理之后和通过细胞仪进行分析之前的混合。这也可以消除对多个容器的需求，并且减少引入外界污染物(或者将潜在的有害样品成分释放到外界环境中)的可能性。由于微流体装置能够被制造为进行灭菌(例如，被暴露给γ辐射)，所以能够在封闭、无菌的环境中进行离心处理、细胞仪测量和收集被分选的部分的整个处理。更重要的是，离心处理和材料在容器之间的传送可能导致损失10％或者更多的细胞。当包含较少的细胞数目时，该损失是不可容忍的，实际上在样品容积较低的很多场合下，甚至不可能应用微量离心处理。
染料-选择性地提取样品
在一个实施例中，图2示出了装置200，其中该装置200被构造为实现包含在生物成分中的样品分离。该装置200包括样品槽202，用以经由端口206接收来自外部源(未示出)的样品204。在一些实施例中，当将该装置200放置在离心机中时，样品槽202被延长，以便于样品成分的梯度分离。可以将本领域所公知的、通常被用来基于样品成分的密度来方便分离处理的各种化学添加剂，诸如非限制性示例Ficoll-Hypaque添加到样品204中，以增加分离效率。在一些实施例中，可以在制造过程中将上述化学添加剂添加到样品槽202中，从而消除对用户在采样处理中添加它们的需求。另外，在一些实施例中，可以将染料添加到Ficoll-Hypaque中，以在下述的层之间提供色彩差异。
本领域所属技术人员应理解，微流体装置可能受到沿样品槽202的纵轴任一方向上的离心力。对于Ficoll-Hypaque方法，细胞被层压在Ficoll-Hypaque溶液上，使得相对于离心力而言，细胞位于“上方”。在其它实施例和其它附加实施例中，可以颠倒整个位置。通过在分析之前、离心处理过程中、分析过程中和/或分选之后，将该微流体装置用作样品容器，用户可以将少量样品从一部分实验室中的离心机移到位于它处的细胞仪中，并且在分析之后可接着将该样品运送到第三位置处，所有处理均在无菌环境下进行。
通道208经由端口210被连接在样品槽202的一个末端处，以在离心处理后取回期望的样品成分。作为一个非限制的示例，可以将人体血液注入到样品槽202中，之后，使装置200经受离心处理，以从较大的粒细胞214和血红细胞216中分离出单核细胞212，即淋巴细胞和单核细胞。在离心处理之后，可以打开端口210，使得样品204能够在装置200内流经通道208到达分析部218，以便进一步进行细胞仪分析和/或分离。例如，细胞仪分析部218可以在切换元件223之前的流动通道中对细胞进行照相，并且接着通过使用该图像或基于荧光的常规方法对其进行识别，并接着通过对切换元件223执行恰当的控制，将先前所隔离的单核细胞子集分流到提取槽222中，并且将不期望的细胞分流到废弃物槽224中。在一些实施例中，槽222和224经由端口(未示出)连通，以允许从微流体装置200中取出所容纳之物。在分析部218中所执行的具体分析和/或分选对本发明而言并不是关键的，并且可以在不同的实施例中以各种不同的方式执行。
在一些实施例中，由细胞仪分析部218执行的分选多于两级分选。在一些实施例中，由细胞仪分析部218执行的分选多于三级分选。在其它实施例中，由细胞仪分析部218执行的分选多于四级分选。在实施分选过程中，一些实施例至少包括5个通道。其它实施例至少包括10个通道。其它实施例至少包括100个通道。其它实施例至少包括256个通道。
可以通过毛细作用或本领域所公知的其它微流体流动手段使流动开始经过通道208。上述方法可能要求微流体装置包括附加的通道或特征(未示出)。在一个实施例中，首选将样品细胞添加到样品槽202中，并且接着添加Ficoll-Hypaque溶液。该微流体装置接着在所施加的朝向端口206的力的作用下经受离心处理。当该样品流经通道208时，较轻的单核细胞212将首先被移除。当通过分析部218检测包含在Ficoll-Hypaque溶液内的个别染料时，指示细胞仪分析和分选部218关闭端口210，或阀220(在替代实施例中)。在此情况下，该染料将与plasma-Ficoll界面处于同一层中，其中plasma-Ficoll界面位于淋巴细胞层的正下方。粒细胞214和血红细胞216将被保持在plasma-Ficoll界面层下方，因此被保持在染料下方。这使得在梯度分离方法中抛弃不期望成分的同时，能够提取包含在样品204中的所有单核细胞212。在第二示例中，坏死细胞因其较高的密度，能够在没有任何化学添加剂的情况下被轻松地分离。除了血液之外，本发明实现了可以此方式分析其它类型的生物或化学样品，应理解，本发明对那些能够通过离心处理而被分离的任何样品均是有用的。
当将染料添加到样品溶液时，必须以使染料在离心处理之后停留在校准层上的方式来完成处理。在一些实施例中，为了实现上述目的，染料被设计为具有校准密度。在其它实施例中，可以在不对Ficoll-Hypaque的比重产生消极影响的情况下，以分子量级来结合染料与Ficoll-Hypaque(或其它化学添加剂)。
在其它实施例中，可以使用各种分别具有不同比重和/或染料色彩的密度梯度的化学物质来检测并从样品中提取个别成分。例如，如图3所示，细胞仪分析部318可以被构造为使来自第一样品成分的、被分选的细胞或粒子(例如病毒粒子)分流到第一提取槽322中，直到开始检测与密度梯度化学层(其保持第二样品成分304)相对应的第一着色染料。该装置300与装置200类似，并且使用相同的标号来指代相同的构件。在离心处理之后，细胞仪分析部318将调节分析参数，以对正被分析的新型细胞进行计数，并且将被分选的细胞分流到第二提取槽326中。当检测第二着色染料溶液(其保持第三样品成分306)时，细胞仪分析部318将接着调节分析参数，以对正被分析的新型细胞进行计数，并且将所有剩余细胞分流到废弃物槽324中，和/或关闭阀220以终止样品流。在一些实施例中，槽322、324和326经由端口(未示出)连通，使得能够从微流体装置300中取出所容纳之物。在分析部318中所执行的具体分析和/或分选对本发明而言并不是关键的，并且可以在不同的实施例中以各种不同的方式执行。
在一些实施例中，由细胞仪分析部318执行的分选多于两级分选。在一些实施例中，由细胞仪分析部318执行的分选多于三级分选。在其它实施例中，由细胞仪分析部318执行的分选多于四级分选。在实施分选过程中，一些实施例至少包括5个通道。其它实施例至少包括10个通道。其它实施例至少包括100个通道。其它实施例至少包括256个通道。
在一些实施例中，微流体装置包括两个以上的部分。这两部分通过任何期望的手段，例如通过非限制的示例，热粘合工艺、超声波焊接工艺或粘结工艺耦合在一起。在一个实施例中，这两部分为两半。在另一实施例中，这两部分被平面，例如平面盖和包含该部分的通道非对称地分割。在另一实施例中，组装了多个部分。依据被用来制造微流体装置的材料，耦合这两部分的其它方法对本领域技术人员将是显而易见的。
地理特征-选择性地提取样品
图4示出了另一实施例，其中装置400被构造为实现包含在样品内的生物成分的分离。该装置400与装置200类似，并且使用相同的标号来指代相同的构件。该装置400包括样品槽202，用以经由端口206接收来自外部源(未示出)的样品204。当该将装置400放置在离心机中时，样品槽202被延长，以便于样品成分的梯度分离。如上所述，可以将本领域所公知的各种化学添加剂，诸如Ficoll-Hypaque添加到样品204中，以增加其分离效率。在一些实施例中，可以在制造过程中将上述化学添加剂添加到样品槽202中，从而消除对用户在采样处理中添加它们的需求。
通道208经由端口210被连接在沿样品槽202长度的特定位置处，以在离心处理后取回期望的样品成分。端口210的精确位置由待处理的样品和期望提取的成分的性质决定，使得将端口210的位置设计在离心处理之后期望被提取的成分的位置附近。这便确保可以从样品槽202中提取最大体积的期望样品。因此，应理解，与图2所示的装置200相比，在策略上可使得装置400中的端口210的位置更精确地与期望样品成分的位置对准。
作为一个非限制的示例，可以将人体血液注入到样品槽202中，之后，使装置400经受离心处理以从较大的粒细胞214和血红细胞216中分离出单核细胞212，即淋巴细胞和单核细胞。在离心处理之后，可以打开端口210，使得样品204能够在装置400内流经通道208到达细胞仪分析部218，以便进一步进行细胞仪分析和/或分离。例如，细胞仪分析部218可以通过对切换元件223执行恰当的控制，将被分选的期望细胞分流到提取槽222中，并且将不期望的细胞分流到废弃物槽224中。在一些实施例中，也可以通过废弃物端口(未示出)将不期望的细胞从装置400中排出。在分析部218中所执行的具体分析和/或分选对本发明而言并不是关键的。
可以通过毛细作用或本领域所公知的其它微流体泵入手段使流动开始流经通道208。当该样品流经通道208时，较轻的单核细胞212因靠近端口210将首先被移除。在一些实施例中，可以在期望样品成分(例如，单核细胞212)的区域内沿样品槽202连接多个通道208和多个端口210，以便于更彻底地提取所期望的样品成分。在已经提取了一定数量的样品流体或细胞之后，指示细胞仪分析部218关闭端口210或阀220(在替代实施例中)。此数量取决于样品204的体积、待处理样品的性质和期望成分层的期望体积。
为了简化说明，示例性实施例只示出了一个在示例性装置的构件、区域和部件之间延伸的通道。但是，应理解，单通道可以代表多个细胞仪通道和多种可行的通道构造，这对于本领域技术人员是显而易见的。
在其它实施例中，可以使用多个通道从样品中提取多种成分。也可以使用两种或两种以上的Ficoll-Hypaque添加剂(或其它合适的添加剂)以在离心样品中产生附加层。例如，如图5所示，设有装置500，其中分析样品202可通过端口206装填到该装置500中。通过使用本文上述的合适添加剂，该分析样品可以在离心处理之后被分割为3个层302、304和306。通过将端口310a和310b布置为分别与层302和304对准，该装置500适于从层302和304中选择性地提取样品。可以打开端口310a和/或阀320a，使得样品302流经通道308a。细胞仪分析部318可以被构造为通过控制阀323将来自第一样品成分302的被分选细胞分流到第一提取槽322中。类似地，可以通过适当地控制阀323将来自第一样品成分302的不期望细胞分流到废弃物槽324中。一旦细胞仪分析部318确定第一样品成分302的分析完成，则指示细胞仪分析部318关闭端口310a或阀320a(在替代实施例中)。
细胞分析部318接着将调节分析参数以对待分析的新型细胞进行计数，打开端口310b使得来自第二样品成分304的流体流入该细胞仪分析部318，并且通过适当地控制阀323将被分选的细胞分流到第二提取槽326中。一旦细胞仪分析部318确定第二样品成分304的分析完成，则指示细胞仪分析部318关闭端口310b或阀320b(在替代实施例中)。
应理解，通过恰当地定位端口310a和310b，使得装置500具有样品在离心处理后呈现多层的优势。通过使用离心处理将样品成分分离到层中，并且接着通过提取端口310的战略位置以更纯净的形式提取样品成分，使得更加容易地对样品成分进行分析和分选。本领域技术人员应理解，可以利用任何数目的提取端口，以更加精确地从分析样品中提取经离心处理的样品。
鉴于上述，尽管在附图和上面的描述中已经详细阐明并描述了本发明，但其特性同样被视为示例性而非限制性的，应理解，只示出并描述了示例性实施例，并且期望保护在本发明的实质范围内所作出的所有改变和修改。

Claims (21)

1.一种在微流体细胞仪系统中分析样品流体的方法，所述方法包括以下步骤：
a)将样品供给微流体装置中的样品槽；
b)对所述微流体装置进行离心处理，以在所述样品槽内产生第一样品层和第二样品层；
c)从所述第一样品层中提取第一流体；以及
d)当被提取的所述第一流体处在所述微流体装置中时，对被提取的所述第一流体进行分析。
2.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：
e)基于步骤d)中所得到的结果，将被提取的所述第一流体的第一部分分选到第一槽中；以及
f)基于步骤d)中所得到的结果，将被提取的所述第一流体的第二部分分选到第二槽中。
3.根据权利要求2所述的方法，其中在步骤e)和f)处进行的所述分选处理从由多于二级分选、多于三级分选、多于四级分选构成的分组中选择。
4.根据权利要求2所述的方法，其中在步骤e)和f)处进行的所述分选处理采用了预定数目的微流体通道，所述预定数目从由至少5个通道、至少10个通道、至少100个通道以及至少256个通道构成的分组中选择。
5.根据权利要求2所述的方法，还包括以下步骤：
g)从所述第二样品层中提取第二流体；以及
h)当被提取的所述第二流体处在所述微流体装置中时，对被提取的所述第二流体进行分析。
6.根据权利要求5所述的方法，还包括以下步骤：
I)基于步骤h)中所得到的结果，将被提取的所述第二流体的第三部分分选到第三槽中。
7.根据权利要求5所述的方法，其中：
在第一位置处从所述样品槽中提取被提取的所述第一流体；以及
在第二位置处从所述样品槽中提取被提取的所述第二流体，所述第二位置不同于所述第一位置。
8.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：
e)在执行步骤a)之前将化学添加剂添加到所述样品槽中。
9.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：
e)在执行步骤a)之前将Ficoll-Hypaque添加到所述样品槽中。
10.根据权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：
e)在执行步骤a)之前将染料添加到所述样品槽中。
11.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)还包括将人体血液供给微粒体装置上的样品槽。
12.一种微流体装置，所述微流体装置包括：
样品槽，所述样品槽具有样品入口，用以接收进入到所述微流体装置中的样品，所述样品槽具有第一末端和第二末端；以及
样品出口，所述样品出口流体连通到所述样品槽，所述样品出口位于所述第一末端与所述第二末端之间；
其中可通过所述样品出口对样品进行取样以形成取样样品，并且不在所述第一末端处和所述第二末端处对所述取样样品进行取样。
13.根据权利要求12所述的微流体装置，还包括：
分选槽；
废弃物槽；以及
通道，所述通道被耦合到所述分选槽和所述废弃物槽；
阀，所述阀被配置在所述通道中，用以将在所述通道中流动的流体引入到所述分选槽或所述废弃物槽中。
14.根据权利要求12所述的微流体装置，还包括化学添加剂，所述化学添加剂在接收样品之前被配置在所述样品槽中。
15.根据权利要求14所述的微流体装置，其中所述化学添加剂包括Ficoll-Hypaque。
16.根据权利要求14所述的微流体装置，其中所述化学添加剂包括染料。
17.一种微流体装置，所述微流体装置包括：
样品槽，所述样品槽具有样品入口，用以接收进入到所述微流体装置中的样品，所述样品槽具有第一末端和第二末端；
第一样品出口，所述第一样品出口流体连通到所述样品槽，所述第一样品出口位于所述第一末端与所述第二末端之间；以及
第二样品出口，所述第二样品出口流体连通到所述样品槽，所述第二样品出口位于所述第一样品出口和所述第二末端之间；
其中可通过所述第一样品出口对样品进行取样以形成第一取样样品，并且不在所述第一末端处和所述第二末端处对所述第一取样样品进行取样；以及
其中可通过所述第二样品出口对样品进行取样以形成第二取样样品，并且不在所述第一末端处和所述第二末端处对所述第二取样样品进行取样。
18.根据权利要求17所述的微流体装置，还包括：
第一分选槽；
第二分选槽；
废弃物槽；以及
通道，所述通道被耦合到所述第一分选槽、所述第二分选槽和所述废弃物槽；
阀，所述阀被配置在所述通道中，用以将在所述通道中流动的流体引入到所述分第一分选槽、所述第二分选槽或所述废弃物槽中。
19.根据权利要求17所述的微流体装置，还包括化学添加剂，所述化学添加剂在接收样品之前被配置在所述样品槽中。
20.根据权利要求19所述的微流体装置，其中所述化学添加剂包括Ficoll-Hypaque。
21.根据权利要求19所述的微流体装置，其中所述化学添加剂包括染料。
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