CN102470091B - N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤“丰盈”剂和/或“丰满”剂的用途 - Google Patents
N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤“丰盈”剂和/或“丰满”剂的用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及式(I)的N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤“丰盈”剂和/或“丰满”剂的美容用途。本发明还涉及用于在选自下列部位的人体皮肤获得“丰盈”和/或“丰满”效果的美容处理方法:乳房、面部、脸颊、臀部和眼睑。CH3-(CH2)14-C(=O)-NH-CH(COOH)-CH(CH3)-CH2-CH3 (I)。
Description
本发明涉及美容和药物活性成分领域,还涉及含有所述成分的局部用组合物。
发达国家寿命的延长一直伴随着对“永葆青春”的需求,这种需求在过去30年左右已经变得更加显著。对延迟老年人皮肤松弛现象的努力反映了该需求,对个体面部面貌和表情的改善尤其反映了该需求。在保持直观反应健康的“年轻”动感外貌和苗条体形的类似方面,一些女性也一直在寻找旨在使胸部坚挺或者甚至增加其体积的方法。所述行为变化伴随着致力于皮肤的科学研究的发展,同时在大约十年左右以来,还伴随着“抗衰老”美容产品或者旨在改善皮肤整天状况的美容产品市场的快速成长。
本发明的目的是研究开发新的分子或组合物,当施用至皮肤时,由于其自身的活性,所述分子或组合物在皮肤上能够产生“丰满”作用和/或在皮肤上产生“致密”作用和/或在皮肤上产生“丰盈”作用和/或产生改善人体各部位皮肤弹性的作用,例如手、臀部、面部、胸部和眼睑。
在哺乳动物中,脂肪组织构成包围身体的贮存脂肪层,但是根据身体的面积、年龄和性别,脂肪层的厚度有所不同。在女性中,脂肪组织占总体重的20%~25%,而在男性中,脂肪组织占总体重的15%~20%。男性和女性具有不同脂肪组织分布位置,这主要归因于取决于性别的人体合成的各种激素因素的不同。由于脂肪组织的重要性,脂肪组织造就了人类体形和面部的总体外观。脂肪组织通常存在于面部、四肢、腹部、手和臀部。在女性中,脂肪组织还存在于胸部,更特别是乳房。女性的乳房由乳腺、结缔组织和脂肪组织构成。脂肪组织占乳房的一大部分,由此其比例和分布决定着乳房的大小和形状。取决于人生的阶段(妊娠期、哺乳期、青春期、明显的体重减轻、疾病),乳房中脂肪组织的比例和分布发生变化,这种变化导致乳房体积和形状发生变化,由此可造成乳房的下垂或者坚挺。对于面部,脂肪组织使其可以形成个体的特征和表情。过多的体重丧失或者皮肤老化可引起面部脂肪组织比例的降低,并导致个体特征和表情的变化。
下述方面可解释皮肤老化的机制:
皮肤由三个主要组织构成,从外表层起依次为:表皮、真皮和皮下组织。
-表皮主要由角质化细胞构成。这些细胞在基底层中增殖,然后逐渐分化,以产生表皮的各层,同时从底部移至表面,它们在此脱落。
-真皮是致密的具有纤维弹性的结缔组织,它们的产生和任何重塑主要通过成纤维细胞进行,其由负责皮肤的美观性的纤维(胶原和弹性的)分子构成的细胞外基质(ECM)以及基质组成。胶原占真皮干重的98%。基质由下列物质构成:填充细胞和纤维之间空间的大分子;保证细胞连接至ECM并主要位于真皮-表皮结合处下方的结构糖蛋白和由键合(共价键)至蛋白的葡萄糖胺聚糖(GAGs)组成的蛋白聚糖。
-皮下组织构成皮肤的深层。皮下组织由脂肪组织和结缔组织构成,并且皮下组织是完全血管化和受神经支配的。在真皮和下面移动结构(肌肉、腱、器官)的界面,皮下组织起震动吸收器的作用,并保护所述下面的移动结构免于外部机械压力。由于脂肪组织的所述性质,皮下组织还具有重要的能量、代谢和保暖作用。特别是,它以甘油三酯(TGs)的形式贮存过量的食物能量摄入,称为脂肪形成现象,以便随后能按照人体的需求重新分配所述过量的能量,称作脂解现象。脂肪组织中主要的参与者是脂肪细胞及其前体前脂肪细胞。脂肪细胞是可扩展的圆细胞形式,其含有占据整个细胞质空间并将细胞核推至细胞边缘的大脂质液泡。前脂肪细胞是成纤维细胞形态型的小细胞,其不具有任何与能量贮存相关的代谢活性。当前脂肪细胞以适当的细胞外信号存在时,它开始分化过程,以获得成熟的脂肪细胞表型。大量描述的所述体外过程需要几周时间,并且各种转录因子的协调表达使其成为可能,所述转录因子靶向脂质代谢的特异性基因(Fève等人,Grégoire等人,1998)。因此,将所述过程通常描述为脂肪形成或者脂肪细胞分化或者其他的脂肪细胞转化。最近,已表明在人类一生中脂肪组织中均存在前脂肪细胞,在成人中,其占所述组织细胞的15%-50%(Yu等人,2004;Guo等人,2006)。因此,在生命的任何时间点,前脂肪细胞可分化成脂肪细胞,由此产生脂肪组织的细胞更新或者所述组织的扩充。然而,似乎是:人发育的某些阶段对于脂肪细胞数量的增加是必需的,由此,在形成脂肪数量中是必需的。出生第一年和青春期是特别重要的两个阶段,在此期间脂肪组织在其组成上更易发生显著的变化(Smith等人,2006)。
困扰许多个体的皮肤老化、更特别是面部老化的特征在于两个组织现象:下垂和萎缩为。
-下垂与所有皮肤组分(组织、韧带、肌肉)的张力的丧失有关。表皮组织失去弹性,并与下面的脂肪一起出现下垂(Dumont等人,2007)。所述现象无任何视觉特征,除了加重的鼻褶、下颊下落等。
-萎缩发生于第二个步骤,并在随着衰老发生于面部的体积变化中起主要作用。萎缩公认地涉及脂肪组织,而且涉及所有的其他结构层(真皮、表皮、肌肉等)。所述脂肪组织萎缩现象还通过“内含物-容器”失衡而使下垂恶化(Dumont等人,2007)。这种现象的视觉后果是观察到面部凹陷,以及皮肤体积和/或丰满度的缺失。衰老过程中,面部的脂肪组织会发生一些生理和代谢方面的变化。可通过各种现象解释观察到的脂肪组织萎缩,所述现象开始于脂肪细胞和前脂肪细胞,并影响脂肪细胞和前脂肪细胞。就脂肪细胞而言,观察到其尺寸的缩小,但是它们的数量保持不变(I.Karagiannides等人,2001,2006)。这还可通过观察到它们蓄积脂质的能力和它们进行脂解能力的下降来解释。衰老过程也影响前脂肪细胞。的确,前脂肪细胞分化成脂肪细胞的能力下降,其后果是由其产生的脂肪细胞蓄积脂质的能力下降(I.Karagiannides等人,2001,2006)。此外,含有高浓度与大量巨噬细胞和促炎症反应细胞因子偶联的细胞毒游离脂肪酸的脂肪组织可损害休眠的前脂肪细胞,使其分化成不完善的脂肪细胞(Guo等人,2006;I.Karagiannides等人,2006)。Kirkland已描述了由此形成的非功能化细胞(Kirkland等人,2002),并将其称作MAD(间质脂肪细胞样缺乏)细胞。所述MAD细胞是比功能脂肪细胞更小的且对胰岛素反应性更低的细胞。它们的特征还在于脂肪酸代谢能力降低,并且产生更大量的TNFα细胞因子。TNFα细胞因子的大量产生阻止相邻前脂肪细胞的分化,并反过来可使前脂肪细胞转化成MAD细胞。人皮肤弹性的丧失,更具体地讲人体某些部位例如乳房、面部、面颊、臀部和眼睑的弹性丧失可通过下述事实解释,即真皮含有弹性纤维和胶原纤维,这些纤维主要决定人皮肤的粘弹性,并且人皮肤的最深层皮下组织也具有所述性质。的确,皮下组织以取决于其厚度的不同方式挤压真皮;由此,皮下组织厚度增加可引起皮肤生物力学性质的变化,特别是使皮肤的弹性增加。为了满足个体希望改善他们的体形或者他们的胸部或者他们的手或者他们的面部外观的需求,出现了手术的解决方法。已知所述技术之一为灌脂,并且该项技术由下述步骤组成,即从个体人体的一部位取出脂肪组织,以便将其植入到同一个体身体的另一部位的皮肤下,该部位预期通过增加体积来校正。然而,这种手术具有侵害性并且价格昂贵的缺点,并且在人体上会留下在很长一段时间内可以看得见的伤疤。还存在一些“抗衰老”或“防皱”的活性成分,可将它们以各种方式施用至人类。这些“活性”成分中的数种能够调节正常人成纤维细胞的表型和/或性质。例如,许些美容活性成分能够刺激真皮中存在的胶原的成纤维细胞的形成。因此,在美容领域所用的氨基酸的N-酰基衍生物中,一些显示抗衰老的生物学性质,例如二棕榈酰羟脯氨酸(SepiliftTM DPHP)。其他活性成分更侧重于保护表皮,具有游离基清除作用或者依据分化和/或免疫机制具有维持和/或改善表皮机能的作用。另一方面,还已知少数抗衰老活性成分能够通过刺激构成所述皮下组织的细胞代谢而作用于皮下组织中存在的脂肪组织,以便再增加皮肤的体积和/或使皮肤“丰满”和/或使皮肤再具有弹性。在所述抗衰老活性成分中,应提及的是由植物甾醇皂苷三萜类化合物(描述于专利申请WO2008/015639 A2中)或者基于印度穆库尔没药(Commiphora mukul)提取物制成的,所述物质不受衰老改变地作用于细胞。国际申请WO 90/14429 A1描述了N-十六酰异亮氨酸并教导将其用于制备洗涤剂组合物。申请JP 2003-096039描述了制备N-酰基氨基酸盐的方法,并且还描述了它们的表面活性和它们的抑制真菌作用。该申请特别描述了N-十六酰异亮氨酸的钠、钾、三乙胺和精氨酸盐。国际申请WO 98/09611描述了N-酰基氨基酸作为皮肤生理学调节剂的用途,更特别是作为刺激细胞代谢和重建皮肤屏障的物质的用途。J.Morelle(Parfums cosmétiques savons de France,巴黎,第3卷,第2期,1973年2月1日)所出版的题目为“Lipoaminoacides et cosmetology”[“脂氨基酸与美容学”]的文献描述了N-酰基氨基酸因其抗皮脂溢、抗真菌和抗菌性质而作为细胞发育过程的促进剂的用途。申请FR 2 873 575 A1描述了含有用于提供抗皮肤衰老作用的N-酰基氨基酸的美容组合物,通过改善结缔组织而显示皮肤弹性恢复作用。
据发明人所知,还未报道N-酰基氨基酸能通过改善脂肪细胞分化和/或通过诱导脂肪细胞总的表面积的增加和/或通过恢复脂肪细胞表型而调节存在于皮下组织的脂肪组织中的细胞活性。同样也未有关于N-酰基氨基酸能够引起人体任何面积上皮下组织的脂肪组织的体积增加、由此可通过所述面积可测定的体积增加来反映的报道,或者还未有关于N-酰基氨基酸能够引起人体任何面积上皮下组织的脂肪组织的密度和厚度增加、由此可通过所述面积可视的体积增加来反映的报道。
因此,根据第一方面,本发明的目的是式(I)的N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤“丰盈”剂和/或“丰满”剂的美容用途。
CH3-(CH2)14-C(=O)-NH-CH(COOH)-CH(CH3)-CH2-CH3 (I)
“式(I)的N-十六酰异亮氨酸的美容用途”的表述特别是指美化和/或改善人体外观的用途。
“式(I)的N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤“丰盈”剂”的表述指式(I)的N-十六酰异亮氨酸的任何作用,其能引起人体任何面积上皮下组织的脂肪组织的体积增加,由此通过所述面积可测定的体积增加来反映。“丰盈”作用可通过超声或者适合于人体该面积的技术来分析、测定和定量。例如,为了证明对女性乳房的“丰盈”作用,测定胸部的变化是可能的。
“式(I)的N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤“丰满”剂”的表述指式(I)的N-十六酰异亮氨酸的任何作用,其能引起人体任何面积上皮下组织的脂肪组织的密度和厚度的增加,由此可通过所述面积可视的体积增加来反映。对脂肪组织的“丰满”或者“再增密”作用可通过条纹投影技术(fringeprojection technique)或者通过超声来分析。
在关于证明式(I)的N-十六酰异亮氨酸的“丰盈”作用和“丰满”作用的描述中,申请人已经证明式(I)的N-十六酰异亮氨酸能够调节存在于人皮肤皮下组织的脂肪组织中的细胞活性。在“调节存在于人皮肤皮下组织的脂肪组织中的细胞活性”的表述中,更具体地是指式(I)的N-十六酰异亮氨酸具有下列性能中任何一个、几个或者所有性能:
-它改善存在于人皮肤皮下组织的脂肪组织中的脂肪细胞分化;
-它增加存在于人皮肤皮下组织的脂肪组织中的脂肪细胞的总表面积;
-它恢复人皮肤皮下组织的脂肪组织中的脂肪细胞的表型,由此防止人皮肤皮下组织的脂肪组织中变异细胞的产生。
式(I)的N-十六酰异亮氨酸可以是游离酸形式或者是部分或完全的盐化形式。当N-十六酰异亮氨酸是盐形式时,盐形式特别包括碱金属盐,例如钠盐、钾盐或锂盐;碱土金属盐,例如钙盐、镁盐或锶盐;铵盐或者氨基醇盐,例如(2-羟基乙基)铵盐。盐形式还可包括金属盐,例如锌或锰的二价盐,或者铁、镧、铈、铝的三价盐。一般来讲,除了其他方面的原因,式(I)的N-十六酰异亮氨酸的盐化程度将取决于它的pKA和它要掺入的组合物的盐浓度。在下文的描述中,术语“式(I)的N-十六酰异亮氨酸”是指游离形式的式(I)的N-十六酰异亮氨酸或者部分盐化或完全盐化形式的式(I)的N-十六酰异亮氨酸。
式(I)的N-十六酰异亮氨酸通常利用下式十六烷酸的活化衍生物作为酰化试剂,通过异亮氨酸或其盐的N-酰化得到:
CH3-(CH2)14-C(=O)-OH,
所述活化衍生物为例如该酸的对称酸酐、该酸的甲酯或者酰卤如酰氯或酰溴。酰化反应是本领域技术人员所公知的。例如以WO 98/09611公开的专利申请中所描述的。
根据更具体的方面,本发明的主题是式(I)的N-十六酰异亮氨酸的美容用途,特征在于式(I)的N-十六酰异亮氨酸还促进人皮肤的皮下组织的脂肪组织扩张。
“促进人皮肤的皮下组织的脂肪组织扩张”的表述是指人皮肤的皮下组织的脂肪组织在质量和/或体积和/或厚度方面的任何增加。
根据更具体的方面,本发明的主题是式(I)的N-十六酰异亮氨酸的美容用途,特征在于式(I)的N-十六酰异亮氨酸还刺激人皮肤的弹性增加和/或刺激人皮肤的“丰盈”效果和/或促进人皮肤的“丰满”效果。
人皮肤具有根据下面两个参数评价的流变学性质:
-弹性参数;
-张力参数,其根据人体的不同区域而变化。
在本发明的上下文中,“式(I)的N-十六酰异亮氨酸刺激人皮肤的弹性增加”的表述旨在表示式(I)的N-十六酰异亮氨酸的任何作用,其引起人皮肤在水珠冲撞试验(ballistometry)中的弹性系数下降,由此相应于人皮肤弹性的增加。
可通过基于研究所述参数变化的技术例如涉及“CutometerTM”或者“Dermal Torque MeterTM”或者“BallistometerTM”使用的技术来分析、测定和定量生物力学性质。
根据第二方面,本发明的主题是获得人体的一部分皮肤的“丰盈”和/或“丰满”效果的美容处理方法,所述人体的一部分皮肤选自乳房、面部、脸颊、臀部和眼睑,特征在于所述处理方法将含有有效量式(I)的N-十六酰异亮氨酸的美容组合物施用至所述部位。
“施用至选自乳房、面部、脸颊、臀部和眼睑的一部分人体皮肤,以获得该部位皮肤的“丰盈”和/或“丰满”效果的式(I)的N-十六酰异亮氨酸的有效量”的表述旨在表示0.000001重量%~0.5重量%、更特别是0.00001重量%~0.05重量%,尤其更特别是0.0001重量%~0.005重量%的量的式(I)的N-十六酰异亮氨酸。
根据更具体的方面,本发明的主题是如上所定义的用于人体的美容处理方法,特征在于其还使促进人皮肤的皮下组织的脂肪组织扩张成为可能。
根据甚至更具体的方面,本发明的主题是如上所定义的用于人体的美容处理方法,特征在于其在乳房和/或面部和/或面颊和/或臀部和/或眼睑施用有效量的式(I)的N-十六酰异亮氨酸,以获得皮肤的弹性增加和/或“丰盈”效果和/或“丰满”效果。
在为本发明的主题的用于人体的美容处理方法中,通常将式(I)的N-十六酰异亮氨酸包含于含有美容上可接受成分的组合物中。
根据1976年7月27日的欧洲经济共同体理事会指令号76/768/EEC,1993年6月14日修订的指令号93/35/EEC,在为本发明主题的美容处理方法中所用的组合物中,与式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的成分的定义中所用的“美容上可接受的”的表述指所述组合物含有任何预期与人体各部分(表皮、体毛和头发系统、指甲、嘴唇和生殖器官)或者与牙齿和口腔粘膜接触的物质或制剂,非排他地或主要地用于下述目的,即清洁它们、使它们变得芳香、修饰其外表和/或校正其身体气味和/或保护它们或者使它们维持于良好状态的任何物质或制剂。
在为本发明主题的用于人体的美容处理方法中所用的含有式(I)的N-十六酰异亮氨酸的组合物通常是稀水溶液剂或者含水的醇溶液剂形式、简单的或多重的乳剂形式,例如油包水(W/O)、水包油(O/W)或者水包油包水(W/O/W)乳剂,其中油是植物或矿物性的,或者是散剂形式。它们还可分散或浸入纺织原料或者非针织材料上,无论这是否涉及湿巾、纸、毛巾或布。
更特别的是利用上述的纺织物载体或者非针织材料,将在本发明主题---用于人体的美容处理方法中所用的含有式(I)的N-十六酰异亮氨酸的组合物通过直接或间接的局部途径施用。
在本发明主题---用于人体的美容处理方法中所用的含有式(I)的N-十六酰异亮氨酸的组合物中,通常将式(I)的N-十六酰异亮氨酸以相对于100%的所述组合物重量的0.01重量%~10重量%,更特别是0.1重量%~5重量%,并且相当特别是1重量%~5重量%的量使用。
一般来讲,将式(I)的N-十六酰异亮氨酸与本发明主题---用于人体的美容处理方法中施用的美容组合物中所用的多种类型的佐剂或者活性成分联合,无论它们是脂肪物质、有机溶剂、稠化剂、胶凝剂、软化剂、洗涤剂表面活性剂、溢脂剂(overfatting agents)、增稠剂和/或胶化表面活性剂、抗氧化剂、遮光剂、稳定剂、发泡剂、芳香剂、乳化表面活性剂、水溶助剂、增塑剂、溢脂剂、嫩滑剂(texturing agents)、色素、掩蔽剂、螯合剂、防腐剂、化学防晒剂(chemical screening agents)或矿物防晒剂(mineralscreening agents)、精油、燃料、色素、亲水或亲脂活性剂、保湿剂如甘油、防腐剂、染料、芳香剂、美容活性剂、矿物或有机遮光剂、矿物填充剂(如氧化铁、氧化钛和滑石)、合成填充剂(如尼龙和交联的或非交联的聚(异丁烯酸甲酯))、硅酮弹性体、绢云母或者植物提取物或者其他的脂囊泡或者任何其他的通常在美容工业中所用的成分。
可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的油的示例可以提及括矿物油例如液体石蜡、液体石油胶冻剂、异链烷烃或者白色矿物油;动物来源的油例如角鲨烯或者角鲨烷;植物油例如甜杏仁油、椰子油、蓖麻油、荷荷葩油、橄榄油、油菜籽油、花生油、向日葵油、小麦胚芽油、玉米胚芽油、大豆油、棉籽油、苜蓿油、御米油、南瓜子油、月见草油、小米油、大麦油、黑麦油、红花油、桐树油、西番莲油、榛子油、棕榈油、乳木果油、杏仁油、美容油(beauty leaf oil)、sysymbrium oil、鳄梨油、金盏花油;乙氧基化植物油;合成油,例如脂肪酸酯如肉豆蔻酸丁酯、肉豆蔻酸丙酯、肉豆蔻酸十六烷酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、硬脂酸十六烷酯、硬脂酸异丙酯、硬脂酸辛烷酯、硬脂酸异十六烷酯、油酸十二烷酯、月桂酸己酯、丙二醇二辛酸酯;衍生自亚油酸的酯,例如羊毛脂酸异丙酯或羊毛脂酸异十六烷酯;脂肪酸甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯,例如三庚酸甘油酯;苯甲酸烷基酯;聚α烯烃;聚烯烃例如聚异丁烯;合成的异烷烃例如异十六烷或者异十二烷;全氟代油和硅油。后者中,特别要提及的是二甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、胺类改性的硅酮、脂肪酸改性的硅酮、醇类改性的硅酮、醇类和脂肪酸改性的硅酮、聚醚改性的硅酮、环氧改性的硅酮、氟基改性的硅酮、环状硅酮和烷基改性的硅酮。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的其他脂肪,可提及的是由脂肪醇或者脂肪酸。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的蜡类的示例,可提及的是例如蜂蜡;腊棕榈蜡;堪地里拉蜡;小冠椰子蜡;日本蜡;软木纤维蜡或者甘蔗蜡;石蜡;褐煤蜡;微晶蜡;羊毛脂蜡;地蜡;聚乙烯蜡;氢化油;硅树脂蜡;植物蜡;在室温是固体状的脂肪醇和脂肪酸;和在室温是固体的甘油酯。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的增稠剂和/或乳化聚合物的示例,可提及的是例如丙烯酸或者丙烯酸衍生物的均聚物或共聚物;丙烯酰胺均聚物或共聚物;丙烯酰胺衍生物的均聚物或共聚物;丙烯酰氨基甲基丙磺酸、乙烯单体和氯化丙烯酸三甲胺乙酯的均聚物或共聚物;植物或生物合成来源的水胶体,例如黄原胶、梧桐胶、角叉菜胶;藻酸盐;硅酸盐;纤维素及其衍生物;淀粉及其亲水衍生物;聚氨基甲酸酯。
在可与式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的聚合电解质型聚合物中,有例如丙烯酸和2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸(AMPS)的共聚物、丙烯酰胺和2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸的共聚物、2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸和(2-羟基乙基)丙烯酸酯的共聚物、2-甲基-[(1-氧代-2-丙烯基)氨基]-1-丙磺酸均聚物、丙烯酸均聚物、丙烯酰乙基三甲基氯化铵和丙烯酰胺共聚物、AMPS和乙烯基吡咯烷酮共聚物、丙烯酸和丙烯酸烷基(其中碳链含有10-30个碳原子)酯共聚物,以及AMPS和丙烯酸烷基(其中碳链含有10-30个碳原子)酯共聚物。申请人分别以名称SimulgelTM EG、SepigelTM 305、SimulgelTM NS、SimulgelTM 800和SimulgelTM A出售所述共聚物。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的乳化剂的示例,可提及的是例如法国专利申请2 668 080、2 734 496、2 756 195、2 762 317、2 784 680、2 784 904、2 791 565、2 790 977、2 807 435和2 804 432中描述的脂肪酸、乙氧基化脂肪酸、山梨糖醇的脂肪酸酯、乙氧基化脂肪酸酯、聚山梨酯、聚甘油酯、乙氧基化脂肪醇、蔗糖酯、烷基聚糖苷、硫酸化和磷酸化脂肪醇或者烷基聚糖苷和脂肪醇混合物。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的活性成分的示例,可提及的是具有发光或脱色素作用的化合物,所述化合物为例如熊果苷、曲酸、对苯二酚、鞣花酸、维生素C、抗坏血酸磷酸镁、多酚提取物、糖基化多酚衍生物例如迷迭香酸葡糖苷、葡萄提取物、松树提取物、葡萄酒提取物、橄榄提取物、pond extracts、N-乙酰化蛋白质、N-乙酰化肽、N-乙酰化氨基酸、N-乙酰化蛋白质的部分水解产物、氨基酸、肽、总蛋白水解产物、部分蛋白水解产物、多元醇(例如甘油或丁二醇)、尿素、吡咯烷酮羧酸或该酸的衍生物、甘草次酸、α-甜没药萜醇、糖或糖衍生物、多糖或其衍生物、羟基酸例如乳酸、维生素、维生素衍生物(例如视黄醇、维生素E及其衍生物)、矿物质、酶、辅酶(例如辅酶Q10)、激素类或激素样物质、大豆提取物例如RaffermineTM、小麦提取物例如TensineTM或GliadineTM、植物提取物(例如富含鞣质的提取物、富含异黄酮的提取物或富含萜的提取物)、淡水藻或盐水藻提取物、essential waxes、细菌提取物、矿物质、通用脂类、脂类(例如神经酰胺或磷脂)、具有减肥作用的活性物质(例如咖啡因或其衍生物;例如以名称AdipolessTM出售的昆诺阿藜提取物;例如以SereniksTM 207名称出售的铁杉提取物;例如以名称AdiposlimTM出售的含有月桂酰辅氨酸的组合物)、对油性皮肤具有抗微生物活性或者净化作用的活性物质例如LipacideTM PVB、具有供能或刺激性质的活性物质例如SepitonicTM M3或Physiogeny]TM、泛醇及其衍生物例如SepicapTM MP、抗衰老活性物质(例如SepiliftTM DPHP、LipacideTM PVB、SepivinolTM或SepivitalTM)、保湿活性物质(例如SepicalmTM S、SepicalmTM VG和SepiliftTM DPHP)、“抗光老化”抗衰老活性物质;保护真皮-表皮结合处完整性的活性物质;具有增加细胞外基质成分合成的活性物质;具有减肥、坚硬或排泄活性的活性物质,例如咖啡因、茶碱、cAMP、绿茶、茜草、银杏、常春藤、七叶树、竹子、假叶树(ruscus)、假叶树(butcher’s broom)、雷公根(Centella asiatica)、石南花、绣线菊属植物、墨角藻属植物、迷迭香或柳树;在皮肤上形成“加热”感的活性物质,例如毛细管微循环活性剂(例如烟酸盐)或者在皮肤上形成“新鲜”感的活性物质(例如薄荷醇和衍生物)。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的嫩滑剂的示例,可提及的是氨基酸的N-酰化衍生物,例如Ajinomoto公司以名称AminohopeTM LL出售的月桂酰赖氨酸(lauroyllysine)、National Starch公司以名称DryfloTM出售的辛烯基琥珀酸淀粉、SEPPIC以名称MontanovTM 14出售的肉豆蔻基多聚葡萄糖苷;纤维素纤维;棉花纤维;壳聚糖纤维;滑石;绢云母和云母。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的遮光剂和/或珠光剂的示例,可提及的是棕榈酸钠、硬脂酸钠、羟基硬脂酸钠、棕榈酸镁、硬脂酸镁、羟基硬脂酸镁、乙二醇单硬脂酸酯、乙二醇双硬脂酸酯、聚乙二醇单硬脂酸酯、聚乙二醇双硬脂酸酯和脂肪醇。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的增稠剂和/或胶凝表面活性剂的示例,可提及的是:
-任选的烷氧基化烷基多糖苷脂肪酯,并且更具体地是乙氧基化甲基多葡糖苷酯,例如分别以名称GlucamateTM LT和GlumateTM DOE120出售的PEG 120甲基葡糖三油酸酯和PEG 120甲基葡糖二油酸酯;
-烷氧基化脂肪酯,例如以名称CrothixTM DS53出售的PEG 150季戊四醇四硬脂酸酯(pentaerythrityl tetrastearate)或者以名称AntilTM 141出售的PEG 55丙二醇油酸酯;
-脂肪-链聚乙二醇氨基甲酸酯,例如以名称ElfacosTM T211出售的PPG 14月桂醇聚醚异佛尔基二氨基甲酸酯或者以名称ElfacosTM GT2125出售的PPG 14棕榈油醇聚醚-60己基二氨基甲酸酯。
作为可与人体美容处理方法(其是本发明的主题)中所用的美容组合物中的式(I)的N-十六酰异亮氨酸联合的遮光剂的示例,可提及的是修订的化妆品规范76/768/EEC附件VII中出现的那些。
下面的试验研究用于说明本发明,然而不限制本发明。
1-体外研究
体外研究证明式(I)的N-十六酰异亮氨酸调节皮下脂肪组织的活性:在模拟脂肪形成刺激不充分条件的模型中使刺激正常人前脂肪细胞分化成为可能、使刺激脂肪细胞表面积增加成为可能、在模拟衰老条件的模型中使恢复“年轻(young)”正常人前脂肪细胞的脂肪细胞表型成为可能。
1.1-在模拟脂肪形成刺激不充分条件下的体外模型中证明N-十六酰异亮氨酸对正常人前脂肪细胞分化的刺激效果和N-十六酰异亮氨酸对脂肪细胞表面积增加的刺激效果
实验设计
培养自38岁女性供体的腹部手术废弃物得到的正常人前脂肪细胞单层,直至在Lonza公司提供的含有PBM-2(前脂肪细胞基础培养基-2)、谷氨酰胺和庆大霉素的培养基上出现汇合,100%体积的培养基含有10%体积的量的FBS(胎牛血清)。
通过加入“贫乏的(depleted)”分化培养基诱导所述前脂肪细胞分化成脂肪细胞,分化培养基含有胰岛素、地塞米松、IBMX(异丁基甲基黄嘌呤)和消炎痛的混合物,并将分化培养基以相对于“标准”分化培养基1/10的稀释比率使用。在本说明书的上下文中,在受试产物(即N-十六酰异亮氨酸、棕榈酸、异亮氨酸和重量比为65/35的棕榈酸和异亮氨酸混合物)存在下,经加入“贫乏的”分化培养基来完成所述分化阶段,同时还在无产物存在下,经加入“贫乏的”分化培养基来完成所述分化相,以得到“在贫乏培养基分化的对照”。
按照上述,还在人前脂肪细胞上对分化期进行试验,并按照上述单层培养,但是在“标准”分化培养基(即未稀释的胰岛素、地塞米松、IBMX(异丁基甲基黄嘌呤)和消炎痛的混合物)的存在下,以便得到“在标准培养基中分化的对照”。
一旦实现前脂肪细胞的成熟,即按照上述诱导15天后,将培养物用PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤,并利用特异性可行的荧光探针Bodipy(500μg/ml)标记胞浆内脂质小囊泡。还利用Sigma出售的2μg/ml浓度的Hoechst试剂(双苯甲亚胺(bisbenzimide))标记分化的前脂肪细胞核,Hoechst试剂也是荧光的。
每孔利用装配20倍目镜的Zeiss AxiovertTM 25倒置荧光显微镜拍摄3张照片。
结果
对于受试产物包括对照的每次测试,利用Lucia软件分析用倒置荧光显微镜获得的图象,使Bodipy荧光标记定量,以实现:
-脂质小滴表面积的测定(Sd),
-分化细胞数的测定(Nc),和
-总细胞核数目的测定(Nnc)。
然后,对于每次测试,根据下式将脂类小滴表面积与总细胞核数关联起来,计算脂肪细胞分化水平(D)。
(D)=(脂类小滴表面积)/(总细胞核数)
由此,可计算下面的:
-在贫乏培养基中分化的对照的脂肪细胞分化水平(随后表示为Ddm);
-在标准或完全培养基中分化的对照的脂肪细胞分化水平(随后表示为Dcm);
-受试产物(N-十六酰异亮氨酸、棕榈酸、异亮氨酸、重量比为65/35的棕榈酸/异亮氨酸混合物)的脂肪细胞分化水平(随后表示为Dpt)。
然后,对于每个受试产物,计算下面的:
a)根据下式的脂肪细胞分化的恢复百分数(随后表示为RAD):
RAD=[(Dpt-Ddm)/(Dcm-Ddm)]×100
b)根据下式的脂肪细胞表面积(AS):
(AS)=[(脂类小滴表面积Sd)/(分化细胞的数目Nc)]×100
c)根据下式,相对于用贫乏培养基处理的对照,脂肪细胞表面积的增加百分数(随后表示为IAS):
IAS=[产物的脂肪细胞表面积(ASpt)/用贫乏培养基处理的对照的脂肪细胞表面积(ASdm)]×100
然后,利用推定不等方差的双侧Student分布检验(two-sided Student’stest assuming unequal variances)对数据(D)和(AS)进行统计学分析。由此,将用于参数(D)和(AS)的每个受试条件的总体与在贫乏分化培养基存在下分化条件的群体相比较。将误差阈(p)设定在5%。如果p≤0.05,则认为研究的两个群体是具有显著差异的,然后,与在贫乏培养基中的分化条件相比,研究的试验条件具有作用。如果p>0.05,则认为两个群体不具有任何差异,并且由此,与在贫乏培养基中的分化条件相比,研究的试验条件没有产生作用。
下面表1给出了得到的结果:
表1
(*):与在贫乏培养基中分化的对照相比,结果具有统计学显著性(推定不等方差的双侧Student分布检验,p≤0.05)
根据上述的和表1中包括的试验设计进行的试验表明:基于干燥提取物计,5μg/ml剂量的N-十六酰异亮氨酸得出63%的RAD;基于干燥提取物计,10μg/ml剂量的N-十六酰异亮氨酸得出85%的RAD。
当以干燥提取物计以3.3μg/ml的剂量和以干燥提取物计以6.5μg/ml的剂量使用棕榈酸,并且当以干燥提取物计以1.7μg/ml的剂量和以干燥提取物计以3.3μg/ml的剂量使用异亮氨酸时,RAD小于10%,认为该RAD是不显著的。对于以干燥提取物计以5μg/ml的剂量和以干燥提取物计以10μg/ml的剂量利用棕榈酸和异亮氨酸混合物(棕榈酸和异亮氨酸的重量比是65/35)进行试验,情况也是如此。
因此,所述结果表明N-十六酰异亮氨酸的N-酰化结构保证了有效的RAD。
试验还表明:与在标准培养基上分化的对照194%的脂肪细胞表面积增加水平相比,对于以干燥提取物计5μg/ml的剂量,N-十六酰异亮氨酸使得获得215%的脂肪细胞表面积增加水平成为可能,并且对于以干燥提取物计10μg/ml的剂量,N-十六酰异亮氨酸使得获得214%的脂肪细胞表面积增加水平成为可能。此外,当以干燥提取物计以3.3μg/ml的剂量和以干燥提取物计以6.5μg/ml的剂量使用棕榈酸,并且当以干燥提取物计以1.7μg/ml的剂量和以干燥提取物计以3.3μg/ml的剂量使用异亮氨酸时,根据上述试验设计进行的试验中,得到的IAS水平比在标准培养基上分化的对照获得的水平是显著更低,并且在大多数情况下,它们还比在贫乏培养基上分化的对照获得的水平低。对于以干燥提取物计以5μg/ml的剂量和以干燥提取物计以10μg/ml的剂量利用棕榈酸和异亮氨酸混合物(棕榈酸和异亮氨酸的重量比是65/35)进行的试验,得到了相同的观察结果。
因此,所述结果表明N-十六酰异亮氨酸的N-酰化结构保证了有效的IAS。
1.2-在模拟衰老条件的体外模型中利用正常人前脂肪细胞证明N-十六酰异亮氨酸对脂肪细胞-表型的恢复效果
所用的体外模型由通过连续“传代”而加速衰老的正常人前脂肪细胞组成,以便产生分化后显示MAD细胞表型和特征的细胞。文中术语“传代”或“传代培养”或“扩增”指本领域技术人员公知的操作,包括根据细胞周期连续扩增上述细胞。因此,术语“R0传代的前脂肪细胞”意指未按照上述进行传代操作的前脂肪细胞。术语“R1传代的前脂肪细胞”意指已按照上述进行一次传代操作的前脂肪细胞。术语“R7传代的前脂肪细胞”意指在相同的操作条件下已进行7次连续传代操作的前脂肪细胞。因此,可认为R1传代的前脂肪细胞是“年轻(young)”个体前脂肪细胞的代表,,它们不显示任何由于连续传代步骤导致的形态学和表型的改变。此外,可认为R7传代的前脂肪细胞是人为老化的个体的代表,它们显示由于连续的传代步骤导致的形态学和表型的变化。实施了三种不同的实验设计方案,以证明N-十六酰异亮氨酸在恢复分化和人为衰老的前脂肪细胞表型中的效果。
实验设计1
a)-“年轻”对照的制备
i)-将R1传代的人前脂肪细胞单层培养5天直至汇合。通过加入标准分化混合物诱导前脂肪细胞分化为脂肪细胞,所述标准分化混合物包含胰岛素、地塞米松、IBMX(异丁基甲基黄嘌呤)和消炎痛的混合物。
ii)-按照上述的诱导步骤培养15天后,将制备的培养物用PBS(磷酸盐缓冲的盐水)缓冲液洗涤,然后利用下述溶液固定,相对于100%的所述溶液重量,该溶液含有4重量%的甲醛和0.1重量%Triton X-100,TritonX-100是生物学领域常用的合成清洁剂。
iii)-然后,利用Sigma公司出售的油红O(Oil-Red-O)标记物(0.2%质量的量)标记先前制备的细胞培养物中细胞浆内的脂类小滴。
iv)-然后,将含有先前描述的和按照上述标记的细胞培养物脂类小囊泡的细胞单层用二甲基亚砜(或DMSO)裂解。
v)-然后,通过利用分光光度计在540nm波长处读取所述裂解物的光密度(OD)来评估本实验设计第iv)步骤结束时制备的标记和裂解的细胞培养物中脂类小囊泡的标记量。
由此,将测定的年轻对照的光密度表示为“ODR1”。
b)-“老化”对照的制备
将a)部分描述的实验设计的第i)~v)步骤施用至R7传代的前脂肪细胞,以便得到“老化”对照的光密度,将其表示为“ODR7”。
c)-评价N-十六酰异亮氨酸对人R7传代的前脂肪细胞的作用
将R7传代的人前脂肪细胞单层培养5天直至汇合。在N-十六酰异亮氨酸存在下,通过加入标准分化混合物诱导前脂肪细胞分化成为脂肪细胞,所述分化混合物包含胰岛素、地塞米松、IBMX(异丁基甲基黄嘌呤)和消炎痛的混合物。然后,根据a)部分所述进行第i)~v)步骤,以便得到N-十六酰异亮氨酸的光密度,将其表示为“ODHIL”。
d-计算表型恢复程度
各种光密度的测定使根据下式计算N-十六酰异亮氨酸的表型恢复率(下文中表示为PRR)成为可能:
PRR(%)=[(ODHIL-ODR7)/(ODR1-ODR7)]×100
然后,利用推定不等方差的双侧Student分布检验对光密度数据进行统计学分析。由此,将每个受试条件的群体与R7前脂肪细胞分化条件的群体进行比较。将误差阈(p)设定在5%。如果p小于或等于0.05,则认为研究的两个群体具有显著差异,据此,与R7前脂肪细胞分化条件相比,认为研究的试验条件是有效果的。如果p确实比0.05大,则认为两个群体不具有任何差异,并且由此,与R7前脂肪细胞分化条件相比,研究的试验条件没有任何作用。
下面表2中报道了不同浓度的N-十六酰异亮氨酸得到的PRRs。
表2
受试产物 | PRR |
分化的R7对照 | 0% |
分化的R1对照 | 100%* |
N-十六酰异亮氨酸(以干燥提取物计,5μg/ml) | 13%* |
N-十六酰异亮氨酸(以干燥提取物计,10μg/ml) | 16%* |
(*):与在贫乏培养基中分化的对照相比,结果是统计学显著的(推定不等方差的双侧Student分布检验,p≤0.05。
实验设计2
利用R1传代的人前脂肪细胞和R7传代的人前脂肪细胞,进行实验设计1中a)和b)部分的步骤,以得到”年轻”对照和“老化”对照,以及相关的光密度ODR1和ODR7。根据实验设计1操作方法的变通方法评价N-十六酰异亮氨酸对R7传代人前脂肪细胞的作用,第一个步骤包括在N-十六酰异亮氨酸存在下单层培养R7传代人前脂肪细胞5天,直到出现汇合。通过加入标准分化混合物诱导前脂肪细胞分化成为脂肪细胞,所述分化混合物包含胰岛素、地塞米松、IBMX(异丁基甲基黄嘌呤)和消炎痛的混合物。然后,进行实验设计1的a)部分描述的第ii)~v)步骤,以便得到N-十六酰异亮氨酸的光密度,将其表示为“ODHIL”。
各种光密度的测定使得根据下式计算按照实验设计2的操作得到的N-十六酰异亮氨酸的表型恢复率(PRR)成为可能:
PRR(%)=[(ODHIL-ODR7)/(ODR1-ODR7)]×100
下面表3中报道了按照实验设计2的操作在不同浓度的N-十六酰异亮氨酸下得到的PRRs。
表3
受试产物 | PRR |
分化的R7对照 | 0% |
分化的R1对照 | 100%* |
N-十六酰异亮氨酸(以干燥提取物计,5μg/ml) | 27%* |
N-十六酰异亮氨酸(以干燥提取物计,10μg/ml) | 17%* |
(*):与在贫乏培养基中分化的对照相比,结果是统计学显著的(推定不等方差的双侧Student分布检验,p≤0.05。
实验设计3
利用R1传代的人前脂肪细胞和R7传代的人前脂肪细胞,进行实验设计1中a)和b)部分的步骤,以得到”年轻”对照和“老化”对照,以及相关的光密度ODR1和ODR7。
根据实验设计2的操作方法的变通方法评价N-十六酰异亮氨酸对R7传代的人前脂肪细胞的作用,第一个步骤包括在N-十六酰异亮氨酸存在下单层培养R7传代人前脂肪细胞5天直到出现汇合。
在N-十六酰异亮氨酸存在下,通过加入标准分化混合物诱导前脂肪细胞分化成为脂肪细胞,所述分化混合物包含胰岛素、地塞米松、IBMX(异丁基甲基黄嘌呤)和消炎痛的混合物。然后,进行实验设计1的a)部分描述的第ii)~v)步骤,以便得到N-十六酰异亮氨酸的光密度,将其表示为“ODHIL”。
各种光密度的测定使根据下式计算按照实验设计3的操作方法得到的N-十六酰异亮氨酸的PRR成为可能:
PRR(%)=[(ODHIL-ODR7)/(ODR1-ODR7)]×100
下面表4中报道了按照实验设计2的操作方法得到的不同浓度的N-十六酰异亮氨酸的PRRs。
表4
受试产物 | PRR |
分化的R7对照 | 0% |
分化的R1对照 | 100%* |
N-十六酰异亮氨酸(以干燥提取物计,5μg/ml) | 36%* |
N-十六酰异亮氨酸(以干燥提取物计,10μg/ml) | 30%* |
(*):与在贫乏培养基中分化的对照相比,结果是统计学显著的(推定不等方差的双侧Student分布检验,p≤0.05。
结论
无论所用的实验设计为何种,实验结果均显示在人为老化条件下,N-十六酰异亮氨酸对脂肪细胞表型的恢复具有有益作用。因此,对于以干燥提取物计的5μg/ml剂量的N-十六酰异亮氨酸,经根据实验设计1的方案测得的13%表型恢复率、经根据实验设计2的方案测得的27%表型恢复率和经根据实验设计3的方案测得的36%表型恢复率,评价所述作用。
2-体内研究
下面的试验研究用于说明本发明,而不限制本发明。
体内研究证明式(I)的N-十六酰异亮氨酸的美容用途和人体美容处理方法的实施使人皮肤产生“丰盈”和/或“丰满”效果成为可能和/或使皮肤弹性增加成为可能。
2.1-证明含有N-十六酰异亮氨酸的美容组合物对乳房的“丰盈”效果和“丰满”效果
a)-含有N-十六酰异亮氨酸的水包油型(O/W)乳剂(E1)和“安慰剂”水包油乳剂(E2)的制备
按照下述方法制备乳剂(E1)和(E2):
步骤1):在80℃的温度下,依次将油相和乳化剂系统的成分加入到烧杯中,采用具有“锚”型转动轴的搅拌器将所述成分在80℃的温度下、以80rpm的速度进行机械搅拌15分钟。
步骤2):在80℃的温度下,将增稠聚合物加入到在第1)步骤结束时得到的混合物中,增稠聚合物是在室温经混合其组分预先制备的水相。然后,采用Silverson公司出售的定转子乳化装置,将产生的混合物在80℃的温度、以3000rpm的速度搅拌4分钟。
步骤3):将在第2)步骤结束时得到的混合物历经10分钟冷却至30℃,并在整个冷却过程中采用具有“锚”型转动轴的搅拌器以80rpm的速度持续搅拌。
步骤4):然后,在30℃下,将Neolone MxP防腐剂和“plaisir”芳香剂加入到第3)步骤产生的混合物中。然后,通过加入50%三乙醇胺将pH值调至6.5。
水包油型乳剂(E1)和(E2)具有下述组成(重量百分含量):
表5
(1):Stéarineries Dubois公司出售的新戊二醇二乙基己酸酯(neopentylglycol diethyl hexanoate)。
(2):SEPPIC公司出售的增稠反相胶乳(INCI名称:羟基乙基丙烯酸酯/丙烯酰基二甲基牛磺酸钠共聚物和异十六烷和聚山梨酯60)。
(3):SEPPIC公司出售的自乳化组合物例如EP 0 977 626中描述的那些,基于花生醇、二十二醇和花生醇葡糖苷类。
(4):& Haas公司出售的防腐剂混合物,其含有苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和甲基异噻唑酮。
b)-评价水包油乳剂(E1)和(E2)对乳房的“丰盈”效果和“丰满”效果
通过测定下述指标进行所述评价:
-测定胸部尺寸以厘米计的变化(Mb),
-通过深度超声测定乳房皮下组织厚度的变化;
-利用条纹投影技术测定乳房体积的变化(Primos BodyTM)。
对平均年龄26岁具有A杯尺寸(即两个乳房的乳头水平进行的胸部测定值和两个乳房的底部进行的胸部测定值之间2.5cm的差值)的44名女性志愿者群进行所述评价,将其分成每组22名志愿者的两个相等组(第I组和第II组)。第(I)组的每个成员每天两次施用乳剂(E1)至其乳房,持续28天,第(II)组的每个成员每天两次施用乳剂(E2)至其乳房,持续28天。
b1)-通过测定胸部尺寸的变化评价N-十六酰异亮氨酸的“丰盈”效果
实验设计
开始施用乳剂(E1)和(E2)之前和在28天的实验期结束时,利用厘米刻度的卷尺测定胸部尺寸(Mb)和胸围尺寸(Mub)。
并行地,控制每组每个个体(i)的重量曲线,以便在解释期间抽出历经太大重量减轻或重量增加(相对于研究开始之前测定的体重,个体体重±3kg的变化)的个体的测定数据。将重量变化大于实验开始之前测定的起始体重±3kg的个体数目表示为(j)。然后,根据公式:N=20-j,计算每组个体的总数N,该数目应是要记录尺寸的个体数。
通过将各个个体的两个乳房的乳头作为基础,得到第(I)组和第(II)组的各个成员(i)以厘米表示的胸部尺寸。由此,对于每组的每个成员(i),得到了实验开始之前的胸部尺寸(Mb0i)和28天的实验结束时的胸部尺寸(Mb28i)。然后根据下式,计算每组每个成员的胸部尺寸变化,ΔMbi:
ΔMbi=Mb28i-Mb0i
然后,根据下式,计算每组胸部尺寸变化的算术平均值(ΔMbm):
ΔMbm=[∑(ΔMbi)]/N
通过将各个个体的两个乳房的界线作为基础,也得到第(I)组和第(II)组的各个成员(i)以厘米表示的胸围尺寸。由此,对于每组的每个成员(i),得到了实验开始之前的胸围尺寸(Mub0i)和28天的实验结束时的胸围尺寸(Mub28i)。然后根据下式,计算每组每个成员的胸围尺寸变化,ΔMubi:
ΔMubi=Mub28i-Mub0i
然后,根据下式,计算每组胸围尺寸变化的算术平均值(ΔMubm):
ΔMubm=[∑(ΔMubi)]/N
得到的结果
下面表6中报道了第(I)组和第(II)组的算术平均值ΔMbm和ΔMubm的结果。
表6
第(I)组 | 第(II)组 | |
ΔMbm(cm) | +0.6 | 0 |
ΔMubm(cm) | -0.1 | 0 |
对于胸围尺寸(ΔMubm)-0.1厘米的变化,测得第(I)组成员胸部尺寸变化的算术平均值(ΔMbm)为+0.6厘米,该组成员将含有N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E1)施用至其乳房。
对于胸围尺寸(ΔMubm)0厘米的变化,测得第(II)组成员胸部尺寸变化的算术平均值(ΔMbm)为0厘米,该组成员将不含N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E2)施用至其乳房。
解释
其中值(Mb28i)的集合(set)和值(Mb0i)的集合在统计学上是不同的,被认为胸部尺寸的增加是显著的。
其中值(Mub28i)的集合和值(Mub0i)的集合在统计学上是不同的,被认为胸围尺寸的增加是显著的。
采用推定不等方差的双侧Student分布检验进行统计学分析,用于评价胸部尺寸增加和胸围尺寸增加的显著性。由此,分别将值(Mb28i)的集合和值(Mub28i)的集合分别与值(Mb0i)的集合和值(Mub0i)的集合进行比较。将误差阈(p)设定为5%。如果p小于或等于0.05,那么认为值(Mb28i)的集合和值(Mub28i)的集合分别与值(Mb0i)的集合和值(Mub0i)的集合是显著不同的。由此,可以推导出胸部尺寸和胸围尺寸具有显著的增加。如果p确实大于0.05,那么不认为值(Mb28i)的集合和值(Mub28i)的集合分别与值(Mb0i)的集合和值(Mub0i)的集合是显著不同的。由此,不可以推导出胸部尺寸和胸围尺寸具有显著的增加。
此外,当算术平均值(ΔMbm)大于或等于0.2cm时,则认为胸部尺寸的增加是显著的,前提是胸围尺寸的算术平均值(ΔMubm)不大于±0.2cm。
结论
因此,可能从上述结果中推导出水包油乳剂(E1)中存在的N-十六酰异亮氨酸使得第(I)组成员的平均胸部尺寸以显著方式增加成为可能,并由此使所述个体乳房“丰盈”的效果成为可能。
b2-评价N-十六酰异亮氨酸对胸部皮下组织厚度的作用
实验设计
利用西门子(Siemens)公司出售的装配6cm长和1cm厚探针的SonolineAntaresTM超声系统,经深度超声,完成对每组每个成员的乳房皮下组织厚度的测定。每次测定之前,将Aquasonic 100TM牌瞬干胶(contact gel)施用至乳房。通过将探针直接施用至乳房皮肤,在13MHz频率下进行测定。将探针与处理测定的数据的软件和Fuji DryPix 7000TM打印机连接。
对于每组每个成员(i),通过在乳房的3个不同地方完成下述3次测定进行该项评价:
-在乳房的侧面进行皮下组织厚度的测定(MLi),
-在乳房的上部前面(superior-anterior face)完成皮下组织厚度的测定(MSAi),和
-在乳房的下部前面(inferior-anterior face)完成皮下组织厚度的测定(MIAi)。
并行地,控制每组每个个体(i)的重量曲线,以便在解释期间抽出历经太大重量减轻或重量增加(相对于研究开始之前测定的体重,个体体重±3kg的变化)的个体的测定数据。将重量变化大于实验开始之前测定的起始体重±3kg的个体数目表示为(j)。然后,根据公式:N=20-j,计算每组个体的总数N,该数目应是要记录尺寸的个体数。
由此,对于每组每个个体成员(i),测定下述的:
-实验开始前,乳房侧面的皮下组织厚度(ML0i);
-28天实验结束时,乳房侧面的皮下组织厚度(ML28i);
-实验开始前,乳房上部前面的皮下组织厚度(MSA0i);
-28天实验结束时,乳房上部前面的皮下组织厚度(MSA28i);
-实验开始前,乳房下部前面的皮下组织厚度(MIA0i);和
-28天实验结束时,乳房下部前面的皮下组织厚度(MIA28i)。
然后,对于每组每个成员,计算下述的:
-根据公式:ΔMLi=ML28i-ML0i,计算乳房侧面的皮下组织厚度变化(ΔMLi);
-根据公式:ΔMSAi=MSA28i-MSA0i,计算乳房上部前面的皮下组织厚度变化(ΔMSAi);和
-根据公式:ΔMIAi=MIA28i-MIA0i,计算乳房下部前面的皮下组织厚度变化(ΔMIAi)。
结果的表示
然后,基于上面所示的测定结果,计算每组下述的:
-根据公式:ΔMLm=[∑(ΔMLi)]/N,计算乳房侧面的皮下组织厚度的平均变化(ΔMLm);
-根据公式:ΔMSAm=[∑(ΔMSAi)]/N,计算乳房上部前面的皮下组织厚度的平均变化(ΔMSAm);
-根据公式:ΔMIAm=[∑(ΔMIAi)]/N,计算乳房下部前面的皮下组织厚度的平均变化(ΔMIAm);
-根据公式:[Mean(ML0)]=[∑(ML0i)]/N,计算实验开始前,乳房侧面皮下组织的平均厚度[Mean(ML0)];
-根据公式:[Mean(MSA0)]=[∑(MSA0i)]/N,计算实验开始前,乳房上部前面皮下组织的平均厚度[Mean(MSA0)];
-根据公式:[Mean(MIA0)]=[∑(MIA0i)]/p,计算实验开始前,乳房下部前面皮下组织的平均厚度[Mean(MIA0)];
-根据公式:(IML)=[ΔMLm/[Mean(ML0)]]×100,计算乳房侧面皮下组织厚度增加的水平(IML);
-根据公式:(IMSA)=[ΔMSAm/[Mean(MSA0)]]×100,计算乳房上部前面皮下组织厚度增加的水平(IMSA);
-根据公式:(IMIA)=[ΔMIAm/[Mean(MIA0)]]×100,计算乳房下部前面皮下组织厚度增加的水平(IMIA)。
得到的结果
下面表7中,报道了对第(I)组和第(II)组进行的测定结果,即ΔMLm、ΔMSAm、ΔMIAm、IML、IMSA和IMIA。
表7
第(I)组 | 第(II)组 | |
ΔMLm(mm) | +0.13 | +0.04 |
IML(%) | 1.0 | 0 |
ΔMSAm(mm) | +1.14* | +0.35 |
IMSA(%) | 5.0 | 2.0 |
ΔMIAm(mm) | +0.42 | -1.19 |
IMIA(%) | 1.0 | -4.0 |
(*):与t=0的值相比,统计学显著的结果(推定不等方差的双侧Student分布检验),p≤0.05。
第(I)组个体的乳房上部前面皮下组织的厚度增加水平(IMSA)达到5%,该组个体将含有N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E1)施用至其乳房,而计算的第(II)组个体同样的乳房上部前面皮下组织的厚度增加水平(IMSA)是2%,该组个体将不含N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E2)施用至其乳房。
与第(II)组个体0.35mm的值相比,还观察到第(I)组个体1.14mm的乳房上部前面皮下组织厚度的平均增加(ΔMSAm)。
所述第(I)组个体的乳房上部前面皮下组织的厚度显著增加伴随有稳定的乳房下部前面皮下组织厚度(ΔMIAm=+0.42mm)和稳定的乳房侧面皮下组织厚度(ΔMLm=+0.13mm)。
结果解释
当值(ML28i)的集合在统计学上显著不同于值(ML0i)时,则认为乳房侧面的皮下组织厚度的平均增加是显著的。
当值(MSA28i)的集合在统计学上显著不同于值(MSA0i)时,则认为乳房上部前面的皮下组织厚度的平均增加是显著的。
当值(MIA28i)的集合在统计学上显著不同于值(MIA0i)时,则认为乳房下部前面的皮下组织厚度的平均增加是显著的。
用于评价所述3个参数显著性的统计学分析是推定不等方差的双侧Student分布检验。因此,分别将值(ML28i)、(MSA28i)和(MIA28i)的集合与值(ML0i)、(MSA0i)和(MIA0i)的集合进行比较。将误差域(p)设定为5%。
如果p小于或等于0.05,那么认为值(ML28i)、(MSA28i)和(MIA28i)的集合分别与值(ML0i)、(MSA0i)和(MIA0i)的集合是显著不同的。由此,可以推导出乳房侧面和/或乳房上部前面和/或乳房下部前面的皮下组织厚度具有显著的增加。
如果p确实大于0.05,那么不应认为值(ML28i)、(MSA28i)和(MIA28i)的集合分别与值(ML0i)、(MSA0i)和(MIA0i)的集合是显著不同的。由此,将不可以推导出乳房侧面和/或乳房上部前面和/或乳房下部前面的皮下组织厚度具有显著的增加。
结论
因此,可从所述结果推导出水包油乳剂(E1)中存在的N-十六酰异亮氨酸使得乳房上部前面皮下组织的厚度以显著方式增加成为可能,所述增加未对乳房下部前面的皮下组织厚度造成伤害和/或未对乳房侧面的皮下组织厚度造成伤害。因此,N-十六酰异亮氨酸的应用使所述个体的乳房产生“丰满”效果成为可能。
b3-利用条纹投影技术评价N-十六酰异亮氨酸对乳房体积增加的作用
实验设计
对用于前面b1)和b2)部分描述的评价的群中12名志愿者的随机亚群进行所述评价,将所述亚群分成每组6名志愿者的2个相等组(第III组和第IV组)。第(III)组的每个成员将乳剂(E1)一天两次施用至其两个乳房,持续28天,第(IV)组的每个成员将乳剂(E2)一天两次施用至其两个乳房,持续28天。
所述评价包括在实验开始之前以及施用乳剂(E1)和(E2)28天结束时,测定每组各个成员(i)的乳房体积。
该实验由施用乳剂(E1)或(E2)之前,以及施用乳剂(E1)或(E2)28天后,采用以名称3D Primos BodyTM出售的干扰条纹投影技术(interferencefringe projection profilometer)记录每组各个成员(i)乳房体积的三维影像。所述设备使发射两种光束到要分析的表面成为可能,并且利用两台照相机在20°的角度记录得到的影象,该设备的特征在于300mm×200mm的测定域、500微米的横向分辨率(lateral resolution)、大于或等于30微米的横向分辨率和大于或等于140毫秒的数据获取时间。然后,整合成“3D PrimosBodyTM”的计算软件使得计算先前记录的三维影象上存在的各区域体积成为可能。
然后,对于上面定义的第(III)组和第(IV)组的每个成员,计算下述的:
-在实验开始之前记录的三维影象得到的所述乳房体积(V0i);
-在28天实验结束时记录的三维影象得到的所述乳房体积(V28i)。
然后,对于上面定义的第(III)组和第(IV)组的每个成员(i),根据下式,计算所述乳房体积的变化,ΔVi:
ΔVi=(V28i)-(V0i)
结果表示
然后,根据上述测定得到的结果,计算每组下述的:
-根据下式,计算乳房体积的平均变化(ΔVm):
(ΔVm)=[∑(ΔVi)]/6;
-根据下式,计算实验开始前乳房体积的平均变化[Mean(V0)]:
[Mean(V0)]=[∑(MV0i)]/6;
-根据下式,计算乳房体积的增加水平(IV):
(IV)=[(ΔVm)/[Mean(V0)]]×100。
得到的结果
下面表8中报告了第(III)组和第(IV)组所得到的结果,即ΔVm和IV。
表8
第(III)组 | 第(IV)组 | |
(ΔVm)(cm3) | +2.6* | -0.5* |
(IV)(%) | +1.0%* | 0%* |
(*):与t=0的值相比,结果是统计学显著的(推定不等方差的双侧Student分布检验),p≤0.05。
与判断为不显著的第(IV)组个体的-0.5cm3变化相比,第(III)组个体的乳房体积平均增加(ΔVm)达2.6cm3,第(III)组个体将含有N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E1)施用至其乳房,而第(IV)组个体将不含N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E2)施用至其乳房。类似地,与第四组个体0%的值相比,计算的第(III)组个体的乳房体积增加水平是+1.0%,第(III)组个体将含有N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E1)施用至其乳房,而第(IV)组个体将不含N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E2)施用至其乳房。
结果解释
其中值(V28i)的集合和值(V0i)在统计学上是不同的,认为乳房体积的平均增加是显著的。用于评价显著性的统计学分析是Student分布检验。
用于评价乳房体积增加显著性的统计学分析是推定不等方差的双侧Student分布检验。由此,将值(V28i)的集合与值(V0i)的集合进行比较。将误差阈(p)设定为5%。
如果p小于或等于0.05,那么认为值(V28i)的集合与值(V0i)的集合是显著不同的。由此,可以推导出乳房体积具有显著增加。如果p确实大于0.05,那么不应认为值(V28i)的集合与值(V0i)的集合是显著不同的。由此,将不可以推导出乳房体积具有显著的增加。
结论
因此,可从所述结果推导出水包油乳剂(E1)中存在的N-十六酰异亮氨酸使得第(III)组成员的乳房体积以显著方式增加成为可能。
b4-总的结论
b1)、b2)和b3)实验部分所示的实验结果显示将含有N-十六酰异亮氨酸的美容组合物施用至乳房使得所研究个体的胸部尺寸、乳房上部前面的皮下组织厚度和乳房体积获得显著增加成为可能。的确,N-十六酰异亮氨酸的应用和将含有N-十六酰异亮氨酸的美容组合物施用至胸部使得所研究个体的乳房产生“丰满”效果和“丰盈”效果成为可能。
2.2-在具有成熟皮肤的个体面部证明含有N-十六酰异亮氨酸的美容组合物的改善皮肤弹性和“丰满”的作用
a)-含有N-十六酰异亮氨酸(E3)的水包油乳剂(E3)和安慰剂水包油乳剂(E4)的制备
按照下述方法制备乳剂(E3)和(E4):
步骤1):在80℃的温度,依次将油相和乳化剂系统的成分加入到烧杯中,采用具有“锚”型转动轴的搅拌器将所述成分在80℃的温度、以80rpm的速度进行机械搅拌15分钟,以形成均质的混合物。
步骤2):在80℃的温度,将增稠聚合物加入到在第1)步骤中得到的混合物中,增稠聚合物是在室温经混合其组分预先制备的水相。然后,采用Silverson公司出售的定转子乳化装置,将产生的混合物在80℃的温度、以3000rpm的速度搅拌4分钟。
步骤3):将在第2)步骤结束时得到的混合物历经10分钟冷却至30℃的温度,并在整个冷却过程中采用具有“锚”型转动轴的搅拌器以80rpm的速度搅拌。
步骤4):然后,于30℃将SepicideTM LD防腐剂、氯苯甘醚防腐剂和“Petite Fleur”芳香剂加入到第3)步骤产生的混合物中。然后,通过加入50%三乙醇胺将pH值调至6.0。
水包油乳剂(E3)和(E4)具有下述组成(重量百分含量)
表9
(5):SEPPIC公司出售的乙二醇单棕榈酸酯;
(6):SEPPIC公司出售的例如WO 2005/040230中描述的那些共聚物的反相胶乳(INCI名称:聚丙烯酸酯-13&聚异丁烯和聚山梨酯20);
(7):CP Kelco公司出售的黄原胶;
(8):SEPPIC公司出售的基于十六烷基十八烷基醇和椰油基葡糖苷类的自乳化组合物;
(9):SEPPIC公司出售的防腐剂苯氧乙醇;
(10):防腐剂。
b)-评价水包油乳剂(E3)和(E4)对具有成熟皮肤的个体面部的“丰满”作用和皮肤弹性的改善
通过测定下述指标,评价水包油乳剂对具有成熟皮肤的个体面部的“丰满”作用和皮肤弹性改善:
-采用Primos BodyTM测定颊骨水平面部体积的变化;
-采用BallistometerTM测定面部皮肤的生物力学性质。
对面部具有下垂和凹陷皮肤、平均年龄58的14名女性志愿者进行颊骨水平的面部体积变化和面部皮肤的生物力学性质评价,将该14名女性志愿者郡分成每组具有7名志愿者的两个相等的组(第V组和第VI组)。第(V)组各成员每天两次将乳剂(E3)施用至其面部,持续56天,并且第(VI)组各成员每天两次将乳剂(E4)施用至其面部,持续56天。
b1-利用条纹投影技术(Primos BodyTM)评价N-十六酰异亮氨酸对面部颊骨部位的“丰满”效果
实验设计
本评价包括在实验开始前测定每组各成员(i)面部的体积,以及施用乳剂(E3)和(E4)56天结束时测定每组各成员(i)面部体积。
该实验包括施用乳剂(E3)或(E4)之前,以及施用乳剂(E3)或(E4)56天后,采用以名称3D Primos BodyTM出售的干扰条纹投影技术记录每组各个成员(i)面部的三维影像。所述设备使发射两种光束到要分析的表面成为可能,并且采用两台照相机在20°的角度记录得到的影象,该设备的特征在于300mm×200mm的测定域、500微米的横向分辨率、大于或等于30微米的横向分辨率和大于或等于140毫秒的数据获取时间。然后,整合成“3D Primos BodyTM”的计算软件使得计算在先前记录的三维影象上存在的各区域体积成为可能。
然后,对于上面定义的第(V)组和第(VI)组的各个成员(i),计算下述的:
-从实验开始前记录的三维影像计算颊骨水平面颊的体积(W0i);
-从56天实验结束时记录的三维影像计算颊骨水平面颊的体积(W56i)。
结果表示
然后,对于上面定义的第(V)组和第(VI)组的各个成员(i),计算下述的:
-根据下式,计算所研究乳房的体积变化ΔWi:
ΔWi=(W56i)-(W0i)
-根据下式,计算颊骨水平面颊体积的平均变化(ΔWm):
(ΔWm)=[∑(ΔWi)]/7
结果
下面表10中报道了第(V)组和第(VI)组所得到的结果,即(ΔWm)。
表10
第(V)组 | 第(VI)组 | |
(ΔWm,ml) | +0.784* | +0.276 |
(*):与t=0的值相比,结果具有统计学显著性(推定不等方差的双侧Student分布检验),p≤0.05。
与认为不显著的第(VI)组个体的+0.276ml增加相比,第(V)组个体颊骨水平面颊体积的平均增加达0.784ml,第(V)组个体将含有N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E3)施用至其面颊,而第(VI)组个体将不含N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E4)施用至其面颊。
结果解释
其中值(W56i)的集合和值(W0i)在统计学上是不同的,认为颊骨水平面颊体积的平均增加是显著的,并具有丰满作用的特征。
用于评价显著性的统计学分析是推定不等方差的双侧Student分布检验。如果p小于或等于0.05,那么认为值(W56i)的集合与值(W0i)的集合是显著不同的。由此,可以推导出颊骨水平面颊体积具有显著增加。如果p确实大于0.05,那么不应认为值(W56i)的集合与值(W0i)的集合是显著不同的。由此,将不可以推导出颊骨水平面颊体积具有显著的增加。
结论
因此,可从所述结果推导出水包油乳剂(E3)中存在的N-十六酰异亮氨酸使得第(V)组成员的颊骨水平面颊体积以显著方式增加成为可能,并由此诱导出所述第(V)组个体的面部显著的“丰满”效果。
b2-利用BallistometerTM,评价N-十六酰异亮氨酸对颊骨水平面部皮肤的皮肤弹性的有效作用
实验设计
将所述组合物施用至皮肤后,皮肤的生物力学性质研究使得测定该组合物的软化和/或张力调整作用成为可能。
现有技术是按照皮肤的吸力(采用CutometerTM)、扭转(torsion)(Dermal Torque MeterTM)或伸展(延伸仪)作用或者皮肤上小球的回弹(BallistometerTM)基于研究生物力学性质的变化设计的。这些技术使得获得精确、快速、可靠的结果,以及利用对个体皮肤无创伤的实验设计成为可能。
皮肤具有2个流变学特性:
-弹性特性;
-根据人体不同部位而变化的张力特性。
皮肤的流变学特性取决于其结构,其结构主要由三维网状的胶原和弹性蛋白纤维组成。
为了评价N-十六酰异亮氨酸对颊骨水平面部皮肤的生物力学性质变化的作用,选择采用BallistometerTM进行测定。BallistometerTM使得解释皮肤弹性成分的变化成为可能。
采用Dia-Stron公司出售的BLS 780BallistometerTM完成本研究上下文中要进行的评价。
BLS 780 BallistometerTM包括连接至控制组件的手控探头,控制组件装配有数据收集软件。手控探头包括由铝合金制成的坚硬支臂,其安装在扭转轴上,并且所述坚硬支臂的末端是直径2mm的振动球。
当使探头的振动球与要测试的皮肤表面接触时,要测试的皮肤表面释放阻力,该阻力在扭转轴的弹簧上产生振动运动。然后,通过控制组件记录该振动运动,并经配置的软件处理。因此,该装置使得记录其回弹和阻尼成为可能,并且还使得记录在要测试的皮肤表面施用弹性球后得到的相关(associated)能量成为可能。
然后,控制组件配置的软件使得计算各种参数包括“α参数”成为可能,α参数说明机械能量衰减的速率。高的“α参数”值表示要测试的皮肤表面的强弹性。“α参数”随时间的增长证实皮肤的紧致性(firming)。
在本实验中,乳剂(E3)或(E4)施用之前和乳剂(E3)或(E4)施用56天后,采用BallistometerTM探头在颊的颊骨水平评价皮肤的生物力学性质,其是本发明的主题。然后,施用后,对上面所定义的第(V)组和第(VI)组的每个成员,测定下述的:
-实验开始之前,颊骨水平面颊皮肤的“α参数”(α0i),
-56天的实验结束时,颊骨水平面颊皮肤的“α参数”(α56i)。
结果表示
然后,对上面所定义的第(V)组和第(VI)组的每个成员,计算下述的:
-根据下式,颊骨水平面颊皮肤的“α参数”变化(Δαi):
(Δαi)=(α56i)-(α0i)
并且对于每组:
-根据下式,颊骨水平面颊皮肤的“α参数”的平均变化(Δαm):
(Δαm)=[∑(Δαi)]/7
-根据下式,实验开始之前,颊骨水平面颊皮肤“α参数”的平均值[Mean(α0)]:
[Mean(α0)]=[∑(Mα0i)]/7
-根据下式,颊骨水平面颊皮肤“α参数”的变化程度(Cα):
(Cα)=(Δαm)/[Mean(α0)]×100
得到的结果
下面表11报告第(V)组和第(VI)组所得到的结果,即颊骨水平面颊皮肤“α参数”的平均变化(Δαm)和颊骨水平面颊皮肤“α参数”的变化程度(Cα)。
表11
第(V)组 | 第(VI)组 | |
(Δαm) | -0.005* | 0.0 |
(Cα,%) | -10.0%* | +1.0% |
(*):与t=0的值相比,结果具有统计学显著性(推定不等方差的双侧Student分布检验),p≤0.05。
与第(VI)组个体的未变化((Δαm)=0)相比,第(V)组个体颊骨水平面颊皮肤“α参数”的平均变化是-0.005,第(V)组个体将含有N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E3)施用至其面颊,而第(VI)组个体将不含N-十六酰异亮氨酸的水包油乳剂(E4)施用至其面颊。
类似地,与第(VI)组个体+1.0%相比,对于第(V)组个体,颊骨水平的面颊皮肤“α参数”的变化程度(Cα)评价为-10%。
结果解释
其中值(α56i)的集合与值(α0i)在统计学上是不同的,认为“α参数”的平均增加是显著的,并具颊骨水平的面颊皮肤弹性改善的特性。用于评价显著性的统计学分析是推定不等方差的双侧Student分布检验。如果p小于或等于0.05,那么认为值(α56i)的集合与值(α0i)的集合是显著不同的。由此,可以推导出颊骨水平面颊皮肤弹性显著增加。如果p确实大于0.05,那么不应认为值(α56i)的集合与值(α0i)的集合是显著不同的。由此,将不可以推导出颊骨水平面颊皮肤弹性具有显著的增加。
结论
因此,可从所述结果推导出水包油乳剂(E3)中存在的N-十六酰异亮氨酸使得诱导第(V)组成员的颊骨水平面颊皮肤弹性以显著方式改善成为可能。
b3-总的结论
本2.2章的b1)和b2)实验部分所示的实验结果显示对于所研究个体,将含有N-十六酰异亮氨酸的美容组合物施用至面部使得以显著方式诱导“丰满”效果和颊骨水平面颊皮肤弹性的改善成为可能。
本文中所引用的参考文献:
-Dumont等人:Analysis of the implications of the adipose tissue in facialmorphology,from a revue of the literature and dissections of 10 half-faces.Annales de chirurgie plastique esthétique[Annals of cosmetic plasticsurgery].2007;52:169-205.
-Fève等人:La différenciation adipocytaire:tout un programme...M/S[Adipocyte differentiation:an entire program...M/S].1998;14:848-57.
-Gregoire等人:Understanding adipocyte differentiation(理解脂肪细胞分化).Physiological reviews.1998,July;78(3):783-809.
-Guo等人:Aging results in paradoxical susceptibility of fat cellprogenitors to lipotoxicity(衰老致使脂肪细胞先祖对脂毒性敏感).Am JPhysiol.Endocrinol.Metab.2006,Dec.:1-54.
-Karagiannides等人:Altered expression of C/EBP family members resultsin decreased adipogenesis with aging(C/EBP家族成员的改变的表达引起与衰老相关的降低的脂肪形成).Am J Physiol Regulatory Integrative CompPhysiol.2001,Jan.;280:R1772-80.
-Karagiannides等人:Increased CUG triplet repeat-binding protein-1predisposes to impaired adipogenesis with aging(增加的CUG三联体重复结合蛋白-1易形成与衰老相关的受损的脂肪形成).J Biol Chem.2006,Aug.;281(32):23025-33.
-Kirkland等人:Adipogenesis and aging:does aging make fat go MAD?(脂肪形成和衰老:衰老使脂肪形成MAD吗?)Exp Gerontol.2002,June;37(6):757-67.
-Smith等人:The adipocyte life cycle hypothesis(脂肪细胞生命周期假说).Clinical Science.2006;110:1-9.
-Yu等人:Chronological changes in metabolism and functions of culturedadipocytes:a hypothesis for cell aging in mature adipocytes(培养的脂肪细胞代谢和功能方面的随年代的变化:成熟脂肪细胞中细胞衰老的假说).AmJ Physiol Endocrinol Metab.2004,March;286:402-410。
Claims (2)
1.式(I)的N-十六酰异亮氨酸作为人皮肤”丰盈”剂和/或”丰满”剂的美容用途:
CH3-(CH2)14-C(=O)-NH-CH(COOH)-CH(CH3)-CH2-CH3 (I)。
2.在选自下列部位的人体皮肤获得“丰盈”和/或“丰满”效果的美容处理方法:乳房、面部、脸颊、臀部和眼睑,所述方法的特征在于在所述皮肤部位施用含有有效量的式(I)的N-十六酰异亮氨酸的美容组合物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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