CN102441166A

CN102441166A - 一种单克隆抗体用于治疗头颈部肿瘤的用途

Info

Publication number: CN102441166A
Application number: CN2011103806393A
Authority: CN
Inventors: 白先宏; 罗兰多; 郭伟; 郭晔; 马国胜; 马博晨; 郑隽奇; 李桂珠; 霰海萍; 曲圣坤
Original assignee: Biotech Pharmaceuticals Co Ltd
Current assignee: Biotech Pharmaceuticals Co Ltd
Priority date: 2011-11-25
Filing date: 2011-11-25
Publication date: 2012-05-09

Abstract

本发明涉及药物领域，更具体地涉及一种抗表皮生长因子受体的单克隆抗体在治疗头颈部肿瘤包括鼻咽癌、甲状腺癌、口腔癌、喉癌和涎腺肿瘤等的用途，尤其是人源化单克隆抗体——尼妥珠单抗。该单克隆抗体是针对特异抗原产生的特异纯化抗体，它具有高度专一性，能够特异性针对肿瘤细胞进行靶向治疗，从分子水平逆转肿瘤细胞的恶性生物学行为，具有靶向性强、特异性高和毒副作用低等特点，并能显著增强放、化疗的治疗效果。

Description

一种单克隆抗体用于治疗头颈部肿瘤的用途

技术领域

本发明涉及一种抗表皮生长因子受体的单克隆抗体在治疗头颈部肿瘤方面的用途。

背景技术

根据世界卫生组织报告，目前全球每年新发肿瘤患者约有1000万，死亡近600万。自20世纪70年代以来，我国恶性肿瘤的发病率和死亡率一直呈上升趋势，2010年癌症发病总人数约为200万人，死亡150万。目前肿瘤死亡率已超过心脑血管病而跃居首位。恶性肿瘤已成为人类的“第一杀手”。

头颈肿瘤包括自颅底到锁骨上，颈椎以前这样一个解剖范围的肿瘤，以恶性肿瘤为主。即以头面部软组织、耳鼻咽喉、口腔、涎腺、颈部软组织、甲状腺等部位的肿瘤(通常不包括颅内、颈椎肿瘤及眼内肿瘤)。

头颈部恶性肿瘤因其发病部位很多，因此其发病率在不同的国家，地区，民族以及人种间都不相同。在美国华人中，男性发病率较高的是鼻咽癌，以下依次是甲状腺癌，口腔癌和喉癌；女性发病率较高的是甲状腺癌，其次是鼻咽癌和涎腺肿瘤。在美国华人男性中头颈部恶性肿瘤占全身恶性肿瘤的11％以上，在女性则不足10％。在日本，男性发病率较高的是喉癌，其次，是口腔癌；女性发病率较高的是甲状腺癌，其次是口腔癌。头颈部肿瘤占全身肿瘤的10％以下。

在我国，北京的男性头颈部肿瘤发病率以喉癌占首位，其次为鼻咽癌和口腔癌；女性头颈部肿瘤发病率以甲状腺癌占首位，其次为口腔癌。而上海市统计资料显示，男性头颈部肿瘤发病率首位是鼻咽癌，其次为喉癌。女性头颈部肿瘤发病率首位是甲状腺癌，其次是鼻咽癌，头颈部肿瘤因其解剖复杂，组织病理类型繁多，一般常见鳞状上皮细胞癌，其次为各类腺癌、肉瘤少见。依据有关的统计资料，我国头颈部恶性肿瘤占全身恶性肿瘤的10％。其中绝大部分为头颈部鳞癌。早期的头颈部鳞癌，通过单一的手术或放疗均可取得较好的效果，而对于进展期的头颈部鳞癌，则应当选择更为积极地治疗措施。目前由于治疗方式上的改变，以及大量新药的出现，进展期头颈部鳞癌的治疗有了新的进展，疗效较传统的治疗模式也有了明显的改善。

近年来提出的肿瘤生物学分期，以探讨区分机体对肿瘤的不同反应，寻找适合于调整机体反应有利于根治肿瘤的治疗方案。随着对肿瘤发病机制的进一步认识，以及分子生物学技术的不断进步，目前临床已经开始针对细胞受体、关键基因和调控分子为靶点的治疗，也就是所谓的分子靶向治疗。而其中的热点，主要是针对表皮生长因子受体(EGFR)为靶向的治疗。

EGFR是一跨膜糖蛋白受体，由细胞外的配体结合区，跨膜区及细胞内的酪氨酸激酶活性区组成，当配体于胞外的配体结合区结合后，受体可发生同二聚或异二聚作用，激活胞内酪氨酸激酶的活性，并进一步激活下游的信号传导通路。因EGFR的信号传导机制和肿瘤的恶性表型，正常细胞凋亡的抑制，血管生成，以及肿瘤的转移均有密切的联系，提示它可以作为药物的治疗靶向。在上皮源性肿瘤，特别是头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)中，EGFR表达水平显著提高，并与鳞状细胞恶变相关。目前，全球已经有三种针对EGFR的单克隆抗体上市，用于EGFR过度表达的上皮源性肿瘤的治疗，已经取得了明显的效果。此三种抗体为尼妥珠单抗(Nimotuzumab)，西妥昔单抗(Cetuximab)，帕尼单抗(Panitumumab)。

尼妥珠单抗(简称hR3)是人IgG1类型的抗体，它表达在鼠源骨髓瘤NS0细胞系中。该人源化单抗显示出与其鼠源单抗相同的活性，可以抑制标记的EGF结合到其受体上，并且有10^-9M的解离常数。尼妥珠单抗表现出对EGFR良好的结合性。为了降低与鼠源单抗相关的免疫反应和HAMA氏反应并提高体内半衰期，对这一鼠源单抗ior egf/r3(简称r3)进行了重构和人源化重组。该改造的抗体的构造：使用人免疫球蛋白RE1和EU的轻链和重链，将鼠源单抗r3互补决定区CDR移植到人免疫球蛋白的骨架上，同时突变回3个鼠源氨基酸残基(分别是Ser75，Thr76和Thr93)以完全恢复其对抗原的亲和力。

尼妥珠单抗是针对EGFR的人源化IgG1型单克隆抗体药物，通过与EGFR胞外区域3A表位结合，竞争性抑制配体与EGFR的结合，使受体失去活性，从而达到抑制肿瘤细胞的作用。同时与西妥西单抗相比，它具有人源化程度高(达95％)、相对中等亲和力和半衰期长(达302小时)的生物活性特点，从而可显著降低免疫原性、以及皮肤毒性等副反应。

本药物的治疗机制

尼妥珠单抗(hR3)是人源化抗EGFR单抗。尼妥珠单抗是抗EGFR的重组人源化单克隆抗体，其人源化程度达95％，为中度亲和力(10^-9)，有较长半衰期(302小时)。由于它是单克隆抗体，所以特异性强；而且加之它是一个人源化抗体，所以不会发生其他抗体所容易产生的致命免疫应答(HAMA)反应。

研究已经证实：尼妥珠单抗参与了抗体依赖的细胞介导的细胞毒(ADCC)和补体依赖的细胞毒(CDC)这两种重要的免疫学系统的效应机制。在51Cr释放实验中使用H-125人肺腺癌细胞系作为靶目标证明了尼妥珠单抗的ADCC活性。当使用人的补体源时，人源化单抗尼妥珠单抗可以固定、激活和诱导标记细胞的溶解。这个结果揭示了尼妥珠单抗可以通过这些免疫学效应机制(ADCC和CDC)诱导肿瘤细胞的溶胞效应。

在老鼠细胞上通过阻断EGFR受体进行了一些体内和体外的实验，以用来演示尼妥珠单抗在肿瘤细胞系和移植的肿瘤细胞上的抗增殖活性。尼妥珠单抗在三维培养基(该培养基对于肿瘤抑制有理想的品质)上有格外的活力。

尼妥珠单抗通过抑制促血管生成生长因子比如VEGF的产生而证明了其抗血管生成的属性，它还通过伴随细胞周期S期减少的G1停止证明了其致细胞凋亡的属性。在测定尼妥珠单抗的抗肿瘤活性的体内试验中，免疫组化分析揭示了被治疗患者肿瘤的血管血运供应显著降低。这些结果暗示人源化单抗尼妥珠单抗可以有效作为针对EGF-R依赖的肿瘤的治疗。

发明内容

本发明的目的在于提供一种有效治疗头颈部肿瘤的药物，经本发明人深入而广发的研究发现，尼妥珠单抗可以非常有效的治疗头颈部肿瘤，在此基础上完成了本发明。

尼妥珠单抗的分子结构是已知的，如中国专利CN1054609C所述，该单克隆抗体是一人源化单克隆抗体，是针对特异抗原产生的特异纯化抗体，它具有高度专一性，能够特异性针对肿瘤细胞进行靶向治疗，从分子水平逆转肿瘤细胞的恶性生物学行为，因而有“生物导弹”之称。该类药物具有靶向性强、特异性高和毒副作用低等特点，并能增强放、化疗的治疗效果，代表着肿瘤治疗领域的最新发展方向。

本发明的技术方案如下：

本发明的目的在于提供一种有效治疗头颈部肿瘤的药物，所述药物的活性成分为抗EGFR单克隆抗体，该单克隆抗体指尼妥珠单抗(Nimotuzunab)。

本发明的第一方面，提供了一种抗EGFR的单克隆抗体的用途，用于制备治疗头颈部肿瘤的药物。

所述的疾病头颈部肿瘤包括自颅底到锁骨上，颈椎以前这样一个解剖范围的恶性肿瘤，即以头面部软组织、耳鼻咽喉、口腔、涎腺、颈部软组织、甲状腺等部位的肿瘤(通常不包括颅内、颈椎肿瘤及眼内肿瘤)；所述的头颈部肿瘤是指鼻咽癌、甲状腺癌、口腔癌、喉癌，下咽癌，鼻腔副鼻窦癌和涎腺肿瘤(大涎腺等)等。

所述的口腔癌是指口底癌，腭癌，牙龈癌，舌癌，颊粘膜癌，唇癌。

所述头颈部肿瘤的发病部位为面部软组织、耳鼻咽喉、口腔、涎腺、颈部软组织、甲状腺等部位。

所述药物的给药途径是静脉注射或静脉滴注。

所述药物的给药剂量是每周给药一次，优选给药剂量：首次剂量200mg1.5m²体表面积，以后可以每次100mg-200mg/1.5m²体表面积，持续6-8周。后续治疗可考虑每两周给药一次(100mg-200mg1.5m²体表面积)，根据其药物代谢半衰期特点来设定。

在使用本发明药物时，是将安全有效量的尼妥珠单抗施用于哺乳动物，其中，该安全有效量通常至少为50mg/周，首次剂量为200mg1.5m²体表面积，持续应用6-8周。具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围内的。

附图说明

图1为抗体依赖性细胞调节细胞毒特异减退的结果：100/1效应器/靶位率

图2为抗体依赖性细胞调节细胞毒特异减退的结果：50/1效应器/靶位率

图3为抗EGFR单抗对荷载H-125人腺癌细胞裸鼠的抗肿瘤作用

图4为抗EGFR单抗对荷载A431肿瘤细胞裸鼠的抗肿瘤作用

图5为长期毒性试验中三种抗体在两个计量条件下对荷载A431SCID小鼠的作用

具体实施方式

本发明的实施方案通过下列实施例举例说明。然而本发明的实施方案不限于这些实施例的特定细节，因为对于本领域的普通技术人员来说，其它的变化是已知的，或根据直接公开的内容和附属的权利要求是显而易见的。因此，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。本文引用的参考文献以其全文通过引用并入本文。

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1、临床前药效学试验

一、体外活性

通过99mTc标记的尼妥珠单抗和H-125人肺腺癌肿瘤细胞系、A431人阴道上皮癌肿瘤细胞系以及MDA-MB-468人乳腺癌肿瘤细胞系的平衡结合试验来测定尼妥珠单抗结合肿瘤细胞的能力。在室温下使用冰冻干燥试剂盒(购自西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司)标记，15分钟后，平均有(97.38±0.23)％的99mTc标记到了IgG抗体上。在丙酮中单抗的快速纸层析显示大约3％或更少的自由高锝酸跑到试剂前沿(Rf＝10)，这揭示几乎所有的高锝酸都被还原。由1.0％白蛋白浸渗的ITLC方法测定的尼妥珠单抗的胶体形态是(1.68±0.81)％。99mTc 标记的尼妥珠单抗的最大结合(Bmax)可达74.02％，表3中显示了每个细胞的EGFR的数目及抗体和所有细胞系的亲和常数。

表3、在人癌症肿瘤细胞系上的尼妥珠单抗的结合特性

由上表可以看出，每个细胞的EGFR的数目分别是(2.26±0.04)×10⁵、(1.13±0.10)×10⁶、(1.76±0.27)×10⁶，单抗的结合亲和常数分别是1.76×10⁸、2.75×10⁸、2.35×10⁸。这些研究显示出抗体有能力识别癌症肿瘤细胞，并且该产品对这三种过度表达EGFR的细胞系有很好的特异识别。

为了检定尼妥珠单抗的免疫学和非免疫学效应功能，与其亲代鼠源单抗r3进行功能比较，在H-125肺腺癌细胞系上进行了抗体依赖的细胞介导的细胞毒(ADCC)、补体依赖细胞毒(CDC)和增生抑制(PIA)实验。该细胞系每个细胞都表达10⁵EGFR，EGFR和EGF有10^-9M的高亲和力，并在培养中保持腺癌组织学特性。在37℃，含5％CO₂潮湿空气下细胞生长在RPMI 1640培养液中，此培养液含10％胎牛血清。每个单抗浓度下尼妥珠单抗特异调节较高的ADCC减退和效应器/靶位率高于尼妥珠单抗。结果如表4、表5以及图1、图2所示。表6显示了人源化单抗固定和激活人补体并诱导肿瘤细胞溶解的能力。

表4、抗体依赖性细胞调节细胞毒特异减退的结果：100/1效应器/靶位率

表5、抗体依赖性细胞调节细胞毒特异减退的结果：50/1效应器/靶位率

表6尼妥珠单抗的补体依赖的细胞毒性测定结果

在体外由增殖抑制测定确定鼠源性和人源性单抗的细胞增殖抑制作用。尼妥珠单抗和鼠源单抗均抑制H-125细胞增殖。尼妥珠单抗的抑制率高于鼠源单抗，如表7所示。

表7增殖抑制测定结果

二、体内活性

1、抗肿瘤作用的动物模型试验：NMRI nu/nu裸鼠荷载H-125人腺癌细胞试验

裸鼠在异种皮移植H-125人腺癌细胞后注射使用铼-188(188Re)标记鼠源单抗标记的单抗。标记单抗的放射免疫疗效取决于肿瘤的部位及靶位，即EGFR和抗体互补决定区(CDRs)的分子反应。由于人源化和鼠源抗体有相同的CDRs，因此从RAIT试验中鼠源单抗的数据可以预期人源化单抗的治疗作用，在这个动物模型中188Re标记的和未标记的均显著的降低了肿瘤的生长速度(50％)，如图3所示。标记的单抗比不标记的单抗抑制作用更强一些。这个结果显示了188Re标记的单抗对动物模型和人类表皮源癌症的潜在治疗功效。

2、抗肿瘤作用的动物模型试验：NMRI nu/nu裸鼠荷载A431肿瘤细胞试验

动物短期和长期体内抗增殖作用是在异种皮移植小鼠模型上进行。C225(该单抗为人鼠嵌合单抗，是美国Imclone公司的产品，曾在美国进行临床试验)，尼妥珠单抗和其亲本鼠源单抗以PBS为对照进行测试。在移植良好的A431肿瘤的SCID小鼠身上注射4次(短期)或8次(长期)单抗或对照物(PBS)后对肿瘤的体积进行测量。从肿瘤的百分数和体积看单抗有明显的抗肿瘤作用。在短期和长期的对照试验中对照组平均肿瘤大小是用药组的2和5倍。三种抗体在1mg和0.25mg剂量下抑制作用无显著差异。如图4所示。

实施例2、安全性试验

临床试验为尼妥珠单抗(泰欣

)联合放疗/放化疗用于头颈鳞癌术后辅助治疗的临床研究研究，调查尼妥珠单抗作为一潜在头颈鳞癌治疗药物的安全性和有效性。共36例患者，男性24例、女性12例。平均年龄58.83岁(33至65岁)，均为晚期肿瘤。36例患者分为2个治疗组，每组18人。组1＝200mg：18例患者，术后尼妥珠辅助单抗；组2＝200mg：18例患者术后无尼妥珠辅助单抗，前肘静脉输液给药。结果：未出现严重临床毒性。18例中有3例出现轻度不良副反应。主要症状为震颤。其它的不良反应还有：发热、呕吐、头晕、胸痛和皮肤潮红。未见局部不良反应。

实施例3、毒性试验

一、急性毒理研究

单次剂量注射的毒性试验是按照GLP标准的要求在Sprague Dawley大鼠上进行的。剂量分别为最高人体剂量400mg的(5.71/mg/Kg)的0、0.25、1.25和5倍。四组动物中每组各有5只雌性和5只雄性大鼠。除所有动物中的软粪便次数增加(p＜0.05)外，在给药和对照组中没有出现死亡和临床异常。结论：注射任一剂量的药物均未发现明显的毒性反应特征。

二、亚急性毒性研究

采用剂量达到人体最高每公斤剂量(315mg/dose或4.5mg/Kg)的4.0～12.7倍在动物身上做了尼妥珠单抗的重复剂量的亚急性研究(两次大鼠试验和一次猴试验)，该单抗是从主细胞库和扩展细胞库中生产出来的。从扩展细胞库生产出来的产品用于最高剂量研究。用扩展细胞库生产的产品来达到的累积的剂量是建议的人最高每公斤剂量的178倍。在各单独的剂量或重复的剂量下没有观察到任何毒性征兆。在兔子身上做的局部耐受性实验显示在给药位点给药0.428mg/Kg(体积1ml)剂量下没有刺激作用。对于2公斤的兔子，最高给药浓度是0.85mg/mL，一次注射。这与通过大约1mg/ml浸剂给药的治疗剂量是可比较的。在猴子身上进行的早期重复剂量的毒性研究：诊断剂量(3mg)从0.19倍于建议的人每公斤治疗剂量给药到在14天内累加到2.64倍，没有观察到负面效应。在啮齿类动物和猴子身上连续14天使用单抗的研究(累积剂量：建议的人每公斤剂量的81倍～178倍)提供了一个合适的关于毒性缺乏和该产品剂量多次使用安全性的提示，对蛋白单抗的主要副反应是可以抵消其预定活性的抗原应答反应。

三、长期毒性试验

在两个剂量下，长程注射尼妥珠单抗，鼠源单抗和C225对有效植入的A431肿瘤的影响试验，如图5所示。在注射3种抗体8次后，6个治疗组均有显著的反应。对照组肿瘤呈现快速生长，最终体积达1000mm³，相当于最初体积的5倍。3种抗体在两个剂量下给药组动物的肿瘤平均体积未见明显差异，这说明低剂量(0.25mg/次)已对肿瘤有足够的抑制。8次注射后，小鼠的肿瘤已消失，给药终止。随后对所有小鼠进行了肿瘤复发和抗药性的评价。对照组小鼠在最后注射的7天后行安乐死，并测量肿瘤的大小。给药组在最后给药的两周内尚有肿瘤存在的小鼠肿瘤体积继续缩小。就每只动物来说，高剂量组的抗肿瘤效果偏好。使用1mg剂量的h-R3和C225给药组小鼠在首次注射后的22天肿瘤基本消失。而在3个低剂量组中5只小鼠的4只在8次注射后肿瘤完全消失，每组中均有一只仍有小块肿瘤存在。

实施例4、药物动力学试验

一、动物药代动力学：

1、肿瘤移植小鼠的药代动力学研究：在晚期相中相对于不同剂量的分布体积是213.3ml、177.83ml、127.10ml(剂量分别是1.0、6.72和10.33mg)。对于1.0、6.72、10.33mg剂量的清除半衰期分别是27.4小时、41.53小时和52.36小时。这对于动物模型半衰期较长，而血浆清除率(5.5小时、3.12小时、1.68小时)则相对较慢。试验中也对人源单抗结合的生物分布进行了研究。单抗在循环系统中迅速清除，在除肝脏、肺脏、肾脏的一般组织中非特异性的放射性很快降低。对肿瘤移植小鼠，在后期放射标记的尼妥珠单抗的肿瘤/非肿瘤比值相当高。良好的生物分布和清除率及高的肿瘤摄取率表明该产品对EGFR高表达的表皮源性肿瘤患者有着潜在的治疗作用。

2、兔子的药代动力学研究：使用免疫酶标方法和125I标记方法在静脉注射单抗(免疫酶标方法：三个剂量分别为1、6.72和10.33mg；125I标记方法：剂量为1毫克)后描绘单抗的药代动力学特性。每组兔子(每组6只)接受了单剂量的耳缘静脉注射。在注射药物后0.16、0.25、0.33、0.41、0.5、0.75、1、3、6、12、24、36、48和60小时时取血样(每个时间点抽取1mg血样)。血样被用来进行血液自发凝集反应。血块从管的边缘分离出来。将Eppendorf管在3000rpm(Sigma离心机)下离心15分钟，收集血清，在一γ-Clinigamma 1272计数器中进行放射活性的定量；或将血清储存在-20℃，用酶联免疫吸附ELISA方法来鉴定，显示了很好的一致性或精确指标，其平行和线性的平均值为98.23％，灵敏度为7.8ng/mL(能检测到的最低浓度)，有很高的专一性。表6总结了从对血浆浓度-时间数据分析而来的药代动力学平均参数。在所有兔子中对所有的剂量都观察到了血浆浓度的双相衰退。

表6、兔子中静脉注射单抗所获得的药代动力学的参数表

结果分析：根据H.Akaike 1976年的标准在一个专业程序

V2.11上进行值的运算(特征参数)。t1/2λZ显示很好的平均值(27.4小时)，其范围在24.0-31.5小时。这个清除值与在其它单抗中获得的结果相一致。既然单抗对于兔子来说是一个外来蛋白，其生物转化机制应该比在人中更为活跃。一个低的清除率(5.5ml/h)显示在该物种中的低净化机理。Vz值显示了一个213.3ml的平均值。如果和兔子平均血浆体积(57-65ml/kg)6-9相比这个值有很好的相关关系。Vss显示了一个217.0ml的平均值。已知低的Vz值应该就是血浆体积(156ml)10。从这些结果根据William Jusko方法(KD＝Vss/TBWti 10)可以计算单抗的分配系数。获得的KD平均值(0.13)揭示单抗有限的血管外的渗透性和在中央室或包括血浆在内的中央腔的高冲洗器官内的很高的持久性。MRT平均值是40.2小时，确证了单抗在循环中的很好的持久性，相应的到期清除率是注射剂量的63.2％，证实了单抗在循环中有很高的持久性。尼妥珠单抗在兔子的试验中显示出药代动力学的规律。

二、人体药代动力学：

对22名晚期上皮源性肿瘤患者进行了观察：各组病人通过静脉分别注射50、100、200和400mg的尼妥珠单抗(其中每个剂量中均含有3mg 99mTc-标记的尼妥珠单抗)。血浆清除曲线与双指数方程显示：用药剂量50、100、200和400mg组对应的清除半衰期(t1/2β)分别为：62小时、82小时、302小时和304小时。生理条件下，不同剂量用药24小时由尿路排出量占注射剂量(ID)的比例分别是21.1％、28.20％、27.36％和33.57％。

生物分布研究显示：尼妥珠单抗在人体内主要分布的器官为肝脏、脾脏、心脏、肾脏和胆囊，其中肝脏是单抗特异摄取最高的器官。其药代动力学的清除曲线呈指数关系，半衰期分别为62.91、82.60、302.95和304.51小时，其AUC分别为45458、145931、573612和635275ng/ml.min。Cmax分别为27790、36612、52713和57117ng/ml，中央室分布容积(Vc)分别为2321.96、2823.67、4279.71、7173.99ml，总清除率(CI)分别为1.08、0.67、0.34和0.76ml/h/kg。在一个I/II期临床试验中共有24例确诊为晚期头颈部鳞癌无法手术的患者入组，对尼妥珠单抗多次剂量联合的药代动力学进行评估。重复剂量200、400mg/W治疗的平均最小和最大稳态血清浓度分别为19.20～75.61ug/ml和39.02～147.13ug/ml，稳态的谷浓度分别为34.6ug/ml和81.9ug/ml。

实施例5、给药剂量和方式

尼妥珠单抗联合放疗治疗不宜根治的头颈部肿瘤的I期临床研究的初步结果，试验剂量为100、200、400mg，每周一次，连续6-8周，后续每两周给药一次，直至病情变化。结果：100mg组：6例中3例CR，1例PR、1例SD，随访期间中位进展时间12月，中位OS 28月。200mg组：6例中4例CR，2例PR，中位进展时间24月，中位OS未达到；400mg组：6例中5例CR，1例PR，中位进展时间和总生存时间(OS)均未达到。三组总的中位生存时间为28月。无III～IV度不良反应出现。结论为尼妥珠单抗与放疗联合在三个剂量组均有良好的临床反应和耐受性。由于几乎无副作用尤其是无皮疹发生是尼妥珠单抗临床应用的亮点，建议使用尼妥珠单抗，首次剂量200mg/1.5m2体表面积，以后每次100mg-200mg/1.5m2体表面积，持续6-8周，后续治疗中每两周给药一次，每次100mg-200mg/1.5m2体表面积。

实施例6、临床研究

1、II期临床研究案例分析：

本实验是由我单位临床试验基地上海交通大学医学院附属第9人民医院的郭伟教授做的尼妥珠单抗联合化疗TPF方案治疗晚期头颈部鳞癌的II期临床试验研究。试验的主要目是为了探索尼妥珠单抗联合化疗治疗晚期不能手术或复发转移头颈部鳞癌的有效性。次要目的是为观察头颈部鳞癌化疗联合泰欣生

(尼妥珠单抗)靶向治疗敏感性可能相关的生物学指标及安全性。研究为随机对照临床试验，试验组入组患者40对。试验组的治疗方案为化疗；TPF方案：d1多西他赛75mg/m²+DDP 75mg/m²，d1-d5 5-FU 750mg/m²iv CI，21d重复，共2个周期。同时联合泰欣生(200mg静脉滴注)，1次/周，共6个周期，在化疗前1小时使用。对照组单用化疗。治疗前及第一次治疗后6、10周，分别进行影像学检查(CT)及血清学检查评估肿瘤缓解情况和疾病进展情况。试验组有效率为有超过61％的患者在试验结束后达到了可以手术的指证。大部临床患者获益(CR+PR)，无效患者仅占一小部分。尼妥珠单抗联合化疗TPF方案对晚期头颈部鳞癌有效，有效剂量为200mg，不良反应轻微，特异为HAMA反应和皮疹，未发现新的剂量限制性毒性，结果如表8所示。

表8、患者入组与疗效情况

剂量	试验组	对照组
			200mg	40	40
有效(CR+PR)	/40	/40

2、II期临床研究案例分析：

本实验是由我单位临床试验基地上海复旦肿瘤医院的嵇庆海教授与郭晔教授采用尼妥珠单抗联合PF方案作为诱导化疗治疗可切除头颈部鳞癌的II期临床研究。试验是预测对于有手术切除可能的局部晚期头颈部鳞癌患者，在常规PF方案基础上联合尼妥珠单抗进行诱导化疗有可能提高肿瘤缓解率，进而改善这部分患者的治疗预后的一项前瞻性II期临床研究，来验证并且探索与疗效以及预后相关的生物标记物。该研究为单中心、开放性的II期临床研究，计划入组40例患者，接受2个疗程的尼妥珠单抗联合PF方案的诱导化疗继以手术治疗。研究终点：主要研究终点是客观缓解率(ORR)：完全缓解(CR)+部分缓解(PR)，病理完全缓解率(pCR)次要研究终点为总生存(OS)：自入组之日起至任何原因导致的死亡，无进展生存(PFS)：自入组之日起至疾病进展或任何原因导致的死亡和安全性：血液学和非血液学毒性。尼妥珠单抗400mg每周，连续6周。顺铂75mg/m2IV D1，5-FU 3750mg/m2CIV 120小时，每3周重复，评价疾病情况决定是否进入手术指证。入组40例，40例全部可评价。治疗反应CR 13例(32.5％)，PR 12例(30％)，SD 12例(30％)和PD 3例(7.5％)。疾病控制率为62.5％(高低于BOND的55.5％)，如表10、11所示。结果显示，尼妥珠单抗联合PF方案作为诱导化疗治疗可切除头颈部鳞癌的II期临床研究尼妥珠单抗联合伊立替康治疗伊立替康治疗失败的IV期结直肠癌在疾病控制和生存期均有良好的效果。

表10、疾病控制率

表11、治疗反应

Tumor Response	n＝40(％)
		CR	13(32.5％)
PR	12(30％)
		SD	12(30％)
PD	3(7.5％)
		Missing	0(0％)

结论：尼妥珠单抗联合PF方案作为诱导化疗治疗可切除头颈部鳞癌有效，有效剂量400mg(优化剂量400mg)，不良反应轻微，特异为HAMA反应和皮疹，未发现新的剂量限制性毒性。尼妥珠单抗联合PF方案作为诱导化疗治疗可切除头颈部鳞癌在疾病控制和生存期均有良好的效果。

由上述我单位在临床基地进行的临床研究可以看出，尼妥珠单抗在联合化疗治疗头颈部肿瘤患者，可提高疗效且耐受性良好，延长PFS时间。不良反应较轻。尼妥珠单抗联合化疗治疗晚期头颈部肿瘤患者，可提高疗效，提高患者适合手术切除的可能性，且耐受性良好。均证明本发明药物尼妥珠单抗在治疗头颈部肿瘤方面的显著的临床效果。

Claims

1.一种抗表皮生长因子受体的单克隆抗体在制备治疗头颈部肿瘤的药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述头颈部肿瘤是指鼻咽癌、甲状腺癌、口腔癌、喉癌、下咽癌、鼻腔副鼻窦癌和涎腺肿瘤中的任意一种。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述口腔癌是指口底癌、腭癌、牙龈癌、舌癌、颊粘膜癌、唇癌中的任意一种。

4.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述头颈部肿瘤的发病部位为面部软组织、耳鼻咽喉、口腔、涎腺、颈部软组织、甲状腺中的任意一种。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗表皮生长因子受体的单克隆抗体为尼妥珠单抗。

6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗表皮生长因子受体的单克隆抗体的给药途径是静脉注射或静脉滴注。

7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抗表皮生长因子受体的单克隆抗体的给药剂量是每周给药一次，首次剂量200mg/1.5m²体表面积，以后每次100mg-200mg/1.5m²体表面积，持续6-8周，后续治疗中每两周给药一次，每次100mg-200mg/1.5m²体表面积。