CN102433266A - 热带假丝酵母菌、其组合物和应用 - Google Patents
热带假丝酵母菌、其组合物和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102433266A CN102433266A CN2011103801173A CN201110380117A CN102433266A CN 102433266 A CN102433266 A CN 102433266A CN 2011103801173 A CN2011103801173 A CN 2011103801173A CN 201110380117 A CN201110380117 A CN 201110380117A CN 102433266 A CN102433266 A CN 102433266A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- candida tropicalis
- whcz
- strain
- fermentation
- vinasse
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000222178 Candida tropicalis Species 0.000 title claims abstract description 84
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 70
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 70
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 48
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 29
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 13
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims abstract description 8
- 108010027322 single cell proteins Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims abstract description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 57
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 38
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 38
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 12
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 10
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 9
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 9
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 6
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 claims description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims description 3
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims description 3
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000009461 vacuum packaging Methods 0.000 claims description 3
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 12
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract description 9
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 abstract 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 abstract 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 abstract 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 53
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 33
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 32
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 32
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 29
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 18
- 241000235646 Cyberlindnera jadinii Species 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 15
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 13
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 10
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 9
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 9
- 229960003487 xylose Drugs 0.000 description 9
- SRBFZHDQGSBBOR-LECHCGJUSA-N alpha-D-xylose Chemical compound O[C@@H]1CO[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-LECHCGJUSA-N 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 L-rhamnosyl Chemical group 0.000 description 4
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 4
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 4
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000004065 wastewater treatment Methods 0.000 description 4
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N Ammonia-15N Chemical compound [15NH3] QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 3
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N D-ribopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 2
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- VAJVDSVGBWFCLW-UHFFFAOYSA-N 3-Phenyl-1-propanol Chemical compound OCCCC1=CC=CC=C1 VAJVDSVGBWFCLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DMOXQGWDIIINKU-ZBXWUJIGSA-N 76822-96-3 Chemical compound N([C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN DMOXQGWDIIINKU-ZBXWUJIGSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 229920000862 Arboform Polymers 0.000 description 1
- 241000432824 Asparagus densiflorus Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- YTBSYETUWUMLBZ-UHFFFAOYSA-N D-Erythrose Natural products OCC(O)C(O)C=O YTBSYETUWUMLBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YTBSYETUWUMLBZ-IUYQGCFVSA-N D-erythrose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)C=O YTBSYETUWUMLBZ-IUYQGCFVSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 206010056474 Erythrosis Diseases 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 240000008415 Lactuca sativa Species 0.000 description 1
- XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N N-acetyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N Phenylpropyl alcohol Natural products CCC(O)C1=CC=CC=C1 DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N T-2 toxin Chemical compound C([C@@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@]3(COC(C)=O)C[C@@H](C(=C1)C)OC(=O)CC(C)C)O2 BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N 0.000 description 1
- BXFOFFBJRFZBQZ-UHFFFAOYSA-N T2 Toxin Natural products C1=C(C)C(OC(=O)CC(C)C)CC2(COC(C)=O)C1OC1C(O)C(OC(C)=O)C2(C)C11CO1 BXFOFFBJRFZBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- HNEGCRMUYSKRRR-UHFFFAOYSA-N Trichodermin Natural products CC(=O)OC1CC2OC3C=C(C)CCC3(C)C1(C)C21CO1 HNEGCRMUYSKRRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000015177 dried meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000002921 fermentation waste Substances 0.000 description 1
- 239000002657 fibrous material Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940059442 hemicellulase Drugs 0.000 description 1
- 108010002430 hemicellulase Proteins 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 229960000448 lactic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N melezitose Chemical compound O([C@@]1(O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O)CO)CO)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QWIZNVHXZXRPDR-WSCXOGSTSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000010815 organic waste Substances 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000010909 process residue Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 235000012045 salad Nutrition 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000012882 sequential analysis Methods 0.000 description 1
- 239000010802 sludge Substances 0.000 description 1
- 238000010563 solid-state fermentation Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000004458 spent grain Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- HNEGCRMUYSKRRR-IKIFYQGPSA-N trichodermin Chemical compound C([C@@]12[C@@]3(C)[C@@]4(C)CCC(C)=C[C@H]4O[C@@H]1C[C@H]3OC(=O)C)O2 HNEGCRMUYSKRRR-IKIFYQGPSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 108010049518 viscotoxin Proteins 0.000 description 1
- 229920001221 xylan Polymers 0.000 description 1
- 150000004823 xylans Chemical class 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
本发明提供了一株新的热带假丝酵母菌，以及热带假丝酵母菌与黑曲霉菌剂组合物在酒糟处理和单细胞蛋白发酵饲料中的应用。本发明还提供制备固体发酵菌剂的方法。本发明所分离的热带假丝酵母菌，具有能够利用多种碳源、抗逆性强，耐高温性和絮凝性好，蛋白含量高等特点，用于处理酒糟液具有很高的负荷，对酒糟液的COD和氨氮去除率高，并能够增加酒糟离心后的固形物得率和蛋白质含量。采用该菌株发酵可提高酒糟饲料蛋白质含量。
Description
发明所属领域：
本发明属于酒糟资源化利用与发酵饲料领域，具体地说，本发明涉及热带假丝酵母菌、含该菌的组合菌剂，及该酵母菌和组合菌剂在酒糟处理及单细胞蛋白发酵饲料中的应用。
背景技术：
酵母菌具有蛋白质含量高、易于培养，并可利用氨态氮等无机氮源合成菌体蛋白等优点，国内外均有不少关于酵母菌利用食品加工或发酵废弃物发酵生产单细胞蛋白的报道，下列文献体现了这一点。
Azoulay E,Jouanneau F,Bertrand J C,et al. Fermentation Methods for protein enrichmemt of Cassava and Corn with Candida tropicalis. Applied and Environmental Microbiology,1980,39(1):41-47.
张敏，侯先志，考桂兰，等.酵母菌发酵生产饲料酵母条件的优化,饲料工业,2010,31(8):28-30.
但用粮食等淀粉质原料发酵转化酵母蛋白在经济上并不合算。对工业化生产而言，开发廉价的酵母菌培养基质，特别是廉价碳源，以及适应该基质生长的酵母菌株，是饲料酵母生产是否具有工业应用价值的决定因素。
酒糟是常用于生产酵母蛋白饲料的廉价原料。有实验分析表明酒糟的主要成分为纤维素、半纤维素、有机酸、甘油等，同时还含有能抑制酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）生长的有害物质。
利用酵母菌处理酒糟等高浓度有机废液及利用低蛋白原料发酵制备单细胞蛋白，既可解决发酵生产中产生的废除物，也可产生高质量的饲料蛋白。但在生产上能否成功应用并取得较好的经济效益，取决于发酵时间的长短、酵母菌株对高温、pH及有害物质的耐受性及对多种廉价碳源的利用能力、酵母菌的营养价值等。即在工业化生产上要求菌种对酒糟废液的处理具有更高的BOD负荷、氨氮去除率的实际效果，和菌体固形物得率高和菌体蛋白含量高的经济性。
已有的实验证明，不同的酵母菌株对酒糟等废弃物中有害物质的耐受能力、生长速度、耐高温能力、耐酸能力、水处理负荷及氨氮吸收能力、蛋白质含量等方面存在明显差异。诚然，目前公开的菌种还没有同时具有耐高温、废水处理容积负荷高，耐酸，生长速度快，蛋白质含量高的菌株。如果筛选到这样菌种，就可以不经特别处理直接用于对酒糟的处理，提高COD及氨氮的去除效率，有效缩短发酵处理时间，降低废水处理运行成本，提高蛋白饲料的营养价值和售价。
由于热带假丝酵母菌(Candida tropicalis)抗逆性强，能够利用木糖等优点，已应用于处理酒糟等低蛋白、高纤维的废弃物发酵或污水处理中。
下列文献是热带假丝酵母菌应用实例。
丁重阳, 吴天祥, 张梁, 等.利用浓醪酒糟培养单细胞蛋白的研究，酿酒科技，2007，162（12）：95-98.
李兆春，郑朔方，侯文华，等.玉米酒精糟液生产高蛋白饲料的清洁生产工艺，工业用水与废水，2005，36（3）：27-29.
刘建龙，姚源明, 杨连生.双株酵母混合培养处理酒精蒸馏废水生产饲料酵母的研究,粮食与饲料工业，2005，11:30-31.
赵建国，钟世博，张明祥.热带假丝酵母固体发酵黄酒糟生产饲料的研究,粮食与饲料工业,2002，2：22-23.
刘继栋，付灿，王同阳.热带假丝酵母在木薯淀粉废液治理中的应用研究，中国酿造，2009.208(7)：121-123.
王升厚，菌糠单细胞蛋白饲料生产方法，中国发明专利申请号:200410020561.4,公开号 CN1579197A.
Zheng S Yang M Yang Z. Biomass production of yeast isolate from salad oil manufacturing wastewater. Bioresour Technol.2005,96(10):1183-1187.
目前，热带假丝酵母菌在实际生产应用上存在的主要问题是：（1）现有公开的热带假丝酵母菌株耐高温性能差，最适生长温度低于40℃，在高温条件下的发酵性能稳定性差，不适合应用于对高温酒糟液的处理；（2）现有公开的热带假丝酵母菌株对酒糟的絮凝性较差，发酵固形物得率偏低，处理废水的容积负荷和对氨氮的去除率不高，导致实际应用中生产运行成本高。（3）由于热带假丝酵母菌不能直接利用废弃物中粗纤维，仅采用酵母菌发酵酒糟，对其中的纤维素、半纤维素等有机物不能有效转化和利用，从而降低了其对高纤维原料的转化为菌体蛋白的效果。
黑曲霉、木霉等霉菌含有丰富的纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶等酶系，往往被用于与酵母菌混合培养，以克服酵母菌对粗纤维难以利用的缺点。这方面已有不少研究报道。
吴祖芳，翁佩芳. 复合菌固态生物转化啤酒糟发酵条件优化的研究,饲料工业，2002，23(5）:32-34.
陶敏, 王维嘉,蔡俊. 啤酒糟发酵产高蛋白饲料菌种的配伍,饲料工业，2011，32(11）：58-61.
张建华. 酒糟发酵蛋白质饲料菌种筛选的研究,粮食与饲料工业，2010，8:46-48.
王沁,赵学慧. 纤维素分解菌W25的筛选与鉴定, 华中农业大学学报,1992,11(2),198-200.
曾任森,石木标,骆世明,等. 绿色木霉代谢产物的植物毒性研究，应用生态学报，1998，9（1）：64-66.
刘忠元，热带假丝酵母和黑曲霉发酵玉米秸秆的条件优化，吉林大学硕士论文，2005.
酵母菌和黑曲霉、木霉等的组合菌剂中菌种组成及其比例是否合适，关系到发酵饲料产品的安全性和对酒糟等废弃物中纤维质原料的利用率，决定产品的质量和产品的最终生产成本。
目前利用含酵母和霉菌的组合菌剂发酵饲料存在的主要问题是：（1）多数研究报道含有木霉菌，存在饲用安全性问题。木霉虽然纤维素酶活高，但许多研究还指出, 木霉培养物中存在着多种毒素, 包括木霉素、T2毒素、粘毒素等，不适合直接用于食品、饲料中。（2）目前利用组合菌剂进行发酵饲料的研究报道发酵处理时间过长，均超过3天，不适合于工业化快速生产需要，生产效率不高。（3）由于酵母菌和霉菌之间的生长速率差别较大，组合菌剂中若无合适的菌数比例，进行混合菌种发酵时会导致各菌种之间菌数比例不协调，不便于发酵生产过程控制和组合菌剂达到最佳处理效果。
发明技术内容：
本发明的一个目的是提供一种新的热带假丝酵母菌株，该菌株耐高温，抗逆性强，生长快，絮凝性好，废水处理容积负荷高，耐酸性好，蛋白质含量高；解决了利用酒糟液进行饲料酵母蛋白发酵工艺过程中，由于酵母菌容积负荷和固形物得率低而带来的整个生产效率低，酒糟料温高及发酵过程产热带来的酵母菌耐热等不适于工业化生产的问题。
本发明的另一个目的是提供一种含有热带假丝酵母菌的饲料发酵菌剂组合物。菌剂组合物中添加有能够降解酒糟中纤维素和半纤维素的黑曲霉，可以提高酒糟中粗纤维的利用率，同时具有较好的饲用安全性。
本发明的再一个目的是提供热带假丝酵母菌株及其菌剂组合物在酒糟液处理及木薯酒糟等单细胞蛋白发酵饲料中的应用。
本发明公开了一株新的热带假丝酵母菌，其特征在于,该菌株为热带假丝酵母WHCZ株（Candida tropicalis WHCZ），保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2011355，保藏日期是2011年 10月17 日。 热带假丝酵母WHCZ株从一种传统白酒高温堆积料中分离经筛选获得。该菌株有如下特征：热带假丝酵母WHCZ株最适生长温度40℃，并且在42℃高温下生长良好。该菌株能够利用木糖和甘油作为碳源。固体发酵条件下，与未发酵的木薯酒糟原料对照相比，接种菌株WHCZ对木薯酒糟粗蛋白含量达19.12%，比对照提高56.1%。液态发酵条件下，对高浓度的木薯酒糟液的BOD容积负荷达18.5kg BOD/m3.d ，对氨氮的去除率达76.0%,固形物粗蛋白含量达45.80%，分别比普通热带假丝酵母高56.8%、29.5%和13.1%。WHCZ酵母处理高浓度小麦酒糟液的BOD容积负荷达18.9kg BOD/m3.d，固形物得率为1.75%，粗蛋白含量达36.67%,分别比产朊假丝酵母提高62.9%，9.4%和 6.6%。即热带假丝酵母WHCZ株具有耐高温，发酵酒糟饲料能力好，蛋白质含量高，对酒糟液的BOD容积负荷达高，COD及氨氮去除率高等特点。
热带假丝酵母WHCZ株形态特征是：菌落乳白色、形状为规则圆形、表面较平坦、干燥，培养较长时间后，假菌丝分支分布，细胞呈圆形或椭圆形。
热带假丝酵母WHCZ株生化特征是：可发酵利用果糖，蔗糖，D-半乳糖、D-木糖，甘油；不能发酵利用，纤维二糖，绵子糖，D-阿拉伯糖，L-阿拉伯糖，D-海藻糖，L-鼠李糖。
热带假丝酵母WHCZ株耐高温及生长特征是：YPD平板上划线接种，分别在33℃至42℃下培养均生长良好。
热带假丝酵母WHCZ株26S rDNA D1/D2区域基因序列分析显示：热带假丝酵母WHCZ株与热带假丝酵母N02-2.1株的同源性超过98%。
本发明还公开了一种含热带假丝酵母WHCZ株的菌剂组合物，该菌剂组合物对酒糟处理时间短，生产效率高，安全可靠，适合直接用于食品、饲料。
本发明还公开了一种优化的发酵菌剂组合物，其特征在于它含有下列组份(重量百分比)：
热带假丝酵母 80%
黑曲霉 20%
其中热带酵母为CCTCC M2011355 ，黑曲霉为CICC 40613。
本发明中，热带酵母CCTCC M2011355按专利法要求进行了保藏；黑曲霉CICC 40613可通过市售商业生物公司获得或菌种保藏机构获得，如中国工业微生物菌种保藏管理中心保藏有该菌种，研究者可向该中心索取。黑曲霉(Aspergillus niger)在中国工业微生物菌种保藏管理中心菌种目录中编号为CICC 40613，任何符合条件的研究者可向该保藏中心索取。
本发明公开的饲料发酵菌剂组合物为液态或固态。优先的，本发明公开的饲料发酵菌剂组合物为固态。
本发明还公开了制备固态发酵菌剂组合物的方法，包括如下步骤：
1) 菌种活化：接种热带假丝酵母WHCZ CCTCC M2011355于灭菌的土豆汁或米曲汁三角瓶培养基中，28～35℃摇床培养18-24小时；接种黑曲霉CICC 40613于灭菌的三角瓶麸皮固体培养基中，28～35℃恒温培养箱中培养70-80小时；
2) 扩大培养：固体培养的配料是麸皮80％、玉米面20％，用玉米糖化液润料，加1％浓硫酸，蒸煮冷散后，将活化后的酵母菌液和黑曲霉孢子按5%接种量分别接种后装盒，保持室温30℃左右，品温35℃左右，培养发酵40-60小时；
3) 真空干燥：对发酵后的各固体样品在45℃下进行真空干燥处理，使各样品含水率低于10%；
4) 混合包装：按照热带假丝酵母：黑曲霉重量比为4：1的比例混合后真空包装。
本发明还公开了新的热带假丝酵母菌WHCZ株在酒糟液处理中的应用。本发明的菌株单独使用时可有效的对小麦酒糟液，木薯酒糟液发酵，产生高质量的酵母菌蛋白。菌株耐高温，抗逆性强，生长快，絮凝性好，废水处理容积负荷高，耐酸性好，蛋白质含量高。有效地解决了现有技术中，由于酵母菌容积负荷和固形物得率低而带来的整个生产效率低，酒糟料温高及发酵过程产热带来的酵母菌耐热等不适于工业化生产的问题。
本发明还公开了发酵菌剂组合物在单细胞蛋白发酵饲料上的应用。
本发明还公开了饲料发酵菌剂组合物在酒糟蛋白饲料发酵中的应用。组合菌剂可提高对酒糟等废弃物中纤维素和半纤维素的利用效率，饲料产品安全性好，并使酵母菌株发挥最大的生产潜力，最终降低生产成本，提高生产效率。
本发明与现有技术相比，优点表现在：
1、本发明提供的热带假丝酵母WHCZ株是一株新的菌株，处理酒糟液具有很高的BOD容积负荷和酵母泥负荷，其容积负荷达到18.9 kg BOD/m3.d，远远超过了现有公开的酵母菌株只有8-12kg BOD /m3.d的容积负荷；其酵母泥负荷达到2.8 kg BOD/kg SS.d，也明显高于一般的酵母菌株只有1.0-2.0 kg BOD/kg SS.d的酵母泥负荷。热带假丝酵母WHCZ株絮凝性好，并可利用酒糟液中木糖、甘油等多种成分。使用该株酵母处理酒糟液效率高，运行成本低。
2、热带假丝酵母WHCZ株发酵酒糟饲料能力好，蛋白质含量高，对酒糟液的BOD容积负荷达高，COD及氨氮去除率高等特点。固体发酵条件下，与未发酵的木薯酒糟原料对照相比，接种菌株WHCZ对木薯酒糟粗蛋白含量达19.12%，比对照提高56.1%。液态发酵条件下，对高浓度的木薯酒糟液的BOD容积负荷达18.5kg BOD/m3.d ，对氨氮的去除率达76.0%,固形物粗蛋白含量达45.80%，分别比普通热带假丝酵母高56.8%、29.5%和13.1%。WHCZ酵母处理高浓度小麦酒糟液的BOD容积负荷达18.9kg BOD/m3.d，固形物得率为1.75%，粗蛋白含量达36.67%,分别比产朊假丝酵母提高62.9%，9.4%和 6.6%。
3、热带假丝酵母WHCZ株抗逆性好，生长速度快，可耐42℃高温，最适温度达40℃，在40℃高温下处理酒糟液效果比35℃更好；该菌株耐酸性好，可在pH3.0酒糟液中生长，这些特性使得该菌株更适合应用于高温、酸性酒糟液的处理中，可降低处理工艺成本。使用本单一菌株和组合菌剂，发酵时间短，液体和固体发酵时间均不超过24小时。
4、热带假丝酵母WHCZ菌体蛋白质含量高，具有很高的吸收利用氨氮转化为菌体蛋白的能力。对酒糟液的COD和氨氮去除率高。热带假丝酵母WHCZ株与黑曲霉混合处理木薯酒糟液，与不添加菌剂的对照组相比COD降低了72%，氨氮下降了80%，固形物粗蛋白提高了50%以上。
5、根据酵母菌和黑曲霉生长速度和培养条件存在较大差异，对这2种菌进行分别培养，然后按照能发挥组合菌剂最大效率的合适比例复合而成。本发明复合菌剂按4：1比例混合含酵母菌和黑曲霉2种菌剂，具有糖化和酵母菌体蛋白发酵双重功能，充分考虑到酒糟等原料含粗纤维的特点，黑曲霉可降解纤维素和木聚糖，提供给WHCZ作为可利用的碳源。复合菌剂单独培养并按所需的比例混合制备而成，可保证各菌按照最佳菌数比例混合，制备的活性干菌粉使用方便。
6、本发明的酵母细胞可以长时间反复利用。酒糟无需灭菌可连续发酵5个批次。
附图说明
图1是热带假丝酵母菌WHCZ株26S rDNA D1/D2区序列系统发育树图。
具体实施方式
下面结合具体的实施例来进一步阐述本发明。应当理解，这些实施例仅用于说明本发明，而不能限制本发明的保护范围。特别说明的是在本发明中涉及的菌种未公开的进行了专利程序寄存，其它菌种处于公开状态，科学工作者可向其保藏机构索取，具体信息如下：
1，热带假丝酵母WHCZ株专利寄存在中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC M2011355；
2，产朊假丝酵母CICC 1807，中国工业微生物菌种保藏管理中心，已上目录，公开状态；
3，热带假丝酵母CICC 1254，中国工业微生物菌种保藏管理中心，已上目录，公开状态；
4，黑曲霉CICC 40613，中国工业微生物菌种保藏管理中心，已上目录，公开状态。
实施例
实施例1 热带假丝酵母WHCZ的分离与鉴定
1.1 热带假丝酵母WHCZ株的分离：从白酒及酒精厂环境采集堆积发酵料、废弃的酒糟、废水作为分离样品，按来源不同分别接入液体木糖富集培养基中。250毫升 三角瓶装量50毫升,接入固体或液体分离样品约1克，将样品活化后加入到的含木糖的酸性液体富集培养基中，培养基配方是：木糖30克，蛋白胨15克，酵母膏15克，pH4.0-4.5水1000毫升。转速200 rpm，温度35℃时富集培养48小时，然后取100μl经过一定梯度稀释后的培养液涂布到YPD培养基固体平板上，42℃培养48小时后，挑取典型酵母形态的单菌落，再在相同培养基固体平板上重复划线纯化三次后，4℃保存。然后通过木薯酒糟液和稻草酸水解液发酵实验检验这些分离出来的菌株在发酵过程中对COD的去除率、对糖的利用、发酵酒糟离心分离固形物的得率及粗蛋白含量，最后根据发酵试验结果筛选出COD去除率和粗蛋白含量均较高的菌株。本发明人将分离的一株新的热带假丝酵母菌WHCZ株（Candida tropicalis WHCZ）保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2011355。 保藏日为 2011 年 10月 17 日。
热带假丝酵母菌WHCZ株的鉴定：通过形态特征观察、生理生化测定及26S rDNA D1/D2区域基因序列分析结果对WHCZ进行鉴定。在鉴定中，本实验选择热带假丝酵母Candida tropicalis CGMCC 2.1775，产朊假丝酵母Candida utilis CGMCC 2.1028 和酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae CCTCC AY92003菌株作为对照菌株。热带假丝酵母Candida tropicalis CGMCC 2.1775和Saccharomyces cerevisiae CCTCC AY92003为常用普通微生物菌种，分别登载于中国普通微生物菌种保藏管理中心和中国典型培养物保藏中心目录，处于公开状态，科学工作者可向保藏中心索取。
热带假丝酵母菌WHCZ株形态特征观察：菌落乳白色、形状为规则圆形、表面较平坦、干燥，培养较长时间后，假菌丝分支分布，细胞呈圆形或椭圆形。
通过26S rDNA D1/D2区域序列分析进行系统发育地位鉴定
用酵母菌基因组DNA提取试剂盒（BioFlux杭州博日科技有限公司提供）提取热带假丝酵母菌WHCZ株的全DNA,然后以提取出来的全DNA为模板，进行PCR扩增，正向引物NL1： 5’-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-3’，反向引物NL4：5’- GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3’。按以下的反应条件共进行30个循环：94℃预变性5 min，94℃变性1 min，59℃退火1 min，72℃延伸1 min，30个循环后，72℃延伸5 min。所得PCR产物由北京奥科生物技术公司进行纯化及序列测定。将测定出来的热带假丝酵母菌WHCZ株的26S rDNA D1/D2区域与GenBank核酸序列数据库中的序列进行比对，采用ClustalX软件进行匹配排列（align），用MEGA4.0软件中的neighbor-joining分析法构建系统发育树，并进行1000次Bootstraps检验，最后用TreeView软件显示系统树。
实验得到571bp的基因序列，在Genbank核酸序列数据库中进行同源序列搜索，WHCZ与Candida tropicalis N02-2.1的同源性超过98%，符合Kuttzman&Robnett所定的同种内不同菌株见差异不超过3%的标准。图1是根据26S rDNA D1/D2区域序列所做的系统发育树。
：热带假丝酵母菌WHCZ株的生理生化实验结果：
1.2.3.1按照中国科学院微生物研究所：《菌种保藏手册》(科学出版社.北京。1980，p368-370)提供的方法，对所分离的酵母菌株WHCZ进行碳源利用及生理生化实验，结果如下：
表1. 酵母菌WHCZ菌株生理生化实验结果
| 碳源 | 结果 | 碳源 | 结果 | 碳源 | 结果 |
| 葡萄糖 | + | D-阿拉伯糖 | - | 乳糖 | - |
| 果糖 | + | L-阿拉伯糖 | - | 菊糖 | - |
| 蔗糖 | + | L-鼠李糖 | - | L-山梨糖 | +，弱 |
| 麦芽糖 | + | D-木糖 | + | D-核糖 | - |
| D-半乳糖 | + | 甘油 | + | 赤鲜糖 | - |
| 纤维二糖 | - | 可溶性淀粉 | + | D-山梨醇 | + |
| 绵子糖 | - | 密二糖 | + | D-甘露糖 | + |
| D-海藻糖 | + | 松三糖 | + | DL-乳酸 | + |
| 柠檬酸 | + | 乙醇 | + | 同化硝酸钾 | - |
上述形态、生理生化特征均与文献《菌种保藏手册》（科学出版社，北京.1980）所描述的热带假丝酵母（Candida tropicalis）完全相同。
1.2.3.2配制生长培养基，配方是：木糖30克，蛋白胨15克，酵母膏15克，pH3.0，水1000毫升，琼脂3克。接种热带假丝酵母菌WHCZ株，结果表明，在热带假丝酵母菌WHCZ株在PH3.0的培养基生长良好。
热带假丝酵母菌WHCZ株与产朊假丝酵母氨基酸含量的比较结果：
热带假丝酵母菌WHCZ株和产朊假丝酵母CICC 1807，采用YPD液体培养基，30℃、160rpm摇床培养24h，4000rpm离心分离，分别获得2株纯酵母菌体，80℃干燥至恒重，测定氨基酸含量，结果见表1。由表1可知，热带假丝酵母氨基酸含量要明显高于来源于中国工业微生物菌种保藏管理中心菌种库的一株用于生产饲料酵母的产朊假丝酵母CICC 1807。在某些特定氨基酸上，如蛋氨酸、赖氨酸、天冬氨酸和精氨酸等，热带假丝酵母WHCZ都具有明显优势。
表2 产朊假丝酵母1807与热带假丝酵母WHCZ氨基酸分析结果比较
| 样品% | 1807 | WHCZ |
| 1. Aspartic | 2.74 | 4.08 |
| 2. Threonine | 1.90 | 2.14 |
| 3. Serine | 1.87 | 2.12 |
| 4. Glutamic | 5.95 | 4.69 |
| 5. pro | 1.92 | 3.83 |
| 6. Glycine | 2.78 | 2.95 |
| 7. Alanine | 3.81 | 3.59 |
| 8. Cystine | 0.08 | 0.13 |
| 9. Valine | 1.85 | 1.93 |
| 10. Methionine | 0.34 | 0.47 |
| 11. Isoleucine | 1.27 | 1.70 |
| 12. Leucine | 2.16 | 2.39 |
| 13. Tyrosine | 0.68 | 0.84 |
| 14. Phenylalanine | 1.28 | 1.54 |
| 15. Histidine | 1.44 | 1.66 |
| 16. Lysine | 2.53 | 3.09 |
| 17. Arginine | 1.57 | 1.92 |
| ∑ | 34.17 | 39.07 |
实施例2 热带假丝酵母WHCZ单独对酒糟发酵的结果
2.1热带假丝酵母WHCZ对木薯酒糟发酵的结果：采用固体发酵方法，木薯酒糟中添加少量无机盐等辅料混匀，使含水率保持55-65%，然后接种采用热带假丝酵母WHCZ菌剂，35℃下发酵23h，样品烘干后进行分析，结果见表3。发酵后的木薯酒糟粗蛋白含量达19.12%,比未发酵的原糟提高了56.1%。采用相同的发酵方法，酒糟无需灭菌可连续发酵5个批次，并获得相似结果。
表3 单株酵母菌WHCZ对木薯酒糟固体发酵结果
| 测定项目 | 原糟 | 发酵酒糟 |
| 烘干后水分 ％ | 3.20 | 3.55 |
| 发酵损耗率 % | - | 3.60 |
| 样品粗蛋白 % | 12.25 | 19.12 |
| 粗蛋白提高 % | - | 56.1 |
2.2热带假丝酵母WHCZ对小麦酒糟发酵的结果：
分别接种产朊假丝酵母CICC 1807和WHCZ酵母发酵小麦酒糟液，比较2株酵母菌对小麦酒糟的处理效果，结果见表4。由表4可知，WHCZ酵母菌比产朊假丝酵母处理酒糟液具有更高的固形物得率， BOD容积负荷和粗蛋白含量。
表4 不同酵母菌发酵小麦酒糟液结果比较
实施例3 热带假丝酵母WHCZ与普通热带假丝酵母对酒糟发酵比较
比较热带假丝酵母WHCZ和热带假丝酵母CICC 1254两个菌株对木薯酒糟离心分离的上清液的处理效果，热带假丝酵母CICC 1254为购于中国工业微生物菌种保藏管理中心菌种库的一株用于发酵生产饲料酵母的菌株。具体方法为：酒糟上清液中加入硫酸铵等营养盐，各分装100ml至250ml锥形瓶中，分别接种热带假丝酵母菌株WHCZ和菌株CICC 1254，分别于40℃和30℃，22h摇床160rpm培养，离心测上清液COD、氨氮、负荷等参数。实验结果见表5。热带假丝酵母WHCZ的容积负荷达到18.5 kg BOD/m3.d，比普通的热带假丝酵母CICC 1254菌株高56.8%。利用酒糟液生产SCP不仅可获得有价值的饲料产品，还可通过发酵过程中微生物对营养物质的利用来降低废酒糟液中COD和氨氮等污染物的含量。
表5 接种不同酵母菌对木薯酒糟上清液COD去除率及菌体得率的影响
| 测定项目 | CICC 1254 | WHCZ酵母 |
| 培养温度（℃） | 30 | 40 |
| 培养前NH4 + -N（mg/L） | 125.2 | 125.2 |
| 培养后NH4 + -N（mg/L） | 51．7 | 30．1 |
| NH4 + -N去除率(%) | 58．7 | 76.0 |
| NH4 + -N去除率提高（%） | - | 29.5 |
| 培养前COD（mg/L） | 54862 | 54862 |
| 培养后COD（mg/L） | 38200 | 29980 |
| COD去除率(%) | 32.0 | 45.3 |
| BOD容积负荷（kg BOD/m 3 .d） | 11.8 | 18.5 |
| BOD容积负荷提高（%） | - | 56.8 |
| 固形物得率（%） | 0.5 | 0.8 |
| 固形物粗蛋白含量（%） | 40.50 | 45.80 |
| 固形物粗蛋白含量提高（%） | - | 13.1 |
实施例4 WHCZ组合菌剂的制备方法
菌种活化：接种热带假丝酵母WHCZ于灭菌的土豆汁或米曲汁三角瓶培养基中，28～35℃摇床培养18-24h；接种黑曲霉CICC 40613于灭菌的三角瓶麸皮固体培养基中，28～35℃恒温培养箱中培养70-80h。
扩大培养：固体培养的配料是麸皮80％、玉米面20％，用玉米糖化液润料，加1％浓硫酸，蒸煮冷散后，将活化后的酵母菌液和黑曲霉孢子按5%接种量分别接种后装盒，保持室温30℃左右，品温35℃左右，培养发酵40-60h；
真空干燥：对发酵后的各固体样品在45℃下进行真空干燥处理，使各样品含水率低于10%。
混合包装：按照热带假丝酵母：黑曲霉重量比为4：1的比例混合后真空包装。
酵母菌固体制剂组合物测定结果：采用稀释平板测定实验室制备的热带假丝酵母活性干酵母的活菌数达到30亿/g左右。热带假丝酵母WHCZ和黑曲霉CICC 40613的重量比例是4：1。
实施例5：组合菌剂发酵结果
5.1 WHCZ组合菌剂固体发酵木薯酒糟及分析
采用固体发酵方法，木薯酒糟中添加少量无机盐等辅料混匀，使含水率保持55-65%，然后接种采用热带假丝酵母WHCZ和黑曲霉CICC 40613的固体组合菌剂（重量比是4：1），35℃下发酵23h，样品烘干后进行分析。结果表明，发酵后的木薯酒糟粗蛋白比未发酵的原糟提高了66.5%（表6），16种总氨基酸含量提高了50.7%（表7）。
表6 木薯酒糟固体发酵结果
| 测定项目 | 原糟 | 发酵酒糟 |
| 烘干后水分 ％ | 3.2 | 3.55 |
| 发酵损耗率 % | - | 3.60 |
| 样品粗蛋白 % | 12.35 | 20.56 |
| 粗蛋白提高 % | - | 66.5 |
表7 木薯酒糟固体发酵前后氨基酸含量变化比较
| 样品% | 木薯酒糟原料 | 发酵蛋白饲料 |
| 1. Aspartic天冬 | 1.20 | 1.77 |
| 2. Threonine 苏 | 0.64 | 0.91 |
| 3. Serine丝 | 0.62 | 0.92 |
| 4. Glutamic谷 | 1.42 | 2.48 |
| 5. pro脯 | 0.28 | 0.72 |
| 6. Glycine甘 | 0.54 | 0.83 |
| 7. Alanine丙 | 0.66 | 1.01 |
| 8. Valine缬氨酸 | 0.73 | 0.95 |
| 9. Methionine蛋 | 0.49 | 0.54 |
| 10. Isoleucine异亮 | 0.57 | 0.76 |
| 11. Leucine亮 | 0.93 | 1.33 |
| 12. Tyrosine酪 | 0.46 | 0.61 |
| 13. Phenylalanine苯丙 | 0.56 | 0.81 |
| 14. Histidine组 | 0.26 | 0.41 |
| 15. Lysine赖 | 0.63 | 0.89 |
| 16. Arginine精 | 0.54 | 0.93 |
| ∑ | 10.53 | 15.87 |
5.2. WHCZ及其菌剂组合物发酵木薯酒糟液
5.2.1热带假丝酵母WHCZ和产朊假丝酵母1807发酵木薯酒糟液比较，分别接种菌株至木薯酒糟液，42℃下发酵22h，结果如表8。由表8可知，热带假丝酵母WHCZ对木薯全糟的COD去除率明显高于产朊假丝酵母1807的去除率，前者为72.00%，远远高于后者的55.64%。WHCZ株发酵后的酒糟固形物的粗蛋白含量达20.77%,比产朊假丝酵母1807发酵的样品的粗蛋白含量要高。表明WHCZ菌木薯酒糟液的处理效果明显比产朊假丝酵母1807株要好。
表 8 产朊假丝1807与热带假丝WHCZ对木薯酒糟的处理效果比较
5.2.2比较接种单一酵母菌WHCZ及WHCZ和黑曲霉组合菌剂对木薯全糟液的发酵效果。分别接种菌株及菌株组全物至木薯酒糟液，40℃下发酵20h，结果如表9。结果表明，接种WHCZ和黑曲霉CICC 40613组合菌剂发酵后粗蛋白含量达到18.03%，在原糟粗蛋白的基础上提高了51.6%，比接种单一酵母菌WHCZ处理粗蛋白含量显著提高。与未处理的原糟相比，2种发酵处理的酒糟液氨氮去除率均达到80.4%。
表9 木薯酒糟全糟液体发酵结果
| 测定项目 | 原酒糟 | WHCZ | WHCZ +黑曲霉 |
| pH | 3.58 | 3.86 | 3.92 |
| NH4 + -N（mg/L） | 111.2 | 25.2 | 21.8 |
| NH4 + -N去除率（%） | - | 77.3 | 80.4 |
| 固形物得率（g/100ml） | 2.65 | 3.28 | 3.37 |
| 固形物得率提高（%） | - | 23.77 | 27.17 |
| 粗蛋白（%） | 11.23 | 16.69 | 18.03 |
| 粗蛋白提高（%） | - | 48.6 | 60.6 |
5.3．WHCZ菌和黑曲霉混合发酵小麦酒糟液
按重量比4：1的比例混合接种WHCZ和黑曲霉CICC 40613液体菌剂，分别在2个10m3的发酵罐中进行通气培养，比较不同温度下发酵小麦酒糟液，发酵前后离心得率、上清COD、沉淀粗蛋白对比如表10。结果表明，40℃下发酵，其固形物得率，COD去除率，BOD容积负荷，固形物粗蛋白等指标均优于35℃下的发酵样品。表明WHCZ菌和组合菌剂具有较好的耐高温能力。
表10 WHCZ菌和黑曲霉混合发酵小麦酒糟液
| 测定项目 | 原糟 | 35℃发酵 | 40℃发酵 |
| 离心固形物得率（%） | 1.75 | 2.16 | 2.22 |
| 离心固形物得率提高（%） | － | 23.11 | 26.39 |
| COD（mg/L） | 57215 | 29074 | 28142 |
| COD去除率% | - | 49.2 | 50.8 |
| BOD容积负荷（kg BOD/m3.d） | - | 20．1 | 22.8 |
| 污泥负荷(kgBOD/kg SS.d) | － | 3.0 | 3.3 |
| 离心固形物粗蛋白(%) | 31.27 | 36.61 | 36.66 |
| 固形物粗蛋白提高（%） | - | 17.1 | 17.2 |
Claims (7)
1.一株新的热带假丝酵母菌，其特征在于,该菌株为热带假丝酵母WHCZ株（Candida tropicalis WHCZ），保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M2011355。
2.一种含权利要求1中所述菌株的发酵菌剂组合物。
3.根据权利要求 2中 所述的发酵菌剂组合物，其特征在于它含有下列组份(重量百分比)：
热带假丝酵母 80%
黑曲霉 20%
其中热带酵母为CCTCC M2011355 ，黑曲霉为CICC 40613。
4.根据权利要求 2中 所述的发酵饲料菌剂组合物，其特征在于所述的发酵菌剂组合物为固态菌剂。
5.制备权利要求3中所述的菌剂组合物的方法，该方法包括如下步骤：
1）菌种活化：接种热带假丝酵母WHCZ， CCTCC M2011355于灭菌的土豆汁或米曲汁三角瓶培养基中，28～35℃摇床培养18-24小时；接种黑曲霉CICC 40613于灭菌的三角瓶麸皮固体培养基中，28～35℃恒温培养箱中培养70-80小时；
2）扩大培养：固体培养的配料是麸皮80％、玉米面20％，用玉米糖化液润料，加1％浓硫酸，蒸煮冷散后，将活化后的酵母菌液和黑曲霉孢子按5%接种量分别接种后装盒，保持室温30℃左右，品温35℃左右，培养发酵40-60小时；
3）真空干燥：对发酵后的各固体样品在45℃下进行真空干燥处理，使各样品含水率低于10%；
4）混合包装：按照热带假丝酵母：黑曲霉重量比为4：1的比例混合后真空包装。
6.权利要求 1 所述的热带假丝酵母WHCZ株在酒糟处理上的应用。
7.权利要求 2-4中所述的任何一种菌剂组合物在单细胞蛋白发酵饲料上的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011103801173A CN102433266B (zh) | 2011-11-25 | 2011-11-25 | 热带假丝酵母菌、其组合物和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011103801173A CN102433266B (zh) | 2011-11-25 | 2011-11-25 | 热带假丝酵母菌、其组合物和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102433266A true CN102433266A (zh) | 2012-05-02 |
| CN102433266B CN102433266B (zh) | 2013-01-09 |
Family
ID=45981613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2011103801173A Expired - Fee Related CN102433266B (zh) | 2011-11-25 | 2011-11-25 | 热带假丝酵母菌、其组合物和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102433266B (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103719541A (zh) * | 2013-12-30 | 2014-04-16 | 四川绿食佳农业有限公司 | 一种菌渣饲料及其制备方法 |
| CN103907744A (zh) * | 2013-01-04 | 2014-07-09 | 中粮营养健康研究院有限公司 | 一种菌株和蛋白饲料及其制备方法 |
| CN104872378A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-09-02 | 北京中生奥普寡肽技术研究所 | 利用白酒酒糟制备高蛋白饲料的方法 |
| CN105647823A (zh) * | 2016-02-03 | 2016-06-08 | 中山大学 | 一种具有除磷脱氮功能的热带假丝酵母pny2013及其应用 |
| CN106497912A (zh) * | 2016-10-13 | 2017-03-15 | 江苏大学 | 一种扫频超声处理对数中期热带假丝酵母促进增殖的方法 |
| CN111394267A (zh) * | 2020-02-25 | 2020-07-10 | 广西金穗生态科技股份有限公司 | 山梨假丝酵母及其应用 |
| CN113621674A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-11-09 | 泸州老窖股份有限公司 | 利用白酒丟糟生产l-乳酸的方法 |
| CN114671716A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-06-28 | 黄乃坤 | 一种猪尿有机液体肥及其制备方法与应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1931004A (zh) * | 2006-09-15 | 2007-03-21 | 福建师范大学 | 一种利用构树叶和酒糟混合发酵制备高蛋白饲料的方法 |
| EP1865048A1 (en) * | 2006-06-09 | 2007-12-12 | Cognis IP Management GmbH | Process for the production of fatty acid alkyl esters by integrating fermentation and esterification |
| CN102102084A (zh) * | 2010-10-26 | 2011-06-22 | 湖北白云边酒业股份有限公司 | 东方伊萨酵母菌、其组合物和应用 |
-
2011
- 2011-11-25 CN CN2011103801173A patent/CN102433266B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1865048A1 (en) * | 2006-06-09 | 2007-12-12 | Cognis IP Management GmbH | Process for the production of fatty acid alkyl esters by integrating fermentation and esterification |
| CN1931004A (zh) * | 2006-09-15 | 2007-03-21 | 福建师范大学 | 一种利用构树叶和酒糟混合发酵制备高蛋白饲料的方法 |
| CN102102084A (zh) * | 2010-10-26 | 2011-06-22 | 湖北白云边酒业股份有限公司 | 东方伊萨酵母菌、其组合物和应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 叶均安等: "不同菌种组合对固态发酵黄酒糟生产蛋白饲料的研究", 《中国畜牧杂志》, vol. 44, no. 23, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 58 - 61 * |
| 吴祖芳等: "复合菌固态生物转化啤酒糟发酵条件优化的研究", 《饲料工业》, vol. 23, no. 5, 31 December 2002 (2002-12-31), pages 32 - 34 * |
| 赵建国等: "混种固态发酵大曲酒糟生产蛋白饲料的研究", 《粮食与饲料工业》, no. 7, 31 December 2001 (2001-12-31), pages 25 - 27 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103907744A (zh) * | 2013-01-04 | 2014-07-09 | 中粮营养健康研究院有限公司 | 一种菌株和蛋白饲料及其制备方法 |
| CN103719541A (zh) * | 2013-12-30 | 2014-04-16 | 四川绿食佳农业有限公司 | 一种菌渣饲料及其制备方法 |
| CN104872378A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-09-02 | 北京中生奥普寡肽技术研究所 | 利用白酒酒糟制备高蛋白饲料的方法 |
| CN105647823A (zh) * | 2016-02-03 | 2016-06-08 | 中山大学 | 一种具有除磷脱氮功能的热带假丝酵母pny2013及其应用 |
| CN105647823B (zh) * | 2016-02-03 | 2019-01-01 | 中山大学 | 一种具有除磷脱氮功能的热带假丝酵母pny2013及其应用 |
| CN106497912A (zh) * | 2016-10-13 | 2017-03-15 | 江苏大学 | 一种扫频超声处理对数中期热带假丝酵母促进增殖的方法 |
| CN111394267A (zh) * | 2020-02-25 | 2020-07-10 | 广西金穗生态科技股份有限公司 | 山梨假丝酵母及其应用 |
| CN111394267B (zh) * | 2020-02-25 | 2021-12-14 | 广西金穗生态科技股份有限公司 | 山梨假丝酵母及其应用 |
| CN113621674A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-11-09 | 泸州老窖股份有限公司 | 利用白酒丟糟生产l-乳酸的方法 |
| CN114671716A (zh) * | 2022-04-06 | 2022-06-28 | 黄乃坤 | 一种猪尿有机液体肥及其制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102433266B (zh) | 2013-01-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102433266B (zh) | 热带假丝酵母菌、其组合物和应用 | |
| Wu et al. | Bioethanol production from taro waste using thermo-tolerant yeast Kluyveromyces marxianus K21 | |
| Pervez et al. | Saccharification and liquefaction of cassava starch: an alternative source for the production of bioethanol using amylolytic enzymes by double fermentation process | |
| Liu et al. | Cellulase production by Trichoderma koningii AS3. 4262 in solid-state fermentation using lignocellulosic waste from the vinegar industry | |
| Sjöblom et al. | Production of butyric acid by Clostridium tyrobutyricum (ATCC25755) using sweet sorghum stalks and beet molasses | |
| Ahmed et al. | Production of microbial biomass protein by sequential culture fermentation of Arachniotus sp. and Candida utilis | |
| Yalemtesfa et al. | Solid substrate fermentation and conversion of orange waste in to fungal biomass using Aspergillus niger KA-06 and Chaetomium Spp KC-06 | |
| CN102041235B (zh) | 一株耐高温酿酒酵母菌及其应用 | |
| Omwango et al. | Nutrient enrichment of pineapple waste using Aspergillus niger and Trichoderma viride by solid state fermentation | |
| Adesanya et al. | Ethanol production by Saccharomyces cerevisiae from cassava peel hydrolysate | |
| CN102652529A (zh) | 多菌种复合固态发酵普通菜籽粕获得活性多肽的方法 | |
| CN113729110B (zh) | 一种生物质材料高效低成本预处理结合固态发酵方法及在单细胞蛋白饲料生产中的应用 | |
| CN114410486B (zh) | 一株米曲霉菌株及其在饲用蛋白开发方面的应用 | |
| Ke et al. | Bioconversion of rape straw into a nutritionally enriched substrate by Ganoderma lucidum and yeast | |
| CN110684691A (zh) | 一种基于微生物的定向筛选的微生物菌剂的制备工艺 | |
| Elida et al. | Efficiency of cellulase production using coffee pulp waste under solid state fermentation by Aspergillus sp. VT12 | |
| Rudravaram et al. | Optimization of protein enrichment of deoiled rice bran by solid state fermentation using Aspergillus oryzae MTCC 1846 | |
| Hermansyah et al. | Effect of aeration and nutrients on Saccharomyces cerevisiae cultivation using lignocellulosic hydrolysate from Empty Fruit Bunch | |
| Kahil et al. | Economic co-production of cellulase and αamylase by fungi grown on agro-industrial wastes using solid-state fermentation conditions | |
| Vinche et al. | Chitosan: A valuable byproduct of ethanolic fermentation by Rhizopus oryzae | |
| CN102787076B (zh) | 一株耐冷玫红假裸囊菌及其在制备冷水纤维素酶中的应用 | |
| CN102030417A (zh) | 一种水解处理生物燃料乙醇生产中废液的方法 | |
| CN113322190A (zh) | 里氏木霉与酿酒酵母混合发酵白酒糟生产单细胞蛋白的方法 | |
| CN102492634A (zh) | 一株耐高温酵母菌及其应用 | |
| CN111333469A (zh) | 一种利用白酒固态丢糟两步法制备的有机肥料及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 430023 No. 68, Xuefu Road, Changqing Garden, Dongxihu District, Wuhan, Hubei Patentee after: Wuhan Polytechnic University Address before: 430023 No. 1 Middle Ring Road, Hankou Evergreen Garden, Wuhan City, Hubei Province Patentee before: Wuhan Polytechnic University |
|
| CP03 | Change of name, title or address | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130109 Termination date: 20191125 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |