CN102401821A - 一种牡丹皮的增荧光薄层鉴别方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药材的增荧光检测薄层鉴别方法，该方法在普通薄层鉴别的基础上增加增荧光剂，对多种无检测信息的中药材进行鉴别获得了理想的结果，大大拓宽薄层鉴别检测途径，可有效提高中药成方制剂中的薄层鉴别增订率。
Description
本发明专利申请为分案申请，原案信息如下：
申请号：2010105281179
申请日：2010年11月2日
发明创造名称：一种中药材的增荧光检测薄层鉴别方法。
技术领域
本发明涉及一种中药材的薄层鉴别方法，具体地，涉及一种牡丹皮的增荧光薄层鉴别方法。
背景技术
目前在国家各类中药制剂质量标准中，其药材的薄层鉴别增订率低，平均约为处方中药材总量的30%，无法全方位监控制剂质量。尤其是提取制剂，药材的显微特征已不附存在，显微鉴别对其束手无策，薄层鉴别再寻找不到特征性检测信息，就无法控制制剂质量。造成一些不法经营者在药品的生产过程中偷工减料，以劣代优、以假充真的情况发生，轻者贻误患者的病情，重者直接危害患者的健康。
发明内容
为拓宽薄层鉴别检测途径，提高中药成方制剂中的薄层鉴别增订率，发明人对多种无检测信息的中药材进行了增荧光研究，并获得理想的结果。
本发明提供了一种中药材的增荧光检测薄层鉴别方法，该方法包含如下步骤：
a、分别取供试品药材和对照药材粉末0.01-0.5克，加甲醇3-10毫升，超声处理10-15分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各2-4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
作为优选方案，本发明薄层鉴别方法种的中药材优选为蟾酥、白术、连翘、人工牛黄、乌药、茵陈、牡丹皮或香附中的一种，增荧光剂优选为10%硫酸乙醇溶液或1%三氯化铝乙醇溶液。
理论上，原本无任何检测信息的中药材，都可以通过本发明的增荧光的方法进行薄层鉴别，发明人特别优选了几种药材的增荧光检测薄层鉴别方法，分别如下：
1、蟾酥的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取蟾酥药材和蟾酥对照药材粉末0.05克，加甲醇3毫升，超声处理15分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各2微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为4：6：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，蟾酥供试品色谱在与蟾酥对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
2、白术的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取白术药材和白术对照药材粉末0.5克，加甲醇5毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，白术供试品色谱在与白术对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
3、连翘的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取连翘药材和连翘对照药材粉末0.4克，加甲醇5毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为10：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，连翘供试品色谱在与连翘对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
4、人工牛黄的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取人工牛黄药材和人工牛黄对照药材粉末0.15克，加甲醇6毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各2微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为10：25：2：3的环己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，人工牛黄供试品色谱在与人工牛黄对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
5、乌药的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取乌药药材和乌药对照药材粉末0.3克，加甲醇4毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，乌药供试品色谱在与乌药对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
6、茵陈的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取茵陈药材和茵陈对照药材粉末0.4克，加甲醇8毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为7：3的环己烷-乙酸乙酯为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，茵陈供试品色谱在与茵陈对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
7、牡丹皮的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取牡丹皮药材和牡丹皮对照药材粉末0.01克，加甲醇10毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各3微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：1：0.2的环己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以1%三氯化铝乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，牡丹皮供试品色谱在与牡丹皮对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
8、香附的增荧光检测薄层鉴别方法优选为：
a、分别取香附药材和香附对照药材粉末0.5克，加甲醇4毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为10：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，香附供试品色谱在与香附对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
从8种药材增荧光前后的薄层色谱图对比分析，增荧光之前，不论254nm还是365nm下，都无清晰的检测信息呈现，无法对结果做出判断，但增荧光之后，信息量大幅度增多，灵敏度提高，如乌药呈现出8～9个蓝、绿色荧光斑点；白术呈现出5～6个蓝、绿色荧光斑点；连翘呈现出3个黄与亮蓝色荧光斑点等，斑点清晰，强度很高，可用于定性甚至定量研究，详见实施例检测结果的各薄层色谱图。
总之，本发明增荧光检测薄层鉴别方法具有灵敏、快捷、高效的特点，解决了既无紫外吸收、又无荧光的药材的鉴别问题，使这些药材的鉴别能够高灵敏度、准确地进行，对提高中药材和中药成方制剂的薄层鉴别增订率，无疑是一项非常有使用价值发明。
附图说明
图1 蟾酥薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后三个为对照药材。
图2白术薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后三个为对照药材。
图3连翘薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后三个为对照药材。
图4人工牛黄薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后两个为对照药材。
图5乌药薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后两个为对照药材。
图6茵陈薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后两个为对照药材。
图7牡丹皮薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，后三个为对照药材。
图8香附薄层鉴别图谱，A为增荧光前254nm紫外灯下检视照片，B为增荧光前365nm紫外灯下检视照片，C为增荧光后365nm紫外灯下检视照片，斑点从左到右前三个为样品，接下来三个为对照药材，最后两个为醋制香附。
具体实施方式
下述实施例用于举例说明本发明方法的具体实施方式，但其不能对本发明的范围构成任何限制，为证实本发明方法的技术效果，各实施例均在以展开剂展开晾干以后，喷增荧光以前，在254nm和365nm紫外灯下检视拍照，以作增荧光后色谱图进行比较。
实施例1
蟾酥的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取蟾酥药材和蟾酥对照药材粉末0.05克，加甲醇3毫升，超声处理15分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各2微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为4：6：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图1，可见增荧光以后蟾酥供试品色谱在与蟾酥对照品色谱相应的位置上显4个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例2
白术的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取白术药材和白术对照药材粉末0.5克，加甲醇5毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图2，可见增荧光以后白术供试品色谱在与白术对照品色谱相应的位置上显多个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例3
连翘的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取连翘药材和连翘对照药才分末0.4克，加甲醇5毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为10：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图3，可见增荧光以后连翘供试品色谱在与连翘对照品色谱相应的位置上显3个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例4
人工牛黄的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取人工牛黄药材和人工牛黄对照药材粉末0.15克，加甲醇6毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各2微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为10：25：2：3的环己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图4，可见增荧光以后人工牛黄供试品色谱在与人工牛黄对照品色谱相应的位置上显4个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例5
乌药的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取乌药药材和乌药对照药材粉末0.3克，加甲醇4毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图5，可见增荧光以后乌药供试品色谱在与乌药对照品色谱相应的位置上显多个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例6
茵陈的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取茵陈药材和茵陈对照药材粉末0.4克，加甲醇8毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为7：3的环己烷-乙酸乙酯为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图6，可见增荧光以后茵陈供试品色谱在与茵陈对照品色谱相应的位置上显多个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例7
牡丹皮的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取牡丹皮药材和牡丹皮对照药材粉末0.01克，加甲醇10毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各3微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：1：0.2的环己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以1%三氯化铝乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图7，可见增荧光以后牡丹皮供试品色谱在与牡丹皮对照品色谱相应的位置上显1个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
实施例8
香附的增荧光检测薄层鉴别：
a、分别取香附药材和香附对照药材粉末0.5克，加甲醇4毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各4微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为10：2：0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，分别在254nm和365nm紫外灯下检视拍照；
c、薄层板上喷以10%硫酸乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视拍照；
结果见图8，可见增荧光以后香附供试品色谱在与香附对照品色谱相应的位置上显多个相同颜色的荧光斑点，而未增荧光的薄层色谱中，在254nm和365nm紫外灯下均未显示明显斑点。
Claims (1)
1.一种牡丹皮的增荧光薄层鉴别方法，其特征在于该方法包含如下步骤：
a、分别取牡丹皮药材和牡丹皮对照药材粉末0.01克，加甲醇10毫升，超声处理10分钟，取上清液作为供试品溶液和对照品溶液；
b、吸取供试品溶液和对照品溶液各3微升，分别点于同一GF254薄层板上，以体积比为8：2：1：0.2的环己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸为展开剂展开，取出，晾干；
c、薄层板上喷以1%三氯化铝乙醇溶液作为荧光增强剂，105℃加热至斑点显色清晰；
d、置365nm紫外灯下检视，牡丹皮供试品色谱在与牡丹皮对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20120404 |