CN102397541B - 小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法 - Google Patents

小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102397541B
CN102397541B CN2010102864005A CN201010286400A CN102397541B CN 102397541 B CN102397541 B CN 102397541B CN 2010102864005 A CN2010102864005 A CN 2010102864005A CN 201010286400 A CN201010286400 A CN 201010286400A CN 102397541 B CN102397541 B CN 102397541B
Authority
CN
China
Prior art keywords
vaccine
gosling plague
live vaccine
microencapsulated
gosling
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2010102864005A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102397541A (zh
Inventor
龚建森
刘学贤
吕晓娟
戴有理
李新华
徐步
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
HANGZHOU JIANLIANG VETERINARY BIOLOGICAL PREPARATIONS CO., LTD.
Original Assignee
Jiangsu Institute Poultry Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Institute Poultry Sciences filed Critical Jiangsu Institute Poultry Sciences
Priority to CN2010102864005A priority Critical patent/CN102397541B/zh
Publication of CN102397541A publication Critical patent/CN102397541A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102397541B publication Critical patent/CN102397541B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法。该疫苗的制造方法是将小鹅瘟SYG毒株通过鹅胚增殖培养后制成疫苗半成品，无菌检验合格后加入5％的蔗糖脱脂乳溶液，搅拌混匀；在上述半成品溶液中加入20％-40％的多孔淀粉，37℃控温搅拌20-40分钟；将上述液体与等体积1％-2.5％的海藻酸钠溶液混合，充分搅拌后经流化床脱水干燥，制成小鹅瘟微胶囊化疫苗干粉。本发明方法科学，简单，生产稳定可靠，疫苗效价损耗较少。采用疫苗微胶囊化技术，不仅使小鹅瘟活疫苗可以通过口服途径免疫，减小了应激反应，而且赋予该活疫苗以缓释功能，产蛋期间的种鹅可照常使用。

Description

小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法
技术领域
本发明为一种小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法，属于生物工程技术领域。
背景技术
小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的一种主要侵害雏鹅和雏番鸭的烈性传染病，发病率和死亡率都很高，发病雏鹅的死亡率最高可达90％～100％。长期以来，小鹅瘟疫苗是预防小鹅瘟疫病的主要措施。虽然我国目前已具有预防小鹅瘟的活疫苗冻干产品如小鹅瘟活疫苗(SYG株)和小鹅瘟活疫苗(GD株)等，但仍存在一些不足之处，如疫苗必须通过注射途径使用，不但费时费力，而且无法避免因人工围捕和注射疫苗等引起的各种严重应激反应，如：减食、减蛋，生长受抑等，这也是目前种鹅养殖者不愿意加强免疫，特别是在种鹅产蛋期间不愿意加强免疫的主要原因。另外，因现行的小鹅瘟冻干活疫苗不具有缓释功能，免疫期短，保护率低；加上目前培育的种鹅新品种产蛋期都比较长，如果种鹅在产蛋期间不加强免疫就无法避免雏鹅发生小鹅瘟。由此可见这些问题的存在不但制约了小鹅瘟疫苗预防效力的充分发挥，而且影响到种鹅的生产性能、生长速度和经济效益。
发明内容
本发明的目的是针对现有小鹅瘟冻干活疫苗所存在的缺点，提供一种小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法，原理是利用多孔淀粉对小鹅瘟病毒进行高效吸附，再使用肠溶性高分子材料进行微胶囊化包埋，最后通过流化床进行干燥脱水。本发明充分利用微胶囊的优异特性，解决现行小鹅瘟冻干活疫苗存在的免疫期短，使用不便，影响种鹅生产性能等不足之处，可以在种鹅产蛋期进行口服免疫，而不会产生应激反应。从而延长了免疫期，弥补了常规活疫苗的缺陷。
本发明的目的是通过以下技术途径实现的，小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法，包括如下步骤：
(1)将小鹅瘟SYG毒株(购自中国兽医药品监察所)通过鹅胚增殖培养后制成疫苗半成品；
(2)半成品经无菌检合格后，加入5％的蔗糖脱脂乳溶液，搅拌混匀后再加入20％-40％的多孔淀粉，37℃控温搅拌20-40分钟；
(3)将步骤(2)制得的液体与等体积1％-2.5％的海藻酸钠溶液混合，充分搅拌后经流化床脱水干燥，制成小鹅瘟微胶囊化疫苗干粉。
所述的制成小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗干粉粒径范围在5-15μm，每克所含病毒效价为0.7×107-1.5×107ELD50，该疫苗可以通过口服途径免疫。
小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗半成品的制造是采用鹅胚增殖的培养方法。
本发明方法科学，简单，生产稳定可靠，疫苗效价损耗较少。通过使用多孔淀粉作为微胶囊骨架，使制成的微胶囊粒径均匀，易干燥脱水，分散性较好。制成的疫苗不仅具有抗原含量高、缓释时间长、毒副作用小、成本低廉，使用方便、保存期长、无任何有害残留等优点，还可以通过口服途径免疫，减少了应激反应，可以使种鹅在产蛋期进行加强免疫。用本方法生产的小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗干粉每克效价为0.7×107-1.8×107ELD50。产品不加任何防腐剂，在2-8℃密封条件下可保存2年效价不降低。疫苗经口服途径(饮水或拌料)一次免疫接种后，可产生2个月左右的免疫保护期。
附图说明
图1是本发明的小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗低倍扫描电镜图片；
图2是本发明的小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗高倍扫描电镜图片；
具体实施方式
实施例一
将购自中国兽医药品监察所的小鹅瘟SYG毒株通过鹅胚增殖培养后制成疫苗半成品，无菌检验合格后加入5％的蔗糖脱脂乳溶液，混匀后再加入20％的多孔淀粉，37℃控温搅拌40分钟。将上述液体与等体积1％的海藻酸钠溶液混合，充分搅拌后经流化床脱水干燥，制成小鹅瘟微胶囊化疫苗干粉，疫苗干粉粒径范围在5-15μm。将制成的疫苗接种非免疫鹅胚，经测定每克疫苗所含毒价为1.5×107ELD50。将疫苗加入含增稠剂的稀释液中充分混匀，经饮水途径对50只健康成年鹅进行免疫接种，另设30只健康成年鹅作为非免疫对照组，两组健康成年鹅分开饲养。在免疫后的7、14、28、42、56、70天，从免疫组与对照组中随机抽检10份血清，测定相应的ELD50，求得中和指数(中和指数＝试验组ELD50/对照组ELD50)。结果表明，免疫7、14、28、42、56、70天后的血清中和指数分别为101.4、102.0、102.1、102.2、102.0、101.5。根据《中国兽药典》附录27页中的要求(血清中和指数应≥101.8)，可以判断，小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗在免疫后的第14天即可产生坚强保护力，免疫保护期达56天以上。
实施例二
将购自中国兽医药品监察所的小鹅瘟SYG毒株通过鹅胚增殖培养后制成疫苗半成品，无菌检验合格后加入5％的蔗糖脱脂乳溶液，混匀后再加入40％的多孔淀粉，37℃控温搅拌20分钟。将上述液体与等体积2.5％的海藻酸钠溶液混合，充分搅拌后经流化床脱水干燥，制成小鹅瘟微胶囊化疫苗干粉，疫苗干粉粒径范围在5-15μm。将制成的疫苗接种非免疫鹅胚，经测定每克疫苗所含毒价为0.7×107ELD50。将疫苗加入饲料中混和均匀，经拌料途径对45只健康成年鹅进行免疫接种，另设30只健康成年鹅作为非免疫对照组，两组健康成年鹅分开饲养。在免疫后的7、14、28、42、56、70天，从免疫组与对照组中随机抽检10份血清，测定相应的ELD50，求得中和指数(中和指数＝试验组ELD50/对照组ELD50)。结果表明，免疫7、14、28、42、56、70天后的血清中和指数分别为101.2、101.8、102.0、102.0、101.8、101.2。根据《中国兽药典》附录27页中的要求(血清中和指数应≥101.8)，可以判断，小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗在免疫后的第14天即可产生坚强保护力，免疫保护期达56天。
实施例三
按实施例一所述制备方法制成的疫苗经饮水途径免疫开产种鹅40只，另设30只健康成年鹅作为非免疫对照组。取免疫组和对照组在免疫后不同时间段(20-30天，31-40天，41-50天，51-60天)所产蛋孵出的雏鹅各10只，于5日龄时攻击致死量的小鹅瘟病毒液，观察10天。结果试验组不同时间段的免疫保护率分别为90％、100％、100％、80％，而对照组不同时间段的死亡率分别为100％、80％、90％、90％。由此可见，该疫苗对雏鹅具有较好的保护效果。
实施例四
按实施例一所述制备方法制成的疫苗经饮水途径免疫80只健康成年番鸭，另设40只健康成年番鸭作为非免疫对照组，两组番鸭分开饲养。在免疫后的7、14、28、42、56、70天，从免疫组与对照组中随机抽检10份血清，测定相应的ELD50，求得中和指数(中和指数＝试验组ELD50/对照组ELD50)。结果表明，免疫7、14、28、42、56、70天后的血清中和指数分别为101.1、101.8、102.0、101.9、101.7、101.2。根据《中国兽药典》附录27页中的要求(血清中和指数应≥101.8)，可以判断，小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗对番鸭的保护期达42天以上。同时，取免疫组与对照组番鸭在免疫后20-25天所产蛋孵出的雏番鸭各10只，于5日龄时攻击致死量的小鹅瘟病毒液。结果免疫组番鸭全部保护，而对照组番鸭有70％发病死亡。由此可见，该疫苗对番鸭也具有较好的保护效果。

Claims (1)

1.小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法，将购自中国兽医药品监察所的小鹅瘟SYG毒株通过鹅胚增殖培养后制成疫苗半成品，其特征是，还包括如下步骤：
（1）半成品经无菌检合格后，加入5%的蔗糖脱脂乳溶液，搅拌混匀后再加入20%—40%的多孔淀粉，37℃控温搅拌20—40分钟；
（2）将步骤（1）制得的液体与等体积1%—2.5%的海藻酸钠溶液混合，充分搅拌后经流化床脱水干燥，制成小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗干粉；所述的小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗干粉粒径范围在5—15μm；所述的小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗每克所含病毒效价为0.7×107—1.5×107ELD50；所述的小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗通过口服途径免疫；小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗一次免疫接种后，产生至少56天的免疫保护期。
CN2010102864005A 2010-09-17 2010-09-17 小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法 Expired - Fee Related CN102397541B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010102864005A CN102397541B (zh) 2010-09-17 2010-09-17 小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010102864005A CN102397541B (zh) 2010-09-17 2010-09-17 小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102397541A CN102397541A (zh) 2012-04-04
CN102397541B true CN102397541B (zh) 2013-04-17

Family

ID=45880438

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2010102864005A Expired - Fee Related CN102397541B (zh) 2010-09-17 2010-09-17 小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102397541B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103340408B (zh) * 2013-07-26 2015-10-28 湖南农业大学 一种大米抗氧化肽微胶囊及其制备方法
CN108079289A (zh) * 2018-02-07 2018-05-29 姜新鹏 口服灭活猪传染性胃肠炎病毒的微胶囊制备方法
CN108114277A (zh) * 2018-02-07 2018-06-05 姜新鹏 口服灭活猪流行性腹泻病毒的微胶囊制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1927886A (zh) * 2005-09-09 2007-03-14 重庆永健生物技术有限责任公司 防治小鹅瘟病的异源抗小鹅瘟蛋黄抗体的制备方法与应用
CN101513527A (zh) * 2009-03-26 2009-08-26 吉林大学 小鹅瘟、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1927886A (zh) * 2005-09-09 2007-03-14 重庆永健生物技术有限责任公司 防治小鹅瘟病的异源抗小鹅瘟蛋黄抗体的制备方法与应用
CN101513527A (zh) * 2009-03-26 2009-08-26 吉林大学 小鹅瘟、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗及其制备方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
多孔淀粉吸附性能的应用研究;王慧等;《农产品加工.学刊》;20080731(第7期);第70页左栏第1-2段、第71页左栏第3段 *
王慧等.多孔淀粉吸附性能的应用研究.《农产品加工.学刊》.2008,(第7期),第70页左栏第1-2段、第71页左栏第3段.
甘军纪等.鹅胚化小鹅瘟活疫苗.《中国禽业导刊》.2006,(第18期),3.
骆艳秋等.小鹅瘟（GP）活疫苗.《吉林畜牧兽医》.1999,(第6期),26. *
鹅胚化小鹅瘟活疫苗;甘军纪等;《中国禽业导刊》;20060808(第18期);第3页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN102397541A (zh) 2012-04-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100577204C (zh) 用细胞系生产猪瘟活疫苗的方法
CN101612396B (zh) 一种犬瘟热活疫苗及其制备方法
CN102397541B (zh) 小鹅瘟微胶囊化口服活疫苗的制备方法
CN103436499A (zh) 一种猪圆环病毒样颗粒及其疫苗和制备方法
CN1217212A (zh) 甲肝－麻疹二联疫苗及其生产方法
CN105797153A (zh) 兽用疫苗免疫佐剂及其制备与应用方法
CN107970446A (zh) 抗仔猪腹泻高免全蛋粉微胶囊及其制备方法与应用
US3155589A (en) Parenteral extravascular injectable vaccines for simultaneous immunization of canidae against rabies, canine distemper, and infectious canine hepatitis
CN102205123B (zh) 一种防治小鹅瘟的卵黄抗体缓释制剂的制备方法
CN103495167A (zh) 一种鸡传染性法氏囊病复合活疫苗的制备方法
CN101745106A (zh) 一种猪细小病毒病活疫苗及其制备方法
CN101947321A (zh) 活疫苗用耐热冻干保护剂及其制备方法及鸡新城疫活疫苗
CN102727877A (zh) 一种生物反应器制备高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（jxa1-r株）的方法及其应用
CN104758928A (zh) 一种山羊痘、羊口疮二联细胞弱毒疫苗及其制备方法和用途
CN106310250A (zh) 一种猪瘟口服弱毒冻干疫苗、其制备方法及冻干保护剂
CN102716479A (zh) 一种猪繁殖与呼吸综合征nvdc-jxa1株-猪细小病毒病二联灭活疫苗及其制备方法和应用
CN107338227B (zh) 牛副流感病毒pbiv3-b株及其应用
CN102727881A (zh) 高致病性猪繁殖与呼吸综合征jxa1-r株-猪细小病毒病二联活疫苗及其制备方法和应用
CN105582535A (zh) 猪瘟、伪狂犬病二联活疫苗的制备方法及其制品
CN101380470B (zh) 一种猪细小病毒活疫苗
CN103550770B (zh) 一种鸡传染性法氏囊病复合泡腾片的制备方法
CN104248761B (zh) 一种疫苗组合物及其制备方法和应用
CN103834620B (zh) 新城疫病毒、新城疫灭活疫苗及其制备方法
CN102978166A (zh) 使用连续传代的细胞系制备新城疫病毒与疫苗的方法及其制品
CN100566751C (zh) 禽霍乱微胶囊疫苗的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20160719

Address after: 310018, No. 10, No. 266, Hangzhou economic and Technological Development Zone (Xiasha), Zhejiang

Patentee after: HANGZHOU JIANLIANG VETERINARY BIOLOGICAL PREPARATIONS CO., LTD.

Address before: 225003 Jiangsu city of Yangzhou province mulberry Road No. 46

Patentee before: Jinagsu Poultry lnstitute

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20130417

Termination date: 20160917