CN102397493A - 一种具有抑螨功效的复方中药提取物及其制备方法与应用 - Google Patents

一种具有抑螨功效的复方中药提取物及其制备方法与应用 Download PDF

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赵华
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Abstract

本发明公开了一种具有抑螨功效的复方中药提取物及其制备方法与应用。该复方中药提取物,是从下述中药组合物中提取得到的;所述中药组合物由质量份数比为10-15∶10-15∶10-15的百步、大黄和薄荷三味中药组成。其制备方法如下:将百步、大黄和薄荷三味中药混合,在中药组合物加水进行提取,过滤、离心,收集上清液,即得所述复方中药提取物。本发明提供的制备复方中药提取物的方法,不需要有机试剂,提取分离方法简便,所得产品纯度较高。对本发明的复方中药提取物进行抑螨能力检测,结果表明,该复方中药提取物具有较强的几丁质酶抑制能力及表皮葡萄球菌菌抑制能力。

Description

一种具有抑螨功效的复方中药提取物及其制备方法与应用
 技术领域
本发明涉及一种具有抑螨功效的复方中药提取物及其制备方法与应用。
 背景技术
人体蠕形螨是一类永久性寄生螨,可作为传染源在健康人群的皮肤内寄生,主要寄生于人体颜面部皮脂腺发达的部位如额、鼻尖、鼻唇沟、颊和额部。人体蠕形螨是一种条件性致病螨,在一定条件下可引起毛囊炎、皮脂腺炎,也可引起座疮、酒渣鼻、眼睑炎等蠕形螨病,严重影响人们的健康和美容,因此受到人们的广泛关注。
 发明内容
本发明的目的是提供一种具有抑螨功效的复方中药提取物及其制备方法。
本发明所提供的具有抑螨功效的复方中药提取物是从下述中药组合物中提取得到的,所述中药组合物由百步、大黄和薄荷按照质量份数比为10-15∶10-15∶10-15的比例组成。
所述复方中药提取物的制备方法如下:
将百步、大黄和薄荷三味中药按照上述质量份数比混合,得中药混合物;将所述中药混合物用水进行提取,得到所述具有抑螨功效的复方中药提取物。
所述提取可在水浴中进行,所述提取的温度为70℃-80℃,优选80℃,提取的时间为75分钟-90分钟,优选90分钟;所述提取的过程中,所述中药组合物与水的配比为1g∶15-20ml,优选1g∶20ml。
本发明方法还包括下述纯化的步骤:提取结束后,过滤、离心,收集上清液,即得到复方中药提取物溶液。对提取液用纱布进行过滤,所用纱布为100-200目,优选200目。在所述离心步骤中离心的转速为4000-5000r/min,优选4000r/min,离心时间为10-15分钟,优选10分钟。在对提取体系进行过滤前,还需进行冷却,冷却的终温度为50℃。
另外,在收集上清液步骤之后,还可对所述上清液进行抽滤,可用硅藻土进行抽滤。
本发明的另一个目的是提供上述复方中药提取物的应用。
本发明所提供的中药提取物的应用一方面是其在制备化妆品中的应用;尤其是在制备具有抑螨功效的化妆品中的应用。另一方面是在制备几丁质酶抑制剂或表皮葡萄球菌抑制剂中的应用。
利用本发明的复方中药提取物制备的化妆品,尤其是具有抑螨功效的化妆品,也属于本发明的保护范围。
本发明提供的制备复方中药提取物的方法,不需要有机试剂,提取分离方法简便,所得产品纯度较高。对本发明的复方中药提取物进行抑螨能力检测,结果表明,该复方中药提取物具有较强的几丁质酶抑制能力及表皮葡萄球菌抑制能力。
 附图说明
图1为本发明提供的复方中药提取物的生产工艺流程图;
图2为不同浓度的复方中药提取物对几丁质酶的抑制率比较图;
图3为不同浓度的复方中药提取物对表皮葡萄球菌的抑制率比较图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明,但本发明并不局限与此。下述实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
实施例1、制备复方中药提取物
复方中药提取物的生产工艺流程图如图1所示,具体制备过程如下:
取料液比1∶20,即30g百部、大黄和薄荷的混合物,其中,百部10克,大黄10克,薄荷10克,之后加入600mL去离子水;80℃水浴提取90min(加盖保鲜膜,减少蒸发);提取结束后停止加热,水循环冷却到50℃,200目纱布粗滤;4000r/min的转速下离心10分钟,取上清液;真空硅藻土滤饼抽滤上清液,收集抽滤液,即为复方中药提取物溶液(记为质量浓度为100%的提取物溶液),所得滤液测定pH值、固含量、电导率,测定结果为:pH值为4.4~5.0、固含量为20~30%和电导率为300~550μs/cm2;之后95℃保温30分钟,水浴降温至50℃,加入0.6%LGP液体防腐剂(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS,购自ISP国际特品有限公司),得到产品。之后根据需要,可进行后续操作,如洗桶,消毒,灌装,装箱,打码,入库。
实施例2、制备复方中药提取物
复方中药提取物的生产工艺流程图如图1所示,具体制备过程如下:
取料液比1∶15,即35g百部、大黄和薄荷的混合物,其中,百部15克,大黄10克,薄荷10克,之后加入450mL去离子水;70℃水浴提取75min(加盖保鲜膜,减少蒸发);提取结束后停止加热,水循环冷却到50℃,100目纱布粗滤;4000r/min的转速下离心10分钟,取上清液;真空硅藻土滤饼抽滤上清液,收集抽滤液,即为复方中药提取物溶液(记为质量浓度为100%的提取物溶液),所得滤液测定pH值、固含量、电导率,测定结果为:pH值为4.4~5.0、固含量为20~30%和电导率为300~550μs/cm2;之后95℃保温30分钟,水浴降温至50℃,加入0.6%LGP液体防腐剂(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS,购自ISP国际特品有限公司),得到产品。之后根据需要,可进行后续操作,如洗桶,消毒,灌装,装箱,打码,入库。
 实施例3、制备复方中药提取物
复方中药提取物的生产工艺流程图如图1所示,具体制备过程如下:
取料液比1∶20,即30g百部、大黄和薄荷的混合物,其中,百部10克,大黄15克,薄荷15克,之后加入600mL去离子水;80℃水浴提取90min(加盖保鲜膜,减少蒸发);提取结束后停止加热,水循环冷却到50℃,200目纱布粗滤;5000r/min的转速下离心15分钟,取上清液;真空硅藻土滤饼抽滤上清液,收集抽滤液,即为复方中药提取物溶液(记为质量浓度为100%的提取物溶液),所得滤液测定pH值、固含量、电导率,测定结果为:pH值为4.4~5.0、固含量为20~30%和电导率为300~550μs/cm2;之后95℃保温30分钟,水浴降温至50℃,加入0.6%LGP液体防腐剂(该防腐剂全称为LIQUID GERMALL PLUS,购自ISP国际特品有限公司),得到产品。之后根据需要,可进行后续操作,如洗桶,消毒,灌装,装箱,打码,入库。
实施例4、抽滤后的复方中药提取物溶液的功能测定试验
下述试验中所用的复方中药提取物溶液,是将实施例1制备得到的复方中药提取物溶液记为质量浓度为100%的提取物溶液,其它浓度的提取物溶液是将该溶液进行稀释得到的。
1、对几丁质酶抑制能力的测定
对几丁质酶抑制能力的测定按照如下文献提供的方法进行:赵凯,徐鹏举,谷广烨.3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定还原糖含量的研究;食品科学,2008,29(08):534~536。
几丁质酶将几丁质降解后,生成单体或寡聚体的还原性末段能与特定的显色剂(如3,5-二硝基水杨酸)发生显色反应,通过测定吸光度值的变化计算出几丁质酶的活性。若存在几丁质酶抑制化合物,吸光度值与空白对照相比有显著降低。因而可用分光光度法进行定量分析,来检测复方中药提取物溶液对几丁质酶抑制情况,从而评价样品的抑螨能力。其能力用抑制率来表示,抑制率越大,则表明其抑螨能力越强。
实验方法:取粉状Streptomyces griseus几丁质酶(Sigma,C6137)溶于磷酸盐缓冲液中,配制成最终浓度为0.5U/mL的几丁质酶液。然后将几丁质酶液500μL、复方中药提取物溶液500μL与1mL 10%胶体几丁质-磷酸缓冲液于37℃水浴保温1.5h,然后沸水浴10min,终止反应后离心,取上清0.5mL,再加入1.5mL DNS(3,5-二硝基水杨酸),煮沸5min,迅速冷却。定容至10mL,放置15min后,于540nm处测吸光度值,结果见表1。
 表1
  中药提取物浓度   A1   A2   A3   平均值   抑制率
  1%   0.059   0.065   0.062   0.063   59%
  2%   0.030   0.035   0.038   0.036   76%
  3%   0.029   0.026   0.028   0.028   81%
  4%   0.017   0.015   0.010   0.014   91%
  5%   0.010   0.011   0.013   0.012   92%
该实验结果如图2所示,由图可知,该中药提取物对几丁质酶抑制能力随浓度增加而增强,具有线性关系,质量浓度为5%的提取物溶液对几丁质酶的抑制率可达到92%的抑制率。证明本发明提供的提取物具有较强的几丁质酶抑制能力,可用于制备化妆品,尤其是用来制备具有抑螨功效的化妆品。实施例2和3得到的抑螨功效复方中药取物的结果与上述结果无显著差异。
2、对表皮葡萄球菌的抑制作用
试验菌株:表皮葡萄球菌(购于广东省微生物菌种保藏中心,GIM1.143=ATCC12228)
试验步骤:
将培养24h的表皮葡萄球菌用无菌水配制成106细胞/mL菌悬液。
用无菌水将取抽滤后的复方中药提取物溶液稀释成不同浓度稀释液,然后将每个浓度梯度溶液各取1ml与上述菌悬液1mL均匀混合,接种于表皮葡萄球菌的培养基平板,37℃培养24h后观察结果。以无菌水代替提取物溶液作为空白对照。
计算结果:
(1)计算:
X=(A-B)/A×100%
式中:X——抑菌率,%;
A——对照样品平均菌落数;
B——试验样品平均菌落数。
(2)结果报告:
抑菌率≥50%~90%,产品有抑菌作用;
抑菌率≥90%,产品有较强抑菌作用。
实验结果见图3。由图可知,复方中药提取物溶液对表皮葡球菌的抑制率随着浓度的增加而增大,当溶液浓度为100%时,抑制率可达到90%。说明本发明提供的中药提取物对表皮葡萄球菌具有非常强的抑制能力。实施例2和3得到的抑螨功效复方中药取物的结果与上述结果无显著差异。

Claims (10)

1.一种复方中药提取物,是从下述中药组合物中提取得到的;所述中药组合物由百步、大黄和薄荷按照质量份数比为10-15∶10-15∶10-15的比例组成。
2.根据权利要求1所述的复方中药提取物,其特征在于:所述复方中药提取物是按照包括下述步骤的方法得到的:将百步、大黄和薄荷三味中药按照权利要求1中所述质量份数比混合,得到中药组合物;将所述中药组合物用水进行提取,得所述复方中药提取物。
3.根据权利要求2所述的复方中药提取物,其特征在于:所述提取的温度为70℃-80℃,优选80℃,提取的时间为75分钟-90分钟,优选90分钟;所述提取的过程中,所述中药组合物与水的配比为1g∶15-20ml。
4.一种制备权利要求1所述复方中药提取物的方法,包括下述步骤:将百步、大黄和薄荷三味中药按照权利要求1中所述质量份数比混合,得中药组合物;将所述中药组合物加水进行提取,即得所述复方中药提取物。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述提取的温度为70℃-80℃,优选80℃,提取的时间为75分钟-90分钟,优选90分钟;所述提取的过程中,所述中药组合物与水的配比为1g∶15-20ml。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于:所述方法还包括下述纯化的步骤:提取结束后,过滤、离心、收集上清液,对所述上清液进行抽滤,收集滤液,即为纯化后的中药提取物。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述过滤采用纱布进行过滤,所述纱布为100-200目,优选200目;所述离心的转速为4000-5000r/min,优选为4000r/min;离心的时间为10-15分钟,优选10分钟;所述抽滤中采用助滤剂硅藻土进行抽滤。
8.权利要求1-3中任一项所述的复方中药提取物在制备下述任意一种产品中的应用:
1)化妆品;2)几丁质酶抑制剂;3)表皮葡萄球菌抑制剂。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述化妆品为具有抑螨功效的化妆品。
10.一种具有抑螨功效的化妆品,其特征在于:所述化妆品含有权利要求1-3中任一项所述的复方中药提取物。
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