CN102391145B

CN102391145B - 一种乌苯美司中间体的光学异构体的拆分方法

Info

Publication number: CN102391145B
Application number: CN201110257017.1A
Authority: CN
Inventors: 钱建彬; 秦怀伟; 朱勇; 王庆秋; 钟祥章; 张广明; 尹志媛
Original assignee: WANLE PHARMACEUTICAL CO Ltd SHENZHEN
Current assignee: WANLE PHARMACEUTICAL CO Ltd SHENZHEN
Priority date: 2011-08-31
Filing date: 2011-08-31
Publication date: 2014-07-02
Anticipated expiration: 2031-08-31
Also published as: CN102391145A

Abstract

本发明提供了一种乌苯美司中间体的光学异构体的便捷拆分方法，采用水为重结晶溶剂，分离除去3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸中的赤式异构体，得到含量高的苏式异构体(2RS，3SR)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸，而产品中赤式异构体的含量小于2％，有利于后续步骤的操作，可以提高收率，简化纯化步骤，有利于最终制备高质量的能够用于制备成安全有效药物制剂的乌苯美司原料药；本发明的方法使用水作为重结晶溶剂，成本低且环保，操作简单，适合工业化生产。

Description

一种乌苯美司中间体的光学异构体的拆分方法

技术领域

本发明涉及药物化学领域，进一步涉及肿瘤治疗药物乌苯美司中间体的制备方法。

背景技术

乌苯美司是一种新型的抗肿瘤药物，是从橄榄网状链霉菌的培养液中分离得到的氨肽酶抑制剂，对氨肽酶N具有抑制作用，从而干扰肿瘤细胞的代谢，抑制肿瘤细胞增生，使肿瘤细胞凋亡，并激活人体细胞免疫功能，刺激细胞因子的生成和分泌，促进抗肿瘤效应细胞的产生和增殖。可配合化疗、放疗及联合应用于白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症及造血干细胞移植后的治疗，以及其他实体瘤患者。乌苯美司化学名为N-[(2S，3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸，其结构式如下：

从乌苯美司的结构式可以看出，分子中存在着三个手性中心，最早合成乌苯美司的报道是通过生物化学的细菌发酵培养。随着不对称合成的不断发展，越来越多的化学合成方法被报道出来。含有两个手性中心的中间体即4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酸的合成是研究的重点，现有的合成该中间体的方法存在合成步骤长，超低温反应，使用危险试剂等各种缺点，且合成的是消旋体，需经过复杂的拆分操作后才能进一步合成具有光学活性的乌苯美司。其中J.Antib.1983，36(6)，695-9报道的方法原料成本低，不使用危险试剂，且得到的是合成乌苯美司所需要的光学异构体(2S，3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酸(式I)，较早得到光学活性的中间体可以提高收率，简化后续步骤，适合工业生产使用。该文献报道的方法反应路线如下：

以R为甲基为例，该方法第一步反应用α-乙酰氨基苯乙酮与乙醛酸反应，生成3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸，含二个手性碳，可能生成四个异构体，二个苏式，二个赤式，结构式如下：

二个苏式(Threo)异构体

二个赤式(erythro)异构体

其中苏式异构体(2RS，3SR)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸为需要的异构体，该文献记载按其方法反应只生成二个苏式(Threo)异构体，并无另二个赤式(erythro)异构体，但是实际按照该方法操作，产物中仍然存在二个赤式异构体，但苏式异构体占优，苏式异构体占65-75％，赤式异构体占22-32％。

为了减少后面步骤产生的杂质，提高收率，需分离产生的赤式异构体。光学异构体由于性质接近，通常很难分离拆分，需寻找一个简便的方法以适合工业化的生产，并为最终制备高质量的乌苯美司原料药提供较高纯度的中间体。

发明内容

本发明提供了一种乌苯美司中间体的光学异构体的便捷拆分方法，该方法以水为重结晶溶剂分离除去二个赤式异构体得到二个苏式异构体(2RS，3SR)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸，使产品中赤式异构体的含量少于2％，该方法简便易操作，适合工业化生产。

本发明提供的一种乌苯美司中间体的光学异构体的便捷拆分方法，其特征在于将以下反应得到的3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸进行重结晶操作：

所述重结晶操作使用水作为重结晶溶剂。发明人曾尝试使用其他常用溶剂进行重结晶，如四氢呋喃，丙酮，异丙醇，乙酸乙酯，乙醇以及乙醇-水混合溶剂，但是分别得到的产品经HPLC检测，产品中的赤式异构体未能分离除去，只有采用水做重结晶溶剂时才能达到分离目的。本发明采用的高效液相色谱条件如下：1、流动相为甲醇/0.05M磷酸二氢钠：30/70，2、流速为1.0毫升/分；3、柱温：25℃；4、检测波长：254nm；5、色谱柱：C18/250mm×4.6。

3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸的制备按照J.Antib.1983，36(6)，695-9报道的方法合成，得到的产品经HPLC检测，通常苏式异构体占66-75％，赤式异构体占22-32％。本发明合成的进行重结晶方法筛选的一批3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸含赤式异构体20.3％，苏式异构67.2％，水份7.6％。取该批产品10-100克进行重结晶工艺方法的筛选，结果如下：

根据上述结果，选择3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸与水的质量比为1∶6-15，从最终两种异构体的含量及收率考虑，优选质量比为1∶8-10。将3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸与水混合后，加热搅拌溶解，加热温度范围为50-100℃，待溶液完全澄清后，趁热过滤(如果溶液比较干净，则无须过滤)，滤液自然冷却，如果快速冷却，苏式异构体和赤式异构以几乎相同的速率析晶，分离效果差，如果自然冷却，也即慢慢冷却，此时二种异构体析晶的速率不相同，苏式异构体析晶速率较快，大部份析出，而赤式异构体析晶速率较慢，大部份留在母液中，搅拌或不搅拌，对异构体的控制没有显著差异。因此析晶方式采用自然冷却析晶，所述自然冷却的温度为10-40℃，优选20-30℃；重结晶析晶时可搅拌析晶或静置析晶。

发明人意外发现用水作为重结晶溶剂能够分离本发明需纯化的3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸，从而提供了一种乌苯美司中间体的光学异构体的便捷拆分方法，本发明采用水为重结晶溶剂，分离除去3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸中的赤式异构体，得到含量较高的苏式异构体(2RS，3SR)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸，而产品中赤式异构体的含量小于2％，这样的产品有利于后续步骤的操作，可以提高收率，简化纯化步骤，有利于最终制备高质量的能够用于制备成安全有效药物制剂的乌苯美司原料药。且本发明的方法使用水作为重结晶溶剂，成本低且环保，操作简单，适合工业化生产。

下面结合具体实施方式的实施例及附图对本发明作进一步详细说明。

附图说明

附图1为按照J.Antib.1983，36(6)，695-9报道的方法合成得到的3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸的高效液相色谱图

附图2为本发明实施例1得到的产品的高效液相色谱图

具体实施方式

实施例1

3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸50克(含赤式异构体20.3％，苏式异构67.2％，水份7.6％)，加水500克，加热至90℃，趁热过滤，滤液室温(25℃)自然冷却，析晶，过滤，干燥，得产品25.2克(水份7.1％)，HPLC检测含赤式异构体0.062％，苏式异构体99.938％。

实施例2

3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸40克(含赤式异构体20.3％，苏式异构67.2％，水份7.6％)，加入水320克，加热至90℃，趁热过滤，滤液室温(30℃)自然冷却，析晶，过滤，干燥，得产品21.8克(水份7.2％)，HPLC检测含赤式异构体0.238％，苏式异构体99.762％。

实施例3

3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸50克(含赤式异构体20.3％，苏式异构67.2％，水份7.6％)，加入水300克，加热至90℃，趁热过滤，滤液室温(25℃)自然冷却，析晶，过滤，干燥，得产品36.0克(水份7.5％)，HPLC检测含赤式异构体1.790％，苏式异构体98.194％。

Claims

1.一种乌苯美司中间体的光学异构体的拆分方法，其特征在于将以下反应得到的3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸进行重结晶操作：

所述重结晶操作使用水作为重结晶溶剂，分离除去二个赤式异构体得到两个苏式异构体(2RS，3SR)-3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基丁酸，所述3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸与水的质量比为1∶6-15，析晶方式采用自然冷却析晶，所述自然冷却的温度为10-40℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述3-乙酰氨基-2-羟基-4-氧代-4-苯基-丁酸与水的质量比为1∶8-10。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述自然冷却的温度为20-30℃。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于重结晶析晶时可搅拌析晶或静置析晶。