CN102389437A - 积雪草三萜类成分用于制备抗脑卒中后遗症产品的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及积雪草三萜类成分在用于制备抗颅脑损伤产品中的应用，即积雪草α-香树脂醇型的三萜类成分积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷及其苷元羟基积雪草酸在制备治疗脑卒中后遗症产品中的新用途。经动物实验证实，积雪草苷及积雪草酸、羟基积雪草苷及羟基积雪草酸显示了显著的生物活性，药理作用较强，具有治疗脑卒中后抑郁症、脑卒中后痴呆(血管性痴呆)和肢体障碍的用途。其性质稳定，原料来源丰富、价廉，安全低毒，为预防、诊断、检测、保护、治疗和研究脑卒中后遗症提供了一种新的药物来源；制备工艺简单，得率高，适于工业化生产，且容易推广应用，对开发利用我国的药用植物资源具有重要价值。

Description

积雪草三萜类成分用于制备抗脑卒中后遗症产品的应用

技术领域

本发明涉及医药、食品、保健品、饮料等技术领域，具体地说是涉及中药提取物中化合物的新用途，更具体地说是涉及一种中药积雪草提取物中积雪草三萜类成分的新用途，再具体地说是涉及积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸在制备抗脑卒中后遗症产品中的新应用。

背景技术

(一)积雪草历史研究的概况

1、概述

积雪草(Asiatic Pennywort Herb或Centella，中药材学名：Herba Centellae/Centellaasiatica)为《中国药典》收载的常用中药，始载于《神农本草经》，为双子叶植物伞形科Umbelliferae积雪草Centella asiatica(L.)Urban的干燥全草或带根全草。夏秋二季采收，除去泥沙杂质，洗净，切段，晒干。

积雪草原植物为多年生匍匐草本植物，高可达50cm。常卷缩成团状，其茎葡萄、细长，节上生根，根圆柱形，长2～4cm，直径1～1.5mm，表面浅黄色或灰黄色，无毛或稍有毛，并沿着匍匐茎生根延伸。有长的浅红色的茎，细长弯曲，有细纵皱纹，节上常着生须状根，长茎上有圆形叶片，叶片鲜绿色，为杯状叶，叶缘具圆齿，茎节产生小的叶簇和根。单叶互生；叶柄长2～15cm，基部鞘状；叶片肾形或近圆形，长1～3cm，宽1.5～5cm，基部阔心形，边缘有钝锯齿，两面无毛或在背面脉上疏生柔毛；常状脉5～7。单伞形花序单生，或2～4个聚状；花瓣卵形，紫红色或乳白色。果实圆球形，基部心形或平截，长2～3m，宽2～3.5mm，每侧有纵棱数条，棱间有明显小横脉，网状，平滑或稍有毛。花、果期4～10月。

原产于印度，现广泛分布于世界热带、亚热带区，在中国主要分布于西南及长江以南各省：陕西、江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖北、湖南、广东、广西等地。积雪草生于海拔200～1990m的阴湿草地、田边、沟边，阳光和较湿润的环境：河岸、沼泽、草地中。陶弘景曰：此草以寒凉得名，其性大寒，故名积雪草。

别名：连钱草、地钱草、马蹄草、老公根、葵蓬菜、崩口碗、落得打、地棠草、大马蹄草、土细辛、崩大碗、雷公根、刚果龙、缺碗草芋子草、马脚迹、芽黄草、草如意、蚶壳草、含壳草、乞食碗、老豺碗、大水钱、破铜钱草、铜钱草、老鸭确定、铁灯盏、半边碗、透骨草、跳破碗、雷公碗、地细辛、地排草。

2、生药历史研究的基本现状

【性状鉴别】干燥全草多皱缩成团，根圆柱形，长3～4.5cm，直径1～1.5mm，淡黄色或灰黄色，有纹皱纹。茎细长、弯曲、淡黄色、在节处有明显的细根残迹或残留的细根、叶多皱缩破碎，灰绿色，完整的叶圆形或肾形，直径2～6cm，边缘有钝齿，下面有细毛；叶柄长1.5～7cm，常扭曲，基部具膜质叶鞘。气特异，叶淡微辛。

【显微鉴别】茎横切面：表皮细胞类圆形或近方形。皮层为7～9列薄壁细胞，外侧数列细胞的壁呈不均匀增厚。外韧维管束6～7个，排列成环；韧皮部外侧国微木化的纤维群；木质部导管约6～10个；束内形成层为2～3列细小细胞。髓部由较大的类圆形薄壁细胞组成。皮层和射线中分布圆形的油管，直径24～24μm，周围分泌细胞5～7个。

【理化鉴别】(1)取本品粉末1g，加己醇适量，热提10分钟，滤过，滤液浓缩至干，残潭用氯仿溶解至约1ml，加1ml硫酸，氯仿层显红棕色。(检查三萜类化合物)(2)取本品粉末1g，加己醇适量，热提10min，滤过，滤液浓缩至干，残潭溶于醋酐中，加入1滴硫酸，醋酐层显绿以。(检查三萜类化合物)

【栽培技术】用种子分株繁殖。种子繁殖：于春、秋季条播，覆土2～3cm。分株繁殖：在早春进行。苗期勤除杂草，旱季注意浇水。

【植物特征】与本植物外形相似有：

(1)天胡荽(Hedrocotole sibthorpioides Lain.)，伞形科植物；叶较小，长0.5～2.5厘米，掌状浅裂，用手揉之有芹菜香味，民间称小金钱草，效用类似。

(2)连钱草(Glechoma headeracea L.)，唇形科植物；茎有四棱，叶对生，在叶腋单生唇形花。常易混淆，但效用不同。

(3)黄疸草(Dichondra repens Forst.)，旋花科植物；叶在匍匐茎上互生，较小，长0.6～1.5厘米，先端钝圆或微凹，全缘；春季在叶腋生白色小花。效用不同，应予区别。

【药性】味苦；辛；性寒；

【归经】入肝，脾，肾经。

【功效】清热解毒，利湿消肿。是东方人的长寿药，可益脑提神。研究表明具有滋补、消炎、愈合伤口、利尿通便和镇定作用。对麻风病、溃疡也有疗效，对血液净化及免疫力有激活作用，因其可刺激深层皮肤细胞的更替。它是神经滋补剂，能提高记忆力，减轻精神疲劳；还可降血压，治疗肝病等。

【主治病症】湿热黄疸，中暑腹泻，砂淋血淋，痈肿疮毒，跌扑损伤。

【用法用量】内服：煎汤，9～15g(鲜者15～30g)，或捣汁。外用：适量，捣敷或绞汁涂。剂量过大会引起眩晕。

【药物配伍】(1)配茵陈蒿，利湿清热并举，相辅相成，功效倍增。

(2)配葛根，治暑泻，其效用以其升清，清热解毒，燥湿故也。

(3)配海金沙，治砂淋属于热者。

(4)配白头翁，共奏止痢之功。

(5)配生地，用治热在血分，迫血妄行，咯血，衄血，呕血皆宜。

(6)配紫花地丁，相须为用，功效大增，一切痈疽，发背，疔肿，瘰疬，无名肿毒皆可应用。

(7)配玄参，软坚散结，常用治瘰疬，鼠疮。

【药方选录】(1)治湿热黄疸：积雪草一两，冰糖一两。水煎服(《江西民间草药》)。

(2)治中暑腹泻：积雪草鲜叶搓成小团，嚼细开水吞服一、二切(《浙江民间常用草药》)。

(3)治砂淋：积雪草一两。第二次的淘米水煎服(《江西民间草药验方》)。

(4)治血淋：积雪草头、草益根各一把。捣烂绞汁和冰糖一两，一次炖服(《闽东本草》)。

(5)治小便不通：鲜积雪草一两，捣烂贴肚脐，小便通即去药(《闽东本草》)。

(6)治肝脏肿大：崩大碗每次约八两至一斤。煎水服(《岭南草药志》)。

(7)治麻疹：积雪草一至二两。水煎服(广州部队《常用中草药手册》)。

(8)治乳痈初起：老公很茎叶和槟榔衣一个，酒煎服(《岭南采药录》)。

(9)治疔疮：

①鲜积雪草，洗净，捣烂敷患处(《江西民间草药》)。

②鲜积雪草一至二两。水煎服(《福建中草药》)。

(10)治缠腰火丹：鲜积雪草，洗净，捣烂绞汁，同适量的生糯米粉碉成稀糊状，搽患处(《江西民间草药》)。

(11)治跌打损伤：积雪草八钱至一两，和红酒半斤至十二两，炖一小时，内服；渣捣烂后贴伤部(《福建民间草药》)。

(12)治刀伤出血：崩大碗，酌量，捣烂外敷伤口(《岭南草药志》)。

(13)治臁疮：鲜积雪草洗净，捣烂敷患处，一日一换(《江西民间草药》)。

(14)治目赤肿痛：鲜积雪草捣烂敷寸口处，或捣烂绞汁点患眼，一日三、四次(《江西民间草药》)。

(15)治麦粒肿：鲜积雪草洗净捣烂，掺红糖敷之(《泉州本草》)。

(16)治咽喉肿痛：鲜积雪草二两。洗净，放碗中捣烂，开水冲出汁，候温，频频含咽(《江西民间草药》)。

(17)治百日咳：崩大碗三两，瘦猪肉一两。同煎一小时，分两次服，连服数天。

(18)治误食砒霜或其他食物中毒：老公根四两，胆矾一钱。煎水服。此方亦治钩吻及蕈中毒。

(19)治骨鲠：老公根煎水内服，服时须慢慢咽下(17～19方均出《岭南草药志》)。

(20)解大茶药中毒：取崩大碗捣烂，加茶油灌服。

(21)解木薯中毒：取崩大碗捣烂，温开水冲服。

(22)解毒蕈中毒：崩大碗四两，片糖二两。煎水内服；或崩大碗四两，萝卜一斤，捣烂榨汁内服(20～22方均出《南方主要有毒植物》)。

(23)治咳血、吐血、鼻出血：鲜积雪草二至三两。水煎或捣汁服(《福建中草药》)。

(24)治跌打肿痛：鲜积雪草捣烂绞汁一两，调酒，炖温服；渣敷患处(《福建中草药》)。

(25)治外感暑热、鼻咽：积雪草、旱莲草、青蒿(均鲜)各适量，共捣烂取什，用冷开水冲服。

(26)治外感风热：鲜积雪草60克，白颈蚯蚓4条，共捣烂，水煎后取汁，一日分3次服。

【各家论述】

(1)《本经》：主大热，恶疮，痈疽，浸淫，赤熛，皮肤赤，身热。

(2)《药性论》：治瘰疬鼠漏，寒热时节来往。

(3)《唐本草》：捣敷热肿丹毒。

(4)《日华子本草》：以盐挪贴，消肿毒并风疹疥癣。

(5)《滇南本草》：治子午潮热，眩晕，怕冷，肢体酸困，饮食无味，男妇童疳，虚劳发热不退者用之，利小便，水牛肉为引。

(6)《纲目》：研汁点暴赤眼。

(7)《本草求原》：除热毒，治白浊，浸疳疮，理小肠气。

(8)《民间常用草药汇编》：利水和脾。治水泻及赤白痢。

(9)《陆川本草》：解毒，泻火，利小便。治热性病，头痛，身热，口渴，小便黄赤。

(10)《四川中药志》：祛风散寒。治肺热咳嗽，消瘿瘤，涂痈疮肿毒，消食积饱胀。

(11)《闽东本草》：治暑热痧气，腹痛腹胀。

(12)《广东中药》Ⅱ：清暑热，去湿热。治肝肿大，肋膜炎，双单喉蛾，防治麻疹，并解钩吻中毒。

(二)积雪草的现代研究进展

积雪草在中国已经有两千多年的药用历史，临床上多用于治疗跌打损伤、皮肤病等。其在印度传统草药中被广泛用于精神病、癫痫及癔病的治疗，迄今为止尚未发现有关积雪草三萜类成分积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸用于治疗脑卒中后遗症的报道。

1、化学成分

积雪草目前已知的化学成分主要有三萜类、黄酮类、多炔烯类、挥发油类、甾醇类、木脂素类和香豆素类，下面主要从三萜类、多炔烯烃类、挥发油类等成分来归纳。

(1)三萜类：积雪草主要含大量的三萜皂苷类成分，包括三萜皂甙和三萜酸，即三萜苷及其苷元。

三萜皂甙有积雪草苷(积雪草甙，Asiaticoside，madecassol)、羟基积雪草苷(羟基积雪草甙，Madecas-soside)、玻热模苷(落得打三糖甙，Brahmoside)及玻热米苷(落得打四糖甙，Brah-minoside)，又谓参枯尼苷(含参枯甙，Thankuniside)及异参枯尼苷(异参枯甙，Isothankuniside)、斯理兰卡积雪草苷(centello2side)(赵宇新，李曼玲，冯伟红，等.积雪草的研究进展[J].中国中医药信息杂志，2002，9(8)：，81.)、积雪草二糖苷(asiaticodiglycoside)(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)等，均为五环三萜皂苷。最近报道发现新的三萜类成分，积雪草皂苷B(centellasaponin B)，积雪草皂苷C(centellasaponin C)，积雪草皂苷D(centellasaponin D)。

三萜酸有积雪草酸(asiatic acid)、羟基积雪草酸(破热米酸，Brahmic acid，madecassicacid)、异羟基积雪草酸(isobrahmic acid)、桦皮酸(be-tulinic acid)、异参枯尼酸(isothankunicacid)和Ternomilic acid(赵宇新，李曼玲，冯伟红，等.积雪草的研究进展[J].中国中医药信息杂志，2002，9(8)：，81.)，马达积雪草酸(Madasiatic acid)，centic acid，Centoic acid，cenellic acid，indocenticacid(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)，6-羟基积雪草酸(6-β-O-Hhydroxyasiatic acid)(Shukla YN，Srivas tava Ritu，TripathiAK，et al.Charicterization of an Ursane triterpenoid from Centella asiatica with growth inhibitoryactivity against Sp ilarictia oblique Pharm Biol[J].(LisseNeth)，2000，38(4)：262.)等。

(2)多炔烯烃类：积雪草中还含有多炔烯烃类成分，如：C₁₆H₂₁O₂，C₁₉H₂₇O₄，C₁₉H₂₇O₃，C₁₅H₂₀O₂(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)，C₁₉H₂₈O₂，C₁₇H₂₄O₃和11-oxoheneicosanyl-cyclohexane和dotriacont-8-en-1-oic acid，3-isoocladecanyl-4-hydroxy-a-pyrone(Srivastava Ritu，Shukla YN.A disubstituted pyrone fromCentella Asiati2 ca[J].Indian Chen，Sect B：Org Chem Incl Med Chem，1997.36B(10)：963.)，3-o-[a-L-ara2binopyranosyl]-2a，3a，6a，23a-tetrhydroxyurs-12-ene-28-oic acid(张雷磊，王海生，姚庆强，等.积雪草化学成分研究[J].中草药，2005，36(12)：1761.)等。

(3)挥发油类：秦路平等(秦路平，丁如贤，张卫路，等.积雪草挥发油类成分分析及其抗抑郁作用研究[J].第二军医大学学报，1998，19(2)：186.)应用GC-MS分析，从积雪草中鉴定了45个长链的挥发油类成分，其中含量较高的有石竹烯(caryophyllene)、法尼烯(farnesol)、榄香烯(elemene)、长叶烯(longifolene)等。

(4)其他成分：除上述化学成分外，积雪草中还含有其他成分，Srivastava R(SrivastavaRitu，Shukal YN，Tripathi AK.Antifeedant compounds fromCentella asiatica[J].Fitoterap ia，1997，68(1)：93.)在积雪草提取物中分离得到Stigmasterol、Stigmasterone和Stigmasteroi-B-glucopyranoside。Holeman等(HolemanM，Theron E，Pinel R.Centella asiatica：Analysis by GC-MS and IRMS[J].CosmetAromes，1994，120：52.)从积雪草中分离得到了倍半萜类成分。何明芳等(何明芳，孟正木.沃联群积雪草化学成分的研究[J].中国药科大学学报，2000，31(2)：91.)在积雪草中分离得到了胡萝卜苷(daucosterol)、香草酸(vanfllic acid)。

另外在积雪草中还发现含有内消旋肌醇(Meso-inositol)、积雪草糖(积雪草低聚糖，Centellose，一种寡糖)、胡萝卜烃类(Carotenoids)、叶绿素、山萘酚、β-谷甾醇、谷氨酸、天冬氨酸、维生素B₁、生物碱以及鞣质等成分。

另含山柰素和槲皮素及其甙、积雪草碱(hydrocotyline)、黄酮甙、谷甾醇、维生素C、胡萝卜素、绿色挥发油及树脂状物质。

2、药理作用

2.1抗抑郁的作用

其中所含的甙对小鼠、大鼠有镇静、安定作用，此作用主要是对中枢神经系统中的胆碱能系统的影响。醇提取物无镇痛作用。

陈瑶等(陈瑶，韩婷，芮耀诚，等.积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮和单胺类神经递质的影响[J].中药材，2005，6(6)：492.)给长期未预知应激刺激致大鼠抑郁模型灌胃给药，结果与正常大鼠比较，抑郁症模型组动物血浆促肾上腺皮质激素(简称：ACTH)、血清促甲状腺激素(简称：TSH)、甲状腺素(简称：T₄)、和3，3’，5-三碘甲状腺原氨酸(简称：rT₃)浓度显著降低，血清三碘甲状腺原氨酸(简称：T₃)浓度显著升高；积雪草总苷各剂量组血浆ACTH水平、血清TSH、T₄和rT₃水平不同程度增加，血清T₃水平减少。结果表明积雪草总苷在对下丘脑-垂体-甲状腺轴(简称：HPTA)，有促进垂体血清促TSH的合成与分泌，改善甲状腺功能的异常的作用；在对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(简称：HPAA)，不同程度提高ACTH的水平，并对下丘脑促肾上腺素皮质激素释放激素(简称：CRH)和糖皮质激素有影响。积雪草总苷可能是通过提高机体对各种非特异性刺激的抵抗力，避免过度应激刺激所致机体HPAA和HPTA等调节功能紊乱而发挥抗抑郁作用的。

早期的研究资料(秦路平，丁如贤，张卫东，等.积雪草挥发油成分分析及其抗抑郁作用研究[J].第二军医大学学报，1998，19(2)：186.)表明，积雪草的挥发油和乙醇初提液具有抗抗抑郁作用。近期研究报道表明积雪草的抗抑郁作用是通过降低单胺氧化酶的活性，调节脑内氨基酸的含量(陈瑶，韩婷，秦路平，等.积雪草总苷对小鼠抑郁行为和脑内氨基酸含量的影响[J].中药材，2003，26(12)：870.)；抑制血清皮质酮水平的升高，增强脑内单胺类神经递质的传递(陈瑶，韩婷，芮耀诚，等.积雪草总苷对实验性抑郁症大鼠血清皮质酮和单胺类神经递质的影响[J].中药材，2005，6(6)：492.)等而发挥作用的。

2.2抗胃溃疡作用

乐锦茂等(乐锦茂，浦培英，雷颖.复方积雪草浸膏对大鼠慢性实验性胃溃疡及微循环的影响[J].江苏中医，1992，13(3)：42.)发现复方积雪草浸膏治疗胃溃疡两周以后，大鼠血流加快，血流呈流线型或线粒型，血细胞聚集减少，胃溃疡愈合面积达99.5％。发现复方积雪草浸膏对组胺所致的胃液分泌、胃液游离酸和总酸、胃蛋白酶均有一定的抑制作用。

随着积雪草对胃溃疡的临床和药理作用的研究不段深入，近几年有许多研究证实积雪草对胃溃疡有治疗作用。如：发现积雪草提取物对乙醇胃黏膜具预防作用；对乙酸胃溃疡具有治疗作用；可以降低过氧化物(简称：MPO)、丙二醛(简称：MDA)、IL8的产生；可以增加胃黏膜細胞的存活率(陈宝雯，纪宝安，张学智，等.积雪草提取物对胃粘膜的保护作用及其机制探讨[J].中华消化杂志，1999，8(19)：4，246.)。通过加强黏膜的自身阻碍以及减少自由基的损害来抗小鼠乙醇所致的胃黏膜损害(Cheng CL，KooMWL.Effect of Centella asiaticaon ethanolinduced gastric mucosal lesionsin rats[J].Life Sci，2000，67(21)：2647.)；通过增加粘蛋白和糖蛋白的分泌，增强胃黏膜的屏障作用而发挥抗溃疡作用(Sairam K.Electrosp raycharacterization of selected medicinal plant extracts[J].Journal of Pharmaceutical and Bioadical，2001，39(2)：39.)。

2.3对纤维细胞合成的影响

谢举临等(谢举临，利天增，祁少海，等.积雪草苷对体外培养的成纤维细胞的作用[J].中山医科大学学报，2001，22(1)：41.)研究了积雪草苷对纤维细胞核DNA合成和胶原蛋白合成的影响，发现积雪草苷可以影响成纤维细胞的超微结构，表现为核分裂相较少，核仁变细小或缺失，使成纤维细胞的增殖变得不活跃，合成和分泌蛋白的活性能力减弱。积雪草苷还可以抑制成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成。

王瑞国等(王瑞国，王锦菊，于祥彬，等.积雪草苷对成纤维细胞DNA合成与胶原旦白合成的影响[J].福建中医学院学报，2001，11(2)：41.)发现积雪草苷在一定剂量范围内能促进小鼠成纤维细胞DNA合成和胶原蛋白合成，并呈剂量依赖关系。汤丽霞等(汤丽霞，杨光，谭家驹.积雪草酸抑制HSC2T6细胞Ⅰ型胶原蛋白表达[J].第四军医大学学报，2007，28(13)：1178.)也有积雪草酸抑制肝星状细胞HSC-T₆细胞Ⅰ型胶原蛋白表达的报道。潘姝等(潘姝，利天增，祁少海，等.积雪草苷对瘢痕成纤维细胞增殖与磷酸化Smad2和Smad7表达的影响[J].世界临床药物，2004，25(2)：99.)积雪草苷可抑制瘢痕的成纤维细胞从S期进入M期，减少成纤维细胞中的磷酸化Smad2的含量，增加细胞中Smad7的含量。此外，章庆国等(章庆国，王磊，吕洛，等.羟基积雪草甙对体外培养人成纤维细胞增殖及胶原合成的影响[J].江苏医药杂志，2003，29(2)：91.)，黄茂芳等(黄茂芳，陈明春，曾凡钦，等.3种中药有效成分对瘢痕成纤维细胞生长影响研究[J].中国热带医学，2007，7(1)：24.)研究积雪草提取物对人成纤维细胞增殖及胶原合成的影响，也得到了同样的结论。

2.4对皮肤系统的作用

积雪草甙能治疗皮肤溃疡，如顽固性创伤、皮肤结核、麻风等。对小鼠、豚鼠、兔肌肉注射或皮下植入可促进皮肤生长、局部白细胞增多、结缔组织血管网增生、粘液分泌增加、毛及尾的生长加速等。曾有报告用含积雪草0.25～1％醇提取物(含积雪草酸、积雪草甙)的乳霜剂(其中尚含胚胎的或年幼的牛、猪或羊皮肤、肝、脑的水醇提取物)治疗皮肤病，获良好效果。

张涛等(张涛，利天增，祁少海，等.积雪草苷对烧伤创面愈合中细胞周期蛋白、增殖细胞核抗原表达的影响[J].中华实验外科杂志，2005，22(1)：41.)报道了积雪草苷在烧伤创面愈合过程中能有效促进细胞周期蛋白B₁和增殖细胞核抗原的表达，使细胞周期的S+G₂期明显提前，从而加快细胞增殖，促进创面愈合。毛维翰等(毛维翰，方丽，吴伊旋.积雪苷治疗皮肤病的临床多中心实验[J].新药与临床床，1997，16(3)：133.)对积雪草苷作了治疗皮肤病的临床多中心开放性研究，结果发现，积雪草苷对皮肤溃疡治疗有效率为91.7％，对瘢痕疙瘩的有效率为67.9％，对局限性硬皮病的有效率为89％，对皮肤淀粉样变形的有效率为76％，对萎缩性硬化性苔藓等其他一些皮肤病也有较好的治疗作用。

此外还有用积雪草配成的烧伤膏用于治疗浅Ⅱ度及深Ⅱ度烧伤，发现患者疼痛缓解快、创面渗出少、愈合周期短、瘢痕形成率低(崔文华，刘光亮，李尧宾，等.积雪草治疗烧伤的止痛、防瘢痕疗效观察[J].中国临床康复，2002，6(6)：839.)。还有积雪草苷可直接作用于黑素细胞，抑制黑素合成，是一种无细胞毒性的皮肤脱色剂(刘栋，朱文元.积雪草苷对酪氨酸酶活性的抑制作用及对Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2004，3(1)：7.)。

2.5对肾的作用

复方积雪草在长期的临床实践中显示能改善慢性肾功能衰竭CRF患者症状，降低血肌酐、尿素氮及24h尿蛋白量(王永钧.治疗慢性肾功能衰竭的实践和体会[J].浙江中医学院学报，2003，27(2)：1.)。实验研究提示能抑制系膜细胞增殖，减少细胞外基质沉积，下调肾组织中Ⅳ型胶原、纤连蛋白(简称：FN)、层黏蛋白(简称：LN)以及转化生长因子β₁(简称：TGF-β₁)和基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达，降低血清和肾组织匀浆丙二醛含量，增加超氧化物歧化酶活性，抑制脂质过氧化(朱晓玲，王军，周大为，等.复方积雪草防治肾小球硬化的实验研究[J].中华肾脏病杂志，2001，17(3)：199.；朱晓玲，王永钧，王军，等.复方积雪草对肾小球系膜细胞及细胞外基质的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2002，3(11)：632.)；能够下调α-SMA、Vimentinm RNA表达水平(马丽娟，杨汝春，鲁盈.复方积雪草对UUO小鼠肾组织细胞转分化与肾纤维化的影响[J].浙江中医药大学学报，2006，30(6)：614.)；阻止系膜细胞由G₁期进入S期；下调佛波酯刺激的系膜细胞清道夫受体表达(陈洪宇，童孟立，王永钧，等.加减下瘀血汤对人肾小球系膜细胞清道夫受体表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2003，4(2)：67.)；抑制炎性细胞因子TNF-α上调所致的肾局部补体C₃过度产生(朱晓玲，王永钧，杨汝春，等.复方积雪草有效组分对人肾小管上皮细胞补体C₃表达的影响[J].中国中西医结合肾病杂志，2007，8(3)：131.)。

王军等(王军，程晓霞，杨汝春，等.复方积雪草对局灶硬化性肾小球肾炎模型小鼠肾组织内细胞因子表达的调控作用[J].中国临床药理学与治疗学，2003，8(6)：638.)用基因表达谱芯片检测表明：复方积雪草可抑制PDGF-α、PDGF-β、PDGF受体、VEGFm RNA的表达；能抑制IL-9、IL-7R₂、MIP等因子的mRNA的表达；经复方积雪草刺激后，肾组织中癌基因c-Myc，Jun表达被抑制；覃志成等(覃志成，陈洪宇.复方积雪草对高IgA血清诱导小鼠肾足细胞表达VEGF的影响[J].中国中医药科技，2006，13(5)：307.)研究发现复方积雪草可以明显减低高IgA血清刺激足细胞表达的VEGFmR2NA；张边江等(张边江，黄怀鹏，徐华洲，等.积雪草总苷对大鼠系膜细胞游离钙的影响[J].中国中医基础医学杂志，2006，12(1)：22.)报道了积雪草提取物对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激下的大鼠肾小球系膜细胞(简称：MC)增殖和Ca²⁺水平有抑制和降低作用。

2.6抗肿瘤作用

Bahu T.D等(Babu T.D，Kuttan G，Padikkala J.Cytotoxic and antitumour p roperties ofcertain taxa of Umbelliferae with special refernce to Centella asiatica(L.)Urban[J].Journal ofEthnopharmacology，1995，48(1)：53.)报道积雪草纯化物体外对肿瘤细胞增殖有抑制的作用，并显示一定的剂量依赖关系。同时他们还发现，口服积雪草提取物或经层析法获得的积雪草纯化物，能抑制小鼠腹水瘤的生长并延长这些耐受小鼠的寿命，而且还发现它对人体正常的淋巴细胞没有毒副作用。

1996年有人报道了积雪草具有抗癌作用，之后陆续出现了很多积雪草提取物抗肿瘤作用的研究报道，如：积雪草的醇提取物有抗艾滋病毒逆转录酶的活性(何明芳，孟正木.沃联群积雪草化学成分的研究[J].中国药科大学学报，2000，31(2)：91.)；积雪草苷对体外培养的L₉₂₉细胞和CNE细胞的增殖有抑制作用，对移植S₁₈₀细胞的增殖也有抑制作用，同时能提高荷S₁₈₀小鼠的存活时间(王锦菊，王瑞国，王宝奎，等.积雪草甙抗肿瘤作用的初步实验研究[J].福建中医药，2001，32(4)：39.)；积雪草苷对B₁₆细胞的生长有丝分裂过程有明显抑制作用，能够诱导细胞凋亡或死亡，提示积雪甙有抗黑素瘤细胞生长作用(桑红，倪容之，沈献平，等，积雪甙对黑素瘤细胞生长影响的实验研究[J].中华皮肤科杂志，2004，37(2)：71.)；积雪草苷可诱导肿瘤细胞凋亡并与长舂新碱显示协同作用，有可能作为生化调节剂应用于肿瘤化疗(黄云虹，张胜华，甄瑞贤，等.积雪草苷诱导肿瘤细胞凋亡及增强长舂新碱的抗肿瘤作用[J].癌症，2004，23(12)：1599.)。

积雪草苷对宫颈癌Hela细胞的生长有显著抑制作用并且呈浓度和时间依赖性；可能通过抑制Survivin表达，促进Capase-3表达而在诱导宫颈癌细胞凋亡过程中发挥重要作用(孙盛梅，李佩玲，吴雅冬，等.积雪草甙诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其机制的探讨[J].黑龙江医药科学，2007，30(2)：42.)。

2.7对心血管系统作用

醇提取物能松弛大鼠离体回肠。甙部分能降低家兔及大鼠离体回肠的张力及收缩幅度，并能轻度抑制乙酰胆碱的作用。对麻醉犬，静脉注射可轻度兴奋呼吸，心率变慢及中度的降低血压，后二者不能被阿托品阻断。有报道积雪甙对麻风病有治疗作用。

有人报道(Cui FG The application of asiatic acid and its derivatives in treatment of cardiocerebrovascular disease[P].CN：1582946，2005-02-23.)将积雪草总苷用于制备防治冠心病、心肌梗塞、脑血栓形成、脑梗塞等心血管疾病药物中的新用途。

周建燮等(周建燮，蒋宏伟，衣蕾，等.积雪草甙防治PCI术后再狭窄的实验研究[J].西安交通大学学报(医学版)，2005，26(5)：491.)也有积雪草苷促进内皮细胞生长、内膜修复的作用，初步提示其具有治疗PCI术后再狭窄的作用的报道。

Cesarone，M.R(Cesarone，M.R.Flightmicroangiopathy inmedium to long-distance fights：Prevention of eedema and micro-circulation alterationswith total triterpenic fraction of Centellaasiatica[J].Angiology，2001，52(S2)：33.)研究发现，积雪草的三萜类成分可以增加患者的毛细血管通透性，改善微循环，改善结缔组织血管壁功能，减轻踝部水肿，可以治疗静脉高血压。

Incandela L(Incandela L.Total triterpenic fraction of Centellaasiatica in chronic venous insufficiency and in high-perfusion microangiopathy[J].Angiology，2001，52(S2)：9.)研究发现，积雪草的三萜类成分具有调节静脉管壁成纤维细胞的作用，能增加胶原蛋白和组织蛋白的合成，刺激静脉壁周围胶原的重塑，可以用于治疗静脉功能障碍。

李桂桂等(L IGui-gui，B IAN Guang-xing，REN Jian-ping，et al.Protective effectofmadecassoside against reperfusion injury after regional ischemia in rabbit heart in vivo[J].ActaPharmaceutica Sinica 2007，42(5)：475.)对兔心肌缺血再灌注损伤(简称：MIR I)模型研究，发现羟基积雪草苷(简称：MC)可明显减小左心及全心心肌梗塞面积；对心电图有一定的改善作用；并能明显改善心功能，降低LDH及CK的升高程度。并且，MC可明显降低CRP升高程度；升高SOD酶活性，减少MDA含量；可明显抑制MIR I引起的心肌细胞凋亡，使Bcl-2表达上调。MC对心肌缺血再灌注损伤具有明显的预防和保护作用，作用机制可能与抗脂质过氧化物产生、提高SOD活力、抗炎以及抗心肌细胞凋亡有关。

2.8抗病原微生物作用

积雪草水提物有抗菌和抗病毒作用，对金黄色葡萄球菌和变形杆菌有抑菌作用，对绿脓杆菌、大肠杆菌、副大肠杆菌、宋氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌和炭疽杆菌均无抑菌作用(赵宇新，李曼玲，冯伟红，等.积雪草的研究进展[J].中国中医药信息杂志，2002，9(8)：81.)。

张胜华等(张胜华，余兰香.积雪草苷的抗菌作用及对小鼠实验性泌尿系统感染的治疗作用[J].中国新药杂志，2006，15(20)：1746.)报道了积雪草苷对37株标准及临床分离菌株显示较强抗菌活性，尤其对各种耐药细菌，包括耐甲氧西林的金葡球菌(简称：MRSA)、表葡菌(简称：MRSE)，耐5种氨基糖苷类抗生素、产钝化酶的粪肠球菌、产β-内酰胺酶的大肠埃希菌。肺炎克雷伯杆菌和醋酸钙不动杆菌，以及耐哌拉西林的铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度值与三金片相近。积雪草苷对小鼠膀胱上行性肾感染大肠埃希菌26的清除细菌作用较强，可知积雪草苷具有良好的体内外抗菌活性，尤其对于泌尿系统感染。

积雪草幼芽的水提取物也有抗菌作用。积雪草甙能治疗麻风，有人认为其作用为溶解细菌的蜡膜，从而被其他药物或机体防御机能所消灭。

2.9增强记忆的作用

孙峰等(孙峰，刘颖菊，肖小华，等.羟基积雪草甙对慢性铝中毒痴呆小鼠的治疗作用[J].中国老年学杂志，2006，26(10)：1363.)通过对慢性铝中毒痴呆小鼠模型的研究，羟基积雪草甙可明显减轻铝过负荷所致的海马神经元损伤，明显缩短小鼠寻找平台潜伏期，降低小鼠脑组织中MAO-B活性，对慢性铝中毒小鼠的海马神经元具有保护作用，从而改善学习记忆能力，产生对拟痴呆模型的治疗作用。

陈明亮等(陈明亮，房娜，葛振英，等.复方积雪草对阿尔茨海默病大鼠学习记忆的影响[J].河南外科学杂志，2007，13(4)：6.)用复方积雪草连续灌胃30d阿尔茨海默病(简称：AD)模型大鼠，做跳台实验和Y迷宫实验发现治疗组学习记忆能力显著升高。

2.10对肝的作用

明志君等(明志君，刘世增，曹莉，等.积雪草总苷抗DMN诱导大鼠肝纤维化的作用[J].中国中西医结合杂志，2004，24(8)：731.)用二甲基亚硝氨(简称：DMN)制备的大鼠肝纤维化模型研究积雪草总苷抗实验性大鼠肝纤维化的作用，发现积雪草总苷能改善肝功能，并且肝组织病理学检查显示具有抗肝纤维化作用，可知积雪草总苷对DMN诱导的大鼠慢性肝纤维化具有良好的治疗作用。抑制肝纤维化可以通过抑制肝星状细胞(简称：HSC)的增殖，促进HSC细胞的凋亡。

汤丽霞等(汤丽霞，杨光，谭家驹.积雪草酸抑制HSC₂T₆细胞Ⅰ型胶原蛋白表达[J].第四军医大学学报，2007，28(13)：1178.)的研究表明积雪草酸能抑制活化的HSC-T₆细胞的Ⅰ型胶原蛋白表达水平。马葵芬等(马葵芬，张相宜，齐罗扬，等.三萜类化合物对化学损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用[J].浙江大学学报(医学版)，2007，36(3)：247.)也报道了积雪草酸对化学损伤原代培养大鼠肝细胞有保护作用。

2.11其他作用

除以上综述的药理活性之外还有许多作用如：调节免疫和降低血糖的作用(王雪松，郑芸，方积年.积雪草中降血糖多糖的研究[J].中国药学杂志，2005，40(22)：1697.)，抗炎作用(明志君，孙萌.积雪草总苷抗炎作用的实验研究[J].中国中医药科技，2002，9(1)：62.)，抗乳腺增生的作用(明志君，朱路佳，薛洁，等.积雪草总苷抗实验性大鼠乳腺增生[J].中国新药与临床杂志，2004，23(8)：510.)，降温作用(章卓，万敬员，罗福玲，等.羟基积雪草苷与积雪草苷对LPS诱导大鼠发热模型的影响[J].时珍国医国药，2007，18(8)：1799.)等。

积雪草为中国常用中药，近20年来对积雪草的研究主要集中在它的化学成分及药理作用两方面。在提高实验技能和更新实验方法、加快对其有效成分的研究的同时，更要注药理活性的检验和临床实验，以便更好地利用积雪草的生物活性，促进积雪草在多领域的应用，以便更合理地综合利用积雪草资源。

3、毒理学

醇提取物对大鼠腹腔注射的半数致死量为1.93g/kg。

甙部分毒性较小，大鼠腹腔注射2g/kg也不引起死亡。

积雪草甙对小鼠、兔皮下注射0.04～0.05g/kg能产生中毒症状；0.2～0.25g/kg则增加出血时间，导致出血。口服1g/kg对小鼠、兔皆能耐受。

4、临床应用

(1)用于止痛：取积雪草晒干研细，每日1～1.5钱，3次分服。治疗脑、背及腰部外伤性疼痛42例，27例止痛，14例好转，1例无效。

(2)治疗传染性肝炎：取鲜积雪草4两，加水500ml，浓煎成250ml，趁热加入冰糖2两溶化，分2次空腹服，7天为一疗程。治疗10例，服药4天黄疸消退、食欲改善、恶心呕吐消失者3例，服药1同黄疸消退、消化道症状好转、胃纳增进者5例。肝肿大于服药二疗程消退2例，三疗程消退5例，四疗程消退3例。

(3)处理流行性脑脊髓膜炎：带菌者取积雪草(干)1000g，水煎2次，合并滤液，浓缩至1000ml，加防腐剂，pH调至6左右。每服10ml，5岁以下儿童减半，每日3次，空腹服，连服3天。处理30例流脑带菌者，3天后连续3次作鼻咽分泌物采样培养，结果转阴24例，较磺胺噻唑对照组的转阴率高。

5、化妆品/护肤品领域的应用

积雪草可以紧致表皮与真皮连接部分，能使皮肤变柔软，有助于解决皮肤松弛现象(尤其产后妈妈)，是皮肤光滑有弹性；帮助促进真皮层中胶原蛋白形成，使纤维蛋白再生，重新连接起来，从根本上消除妈妈纹，使肌肤达到紧致光滑的效果。还可帮助受损的组织愈合及紧实肌肤。既能促进表皮与真皮之间的密切连接，又能抑制脂肪细胞的增加，防止皮肤水肿、出现肥胖。在化妆品配方列表里，它可能叫“积雪草苷”或“积雪草酸”。

很多美容成分在被现代科学发现前，已经在传统草药界占据强势地位，貌不惊人的积雪草很早以前就被证明在处理皮肤疾病上有良好功效。《中药大辞典》记载：“落得打(积雪草)，药性苦、寒，入脾经，其功效为活血、消肿、止痛，并有清热解毒、利水等用途。”而在印度，它也是阿育吠陀医学的重要组成部分，涂抹在皲裂、刮伤、手术创伤、烧伤的伤口上，能加速伤口愈合。在斯里兰卡，它还被用来改善早期的静脉曲张症状，并且积雪草对抗皮肤炎症的效果很早之前也被发现了，是治疗皮肤湿疹的重要草药。

而现在，积雪草更成为护肤品中的标志性成分，首先，积雪草提取物中丝毫不含咖啡因或其他刺激性成分，这让它可以适用于几乎任何皮肤类型和皮肤状况(部分红血丝皮肤或者敏感性皮肤或特干性皮肤是不能接受任何细小的外界刺激)。在功能上，它能促进血液循环；改善痤疮性皮肤；防止色素沉淀；促进皮肤的胶原蛋白生成、改善皮肤弹性，延缓肌肤老化；紫外线照射后的晒后修复都被证实有显著效果，因此在不同类型的美容产品中，都能见到积雪草的身影。

尽管在中国、印度、巴基斯坦、斯里兰卡、马达加斯加和南非都有积雪草生长，但护肤品配方中，源自斯里兰卡和南非的积雪草提取物被公认功效最佳。

积雪草为《中国药典》收载的常用中药，为伞形科积雪草属植物积雪草(Centella asiaticaL.Urban.)的干燥全草，始载于《神农本草经》，主要分布于南方地区，性寒、味苦、辛，具有清热利湿，解毒消肿之功效，在中国已经有两千多年的药用历史。临床上多用于治疗跌打损伤、皮肤病等。

(三)一种积雪草提取物

【中文名称】积雪草总甙(Asiaticosides)，别名：亚细亚皂甙；

【分子式、分子量及结构式】C₄₈H₇₈O₁，959.12；

【熔点】：235℃～238℃；

【CAS号】16830-15-2；

【溶解度】不溶于水，溶于酒精和吡啶；

【产品来源】伞形科雷公根属植物积雪草的全草，经提取制得的三萜皂甙。

【化学成分】该产品含有多种三萜类，其中包含α-香树脂醇结构。主要成分为积雪草甙、积雪草酸和羟基积雪草酸。

【产品性状】外观棕黄色至白色精细粉末，口感微苦。

【产品规格】积雪草单甙10％～30％～40～90％％；积雪草总甙10％～80％HPLC；

【用药剂量】积雪草的一般剂量为每天3次，每次20～40mg标准含40％积雪草甙的提取物。

含超过70％总三萜类化合物的标准提取物一般每次服用60mg，每天1至2次。

【应用剂型】栓剂、洗剂、注射液、片剂、胶囊等。

【产品保存】置于阴凉干燥、避光，避高温处。

(四)常用中草药有效成分的提取分离方法

1、溶剂提取法

(1)原理：溶剂提取法是根据中草药中各种成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法。当溶剂加到中草药原料(需适当粉碎)中时，溶剂由于扩散、渗透作用逐渐通过细胞壁透入到细胞内，溶解了可溶性物质，而造成细胞内外的浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入药材组织细胞中，如此多次往返，直至细胞内外溶液浓度达到动态平衡时，将此饱和溶液滤出，继续多次加入新溶剂，就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。中草药成分在溶剂中的溶解度直接与溶剂性质有关。溶剂可分为亲水性有机溶剂及亲脂性有机溶剂，被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同。有机化合物分子结构中亲水性基团多，其极性大而疏于油；有的亲水性基团少，其极性小而疏于水。各类溶剂的性质，同样也与其分子结构有关。这样，发明人就可以通过对中草药成分结构分析，去估计它们的此类性质和选用的溶剂。总的说来，只要中草药成分的亲水性和亲脂性与溶剂的此项性质相当，就会在其中有较大的溶解度，即所谓“相似相溶”的规律。这是选择适当溶剂自中草药中提取所需要成分的依据之一。

(2)溶剂的选择：运用溶剂提取法的关键，是选择适当的溶剂。溶剂选择适当，就可以比较顺利地将需要的成分提取出来。选择溶剂要注意以下三点：①溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等。常见的提取溶剂可分为以下三类：

①水：水是一种强的极性溶剂。中草药中亲水性的成分，如无机盐、糖类、分子不太大的多糖类、鞣质、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐及苷类等都能被水溶出。为了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及碱水作为提取溶剂。

②亲水性的有机溶剂：也就是一般所说的与水能混溶的有机溶剂，如乙醇(又称：酒精)、甲醇(又称：木精)、丙酮等，以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好，对中草药细胞的穿透能力较强。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。难溶于水的亲脂性成分，在乙醇中的溶解度也较大。还可以根据提取物质的性质，采用不同浓度的乙醇进行提取。用乙醇提取比用水量较少，提取时间短，溶解出的水溶性杂质也少。乙醇为有机溶剂，虽易燃，但毒性小，价格便宜，来源方便，有一定设备即可回收反复使用，而且乙醇的提取液不易发霉变质。由于这些原因，用乙醇提取的方法是历来最常用的方法之一。甲醇的性质和乙醇相似，沸点较低(64℃)，但有毒性，使用时应注意。

③亲脂性的有机溶剂：也就是一般所说的与水不能混溶的有机溶剂，如石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。这些溶剂的选择性能强，不能或不容易提出亲水性杂质。但这类溶剂挥发性大，多易燃(氯仿除外)，一般有毒，价格较贵，设备要求较高，且它们透入植物组织的能力较弱，往往需要长时间反复提取才能提取完全。如果药材中含有较多的水分，用这类溶剂就很难浸出其有效成分，因此，大量提取中草药原料时，直接应用这类溶剂有一定的局限性。

(3)提取方法：用溶剂提取中草药成分，常用浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法及连续回流提取法等。同时，原料的粉碎度、提取时间、提取温度、设备条件等因素也都能影响提取效率，必须加以考虑。

①浸渍提取法(简称：浸渍法)：浸渍法系将中草药粉末或碎块装入适当的容器中，加入适宜的溶剂(如乙醇、稀醇或水)，浸渍药材以溶出其中成分的方法。本法比较简单易行，但浸出率较差，且如用水为溶剂，其提取液易发霉变质，须注意加入适当的防腐剂。

②渗漉提取法(简称：渗漉法)：渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中，不断添加新溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗漉器下部流出浸出液的一种浸出方法。当溶剂渗进药粉、溶出成分比重加大而向下移动时，上层的溶液或稀浸液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行，故浸出效果优于浸渍法。但应控制流速，在渗渡过程中随时自药面上补充新溶剂，使药材中有效成分充分浸出为止。或当渗滴液颜色极浅或渗涌液的体积相当于原药材重的10倍时，便可认为基本上已提取完全。在大量生产中常将收集的稀浸出液作为另一批新原料的溶剂之用。

③煎煮提取法(简称：煎煮法)：煎煮法是中国最早使用的传统的浸出方法。所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿，不宜用铁锅，以免药液变色。直火加热时最好时常搅拌，以免局部药材受热太高，容易焦糊。有蒸汽加热设备的药厂，多采用大反应锅、大铜锅、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加热。还可将数个煎煮器通过管道互相连接，进行连续煎浸。

④加热回流提取法：应用有机溶剂加热提取，需采用回流加热装置，以免溶剂挥发损失。小量操作时，可在圆底烧瓶上连接回流冷凝器。瓶内装药材约为容量的20％～60％，溶剂浸过药材表面约1～2cm。在水浴中加热回流，一般保持沸腾3～6小时，放冷过滤，再在药渣中加溶剂，作第二、三次加热回流分别约半小时，或至基本提尽有效成分为止。此法提取效率较冷浸法高，大量生产中多采用连续提取法。

⑤连续回流提取法：应用挥发性有机溶剂提取中草药有效成分，不论小型实验或大型生产，均以连续提取法为好，而且需用溶剂量较少，提取成分也较完全。实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器。连续提取法，一般需数小时才能提取完全。提取成分受热时间较长，遇热不稳定易变化的成分不宜采用此法。

2、分离和纯化方法

上述提取法所得到的中草药提取液或提取物仍然是混合物，需进一步除去杂质，分离并进行精制。

(1)溶剂分离法：一般是将上述总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，由低极性到高极性分步进行提取分离。水浸膏或乙醇浸膏常为胶状物，难以均匀分散在低极性溶剂中，故不能提取完全，可拌入适量惰性填充剂，如硅藻土或纤维粉等，然后低温或自然干燥，粉碎后，再以选用溶剂依次提取，使总提取物中各组成成分，依其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。利用中草药化学成分，在不同极性溶剂中的溶解度进行分离纯化，是最常用的方法。

(2)溶剂萃取法

①萃取法：溶剂提取萃取法又简称萃取法，是利用混合物中各成分在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的方法。萃取时如果各成分在溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高；如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行萃取，如果有效成分是偏于亲水性的物质，在亲脂性溶剂中难溶解，就需要改用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。还可以在氯仿、乙醚中加入适量乙醇或甲醇以增大其亲水性。提取黄酮类成分时，多用乙酸乙脂和水萃取。提取亲水性强的皂苷则多选用正丁醇、异戊醇和水作萃取。不过，一般有机溶剂亲水性越大，与水作萃取的效果就越不好，因为能使较多的亲水性杂质伴随而出，对有效成分进一步精制影响很大。

②逆流连续萃取法：是一种连续的溶剂萃取法。其装置可具有一根、数根或更多的萃取管。管内用小瓷圈或小的不锈钢丝圈填充，以增加溶剂萃取时的接触面。如果一种中草药的水浸液需要用比水轻的苯、乙酸乙酯等进行萃取，则需将水提浓缩液装在萃取管内，而苯、乙酸乙酯贮于高位容器内。萃取是否完全，可取样品用薄层层析、纸层析及显色反应或沉淀反应进行检查。

③逆流分配法：逆流分配法又称逆流分溶法、逆流分布法或反流分布法。逆流分配法与溶剂逆流萃取法原理一致，但加样量一定，并不断在一定容量的溶剂中，经多次移位萃取分配而达到混合物的分离。

④液滴逆流分配法：液滴逆流分配法又称液滴逆流层析法。为近年来在逆流分配法基础上改进的溶剂萃取法。对溶剂系统的选择基本同逆流分配法，但要求能在短时间内分离成，并可生成有效的液滴。由于移动相形成液滴，在细的分配萃取管中与固定相有效地接触、摩擦不断形成新的表面，促进溶质在溶剂中的分配，故其分离效果往往比逆流分配法好。

(3)大孔吸附树脂法：大孔吸附树脂是20世纪60年代发展起来的一类有机高聚物吸附剂，具有良好的吸附性能，近十余年来逐渐被应用于中草药化学成分的提取分离和中药新药的开发研制。

大孔吸附树脂为吸附和筛选原理相结合的分离材料。它的吸附性是由于范德华引力或生成氢键的结果。筛选原理是由于其本身多孔性结构所决定。由于吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而分开。这使得有机化合物尤其是水溶性化合物的提纯得以大大简化。大孔吸附树脂的骨架由苯乙烯和二乙烯苯缩聚而生成，由于改性剂的加入，大孔吸附树脂的极性发生改变，按照树脂的表面性质，吸附树脂一般分为非极性、中极性和极性三类。

非极性吸附树脂是由偶极矩很小的单体聚合物制得的不带任何功能基的吸附树脂。典型的例子是苯乙烯-二乙烯苯体系的吸附树脂，如D101、XAD-1、DiaionHP-10大孔吸附树脂。

中极性吸附树脂指含酯基的吸附树脂，如丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯与双甲基丙烯酸酯等交联的一类共聚物。它是在非极性大孔吸附树脂的基础上，加入丙烯酸甲酯或丙烯腈缩聚而成，如中国中国经常使用的AB-8大孔吸附树脂。

极性吸附树脂是指含酰胺基、腈基、酚羟基等含氮、氧、硫极性功能基的吸附树脂。此外，有时把含氮、氧、硫等配体基团的离子交换树脂称作强极性吸附树脂，强极性吸附树脂与离子交换树脂的界限很难区别。极性大孔吸附树脂可以由甲基丙烯酸甲酯、丙烯酰胺或亚砜类缩聚而成，如日本三菱化工的Diaion HP 2MG、美国Rohm-hass公司的XAD-10，XAD-9大孔吸附树脂。

与活性炭和其它吸附剂相比，大孔吸附树脂具有很多的优点，如对某种物质的吸附选择性较高；物理化学稳定性和机械强度较好；品种规格较多，可根据需要改变树脂物理或化学结构；吸附树脂一般为球状颗粒，流体阻力较小等等。因而被广泛应用于化工、医药等领域，近年来关于大孔吸附树脂在天然产物提取分离中的应用研究报道越来越多。大孔吸附树脂对中草药化学成分如生物碱、黄酮、皂苷、香豆素及其他一些苷类成分都有一定的吸附作用。对糖的吸附能力很差，对色素的吸附能力较强。

(4)沉淀法：是在中草药提取液中加入某些试剂使产生沉淀，以获得有效成分或除去杂质的方法。如铅盐沉淀法：铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一。由于醋酸铅及碱式醋酸铅在水及醇溶液中，能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀，故可利用这种性质使有效成分与杂质分离。然后将铅盐沉淀悬浮于新溶剂中，通以硫化氢气体，使分解并转为不溶性硫化铅而沉淀。

(5)盐析法：盐析法是在中草药的水提液中，加入无机盐至一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。常用作盐析的无机盐有氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。

(6)透析法：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。反之也可将大分子的杂质留在半透膜内，而将小分子的物质通过半透膜进入膜外溶液中，而加以分离精制。

(7)结晶、重结晶和分步结晶法：鉴定中草药化学成分，研究其化学结构，必须首先将中草药成分制备成单体纯品。在常温下，物质本身性质是液体的化合物，可分别用分馏法或层析法进行分离精制。一般地说，中草药化学成分在常温下多半是固体的物质，都具有结晶体的通性，可以根据溶解度的不同用结晶法来达到分离精制的目的。

3、常用干燥方法

(1)真空干燥：是基于这样一基本原理：水的饱和蒸气压与温度紧密相关，在真空状态下，水的沸点降低，即在真空下操作也就是在低温下操作，可避免在高温下营养成分如维生素等的破坏，同时提高了干燥速度。真空干燥在食品、制药、化工等行业有广泛的应用，中国也开发和引进了各种真空干燥设备，其结构形式多种多样。常用的形式主要有箱式真空干燥器、双锥式真空干燥器、带式真空干燥器等。这些传统的真空干燥装置主要采用热风，蒸汽或电等加热，利用热传导、对流或辐射原理将热量从外部传到物料内部。真空干燥具有干燥温度低，干燥室内相对缺氧，可避免脂肪氧化，色素褐变等一系列优点，适合于热敏感性食品物料的干燥，此外设备成本、干燥费用也相对较低。

(2)喷雾干燥：是流化技术用于液态物料干燥的一种方法。因是瞬间干燥，特别适用于热敏性物料，故所得产品质量好，保持原来的色香味，且易溶解。利用喷雾干燥来制备微囊的研究正在进行，它是将心料混悬在衣料的溶液中，经离心喷雾器将其喷入热气流中，所得的产品是衣料包心料而成的微囊，这种微囊粉末可采用于直接压片，也可制备胶囊剂、糖浆剂或混悬剂。

(3)冷冻干燥：是将干燥液体物料冷冻成固体，在低温减压条件下利用冰的升华性能，使物料低温脱水而达到干燥的一种方法。由于物料在高度真空及低温条件下干燥，故对某些极不耐热物品的干燥很适合。王大林报道了一种喷雾通气冻干新技术，是利用冷的空气或氮气作为介质，迅速流经冻结物使水升华，喷雾冻干制得的产品微粒小、干燥快、时间短、均匀、流动性好，并具良好的速溶性。近年来，对膏状物料和粘稠物料干燥的研究取得了较大进展，流态化技术、喷射技术、惰性载体技术，则是在此研究基础上发展起来的。旋转闪蒸干燥机、热喷射气流干燥机、惰性载体干燥机均适合热敏性物料和膏状物料的干燥。这些新的研究成果用于中药制剂生产，将大大改善中药加工的技术水平，提高生产效率。

(4)远红外加热干燥法：是一项新的干燥技术，其干燥原理是将电能转变为远红外辐射，从而被药材的分子吸收，产生共振，引起分子和原子的振动和转动，导致物体变热，经过热扩散、蒸发和化学变化，最终达到干燥的目的。远红外干燥可节省电能20％～50％，效果较好。

(5)微波干燥法：是一项20世纪60年代迅速发展起来的新技术，微波干燥实际上是通过感应加热和介质加热，使被干燥物中的水分和脂肪不同程度地吸收微波能量，并把它转变为热量从而达到干燥的目的。微波干燥可杀灭微生物和霉菌，并具有消毒作用。目前中国生产的微波加热成套设备有915mhz和2450mhz两个频率。

4、超临界CO₂萃取方法

(1)有关动、植物成分的提取方法有：水煮法、水媒分离法、分子蒸馏和减压蒸馏法、金属加合法、萃取结晶法、分盘冷冻压榨法和有机溶剂法等。

采用水煮加热法，因加热时间长、温度高，易使对热不稳定的挥发成分发生变化，如一些不饱和脂肪酸的氧化。水媒分离法，此分离法的明显优点是消除了有机溶剂法造成的高费用和公害，但是这种技术的缺点是得到的提取物的纯度或级别不如有机溶剂分离法高。分子蒸馏和减压蒸馏法为减少热变性，需用尿素加合物等方法来除去大部分提取物，在得到的产品中必须将其除去；虽然可得到较纯的提取物，但需几步才能达到目标，较费时、费力，增加了生产成本。金属加合法分离需要较低的低温处理，最后还要设法去除金属离子，清除不尽还会造成金属离子污染。萃取结晶法得到提取物纯度较高，在较低的温度下进行，能防止提取物的氧化，但时间较长，不太适用于大规模的工业化生产。分盘冷冻压榨法缺点是，安放盘架和液压机的冷冻室需要数千平方米的面积和庞大的冷却系统，大的设施需要多人操作，劳动强度高，分离速度缓慢，效率低，不能连续操作。有机溶剂法是采用石油醚或乙醚有机溶剂在水浴上加热情况下，进行回流循环提取；由于所采用的有机溶剂如石油醚或乙醚等均为一种低沸点物质，易燃易爆，同时，有机溶剂的使用一方面会污染环境，另一方面有机溶剂有可能在提取物中有残留，会影响提取物在医药上的进一步应用。

(2)有关动、植物成分的超临界CO₂萃取方法：一种流体当处在其临界温度和压力状态时，被称为超临界流体。由于超临界流体的密度接近于液体，具有与液体溶剂相当的萃取能力。又具有与气体相当的低粘度，扩散能力比液体要大100倍，因而具有较高的传质性。采用超临界萃取的时候，利用超临界流体的这些性质，使之与待分离的物质相接触穿透基体，从中萃取出目标物质。然后利用降压和/或升温的办法降低其密度，从而降低溶质在其中的溶解度，使被萃取物与溶剂分离。因为不同的物质在相同的萃取条件下溶解度是不同的，因而有可能借助这种差异将它们进一步分开。超临界流体萃取常常选用CO₂等临界温度低且化学惰性的物质为萃取剂，它特别适用于热敏物质和易氧化物质的分离，因此非常适用于对于动物有效成分的提取分离。因此，本发明采取该方法，能够制备高纯度的提取物。

超临界CO₂萃取方法是这样提取的：把干燥的提取物的粗粉放在超临界萃取设备中用CO₂进行萃取，减压后即得提取物，室温条件下呈浅黄色透明状；提取物中有效成分的纯度在40％以上，优于其他提取方法。

超临界CO₂萃取提取物的方法包括如下步骤：

(1)将干燥的提取物粉碎至10～30目后，置于超临界萃取釜中，连续地通入超临界状态下的CO₂进行萃取，优选的条件一般是：CO₂流量10～55kg/h·kg原料、压力5～50Mpa、温度15～75℃、时间0.5～6h；进一步优选的条件一般是：CO₂流量45kg/h·kg原料、压力35Mpa、温度50℃、时间1h；

(2)将萃取了提取物的CO₂减压至1～12MPa，即可获得在室温条件下提取物，提取物中有效成分的纯度在40％以上，萃取物的理化性状和纯度都优于其他提取方法。

萃取条件的选择是通过以下办法实现的：首先选定四因素、三水平，根据正交设计方法，按L9(3⁴)交设计表安排实验(正交实验设计安排参考郭祖超主编的《医学统计学》，人民军医出版社，1999年第一版)。从正交实验结果，分析得到萃取工艺条件。

对超临界CO₂萃取的提取物进行甲酯化后，进行气相色谱-质谱分析。

超临界CO₂萃取提取物的制备方法不使用有机溶剂等物质，不会污染环境，也不存在有害溶剂残留等问题，而且操作简便、萃取时间短、产品纯度高，使用的CO₂廉价而且可重复循环使用，工业生产成本低廉。

(五)脑卒中治疗的研究概况

1、概述

脑卒中(Stroke)是脑中风的学名，亦称“中风”。“中”为打击之意，又为矢石之中；“风”善行而数变，又如暴风疾至，古人将此类疾病症状与所观察的自然现象联系起来，用比喻的方法为疾病命名，中风就此得名。

脑中风是严重危害人类健康和生命安全的常见的难治性疾病，祖国医学将其列为“风、痨、臌、膈”四大疑难病之首，存在着明显三高(发病率高、致残率高、死亡率高)现象。据中国近年的统计表明，脑卒中在死因顺位中居第2位，每年发生脑中风病人达200万，发病率高达120/10万。幸免死亡的患者大多留有不同程度的后遗症，现幸存中风病人700万，其中450万病人不同程度丧失劳动力和生活不能自理，致残率高达75％，重度致残率占40％以上。中国每年中风病人死亡120万。已得过脑中风的患者，还易再复发，每复发一次，加重一次。所以，更需要采取有效措施预防复发。

脑中风给人类健康和生命造成极大威胁，给患者带来极大痛苦，家庭及社会负担沉重。因此，充分认识脑中风的严重性，提高脑中风的治疗与预防水平、降低脑中风的发病率，致残率和死亡率是当务之急。

2、脑卒中正确的应急措施

掌握正确的应急措施，对减少脑卒中合并症，维持生命体征，防止病情加重，争取时间，进一步救治是十分重要的。

发生脑卒中后采取的应急措施如下：

①保持镇静，给病人以精神安慰。

②初步判断为脑卒中后，应使病人仰卧，头肩部稍垫高，头偏向一侧，防止痰液或呕吐物回流吸入气管造成窒息。如果病人口鼻中有呕吐物阻塞，应设法抠出，保持呼吸道通畅。

③使病人平卧，解开病人领口纽扣、领带、裤带、胸罩，如有假牙也应取出。可不放枕头或将枕头垫在肩膀后面，使下颌略微仰起。

④如果病人是清醒的，要注意安慰病人，缓解其紧张情绪。宜保持镇静，切勿慌乱，不要悲哭或呼唤病人，避免造成病人的心理压力。

⑤打电话给急救中心或者医院神经专科，寻求帮助，必要时不要放下电话，询问并听从医生指导进行处理。

⑥及时清除口腔内异物，如呕吐物、假牙等，保持呼吸道通畅。

⑦避光。可将窗帘拉上，避免强光刺激。

⑧有条件者可吸氧。

⑨可以做一些简单的检查。如用手电筒观察病人双侧瞳孔是否等大等圆；如有可能应测量血压，如超过20千帕(150毫米汞柱，收缩压)，可以给病人舌下含服硝苯地平(心痛定)一片(10毫克)。

⑩有条件者呼叫救护车来运送病人。若自行运搬运病人时正确的方法是：2～3人同时用力，一人托住头部和肩部，使头部不要受到震动或过分扭曲，另一人托住病人的背部和臀部，如果还有一人，则要托起病人腰部腿，三人一起用力，平抬病人移至硬木板床或担架上，不搬运时把病人扶直坐起，切勿抱、拖、背、扛病人。

(11)在没有医生明确诊断之前，切勿擅自作主给病用止血剂、安宫牛黄丸或其他药物。

3、脑卒中的分类、临床症状与治疗

脑卒中是一种突然起病的脑血液循环障碍性疾病，又叫脑血管意外；是指脑血管疾病的病人，因各种诱发因素引起脑内动脉狭窄、闭塞或破裂，而造成的急性脑血液循环障碍。临床上表现为一过性或永久性脑功能障碍的症状和体征。

(1)脑卒中的分类

脑卒中分为缺血性脑卒中、出血性脑卒中两类。

缺血性脑卒中(缺血性脑中风)包括：短暂性脑缺血发作、动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞(脑血栓、脑栓塞、脑梗塞、多发性脑梗塞)、腔隙性脑梗塞，其中以脑梗塞最为常见。

出血性脑卒中(出血性脑中风)包括：脑出血(脑溢血)、蛛网膜下腔出血；

①短暂性脑缺血(简称：TIA)：也称小卒中，俗称小中风，不少脑梗塞发病前短时间内出现过一侧肢体无力或麻木症状，伴有突然说话不利或吐字不清。但由于上述症状常在数分钟内消失，头部CT检查正常而不易引起重视。其实，这是微小脑血栓引起的短暂性脑缺血发作，医学上称为小中风。约有一半小中风病人在5年内会发生偏瘫，因此必须高度重视小中风，及早就诊防治。

短暂性脑缺血发作的病理基础也是在脑血管中、晚期动脉硬化的基础上发生的，加以有小块血栓，造成血流暂时阻塞，出现肢体麻木，运动失灵及失语，在几小时至此24小时之内自选缓解，恢复正常，病变程度轻一些，脑组织缺血时间短暂而已。它多发生在有动脉硬化或高血压病史的老年人身上，小中风的表现与中风先兆症状相同，主要表现是手中物品突然落地、偏瘫、偏看、偏身感觉障碍、单眼视力障碍、头痛眩晕、耳鸣及吞咽困难、语言不利等。小卒中约有1/3左右是脑卒中的先兆，但也不一定发生。必须及时就医，接受全部检查和预防治疗。

小中风与中风先兆的区别在于：症状很快消失，持续数分钟至1小时，最长不超过24小时，小中风一般在24小时内恢复正常。如果检查小中风病人的脑组织，会发现没有脑细胞死亡。小中风过后，病人的脑细胞应该完全正常。如果超过24小时，病人就会出现脑细胞死亡，这时就是脑梗塞了。

②动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞(血栓性脑梗塞、脑梗塞、脑血栓、脑栓塞、多发性脑梗塞)：属于脑梗塞的一种。由于脑动脉粥样硬化，脑动脉有高度狭窄乃至完全闭塞，加上脑血管内局部有血栓形成，导致供血阻塞，相关脑部组织供血不足，发生缺血坏死，临床上也称脑血栓。根据脑内血栓形成的部位不同，症状亦不同。发病不太急，头痛轻重不等，症状大体与脑出血相似，但发病不那样急，常在几小时到几天才完全出现。一有表现即应尽早就医，早期采用抗凝治疗更为有效。

多发性脑梗塞：是指脑内有多个缺血性软化梗塞灶而言，又称为多发性脑软化。除常见的瘫痪、感觉与语言障碍外，还可能出现痴呆。医生们就将这种痴呆称为多梗塞性痴呆(即动脉硬化性痴呆)。多发性脑梗塞好发于50～60岁的男性，高血压以及动脉硬化是主要病因。本病的病灶越多，痴呆的发生率越高，双侧梗塞较单侧容易发生痴呆。所以，应该积极预防脑梗塞的复发。

脑血栓是中风发病率最高的，占全部中风病例的半数以上，多发生在55～65岁的中老年人身上，男性多于女性。多在安静状态下发病。初期可有肢体麻木、无力、头晕、头痛等表现，2～3日内可出现半侧肢体失灵、失语、意识障碍、昏迷等情况，严重者造成死亡。

脑栓塞(栓塞性脑梗塞)：脑栓塞与脑血栓的差异很大。它的原发病不在脑内，而是身体其他部位(多为心脏与四肢血管)形成的“栓子”进入血管后，流入脑动脉血管，堵塞了管腔，从而发生脑栓塞，使脑组织局部发生缺血、软化，引起与脑血栓形成的相同后果。

什么是“栓子”呢？有血凝块、脂肪、空气、心脏瓣膜上的赘生物等。脑栓塞发病率也很高，发病年龄以20～40岁的中青年为多。它起病急，多无先兆，症状和脑血栓形成相似，有头痛、呕吐、意识不清、偏瘫等症状。病人如有风湿性心脏病、心房纤颤、亚急性细菌性心内膜炎等疾病史，患脑栓塞的可能性比其他人要多。

③腔隙性脑梗塞(脑腔梗)：是脑梗塞的一种特殊类型，是在高血压、动脉梗化的基础上，脑深部的微小动脉发生闭塞，引起脑组织缺血性软化病变。其病变范围一般为2～20毫米，其中以2～4毫米者最为多见。临床上患者多无明显症状，约有3/4的患者无病灶性神经损害症状，或仅有轻微注意力不集中、记忆力下降、轻度头痛头昏、眩晕、反应迟钝等症状。

该病的诊断主要为CT或MRI检查。而多发性的腔隙性脑梗塞，可影响脑功能，导致智力进行性衰退，最后导致脑血管性痴呆。

防治腔隙性脑梗塞应采取以下措施：

(i)高血压患者应长期药物治疗，定期测血压，使血压控制在正常范围；

(ii)糖尿病患者要严格控制饮食，坚持降糖治疗，使血糖控制在正常范围，糖尿病患者血压应控制在≤130/85mmHg；

(iii)高血脂患者应进行降脂治疗；

(iv)定期进行血液流变学检查，血粘稠度过高者，需口服小剂量阿司匹林；

(v)定期心脏检查，特别注意心功能变化及心律失常，改善心脏供血，防治冠心病；

(vi)对突发头痛、头昏、眩晕、记忆力力减退、反应迟钝、遗忘、视物不清、面部发麻等症状，应提高警惕，尽早到医院做头颅CT，以便早发现早治疗；

(vii)大复方道地取材，具有活血化瘀、芳香开窍，降脂抗凝功效的现代中药，对腔隙性脑梗塞发病诱因有综合的防治作用，坚持服用在改善症状的同时，能防止复发。

④脑出血(脑溢血)：脑动脉发生晚期硬化，既有斑块和狭窄也有退化变脆，在并有高血压的条件下，脑动脉发生破裂出血。另有少数是由于先天血管畸形，发生破裂出血，多见于中青年人。发病急，剧烈头痛，严重的很快昏迷，出现半身不遂(半身瘫)，失语，面瘫(嘴歪眼斜流口涎)。有时有诱因，如突然刺激、兴奋、跌倒，有时并无外界诱因。早期危险大，病死率高达30％～40％。必须尽早就医，搬动病人要特别小心，最好用救护车。

⑤蛛网膜下腔出血(Subarachnoid hemorrhage，简称：SAH)：是指蛛网膜下腔中出血的现象。常见的病因是脑动脉畸形、动脉瘤、血液疾病等。蛛网膜下腔出血是多种病因所致脑底部或脑及脊髓表面血管破裂的急性出血性脑血管病，血液直接这样流入蛛网膜下腔，又称为原发性蛛网膜下腔出血。此外，危急临床还可见因脑实质内、脑室出血、硬膜外或硬膜下血管破裂等血液穿破脑组织流入蛛网膜下腔者，称之为继发性蛛网膜下腔出血，又有外伤性，蛛网膜下腔出血约占急性脑卒中的10％，占出血性脑卒中的20％。

脑血栓与脑出血的临床症状有许多相似之处，极易混淆，有时临床上不易鉴别，做头部CT检查可以确诊。但治疗方案截然相反，前者需溶血，后者需凝血；脑出血可行开颅手术止血，清除积血，脑梗塞一般无手术指征。脑血栓预后比脑出血要好，但一部分病人也会留有偏瘫等后遗症。

(2)临床症状

临床表现以猝然昏扑、不省人事或突然发生口眼歪斜、半身不遂、舌强言蹇、智力障碍为主要特征。

脑中风的基本症状包括：

①头痛：无论是脑出血或脑梗死，头痛非常常见，亦是一个重要的脑中风症状和信号；

②呕吐：一般是伴随头痛一起出现的，也非常常见，其特点是多为喷射状呕吐；如遇有呕吐咖啡色(酱油样或棕黑色)液体，表示病情非常为重；

③眩晕：眩晕还多伴有呕吐或耳鸣，是脑中风的症状中比较常见的，一侧肢体和面部的感觉异常；

④口角流涎(流口水)：出现口角斜，流口水或食物从口角流出的现象，要引起足够的重视；

⑤突发的视感障碍：表现为看不见左或右的物体或视觉缺损，也可以表现为一过性的眼前发黑或眼前突然飞过一只蚊子的感觉；

⑥突发的言语不清和吞咽呛咳症状：表现为病人说话不清、吐词困难、喝水或吞咽时呛咳；

⑦意识障碍：表现为神志模糊不清，呼吸不应，打呼噜，严重的可出现深度昏迷。

(3)治疗原则

脑梗塞是多病因引起的慢性病，饮食等家庭护理康复措施会起到辅助药物治疗的作用，但没针对病因治疗的作用，所以对脑梗塞这种慢性病来说，最关键的康复方法就是科学的针对病因的用药防治，在改善脑梗塞症状的同时，降低脑梗塞的高复发率。

脑卒中是多病因引起的复杂的脑血管意外性疾病，用药以及对危险因素控制等康复治疗手段必须讲求科学的方法。科学的脑梗塞用药，应该能够从病因入手，对血栓形成及动脉硬化起到防治作用，在改善症状的同时，还能够有效防止复发。

(4)高血压患者的脑卒中治疗

脑卒中是高血压的重要合并症之一，超过60％的脑卒中患者有高血压病史。研究发现，脑卒中的年复发率高达3～5％，且与动脉血压水平呈密切的正向相关关系。另一方面，积极的降压治疗可明显减低脑卒中复发的危险性。循证医学证据表明，经降压治疗将脑卒中患者的血压控制到满意水平后，发生脑卒中的危险性有可能降低至与无脑卒中病史患者同等水平。为此，新指南中对该人群的降压治疗同样提出了更高的要求，主张将既往有脑血管病史患者的血压降低至140/90mmHg以下甚至更低。

然而，由于其特殊的病理生理机制与临床特点，脑卒中急性期的降压治疗应更为谨慎。急性脑卒中时，尤其是发病一周以内，血浆皮质醇和儿茶酚胺水平明显升高，患者出现颅内压增高、脑缺氧、疼痛及精神紧张等，并由此引起反射性血压升高。此时机体本身会对这一系列的变化作出生理反应与调整。如果在这一阶段过多的降低血压，有可能加重脑组织缺血、缺氧，不利于病情恢复甚至引起更为严重的后果。

因此，除非血压严重升高(超过180/105mmHg)，应暂时停用降压药物。一般认为，急性脑梗死发病一周以内时，血压维持在160～180/90～105mmHg之间最为适宜。如血压严重升高，应选用一些作用较弱的降压药物，使血压平稳缓慢的降低。

与缺血性脑卒中相比，出血性脑卒中的降压治疗更为复杂：血压过高会导致再次出血或活动性出血，血压过低又会加重脑缺血。对这类患者，现认为将血压维持在脑出血前水平或略高更为稳妥。血压过高时，可在降低颅内压的前提下慎重选用一些作用较为平和的降压药物，使血压平稳缓慢的降低。一般2小时内血压降低不多于25％。血压降低过快、过多均可能会对病情造成不利影响。急性脑出血时血压维持在150～160/90～100mmHg为宜。

无论脑出血还是脑梗死，一旦病情恢复稳定，均应逐步恢复降压治疗，并将血压控制在140/90mmHg以下。

(5)常用的治疗药物与方法

临床治疗脑卒中都有什么可靠的用药呢，防治脑卒中的西药有：拜阿司匹林、氯比格雷、脑活素片、弥可保等，都是疗效比较可靠、有治疗针对性的用药，其中阿司匹林是防治脑卒中的基础用药，对防止脑卒中复发有一定疗效，但临床应用阿司匹林显示有47％的患者存在用药抵抗，即使是阿司匹林肠溶片，也会对胃肠造成负担和影响，有各种出血倾向的患者，更应禁止使用阿司匹林。服用阿司匹林，须在医生指导下针对自身情况和病症特征选择。

短暂性脑缺血发作，它的的防治药物应是抗血小板聚集类西药和降脂抗凝类中药的合理并用。目前临床上应用有效的代表药物主要有中药天欣泰血栓心脉宁片和西药拜阿司匹林，天欣泰血栓心脉宁片是临床治疗脑梗塞的医保用药，是现阶段中国唯一二次研发成功的脑梗塞中药，属于大复方道地取材的现代中药。天欣泰血栓心脉宁片能够对脑梗塞病因血液(血粘度高)及血管病变(动脉硬化形成)同时治疗，为脑组织的恢复创造一个良好的内环境，使由于脑组织缺血缺氧甚至坏死而导致其他神经系统的体征得到改善，防止血栓形成、动脉硬化形成作用明显。具有改善缺血脑组织血氧供应的作用，能够防止缺血发作及进展，防止血栓形成，对动脉硬化形成有明显的抵抗作用，而且是中药，长期服用也很安全。短暂脑缺血的患者以口服天欣泰血栓心脉宁片为主，配合服用拜阿司匹林，能够标本兼治，防止进展成为脑血栓，这是最为关键的。

天欣泰血栓心脉宁片组方中含有两种国家一类新药(体外培育牛黄和中国药材公司产麝香)，这在心脑血管中药极为罕见，道地取材与十多种现代工艺完美结合，提高疗效的同时也大幅提升了成药的安全性与长效性，用于临床治疗脑梗塞—改善语言障碍、肢体障碍、头晕头痛等症状的同时防止复发，效果非常明显。

临床同时能治疗脑卒中症状，并且能有效防止脑卒中复发最好的中药就是众春益脑宁片。众春益脑宁片是中国首个着眼脑卒中二级预防而研发的现代中药，也是中国唯一二次研发成功的脑卒中治疗中药，是防治长效性、安全性、药物稳定性、显效率综合比较好的中药之一，适合脑卒中患者在恢复期和后遗症期长期服用。在改善症状的同时，剂型剂量更利于脑卒中患者在一定较长时期服用，在没有副作用的同时安全的防止复发，临床数据显示防止复发率80％以上。据统计，经系统科学的脑卒中康复防治，80％患者能防止复发，90％患者可恢复步行和生活自理，30％以上肢体功能基本恢复，可参加部分简单劳动和工作，甚至完全恢复工作，所以脑卒中患者们应树立康复信心，只要坚持贯彻好脑卒中二级预防原则，是可以恢复的不复发的。

①水蛭素在缺血性脑卒中治疗中的应用

急性缺血性脑卒中是临床神经内科常见病之一，也是高血压、心脏病、糖尿病的常见并发症，约占全部脑卒中的70％，致残率较高。

急性缺血性脑卒中的治疗目的是降低致残率，提高病人生活质量。超早期(3h)溶栓治疗，可挽救缺血半暗带神经细胞。但大多数患者入院时已错过溶栓时机。因此，对此类患者应进行积极抗凝治疗。抗凝目的是干预凝血过程，改善缺血病灶周边区域的高凝状态，减少管腔内血栓再形成及进一步阻塞，改善侧支循环，抢救缺血半暗带区神经细胞，减轻神经功能缺损。低分子肝素钙抗凝作用依赖血浆中AM-Ⅲ的存在，与其结合后抑制凝血酶的作用，阻断凝血过程。其治疗急性缺血性脑血管病有明显效果，可改善预后，降低致残率和病死率。

水蛭素的抗凝作用有别于肝素，它是迄今最强的特异性凝血酶抑制剂，与凝血酶以等摩尔比结合，能与血浆中游离的及凝血块中与纤维蛋白结合的凝血酶结合，从而阻断凝血过程，防止血栓延伸。其作用不依赖于内源性抗凝因子。重组水蛭素只是63位酪氨酸未被硫酸化，其作用低于天然水蛭素。研究显示：其能抑制因缺血所致的凝血酶形成，防止继发性微血栓形成，增加缺血周边区域血流，挽救濒危的神经细胞。其在第四周仍能改善神经功能缺损，其机制有待研究。已知凝血酶在脑出血脑水肿中的作用已阐明，水蛭素能明显抑制这一过程，减轻脑水肿。另有研究显示水蛭素治疗急性缺血性脑卒中安全、可靠，不增加出血率。

②脑卒中的经颅超声溶栓治疗

自1990年至2003年，美国、日本和德国学着报道了超声溶栓的实验研究714篇，结论是一定功率和频率的超声波可以直接溶解血栓，并能增加纤维溶解药物活性。中国学者郎鸿志教授自二十世纪七十年代在国际上首先开始了经颅超声治疗脑血管病的研究，通过大量的动物实验，在国际上首先提出了经颅超声治疗的安全剂量。

经颅超声溶栓主要用于脑梗死早期的溶栓治疗。可以单独使用，也可与尿激酶同时使用，提高溶栓治疗效果，减少出血并发症。在脑卒中恢复期和康复过程中，本治疗可以改善脑微循环促进侧脂循环建立，加快肢体功能和语言障碍的恢复。在脑动脉硬化、脑血管狭隘(MRA或TCD异常)和TIA发作的脑梗死前期，该治疗可以消除动脉硬化斑块、扩张脑血管，使TIA发作减少或消失，预防脑梗死的发生。

4、脑卒中的预防

控制脑中风发病因素、中风是可以预防的。

知道中风的严重性，早期预防和治疗中风就显得特别重要，了解中风的危险因素，并给予一定的干预和治疗，可以预防和减少中风的发生，减少致残率和死亡率。

(1)中风的危险因素

①高血压病，无论是出血性中风还是缺血性中风，高血压是最主要的独立危险因素。通过降压药、低盐饮食等将血压逐渐降至140/90mmHg以下。

②糖尿病，通过控制饮食、降糖药，将血糖降至3.9-6.1mmol/L正常范围。

③心脏疾病，如风湿性心脏病、冠心病。尤其防止心房颤动引起栓子脱落造成脑栓塞。

④血脂代谢紊乱，极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白是引起动脉粥样硬化的最主要脂蛋白，高密度脂蛋白是抗动脉硬化脂蛋白。

⑤短暂性脑缺血发作(简称：TIA)，TIA本身是缺血性中风分类的一个类型，也可以是脑梗塞的先兆或前区症状，应及时治疗。

⑥吸烟与酗酒；

⑦血液流变学紊乱，特别是全血黏度增加时脑血流量下降，其中红细胞比积增高和纤维蛋白原水平增高是缺血性中风的主要危险因素；

⑧肥胖，肥胖与超重均为缺血性中风的危险因素，与出血性中风无关。

⑨年龄和性别，年龄是动脉粥样硬化的重要危险因素，粥样硬化程度随年龄增高而增加。50岁以上随着年龄增加中风发病率亦有增加，但笔者发现青中年中风发病者亦有增加，不可忽视。一般来说女性中风发病率低于男性。

(2)补充叶酸可有效预防脑卒中

一项由中美医学家联合完成的大型汇总研究证实，补充叶酸可有效降低脑卒中风险。专家称，中国是脑卒中高发国家，这项研究对推动相关防治工作意义重大。

由北京大学第一医院霍勇教授、美国伊利诺大学芝加哥公共卫生学院哈肯·德米塔斯博士等9位中美医学家联合进行的“补充叶酸防治脑卒中疗效”汇总研究，其成果刊登在英国出版的6月2日《柳叶刀》(Lancet)杂志上。对1996年至2006年国际医学界有关“补充叶酸防治脑卒中疗效”研究的汇总分析显示，补充叶酸能使脑卒中发生风险降低18％，疗程达3年以上时，风险可下降29％。文中还引用了在中国河南省林州市进行的营养干预研究，显示补充一定数量叶酸2年后，脑卒中发生风险可降低37％。

近年来，叶酸是否降低心脑血管发病成为国际医学界争论的一个热点，“质疑说”成为《新英格兰医学杂志》《英国医学杂志》等著名医学期刊的“主流观点”。作为争论的“附属物”，多项研究表明叶酸能显著降低脑卒中风险。《柳叶刀》此次汇总研究再次证实，补充叶酸未能降低心血管病发病风险，却显示了显著的预防脑卒中效果。对无脑卒中既往史的人群效果更为明显。

此项研究对中国防治脑卒中具有重要意义。卫生部统计显示，中国是脑卒中高发大国，每年新发病200万人。脑卒中每年导致死亡150万人，是位居肿瘤之后的城乡居民第二位死因。存活的患者中，约四分之三不同程度丧失劳动能力，重度致残者占40％。中国每年用于该病的治疗费用100亿元以上，国家和家庭的经济负担沉重。

国际高血压联盟主席刘力生教授认为，中国应重视和加强叶酸在防治脑卒中方面的作用。相比治疗脑卒中的他汀类药物，叶酸的使用更具性价比的优势，更切合中国的国情。比如“降压药加叶酸”可用于老年正常人群的预防，尤其中国北方人群脑卒中发病率高，而叶酸水平低，补充叶酸的预期要好于西方国家。

5、脑卒中后遗症

脑卒中是急性脑局部血液循环障碍性疾病，以突然出现的意识障碍和肢体瘫痪为常见。是中国中老年人的常见病，死亡率高，幸免死亡的患者大多留有不同程度的后遗症。

脑卒中后遗症是包括脑卒中后抑郁症、脑卒中后痴呆(血管性痴呆)和肢体障碍。

脑卒中后遗症的病人一般均有一侧肢体瘫痪，关节挛缩畸形，失语，姿势异常，常伴有不同程度的精神障碍如抑郁症、痴呆等。一般认为：脑卒中发病6个月内进行康复治疗效果比较显著，偏瘫功能的恢复在1年后逐渐停止。

脑卒中幸存者半数以上瘫痪，长期不愈或只部分恢复，有人有大、小便失禁及语言障碍，完全或部分丧失生活自理能力，患者本人苦难很重，也为家庭和社会造成沉重负担，必须及时进行康复治疗，争取最大程度的恢复。

中国是脑卒中的高发国，可能与高血压尚未很好控制有关，也许还有其他因素，有待研究。必须加强控制高血压和预防动脉粥样硬化，才可减少脑卒中。

(六)脑卒中后抑郁症的研究概况

1、概述

脑卒中是严重危害人类健康的主要病症，脑卒中抑郁症(简称：PSD)是脑卒中的常见并发症。当今世界危害人类健康的五大疾病之一的情感性精神障碍，已经给人类社会带来沉重的负担。中国卫生部证实，情感性精神障碍在中国疾病总负担的排名居前。

情感性精神障碍中的抑郁症是以显著而持久的情绪低落，行为木僵和悲观厌世为主要特征的一组疾病。实际上它很普通，以至被称为精神疾病中的“普通感冒”，同时它还是严重的、威胁生命的疾病，折磨着世界上数以千万计的人。因此，迫切需要安全、高效、低廉的抗抑郁药。

2、临床研究

脑卒中的高致残率，对患者的心身打击巨大，加上脑部本身的损害对精神状态的影响，使脑卒中后抑郁有很高的发病率。PSD是一较常见和持续时间较长的疾病状态，其发生率在20％～60％。

近几年来，脑卒中患者的精神问题已引起临床医生的普遍关注(王焕，脑卒中后抑郁状态[J]；上海神经医学，1991，3(2)：89.)。中国已进行了研究，但这方面资料较少。抑郁症性神经病是一种持久的心境低落，常伴焦虑，躯体不适和睡眠障碍，其症状出现不仅影响患者的生活质量，也妨碍其神经功能障碍的恢复。

有研究显示，脑卒中患者发生抑郁症者占32.9％，其中轻度抑郁20.3％、中度抑郁、9.6％、重度抑郁3％。41.8％发生在脑卒中急性阶段(30天内)，58.2％发生在恢复阶段(慢性期)，且随病程的延长而增高。根据脑卒中病灶的部位分为大脑半球左侧、右侧及大脑皮质、皮质下、小脑卒中。左侧卒中的抑郁发生率高于右侧，但差异无显著性差异；皮质下脑卒中尤其是基底节区卒中其抑郁的发生率为39.4％，较大脑皮质卒中和小脑为高，有显著性差异。

3、发病原因

脑卒中和抑郁发生的原因是多种、复杂的；有人认为脑卒中后抑郁与病灶部位密切相关，也可能与中枢神经损伤、神经内分泌改变以及患者精神压力等因素有关(漆红，赵友文，李美淋。脑血管病后抑郁的临床特点及相关因素[J]，中国心理卫生杂志，1995，9(3)：121.)，脑卒中后抑郁症状主要表现为情绪低落、悲观厌世、阻滞、睡眠障碍、食纳下降等，这些症状会直接影响患者接受治疗和康复锻炼的主动性，从而造成康复困难和减慢生活能力的提高。抑郁的发生与年龄呈正相关，但50岁以前发生脑卒中者，其抑郁发生常明显增高，随年龄的增加和病程的延长，抑郁的发生有增多趋势，可能与不同年龄段所担负的家庭社会角色有关，也与脑卒中后的生活质量有关。慢性期患者的抑郁的发生与患者日常生活能力、社会活动障碍及良好的家庭、社会支持系统等具有显著相关性。

4、治疗情况

脑卒中后抑郁症可应用心理治疗，但效果不甚满意。对住院患者进行早期心理干预，未能有效地减少抑郁的发生，但对患者进行针对性的心理疏导，使其保持健康的心态，客观稳定的情绪，积极配合治疗及康复锻炼，有助于改善预后。对脑卒中患者早期社会心理干预及良好的家庭社会支持系统对减轻抑郁症状，改善预后具有客观的前景。

脑卒中后抑郁症患者对药物有良好反应，一旦发生，及时应用抗抑郁症药物，临床医生认识PSD的水平很重要，进行早期干预治疗，能够显著提高患者康复能力。目前用于治疗抑郁症的药物主要有三环类抗抑郁剂、单胺氧化酶抑制剂和5-羟色胺重吸收抑制剂，但是均有不同程度的不良反应，如嗜睡、视物模糊、高血压、惊厥和性欲低下等，从而限制了其广泛使用。

贯叶连翘提取物(商品名：路优泰)是近年新上市的抗抑郁植物药，其对脑细胞的5-羟色胺(简称：5-HT)、去甲肾上腺素(简称：NE)、多巴胺(简称：DA)的再摄取均有明显的抑制作用，并且对此3个系统的再摄取抑制作用维持平衡，具有作用机制新颖、临床疗效明确、不良反应小的优点，但是其有效成分目前还不十分明确，临床上一直使用其粗提物，对其药品质量的控制有一定影响。因此，寻找新型、成分明确、疗效确切、不良反应小的抗抑郁药仍然势在必行。

(六)脑卒中后痴呆(血管性痴呆)的研究概况

痴呆(Dementia)是由于脑功能障碍而产生的获得性和持续性智能障碍综合症，包括不同程度的记忆、语言、视空间功能、人格异常及认知能力降低。血管性痴呆是由脑血管性疾病引起的，主要由脑缺血缺氧导致。

痴呆的主要类型是包括血管性痴呆症(vascular dementia，简称：VD)、老年痴呆症中的老年性痴呆症(Alzheimer’s Disease，或称阿尔兹海默症，或称阿尔茨海默症，简称：AD)等。

老年痴呆症包括老年性痴呆症、多重梗塞型痴呆症(Multimfarct Dementia)、酒精性痴呆症(Alcoholic Dementia)及正常脑压水脑症(Normal Pressure Hychocephalus)，其中老年性痴呆症为老年痴呆症中的主要类型。由于AD好发病于60岁以上老年人，所以习惯被称为老年性痴呆症或早老性痴呆症。

临床上常见多梗死性痴呆、大面积脑梗死性痴呆、丘脑性痴呆及出血性脑血管并发痴呆及混合性痴呆等类型。临床表现为抑郁、谵妄、失语等。病理改变为多发性腔隙性病变或大面积梗死灶及动脉粥样硬化病变(参见神经病学，第四版，人民卫生出版社)。临床治疗可使用胆碱能抑制剂，扩张血管、增加脑血流量，或者利用脑保护剂—抗氧化剂或自由基清除剂可以改善缺血、缺氧所引起的病理损伤减少脑细胞坏死和凋亡，保护脑组织。

血管性痴呆者早期仅表现近记忆障碍，远记忆相对保持较好；随病程的增加，远记忆能力逐渐丧失，智能衰退呈渐进性加重。

而老年性痴呆早期就表现出远近记忆障碍，智能衰退呈现出一种缓慢的进展过程(郭明英，韩国玲，等.老年性痴呆与血管性痴呆智能障碍的比较研究.青海医学院学报.2007，28(2)：125-127.)。

血管性危险因素在血管性痴呆和阿尔茨海默病的发病中均扮演着重要角色，所以有理论认为阿尔茨海默病与血管性痴呆可能并非两个独立疾患。阿尔茨海默病与血管性痴呆的共性研究已经在危险因素、发病机制、病理生理、影像学改变等各个方面广泛地开展。

血管性痴呆是由多次脑卒中或长期慢性脑缺血所致的大脑皮层获得性高级功能的进行性衰退性疾病。

在欧美调查表明，55岁以上的老人中痴呆发生率约1.1％，其中Alzheimer病占首要位置(发生率约7.7‰)，约为痴呆总人数的50％～60％，而VD居次(发生率约1.5‰)，占10％～20％，而随着年龄增长，VD所占比例显著增加(①Ott A，Breteler MMB，Harskamp F，Stijnen T，Hofman A.Incidence and risk of dementia：the Rotterdam study.Am.J.Epidemiol.，1998，147(6)：574-580.；②Di Carlo A，Baldereschi M，Amaducci L，et al.Incidence of dementia，Alzheimer′s disease，and vascular dementia in Italy.The ILSA Study.J.Am.Geriatr.Soc.，2002；50：41-48.)。

中国最近的研究也表明，65岁以上的老人中AD发生率约3.5％，VD发生率1.1％(ZhangZX，Zahner GE，Roman GC，et al.Dementia subtypes in China：prevalence in Beijing，Xian，Shanghai，and Chengdu.Arch Neurol.2005；62(3)：447-453.)。

由于目前还缺乏适用于诊断VD的认知损害模式，对于AD和VD的诊断的鉴别以及“混合型”痴呆(AD+脑血管病，简称：AD+CVD)的诊断仍然具有一定的挑战性(①丁素菊，李云霞.血管性痴呆的临床诊断和治疗.国外医学：脑血管疾病分册.2005，13(9)：676-680；②Erkinjuntti T：Vascular dementia：challenge of clinical diagnosis.Int Psychogeriatr.1997；9：51-58.)，所以有人认为血管性痴呆可能是老年人中最为常见的痴呆类型，主要是因为很多“混合型”痴呆(AD+CVD)可能被诊断为AD(①Román GC.Vascular dementiamay be the most common form of dementia in the elderly.J Neurol Sci.2002，203-204：7-10；②丁素菊.血管性痴呆.中国老年学杂志.2003；23(4)：200-202.)。

VD的发生率在男女无明显差异(Anderson K，Launer LJ，Dewey ME，et al.Genderdifferences in the incidence of AD and vascular dementia：the EURODEM studies.Neurology.1999；53：1992-1997.)，其最显著的危险因子是年龄[Hebert R.，Lindsay J.，Verreault R.，Rockwood K.，Hill G.，Dubois MF.Vascular dementia：incidence and risk factors in the Canadianstudy of health and aging.Stroke，2000；31(7)：1487-1493.]，根据流行病学调查，在大于60岁的人群中，年龄每增加5岁VD的发病率就增加1倍。

引起VD的两个主要原因是脑卒中和缺血性心脏病(ischemic heart disease，简称：IHD)，而在老年人中这两者都是常见病。仅就脑卒中而言，现在每年全球新增加卒中患者1000万，其中中国就有200万(①Feigin VL，Lawes CMM，Bennett DA，et al.Strokeepidemiology：a review of population-based studies of incidence，prevalence，and case-fatality inthe late 20th century.Lancet Neurol.，2003，2(1)：43-53；②吴兆苏，姚崇华，赵冬.中国人群脑卒中发病率、死亡率的流行病学研究.中华流行病学杂志，2003；24(3)：236-239.)，在老年人中发病率尤高，从而造成很多患者并发VD。中国中国性痴呆流行病学统计资料也显示随着人口的老龄化、饮食结构的改变，VD的发病呈递增趋势。

随着人口老化，心脑血管病的发病率逐年升高，并发VD患者也逐渐增多。VD不仅严重损害患者健康，给患者带来长期痛苦，影响患者的生命质量，也给社会和家庭带来沉重的负担，引起了世界各国的普遍关注，它是老年医学领域中的一个重要课题。普遍认为年龄对VD的作用是通过多方面来影响的，例如脑的自身调节、细胞的新陈代谢、血脑屏障及自主功能方面的老化改变使脑血管易于受到损害，而脑损害的累计效应也是原因之

痴呆的诊断必须符合三个条件：①痴呆；②脑血管病；③以上二者密切相关。痴呆和卒中在时间上密切联系，通常卒中后3个月内发生痴呆。主要症状为：①脑组织病理形态改变；②记忆力下降。

关于VD的治疗，目前尚无肯定的治疗方法可以改变整个病程，由于脑梗死后坏死的脑细胞不可能逆转，主要是对供血不足的脑细胞的治疗以缓解发作期症状、预防再损害等。常采用积极改善脑细胞供氧、改善微循环、预防新血栓与再梗死的方法等。改善脑循环治疗常用的有双氢麦角碱类、钙离子拈抗剂、烟酸类、其他扩血管药物及抗血小板聚集药物。胆碱酯酶抑制剂是近年发展较为迅速的痴呆治疗药物，如盐酸多奈哌齐和重酒石酸卡巴拉汀。临床上还经常应用脑保护治疗药物如钙离子拈抗剂(尼莫地平和西吡灵)；自由基清除剂(维生素E、维生素C以及银杏叶制剂)等。但从上述药物目前临床的应用效果来看，疗效一般，并且大部分都仅仅是对症处理，并不能改善死亡率。目前一些中药制剂如银杏叶、灯盏花、刺五加等制剂大多存在活性成分不清、作用机制不明、质量不稳、毒副作用大等不足之处，难以满足临床需要。

目前抗VD药物的作用主要是缓解症状，并不遏制病情的发展，研究出一种有效的预防、诊断、治疗和研究方法来阻止潜在的发病过程是很必要的。因此，目前世界各国对控制此病病程进展尚无有效方法和药物，VD的预防、治疗和预后的药物研究和开发已成为各国非常重视的研究课题(①丁素菊.血管性痴呆.中国老年学杂志.2003；23(4)：200-202；②陈春雷，邱智辉，苏世鑫，郑忠诚，陈培芬，叶志平.血管性痴呆的治疗进展.中国新医学论坛.2007，7(7)：59-62.)。

(七)脑卒中后肢体障碍康复的研究进展

1、概述

脑卒中是神经系统常见病和多发病，而肢体功能障碍是主要残疾病症，应及早进行康复治疗及训练。据流行病学调查结果推算，存活中约70％～90％致残，大约有80％左右的脑卒中患者伴有上肢功能缺损，他们中60％左右的患者在发病后3～6个月仍伴有上肢功能障碍。

脑卒中严重威胁人类的健康和生存质量，给社会和家庭带来沉重的负担(朱镛连.脑损伤康复理论研究新进展.中国康复理论与实践，2004，10(12)：721-722.)。随着康复医学的迅速发展，脑卒中运动功能障碍的康复已成为康复医学研究的重点之一。

2、肢体障碍康复的进展

脑卒中可引起偏瘫、失语等多种功能障碍，其中偏瘫危害最大，肢体功能恢复主要在发病后6个月内，尤其是前3个月内。

康复是医护人员在康复过程中为克服患者身心障碍而进行的治疗、护理活动。治疗方式是在给患者以心理支持下实施传统针刺疗法、作业疗法、康复训练等综合方法，以其发挥肢体的最大潜能，改善肢体运动功能及生活自理能力，从而提高患者的随意活动能力及生活质量，提供最大限度的医学康复帮助。

近年来，脑卒中后肢体功能障碍的主要康复手段包括康复治疗、传统的中医意念疗法、运动想象疗法、物理疗法、强制性运动疗法等方法。

(1)康复治疗

由于脑卒中患者不但表现肢体运动功能的障碍，还表现为言语、认知、日常生活活动能力等多方面的功能障碍。因此，对脑卒中患者进行早期正规系统的康复治疗，可减轻痉挛，改善躯体运动功能及日常生活活动能力，减轻残损和残疾的程度，提高生存质量。

早期康复治疗护理尤为重要(王伯霞，柳文清，武静.卒中单元内早期康复训练对患者肢体功能恢复的影响.济南：齐鲁护理杂志，2006，12(8)：1411-1412.)。由于肢体功能障碍使患者心理产生巨大的压力，而肢体功能恢复的好坏，更是他们所担心的问题。患者往往焦虑、烦躁、情绪激动、不能面对现实，怕被人嫌弃，不愿意配合医护人员的治疗，甚至有人有轻生的念头。康复训练的主动性和能动性差。早期心理护理、针对患者不同心理状态，采取不同的心理干预措施，进行心理疏导，才能消除心理障碍增强康复信心，减轻心理负担，积极主动参与康复治疗、康复训练。

康复治疗是影响脑可塑性的极为重要的因素，在脑损伤早期、后期和晚期都有极其重要的意义，大量研究表明康复治疗对脑功能重组的意义。功能重组理论对脑损伤残留部分通过病灶周围组织及对侧大脑半球代偿，以功能训练等方式促进功能上的重组，并以新的方式完成已丧失的功能。康复训练还可阻止损伤手代表区邻近的正常区进一步损害，并可诱导正常组织“接替”损伤的功能(潘大滓，杨苏骏，朱满莲，等.早期康复对急性脑卒中患者预后的研究叨.中国康复医学杂志，2006，211(1)：79.)。同时运动可影响神经递质并可上调海马区、皮质等部位的脑源性神经营养因子和神经生长因子的基因表达，因此康复训练对脑功能重组有促进作用。

康复早期的介入可促进脑的结构和功能的重组，从而促进功能的改善。脑卒中常规康复治疗开始的时间应为患者生命体征稳定、神经症状不再发展后的48h。康复应从急性期开始，只要不妨碍治疗，康复训练开始得越早，功能恢复的可能就越大，预后就越好(潘大滓，杨苏骏，朱满莲，等.早期康复对急性脑卒中患者预后的研究.中国康复医学杂志，2006，211(1)：79.)。有关实验表明治疗后较治疗前偏瘫肢体痉挛评分高。可能是与治疗前患者处于休克期，肌张力降低.而随着时间推移。进入痉挛期，治疗一段时间后，大部分患者都经历了肌张力从弛缓到增高的变化，甚至部分患者肌张力又重新恢复正常。

而治疗后康复组较对照组的偏瘫肢体痉挛程度评分显著改善，可能是由于所使用的康复方法中抑制和促通并举，可调节神经运动通路上各个神经元和突触的兴奋性，以获得正确的运动输出。因此脑卒中患者进行早期正规系统的康复治疗，可减轻痉挛，改善躯体运动功能及日常生活活动能力，减轻残损和残疾的程度，提高生存质量。

但脑卒中后3个月内患者有功能自发恢复能力，这可能与脑局部水肿的消退、局部毒素的吸收有关。血肿的吸收、侧支循环的形成和局部循环的改善以及部分缺血性神经元的功能恢复有关。相关实验表明康复组比对照组日常生活活动能力有明显改善，但差别无显著性意义，可能与正处在脑卒中的自发恢复阶段有关，但在改善痉挛和肢体运动功能方面两组有显著性差异。有临床研究显示，早期进行康复治疗还可以降低卒中后抑郁、肩痛、肩手综合征、肩关节半脱位、关节挛缩、误用综合征等的发生(周敬华，梁华忠.脑卒中早期康复对运动功能及肩手综合征的影响.中国康复医学杂志，2005，20(10)：750-752.)。

(2)中医意念疗法

中医是我国传统医学，具有悠久的历史。意念可以调节人体内的生物电，使之和谐均衡。意念导引能够增强前额脑电活动，改变左前后优势脑轴的观念对比，并出现特征谐振频率的变化。意念可使各脑区脑电活动的A2波功率、部分脑区A1波功率显著增加。

对于脑卒中的恢复机制主要是脑水肿的恢复、远隔神经功能抑制的恢复、半暗带血液循环的恢复。由于意念能使A2波、A1波功率增加，所以能够促进神经细胞的恢复。意念可促使某些神经肽的分泌，从而影响心理生理变化。有研究提示，意念调息功法通过特定信息的介导影响皮质一下丘脑一腺垂体一靶腺的活动，从而调节或抑制人体的神经生化一内分泌激素的活动，进而调控人体生命活动。杨远滨等(杨远滨.中医意念与康复的运动想象疗法的比较们.中国康复医学杂志.2005，20(10)：761-762.)把大脑功能重组的观点与中医“形神统一”的整体观有机的结合起来。

(3)“运动想象”疗法

运动想象”疗法是近几年脑卒中康复的一种新方法。

外国学者用单病例研究方法观察了“运动想象”对3例脑卒中偏瘫患者描线训练效果的影响，结果显示“运动想象”明显改善患者描线的准确性。另外还有学者观察了“运动想象”对12例脑卒中患者和14个年龄、性别相匹配的正常人下肢负重能力训练的影响，发现想象与实际训练相结合可明显提高被训练者的下肢负重能力，提示“运动想象”的效果与保持工作记忆的能力有关。又有人采用单病例研究方法，对14例发病10～17d且一直进行常规康复训练的脑卒中患者进行研究，在仍进行常规康复训练的同时，增加伸手抓握物品这一“运动想象”任务，10例患者完成了整个观察过程，9例上肢运动指数积分明显改善，提示“运动想象”疗法有助于改善患者的上肢功能。

贾子善等认为尽管“运动想象”疗法还存在适应证选择、指导语言的规范等尚需解决的问题。但本疗法极有可能成为一种很有前途的治疗方法(贾子善.运动想象疗法在脑卒中中康复的应用.中围康复医学杂志。2004.19(11)：867-868.)。

(4)物理疗法与现代科学技术相结合

现代科学技术的迅速发展必将带动康复医学的进步。脑卒中肢体功能恢复的一个重要理论和治疗原则是患侧高级中枢的功能重组，即脑的可塑性现象。

刘桂芬等认为，电刺激对丧失神经支配肌肉的影响，无论是局部应用还是全身应用，不管电流类型、脉冲频率、波幅，疗程长短，均具有延缓肌萎缩、恢复功能的作用(刘桂芬.周志贤.不同组合模式神经肌肉电刺激促进摊厌上肢功能恢复的效果.中国临床康复，2004，8(22)：4424-4425.)。干细胞移植使中枢神经组织再生成为可能，从而直接完成神经系统功能重建，而不是已有的神经与肌肉的代偿作用机制。

满勇等报道神经节苷脂能够维持神经干细胞的原始神经状态，促进神经干细胞的增殖，从而能够修复中枢神经系统神经元的损伤(满勇.李红伟，杨波，等.不同剂量神经节苷脂对神经干细胞增殖和分化的影响叨.中国临床康复，2004，8(22)：4635.)。

针刺疗法：针刺能使皮内触、压、痛等感受器产生各种冲动，通过痛觉传导通路将冲动传至脊髓、延髓、丘脑外侧桥，最后投射到大脑皮质中央后回，各级神经中枢整合后由锥体系或锥体外系的运动传导通路传出，支配相应的骨骼肌，使患者驰缓的肌肉不至于萎缩，痉挛的肌肉抑制而放松(徐光青，董东锋.针刺治疗脑卒中痉挛性运动障碍机制的研究进展.北京：中国康复医学杂志，203，18(5)：313.)。

通过肢体功能锻炼，使偏瘫肢体关节在无痛范围内可达全范围运动，预防关节活动范围低下、肌腱和肌肉挛缩、肌力低下及肢体异常模式的出现和骨质疏松等废用综合征，又能促进患肢血液循环，通过日常翻身，坐、站、走的训练，吃饭、穿脱衣裤、鞋袜及正确使用卫生洁具等，促进了随意的、协助的、分离的、正常运动模式的建立。

(5)强制性使用运动疗法

20世纪90年代初，在“脑的十年”(1991～2000)中神经科学取得了巨大的进展，其中以强制性使用运动疗法(简称：CIMT)发展最快、疗效最为明显。强制性运动疗法由美国Aabama大学神经科学研究人员通过动物实验而发展起来的，经过数年研究治疗神经元损伤的一种训练方法。经典的CIMT强调的是在生活环境中限制患者健侧肢体的运动，强制患者使用患侧肢体完成日常功能活动。

大量的、重复的和密集的练习乃是CIMT重要的治疗策略与原则，行为再塑的技巧训练是CIMT练习的核心内容，与常规的作业治疗内容有所不同。CIMT根据每个患者的动作能力和日常生活能力情况来制定个体化的行为再塑计划，这些计划中执行的活动大多是日常生活中常用到的动作，有时需将这些活动分成许多较小的动作来完成，让患者重复练习这些小的动作。而且CIMT关注的重点是患者是否能将治疗的效果转移到真实生活的情境中。

CIMT是近年来引人注目的针对脑卒中后上肢功能障碍的一种新的康复训练技术，随机对照实验结果表明接受CIMT的患者在上肢运动功能改善方面显著优于接受常规训练的患者，在中国的研究也初步证实了CIMT的有效性。CIMT分别在脑卒中的慢性期、亚急性期、急性期都取得了很大进展(瓮长水.强制性使用运动疗法在亚急性期和慢性期脑卒中患者中的效力[J].中国康复医学杂志，2005，20(11)：806-809.)。从有关的实验表明，CIMT对于恢复后期偏瘫患者的上肢恢复也是有效的，CIMT较之传统的神经发育疗法显示出了诸多的先进性。

当然CIMT也存在问题，从治疗技术角度来讲，CIMT大多应用于慢性期者的上肢功能恢复，而对于急性期患者研究仍然不够。其次，从具体治疗来说，CIMT过度强调了患侧上肢的单独运动。而忽视了双上肢的协同配合运动。这个结论和很多研究中“患者良好的依从性”有了明显的冲突。这也提示我们CIMT的方法需要进一步改善。

CIMT的治疗机制目前仍不清楚，可能与大脑皮质功能重组有关(毕胜.动态功能性核磁共振成像在强制性使用运动疗法治疗脑卒中上肢偏瘫的初步研究[J].中国康复医学杂志，2003，18(12)：719-723.)，但是CIMT认可度和疗效方而尚存在着争议，应进一步加强对CIMT研究。从理论方面来说，CIMT采用了“脑的可塑性”和“大脑功能重组”理论。刘霖等经过诸多的实验研究说明，在恢复后期偏瘫患者的上肢康复中，CIMT较传统的NDT技术更为有效。以后又有多项研究证明，CIMT可以让脑卒中患者的大脑功能重组，与神经发育疗法或其他传统的治疗脑卒中患者的运动疗法不同。

“强制性使用”运动疗法是从动物实验到临床应用，具有可靠的神经科学基础，是以功能性为导向，以指向性任务为原则，以密集型训练为基础的一种新兴方法。因此有可能成为21世纪脑卒中康复治疗体系中的一枝新秀。

综上所述，综合性康复治疗及护理可显著地改善脑卒中患者运动功能及日常生活自理能力，可使肢体运动功能在短时间内得到较快的提高，预防和减少了废用综合征的发生，降低患者的致残率，提高了随意活动能力及生活质量，使其最大限度地适应社会。

因此，结合中国现有的临床常见的脑卒中后遗症的医疗救治技术，从抗脑卒中后遗症产品的研发上进行改进和完善，特别是从抗脑卒中后遗症产品的有效性、安全性和稳定性等方面进行探索，具有非常重要的意义。

经文献检索等，到目前为止，尚未发现有新的积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)产品在治疗脑卒中后遗症方面的应用报道。

发明内容

本发明所需要解决的技术问题是提供了积雪草三萜类成分的新用途，即积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸在治疗脑卒中后遗症产品中的应用，以克服现有技术存在的上述缺陷。

也就是说，本发明针对现有技术的不足，通过动物实验和临床试验等实践研究和理论探索，目的意在明确一种医药类产品的新用途，即提供一种治疗脑卒中后遗症的产品，既能明显降低和改善脑卒中后遗症，又能保证产品质量稳定能用于大规模工业生产的积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)产品。

(一)本发明所采用的定义

本发明所述的积雪草三萜类成分是中药积雪草提取物中的积雪草三萜类成分，即积雪草α-香树脂醇型的三萜类成分，包括积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸等中的一种或多种。

本发明所述的缺血——再灌注损伤是指组织器官缺血的基础上恢复血流后，组织器官的损伤反而加重；

本发明所述的脑卒中后遗症是指对已经发生的脑血管事件、减少其后遗症(如：偏瘫、大小便失禁、语言障碍等)的发生，并治疗已经产生的后遗症，是包括脑卒中后抑郁症、脑卒中后痴呆(血管性痴呆)或肢体障碍等中的一种或多种；

本发明所述的脑卒中后遗症是包括缺血性脑卒中后遗症或出血性脑卒中后遗症等中的一种或多种；其中：

缺血性脑卒中后遗症是包括缺血性脑卒中后抑郁症、缺血性脑卒中后痴呆(血管性痴呆)或缺血性脑卒中导致的肢体障碍等中的一种或多种；

出血性脑卒中后遗症是包括出血性脑卒中后抑郁症、出血性脑卒中后痴呆(血管性痴呆)或出血性脑卒中导致的肢体障碍等中的一种或多种。

本发明所述的抗脑卒中后遗症产品是直接用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究脑卒中后遗症等直接相关疾病的产品，包括抗缺血性脑卒中后遗症产品或抗出血性脑卒中后遗症产品等中的一种或多种；优选抗缺血性脑卒中后遗症产品，进一步优选抗严重缺血性脑卒中后遗症产品。

本发明所述的抗脑卒中后遗症产品是包括医药、食品、保健品或饮料等领域产品中的一种或多种，优选包括药物、试剂、添加剂、食品、保健食品或饮料等中的一种或多种，进一步优选药物或保健食品等中的一种或多种，最优选药物；所述的保健品是包括片剂、胶囊、冲剂、颗粒剂、丸剂或袋泡茶等中的一种或多种。

本发明所述的脑卒中后遗症的治疗作用是积雪草三萜类成分，即积雪草α-香树脂醇型的三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)能够明显改善脑缺血再灌注引起的行为症状，缩小脑梗塞面积，改善抑郁状态，提高缺血后认知功能，改善血管性痴呆。

(二)技术构思

自主开发创新药物是中国目前的一项紧迫任务，中国中医药学具有悠久的历史，用中草药预防和治疗疾病方面也积累了丰富的经验，因此从中药中寻找有效的活性成分或发现现有成分的新药理活性、探索和改进现有的药物，特别是发现现有成分的新用途、研究和改进现有药物的剂型或给药途径，能够大幅度提高临床用药途径、治疗效果、降低药物不良反应，将有利于减轻越来越重的社会压力和医疗负担，有利于社会的稳定和谐，也是中国医药研制的优势与有效的快捷途径之所在，同时也是中国医药创新发展的基础性工作和一个重要发展趋势。

发明人通过对单味积雪草药材的提取物进行系统的化学成分研究，在对具有抗脑卒中后遗症作用的天然药物活性成分进行筛选中，根据文献检索，通过大量实验研究，筛选发现并证明该提取物具有多种显著的药理活性，特别发现其中一个重要的活性：对脑卒中后遗症有较好的活性和防治作用。

经过化学成分研究，也证明积雪草活性部位积雪草提取物中的主要成分为积雪草三萜类成分。发明人从而推测积雪草的在预防、诊断、保护和治疗脑卒中后遗症等方面活性的临床药效，也应主要是通过活性部位积雪草提取物特别是积雪草三萜类成分的药效来发挥的，研究结果也证明和证实了积雪草提取物特别是积雪草三萜类成分具有显著的药理活性。

脑卒中后遗症临床非常多见，是个普遍性问题，在中国疾病总负担的排名居前，严重影响中国医院临床救治效果和患者的生存质量。研制治疗脑卒中后遗症药物，尤其是预防、诊断、保护和治疗脑卒中后遗症等方面产品特别是药物，将有利于减轻越来越重的社会压力和医疗负担，有利于社会的稳定和谐和提高军队的士气，特别是平时的重大自然灾害如强烈地震、海啸等，以及战争期间。无论是平时还是战时，研制和改进颅脑战创伤的救治技术，特别是脑卒中后遗症的防治具有显著的社会效益、经济效益。本发明的目的就是要研制一种安全、高效的脑卒中后遗症的防治药物。

根据此想法和思路，发明人通过反复的实验研究与分析和理论探索，已成功验证了积雪草三萜类成分的新用途，为临床应用产品提供了相应的药物来源。

(三)积雪草三萜类成分新的药理活性

本发明对积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)在预防、诊断、检测、保护、治疗和研究临床常见的脑卒中后遗症进行了多方面的试验和研究。

本发明通过如下技术方案得以实现。

1、积雪草三萜类成分对脑卒中后抑郁症的活性实验

(1)对脑缺血再灌注后抑郁行为的缓解作用

选择实验性大鼠制作脑缺血再灌注模型进行动物实验。

假手术组给予与药物组等体积的生理盐水，模型组给予与药物组等体积的生理盐水，积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)2个剂量组。

实验方法是根据新药审评要求，用栓线法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型(详见《西药新药临床前研究指导原则汇编》中华人民共和国卫生部药政管理局，1993：73)。除假手术组外，其余组即栓塞大鼠大脑中动脉，作为局灶性脑缺血再灌注模型，各组在缺血的时候，灌胃给药。大鼠清醒后，并进行不可预知刺激，除假手术组外，其余各组均进行昼夜颠倒、湿笼，水平振荡、电击、游泳、禁食、禁水、热风、夹尾刺激，每天一种刺激，两个循环，且单笼饲养。于缺血再灌注后每组选择部分进行强迫游泳实验，其余剔出实验，第20天进行自发活动实验，各组大鼠分别放入敞箱中，利用图像记录分析解析仪观察大鼠活动情况。

实验结果显示：模型组游泳不动时间增加、自主活动探洞次数减少，自主活动休息时间增加均与假手术组有显著性差异，说明抑郁模型造模成功。积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)可缩短大鼠游泳不动时间，增加自主活动探洞次数、减少自主活动休息时间，并且表现出剂量依赖，这可能与其增强脑内5-HT神经功能有关，说明积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)对改善脑卒中后抑郁状态有作用，这对脑卒中后抑郁症的治疗和防治有重要意义。

(2)积雪草三萜类成分对小鼠悬尾不动时间的影响

选择实验性小鼠进行悬尾实验。

ICR小鼠♂群养，自由觅食和饮水，室温，自然光照。

实验方法是设立：①空白对照组，给予与药物组等体积的生理盐水；②阳性对照药组，给予药物多塞平；③试验药物组，给予积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)，分低、中、高剂量。每天上午灌胃，连续给药。末次给药后，将动物尾端部位贴在一水平支撑物上，使动物成倒挂状态，支撑物放置于一敞口箱内。记录小鼠内不动时间，各组小鼠平行操作。数据以

表示，采用Student’s-t检验方法检验差异的显著性。

小鼠悬尾实验结果显示：积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)低、中、高3个剂量均能明显缩短小鼠悬尾，表明积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)具有抗抑郁作用。

(3)积雪草三萜类成分对小鼠游泳不动时间的影响

选择实验性小鼠进行强迫游泳实验。

实验方法是设立：①空白对照组，给予与药物组等体积的生理盐水；②阳性对照药组，给予药物多塞平；③试验药物组，给予积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)，分低、中、高剂量。每天上午灌胃，连续给药。末次给药后，将小鼠单独放入圆柱型玻璃缸中。从小鼠入水后记时，记录累计不动时间，各组小鼠平行操作。数据以

表示，采用Student’s-t检验方法检验差异的显著性。

小鼠强迫游泳实验结果显示：积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)低、中、高3个剂量均能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间，表明积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)具有抗抑郁作用。

(4)积雪草三萜类成分的利血平对抗实验

选择实验性小鼠进行利血平对抗实验。

实验方法：对利血平所致小鼠眼睑下垂的影响按文献方法。小鼠分组：①空白对照组，给予与药物组等体积的生理盐水；②阳性对照药组，给予药物多塞平；③积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)2个剂量组。小鼠尾静脉注射利血平后，立即给药，将动物单个竖放，观察出现眼睑下垂的动物数，计算拈抗率。

拈抗率(％)＝(每组实验动物数-眼睑下垂的动物数)/每组实验动物数。

实验结果显示：积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)对利血平所致小鼠眼睑下垂具有拈抗作用，表明积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)具有抗抑郁作用。

2、对脑缺血再灌注后运动行为障碍的缓解作用

选择实验性大鼠制作脑缺血再灌注模型进行动物实验。

假手术组给予与药物组等体积的生理盐水，模型组给予与药物组等体积的生理盐水，积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)2个剂量组。

试验方法是造模前给药，根据新药审评要求，用栓线法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型(详见《西药新药临床前研究指导原则汇编》中华人民共和国卫生部药政管理局，1993：73)。除假手术组外，其余组即栓塞大鼠大脑中动脉，作为局灶性脑缺血再灌注模型，各组在缺血的时候，定时灌胃给药，测试大鼠抓握能力。参照Rosenberg法进行抓握能力评估，采用无盖铁笼测试。Ⅰ级，不能攀高，不能抓东西；Ⅱ级，不能攀高，但能抓东西；Ⅲ级，能攀高但抓而不牢；Ⅳ级，能攀高，抓而不牢，但较有抵抗力；Ⅴ级，活动敏捷，攀越近于正常。等级资料采Ridit分析。

实验结果显示：模型组大鼠抓握能力明显差于假手术组，说明模型制造成功。而积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)2个剂量组均能改善抓握能力，有显著差异。

3、对脑缺血再灌注后认知功能的改善

选择实验性大鼠制作脑缺血再灌注模型进行动物实验。

实验方法是将SD大鼠用水合氯醛腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离左、右侧颈总动脉，动脉夹阻断双侧颈总动脉血流。撤掉动脉夹再灌注。假手术组不夹动脉夹，其余步骤同上。大鼠再灌注时，定时灌胃给药，假手术组和模型组灌胃时，定时给予纯净水。大鼠连续灌胃，再灌注第21d进行大鼠水迷宫试验。

大鼠水迷宫试验：

由一黑色有机玻璃正圆形水槽组成，水槽中有一台，可供大鼠站立。实验前，迷宫中灌水，水深没过站台，保持水温恒温。

在训练的第一天大鼠被置于站台上，使其了解此安全区域的存在，然后将大鼠按顺序头朝水槽依次从四个象限放入水中，计时，大鼠找到站台并在其上停留一定时间后，计时自动停止。

去掉站台，大鼠的游泳起点为远离站台的两个象限点，记录大鼠站台的潜伏期并记录穿台次数。

实验结果显示：模型组大鼠认知功能的改善明显差于假手术组，说明模型制造成功。而积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)3个剂量组均能改善认知功能，有显著差异。

积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)尤其在防治血管性痴呆方面表现出了相当强的活性，鉴于此又研究了其对阿尔茨海默氏症的作用，结果发现积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)对防治阿尔茨海默氏症同样具有相当强的活性。

4、积雪草三萜类成分及其组合物的临床应用

根据所检索的有关文献资料，发明人通过实验研究，发现积雪草三萜类成分具有多种显著的药理活性。而进一步的实验和研究结果，也证明和证实了积雪草三萜类成分在预防、诊断、检测、保护和治疗脑卒中后遗症等方面具有显著的活性。

积雪草三萜类成分及其组合物主要用于脑卒中后遗症，能够用于包括脑卒中后抑郁症、脑卒中后痴呆(血管性痴呆)或肢体障碍等中的一种或多种，优选血管性痴呆或肢体障碍等中的一种或多种，进一步优选肢体障碍；优选缺血性脑卒中后遗症，进一步优选重型缺血性脑卒中后遗症。

但是，根据脑卒中后遗症的治疗原则，越早用药越有利于患者的康复；当患者处于缺血性脑卒中后遗症早期或中期，积雪草三萜类成分及其组合物能显著改善患者的症状；当患者处于重型缺血性脑卒中后遗症时期，配合其他抢救用药一并使用，积雪草三萜类成分及其组合物也能够明显改善患者的症状。

积雪草三萜类成分可以采用本领域公知的方法制成各种剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、乳剂、溶液剂、注射剂等，采取口服或注射(包括静脉注射、肌肉注射、皮下注射)、粘摸透析等给药途径来用于脑卒中后遗症的治疗与脑卒中后遗症后遗症的防治。

本发明所述及的积雪草三萜类成分可以以组合物的形式施用于需要治疗的患者，所说的组合物包括治疗有效量的积雪草三萜类成分和医药学上可接受的载体。

实验证明，本发明的积雪草三萜类成分以及其药物组合物是一种安全、高效、稳定、价廉的治疗脑卒中后遗症、改善其后遗症的药物。

用于患者时，剂量根据患者的年龄、体重、给药途径以及症状的状况决定。

(四)积雪草三萜类成分的用途

1、概述

本发明的目的是提供一种用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品，包括药物、试剂、食品等中的一种或多种，优选药物。

通过药理活性筛选证明，积雪草三萜类成分为其预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症等直接相关疾病的活性部位。

经实验研究表明，积雪草三萜类成分体外能够显著延缓相关疾病的发展。已完成的急性毒性实验证明，小鼠灌胃给药对该活性部位的最大耐受量超过1.0g/kg，相当于临床推荐用药剂量的200倍以上，表明该有效部位安全可靠，解决了中药复方中成分复杂、有效成分含量低且含有有毒成分的问题。

综上所述，发明人对积雪草三萜类成分进行了理论探索，经过大量的实验研究特别是长期的药理学试验，发现所述及的积雪草三萜类成分有显著的预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症等直接相关疾病的活性。

因此，积雪草三萜类成分及其组合物可用于制备抗脑卒中后遗症产品，优选以本发明积雪草三萜类成分为原料制备而成的药物。

2、积雪草三萜类成分及其组合物的使用方法与要求

本发明积雪草三萜类成分可以单独或与其它活性组分联合使用，包括用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品，包括药物、试剂、食品或饮料等，尤其是药物。

在具体使用方面，本发明所述的积雪草三萜类成分能够单独使用，例如以活性部位、其衍生物或药用盐的形式应用，还能够与其他许多化学物质一起使用。无论这些化学物质是否具有生物活性或具有治疗疾病的功能，包括辅助功能如协同放大作用、拈抗或缓解积雪草三萜类成分的副作用等，这些化学物质是包括医药学上可接受的载体、食品、天然产物、化学合成药物或人类用药等中的一种或多种；优选包括医药学上可接受的载体或者食品等中的一种或多种；进一步优选医药学上可接受的载体。

本文使用的“医药学上可接受的载体”包括任何和所有的生理适用的溶剂、分散介质、胞衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂或吸收延迟剂等中的一种或多种。医药学上可接受载体的例子包括一种或多种的水、盐水、磷酸缓冲盐水、葡萄糖、甘油或乙醇等及其组合物中的一种或多种。在许多情况下，在该组合物中最好包括等渗剂，例如，糖、诸如甘露醇、山梨醇、山梨醇的多元醇或氯化钠等中的一种或多种。医药学上可接受载体还可以包含少量的辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、防腐剂或缓冲液等中的一种或多种，它们增强了该积雪草三萜类成分的有效期或效力。

从具体的分类上看，所说的医药学上可接受的载体是指医药学领域常规的药物载体，包括润滑剂，如滑石粉、聚乙二醇或硬脂酸镁等中的一种或多种；崩解剂，如微晶纤维素等；填充剂，如淀粉、糊精或乳糖等中的一种或多种；粘合剂，如预胶化淀粉、纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等中的一种或多种；渗透压调节剂，如氯化钠、葡萄糖、蔗糖、山梨醇或甘露醇等中的一种或多种；pH调节剂，如盐酸、氢氧化钠等酸或碱中的一种或多种；溶剂，如水、缓冲液、乙醇或丙二醇等中的一种或多种等；抗氧剂和络合剂，如亚硫酸钠、EDTA等中的一种或多种；表面活性剂，如季铵化合物、十六烷醇等；吸附载体，如高岭土或皂粘土等中的一种或多种；高分子骨架剂，如环糊精、聚乙二醇、泊洛沙姆等中的一种或多种；另外，还可以在组合物中加入其它辅剂，如香味剂、防腐剂或甜味剂等中的一种或多种。

例如，将活性组分积雪草三萜类成分溶解、混悬或乳化于适宜的水性溶剂中(例如，蒸馏水、生理盐水或格林溶液等中的一种或多种)或油性溶剂中(例如，植物油例如橄榄油、芝麻油、棉籽油、玉米油或丙二醇等中的一种或多种)中，即可制得注射制剂，其中溶剂中可含有增溶剂(例如，聚山梨酯80、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚维酮、环糊精、泊洛沙姆、聚乙二醇、苯甲醇、氯代丁醇或苯酚等中的一种或多种)、渗透压调节剂(例如，氯化钠、甘油、D9-甘露糖、D-山梨醇或葡萄糖等中的一种或多种)。在这种情况下，如有必要，可加入添加剂，例如稳定剂(例如，人血清白蛋白等)、止痛剂(例如，盐酸普鲁卡因或利多卡因等中的一种或多种)等。

本发明所述及的积雪草三萜类成分还可以以组合物的形式联合使用，特别是与用其它化学物质如药物对动物尤其是哺乳动物包括人或其他动物进行治疗所用的组合物或者是类似的组合物。所述哺乳动物，包括人、小鼠、大鼠、羊、猴、牛、猪、马、兔、犬、黑猩猩、狒狒、狨、猕猴或恒河猴等中的一种或多种，优选人、小鼠、大鼠、猴、猪、兔或犬等中的一种或多种，进一步优选人、大鼠或猴等中的一种或多种。例如，可以将本发明积雪草三萜类成分加入适于给与受治疗者的药用组合物中。通常，该药用组合物包含本发明积雪草三萜类成分和药学上可接受的载体。

积雪草三萜类成分的组合物特别是药物组合物可以有各种形式，包括例如液体、半固体和固体等剂量形式中的一种或多种；其中所说的药物组合物包括治疗有效量的积雪草三萜类成分为活性成分，以及一种或多种医药学上可接受的载体。

本发明所述的积雪草三萜类成分或其药物组合物能够可以采用本领域公知的常规生产方法制成任何一种适合于实验、研究或临床上应用的剂型，包括固体制剂如胶囊、片剂、颗粒制剂等，液体制剂如口服液或者注射剂等。

例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。所述的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂或注射剂等中的一种或多种，采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或多种)、粘膜透析等中的一种或多种给药途径进行抗脑卒中后遗症等直接相关疾病的预防、诊断、检测、保护、治疗或科学研究。

药物组合物优选含有重量比为0.5％～99％的活性成分积雪草三萜类成分，进一步优选含有重量比为1％～95％的活性成分积雪草三萜类成分，最优选含有重量比为5％～90％的活性成分积雪草三萜类成分。

积雪草三萜类成分的药物组合物一般必须无菌且在生产储存条件下稳定。可以将该组合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂质体或其它适合于高药物浓度的有序结构。通过将所需量的该积雪草三萜类成分与所需上述成分的一种或组合一起加入适当的溶剂中并接着进行除菌过滤制备无菌注射液。一般而言，通过将该积雪草三萜类成分加入含有基本分散介质和所需的上述其它成分的无菌溶媒中制备分散液。在用于制备无菌注射液的无菌粉剂的情况下，推荐的制备方法是真空干燥和冷冻干燥剂。例如，通过诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过保持所需颗粒大小和通过使用表面活性剂，可以保持溶液的适当流动性。

该组合物中可包括延迟吸收的药剂，例如单硬脂酸盐或明胶，以达到注射组合物的延长吸收；可包括高分子聚合物载体，如羟丙甲基纤维素或聚氧乙烯，以达到口服组合物的延长释放。

用于患者时，本发明所述的积雪草三萜类成分剂量为5～20mg/kg·d，可以分一次或多次使用，该剂量或用量通常根据患者或使用者的年龄和体重以及身体状况或患者症状的状况来决定。

本发明积雪草三萜类成分及其药用组合物可以包括“治疗有效量”或“预防有效量”的本发明积雪草三萜类成分。“治疗有效量”是指在必要的剂量和时间下有效达到所需治疗效果的量。积雪草三萜类成分的治疗有效量可以根据诸如个体的病况、年龄、性别和体重以及该积雪草三萜类成分在该个体引起所需反应的能力等因素而变化。治疗有效量亦指该积雪草三萜类成分的有益治疗效果超过其任何毒性或有害效果的量。

“预防有效量”是指在必要剂量和时间下有效达到所需预防效果的量。因为预防剂量用于患病前或疾病早期的受治疗者，预防有效量通常小于治疗有效量。本发明积雪草三萜类成分的治疗或预防有效量的典型的非限制性范围是5～20mg/kg，更优选为5～10mg/kg。应注意，剂量值将根据欲减轻的疾病类型和严重性变化，也就是说用于患者时，本发明所述的积雪草三萜类成分剂量或用量，通常根据患者或使用者的年龄和体重以及身体状况或患者症状的状况来决定。

另外，应理解，对于任何特定受治疗者，应随着时间根据个体需要和给与或监督给与所述组合物的人的专业判断调整特定剂量制度，并且本文设定的剂量范围仅为例证性的，并不会限制要求保护的组合物的范围或实践。

也就是说，需要根据治疗的对象、给药途径、所治疗疾病和状况等，变化本发明积雪草三萜类成分的每次和/或每日的剂量或用量。例如，经静脉给予哺乳动物，尤其是成年人(如体重60kg)，所述积雪草三萜类成分的单剂量约为50～1200mg，优选约100mg，优选每日给药1～3次。可以调整剂量单位，以提拱最佳所需反应(例如，治疗或预防应答)。

例如，可以单次大剂量给药，可以在一段时间内给予几个均分量或根据治疗情况的迫切性按比例降低或增加剂量。配制易于给药和剂量统一的剂量单位形式的非肠道组合物尤其有利。本文使用的剂量单位形式，指适于欲治疗的哺乳动物受治疗者的单元剂量的物理分离单位；每个单位含有预定量的计算用于与所需药用载体一同产生所需治疗效果的活性物积雪草三萜类成分。本发明的剂量单位形式的规格，由以下确定并直接取决于以下(a)该积雪草三萜类成分的独特特征和欲达到的特定治疗或预防效果，和(b)在混合这种用于治疗个体敏感性积雪草三萜类成分的技术中的内在限制。

3、积雪草三萜类成分及其组合物的药物剂型和给药途径

本发明所述的积雪草三萜类成分及其组合物制备的用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品，其中按照饮料、食品技术领域的要求制备的产品能够用于预防、保护和治疗抗脑卒中后遗症等直接相关疾病；按照医药技术领域的要求制备的产品能够用于患者的治疗或保健，既能够单独直接用于制备治疗或保健的药物，也能够与许多化学物质进行混合或组合，直接或间接用于制备治疗或保健的药物。这里所述的化学物质与本节上文中所述的相同。

在本发明中，所需物料包括本发明的原料、上述配套使用的化学物质等，均应根据实际情况和需要，采用食品级或药用级的物料。

本发明所述的积雪草三萜类成分及其组合物，可以用本领域已知的各种方法给药，尽管在许多治疗用途中推荐的给药途径/给药方式是喷雾剂或口服给药。但是，技术人员会理解给药途径/给药方式随所需的结果而变化。在某些具体实施中，该活性化合物可以与保护该化合物免于快速释放的载体一同制备例如空释制剂，包括移植物传递系统、透皮贴传递系统或微囊传递系统等中的一种或多种。此外，还可以使用生物可降解的、生物相容性聚合物，例如乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羟基乙酸、胶原蛋白、聚正酯或聚乳酸等中的一种或多种。制备这种制剂的许多方法均已申请专利或一般为本领域技术人员所知(例如Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems，J.R.Robinson编辑，Marcel Dekker，Inc.，纽约，1978)。

本发明所述的积雪草三萜类成分或其药物组合物中，可以含有本领域公知的医药学上可接受的载体和其它任选成分。载体包括羧甲基淀粉、淀粉、纤维素、明胶、碳酸氢钠、丙二醇或吐温-80等。任选成分例如是着色剂、甜味剂、抗氧剂等。

本发明所述的积雪草三萜类成分及其组合物，通常通过口服、直肠或肠胃外给药等中的一种或多种方式，施用于需要这种治疗的患者。

本发明所述的积雪草三萜类成分、其衍生物或药用盐、组合物特别是药物组合物可以制成任何一种适合于临床上应用的剂型，包括固体制剂，如胶囊、片剂、颗粒制剂等，半固体制剂如软膏等，液体制剂如口服液、混悬剂、乳剂等，或者注射剂。采取口服或注射(包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或多种)、粘膜透析等中的一种或多种给药途径进行脑卒中后遗症等直接相关疾病的预防、诊断、检测、保护、治疗或科学研究。

用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂或胶囊等中的一种或多种。在实施时，本发明积雪草三萜类成分可以与例如惰性稀释剂或可同化的食用载体一同口服。该积雪草三萜类成分(和共它成分，如果需要)亦可以包于硬或软壳明胶胶囊、压制成片剂或直接加入受治疗者的膳食中。关于口服治疗给药，可以将所述积雪草三萜类成分与赋形剂一起加入并以可食片剂、颊含片剂、锭剂、胶囊、悬液、糖浆或糯米纸囊剂等等中的一种或多种形式使用。

为了以非肠道给药之外给予本发明积雪草三萜类成分，可能需要用防止其失活的材料对该积雪草三萜类成分包衣或与该积雪草三萜类成分一同给予。亦可以将补充的活性化合物加入该组合物中。在具体实施时，将本发明积雪草三萜类成分与一种或多种可以用于治疗疾病的其它治疗药物共配制和/或共给予。这种联合使用，可以优越地利用较低剂量的该给予的治疗药物，因此避免可能的毒性或与各种单一疗法相关的并发症。

制成液体制剂如水剂、油悬浮剂或其它液体制剂中的一种或多种，如糖浆、酊剂或酏剂等中的一种或多种；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液剂、水剂或油性悬浮剂等中的一种或多种。

以上药物或药物组合物能够使用各种途径，在所述的使用形式中，优选的形式是口服制剂(如片剂、包衣片剂、胶囊、溶液或混悬液等中的一种或多种)、非肠道给予剂型(如注射剂、软膏或贴剂等中的一种或多种)等中的一种或多种，进一步优选片剂、胶囊或注射剂等中的一种或多种，特别优选片剂或注射剂中的一种。

此外，积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等在某些情况下也能够单独直接用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品，也能够与许多化学物质进行混合或组合，以组合物的形式直接或间接用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品。这里所述的化学物质与本节上文中所述的相同。

例如，积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末用于制备用于抗脑卒中后遗症预防、诊断、保护和治疗产品特别是药物的各种剂型，或者是积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅料用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品尤其是药物的各种剂型，或者是积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品如药物一起用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品如药物的各种剂型，或者是积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅助药物一起用于制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品如药物的各种剂型，如片剂、胶囊剂或混悬剂等中的一种或多种，优选胶囊剂。

所述的方法之一是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末灌装为胶囊剂，方法之二是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品如药物一起灌装为胶囊剂，方法之三是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅助药物一起灌装为胶囊剂；方法之四是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末与有关的辅料一起按常规方法直接压为片剂，方法之五是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末、有关的制备用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品如药物一起与有关的辅料按常规方法直接压为片剂，方法之六是将积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的粉末、有关的辅助药物一起与有关的辅料按常规方法直接压为片剂等。

除上述的六种基本方法外，还能够选择积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的其他形式或对积雪草三萜类成分所使用的药材原料进行本领域公知的方法处理后，制备各种剂型的含有积雪草三萜类成分所使用的药材原料的产品如药物。但是，需要注意的是，在上述直接使用积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的时候，应先根据所使用的积雪草三萜类成分的剂量要求，换算得到所需要使用的积雪草三萜类成分所使用的药材原料包括积雪草或积雪草粗提物等的用量。

综上所述，本发明积雪草三萜类成分及其组合物可用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究抗脑卒中后遗症产品，优选药物和食品，进一步优选药物。

(五)技术特长

本发明为预防、诊断、检测、保护、治疗和研究脑卒中后遗症等直接相关疾病提供了一种新的医药类产品，从而拓展了积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)的临床应用。

与现有的脑卒中后遗症等直接相关疾病的治疗药物相比，本发明积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)在治疗脑卒中后遗症等直接相关疾病方面的应用，具有以下显著特点：

(1)提纯的积雪草三萜类成分提高了产品的临床医疗效果和患者的生活质量，安全有效，适用人群多，应用范围广，患者群体广泛，赋予了其更高的临床医生用药方便性，是一种有良好应用前景的脑卒中后遗症治疗药物；

(2)积雪草三萜类成分具有良好的热稳定性和更长的有效期，可高温热压灭菌，对储存温度要求也低，可常温(10℃～30℃)保存，降低了其储存成本，能够更好地保证产品储存和运输的稳定性；

(3)积雪草三萜类成分制备工艺简单，质量控制简便；原药材价廉，生产成本较低，使之具备工业化生产的可能，已适合于药厂大规模生产和临床大规模使用，可用于脑卒中后遗症的长期治疗，研制和改进该抗脑卒中后遗症产品具有显著的社会效益、经济效益。

总之，本发明积极适应了现代医疗和科研领域的工作需要和人性化服务的需要，本发明为研究开发抗脑卒中后遗症产品特别是药物提供了新的药品来源，对改进和提高现有的临床医疗救治效果具有重要价值。

具体实施方式

本发明研究了现有的积雪草提取物，提供了一种积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)，便于医疗行业的安全使用。

积雪草三萜类成分及其组合物的常用药物制剂的制备方法

本发明制备粉针剂一般采用常规的冷冻干燥法，以水作为溶媒，其步骤为：取积雪草三萜类成分，加入赋形剂，加水溶解，调节pH，加入活性炭，过滤除菌，灌装，半轧塞，冷冻干燥，压塞轧盖即可。所用的赋形剂选自甘露醇、水解明胶、葡萄糖、乳糖、右旋糖苷、白蛋白、pH调节剂等中的一种或几种。每瓶含积雪草三萜类成分1～100mg。

本发明制备粉针剂也可采用喷雾干燥法，以水作为溶媒，其步骤为：取积雪草三萜类成分，加或不加赋形剂(赋形剂同上)，加水溶解，加入活性炭，过滤除菌，喷雾干燥，无菌分装，压塞轧盖即可。每瓶含积雪草三萜类成分10～100mg。

本发明制备小针剂时，以注射用水作为溶媒配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸、二甲基乙酰胺、pH调节剂、表面活性剂、环糊精、抗氧剂、金属离子络合剂、抑菌剂中的一种或几种。注射剂可以配制成溶液、微乳液、乳液、脂质体、微球、微囊或其它适合于高药物浓度的有序结构，其中可包括延迟吸收的药剂，例如单硬脂酸盐、明胶、乙烯乙酸乙酯、聚酐、聚羟基乙酸、胶原蛋白、聚正酯或聚乳酸等，以达到注射组合物的延长吸收。每支含积雪草三萜类成分1～100mg。

本发明制备葡萄糖输液或氯化钠输液，以注射用水作为溶媒，加入适量葡萄糖或氯化钠配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸、二甲基乙酰胺、pH调节剂、表面活性剂、抗氧剂、环糊精、金属离子络合剂、抑菌剂中的一种或几种。每瓶含积雪草三萜类成分1～100mg。

本发明制备片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等口服制剂，辅料可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸盐等，按常规技术制备。可包括高分子聚合物载体，如羟丙甲基纤维素或聚氧乙烯等，以达到口服组合物的延长释放。

本发明最终需要制备成积雪草三萜类成分的制剂进行应用，下面将列举实施例进行进一步说明。如有问题，可以与发明人直接联系18964515296。上述提供的一些实验数据以及下列实施例中按前述发明内容给出几种积雪草三萜类制剂制备方法及一些试验研究内容，但应该理解本发明并不仅限于此处所列出的研究内容，还应该理解此处所使用的术语仅用于描述特定的实施例，而并不是对本发明的限定。

在本发明中，以上所述的具体实施方式和以下所述的实施例均是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制发明的范围。

下面通过实施例对本发明作详细描述。

实施例1、积雪草三萜类成分粉针剂的制备

取积雪草三萜类成分10g，加入右旋糖苷30g，加1500ml注射用水，调节pH至9.0，搅拌使其溶解；加注射用水至2000ml，加3.0g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装，半轧塞；冷冻干燥，再压塞轧盖即可。

实施例2、积雪草三萜类成分粉针剂的制备

取积雪草三萜类成分50g，加入甘露醇60g，加5000ml注射用水，调节pH至8.0，搅拌使其溶解；加注射用水至6000ml，加1g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装，半轧塞；冷冻干燥，再压塞轧盖即可。

实施例3、积雪草三萜类成分粉针剂的制备

取积雪草三萜类成分1g，加入葡萄糖50g，加900ml注射用水，调节pH至8.5，搅拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1.5g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装，半轧塞；冷冻干燥，再压塞轧盖即可。

实施例4、积雪草三萜类成分小针剂的制备

取积雪草三萜类成分5g，加900ml注射用水，调节pH至9.0，搅拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加1.0g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶10ml。

实施例5、积雪草三萜类成分小针剂的制备

取积雪草三萜类成分10g，加入乙醇600ml，搅拌使其溶解；加注射用水至1000ml，加0.5g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶5ml。

实施例6、积雪草三萜类成分葡萄糖输液的制备

取积雪草三萜类成分2g，加入聚乙二醇10g，加入葡萄糖500g，加4500ml注射用水，搅拌使其溶解；加5g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；加注射用水至5000ml；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶500ml，热压灭菌。

实施例7、积雪草三萜类成分氯化钠输液的制备

取积雪草三萜类成分1g，加入氯化钠90g，加9000ml注射用水，搅拌使其溶解；加10g针用活性炭，充分搅拌30分钟；脱炭过滤；加注射用水至10000ml；用0.22μm微孔滤膜过滤；分装灌封，每瓶250ml，热压灭菌即可。

实施例8、积雪草三萜类成分片剂的制备

(1)处方

包衣液处方：胃溶薄膜衣料：85G61235，上海卡乐康包衣技术有限公司

(2)制备工艺 按以上处方分别称取处方量的主药与辅料，按等量递加法混合均匀，5％PVP无水乙醇制软材、干燥、整粒，加入硬脂酸镁混匀，测定含量，计算片重后压片，控制裸片硬度5～7kg，共制得片剂9698片，成品率为96.98％。

采用常规高效包衣锅包衣，工艺如下：将裸片(硬度5～7kg)放入包衣锅中，启动搅拌装置和鼓风加热装置，待裸片温度升至40℃时，开始打开喷枪对准片床的上1/3处喷入包衣液包衣，控制片床温度38～42℃，气磅压力6kg，包衣液流速为50mL/min，包衣膜重占包衣片重的3％。

实施例9、积雪草三萜类成分片剂的制备

(1)处方

(2)制备工艺 取原辅料分别过80目筛，混合均匀，用适量10％PVP溶液制软材，干燥，加入硬脂酸镁3g，整粒，压片，制成1000片。

实施例10、积雪草三萜类成分胶囊剂的制备

(1)处方

(2)制备工艺 分别取原料药积雪草三萜类成分及处方中其它辅料分别过100目筛，置60℃烘干，称取处方量积雪草三萜类成分与微晶纤维素、淀粉等量递加法混合均匀，用适量无水乙醇制软材，30目筛制粒，50～60℃干燥2小时，用30目筛整粒，加入处方量的滑石粉混合均匀，填充。

实例11、积雪草苷注射剂的制备

处方：

工艺：

取20℃乙醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量积雪草苷加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含积雪草苷300mg的注射剂。

实例12、积雪草酸注射剂的制备

处方：

工艺：

取20℃乙醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量积雪草酸加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含积雪草酸300mg的注射剂。

实例13、羟基积雪草酸注射剂的制备处方：

工艺：

取20℃醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量羟基积雪草酸加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含羟基积雪草酸300mg的注射剂。

实例14、羟基积雪草苷注射剂的制备

处方：

工艺：

取20℃乙醇(95％)2000g，加入活性炭5g搅拌，经砂芯组减压过滤，备用。取处方量羟基积雪草苷加入上述乙醇2000g中，加热至约40℃，充分搅拌，使之溶解澄明，然后加入处方量丙二醇，再加入新鲜注射用水使全量成10000ml，充分搅拌，混匀，加入活性炭3g，经砂芯组减压过滤澄明，合并前后滤液，再以专用砂芯精滤澄明。检查含量及澄明度合格后灌封，100℃流通蒸气灭菌30min，即得每支10ml含羟基积雪草苷300mg的注射剂。

实例15、积雪草苷胶囊剂的制备

处方：

积雪草苷                        600g

淀粉                            140g

微粉硅胶                        10g

制成                            1000粒

工艺：

取处方量积雪草苷，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg积雪草苷的胶囊剂。

实例16、积雪草苷元积雪草酸胶囊剂的制备

处方：

积雪草酸                        600g

淀粉                            140g

微粉硅胶                        10g

制成                            1000粒

工艺：

取处方量积雪草酸，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg积雪草酸的胶囊剂。

实例17、羟基积雪草苷胶囊剂的制备

处方：

羟基积雪草苷                    600g

淀粉                            140g

微粉硅胶                        10g

制成                            1000粒

工艺：

取处方量羟基积雪草苷，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg羟基积雪草苷的胶囊剂。

实例18、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸胶囊剂的制备

处方：

羟基积雪草酸                    600g

淀粉                            140g

微粉硅胶                        10g

制成                            1000粒

工艺：

取处方量羟基积雪草酸，粉碎过100目筛，加入处方量的淀粉、微粉硅胶中，混匀，直接装入胶囊，可制成1000粒每粒含600mg羟基积雪草酸的胶囊剂。

实例19、对实验性大鼠脑缺血再灌注后抑郁行为的缓解作用

1、组别

假手术组：给予与药物组等体积的生理盐水，10只；

模型组：给予与药物组等体积的生理盐水，25只；

积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸2个剂量组，各25只，分别为50，100mg/kg

2、方法

根据新药审评要求，用栓线法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型(详见《西药新药临床前研究指导原则汇编》中华人民共和国卫生部药政管理局，1993：73)。除假手术组外，其余组即栓塞大鼠大脑中动脉，作为局灶性脑缺血2小时再灌注模型，各组在缺血1小时的时候，灌胃给药，每24h灌胃给药一次。大鼠24小时清醒后，并进行不可预知刺激，除假手术组外，其余各组在18天内均进行昼夜颠倒、湿笼(100g锯屑加200ml水)，水平振荡5min(160次/min)、电击、4℃游泳、禁食、禁水、热风、夹尾刺激，每天一种刺激，18天内两个循环，且单笼饲养。于缺血再灌注后第19天每组选10只进行强迫游泳实验其余剔出实验，第20天进行自发活动实验各组大鼠分别放入80cm×80cm×75cm的敞箱中，利用图像记录分析解析仪观察5min内大鼠活动情况。

表1、对脑缺血后再灌注模型致抑郁模型的影响

^*与模型组比较，P＜0.05

3、结果

如表1所示，模型组游泳不动时间增加、自主活动探洞次数减少，自主活动休息时间增加均与假手术组有显著性差异，说明抑郁模型造模成功。积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸可缩短大鼠游泳不动时间，增加自主活动探洞次数、减少自主活动休息时间，并且表现出剂量依赖，这可能与其增强脑内5-HT神经功能有关，说明积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸对改善脑卒中后抑郁状态有作用。

实例20、对实验性大鼠脑缺血再灌注后运动行为障碍的缓解作用

1、组别

假手术组：给予与药物组等体积的生理盐水，10只；

模型组：给予与药物组等体积的生理盐水，25只；

积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸2个剂量组，各25只，分别为50mg/kg、100mg/kg。

表2、各实验组大鼠抓握能力的评定

^*与模型组比较，P＜0.05

2、方法

造模前7天给药，根据新药审评要求，用栓线法制备SD大鼠脑缺血再灌注模型(详见《西药新药临床前研究指导原则汇编》中华人民共和国卫生部药政管理局，1993：73)。除假手术组外，其余组即栓塞大鼠大脑中动脉，作为局灶性脑缺血2小时再灌注模型，各组在缺血1小时的时候，灌胃给药；再缺血1小时后每12h灌胃给药一次，72h后测试大鼠抓握能力。参照Rosenberg法进行抓握能力评估，采用长20cm、高20cm无盖铁笼测试。Ⅰ级，不能攀高，不能抓东西；Ⅱ级，不能攀高，但能抓东西；Ⅲ级，能攀高但抓而不牢；Ⅳ级，能攀高，抓而不牢，但较有抵抗力；Ⅴ级，活动敏捷，攀越近于正常。等级资料采Ridit分析。

3、结果

从表2可以看出，模型组大鼠抓握能力明显差于假手术组，说明模型制造成功。而积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸2个剂量组均能改善抓握能力，有显著差异。

实例21、对实验性大鼠脑缺血再灌注后认知功能的改善

1、动物：SD大鼠。

2、方法

将SD大鼠，200～220g，用3％水合氯醛10ml/kg腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离左、右侧颈总动脉，动脉夹阻断双侧颈总动脉血流30分钟。撤掉动脉夹再灌注。假手术组不夹动脉夹，其余步骤同上。大鼠再灌注时灌胃给药(积雪草三萜类成分组高中低3个剂量200、100、50mg/kg，阳性药为银杏叶片48mg/kg、0.1ml/10g)，假手术组和模型组灌胃给予纯净水。大鼠灌胃1次/d，连续灌胃25d。再灌注第21d进行进行大鼠水迷宫试验。

表3、各实验组大鼠抓握能力的评定

组别	水迷宫潜伏期	水迷宫穿台次数
			积雪草苷高	28.0±6.3*	9.82±1.29*
积雪草苷中	32.5±3.9*	8.13±2.11*
			积雪草苷低	40.15±3.33	8.01±1.00*
积雪草酸高	30.0±5.1*	10.63±2.16*
			积雪草酸中	43.2±4.7*	8.76±1.75*
积雪草酸低	49.3±2.16	8.54±1.93*
			羟基积雪草酸高	36.0±4.6*	11.15±1.83*
羟基积雪草酸中	47.2±2.7*	9.57±1.77*
			羟基积雪草酸低	54.45±4.53	8.96±1.65*
阳性	49.91±9.11	9.15±3.12
			模型	41.1±8.5	4.43±1.92
假手术	20.4±8.5*	9.91±1.35*

^*与模型组比较，P＜0.05

3、大鼠水迷宫试验

由一黑色有机玻璃正圆形水槽(d＝150cm)组成，水槽中有一台，可供小鼠站立。实验前，迷宫中灌水，水深没过站台2cm，水温24±1℃。

在训练的第一天大鼠被置于站台上10秒，使其了解此安全区域的存在，然后将大鼠按顺序头朝水槽依次从四个象限放入水中，计时2min，大鼠找到站台并在其上停留10s后，计时自动停止。

第五天去掉站台，大鼠的游泳起点为远离站台的两个象限点，记录2分钟内大鼠站台的潜伏期并记录穿台次数。

4、结果

从表3可以看出，模型组大鼠认知功能的改善明显差于假手术组，说明模型制造成功。而积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸3个剂量组均能改善认知功能，有显著差异。

实施例22、积雪草三萜类成分对小鼠悬尾不动时间的影响

表4、积雪草三萜类成分对小鼠悬尾实验和强迫游泳实验不动时间的影响(

，n＝10)

组别	悬尾实验：不动时间(秒)	强迫游泳实验：不动时间(秒)
			生理盐水组	139.0±42.8	171.9±27.6
多塞平组	91.5±41.6**	114.8±32.6**
			积雪草苷低剂量组	105.3±18.6*	144.9±25.7*
积雪草苷中剂量组	98.9±35.1**	136.6±29.9**
			积雪草苷大剂量组	87±31.9**	118.2±37.3**
积雪草酸低剂量组	113.5±12.2*	123.6±23.4*
			积雪草酸中剂量组	104.7±27.4**	115.4±21.2**
积雪草酸大剂量组	93±34.6**	96.8±32.9**
			羟基积雪草酸低剂量组	125.1±14.3*	114.9±21.5*
羟基积雪草酸中剂量组	115.8±32.6**	97.1±22.6**
			羟基积雪草酸大剂量组	102.3±28.9**	85.3±17.5**

^*p＜0.05；^**p＜0.01

1.实验动物：

ICR小鼠♂，19～22克，每10只/笼群养，自由觅食和饮水，室温(23±2)℃，自然光照。

2.实验方法

每组动物10只，①空白对照组，给予与药物组等体积的生理盐水；②阳性对照药组，给予药物多塞平，剂量50mg/kg；③试验药物组，给予积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)，分低、中、高剂量，分别为30mg/kg，60mg/kg，120mg/kg。每天上午灌胃一次，连续给药7d。末次给药后1h，将动物尾端2cm部位贴在一水平支撑物上，使动物成倒挂状态，支撑物放置于一敞口箱内，其头部离底面约5cm。记录小鼠6min内不动时间，各组小鼠平行操作。数据以

表示，采用Student’s-t检验方法检验差异的显著性。结果见表4。

从表4结果可以看出，积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸低、中、高3个剂量均能明显缩短小鼠悬尾时间，表明积雪草三萜类成分具有抗抑郁作用。

实施例23、积雪草三萜类成分对小鼠游泳不动时间的影响

小鼠强迫游泳实验

每组动物10只，①空白对照组，给予与药物组等体积的生理盐水；②阳性对照药组，给予药物多塞平，剂量50mg/kg；③试验药物组，给予积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)，分低、中、高剂量，分别为30mg/kg，60mg/kg，120mg/kg。每天上午灌胃一次，连续给药7d。末次给药后1h，将小鼠单独放入高20cm，直径14cm的圆柱型玻璃缸中，缸内水深10cm，水温23～25℃。从小鼠入水后记时6min，记录后4min内的累计不动时间，各组小鼠平行操作。数据以

表示，采用Student’s-t检验方法检验差异的显著性。结果见表4。

从表4结果可以看出，积雪草三萜类成分低、中、高3个剂量均能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间，表明积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸具有抗抑郁作用。

实施例24积雪草三萜类成分的利血平对抗实验

1、实验动物：ICR小鼠♂，19～22克。

2、实验方法：对利血平所致小鼠眼睑下垂的影响按文献方法。小鼠每组10只，分成4组，①空白对照组，给予与药物组等体积的生理盐水；②阳性对照药组，给予药物多塞平，剂量50mg/kg；③积雪草三萜类成分(积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸)60、120mg/kg。小鼠尾静脉注射利血平2mg/kg后，立即ig给药，60min后将动物单个竖放15s，观察出现眼睑下垂的动物数，计算拈抗率，结果见表5。

拈抗率(％)＝(每组实验动物数-眼睑下垂的动物数)/每组实验动物数

从表5结果可以看出积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸对利血平所致小鼠眼睑下垂具有拈抗作用，表明积雪草三萜类成分具有抗抑郁作用。

表5、积雪草三萜类成分利血平对抗作用

组别	剂量	小鼠眼睑下垂数(只)	拈抗率(％)
				生理盐水组		10	0
多塞平组	50mg/kg	5	50
				积雪草苷	60mg/kg	6	40
积雪草苷	120mg/kg	4	60
				积雪草酸	60mg/kg	6	40
积雪草酸	120mg/kg	5	50
				羟基积雪草酸	60mg/kg	5	50
羟基积雪草酸	120mg/kg	4	60

Claims (14)

1.积雪草三萜类成分在制备抗脑卒中后遗症产品中的应用，所述的积雪草三萜类成分是包括积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸中的一种或多种。

2.积雪草三萜类成分的组合物在制备抗脑卒中后遗症产品中的应用，所述的积雪草三萜类成分是包括积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸中的一种或多种。

3.积雪草三萜类成分的药材原料在制备抗脑卒中后遗症产品中的应用，所述的积雪草三萜类成分是包括积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸中的一种或多种。

4.根据权利要求3所述的积雪草三萜类成分的药材原料在制备抗脑卒中后遗症产品中的应用，其特征在于，所述的积雪草三萜类成分的药材原料是包括积雪草药材或积雪草粗提物中的一种。

5.积雪草三萜类成分的药材原料的组合物在制备抗脑卒中后遗症产品中的应用，所述的积雪草三萜类成分是包括积雪草苷及其苷元积雪草酸、羟基积雪草苷元羟基积雪草酸中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的积雪草三萜类成分的药材原料的组合物在制备抗脑卒中后遗症产品中的应用，其特征在于，所述的积雪草三萜类成分的药材原料是包括积雪草药材或积雪草粗提物中的一种。

7.根据权利要求1～6任一项所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的抗脑卒中后遗症产品是指用于预防、诊断、检测、保护、治疗和研究脑卒中后遗症及其后遗症直接相关疾病的产品中的一种。

8.根据权利要求7所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的脑卒中后遗症是缺血性脑卒中后遗症。

9.根据权利要求8所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的缺血性脑卒中后遗症是包括缺血性脑卒中后抑郁症、缺血性脑卒中后痴呆或缺血性脑卒中导致的肢体障碍中的一种或多种。

10.根据权利要求8所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的脑卒中后遗症是重型缺血性脑卒中后遗症。

11.根据权利要求7所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的脑卒中后遗症是指对已经发生的脑血管事件，减少其偏瘫、大小便失禁、语言障碍等后遗症的发生，并治疗已经产生的后遗症。

12.根据权利要求7所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的脑卒中后遗症是包括脑卒中后抑郁症、血管性痴呆或肢体障碍中的一种或多种。

13.根据权利要求7所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的抗脑卒中后遗症产品是包括药物、试剂、添加剂、食品、保健食品或饮料中的一种。

14.根据权利要求13所述的积雪草三萜类成分的应用，其特征在于，所述的抗脑卒中后遗症产品是保健食品或药物中的一种或多种。