CN102379887A - 心脑血管治疗药物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及对人和哺乳动物的冠心病、心绞痛、心肌梗死，心律失常、缺血性脑疾病、脑血栓、脑出血及其后遗症、血管性痴呆、末梢循环障碍疾病，包括各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、高血压、高脂血症、高粘血症；顽固性颈周综合征、椎基底动脉供血不足及其他缺血及伴有微循环障碍的疾病疾病的治疗或预防的药物——灯盏花乙素衍生物物及其制备和用途，该衍生物具有较好的存储稳定性，适用于制备对制备心脑血管疾病的治疗或预肪的药物中的应用。

Description

心脑血管治疗药物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体地说是提供心脑血管治疗药物——灯盏花乙素衍生物及其制备方法和用途。

背景技术

灯盏花乙素存在于中药灯盏花中，从药理上看，灯盏花乙素可改善微循环，增加脑血流量，提高血脑屏障通透性；改善血液流变学，降低全血粘度，抗血小板聚集作用显著，促纤溶活性，降低血纤维蛋白原，防栓溶栓；防治神经细胞内钙超载和胞外兴奋性氨基酸堆积，抑制蛋白激酶C位移激活或过度激活，减轻脑水肿，延缓缺血性脑细胞死亡，增加营养性心肌血流量，改善心肌微循环，并有一定的降血脂作用。目前临床上用于治疗脑血栓、脑出血及其后遗症；冠心病、心绞痛、心律失常；高粘血症；顽固性颈周综合征、椎基底动脉供血不足及其他缺血及伴有微循环障碍的疾病，在心脑血管疾病的治疗中具有重要的应用价值。目前，公开的文献仅报道了灯盏花乙素(C₂₁H₁₈O₁₂.CAS No.：27740-01-8，分子量：462.37)，到目前为止，国内外尚没有公开的文献报道灯盏花乙素结晶水合物C₂₁H₁₈O₁₂·nH₂O，n＝1.7～2.2]及其制备方法和用途。

发明内容

本发明所涉及的是灯盏花乙素衍生物及其制备方法和用途，进一步说，是涉及灯盏花乙素结晶水合物[C₂₁H₁₈O₁₂·nH₂O，n＝1.7～2.2，n可以是1.75、1.8、2、2.1、2.2或其之间的数字]及其制备方法和用途。

本发明获得的含有结晶水的灯盏花乙素，令人惊奇的是，含结晶水的灯盏花乙素引湿性远低于不含有结晶水的灯盏花乙素，含有结晶水的灯盏花乙素水合物比不含结晶水的更能稳定的存在，便于储存和运输，并在室温下具有良好的水溶性，易于制成水溶性的制剂。此外，无水物的潮解使得在处理时要隔绝空气防止粘连等，而水合物具有良好的滑动性，从而改善制剂的可操作性。

令人惊奇的是，特征性的，本发明的水合物的热分析(TG-DTA)图谱的失重平台下具有对应的吸热峰，热分析图谱显示出灯盏花乙素的结晶水合物，如其1.75、2.0水合物等。

本发明的灯盏花乙素水合物，为黄色或淡黄色粉末，能稳定存储。参考中国药典要求进行引湿性试验：取灯盏花乙素无水物和本发明的水合物约1g，置于干燥恒重的表面皿中，精密称重，25℃、相对湿度为75％，分别于试验0h和48h取样，计算其引湿增重的百分率，结果显示，无水物引湿性比本发明的水合物都高得多，本发明的灯盏花乙素的结晶水合物能更好地稳定存储，在RH75％、40℃避光的条件下，将灯盏花乙素的结晶水合物和灯盏花乙素的无水物样品分别密闭与西林瓶中进行加速稳定性试验，色谱条件：色谱柱：Kromasil C₁₈(200mm×4.6mm，5μm)，流动相：甲醇-0.1％磷酸(40∶60)，检测波长335nm，流速1ml/min，测定有关物质增加的幅度。结果见表1～2。

表1.引湿试验结果

表2.加速稳定性试验结果

说明本发明的灯盏花乙素结晶水合物具有更好的存储稳定性。

灯盏花乙素结晶水合物的制备包括如下方法：

方法A在反应容器中，将灯盏花全草用2～20倍量(体积比)的水、或C1-C6的低分子醇、C2-C6的低分子腈、C3-C8的低级酮、C2-C8的低分子酯等中的一种或几种为溶剂进行提取(包括冷提、加热提取、或超声提取、或微波提取或回流提取等)一次至数次(1～6次)，合并提取液，过滤、将滤液浓缩，浓缩物加水稀释，用碱调节pH为6.5～9之间(所用的碱包括碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、精氨酸、赖氨酸、C1-C12的低分子胺等普通化学上定义的药学上可接受的路易斯碱或其碱性溶液)，过滤，过硅胶层析柱、或大孔吸附树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子醇、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈等中的一种或几种进行洗脱，滤液用酸调节pH为1～5(所用的酸包括盐酸、硫酸、磷酸、碳酸、磷酸二氢钠、乳酸、C1-C8的低分子酸等化学上定义的路易斯酸或其酸性溶液)，搅拌、放置、使沉淀充分析出，将所得沉淀过滤，用水与C1-C6的低分子醇、C2-C8的低分子酯、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈、C2-C6的低级醚、C1-C6的低级卤代烃、C1-C8的低分子酸等中的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶一次或数次，过滤，水洗或C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈的一种或几种洗，将所得的固体干燥，得灯盏花乙素结晶水合物；

或者方法B

在反应容器中，将灯盏花全草用2～20倍量(体积比)的水、碱性溶液或C1-C6的低分子醇等中的一种或几种为溶剂进行提取(包括冷提、加热提取、渗鹿或超声提取、或微波提取或回流提取等)一次至数次(1～6次)，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，浓缩物加水稀释，用碱调节pH为6.5～9之间(所用的碱包括碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、碳酸钾、枸橼酸钠、精氨酸、赖氨酸、C1-C12的低分子胺等普通化学上定义的药学上可接受的路易斯碱或其碱性溶液等)，过滤，滤液过硅胶层析柱及大孔吸附树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子醇、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈等中的一种或几种进行洗脱，滤液用酸调节pH为1～5(所用的酸包括盐酸、硫酸、磷酸、碳酸、磷酸二氢钠、乳酸、C1-C8的低分子酸等化学上定义的路易斯酸或其酸性溶液)，放置，使沉淀充分析出，将所得沉淀过滤，用水或C1-C6的低分子醇、C2-C8的低分子酯、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈、C2-C6的低级醚、C1-C6的低级卤代烃、C1-C8的低分子酸等中的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥，得灯盏花乙素结晶水合物；

本发明所涉及的提取过程中按照常规可使用提取溶剂充分浸泡灯盏花药材粉后再实施其它制备程序。本发明在制备过程中的过滤的方式可以是用滤布、漏斗、垂熔玻璃滤器、砂芯滤棒、板框式压滤机、微孔滤膜、陶瓷膜或超滤等的一种或几种过滤方式进行一次或几次过滤(1～6次).在制备灯盏花乙素结晶水合物所涉及的采用超滤除去杂质的方法或过程中，超滤器可选用平板式、卷式、管式、中空纤维式或圆盒式等，优选卷式和中空纤维式超滤器，采用截留相对分子质量4000～60000的超滤膜除去杂质，优选相对分子质量6000～30000的超滤膜，更优选相对分子质量6000～20000的超滤膜。

本发明的灯盏花乙素结晶水合物两种制备方法的制备过程中，“提取液用碱调节pH为6.8～9之间(所用的碱包括碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、碳酸钾、枸橼酸钠、C1-C12的低分子胺等普通化学上定义的药学上可接受的路易斯碱或其碱性溶液)，过滤，滤液过硅胶层析柱及大孔吸附树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子醇、C3-C8的低级酮、C2-C8的低分子酯、C2-C6的低分子腈的一种或几种进行洗脱，滤液用酸调节pH为1～5(所用的酸包括盐酸、硫酸、磷酸、碳酸、磷酸二氢钠、乳酸、C1-C8的低分子酸等化学上定义的路易斯酸或其酸性溶液)，放置，使沉淀充分析出”的过程，该过程在制备过程中可将酸沉淀后得到的沉淀再以水稀释后重复上述过程，进行1～3次，以实现纯化目的，之后再进行重结晶过程。

本发明涉及的大孔吸附树脂可包括如下型号的大孔吸附树脂：D-101型、DA-201型、MD-05271型、GDX-105型、CAD-40型、XAD-4型、SIP系列、D-型、X-5型、AB-8型、LD-605型、LD-601型、DM-130型、R-A型、CHA-101型、WLD型(混合型)、H-107型、NKA-9型等。

本发明中的水合物的制备方法A和方法B的不同步骤，包括在提取和精制过程的方法还可以交叉使用，用于制备本发明的化合物。

本发明中的低分子醇的碳原子数定义为C1-C6(即：1-6个碳原子的醇)，如甲醇、乙醇、异丙醇等；低分子醚的碳原子数定义为C2-C8(即：2-8个碳原子的醚)，如乙醚、异丙醚、丁醚、四氢呋喃等；低分子卤代烃的碳原子数定义为C1-C6(即：1-6个碳原子的卤代烃)，包括二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿等；低分子酯的碳原子数定义为C2-C8(即：2-8个碳原子的酯)，包括醋酸丁酯、乙酸乙酯、甲酸乙酯等；低分子直链或支链烷烃或环烷烃的碳原子数定义为C5-C10，包括戊烷、正己烷、环己烷、石油醚等；低分子芳香烃的碳原子数定义为C6-C12(即：6-12个碳原子的芳香烃)，包括苯，甲苯等；C1-C8的低分子酸的碳原子数定义为1-8个碳原子的有机酸，包括甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、马来酸、酒石酸等；C3-C8的低分子酮定义为3-8个碳原子的酮，包括丙酮，丁酮、异己酮等；C2-C6的低分子腈(即：2-6个碳原子的腈)，包括乙腈、丙腈等；C1-C12的低分子胺定义为1-12个碳原子的有机胺，包括二甲胺、二乙胺、三乙胺、环己胺、二环己胺、叔丁胺、N-甲基吗啉、吡啶、甲基吡啶、手性或消旋的碱性氨基酸，如L-精氨酸、DL-赖氨酸等；关于任何一类描述为“低分子”化合物的碳原子数量的标记方法只要在本申请的文本中出现一次，其它任何未进行标记的描述为“低分子”的同类化合物的碳原子数与本文中已经标明的数量是一致的。

灯盏花乙素水合物的结晶或重结晶溶剂，优选水、甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮、丁酮、异己酮、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸、二氯甲烷、氯仿、乙醚、异丙醚、四氢呋喃、石油醚、苯中的一种或几种。

本发明的产物的干燥方式可以为在不同温度(如20-100℃)、干燥时间(1小时到数日)、或附有其它干燥剂(包括硅胶，五氧化二磷、无水氯化钙、无水硫酸钠等)的环境条件下、或使用常压或减压的方式对最后的产物进行干燥。其干燥温度优选在30～70℃。

本发明的灯盏花乙素可具有不同的晶型，例如，从不同溶剂体系为结晶或重结晶体系而制备出来的灯盏花乙素1.75、2水合物的X-射线粉末衍射图谱可以有所不同。本发明中的结晶水合物或者实施例中的结晶水合物的溶液在同一HPLC条件下的其主峰色谱保留时间具有一致性。

本发明的灯盏花乙素水合物用途：本发明的灯盏花乙素水合物用于制备注射用冻干粉针制剂、粉针制剂、大输液制剂、小水针注射剂，固体制剂等。

本发明的灯盏花乙素水合物用于制备固体制剂的片剂(包括普通片、控缓释片和胶囊、口含片、分散片、口崩片等)、胶囊(包括普通胶囊、控缓释胶囊等)、颗粒剂，混悬剂、滴丸剂等，其中可含有药学上可接受的填充剂，如淀粉、变性淀粉、乳糖、微晶纤维素、环糊精、山梨醇、甘露醇、木糖醇、磷酸钙、磷酸氢钙、氨基酸、聚乙二醇4000-20000、泊洛沙姆、明胶、硬脂酸、硬脂酸钠等；药学上可接受的崩解剂，如淀粉、变性淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素、表面活性剂、；药学上可接受的润湿剂和粘合剂，如胶化淀粉、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、海藻酸及其盐；药学上可接受的润滑剂和助流剂，如硬脂酸、硬脂酸镁、聚乙二醇4000-8000、滑石粉、微粉硅胶、十二烷基硫酸镁等；药学上可接受的甜味剂和香精，如蔗糖、阿斯巴甜、甜蜜素、糖精钠、三氯蔗糖、食用香精等；药学上可接受的助悬稳定剂，如黄原胶、瓜尔胶、明胶、阿拉伯胶、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、西黄蓍胶、海藻酸钠等；其它药学上可接受的稳定剂，如β-环糊精等。

本发明的结晶水合物不同于无水物的潮解使得在处理时要隔绝空气防止粘连等，而结晶水合物具有良好的滑动性，从而改善制剂的可操作性；并使制备的固体制剂具有良好的溶出性能，使得其容易被吸收进入血液循环，改善生物利用度，并有利于快速发挥其作用。

灯盏花乙素水合物针剂，其制备方法为：

冻干粉针制剂的制备方法为：取灯盏花乙素水合物，可以加药学上可接受的助溶剂、冻干支持剂或辅形剂、稳定剂、注射用水，搅拌使溶解，若需要，可用药学上可接受的酸碱调节pH为4.5～7.5，加活性碳0.005～1％(W/V)搅拌15～45min，过滤，补水，无菌过滤，按5～400mg/瓶(以主药计)分装，冷冻干燥，压塞，得成品。

灯盏花乙素水合物小容量注射液及其制备工艺：灯盏花乙素水合物加注射用水和药学上可接受的附加剂，例如：药学上可接受的助溶剂、pH调节剂、药学上可接受的抗氧剂、惰性气体，过滤、除菌制成灭菌小容量注射液，其pH值在4.5～7.5之间。

药学上可接受的冻干支持剂或辅形剂可以含有乳糖、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、右旋糖酐、氨基酸或其盐(包括甘氨酸、牛磺酸、精氨酸等)、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、去氧胆酸钠等的一种或几种。

其药学上可接受的pH调节剂可以是药学上可接受的无机酸或有机酸、无机碱或有机碱，也可以是广义的路易斯酸或碱，可以含有一种或者几种，可以是盐酸、磷酸、丙酸、醋酸及醋酸盐、如醋酸钠等，乳酸以及乳酸药用盐、枸橼酸药用盐、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾、磷酸盐、酒石酸及其药用盐、硼砂、硼酸、丁二酸、己酸、己二酸、反丁烯二酸、顺丁烯二酸、三羟基氨基甲烷、二乙醇胺、乙醇胺、异丙醇胺、二异丙醇胺、2-氨基-2-(羟甲基)1，3-丙二醇胺、1，2-己二胺、N-甲基葡萄胺、二异丙胺以及它们的盐，多羟基羧酸及药用盐，如葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、乳糖酸、苹果酸、苏糖酸、葡庚糖酸、氨基酸及氨基酸盐等中的一种或者几种。

其药学上可接受的抗氧剂和稳定剂可以是亚硫酸、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、焦亚硫酸盐、连二亚硫酸盐、硫代硫酸盐，有机硫化合物硫脲、谷胱甘肽、二巯基丙醇、巯基乙酸及盐、硫代乳酸及盐、硫代二丙酸及盐、苯酚类化合物，如没食子酸及盐、咖啡酸、咖啡酸盐、阿魏酸、阿魏酸盐、二叔丁基对苯酚、2，5-二羟基苯甲酸、2，5-二羟基苯甲酸盐、苯酚或其衍生物、水杨酸或其盐；氨基酸以及其盐；抗坏血酸及抗坏血酸盐、异抗坏血酸及异抗坏血酸盐、烟酰胺、酒石酸、硝酸盐、磷酸盐、醋酸药用盐、柠檬酸盐、EDTA及EDTA盐、如EDTA二钠、EDTA四钠、N-二(2-羟乙基)甘氨酸、α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、葡糖基-环糊精(G₁-CYD)、麦芽糖基-β-环糊精、羟丙基β-环糊精、2-羟丙基β-环糊精(2-HP-β-CYD)、3-羟丙基β-环糊精(3-HP-β-CYD)、磺丁醚-β-环糊精(SBE-β-CD)，如(SBE₇-β-CD)、SBE₄-β-CD等中的一种或者几种。

其药学上可接受的助溶剂可以是碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸氢二钾、乳酸钠、枸橼酸钠、N-甲基葡萄胺、N-乙基葡萄胺、烟酰胺、乙二胺、二乙胺、乙醇胺(包括二乙醇胺、三乙醇胺等)、三羟基氨基甲烷、L或D或DL型氨基酸(包括L或D或DL型精氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、组氨酸等)等药学上可接受的有机胺、吐温20-80、泊洛沙姆(包括泊洛沙姆124，188，237，338，407等)、聚乙二醇200-2000、乙醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇、葡糖基-环糊精(G₁-CYD)、麦芽糖基-β-环糊精、羟丙基β-环糊精、2-羟丙基β-环糊精(2-HP-β-CYD)、3-羟丙基β-环糊精(3-HP-β-CYD)、磺丁醚-β-环糊精(SBE-β-CD)，如(SBE₇-β-CD)、SBE₄-β-CD等、以及水等中的-种或者几种。

冻干支持剂或辅形剂可以是葡萄糖、果糖、木糖醇、山梨醇、甘露醇、转化糖、麦芽糖、右旋糖酐、N-甲基葡萄胺、N-乙基葡萄胺、烟酰胺、乙二胺、二乙胺、乙醇胺(包括二乙醇胺、三乙醇胺等)、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸氢二钾、乳酸钠、、枸橼酸钠、L或D或DL型氨基酸(包括L或D或DL型精氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、组氨酸等)、吐温20-80、泊洛沙姆(包括泊洛沙姆124，188，237，338，407等)、聚乙二醇200-2000、乙醇、乙二醇、丙三醇、葡糖基-环糊精(G₁-CYD)、麦芽糖基-β-环糊精、羟丙基β-环糊精、2-羟丙基β-环糊精(2-HP-β-CYD)、3-羟丙基β-环糊精(3-HP-β-CYD)、磺丁醚-β-环糊精(SBE-β-CD)，如(SBE₇-β-CD)、SBE₄-β-CD等、以及水等中的一种或者几种。

其药学上可接受的等渗调节剂可以是葡萄糖、果糖、木糖醇、山梨醇、甘露醇、转化糖、麦芽糖、右旋糖酐、氯化钠、氯化钾、乳酸钠等中的一种或几种。

去热源和除菌方式可以是加入配液量0.005～3％的活性炭去热源，微孔滤膜除菌和热压灭菌，也可以采用超滤除菌、去热源。超滤方法中，超滤器可选用平板式、卷式、管式、中空纤维式或圆盒式等，优选卷式和中空纤维式超滤器，采用截留相对分子质量为5万至30万的滤膜除去大部分发热性物质和细菌后，再采用截留相对分子质量4000～30000的超滤膜除去剩余热源，优选相对分子质量6000～30000的超滤膜。

本发明的灯盏花乙素结晶水合物，适用于制备人和哺乳动物的冠心病、心绞痛、心肌梗死、心律失常、缺血性脑疾病、脑血栓、脑栓塞、脑出血及其后遗症、血管性痴呆；末梢循环障碍疾病如各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、顽固性颈周综合征、椎基底动脉供血不足及其他缺血及伴有微循环障碍的疾病、高粘血症等疾病的治疗或预防的药物中的应用。

用量用法：一般情况下，于成人，肌内注射：5-200mg/次，一日1-3次。静脉注射：5-400mg/次，以25％葡萄糖注射液稀释。静脉滴注：5-400mg，以5％葡萄糖注射液或0.9％氯化钠注射液250～500ml稀释，一日1-2次。儿童减半量以上使用。经胃肠道给药用量用法：10～70kg体重的人或动物，一般情况下10～400mg/天，分1-3次给药；儿童减半量以上使用。

附图说明

图1为灯盏花乙素1.75水合物的热分析图谱，

图2为灯盏花乙素2水合物的热分析图谱，

测试条件：Setaram公司Setsys 16，样品量5mg左右，升温速度：10K/min，N₂流速：50ml/min，温度：一般为室温～400℃左右。

具体实施方式

实施例1灯盏花乙素1.75结晶水合物的制备在提取罐中，将40目左右的灯盏花全草干粉2kg用甲醇200ml、乙醇12L、水2L为混合溶剂回流提取3次，经滤布粗滤，合并提取液，再以0.45-1μm微孔滤膜过滤，再采用截留相对分子质量10000～30000的超滤膜过滤，将滤液浓缩致几近无醇，再用碳酸氢钠溶液调节稀释液的pH为7.2左右，过滤，滤液过D101型大孔吸附树脂、水洗，收集洗脱液，过滤，滤液用稀磷酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、氯仿洗，抽滤，所得固体用甲醇2ml、丙酮150ml、氯仿5ml、水10ml的溶剂进行重结晶2次，过滤，水洗，固体45℃左右真空干燥24小时，得黄色粉末1.1g，熔点：193℃变灰(ELECTROTHERMAL MELTING POINT APPARATUS，未校正)；紫外：取其5μg/ml的甲醇溶液，照分光光度法测定，发现在波长284nm与335nm处有最大吸收；HPLC：主色谱峰与市售灯盏花乙素注射液主峰保留时间相同；ESI-MS：m/z：461；红外光谱：v^KBr _max cm^-13380(宽)、2920、1721、1661、1608、1557、1498、1467、1362、1249、1215、1184、1084、1043、923，846、740、619，卡氏法测定水分为6.61％，热分析：平台失重约6.37％，这与样品含有1.75个结晶水的结果(理论值6.39％)在误差范围内(见附图1)，元素分析理论值：C 51.07％，H4.39％；实测值：C 51.19％，H4.46％。

实施例2灯盏花乙素2水合物的制备在提取罐中，将40目左右的灯盏花全草干粉4kg用乙醇32L、水4L为混合溶剂回流提3次，过滤，合并提取液，将滤液浓缩致几近无醇，加水稀释，再用碳酸钠溶液调节稀释液的pH为7.5左右，以0.2-1μm陶瓷膜过滤，滤液用D101大孔树脂吸附、水洗，收集洗脱液，过滤，滤液用醋酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、氯仿洗，抽滤，所得固体加水稀释，搅拌下加碳酸钠溶液使其溶解，并调节稀释液的pH为7.5左右，采用截留相对分子质量8000～20000的超滤膜(聚砜中空纤维膜组件，纤维孔径约0.011μm，内径约为1.1mm)过滤，滤液用醋酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、氯仿洗，抽滤，所得固体用甲醇2ml、乙醚10ml、丙酮300ml、正丁醇5ml、水30ml的溶剂进行重结晶2次，过滤，水洗，固体45℃左右真空干燥6小时，得黄色粉末2.87g；熔点：192℃变灰(未校正)，紫外光谱：取其5μg/ml的甲醇溶液，照分光光度法测定，发现在波长284nm与335nm处有最大吸收，在310nm有最小吸收；红外光谱：v^KBr _maxcm^-13513、3376(宽)、2920、1721、1661、1608、1574、1498、1467、1442、1361、1249、1225、1183、1150、1083、1043、902，845、740、619、589，ESI-MS：m/z：461；卡氏法测定水分为7.74％，热分析：平台失重约7.26％，这与样品含有2个结晶水的结果(理论值7.23％)在误差范围内(见附图2)，元素分析理论值：C 50.61％，H4.45％；实测值：C 50.76％，H4.57％。

实施例3灯盏花乙素2水合物的制备在提取罐中，将40目左右的灯盏花全草干粉2kg用80％乙醇3L充分润湿后，用乙醇16L、水3L为混合溶剂超声提取3次，合并提取液，经滤布粗滤，再以0.45μm微孔滤膜过滤，采用截留相对分子质量10000～30000的超滤膜(聚砜中空纤维膜组件，纤维孔径约0.011μm，内径约为1.1mm)过滤，将滤液减压浓缩致几近无醇，加水稀释，再用碳酸钠溶液调节稀释液的pH为7.5左右，过滤，D101大孔树脂吸附、水洗，收集洗脱液，过滤，滤液用醋酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、氯仿洗，抽滤，所得固体加水稀释，搅拌下加磷酸钠溶液使其溶解，并调节稀释液的pH为7.5左右，采用截留相对分子质量8000～20000的超滤膜过滤，滤液用醋酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、氯仿洗，抽滤，所得固体用甲醇1ml、异丙醇5ml、丙酮120ml、乙酸5ml、水10ml为溶剂进行重结晶2次，过滤，水洗，固体50℃左右真空干燥4小时，得黄色粉末1.21g；熔点：189℃变灰(未校正)，紫外光谱：10μg/ml的甲醇溶液，波长284nm与335nm处有最大吸收，在310nm有最小吸收；HPLC：主色谱峰与市售灯盏花乙素注射液主峰保留时间相同；红外光谱：v^KBr _maxcm^-13513、3376(宽)、2920、1721、1661、1608、1574、1498、1467、1442、1361、1249、1225、1183、1150、1083、1043、902，845、740、619、589，ESI-MS：m/z：461；卡氏法测定水分为7.68％，热分析TG-DSC：平台失重约7.06％，这与样品含有2个结晶水的结果(理论值7.23％)在误差范围内；元素分析理论值：C50.61％，H4.45％；实测值：C 50.55％，H4.61％。

实施例4灯盏花乙素1.75水合物的制备在提取罐中，将40目左右的灯盏花全草干粉3kg用60％乙醇4L充分润湿后，用饱和碳酸氢钠溶液180ml、乙醇18L、水4L为混合溶剂超声提取3次，合并提取液，经滤布粗滤，再以0.45μm陶瓷膜过滤，采用截留相对分子质量10000～30000的超滤膜过滤，再用碳酸钠溶液或醋酸调节稀释液的pH为7.5左右，滤液过硅胶层析柱，水洗，所得液体再过D101大孔吸附树脂、水洗，收集洗脱液，过滤，滤液用醋酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、氯仿洗，抽滤，所得固体加水稀释，搅拌下加碳酸钠溶液使其溶解，并调节稀释液的pH为7.5左右，采用截留相对分子质量8000～20000的超滤膜(聚砜中空纤维膜组件，纤维孔径约0.011μm，内径约为1.1mm)过滤，滤液用醋酸调节pH＝2～3，静置，待沉淀充分析出，滤过，沉淀用水洗致近中性、再用乙醇、异己酮洗，抽滤，所得固体用甲醇1ml、异丙醇5ml、丙酮160ml、乙酸乙酯5ml、乙腈3ml、水10ml为溶剂进行结晶，过滤，水洗，固体50℃左右真空干燥4小时，得黄色粉末1.56g；熔点：194℃变灰(未校正)，紫外光谱：10μg/ml的甲醇溶液，波长284nm与335nm处有最大吸收，在310nm有最小吸收；HPLC：主色谱峰与市售灯盏花乙素注射液主峰保留时间相同；ESI-MS：m/z：461；卡氏法测定水分为6.79％，热分析TG-DSC：平台失重约6.32％，这与样品含有1.75个结晶水的结果(理论值6.39％)在误差范围内；元素分析理论值：C 51.07％，H4.39％；实测值：C 50.95％，H4.51％。取少量样品140℃、五氧化二磷存在下干燥3h得其无水物。

实施例5取灯盏花乙素二水合物5g(按无水物计)、碳酸钠0.6g、加甘露醇5g、磷酸二氢钠0.2g、抗坏血酸钠0.2g、EDTA二钠0.02g，加20-50℃注射用水250ml左右，搅拌使溶，用磷酸和磷酸氢二钠溶液调节pH为5.5～7.1，加活性碳0.01～0.5％(W/V)搅拌15-30min，过滤，补注射用水至300ml，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量6000～20000的超滤膜过滤，按25、50mg/瓶或100mg/瓶(按灯盏花乙素无水物计)分装，真空冷冻干燥，压塞，得冻干品。

实施例6取灯盏花乙素水合物5g、碳酸氢钠1g、加甘露醇30g、抗坏血酸钠1g、EDTA二钠0.02g，加20-50℃注射用水850ml左右，搅拌使溶，用柠檬酸和柠檬酸钠溶液调节pH为7.0左右，加活性碳0.3％(W/V)搅拌20min，过滤，补注射用水至1000ml，加活性碳0.01～0.5％(W/V)搅拌15-30min，过滤，用0.22微米微孔滤膜过滤，按5、10、20或50mg/瓶(按灯盏花乙素无水物计)分装，真空冷冻干燥，压塞，得冻干品。

实施例7取灯盏花乙素水合物5g(按无水物计)，L-精氨酸1.8g，加山梨醇15g，磷酸二氢钠0.5g，酒石酸钠0.2g、盐酸半胱氨酸0.1g、EDTA二钠0.02g，加30-50℃注射用水400ml左右，搅拌使溶，用酒石酸和酒石酸钠溶液调节pH为5.6～6.5，加活性碳0.5％(W/V)搅拌30min，过滤，补注射用水至500ml，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量6000～20000的超滤膜过滤，按20、50mg/瓶或100mg/瓶(按无水物计)分装，真空冷冻干燥，压塞，得冻干品。

实施例8取灯盏花乙素二水合物5g(按无水物计)，赖氨酸1.47g，加甘露醇10g，磷酸二氢钠0.5g，盐酸半胱氨酸钠0.1g、EDTA二钠0.05g，加30-50℃注射用水420ml左右，搅拌使溶，用柠檬酸和柠檬酸钠溶液调节pH为5.6～6.2，加溶液量0.5％(W/V)活性碳搅拌30min，过滤，补注射用水至500ml，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量6000～20000的超滤膜过滤，按5、10、20、50mg/瓶或100mg/瓶(按灯盏花乙素无水物计)分装，真空冷冻干燥，压塞，得冻干品。

实施例9灯盏花乙素水合物注射液的制备灯盏花乙素水合物(按干品计)10g，磷酸氢二钠4g，柠檬酸钠2g，亚硫酸氢钠1g、丙二醇10ml、EDTA二钠0.1g，避强光下加注射用水、通氮气、搅拌使溶解，柠檬酸和柠檬酸钠溶液调节pH为5.6～6.3，加活性碳0.1％(W/V)搅拌15～45min，过滤，补水至2000ml左右，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量6000～20000的超滤膜过滤，溶液通氮气饱和，按主药10、20、25、40mg、50mg或100mg/支分装，灭菌得成品。

实施例10灯盏花乙素水合物注射液的制备灯盏花乙素水合物(按干品计)5g，吐温-80 20ml，盐酸半胱氨酸1g、丙二醇20ml、EDTA二钠0.1g，避强光下加注射用水、通氮气、搅拌使溶解，柠檬酸和柠檬酸钠溶液调节pH为5.6～6.3，加活性碳0.1％(W/V)搅拌45min，过滤，补水至2000ml左右，用0.22微米微孔滤膜过滤或者采用截留相对分子质量6000～20000的超滤膜过滤，溶液通氮气饱和，按主药2.5、5、10mg/支分装，灭菌得成品。

实施例11灯盏花乙素水合物注射液的制备灯盏花乙素水合物(按干品计)10g，精氨酸4g，柠檬酸钠2g，盐酸半胱氨酸1g、丙二醇20ml、EDTA二钠0.2g，避强光下加注射用水、通氮气、搅拌使溶解，柠檬酸和柠檬酸钠溶液调节pH为5.6～6.3，加活性碳0.1％(W/V)搅拌35min，过滤，补水至5000ml左右，用0.22微米微孔滤膜过滤，溶液通氮气饱和，按主药10、20、25、40mg或50mg/支分装，灭菌得成品。

实施例12灯盏花乙素水合物注射液的制备称取葡萄糖250g加入注射用水中，搅拌使溶解完全，加入配液量0.5％的活性炭，加热10-30分钟左右，经砂滤棒过滤脱炭；将灯盏花乙素二水合物(按干品计)5g与上述滤液混合均匀，加磷酸二氢钠3g，酒石酸钠1g、丙三醇20ml、磺丁醚-β-环糊精1g，EDTA二钠0.05g，溶解完全后，加注射用水至5000ml，用1-3M盐酸或乳酸或柠檬酸以及柠檬酸钠溶液调节pH值在4.5-6.0的范围内，加配液量0.05％的活性炭，加热搅拌10-30分钟左右，过滤脱炭，再经0.22um微孔滤膜过滤一到两次，溶液通高纯氮气饱和，检验澄明度等后溶液按主药25、50mg或100mg支灌封，灭菌，包装即得。

实施例13灯盏花乙素水合物氯化钠输液的制备：将灯盏花乙素水合物(按无水物计)25g、氯化钠425g、枸橼酸钠5g、EDTA二钠1g，加入注射用水中，溶液通高纯氮气饱和，搅拌使溶解完全，用枸橼酸溶液和枸橼酸钠溶液调节pH值在5.0-6.5的范围内，加注射用水至50L，加配液量0.05％的活性炭，搅拌10-30分钟左右，过滤脱炭，再经0.22um的膜精滤或者采用截留相对分子质量6000～20000的超滤膜过滤，经半成品化验，待其含量、pH值和澄明度合格后，在高纯氮气下，灌装于50ml、100ml或250ml瓶或塑料袋中，灭菌，包装即得。

实施例14灯盏花乙素水合物氯化钠输液的制备：将灯盏花乙素水合物(按无水物计)20g、氯化钠425g、酒石酸钠5g、EDTA二钠0.5g，加入注射用水中，溶液通高纯氮气饱和，搅拌使溶解完全，用酒石酸溶液和酒石酸钠溶液调节pH值在5.0-6.5的范围内，加注射用水至50L，加配液量0.05％的活性炭，搅拌10-30分钟左右，过滤脱炭，再经0.22um的微孔膜精滤2次，经半成品化验，待其含量、pH值和澄明度合格后，在高纯氮气下，灌装于50ml、100ml或250ml瓶或塑料袋中，灭菌，包装即得。

实施例15灯盏花乙素水合物片(50mg/片)

处方：灯盏花乙素2水合物    50g

微晶纤维素                 135g

乳糖                       10g

羧甲基淀粉钠               5g

β-环糊精                  5g

5％PVP30(50％的乙醇水溶液) 适量

硬脂酸镁                   2g

将灯盏花乙素水合物、微晶纤维素、乳糖、β-环糊精、羧甲基淀粉钠过100目筛，用5％PVP30的50％的乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加硬脂酸镁混匀，压片。

实施例16灯盏花乙素水合物胶囊(50mg/粒)

处方：灯盏花乙素2水合物   50g

微晶纤维素                65g

乳糖                      10g

羧甲基淀粉钠              5g

β-环糊精                 5g

5％PVP30(50％的乙醇水溶液)适量

硬脂酸镁                  2g

将灯盏花乙素水合物、微晶纤维素、乳糖、β-环糊精、羧甲基淀粉钠过100目筛，用5％PVP30的50％的乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加硬脂酸镁混匀，灌装胶囊。

实施例17灯盏花乙素水合物分散片(50mg/片)

处方：灯盏花乙素水合物     50g

微晶纤维素                 135g

乳糖                       10g

聚乙二醇6000               3g

低取代羟丙基纤维素         10g

羧甲基淀粉钠               5g

β-环糊精                  5g

阿司帕坦                   1g

5％PVP30(50％的乙醇水溶液)适量

硬脂酸镁                  2g

将灯盏花乙素水合物、微晶纤维素、乳糖、聚乙二醇6000、低取代羟丙基纤维素、β-环糊精、羧甲基淀粉钠、阿司帕坦过100目筛，用5％PVP30的50％的乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加已过100目筛的硬脂酸镁混匀，压片。

实施例18灯盏花乙素水合物胶囊(50mg/粒)

处方：灯盏花乙素1.75水合物50g

微晶纤维素                65g

玉米淀粉                  10g

低取代羟丙基纤维素        5g

β-环糊精                 5g

5％PVP30(50％的乙醇水溶液)适量

微粉硅胶                  2g

将灯盏花乙素水合物、微晶纤维素、玉米淀粉、β-环糊精、低取代羟丙基纤维素过100目筛，用5％PVP30的50％的乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加微粉硅胶混合，灌装胶囊。

实施例19灯盏花乙素1.75水合物片(50mg/片)

处方：灯盏花乙素1.75水合物50g

甘露醇                    120g

乳糖                      25g

羧甲基淀粉钠              5g

β-环糊精                 5g

5％PVP30(50％的乙醇水溶液)适量

硬脂酸镁                  2g

将灯盏花乙素水合物、甘露醇、乳糖、β-环糊精、羧甲基淀粉钠过100目筛，用5％PVP30的50％的乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，干燥，过14-20目筛整粒后，加硬脂酸镁混匀，压片。

实施例20灯盏花乙素水合物颗粒(100mg/包)

处方：灯盏花乙素水合物100g(以无水物计)

甘露醇                185g

乳糖                  710g

甲基纤维素            3g

黄原胶                5g

固体食用香精          1g

5％羟丙基甲基纤维素   适量

将灯盏花乙素水合物、甘露醇、乳糖、甲基纤维素、黄原胶、食用香精过100目筛，用5％的羟丙基甲基纤维素的50％乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，60℃以下干燥，过14-20目筛整粒后，分包装。

实施例21灯盏花乙素水合物混悬剂(25mg/包)

处方：灯盏花乙素水合物25g(以无水物计)

甘露醇                165g

乳糖                  780g

黄原胶                8g

固体食用香精          1g

5％羟丙基甲基纤维素   适量

将灯盏花乙素水合物、甘露醇、乳糖、食用香精过100目筛，用5％的羟丙基甲基纤维素的50％乙醇水溶液适量为粘合剂制软材，过18-24目筛制粒，60℃以下干燥，过14-20目筛整粒后，将已过100目筛的黄原胶与上述颗粒混匀，分包装。

实施例22灯盏花乙素水合物滴丸剂

处方：灯盏花乙素2水合物25g(以无水物计)

聚乙二醇6000           325g

聚乙二醇4000           30g

硬脂酸                 20g

将聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、硬脂酸加热使之融化，将过100目筛的灯盏花乙素水合物加入其中，搅拌使混匀，保温下滴入植物油或二甲基硅油中，待冷却成丸，收集滴丸，干燥即得。

实施例23

药理学试验如下：

Wistar雄性大鼠48只，体重250～300g，随机分为4组：假手术组、缺血再灌组和灯盏花乙素1.75水合物组、灯盏花乙素2水合物组，每组12只。本发明药物组；采用灯盏花乙素水合物的生理盐水腹腔给药，剂量为75mg/kg，每天两次，连续7天，最后一次给药60min后实施脑缺血手术；假手术组和缺血再灌组分别给以等容积的生理盐水。

大鼠用10％水合氯醛(3.5ml/kg)腹腔注射麻醉，仰卧位固定，参照文献用Zea Longa线拴改良法造模[上海交通大学学报(医学版)2007，27(10)：1218-1222]；假手术组栓线只插入10mm，其余步骤同模型组，动物苏醒后出现手术侧Homer征和对侧体运动障碍即为模型制备成功。造模成功后本发明药物组一天给药2次，剂量同前，假手术组和缺血再灌组分别给以等容积的生理盐水。造模后2h抽出线，再灌注24小时后处死大鼠，迅速取脑称重。低温下用生理盐水制成10％脑组织匀浆液，低温离心，3000r/min离心10min，弃沉淀，取上清液，按市售测试超氧歧化酶SOD、丙二醛MDA、一氧化氮NO、一氧化氮合酶NOS相应试剂盒的说明书分别测定SOD、MDA、NO、NOS含量或活性，结果见表3。

表3.本发明药物对大鼠脑缺血再灌注脑组织中NO、NOS、MDA、SOD的影响

结果表明，与假手术组相比，缺血再灌模型组大鼠脑组织中SOD活性明显降低，MDA、NO含量及NOS活性明显增加(P＜0.01)；与缺血再灌模型组相比，本发明药物大鼠脑组织中SOD活性明显升高，NOS活性降低，MDA、NO含量明显减少(P＜0.01)。

随着对缺血性脑损伤的病理机制认识不断加深，人们发现氧自由基、兴奋性氨基酸、一氧化氮(NO)、单胺类递质、Ca²⁺超载等多种因素参与了损伤过程。在缺血性脑损伤中，缺血过程中可产生大量的氧自由基。SOD是细胞内主要的对抗氧自由基的酶促防御系统，它通过歧化方式清除超氧阴离子自由基，保护生物体免受自由基的攻击。目前已肯定SOD可显著减轻脑缺血引起的损伤，不仅给予外源性SOD有抗脑缺血损伤的作用，而且利用转基因动物敲除或转入SOD基因后均可分别拮抗或促进脑缺血的损伤。可见SOD值的高低直接反映机体清除氧自由基的能力。

各种不同的氧自由基攻击生物膜中的不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，形成一系列的脂质自由基及其降解产物MDA。MDA作为氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的代谢产物，其含量的变化可间接地反映组织中氧自由基含量变化。

研究表明，NO是具有生物活性信使小分子，可自由穿过细胞膜，作用于胞内的靶分子。在生物体内，NO生成后很快被氧化灭活，以硝酸根和亚硝酸根的形式存在于细胞的内外液中。低浓度的NO能使血管扩张，抑制血小板集聚与粘附，使谷氨酸调控的离子通道下调，防止细胞内钙超载，因而对细胞有保护作用；但在高浓度下，NO可与超氧阴离子反应生成超氧亚硝酸根离子，超氧亚硝酸根离子可以降解为OH^-和NO^2-自由基，使细胞膜发生脂质过氧化作用，在细胞的膜水平造成强烈的神经毒性，甚至导致神经元死亡等。

研究表明，NO在脑缺血性损伤和心肌缺血损伤的发病中起重要作用，缺血后数分钟NO含量明显增高，之后缓慢下降，于再灌注期NO再次升高。其机制可能为：脑缺血后神经元受损，细胞膜去极化过程增强，突触前谷氨酸等兴奋性氨基酸生成大量增加，使胞外谷氨酸浓度升高，激活N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体，NMDA受体激活后使突触后Ca²⁺内流增加，激活一氧化氮合酶NOS，促进NO的生成；其二，脑缺血后，ATP大量消耗，导致能量代谢障碍及cAMP依赖的蛋白激酶活性下降，由于NOS脱磷酸化使得NOS的活性增强，从而促进NO的生成。

一氧化氮合酶是一氧化氮合成的限速酶NOS。在脑缺血早期，NOS介导生成的NO通过扩张血管改善缺血区的血液供应，具有短时保护性作用，但随着NO的大量产生，在缺血区NOS因介导神经毒性效应并很快占优，使脑缺血损伤加剧；到晚期，脑缺血脑组织损伤、炎症反应刺激巨噬细胞、神经小胶质细胞、神经元等可大量产生诱导型NOS，诱导型NOS可缓慢而持久大量地产生NO，过量的NO产生和释放，加重神经元损害。因此，降低诱导型NOS的产生可明显减少NO的释放，从而降低NO的细胞毒性作用，起到保护脑细胞的作用。

本实验的研究结果表明，大鼠脑缺血再灌注损伤后，脑组织中NO和NOS含量显著增加，说明NO和NOS参与了脑缺血再灌注损伤的发病机制，给予本发明药物治疗后，NO和NOS含量明显下降。表明本发明药物通过对NOS活性和NO含量进行调节，从而发挥对脑缺血再灌注损伤或脑梗塞的保护作用。

脑缺血及再灌注损伤可导致脑细胞膜脂质过氧化反应，产生过多的氧自由基，损伤脑细胞膜。脑缺血时由于组织氧和能量代谢的物质供应不足，ATP生成减少，离子泵失效，Na⁺-K⁺-ATP酶活性降低，使大量Na⁺内流、K⁺外流，Cl^-和H₂O被动进入细胞内，引起神经细胞急性渗透性肿胀死亡。Na⁺内流和K⁺外流导致细胞膜电位下降产生去极化，电压依赖性Ca²⁺通道开放，Ca²⁺大量内流；同时由于K+、蛋白激酶C及递质的释放等作用，受体依赖性Ca²⁺通道开放，Ca²⁺大量内流。细胞内钙超载可导致氧自由基产生增加、花生四烯酸代谢增强、兴奋性氨基酸递质释放增加等，兴奋性氨基酸又可引起细胞内Ca2+超载造成神经细胞凋亡，其中氧自由基增加是缺血再灌注损伤的一个重要因素。此外，脑缺血所致的自由基增加引起的神经元损伤、钙离子内流增加、脑缺血所致的一氧化氮、诱导型NOS等增加也是血管性痴呆的一个重要因素，本发明药物对脑缺血的抗氧化作用、抗自由基作用、减少缺血所致的一氧化氮的产生，为治疗血管性痴呆提供了依据。

因此，本发明药物可显著减少缺血区脑组织的过氧化脂质MDA，NO含量，提高大鼠脑组织中SOD含量，增加清除自由基的能力，降低NOS活性，可减轻自由基反应对脑组织的损害。由此可见，本发明药物抑制自由基的生成等多种途径，保护细胞膜性结构，有助于降低脑血管通透性以及改善血液流变学指标.改善脑部微循环，对抗脑缺血再灌注后氧自由基对脑组织的损害作用而发挥其对脑的保护作用。可用于治疗或预防缺血性脑病、脑梗塞、脑血栓及其后遗症、血管性痴呆、改善脑部微循环的作用，并可用于制备治疗和预防相应疾病的药物。

可以理解，从本专业角度，很多细节的变化是可能的，这并不因此限制本发明范围和精神，本发明并不限于上述实施例。

Claims (9)

1.一种心脑血管治疗药物，其特征在于：心脑血管治疗药物为灯盏花乙素衍生物，即灯盏花乙素水合物，其分子式为C₂₁H₁₈O₁₂·nH₂0，n＝1.7～2.2之间的数字。

2.根据权利要求1所述的心脑血管治疗药物，其特征在于：灯盏花乙素水合物为灯盏花乙素2水合物。

3.根据权利要求1所述的心脑血管治疗药物，其特征在于：灯盏花乙素水合物为灯盏花乙素1.75水合物。

4.一种根据权利要求1所述的心脑血管治疗药物制备方法，其特征在于：其步骤如下：

方法A在反应容器中，将灯盏花全草用体积比为2～20倍量的水、或C1-C6的低分子醇、C2-C6的低分子腈、C3-C8的低级酮、C2-C8的低分子酯等中的一种或几种为溶剂进行提取一次至数次，过滤、合并提取液，将滤液浓缩，浓缩物加水稀释，用碱调节pH为6.5～9之间，过滤，过硅胶层析柱、或大孔吸附树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子醇、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈的一种或几种进行洗脱，滤液用酸调节pH为1～5，搅拌、放置、使沉淀充分析出，将所得沉淀过滤，用水与C1-C6的低分子醇、C2-C8的低分子酯、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈、C2-C6的低级醚、C1-C6的低级卤代烃或C1-C8的低分子酸等中的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶一次或数次，过滤，水洗或C1-C6的低分子醇、或C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈等中的一种或几种洗，将所得的固体干燥，得灯盏花乙素结晶水合物；

或者方法B

在反应容器中，将灯盏花全草用体积比为2～20倍量的水、碱性溶液或C1-C6的低分子醇等中的一种或几种为溶剂进行提取一次至数次，过滤，合并滤液，将滤液浓缩，浓缩物加水稀释，用酸或碱调节pH为6.5～9之间，过滤，滤液过硅胶层析柱及大孔吸附树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子醇、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈等中的一种或几种进行洗脱，滤液用酸调节pH为1～5，放置，使沉淀充分析出，将所得沉淀过滤，用水或C1-C6的低分子醇、C2-C8的低分子酯、C3-C8的低级酮、C2-C6的低分子腈、C2-C6的低级醚、C1-C6的低级卤代烃、或C1-C8的低分子酸等中的一种或几种为结晶溶剂，进行重结晶一次或数次，过滤，水洗，将所得的固体干燥，得灯盏花乙素结晶水合物。

5.一种根据权利要求1所述的心脑血管治疗药物用途，其特征在于：用于制备注射用冻干粉针制剂、或者无菌分装粉针制剂、或者大输液制剂、或者小水针注射剂及固体制剂，固体制剂包括片剂、胶囊、颗粒剂、混悬剂、滴丸。

6.一种根据权利要求1所述的心脑血管治疗药物用途，其特征在于：适用于制备人和哺乳动物的冠心病、心绞痛、心肌梗死，心律失常、缺血性脑疾病、脑血栓、脑出血及其后遗症、血管性痴呆、末梢循环障碍疾病，包括各种动脉闭塞症、脉管炎、糖尿病引起的微循环障碍、高血压、高脂血症、高粘血症；顽固性颈周综合征、椎基底动脉供血不足及其他缺血及伴有微循环障碍的疾病疾病的治疗或预防的药物中的应用。

7.根据权利要求4所述的心脑血管治疗药物的制备方法，其特征在于：本权利要求中的制备过程中的过滤的方式包括用滤布、漏斗、垂熔玻璃滤器、砂芯滤棒、板框式压滤机、微孔滤膜、陶瓷膜或超滤等的一种或几种过滤方式进行一次或几次过滤。

8.根据权利要求4所述的心脑血管治疗药物的制备方法，其特征在于：本权利要求中的两种方法的制备过程中，“提取液用碱调节pH为6.8～9之间，过滤，滤液过硅胶层析柱及大孔吸附树脂、或聚酰胺柱层析或葡萄糖凝胶树脂，用水或C1-C6的低分子醇、C3-C8的低级酮、C2-C8的低分子酯、C2-C6的低分子腈的一种或几种进行洗脱，滤液用酸调节pH为1～5，放置，使沉淀充分析出”的过程，该过程在制备过程中可将酸沉淀后得到的沉淀再水稀释后重复上述过程，进行1～3次，以实现纯化目的，之后再进行重结晶过程。

9.根据权利要求4所述的心脑血管治疗药物的制备方法，其特征在于：所述重结晶溶剂选自水，以及下列溶剂甲醇、乙醇、异丙醇，丙酮、丁酮、异己酮、乙腈、四氢呋喃、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸、二氯甲烷、氯仿、乙醚、石油醚、苯中的一种或几种。

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