CN102373178A - 利用不足量血制备悬浮红细胞的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及利用ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞的技术指标、工艺路线和具体方法。该方法通过建立可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的相关技术指标,如实际采血量、转移袋内容物的pH值、储存温度和制备时间,确立了不足量血制备MAP悬浮红细胞的工艺路线和制备参数。其具体方法是:使用全密封的多联袋系统采集ACD-B抗凝、实际采血量≥66%采血标示量、血液采集后立即置2-6℃储存小于4小时的原料全血,在2-6℃的离心机中,以3000-3500g的离心力,离心15-20min,用分浆夹将上层血浆和/或白膜层分离至转移袋中,如转移袋内容物pH值≥6.1,则称重母袋中的红细胞,并按红细胞和红细胞添加液为2∶1的比例添加MAP红细胞添加液,制备MAP悬浮红细胞。
Description
技术领域
本发明涉及医学领域,特别是涉及采供血领域由ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞的技术指标、工艺路线和具体方法。
背景技术
不足量血由于红细胞与保养液的比例失调,导致红细胞的胞外pH值低于正常标准,该低pH的储存环境和储存时间可影响红细胞的能量代谢和生理功能,难以确保储存期内的血液质量。目前国内外普遍使用ACD(pH 5.03),CPD(pH 5.60)和CPDA(pH 5.60)保养液采集全血,由于ACD保养液的pH值最低,因此对不足量血的红细胞影响更甚。国内对不足量血的研究资料目前还是一个空白,而国外对不足量血红细胞的理化和功能指标的资料主要来源于CPD和CPDA保养液抗凝的不足量全血。国外相关体内外研究结果表明:采血量在一定范围内(50-90%标示量)的不足量血,其保存期末的红细胞理化和功能指标与同期正常全血存在差异,在缩短不足量全血的保存期,预防其抗凝剂过量的副作用的前提下,不足量血红细胞的功能指标可达到正常红细胞的标准。但迄今为止,国内外鲜有利用不足量全血制备成悬浮红细胞的技术资料。因此,我们在研究红细胞所处的酸碱度环境对其理化指标和功能产生影响,探讨不足量血红细胞的百分比含量以及储存时间与MAP悬浮红细胞质量的关系的基础上,利用多联袋技术,将满足特定条件的不足量全血中的红细胞从可损伤红细胞和产生输血不良反应的低pH液相环境(血浆和过量的抗凝剂)中分离,利用不足量全血中的红细胞制备MAP悬浮红细胞,建立可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标、工艺路线和具体方法,此举对综合利用不足量血、节约宝贵的血液资源意义重大。
发明内容
本发明的目的是建立由ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞的技术指标、工艺路线和具体方法,利用ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞。
本发明的方法包括以下步骤:建立可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标以及制备MAP悬浮红细胞工艺路线,将符合特定标准的不足量血,利用多联袋技术制备MAP悬浮红细胞。
本发明所说的“全血”是指采入血袋内含适量抗凝剂和各种血液成分的血液。
本发明所说的“不足量血”是指采供血工作中因献血反应、血流不畅和采血异常等原因致使采集血液的实际容量少于90%标示量的全血,或者是在自体输血和儿科输血中由于标准血袋中的保养液容量与实际采集血量不匹配的全血。
本发明所说的“悬浮红细胞”是指全血将血浆分离出后加入适量添加液的红细胞成分。
本发明所说的“MAP悬浮红细胞”是指用氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇-磷酸盐保存液制备的红细胞悬液。
本发明所说的“ACD-B液”是指血液抗凝和保存用复方枸橼酸钠液。
本发明所说的“全密封的多联袋系统”是指由采血针、采血导管和含适量抗凝剂的溶剂所组成的采血袋以及由导管和若干个塑料容器所组成的转移袋共同形成的用于采血和血液成分的分离制备保存的全密封塑料容器系统。
本发明所说的“多联袋技术”是指利用全密封的多联袋系统,依据不同的离心转速、时间和温度,在适宜的条件下进行血液成分的制备。
现针对本发明的技术指标、工艺路线和制备步骤,分别详述如下:
1.可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标:
可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标必须同时满足以下特定标准方可进行相关血液成分的制备。
(1).实际采血量:≥66%采血标示量;
(2).分离袋内容物的pH值:≥6.1;
(3).储存温度:须在血液采集后立即置于2-6℃环境中储存;
(4).制备时间:须在血液采集后4小时之内分离;
2.不足量血制备MAP悬浮红细胞的工艺路线
见附图,附图是“不足量血制备MAP悬浮红细胞的工艺路线图”。
3.不足量血制备MAP悬浮红细胞的制备步骤
具体实施方式
本发明使用中遵照《中国输血技术操作规程》(血站部分)、中华人民共和国国家标准GB18469-2001以及《全血与成分血质量要求》进行分离和制备,操作如下:
取用三联袋或四联袋采集的ACD-B抗凝、实际采血量≥66%采血标示量、血液采集后立即置2-6℃储存小于4小时的原料全血,在温度为2-6℃的离心机中,以3500g的离心力,离心15分钟,将白膜层以及其上的液体成分挤到转移袋中,用高频热合机热合封口并与母袋分离,检测转移袋内容物的pH值;如转移袋内容物pH值≥6.1,则称重母袋中的红细胞,并按红细胞和红细胞添加液为2∶1的比例添加MAP红细胞添加液,制备MAP悬浮红细胞。
鉴于在制备过程中无需利用白细胞滤器去除白细胞,当全密封的多联袋系统带有白细胞滤器时,应在进行制备前关闭滤器两端连接软管上的调节夹,或者用高频热合机热合封口后去除滤器。
实施例1采供血机构的ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞
原料血为使用规格为300ml标示量、实际采血量为230ml的ACD-B抗凝的四联袋全血。制备前先确认该不足量血是否符合可用于制备MAP悬浮红细胞的技术指标,待确认符合后,按以下步骤进行相关制备。
将全血四联袋检查、配平后放入离心机后以相对离心力3500g,4℃离心15min;离心机停稳后打开离心机门,取出离心杯,轻轻从离心杯中取出血袋,并做离心后的外观检查,并观察分层情况,用分浆夹将上层血浆和白膜层(约10-15ml)分离至转移袋;检测转移袋内容物pH值,如内容物pH值≥6.1则继续进行相关制备,否则停止制备;利用电子天平称重母袋中的红细胞(母袋+红细胞的重量-母袋净重);打开母袋与内容MAP红细胞添加液子袋间的调节夹,按红细胞和红细胞添加液为2∶1的比例使用电子天平将MAP红细胞添加液挤入母袋中,充分混匀并热和封口后即为MAP悬浮红细胞。
实施例2儿童自体输血中ACD-B抗凝的不足量血制备MAP悬浮红细胞
一体重为35kg、12岁儿童的择期手术备血。鉴于患儿心血管和肺部情况稳定、Hb浓度≥11g/dl和血清铁正常,于术前1w进行自体血的预储存,使用规格为200ml标示量的全 密封的三联袋系统采集150mlACD-B抗凝的全血。
以无菌技术采集采集患儿150mlACD-B抗凝的全血,采集后即刻将全血三联袋检查、配平后放入离心机后以相对离心力3500g,4℃离心15min;离心机停稳后打开离心机门,取出离心杯,轻轻从离心杯中取出血袋,并做离心后的外观检查,并观察分层情况,用分浆夹将上层血浆分离至转移袋;检测转移袋内容物pH值,如内容物pH值≥6.1则继续进行相关制备,否则停止制备;利用电子天平称重母袋中的红细胞(母袋+红细胞的重量-母袋净重);打开母袋与内容MAP红细胞添加液子袋间的调节夹,按红细胞和红细胞添加液为2∶1的比例使用电子天平将MAP红细胞添加液挤入母袋中,充分混匀并热和后封口,制备MAP悬浮红细胞备用。
Claims (4)
1.一种利用不足量血制备MAP悬浮红细胞的方法,其特征在于该方法包括以下步骤:
(1)建立了可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标;
(2)确立了不足量血制备MAP悬浮红细胞的工艺路线;
(3)建立了利用不足量血制备MAP悬浮红细胞的具体方法。
2.根据权利要求1所述的利用不足量血制备MAP悬浮红细胞的方法,其特征在于所述的可用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标为实际采血量≥66%采血标示量、血液采集后立即置2-6℃储存小于4小时的原料全血和转移袋内容物pH值≥6.1。
3.根据权利要求1所述的利用不足量血制备MAP悬浮红细胞的方法,其特征在于所述的不足量血制备MAP悬浮红细胞的工艺路线为确认用于制备MAP悬浮红细胞的不足量血的技术指标、分离不足量全血红细胞和添加MAP红细胞添加液。
4.根据权利要求1所述的利用不足量血制备MAP悬浮红细胞的方法,其特征在于所述的利用不足量血制备MAP悬浮红细胞的具体方法为将符合条件的原料全血,在2-6℃的离心机中,以3000-3500g的离心力,离心15-20min,用分浆夹将上层血浆和/或白膜层分离至转移袋中,如转移袋内容物pH值≥6.1,则称重母袋中的红细胞,并按红细胞和红细胞添加液为2∶1的比例添加MAP红细胞添加液,充分混匀并热和封口。
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